AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN ANGGUR (Vitis Aktivitas Ekstrak Etanol Daun Anggur (Vitis vinifera L.) dan Fraksi-Fraksinya Terhadap Bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis.
AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN ANGGUR (Vitis
vinifera L.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA TERHADAP BAKTERI
Staphylococcus aureus DAN Staphylococcus epidermidis
SKRIPSI
Oleh:
NINA NUR ROFIKAYATI
K100100128
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2014
2
AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN ANGGUR (Vitis
vinifera L.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA TERHADAP BAKTERI
Staphylococcus aureus DAN Staphylococcus epidermidis
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh :
NINA NUR ROFIKAYATI
K100100128
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2014
3
4
5
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr. wb
Alhamdulillahirrabbil’alamiin, segala puji syukur bagi Allah SWT yang
telah melimpahkan rahmat dan hidayah sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian dan menyusun skripsi yang berjudul “Aktivitas Ekstrak Etanol Daun
Anggur (Vitis vinifera L.) dan Fraksi-Fraksinya Terhadap Bakteri Staphylococcus
aureus dan Staphylococcus epidermidis” sebagai salah satu syarat untuk mencapai
derajat
Sarjana
Farmasi
(S.
Farm)
di
Fakultas
Farmasi
Universitas
Muhammadiyah Surakarta. Penulis ingin mengucapkan terimakasih kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Arifah Sri Wahyuni, M.Sc., Apt., selaku pembimbing akademik.
3. Ibu Rima Munawaroh, M.Sc., Apt dan Ika Trisharyanti DK, M.Farm., Apt.,
selaku pembimbing skripsi.
4. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St dan Tanti Azizah Sujono, M.Sc., Apt., selaku
penguji skripsi
5. Kedua orang tua tercinta, Bapak Sumarjo dan Ibu Suwarni serta saudaraku
Reza Muhammad Fathkur.
6. Tim Penelitian : Tutut Nurcahyanti dan Aeinnul Yaqin.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi penulis maupun
pembaca.
Wassalamu’alaikum wr. wb.
Surakarta, 26 Juni 2014
Penulis
iv
6
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL........................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................... ii
DEKLARASI .................................................................................................. iii
KATA PENGANTAR .................................................................................... iv
DAFTAR ISI .................................................................................................... v
DAFTAR TABEL ........................................................................................... vii
DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... viii
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... ix
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................ x
INTISARI ........................................................................................................ xi
BAB I PENDAHULUAN...... .......................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah ................................................................. 1
B. Perumusan Masalah ........................................................................ 2
C. Tujuan Penelitian ............................................................................ 2
D. Tinjauan Pustaka ............................................................................ 3
1. Tanaman Anggur (Vitis vinifera L.) ............................................ 3
2. Bakteri ........................................................................................ 3
3. Uji Aktivitas Antibakteri ............................................................. 5
E. Landasan Teori ............................................................................... 6
F. Hipotesis ......................................................................................... 6
BAB II METODE PENELITIAN .................................................................... 7
A. Ketegori Penelitian .......................................................................... 7
B. Variabel Penelitian ......................................................................... 7
C. Alat dan Bahan ............................................................................... 7
D. Jalannya Penelitian .......................................................................... 8
1. Determinasi Tanaman ................................................................. 8
2. Pembuatan Serbuk Simplisia ....................................................... 8
3. Ekstraksi ..................................................................................... 8
v
7
4. Fraksinasi ..................................................................................... 8
5. Sterilisasi Alat dan Bahan ........................................................... 9
6. Pembuatan Media ....................................................................... 9
7. Pembuatan Stok ........................................................................... 9
8. Pembuatan Suspensi Bakteri ....................................................... 9
9. Identifikasi Bakteri ..................................................................... 9
a. Pengecatan Gram ................................................................... 9
b. Uji Biokimia .......................................................................... 10
10. Pembuatan Seri Konsentrasi Fraksi Daun Anggur .................... 10
11. Uji Aktivitas Antibakteri dengan Metode Difusi Agar ............. 10
12.Uji Fitokimia............................................................................... 11
E. Analisis Data.................................................................................... 12
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 13
A. Identifikasi Daun Anggur ............................................................ 13
B. Ekstraksi dan Fraksinasi .............................................................. 13
C. Identifikasi Bakteri ...................................................................... 13
D. Uji Aktivitas Antibakteri ............................................................. 15
E. Uji Fitokimia ................................................................................ 18
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................... 23
A. Kesimpulan .................................................................................. 23
B. Saran ............................................................................................ 23
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 24
LAMPIRAN
................................................................................................ 26
vi
8
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Identifikasi bakteri Staphylococcus epidermidis dan
Staphylococcus aureus ...................................................................... 14
Tabel 2. Hasil uji biokimiawi .......................................................................... 15
Tabel 3. Hasil uji aktivitas ekstrak etanol dan fraksi-fraksinya daun
anggur bakteri S. aureus dan S. epidermidis ..................................... 16
Tabel 4. Hasil uji tabung fraksi n-heksan, etil asetat, fraksi etanol-air
dan ekstrak etanol daun anggur S. aureus dan S. epidermidis ........... 19
Tabel 5. Hasil uji Kromatografi Lapis Tipis terhadap fraksi n-heksan
daun anggur dengan fase gerak n-heksan : etil asetat (1:1
v/v) dan fase diam silika gel GF 254 (jarak elusi 5 cm). ................... 20
Tabel 6. Hasil uji Kromatografi Lapis Tipis terhadap fraksi etil asetat
daun anggur dengan fase gerak n- heksan : etil asetat (1:1
v/v) dan fase diam silika gel GF 254 (jarak elusi 5 cm). ................... 21
vii
9
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Pengecatan bakteri (A) Staphylococcus epidermidis, (B)
Staphylococcus aureus ................................................................ 14
Gambar 2.
Hasil uji identifikasi bakteri S. epidermidis dan S. aureus
menggunakan media Manitol Salt Agar (MSA) .......................... 15
Gambar 3.
Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksan (a), fraksi
etil asetat (b), fraksi etanol-air (c), dan ekstrak etanol (d)
bakteri S. aureus pada konsentrasi 6% (1), 7% (2), 8%
(3), 9% (4), 10% (5), K+ (6), K- (7) ............................................ 17
Gambar 4.
Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksan (a), fraksi
etil asetat (b), fraksi etanol-air (c), dan ekstrak etanol (d)
bakteri S. epidermidis pada konsentrasi 6% (1), 7% (2),
8% (3), 9% (4), 10% (5), K+ (6), K- (7) ..................................... 18
Gambar 5.
Hasil uji Kromatografi Lapis Tipis ekstrak etanol daun
anggur dengan fase diam : silika GF 254 nm dan fase
gerak etil asetat: asam format : air (90:5:5 v/v). Dilihat
dari sinar tampak (a), UV 254 nm (b), UV 366 nm (c),
Dragendorff (d), anisaldehid (e), FeCl3 (f), dan sitroborat
(g). ............................................................................................... 19
Gambar 6.
Hasil uji Kromatografi Lapis Tipis fraksi n-heksan daun
anggur dengan fase diam : silika GF 254 nm dan fase
gerak n-heksan : Etil asetat (1:1 v/v). Dilihat dari sinar
tampak (a),
UV 254 nm (b), UV 366 nm (c),
Dragendorff (d), anisaldehid (e), FeCl3 (f), dan sitroborat
(g). ............................................................................................... 20
Gambar 7.
Hasil uji Kromatografi Lapis Tipis fraksi etil asetat daun
anggur dengan fase diam : silika GF 254 nm dan fase
gerak n-heksan : Etil asetat (1:1 v/v). Dilihat dari sinar
tampak (a),
UV 254 nm (b), UV 366 nm (c),
Dragendorff (d), anisaldehid (e), FeCl3 (f), dan sitroborat
(g). ............................................................................................... 21
viii
10
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.
Perhitungan rendemen ekstrak etanol, fraksi n-heksan,
fraksi etil asetat, dan fraksi etanol-air daun anggur ..................... 25
Lampiran 2.
Perhitungan seri konsentrasi fraksi n-heksan, fraksi etil
asetat, fraksi etanol-air, dan ekstrak etanol daun anggur
Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis ........... 26
Lampiran 3.
Perhitungan hRf uji KLT ekstrak etanol dan fraksi nheksan daun anggur ..................................................................... 27
Lampiran 4.
Surat identifikasi daun anggur .................................................... 28
Lampiran 5.
Surat permohonan permintaan bakteri ........................................ 29
Lampiran 6.
Surat keterangan bakteri S. epidermidis ...................................... 30
Lampiran 7.
Komposisi media ......................................................................... 31
Lampiran 8.
Komposisi cat Gram .................................................................... 32
ix
11
INTISARI
Tanaman anggur (Vitis vinifera L.) merupakan tanaman tradisional yang
digunakan untuk mengobati infeksi bakteri. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas antibakteri fraksi n-heksan, etil asetat, dan etanol-air ekstrak
etanol daun anggur terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus
epidermidis. Daun anggur diekstraksi menggunakan metode maserasi dengan
penyari etanol 96% dan kemudian difraksinasi dengan metode partisi. Uji aktivitas
antibakteri digunakan metode difusi disk dengan seri konsentrasi 600; 700; 800;
900; dan 1000 µg/disk dari fraksi n-heksan, etil asetat, etanol-air ekstrak etanol
daun anggur. Uji tabung dan KLT digunakan untuk mengetahui senyawa yang
terkandung dalam ketiga fraksi tersebut. Hasil aktivitas ekstrak etanol daun
anggur dan fraksi-fraksinya terhadap S. aureus tidak memiliki zona hambat
kecuali pada konsentrasi 700 µg/disc dengan zona hambat irradikal (12.5± 1,3
mm), sedangkan terhadap S. epidermidis fraksi n-heksan dengan konsentrasi 1000
µg/disk mampu membuat zona irradikal sebesar 13±2,5 mm yang dibandingkan
dengan fraksi etil asetat sebesar 15,25±0,25 mm dan fraksi etanol-air sebesar
15,5±0 mm. Uji fitokimia menunjukkan adanya kandungan senyawa fenol,
flavonoid, dan terpenoid pada fraksi etanol-air, etil asetat, dan n-heksan.
Kata kunci: Vitis vinifera L., Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis
x
vinifera L.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA TERHADAP BAKTERI
Staphylococcus aureus DAN Staphylococcus epidermidis
SKRIPSI
Oleh:
NINA NUR ROFIKAYATI
K100100128
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2014
2
AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL DAUN ANGGUR (Vitis
vinifera L.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA TERHADAP BAKTERI
Staphylococcus aureus DAN Staphylococcus epidermidis
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh :
NINA NUR ROFIKAYATI
K100100128
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2014
3
4
5
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr. wb
Alhamdulillahirrabbil’alamiin, segala puji syukur bagi Allah SWT yang
telah melimpahkan rahmat dan hidayah sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian dan menyusun skripsi yang berjudul “Aktivitas Ekstrak Etanol Daun
Anggur (Vitis vinifera L.) dan Fraksi-Fraksinya Terhadap Bakteri Staphylococcus
aureus dan Staphylococcus epidermidis” sebagai salah satu syarat untuk mencapai
derajat
Sarjana
Farmasi
(S.
Farm)
di
Fakultas
Farmasi
Universitas
Muhammadiyah Surakarta. Penulis ingin mengucapkan terimakasih kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Arifah Sri Wahyuni, M.Sc., Apt., selaku pembimbing akademik.
3. Ibu Rima Munawaroh, M.Sc., Apt dan Ika Trisharyanti DK, M.Farm., Apt.,
selaku pembimbing skripsi.
4. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St dan Tanti Azizah Sujono, M.Sc., Apt., selaku
penguji skripsi
5. Kedua orang tua tercinta, Bapak Sumarjo dan Ibu Suwarni serta saudaraku
Reza Muhammad Fathkur.
6. Tim Penelitian : Tutut Nurcahyanti dan Aeinnul Yaqin.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi penulis maupun
pembaca.
Wassalamu’alaikum wr. wb.
Surakarta, 26 Juni 2014
Penulis
iv
6
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL........................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................... ii
DEKLARASI .................................................................................................. iii
KATA PENGANTAR .................................................................................... iv
DAFTAR ISI .................................................................................................... v
DAFTAR TABEL ........................................................................................... vii
DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... viii
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... ix
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................ x
INTISARI ........................................................................................................ xi
BAB I PENDAHULUAN...... .......................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah ................................................................. 1
B. Perumusan Masalah ........................................................................ 2
C. Tujuan Penelitian ............................................................................ 2
D. Tinjauan Pustaka ............................................................................ 3
1. Tanaman Anggur (Vitis vinifera L.) ............................................ 3
2. Bakteri ........................................................................................ 3
3. Uji Aktivitas Antibakteri ............................................................. 5
E. Landasan Teori ............................................................................... 6
F. Hipotesis ......................................................................................... 6
BAB II METODE PENELITIAN .................................................................... 7
A. Ketegori Penelitian .......................................................................... 7
B. Variabel Penelitian ......................................................................... 7
C. Alat dan Bahan ............................................................................... 7
D. Jalannya Penelitian .......................................................................... 8
1. Determinasi Tanaman ................................................................. 8
2. Pembuatan Serbuk Simplisia ....................................................... 8
3. Ekstraksi ..................................................................................... 8
v
7
4. Fraksinasi ..................................................................................... 8
5. Sterilisasi Alat dan Bahan ........................................................... 9
6. Pembuatan Media ....................................................................... 9
7. Pembuatan Stok ........................................................................... 9
8. Pembuatan Suspensi Bakteri ....................................................... 9
9. Identifikasi Bakteri ..................................................................... 9
a. Pengecatan Gram ................................................................... 9
b. Uji Biokimia .......................................................................... 10
10. Pembuatan Seri Konsentrasi Fraksi Daun Anggur .................... 10
11. Uji Aktivitas Antibakteri dengan Metode Difusi Agar ............. 10
12.Uji Fitokimia............................................................................... 11
E. Analisis Data.................................................................................... 12
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 13
A. Identifikasi Daun Anggur ............................................................ 13
B. Ekstraksi dan Fraksinasi .............................................................. 13
C. Identifikasi Bakteri ...................................................................... 13
D. Uji Aktivitas Antibakteri ............................................................. 15
E. Uji Fitokimia ................................................................................ 18
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................... 23
A. Kesimpulan .................................................................................. 23
B. Saran ............................................................................................ 23
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 24
LAMPIRAN
................................................................................................ 26
vi
8
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Identifikasi bakteri Staphylococcus epidermidis dan
Staphylococcus aureus ...................................................................... 14
Tabel 2. Hasil uji biokimiawi .......................................................................... 15
Tabel 3. Hasil uji aktivitas ekstrak etanol dan fraksi-fraksinya daun
anggur bakteri S. aureus dan S. epidermidis ..................................... 16
Tabel 4. Hasil uji tabung fraksi n-heksan, etil asetat, fraksi etanol-air
dan ekstrak etanol daun anggur S. aureus dan S. epidermidis ........... 19
Tabel 5. Hasil uji Kromatografi Lapis Tipis terhadap fraksi n-heksan
daun anggur dengan fase gerak n-heksan : etil asetat (1:1
v/v) dan fase diam silika gel GF 254 (jarak elusi 5 cm). ................... 20
Tabel 6. Hasil uji Kromatografi Lapis Tipis terhadap fraksi etil asetat
daun anggur dengan fase gerak n- heksan : etil asetat (1:1
v/v) dan fase diam silika gel GF 254 (jarak elusi 5 cm). ................... 21
vii
9
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Pengecatan bakteri (A) Staphylococcus epidermidis, (B)
Staphylococcus aureus ................................................................ 14
Gambar 2.
Hasil uji identifikasi bakteri S. epidermidis dan S. aureus
menggunakan media Manitol Salt Agar (MSA) .......................... 15
Gambar 3.
Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksan (a), fraksi
etil asetat (b), fraksi etanol-air (c), dan ekstrak etanol (d)
bakteri S. aureus pada konsentrasi 6% (1), 7% (2), 8%
(3), 9% (4), 10% (5), K+ (6), K- (7) ............................................ 17
Gambar 4.
Hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksan (a), fraksi
etil asetat (b), fraksi etanol-air (c), dan ekstrak etanol (d)
bakteri S. epidermidis pada konsentrasi 6% (1), 7% (2),
8% (3), 9% (4), 10% (5), K+ (6), K- (7) ..................................... 18
Gambar 5.
Hasil uji Kromatografi Lapis Tipis ekstrak etanol daun
anggur dengan fase diam : silika GF 254 nm dan fase
gerak etil asetat: asam format : air (90:5:5 v/v). Dilihat
dari sinar tampak (a), UV 254 nm (b), UV 366 nm (c),
Dragendorff (d), anisaldehid (e), FeCl3 (f), dan sitroborat
(g). ............................................................................................... 19
Gambar 6.
Hasil uji Kromatografi Lapis Tipis fraksi n-heksan daun
anggur dengan fase diam : silika GF 254 nm dan fase
gerak n-heksan : Etil asetat (1:1 v/v). Dilihat dari sinar
tampak (a),
UV 254 nm (b), UV 366 nm (c),
Dragendorff (d), anisaldehid (e), FeCl3 (f), dan sitroborat
(g). ............................................................................................... 20
Gambar 7.
Hasil uji Kromatografi Lapis Tipis fraksi etil asetat daun
anggur dengan fase diam : silika GF 254 nm dan fase
gerak n-heksan : Etil asetat (1:1 v/v). Dilihat dari sinar
tampak (a),
UV 254 nm (b), UV 366 nm (c),
Dragendorff (d), anisaldehid (e), FeCl3 (f), dan sitroborat
(g). ............................................................................................... 21
viii
10
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.
Perhitungan rendemen ekstrak etanol, fraksi n-heksan,
fraksi etil asetat, dan fraksi etanol-air daun anggur ..................... 25
Lampiran 2.
Perhitungan seri konsentrasi fraksi n-heksan, fraksi etil
asetat, fraksi etanol-air, dan ekstrak etanol daun anggur
Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis ........... 26
Lampiran 3.
Perhitungan hRf uji KLT ekstrak etanol dan fraksi nheksan daun anggur ..................................................................... 27
Lampiran 4.
Surat identifikasi daun anggur .................................................... 28
Lampiran 5.
Surat permohonan permintaan bakteri ........................................ 29
Lampiran 6.
Surat keterangan bakteri S. epidermidis ...................................... 30
Lampiran 7.
Komposisi media ......................................................................... 31
Lampiran 8.
Komposisi cat Gram .................................................................... 32
ix
11
INTISARI
Tanaman anggur (Vitis vinifera L.) merupakan tanaman tradisional yang
digunakan untuk mengobati infeksi bakteri. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas antibakteri fraksi n-heksan, etil asetat, dan etanol-air ekstrak
etanol daun anggur terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Staphylococcus
epidermidis. Daun anggur diekstraksi menggunakan metode maserasi dengan
penyari etanol 96% dan kemudian difraksinasi dengan metode partisi. Uji aktivitas
antibakteri digunakan metode difusi disk dengan seri konsentrasi 600; 700; 800;
900; dan 1000 µg/disk dari fraksi n-heksan, etil asetat, etanol-air ekstrak etanol
daun anggur. Uji tabung dan KLT digunakan untuk mengetahui senyawa yang
terkandung dalam ketiga fraksi tersebut. Hasil aktivitas ekstrak etanol daun
anggur dan fraksi-fraksinya terhadap S. aureus tidak memiliki zona hambat
kecuali pada konsentrasi 700 µg/disc dengan zona hambat irradikal (12.5± 1,3
mm), sedangkan terhadap S. epidermidis fraksi n-heksan dengan konsentrasi 1000
µg/disk mampu membuat zona irradikal sebesar 13±2,5 mm yang dibandingkan
dengan fraksi etil asetat sebesar 15,25±0,25 mm dan fraksi etanol-air sebesar
15,5±0 mm. Uji fitokimia menunjukkan adanya kandungan senyawa fenol,
flavonoid, dan terpenoid pada fraksi etanol-air, etil asetat, dan n-heksan.
Kata kunci: Vitis vinifera L., Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis
x