EFEKTIFITAS PEMBERIAN SOYGHURT YANG MENGANDUNG BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM MEMPERBAIKI KERUSAKAN JARINGAN HATI MENCIT (Mus musculus L.) YANG DIPAPAR TIMBAL TESIS Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains dalam Program Studi Ma
EFEKTIFITAS PEMBERIAN SOYGHURT YANG
MENGANDUNG BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM
MEMPERBAIKI KERUSAKAN JARINGAN HATI MENCIT
(Mus musculus L.) YANG DIPAPAR TIMBAL
TESIS
OLEH
LAVARINA WINDA
097030031/BIO
PROGRAM PASCASARJANA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2013
EFEKTIFITAS PEMBERIAN SOYGHURT YANG
MENGANDUNG BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM
MEMPERBAIKI KERUSAKAN JARINGAN HATI MENCIT
(Mus musculus L.) YANG DIPAPAR TIMBAL
TESIS
OLEH
LAVARINA WINDA
097030031/BIO
PROGRAM PASCASARJANA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2013
EFEKTIFITAS PEMBERIAN SOYGHURT YANG
MENGANDUNG BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM
MEMPERBAIKI KERUSAKAN JARINGAN HATI MENCIT
(Mus musculus L.) YANG DIPAPAR TIMBAL
TESIS
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Magister Sains dalam Program Studi Magister Ilmu Biologi
pada Program Pascasarjana Fakultas MIPA
Universitas Sumatera Utara
OLEH
LAVARINA WINDA
097030031/BIO
PROGRAM MAGISTER BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2013
PENGESAHAN TESIS
Judul Tesis : EFEKTIFITAS PEMBERIAN SOYGHURT YANG MENGANDUNG BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM MEMPERBAIKI KERUSAKAN JARINGAN HATI MENCIT (Mus musculus L.) YANG DIPAPAR TIMBALNama Mahasiswa : LAVARINA WINDA Nomor Induk Mahasiswa : 097030031 Program Studi : Magister Biologi Fakultas : Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sumatera Utara
Menyetujui
Komisi Pembimbing
(Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M.Biomed) (Dr. Herla Rusmarilin, M.P)
Ketua Anggota Ketua Program Studi, D e k a n,(Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M.Biomed) (Dr. Sutarman, M.Sc)
PERNYATAAN ORISINALITAS
EFEKTIFITAS PEMBERIAN SOYGHURT YANG MENGANDUNG
BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM MEMPERBAIKI KERUSAKAN
JARINGAN HATI MENCIT (Mus musculus L.) YANG DIPAPAR TIMBAL
T E S I S
Dengan ini saya nyatakan bahwa saya mengakui semua karya tesis ini adalah hasil kerja saya sendiri kecuali kutipan dan ringkasan yang tiap satunya telah dijelaskan sumbernya dengan benar.
Medan, Februari 2013 Lavarina Winda NIM. 097030031
PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA
Sebagai sivitas akademika Universitas Sumatera Utara, saya yang bertanda tangan di bawah ini: Nama : Lavarina Winda NIM : 097030031 Program Studi : Magister Biologi Jenis Karya Ilmiah : Tesis
Demi pengembangan ilmu pengetahuan, menyetujui untuk memberikan kepada Universitas Sumatera Utara Hak Bebas Royalti Non-Eksklusif (Non-Exclusive
Royalty Free Righ t) atas Tesis saya yang berjudul:
EFEKTIFITAS PEMBERIAN SOYGHURT YANG MENGANDUNG BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM MEMPERBAIKI KERUSAKAN JARINGAN HATI MENCIT (Mus musculus L.) YANG DIPAPAR TIMBAL beserta perangkat yang ada (jika diperlukan). Dengan Hak Bebas Royalti Non- Eksklusif ini, Universitas Sumatera Utara berhak menyimpan, mengalih media, memformat, mengelola dalam bentuk data-base, merawat dan mempublikasikan Tesis saya tanpa meminta izin dari saya selama tetap mencantumkan nama saya sebagai penulis dan sebagai pemegang dan atau sebagai pemilik hak cipta.
Demikian pernyataan ini dibuat dengan sebenarnya.
Medan, Februari 2013 Lavarina Winda
Telah diuji pada Tanggal : 14 Februari 2013
PANITIA PENGUJI TESIS
Ketua : Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M.Biomed
Anggota : 1. Dr. Herla Rusmarilin, M.P2. Dr. It Jamilah, M.Sc
RIWAYAT HIDUP
DATA PRIBADINAMA : Lavarina Winda, S.Si Tempat dan Tanggal Lahir : Lubuk Pakam, 9 Maret 1975 Alamat Rumah : Jl. Sutomo Ujung Gg. A No. 55 Medan-20235 Telepon/HP : +62616630214 / +628126379453 e-mail : windaa.lvr@gmail.com Instansi Tempat Bekerja : Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara Alamat Kantor : Jl. dr. T. Mansur No. 5 Medan-20155 Telepon/Faks : +62618211045 ; +62618210555 / +620618216264
DATA PENDIDIKAN
SD : Negeri 1 Lubuk Pakam Tamat : 1987 SMP : SMP Negeri 1 Lubuk Pakam Tamat : 1990 SMA : SMAK Dep. Kes. Medan Tamat : 1993 Strata-1 : Fakultas Biologi UMA Medan Tamat : 2005
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala rahmat dan ridho-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan dan penyusunan tesis yang berjudul: “Efektifitas Pemberian Soyghurt yang Mengandung Bakteri Asam Laktat dalam Memperbaiki Kerusakan Jaringan Hati Mencit (Mus musculus L.) yang Dipapar Timbal” sebagai salah satu syarat dalam menyelesaikan jenjang pendidikan strata-2 pada Program Magister Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sumatera Utara.
Dengan selesainya penelitian dan penyusunan tesis ini, penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada: Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M.Biomed dan Dr. Herla Rusmarilin, M.P selaku pembimbing, yang dengan penuh perhatian dan kesabaran memberikan motivasi, bimbingan dan saran-sarannya dalam penelitian dan penulisan tesis ini.
Rektor Universitas Sumatera Utara, Prof. Dr. dr. Syahril Pasaribu, DTM&H, M.Sc (CTM), Sp.A(K) atas kesempatan dan fasilitas yang diberikan kepada penulis untuk mengikuti dan menyelesaikan pendidikan Program Magister.
Dekan Fakultas MIPA Universitas Sumatera Utara, Dr. Sutarman, M.Sc atas kesempatan menjadi mahasiswa Program Magister pada Program Pascasarjana Fakultas MIPA Universitas Sumatera Utara.
Ketua Program Studi Magister Biologi Fakultas MIPA, Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M.Biomed, dan seluruh komisi penguji Dr. It Jamilah, M.Sc dan Drs. Kiki Nurtjahja, M.Sc beserta Staf Pengajar pada Program Studi Magister Biologi Program Pascasarjana Fakultas MIPA Universitas Sumatera Utara.
Kepada keluarga tercinta Papa Adwinarta dan Ibunda Lisdayanizma serta kedua adikku Koko Adliswan, S.E. dan Adil Winazta, S.Kom yang telah tulus memberikan kasih sayang, motivasi, doa, dan nasehat kepada penulis sehingga penulis dapat menyelesaikan tesis ini.
Kepada semua pihak yang banyak membantu yang namanya tidak tersebutkan, penulis ucapkan terimakasih. Penulis berharap semoga pihak yang telah memberikan bantuan kepada penulis mendapatkan balasan dari Allah SWT. Akhirnya penulis berharap semoga tesis ini dapat bermanfaat bagi pengembangan ilmu pengetahuan.
Medan, Februari 2013
EFEKTIFITAS PEMBERIAN SOYGHURT YANG MENGANDUNG
BAKTERI ASAM LAKTAT DALAM MEMPERBAIKI KERUSAKAN
JARINGAN HATI MENCIT (Mus musculus L.) YANG DIPAPAR TIMBAL
ABSTRAK
Paparan timbal dapat mengakibatkan kerusakan sel-sel hepatosit yang berakibat meningkatnya kadar enzim Serum Glutamat Oksaloasetat Transaminase (SGOT) dan Serum Glutamat Piruvat Transaminase (SGPT) dalam darah yang sering menjadi indikator adanya kerusakan hati. Tujuan penelitian ini ialah untuk pembuatan soyghurt dengan menggunakan starter soyghurt yang mengandung bakteri asam laktat Lactobacillus bulgaricus dan Streptococcus thermophilus, dan melihat manfaatnya dalam memperbaiki kadar SGOT dan SGPT yang dihasilkan oleh jaringan hati serta gambaran makroskopis dan histopatologi hati mencit (Mus
musculus L.) jantan yang diberi timbal. Perlakuan waktu fermentasi pada
opembuatan soyghurt ialah 4, 6, dan 8 jam pada suhu inkubasi 40
C. Analisa jumlah bakteri asam laktat berdasarkan Standard Plate Count. Identifikasi jenis bakteri dilakukan dengan pengamatan karakteristik sifat morfologi dan sifat fisiologis bakteri. Sifat morfologi dilakukan uji pewarnaan Gram dan motilitas bakteri, sedangkan sifat fisiologisnya dilakukan uji katalase, indol, H
2 S,
pembentukan gas, fermentasi glukosa, penggunaan sitrat, reduksi nitrat, hidrolisa pati, ketahanan suhu, dan fermentasi karbohidrat. Hasil penelitian menunjukkan bahwa waktu fermentasi yang baik pada pembuatan soyghurt adalah 8 jam dengan
9
jumlah koloni sebesar 1,71 x 10 cfu/ml. Pemberian timbal meningkatkan kadar SGOT dengan nilai (544,00±30,26 IU/ml), kadar SGPT (116,43±11,13 IU/ml) dan kerusakan sel hati dengan nilai (28,57±8,13). Sebaliknya pemberian soyghurt dapat menurunkan kadar SGOT (456,29±26,87 IU/ml), kadar SGPT (85,86±7,06
IU/ml) dan perbaikan sel-sel hati (19,05±6,30); p < 0.05. Hasil menunjukkan bahwa soyghurt yang mengandung bakteri asam laktat efektif dalam memperbaiki kerusakan jaringan hati mencit yang terpapar timbal.
Katakunci: , fermentasi soyghurt, makroskopis dan bakteri asam laktat histopatologi hati, SGOT, SGPT
THE EFFECTIVENESS OF SOYGURT CONTAINING LACTIC ACID
BACTERIA IN REPAIRING LIVER TISSUE DAMAGE OF LEAD
EXPOSED MICE (Mus musculus L.)
ABSTRACT
The influence of metalloid lead again the liver cells damage, which may
consequently increase of Glutamat Oksaloasetat Transaminase Serum (SGOT)
and Glutamat Piruvat Transaminase Serum (SGPT), in the blood plasma and
therefore both of them frequently used as indicators of liver cells damage. The
aim of this study was to investigate the production of soygurt which lactic acid
bacteria (Lactobacillus bulgaricus and Streptococcus thermophilus) as well as its
benefit in improving the levels of SGOT and SGPT, also the macroscopic and
histopahologic of mice (Mus musculus L.) to be exposed by lead. During the
fermentation, the soygurt was incubated at 40 C for 4, 6, and 8 hours. Total
colony count of the lactic acid bacteria was carried out using Standard Plate
Count, whilst the identification of the type of the lactic acid bacteria was
performed the morphological and physiological characteristics of the bacteria.
The morphological characteristic was tested using Gram staining and motility of
the bacteria, while the physiological characteristic was tested by the catalase,
indol, H2 S, the gas formation, the glucose fermentation, the utilization of citrate,
reduction of nitrate, hydrolysis of starch, resistance to temperature and
carbohydrate fermentation. The result showed that the optimal fermentation time
9of soygurt production was 8 hours and the total colony was 1,71 x 10 cfu/ml.
Exposure to lead increased the levels of mean ± S.D of the SGOT (554.00 ± 30.26
IU/ml), SGPT (116.43 ± 11.13 IU/ml) and hepatocyte cell damage (28.57 ± 8.13).
In contrary, the administration of soygurt reduced the levels of SGOT (456. 29 ±
26.87 IU/ml), SGPT (85.86 ± 7.06 IU/ml) and improvement of hepatocytes (19.05
± 6.03); p < 0.05. The result demonstrated that soygurt containing lactic acid
bacteria was effective in repairing liver tissue damage in lead-exposed mice.Keywords: lactic acid bacteria, soygurt fermentation, macroscopy and histopathology of the liver, SGOT, SGPT
DAFTAR ISI
HalamanKATA PENGANTAR
i ABSTRAK ii ABSTRACT iii DAFTAR ISI iv DAFTAR TABEL vi DAFTAR GAMBAR vii DAFTAR LAMPIRAN viii
BAB 1. PENDAHULUAN
1.2. Pembatasan dan Perumusan Masalah
8
1.1. Latar Belakang
10
2.1.3. Toksisitas Timbal
9
2.1.2. Metabolisme Timbal
8
2.1.1. Sifat Fisika dan Kimia Timbal
2.1. Timbal
5
7 BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA
1
7
1.5. Hipotesis Penelitian
7
1.4. Tujuan Penelitian
6
1.3. Kerangka Pemikiran
1.6. Manfaat Penelitian
2.2. Yoghurt dan Soyghurt
39
2.4.5. Intoksikasi Hati
33
2.5. Mekanisme Kerusakan Hati Akibat Timbal dan Perlindungan Soyghurt terhadap Hati
34 BAB 3. METODE PENELITIAN
3.1. Waktu dan Lokasi Penelitian
39
3.2. Populasi dan Sampel Penelitian
3.3. Bahan dan Alat Penelitian
2.4.4. Kelainan Fungsi Hati dan Kadar Transaminase
39
3.4. Pembuatan Starter Soyghurt (Koswara, 2006)
41
3.5. Pembuatan Susu Kedelai (Yudhi, 2008)
41
3.6. Pembuatan Soyghurt (Koswara, 2006)
41
3.7. Isolasi dan Identifikasi BAL Soyghurt
32
30
12
2.3.2. Lactobacillus bulgaricus
2.2.1. Yoghurt
12
2.2.2. Soyghurt
15
2.3. Bakteri Asam Laktat
19
2.3.1. Streptococcus thermophilus
22
23
2.4.3. Fisiologi Hati
2.3.3. Bakteri Asam Laktat sebagai Probiotik
24
2.4. Hati (Hepar)
27
2.4.1. Morfologi Hati Mencit (Mus musculus L.)
27
2.4.2. Morfologi dan Histologi Hati Manusia
28
42
3.7.1. Preparasi Alat dan Bahan
42
3.7.2. Pembuatan Media
42
3.7.3. Pengenceran Sampel
42
3.7.4. Isolasi Bakteri Asam Laktat
43
3.7.5. Penghitungan Jumlah Koloni BAL
44
3.7.6. Identifikasi Bakteri Asam Laktat
44
3.7.6.1. Pewarnaan Gram
44
3.7.6.2. Uji Motilitas
44
3.7.6.3. Uji Katalase
45
3.7.6.4. Uji Indol
45
3.7.6.5. Uji H
2 S, Fermentasi Glukosa dan
Pembentukan Gas
45
3.7.6.6. Uji Sitrat
46
3.7.6.7. Uji Reduksi Nitrat
46
3.7.6.8. Uji Hidrolisis Pati
46
3.7.6.9. Uji Ketahanan Suhu
46
3.7.6.10. Fermentasi Karbohidrat
46
3.8. Pemeliharaan Hewan Coba
47
3.9. Perlakuan Hewan Coba
47
3.10. Pengamatan Perubahan Prilaku Mencit
48
3.11. Pengukuran Bobot Badan Mencit
48
3.12. Pengukuran Berat Hati Mencit
48
3.13. Pemeriksaan Kadar Enzim GOT dan GPT
48
3.14. Pemeriksaan Histopatologi Hati
49
3.15. Pengamatan Hati secara Makroskopis
50
3.16. Pengamatan Sel Hati secara Mikroskopis
4.6. Berat Hati Mencit
70 DAFTAR KEPUSTAKAAN
5.2. Saran
70
5.1. Kesimpulan
65 BAB 5. KESIMPULAN DAN SARAN
4.9. Kerusakan Sel Hati secara Mikroskopis
63
4.8. Kerusakan Hati secara Makroskopis
61
4.7. Pemeriksaan Kadar Enzim GOT dan GPT
59
57
51
4.5. Bobot Badan Mencit
56
4.4. Perubahan Prilaku Mencit
54
4.3. Identifikasi Bakteri Asam Laktat
52
4.2. Isolasi dan Penghitungan Jumlah Koloni BAL
52
4.1. Hasil Penelitian
51 BAB 4. HASIL DAN PEMBAHASAN
3.17. Analisis Data
71 LAMPIRAN L-1
DAFTAR TABEL Judul Halaman Nomor Tabel
2.2.1 Standar Nasional Indonesia untuk Yoghurt 2981:2009
14
2.2.2 Perbandingan Komposisi Nutrien Susu Kedelai dan Susu Sapi
17
2.3 Karakterisasi Empat Genus Bakteri Asam Laktat
22
2.3.3 Bakteri Asam Laktat yang Digunakan sebagai Probiotik
26
o
4.2a Jumlah Koloni BAL pada Soyghurt Suhu Inkubasi 40 C
53 dengan Waktu Fermentasi 4, 6, dan 8 jam 4.2b Jumlah Koloni Bakteri S. thermophilus dan L. bulgaricus pada
- 7
54 Pengenceran 10 waktu Fermentasi 8 jam
4.3 Karakterisasi Morfologi dan Sifat Fisiologi S. thermophilus dan L. bulgaricus
55
4.4 Prilaku Mencit Sebelum dan Sesudah Perlakuan
57
4.5 Hasil Rata-rata Peningkatan dan Penurunan Bobot Badan Mencit Sebelum dan Sesudah Perlakuan
58
4.6 Hasil Rata-rata Berat Hati Mencit Sesudah Perlakuan (g)
59
4.7 Hasil Rata-rata Kadar SGOT dan SGPT Mencit (Mus
musculus L.) Sesudah Perlakuan
61
4.8 Derajat Kerusakan Hati Mencit (Mus musculus L.) secara Makroskopis Sesudah Perlakuan
63
4.9 Hasil Rata-rata Kerusakan Sel Hati Mencit secara Mikroskopis Sesudah Perlakuan
65
DAFTAR GAMBAR Nomor Gambar Judul Halaman
3.7.4 Cara Pengenceran Soyghurt untuk Isolasi Bakteri pada Media Biakan dalam Cawan Petri
67 4.9d Gambaran Histologi Hati Mencit secara Mikroskopis
66 4.9c Gambaran Histologi Hati Mencit secara Mikroskopis
65 4.9b Gambaran Histologi Hati Mencit secara Mikroskopis
64 4.9a Gambaran Histologi Hati Mencit secara Mikroskopis
64 4.8d Gambaran Hati Mencit secara Makroskopis
64 4.8c Gambaran Hati Mencit secara Makroskopis
64 4.8b Gambaran Hati Mencit secara Makroskopis
62 4.8a Gambaran Hati Mencit secara Makroskopis
4.7 Rata-rata Kadar Enzim SGOT dan SGPT Mencit
60
4.6 Rata-rata Berat Hati Mencit (Mus musculus L.)
58
4.5 Peningkatan dan Penurunan Bobot Badan Mencit
43
30
1.3 Kerangka Pemikiran Penelitian
20
6
2.1.2 Akumulasi Timbal dalam Tubuh Manusia
9
2.2.2 Soyghurt
19
2.3 Skema Pembentukan Asam Laktat dari Glukosa oleh BAL Homofermentatif dan Heterofermentatif
2.3.1 Streptococcus thermophilus
29 2.4.2c Sistem Asinus Hati Manusia
23
2.3.2 Lactobacillus bulgaricus
24
2.4.1 Morfologi Hati Mencit (Mus musculus L.)
28 2.4.2a Morfologi Hati Manusia Normal
28 2.4.2b Struktur Mikroskopis Lobulus Hati Manusia
67