Penetapan kadar pirantel pamoat dalam sediaan suspensi merk `X` secara spektrofotometri ultraviolet - USD Repository

PENETAPAN KADAR PIRANTEL PAMOAT DALAM SEDIAAN

  ®

SUSPENSI MERK X SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

SKRIPSI

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

  Program Studi Farmasi Oleh:

  Novia Sarwoning Tyas NIM : 09 8114 119

  

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2013

PENETAPAN KADAR PIRANTEL PAMOAT DALAM SEDIAAN

  ®

SUSPENSI MERK X SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET

SKRIPSI

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

  Program Studi Farmasi Oleh:

  Novia Sarwoning Tyas NIM : 09 8114 119

  

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2013

HALAMAN PERSEMBAHAN

  Kupersembahkan karyaku ini untuk:

Tuhan Yesus Kristus yang memberikan hikmat dan pengertian

Papa, Mama, Adikku atas doa, dukungan dan perhatian yang

diberikan kepadaku

  Almamaterku Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma

  

PRAKATA

  Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yesus Kristus untuk segala anugerah dan penyertaan-Nya kepada penulis selama menyelesaikan penelitian dan penyusunan naskah skripsi ini.

  Skripsi berjudul

  “Penetapan Kadar Basa Pirantel dalam Sediaan ®

Suspensi Pirantel Pamoat Merk X Menggunakan Metode Spektrofotometri

Ultraviolet” ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar

  Sarjana Farmasi (S.Farm) Progam Studi Ilmu Farmasi Universitas Sanata Dharma.

  Keberhasilan dalam penulisan skripsi ini juga tidak terlepas dari bantuan dan dukungan berbagai pihak yang telah memberikan saran, kritik, dan dukungan kepada penulis, maka dari itu penulis mengucapkan terima kasih yang setulus- tulusnya kepada:

1. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt., selaku dekan Universitas Sanata Dharma.

  2. Prof. Dr. Sudibyo Martono, M.S., Apt., selaku dosen pembimbing yang dengan penuh kesabaran memberikan masukan, pengarahan, dukungan, semangat, kritik dan saran baik selama penelitian maupun penyusunan skripsi ini.

  3. Ibu Dra. M. M. Yetty Tjandrawati, M.Si., selaku dosen pembimbing akademik yang memberikan masukan dan dukungan kepada penulis dalam menjalankan studi di Fakultas Farmasi USD.

  4. Bapak Jeffry Julianus, M.Si., selaku dosen penguji yang telah memberikan saran dan kritik selama penyusunan skripsi.

  5. Ibu Lucia Wiwid Wijayanti, M.Si., selaku dosen penguji yang telah memberikan saran dan kritik selama penyusunan skripsi.

  6. PT. Konimex-Solo yang telah bersedia memberikan baku pirantel pamoat yang berguna dalam skripsi.

  7. Mas Bimo, Mas Parlan, dan Mas Kunto selaku staff laboratorium Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah membantu penulis dalam pengerjaan penelitian di laboratorium.

  8. Segenap dosen dan karyawan atas ilmu yang telah diberikan.

  9. Papa, Mama dan Dian, yang tak pernah berhenti mendoakan, mendukung dan memberi semangat sampai akhirnya skripsi ini selesai.

  10. Agnes sebagai sahabat dan rekan kerja yang telah menyediakan waktu untuk memberikan saran dan kritik baik dalam hal penyusunan tugas akhir maupun hal-hal lainnya serta bekerja bersama di laboratorium.

  11. Victor sebagai rekan kerja yang telah menyediakan waktu untuk berdiskusi maupun bekerja bersama di laboratorium.

  12. Ko franky dan cik lia sebagai teman yang selalu memberikan pengarahan, diskusi, semangat, kritik dan saran selama penelitian dan penyusunan skripsi ini.

  13. Dita, tere, lulu, niken dan nanda sebagai sahabat yang selalu mendukung, mendoakan dan memberi semangat sampai akhirnya skripsi ini selesai.

  

DAFTAR ISI

  Halaman HALAMAN JUDUL ............................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ........................................ ii HALAMAN PENGESAHAN .................................................................. iii HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................... iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ................................................... v LEMBAR PERNYATAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ......... vi PRAKATA .............................................................................................. vii DAFTAR ISI ........................................................................................... x DAFTAR TABEL ................................................................................... xiii DAFTAR GAMBAR ............................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ xv

  INTISARI ................................................................................................ xvi

  

ABSTRACT ............................................ .................................................... xvii

BAB I PENGANTAR.............................................................................

  1 A.

  Latar Belakang ..................................................................................

  1 1. Perumusan masalah ....................................................................

  3 2. Keaslian Penelitian .....................................................................

  4 3. Manfaat Penelitian .....................................................................

  4 B. Tujuan Penelitian ..............................................................................

  5

  BAB II PENELAAHAN PUSTAKA .....................................................

  6 A.

  6 Pirantel Pamoat .................................................................................

  B.

  7 Suspensi ............................................................................................

  C.

  8 Ekstraksi ...........................................................................................

  D.

  11 Spektrofotometri UV .........................................................................

  E.

  16 Landasan Teori .................................................................................

  F.

  17 Hipotesis ...........................................................................................

  BAB III METODE PENELITIAN ........................................................

  18 A.

  18 Jenis dan Rancangan Penelitian .........................................................

  B.

  18 Variabel Penelitian ............................................................................

  1.

  18 Variabel bebas ............................................................................

  2.

  18 Variabel tergantung ....................................................................

  3.

  18 Variabel pengacau terkendali......................................................

  C.

  19 Definisi Operasional .........................................................................

  D.

  19 Bahan................................................................................................

  E.

  19 Alat ...................................................................................................

  F.

  20 Tata Cara Penelitian ..........................................................................

  1.

  20 Pemilihan dan pengambilan sampel ............................................

  2.

  20 Uji keseragaman kandungan .......................................................

  3.

  20 Pembuatan larutan stok pirantel pamoat......................................

  4.

  20 Penetapan panjang gelombang maksimum pengukuran ..............

  5.

  21 Pembuatan larutan seri baku dan kurva baku pirantel pamoat .....

  6. Penetapan kadar pirantel pamoat dalam sampel suspensi ............

  ® ....

  39 BIOGRAFI PENULIS ............................................................................

  36 LAMPIRAN ............................................................................................

  35 DAFTAR PUSTAKA ..............................................................................

  35 Saran .......................................................................................................

  35 Kesimpulan ..............................................................................................

  31 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ..................................................

  29 E. Penetapan kadar pirantel pamoat dalam sediaan suspensi merk X

  21 7. Analisis hasil ..............................................................................

  26 D. Pembuatan kurva baku pirantel pamoat .............................................

  24 C. Penentuan panjang gelombang maksimum ........................................

  23 B. Keseragaman kandungan ...................................................................

  Larutan pirantel pamoat ....................................................................

  23 A.

  22 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN.................................................

  53

  

DAFTAR TABEL

Tabel I. Data uji keseragaman kandungan ......................................

  26 Tabel II. Data replikasi kurva baku pirantel pamoat .........................

  30 Tabel III. Hasil penetapan kadar pirantel pamoat dan basa pirantel

  ® dalam suspensi merk X ....................................................

  33

  

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Struktur pirantel pamoat ....................................................

  6 Gambar 2. Spektrofotometer single beam ...........................................

  15 Gambar 3. Spektrofotometer double beam ..........................................

  15 Gambar 4. Spektra absorbansi maksimum pirantel pamoat pada 3 konsentrasi .............................................................

  27 Gambar 5. Gugus kromofor dan auksokrom pada pirantel pamoat ......

  29 Gambar 6. Hubungan antara kadar pirantel pamoat dengan absorbansi

  31 Gambar 7. Spektra pirantel pamoat pada konsentrasi 10 µg/mL ..........

  41 Gambar 8. Spektra absorbansi maksimum pirantel pamoat pada 3 konsentrasi .............................................................

  41 Gambar 9. Spektra blanko DMSO-metanol .........................................

  42 Gambar 10. Spektrum fase polar hasil ekstraksi cair-cair menggunakan ultrasonikator ....................................................................

  42 Gambar 11. Spektrum fase organik hasil ekstraksi cair-cair menggunakan ultrasonikator ..............................................

  43

  

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Setifikat analisis pirantel pamoat ..................................

  40 Lampiran 2. Hasil scanning panjang gelombang pirantel pamoat 10 µg/mL .............................................

  41 Lampiran 3. Hasil scanning panjang gelombang pirantel pamoat pada konsentrasi 10; 20 dan 30 µg/mL ..................................

  41 Lampiran 4. Hasil scanning blanko berisi DMSO dan metanol .........

  42 Lampiran 5. Hasil scanning fase polar ekstraksi cair-cair menggunakan ultrasonikator .........................................

  42 Lampiran 6. Hasil scanning fase organik ekstraksi cair-cair menggunakan ultrasonikator .........................................

  43 Lampiran 7. Contoh perhitungan kadar larutan baku pirantel pamoat .............................................................

  43 Lampiran 8. Perhitungan persamaan kurva baku pirantel pamoat ......

  44 Lampiran 9. Penetapan kadar pirantel pamoat dan basa pirantel

  ® dalam sediaan suspensi merk X batch 229-18062 .......

  47

  

INTISARI

Cacingan adalah penyakit yang disebabkan oleh adanya infeksi parasit.

  Penyakit ini memiliki banyak kerugian bagi penderitanya. Pertolongan pertama yang sering dilakukan adalah pengobatan mandiri menggunakan obat pirantel pamoat yang memiliki khasiat sebagai anthelmintik. Sampel yang digunakan adalah sediaan suspensi oral, yang mengandung pirantel pamoat setara dengan basa pirantel. Perlu dilakukan analisis untuk mengetahui kadar pirantel pamoat

  ®

  yang setara dengan basa pirantel dalam sediaan suspensi merk X dan kesesuaian dengan persyaratan yang ditetapkan oleh Farmakope Indonesia edisi IV yakni mengandung basa pirantel tidak kurang dari 90% dan tidak lebih dari 110% dari jumlah yang tertera pada etiket.

  Penelitian ini merupakan penelitian non eksperimental dengan rancangan penelitian deskriptif. Pada preparasi sampel dilakukan ekstraksi cair-cair menggunakan ultrasonikator dan pengukuran menggunakan spektrofotometer UV pada panjang gelombang maksimum 301 nm, terhadap baku pirantel pamoat.

  ®

  Kadar yang diperoleh suspensi merk X mengandung pirantel pamoat setara dengan basa pirantel 98,40-101,64% release. Kadar basa pirantel tersebut, sesuai dengan kadar yang tertera pada etiket yang ditetapkan oleh Farmakope Indonesia edisi IV.

  

Kata kunci : pirantel pamoat, basa pirantel, suspensi, ultrasonikator,

spektrofotometri UV

  

ABSTRACT

  Wormy is a desease caused by parasite infection. The desease gives many negativ effect to the patients. The first aid for the desease is swamedication using a medicine with pyrantel pamoate as an anthelmintik. The sample of this research is an oral suspension, which contain of pyrantel pamoate that equal to pyrantel base. It is necessary to do a determination of pyrantel pamoate in

  ®

  suspension dosage brand X and get to know about the accordance with the requirements established by the FI IV that is no less than 90.0% and no more than 110.0% of the amount listed on the label.

  This study is a non experimental descriptive research. The sample preparation is done by doing a liquid-liquid extraction using ultrasonicator and measuring using UV spectrophotometer at wavelangeth of 301 nm, with pyrantel pamoate standar.

  Based on the result of this study, the amount of pyrantel pamoate which

  ® equal to pyrantel base in suspension dosage brand X is 98.40-101.64% release.

  The result obtained meet the requirements set by FI IV.

  

Keyword : pyrantel pamoate, pyrantel base, suspension, ultrasonicator, UV

spectrophotometry

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Di Indonesia, masih banyak terdapat penyakit yang menjadi masalah

  utama kesehatan, salah satu contohnya adalah penyakit cacingan. Penyakit tersebut merupakan penyakit yang disebabkan oleh adanya infeksi parasit.

  Penyakit tersebut dapat mengakibatkan menurunnya kondisi kesehatan, gizi, kecerdasan dan produktivitas penderitanya sehingga secara ekonomi banyak mengakibatkan kerugian, karena menyebabkan kehilangan karbohidrat dan protein serta kehilangan darah, sehingga menurunkan kualitas sumber daya manusia (Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 2006). Pertolongan pertama yang sering dilakukan adalah dengan pengobatan mandiri menggunakan obat- obatan yang dijual bebas di pasaran. Obat yang banyak dipasarkan untuk mengobati penyakit cacingan adalah pirantel pamoat yang setara dengan basa pirantel.

  Pirantel pamoat mengandung basa pirantel dan asam pamoat, merupakan anthelmintik berspektrum luas yang sangat efektif untuk terapi infeksi parasit seperti cacing (Katzung, 2010). Saat ini, pirantel pamoat telah tersedia dalam beberapa bentuk sediaan obat, salah satunya yaitu bentuk suspensi oral. Sediaan suspensi oral adalah sediaan cair yang mengandung partikel padat tidak larut yang terdispersi dalam fase cair, digunakan untuk pemakaian oral (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995). Adanya bentuk suspensi oral ditujukan untuk pasien yang sukar menerima tablet atau kapsul, terutama bagi anak-anak,

  2 dapat menutupi rasa obat yang tidak enak atau pahit. Suspensi lebih mudah diabsorpsi daripada tablet atau kapsul karena luas permukaan kontak zat aktif dan

  ®

  saluran cerna meningkat. Suspensi merk X merupakan sediaan yang mengandung pirantel pamoat setara dengan basa pirantel 125 mg/5 mL.

  Salah satu syarat penjaminan mutu adalah kadar obat yang terkandung harus memenuhi persyaratan kadar yang tercantum dalam Farmakope Indonesia atau buku resmi lainnya. Syarat yang ditetapkan oleh Farmakope Indonesia edisi

  IV untuk sediaan suspensi oral pirantel pamoat adalah mengandung basa pirantel C

  11 H

  14 N

  2 S, tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang

  tertera pada etiket. Untuk itu perlu dilakukan penetapan kadar pirantel pamoat

  ®

  dalam sediaan suspensi merk X menggunakan metode yang sudah divalidasi untuk mengetahui kadar pirantel pamoat dalam suspensi dan kesesuaian dengan syarat yang ditetapkan oleh Farmakope Indonesia edisi IV, sehingga kualitas dan

  ® mutu suspensi merk X terjamin.

  Metode yang digunakan untuk tujuan tersebut adalah spektrofotometri UV. Pirantel pamoat merupakan senyawa turunan tetrahydropyrimidine yang memiliki kromofor dan auksokrom sehingga dapat ditetapkan kadarnya secara spektrofotometri UV. Pada penelitian ini, sebelum diukur menggunakan spektrofotometer, terlebih dahulu dilakukan ekstraksi cair-cair menggunakan ultrasonikator pada preparasi sampel dengan tujuan untuk menghilangkan zat tambahan atau pengotor dalam sampel, sehingga tidak mengganggu absorbansi saat pengukuran.

  3 Metode spektrofotometri memiliki kelebihan antara lain mudah dan cepat dalam penggunaannya, memiliki selektivitas dan sensitivitas yang cukup baik untuk penetapan kadar senyawa tunggal dalam suatu sediaan serta merupakan metode dengan instrumen yang umum digunakan dan dimiliki oleh kebanyakan laboratorium di Indonesia.

  Penelitian ini merupakan penelitian gabungan dari FanggidaE (2013) melakukan optimasi pada perbandingan ekstraksi cair-cair dan ultrasonikasi untuk

  ®

  pemisahan pirantel pamoat dari sediaan suspensi merk X dan Kurniawan (2013) melakukan validasi metode analisis spektrofotometri UV pada penetapan kadar

  ®

  pirantel pamoat dalam sediaan suspensi merk X . Hasil optimasi ekstraksi cair- cair menggunakan corong pisah dan ultasonikasi yang dilakukan FanggidaE (2013) memiliki kemampuan yang sama optimumnya dalam mengekstraksi zat aktif pirantel pamoat, namun pada penelitian ini peneliti menggunakan ekstraksi cair-cair secara ultrasonikasi untuk preparasi sampel. Metode spektrofotometri UV yang dilakukan oleh Kurniawan (2013) juga telah memenuhi parameter validasi yaitu selektivitas, presisi, akurasi, range dan linieritas sehingga pada penelitian ini sudah ada jaminan bahwa metode yang digunakan dapat dipercaya dan valid.

1. Perumusan Masalah

  Masalah yang dapat dirumuskan bedasarkan latar belakang tersebut adalah berapa kadar pirantel pamoat yang setara dengan basa pirantel dalam

  ®

  sediaan suspensi merk X dan apakah kadar tersebut memenuhi persyaratan yang ditetapkan oleh Farmakope Indonesia edisi IV yakni mengandung basa pirantel

  4 tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket?

  2. Keaslian Penelitian

  Bedasarkan data-data penelitian yang telah dilakukan sebelumnya, masih jarang ditemukan metode untuk menetapkan kadar pirantel pamoat dalam sediaan

  ®

  suspensi merk X secara spektrofotometri UV di Indonesia. Sejauh peneliti ketahui, determinasi oxantel dan pirantel pamoat pernah dilakukan menggunakan HPLC (Allender, 1988). Determinasi obat anthelmintik pirantel pamoat dalam

  

bulk dan sediaan farmasi pernah dilakukan menggunakan metode electro-

analytical (Jain, Jadon and Radhapyari, 2006).

  Analisis pirantel pamoat menggunakan metode spektrofotometri yang pernah dilakukan sebelumnya yaitu penetapan kadar pirantel pamoat dalam sediaan tablet secara spektrofotometri UV (Agustina, 2010), perbedaan pada penelitian yang sekarang terkait dengan bentuk sediaan yang dianalisis dan dilakukan ekstraksi pada sampel untuk menghilangkan zat tambahan atau pengotor. Selain itu, analisis basa pirantel menggunakan metode spektrofotometri juga pernah dilakukan yaitu penetapan kadar basa pirantel dalam pirantel pamoat pada bulk dan sediaan farmasi (Forcier, Mushinky and Wagner, 2006).

  3. Manfaat Penelitian a.

  Manfaat teoritis. Memberikan informasi tentang penetapan kadar

  ®

  pirantel pamoat yang setara dengan basa pirantel dalam sediaan suspensi merk X secara spektrofotometri UV.

  5 b.

  Manfaat Praktis. Memberikan informasi kepada masyarakat tentang penjaminan mutu dan kadar pirantel pamoat yang setara dengan basa pirantel

  ®

  dalam sediaan suspensi merk X terkait dengan keamanan dan khasiat penggunaan.

B. Tujuan Penelitian

  Bedasarkan latar belakang dan permasalahan yang ada, maka penelitian ini bertujuan untuk mengetahui kadar pirantel pamoat yang setara dengan basa

  ®

  pirantel dalam sediaan suspensi merk X dan mengetahui kesesuaian kadar

  ®

  pirantel pamoat yang setara dengan basa pirantel dalam sediaan suspensi merk X memenuhi persyaratan Farmakope Indonesia edisi IV yakni mengandung basa pirantel tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket.

  

BAB II

PENELAAHAN PUSTAKA A. Pirantel Pamoat

Gambar 1. Struktur pirantel pamoat

Pirantel pamoat (gambar 1) merupakaan garam yang terdiri dari basa

  pirantel dan asam pamoat. Rumus molekulnya adalah C

  11 H

  14 N

  2 S·C

  23 H

  16 O

  6

  dengan bobot molekul 594, 7 dan titik leburnya 178-179

  C. Kelarutan pirantel pamoat praktis tidak larut dalam air dan dalam metanol, larut dalam dimetil sulfoksida, dan sukar larut dalam dimetil formamida (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995). Pirantel pamoat (1-Methyl-2-[(E)-2-

  

(thiophen-2-yl)ethenyl]-1,4,5,6-tetrahydropyrimidine hydrogen 4,4

methylenebis(3-hydroxynaphthalene-2-carboxylate) memiliki khasiat sebagai

  anthelmintik yang mekanisme kerjanya menimbulkan depolarisasi pada otot cacing sehingga terjadi pelepasan asetilkolin dan penghambatan kolinesterase. Hal ini menyebabkan pelumpuhan cacing-cacing, yang diikuti dengan pembuangan dari saluran intestinal manusia (Katzung, 1989).

  1%

  Pirantel pamoat memiliki panjang gelombang teoritis 300 nm E 366;

  1cm

• -1 -1 -1 -1

  1%

  .cm dan 288 nm E 370; .cm dalam pelarut ɛ = 21770 M ɛ = 22000 M

  1cm

  metanol (Dibbern, 2002). Pada penelitian ini panjang gelombang teoritis pirantel

  7 pamoat tidak terdapat absorban dari pelarut yang digunakan, sedangkan nilai

• 1 -1

  absorptivitas molar dari pirantel pamoat lebih dari 20000 M .cm , sehingga mudah untuk dilakukan deteksi secara spektrofotometri UV.

  Pirantel pamoat yang akan ditetapkan berbentuk sediaan suspensi oral, yang mengandung basa pirantel C H N S, tidak kurang dari 90,0% dan tidak

  ,

  11

  14

  2

  lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995).

B. Suspensi

  Suspensi adalah sediaan cair yang mengandung partikel padat tidak larut yang terdispersi dalam fase cair. Pada penelitian ini, menggunakan sediaan suspensi oral yaitu sediaan cair mengandung partikel padat yang terdispersi dalam pembawa cair dengan bahan pengaroma yang sesuai, dan ditujukan untuk penggunaan oral (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995).

  Suspensi mengandung komponen-komponen berikut: 1. Zat aktif

  Berupa bahan aktif atau komponen utama dari sediaan yang memberikan efek terapeutik.

2. Zat tambahan

  Bahan yang dengan sengaja ditambahkan pada sediaan untuk tujuan tertentu sehingga memperoleh hasil yang lebih baik. Terdapat bermacam-macam zat tambahan sesuai dengan fungsinya, yaitu: a.

  Zat pengental (suspending agent)

  8 Berfungsi untuk mendispersikan partikel zat aktif yang tidak larut dalam larutan pembawa serta meningkatkan viskositas sehingga kecepatan sedimentasi diperlambat.

  b.

  Pemanis Digunakan untuk menutupi rasa yang tidak enak dari zat aktif, contoh sukrosa.

  c.

  Penyedap rasa dan aroma Digunakan untuk menutupi aroma tidak enak dari zat aktif, contoh mentol.

  d.

  Pewarna Digunakan untuk menambah daya tarik suspensi yang disesuaikan dengan pemberi rasa, contoh rasa jeruk dan diberi warna orange.

  e.

  Pengawet Digunakan untuk melindungi suspensi dari pertumbuhan mikroorganisme dengan adanya media air, contoh asam benzoat (Ansel, 1989).

C. Ekstraksi

  Ekstraksi merupakan proses pemisahan dua zat atau lebih dengan menggunakan pelarut yang tidak saling campur. Berdasarkan fase yang terlibat, terdapat dua jenis ekstraksi, yaitu ekstraksi cair-cair dan ekstraksi padat-cair, namun pada penelitian ini akan dibahas ekstraksi cair-cair (Gandjar dan Rohman, 2007).

  9 Ekstraksi cair-cair digunakan sebagai cara untuk praperlakuan sampel atau untuk memisahkan analit-analit dari komponen-komponen matriks yang mungkin menganggu pada saat kuantifikasi atau deteksi analit.

  Pemisahan ekstraksi cair-cair dilakukan untuk mendapatkan analit yang diinginkan terlarut dalam pelarut yang sesuai. Proses pemisahan dengan cara ekstraksi terdiri dari tiga langkah dasar: 1.

  Proses penyampuran sejumlah massa bahan ke dalam larutan yang akan dipisahkan komponen-komponennya.

  2. Proses pembentukkan fase seimbang.

  3. Proses pemisahan kedua fase seimbang.

  Untuk memperoleh hasil baik dalam ekstraksi, perlu dilakukan pemilihan pelarut yang tepat. Adapun pertimbangan yang dilakukan sebelum ekstraksi yaitu pelarut yang digunakan mampu melarutkan solute, pelarut memiliki perbedaan titik didih yang besar dengan solute dan mempunyai kemurnian tinggi.

  Prinsip dari ekstraksi cair-cair ditentukan oleh distribusi Nerst atau hukum partisi yang menyatakan bahwa pada konsentrasi dan tekanan yang konstan, analit akan terdistribusi dalam proporsi yang selalu sama diantara dua pelarut yang saling tidak campur. Perbandingan konsentrasi pada kesetimbangan di antara dua pelarut yang tidak saling campur disebut koefisien distribusi atau koefisien partisi (K ), yang ditulis dengan persamaan berikut:

  D Corg

  K D = ............................................................................................(1)

  [Caq ]

  10 C org dan C aq masing-masing merupakan konsentrasi analit dalam fase organik dan dalam fase air. Semakin besar konsentrasi analit dalam pelarut organik maka akan semakin besar nilai koefisien distribusinya. Sebaliknya, semakin kecil konsentrasi analit dalam pelarut organik maka akan semakin kecil nilai koefisien distribusinya.

  Namun dalam kenyataannya, analit seringkali berada dalam bentuk kimia yang berbeda karena adanya disosiasi (ionisasi), protonasi dan kompleksasi atau polimerisasi sehingga definisinya bisa disebut rasio distribusi (D) atau rasio partisi, yang ditulis dengan persamaan berikut:

  Cs org

  D = ............................................................................................(2)

  (Cs )aq

  (Cs) org dan (Cs) aq masing-masing merupakan konsentrasi total analit (dalam segala bentuk) dalam fase organik dan fase air. Jika tidak ada interaksi antar analit yang terjadi pada kedua fase tersebut maka nilai K D dan D adalah sama (Gandjar dan Rohman, 2007).

  Teknik ekstraksi cair-cair yang mulai dikembangkan akhir-akhir ini adalah menggunakan ultrasonikator. Ultrasonikasi merupakan teknik pemberian gelombang ultrasonik yaitu merupakan rambatan energi dalam medium yang bersumber pada gelombang frekuensi tinggi, sehingga membutuhkan medium untuk merambat sebagai interaksi dengan molekul (Tipler, 2001). Aplikasi gelombang ultrasonik yang terpenting adalah pemanfaatannya dalam menimbulkan efek kavitasi akustik (Brennen, 1995).

  Pada penelitian Anggraeni (2012) uji disinfeksi bakteri Escherichia coli menggunakan kavitasi water jet secara ultasonikasi untuk menghilangkan

  11 gelembung dan adanya kavitasi digunakan untuk pembentukkan, pertumbuhan, dan hancurnya gelembung mikro dalam cairan. Gelembung tersebut dapat terbentuk karena terdapat gaya atau energi yang diberikan pada suatu medium yang dapat menyebabkan molekul di dalamnya bergetar. Adanya getaran menyebabkan struktur molekul akan meregang. Jika energi yang diberikan terus ditingkatkan maka akan dicapai suatu kondisi maksimum dimana gaya intramolekul tidak dapat lagi menahan struktur molekul, akibatnya molekul itu pecah dan terbentuklah lubang yang disebut gelembung kavitasi.

  Pada penelitian isolasi metabolit sekunder dan uji toksisitas ekstrak metanol daun tanaman srikaya (Tripiana, Teruna dan Balatif, 2013) menggunakan ultasonikasi sebagai metode ekstraksi. Gelombang ultasonik yang terjadi menghasilkan rambatan energi yang berupa getaran, sehingga analit-analit yang terdapat dalam sampel akan keluar dan larut dalam pelarut yang digunakan. Penelitian lainnya yang melakukan ekstraksi menggunakan metode ultrasonikasi adalah optimised ultrasonic-assisted extraction of flavonoids from folium

  

Eucommiae and evaluation of antioxidant activity in multi-test systems in vitro

(Huang, Xue, Niu, Jia and Wang, 2009).

D. Spektrofotometri UV

  Spektrofotometri UV adalah teknik analisis yang digunakan dengan cara mengukur energi secara relatif jika energi tersebut ditransmisikan, direfleksikan atau diemisikan sebagai fungsi panjang gelombang pada 200-400 nm. Pada analisis menggunakan spektrofotometri UV, dilakukan pembacaan absorbansi (penyerapan) atau transmitansi (penerusan) radiasi elektromagnetik oleh suatu

  12 molekul. Hasil pembacaan absorbansi disebut sebagai absorban (A) dan tidak memiliki satuan %T (Mulja dan Suharman, 1995).

  Sinar UV memberikan energi yang cukup untuk terjadinya transisi elektronik. Keadaan paling rendah disebut keadaan dasar (ground state). Transisi- transisi elektronik akan meningkatkan energi molekuler dari keadaan dasar ke satu atau lebih tingkat energi tereksitasi. Jika molekul dikenakan radiasi elektromagnetik maka molekul tersebut akan menyerap radiasi elektromagnetik yang energinya sesuai dan terjadi eksitasi ke tingkat energi yang lebih tinggi disebut orbital elektron antiikatan (Gandjar dan Rohman, 2007).

  Transisi elektronik yang mungkin terjadi yaitu σ → σ*, π → π*, n → π*, n → σ*. Transisi σ → σ* membutuhkan energi sinar yang frekuensinya terletak diantara UV vakum (kurang dari 180 nm), dan jenis transisi ini kurang begitu bermanfaat un tuk analisis dengan cara spektrofotometri UV. Transisi π → π*, n

  → π* terjadi pada molekul organik yang memiliki gugus fungsional yang tidak jenuh sehingga ikatan rangkap dalam gugus tersebut memberikan orbital phi yang diperlukan. Jenis transisi ini cocok untuk analisis, sebab senyawa yang dianalisis berada pada panjang gelombang 200-

  700 nm. Transisi n → σ* terjadi pada senyawa organik jenuh yang mengandung atom-atom yang memiliki elektron bukan ikatan (elektron n). Energi yang dibutuhkan kecil dan sinar yang diserap memiliki panjang gelombang 150-200 nm (Gandjar dan Rohman, 2007).

  Menurut hukum Lambert, absorban berbading lurus terhadap ketebalan kuvet yang disinari. Menurut hukum Beer, hanya berlaku untuk cahaya monokromatik dan larutan yang sangat encer, absorban berbading lurus dengan

  13 konsentrasi (banyak molekul zat). Kedua pernyataan ini dapat dijadikan satu dalam hukum Lambert-Beer, sehingga diperoleh bahwa absorban berbanding lurus terhadap konsentrasi dan ketebalan kuvet, yang dapat ditulis dalam persamaan :

1 A = log =

  ɛ.b.c

  T Keterangan: T = % transmitan A = absorban

• _{-1 -1}

   = absorptivitas molar (L.mol .cm ) b = tebal larutan (cm) _-1 c = konsentarsi (mol .L )

  1%

  E Hubungan antara nilai dengan absorptivitas molar ( ) adalah

  1cm

  sebagai berikut:

  BM

• 1 -1

  1%

   = E x M . cm

  1cm

10 Nilai  merupakan absorptivitas molar atau koefisien ekstingsi. Nilai 

  tiap molekul atau ion dalam pelarut tertentu memiliki karakter masing-masing, pada panjang gelombang tertentu serta tidak berpengaruh terhadap konsentrasi dan panjang gelombang lintasan radiasi (Sastrohamidjojo, 2001). Nilai  sangat mempengaruhi puncak spektra yang dihasilkan suatu zat. Rincian nilai  terhadap

• 1 -1 2 -1 -1

  2

  puncak spektra adalah: 1-10 M .cm : sangat lemah; 10-10 - M .cm : lemah; 10

  3 -1 -1

  3 4 -1 -1

  4 5 -1 -1

  10 M .cm : sedang; 10 -10 M .cm : kuat; 10 -10 M .cm : sangat kuat (Mulja dan Suharman, 1995).

  Pada umumnya spektrofotometri UV dalam analisis senyawa organik digunakan untuk:

  14

  1. Menentukan jenis kromofor, ikatan rangkap yang terkonjugasi dan auksokrom dari suatu senyawa organik.

  2. Menjelaskan informasi struktur bedasarkan panjang gelombang absorbansi maksimum suatu senyawa organik.

  3. Mampu menganalisis senyawa organik secara kuanitatif dengan menggunakan hukum Lambert-Beer (Dachriyanus, 2004).

  Aspek penggunaan spektrofotometri UV dalam analisis kualitatif dilihat dari parameter panjang gelombang maksimum, intensitas, nilai absortivitas molar, nilai absorptivitas yang spesifik untuk senyawa yang dilarutkan dalam pelarut tertentu. Aspek dalam analisis kuantitatif, terjadi ketika sampel dikenakan suatu radiasi dan intensitas sinar radiasi yang diteruskan diukur besarnya. Analisis kuantitatif juga dilakukan dengan menggunakan metode regresi yaitu dengan menggunakan persamaan garis regresi yang didasarkan pada nilai absorbansi dan konsentrasi baku yang dibuat dalam beberapa konsentrasi. Absorban sampel yang didapat setelah pengukuran dimasukkan ke persamaan garis regresi baku pirantel pamoat. Persyaratannya, pembacaan nilai absorban sampel dan baku tidak jauh berbeda. Pada pengkuran absorbansi senyawa digunakan pada panjang gelombang maksimum untuk mendapatkan absorbansi yang maksimum (Mulja dan Suharman, 1995).

  Beberapa alasan harus digunakan panjang gelombang maksimal, yaitu: a. Pada panjang gelombang maksimal, kepekaannya juga maksimal karena pada panjang gelombang maksimal tersebut perubahan absorbansi untuk setiap satuan konsentrasi adalah yang paling besar.

  15 b.

  Disekitar panjang gelombang maksimal, bentuk kurva absorbansi datar dan pada kondisi tersebut hukum Lambert-Beer akan terpenuhi karena pada kurva datar nilai epsilon yang dihasilkan sama, sehingga absorbansi yang dihasilkan sesuai dengan konsetrasi yang diukur dan akan menghasilkan garis lurus antara kosentrasi yang diukur dan absorbansi yang dihasilkan.

  c.

  Jika dilakukan pengukuran ulang maka akan memberikan kesalahan yang kecil, ketika digunakan panjang gelombang maksimal (Gandjar dan Rohman, 2007).

  Dilihat dari sistem optik spektrofotometer dapat digolongkan menjadi: 1. Sistem optik radiasi berkas tunggal (single beam)

  

Gambar 2. Spektrofotometer single beam

2.

  Sistem optik radiasi berkas ganda (double beam)

  

Gambar 3. Spektrofotometer double beam

  Spektrofotometer single beam melakukan pengukuran absorbansi dengan cara, cahaya hanya melewati satu arah sehingga nilai yang diperoleh hanya nilai

  16 absorbansi dari larutan yang dimasukkan. Keuntungan lebih sederhana dan lebih murah dibandingkan spektrofotometer double beam, kelemahannya adalah tidak dapat mengkoreksi perubahan respon absorbansi akibat turbiditas sampel atau perbedaan intensitas cahaya baik dari sumber radiasi maupun dari pengaruh luar.

  Spektrofotometer double beam merupakan alat pengembangan dari spektrofotometer single beam karena keterbatasan yang dimiliki oleh spektrofotometer single beam. Spektrofotometer double beam memiliki dua sinar yang dibentuk oleh potongan cermin yang digunakan untuk memecah sinar. Sinar pertama melewati larutan blanko dan sinar kedua melewati sampel, dengan dilakukannya sistem ini maka spektrofotometer double beam dapat mengkoreksi perubahan respon absorbansi akibat perbedaan intensitas cahaya, fluktuasi pada kelistrikan instrumen dan absorbansi blanko (Haven, Tetrault, and Schenken, 1994).

E. Landasan teori

  ®

  Suspensi merk X merupakan suspensi yang mengandung pirantel pamoat setara dengan basa pirantel 125 mg/5 mL. Dalam rangka penjaminan mutu obat maka perlu dilakukan penetapan kadar untuk mengetahui kesesuaian kadar yang tertera pada etiket.

  Suspensi oral pirantel pamoat mengandung basa pirantel tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket.

  Pirantel pamoat merupakan senyawa yang memiliki kelarutan dalam dimetil

  1%

  sulfoksida dan memiliki panjang gelombang teoritis 300 nm E 366; ɛ = 21770

  1cm

• 1 -1 -1 -1

  1% M .cm dan 288 nm E 370; .cm dalam pelarut metanol.

  ɛ = 22000 M

  1cm

  17 Pirantel pamoat memiliki gugus kromofor dan auksokrom sehingga kadarnya dapat diukur secara spektrofotometri UV, pada sampel dilakukan ekstraksi cair-cair menggunakan ultrasonikator yang berfungsi untuk menghilangkan komponen matriks dari analit supaya tidak menganggu saat pengukuran.

  Metode spektrofotometri UV digunakan karena cukup selektif dan sensitif untuk menetapkan kadar pirantel pamoat. Selain itu, prosesnya cepat dan alatnya mudah digunakan sehingga spektrofotometri UV banyak digunakan untuk menetapkan kadar senyawa tunggal.

F. Hipotesis

  ®

  Suspensi merk X mengandung pirantel pamoat setara dengan basa pirantel 125 mg/5 mL serta kadar yang diperoleh memenuhi persyaratan Farmakope Indonesia edisi IV yakni mengandung basa pirantel tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket.

BAB III METODE PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian Jenis penelitian ini termasuk penelitian non eksperimental dengan

  rancangan penelitian deskriptif. Jenis penelitian non eksperimental karena subjek penelitian tidak diberi perlakuan. Rancangan penelitian bersifat deskriptif karena peneliti hanya mendeskripsikan keadaan yang ada.

B. Variabel Penelitian 1. Variabel Bebas Variabel bebas dalam peneliltian ini adalah kondisi hasil validasi.

  2. Variabel Tergantung

  Variabel tergantung dalam penelitian ini adalah kadar pirantel pamoat

  ® yang setara dengan basa pirantel dalam sediaan suspensi merk X .

  3. Variabel pengacau terkendali

  Variabel pengacau terkendali dalam penelitian ini adalah kemurnian pelarut yang digunakan. Untuk mengatasinya digunakan pelarut pro analysis yang memiliki tingkat kemurnian yang tinggi.

  19

C. Definisi Operasional 1.

  Baku pirantel pamoat yang divalidasi adalah baku pirantel pamoat yang diperoleh dari P.T Konimex

• – Solo (Certificate of Analysis terlampir di Lampiran 1).

  2. Absorbansi yang diukur merupakan absorbansi pirantel pamoat.

  ®

  3. mengandung pirantel pamoat yang setara dengan basa Suspensi merk X pirantel 125 mg/5 mL.

  4. Penetapan kadar dilakukan dengan menetapkan basa pirantel yang didapat dari hasil konversi pirantel pamoat menjadi basa pirantel.

  ® 5.

  dinyatakan dalam % release. Kadar basa pirantel dalam suspensi merk X D.

   Bahan

  Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini meliputi baku pirantel pamoat (P.T. Konimex) dengan kemurnian 102,3% secara HPLC, Dimethyl sulfoxide, metanol, heksan (p.a., E. Merck), aquades (Laboratorium Kimia

  ®

  Analisis Instrumen Fakultas Farmasi SADHAR), suspensi merk X kemasan 10 mL dengan nomor batch 229-18062, kertas saring, kapas.

E. Alat

  Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi Spektrofotometer UV-VIS merk Shimadzu UV-1800, kuvet UV merk Hellma, neraca analitik merk Ohaus kepekaan 0,1 mg (4 angka dibelakang koma satuan gram), hotplate merk LabTech, mikropipet skala 100-1000 µL merk Socorex, mikropipet skala 10-200 µL merk Gilson pipetman, vortex merk Genie, ultrasonikator merk Retsch

  20 UR-275, dan seperangkat alat gelas yang lazim digunakan di laboratorium analisis.

F. Tata Cara Penelitian 1. Pemilihan dan pengambilan sampel

  ®

  Sampel yang dipilih adalah sediaan suspensi pirantel pamoat merk X yang mencantumkan kandungan pirantel pamoat setara dengan basa pirantel 125 mg/5 mL pada kemasan dengan nomor batch yang sama. Sejumlah 10 buah sampel dicampur hingga homogen kemudian ditetapkan kadarnya dengan dilakukan 10 replikasi.

  2. Uji keseragaman kandungan

  Sejumlah 10 sediaan suspensi diambil dari batch yang sama. Masing- masing sediaan suspensi ditetapkan kadarnya satu per satu. Sediaan suspensi memenuhi syarat apabila jumlah zat aktif tiap 10 satuan menghasilkan kadar antara 85,0% hingga 115,0% dari yang tertera pada etiket dan simpangan baku relatif kurang dari atau sama dengan 6,0% (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan RI, 1995).