AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN LEMPUYANG WANGI (Zingiber aromaticum Val.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Wangi (Zingiber aromaticum Val.) Dan Fraksi-Fraksinya Dengan Metode Dpph Serta Penetapan Kadar
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN LEMPUYANG
WANGI (Zingiber aromaticum Val.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA
DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN
KADAR FENOLIK TOTALNYA
SKRIPSI
Oleh:
NISREEN CHELENG
K100100040
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN LEMPUYANG
WANGI (Zingiber aromaticum Val.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA
DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN
KADAR FENOLIK TOTALNYA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
NISREEN CHELENG
K100100040
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
i
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr. wb
Alhamdulillahirrabbil’alamiin, segala puji syukur bagi Allah SWT yang telah
melimpahkan rahmat dan hidayah sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian dan menyusun skripsi yang berjudul “Aktivitas Antioksidan Ekstrak
Etanol Daun Lempuyang Wangi (Zingiber aromaticum Val.) dan FraksiFraksinya Dengan Metode DPPH
serta Penetapan Kadar Fenolik Totalnya”
sebagai salah satu syarat untuk mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) di
Fakultas
Farmasi
Universitas
Muhammadiyah
Surakarta.
Penulis
ingin
mengucapkan terimakasih kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Zakky Cholisoh, Ph.D., Apt., selaku pembimbing akademik.
3. Bapak Dedi Hanwar, M.Si., Apt., selaku pembimbing skripsi.
4. Ibu Ika Trisharyanti DK, M.Farm., Apt dan Ibu Rima Munawaroh, M.Sc., Apt.,
selaku penguji skripsi.
5. Kedua orang tua dan seluruh keluarga besar tercinta, serta seluruh temanteman.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi penulis maupun
pembaca.
Wassalamu’alaikum wr. wb.
Surakarta, 17 Desember 2014
Penulis
iv
iv
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ....................................................................................... i
HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................... ii
HALAMAN DEKLARASI.............................................................................. iii
KATA PENGANTAR ..................................................................................... iv
DAFTAR ISI ................................................................................................... v
DAFTAR TABEL ............................................................................................ viii
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... .ix
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... x
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................. .xi
INTISARI ........................................................................................................ xii
BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1
A. Latar Belakang Masalah .................................................................... 1
B. Rumusan Masalah ............................................................................. 3
C. Tujuan Penelitian ............................................................................... 3
D. Tinjauan Pustaka ............................................................................... 3
1. Tanaman lempuyang wangi (Zingiber aromaticum Val.) .......... 3
a. Klasifikasi tanaman .............................................................. 3
b. Morfologi tanaman ................................................................ 4
c. Kandungan kimia................................................................... 4
d. Khasiat tanaman .................................................................... 5
2. Radikal bebas .............................................................................. 5
3. DPPH (1,1-Diphenyl-2-Picrylehydrazyl).................................... 6
4. Antioksidan ................................................................................. 6
5. Fenolik ........................................................................................ 7
6. Ekstraksi...................................................................................... 7
E. Landasan Teori ................................................................................... 8
F. Hipotesis ............................................................................................. 9
BAB II Metode Penelitian................................................................................ 10
A. Jenis Penelitian................................................................................... 10
v
B. Variabel penelitian ............................................................................. 10
C. Alat dan Bahan ................................................................................... 10
1. Alat yang Digunakan...................................................................... 10
2. Bahan yang Digunakan .................................................................. 10
D. Tempat Penelitian .............................................................................. 11
E. Jalannya Penelitian…………………………………………………..11
1. Pengeringan dan Penyerbukan ....................................................... 11
2. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Wangi .................... 11
3. Pembuatan Fraksi n-heksan, Etil asetat, dan Etanol ...................... 11
4. Pembuatan larutan stok uji ............................................................. 12
a. Pembuatan Larutan Stok DPPH 0.4 Mm ................................... 12
b. Pembuatan Larutan Stok Asam Galat 0,1% .............................. 12
c. Pembuatan Larutan Stok 0,1% Ekstrak Etanol dan
Fraksi-Fraksi Daun Lempuyang Wangi .................................... 12
5. Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Menggunakan Spektrofotometri ................................................... 12
6. Penetapan Kadar Fenolik Dalam Sampel ....................................... 13
a. Penentuan Operating Time (OT) ................................................ 13
b. Penetapan Panjan Gelombang Maksimal (λmak) ........................ 13
c. Penetapan Kurva Baku Asam Galat ........................................... 13
d. Penetapan Kadar Fenolik Dalam Sampel .................................. 13
F. Analisis Data ...................................................................................... 14
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 15
A. Pengeringan Daun Lempuyang wangi ............................................... 15
B. Ekstraksi ............................................................................................. 15
C. Fraksinasi ........................................................................................... 16
D. Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH ............................. 16
E. Penentuan Kadungan Senyawa Fenolik Total ................................... 19
F. Hubungan Aktivitas Antioksidan dengan kandungan Fenolik Total . 20
vi
BAB IV KESIMPULAN .................................................................................. 22
A. Kesimpulan ......................................................................................... 22
B. Saran ................................................................................................... 22
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 23
LAMPIRAN ...................................................................................................... 27
vii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.
Rendemen
Hasil
Fraksinasi
Ekstrak
Etanol
Daun
Lempuyang wangi ......................................................................... 16
Tabel 2.
Kadar Fenolik Total dari Ekstrak Etanol Daun Lempuyang
wangi dan Fraksi-fraksi ................................................................. 20
Tabel 3.
Hubungan kadar aktivitas antioksidan (IC50) dengan kadar
fenolik total (GAE) ....................................................................... 20
viii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Tanaman Zingiber aromaticum Val. .............................................. 4
Gambar 2. Aktivitas Antioksidan dengan Nilai IC50 dari ekstrak
dan fraksi-fraksi ............................................................................... 17
Gambar 3. Nilai IC50 Sampel dan Vitamin E. .................................................. 18
Gambar 4. Kurva baku asam galat .................................................................... 19
Gambar 5. Kurva hubungan antara kadar fenolik total versus IC50 ................. 21
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.
Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Wangi ............................. 27
Lampiran 2.
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH .............. 28
Lampiran 3.
Perhitungan kosentrasi dengan metode DPPH dan IC50 ..... 29
Lampiran 4.
Kurva Baku Asam Galat ....................................................... 32
Lampiran 5.
Kandungan fenolik total ekstrak, fraksi n-heksan,
fraksi etil asetat dan fraksi etanol. ........................................ 32
x
DAFTAR SINGKATAN
UV
: Ultraviolet
VIS
: Visibel
µL
: Mikroliter
mL
: Mililiter
g
: Gram
µg
: Mikrogram
mg
: Miligram
nm
: Nanometer
µM
: Mikromol
xi
INTISARI
Pada penelitian sebelumnya tentang rimpang lempuyang wangi (Zingiber
aromaticum. Val) diketahui tanaman tersebut memiliki aktivitas antioksidan,
tanaman ini merupakan salah satu tanaman obat yang sering digunakan oleh
masyarakat, antara lain digunakan sebagai obat asma, merangsang membran
mukosa lambung dan menambah nafsu makan. Kandungan senyawa kimia dalam
tanaman ini adalah flavonoid, saponin dan minyak atsiri. Pada bagian daun belum
diteliti aktivitas antioksidan, oleh karena itu dalam penelitian ini bertujuan untuk
menentukan aktivitas antioksidan fraksi-fraksi serta menetapkan kadar fenolik
total dalam daun lempuyang wangi.
Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi dan pelarut etanol. Untuk
fraksinasi metode sonikasi dengan pelarut etanol, n-heksan dan etil asetat.
Aktivitas antioksidan dari ekstrak dan fraksi ditetapkan dengan DPPH dan
kandungan total senyawa fenolik ditetapkan dengan metode Folin-ciocalteu.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai IC50 pada ekstrak etanol sebesar
276,75 ppm, fraksi n-heksan sebesar 255,24 ppm, fraksi etil asetat sebesar 224,89
ppm, fraksi etanol sebesar 420,39 ppm, dan vitamin E sebesar 6,488 ppm.
Kandungan fenolik total untuk ekstrak etanol 55,876 GAE, fraksi n-heksan
sebesar 20,552 GAE, fraksi etil asetat 94,309 GAE, dan fraksi etanol sebesar
35,559 GAE. Hubungan antara aktivitas antioksidan dan kadar fenolik totalnya
adalah 46,31% aktivitas antioksidan yang disumbang oleh senyawa fenolik.
Kata kunci : Lempuyang wangi (Zingiber aromaticum. Val), Antioksidan,
Fenolik, DPPH.
xii
WANGI (Zingiber aromaticum Val.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA
DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN
KADAR FENOLIK TOTALNYA
SKRIPSI
Oleh:
NISREEN CHELENG
K100100040
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN LEMPUYANG
WANGI (Zingiber aromaticum Val.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA
DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN
KADAR FENOLIK TOTALNYA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
NISREEN CHELENG
K100100040
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
i
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr. wb
Alhamdulillahirrabbil’alamiin, segala puji syukur bagi Allah SWT yang telah
melimpahkan rahmat dan hidayah sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian dan menyusun skripsi yang berjudul “Aktivitas Antioksidan Ekstrak
Etanol Daun Lempuyang Wangi (Zingiber aromaticum Val.) dan FraksiFraksinya Dengan Metode DPPH
serta Penetapan Kadar Fenolik Totalnya”
sebagai salah satu syarat untuk mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) di
Fakultas
Farmasi
Universitas
Muhammadiyah
Surakarta.
Penulis
ingin
mengucapkan terimakasih kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Zakky Cholisoh, Ph.D., Apt., selaku pembimbing akademik.
3. Bapak Dedi Hanwar, M.Si., Apt., selaku pembimbing skripsi.
4. Ibu Ika Trisharyanti DK, M.Farm., Apt dan Ibu Rima Munawaroh, M.Sc., Apt.,
selaku penguji skripsi.
5. Kedua orang tua dan seluruh keluarga besar tercinta, serta seluruh temanteman.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi penulis maupun
pembaca.
Wassalamu’alaikum wr. wb.
Surakarta, 17 Desember 2014
Penulis
iv
iv
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ....................................................................................... i
HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................... ii
HALAMAN DEKLARASI.............................................................................. iii
KATA PENGANTAR ..................................................................................... iv
DAFTAR ISI ................................................................................................... v
DAFTAR TABEL ............................................................................................ viii
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... .ix
DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... x
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................. .xi
INTISARI ........................................................................................................ xii
BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1
A. Latar Belakang Masalah .................................................................... 1
B. Rumusan Masalah ............................................................................. 3
C. Tujuan Penelitian ............................................................................... 3
D. Tinjauan Pustaka ............................................................................... 3
1. Tanaman lempuyang wangi (Zingiber aromaticum Val.) .......... 3
a. Klasifikasi tanaman .............................................................. 3
b. Morfologi tanaman ................................................................ 4
c. Kandungan kimia................................................................... 4
d. Khasiat tanaman .................................................................... 5
2. Radikal bebas .............................................................................. 5
3. DPPH (1,1-Diphenyl-2-Picrylehydrazyl).................................... 6
4. Antioksidan ................................................................................. 6
5. Fenolik ........................................................................................ 7
6. Ekstraksi...................................................................................... 7
E. Landasan Teori ................................................................................... 8
F. Hipotesis ............................................................................................. 9
BAB II Metode Penelitian................................................................................ 10
A. Jenis Penelitian................................................................................... 10
v
B. Variabel penelitian ............................................................................. 10
C. Alat dan Bahan ................................................................................... 10
1. Alat yang Digunakan...................................................................... 10
2. Bahan yang Digunakan .................................................................. 10
D. Tempat Penelitian .............................................................................. 11
E. Jalannya Penelitian…………………………………………………..11
1. Pengeringan dan Penyerbukan ....................................................... 11
2. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Wangi .................... 11
3. Pembuatan Fraksi n-heksan, Etil asetat, dan Etanol ...................... 11
4. Pembuatan larutan stok uji ............................................................. 12
a. Pembuatan Larutan Stok DPPH 0.4 Mm ................................... 12
b. Pembuatan Larutan Stok Asam Galat 0,1% .............................. 12
c. Pembuatan Larutan Stok 0,1% Ekstrak Etanol dan
Fraksi-Fraksi Daun Lempuyang Wangi .................................... 12
5. Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Menggunakan Spektrofotometri ................................................... 12
6. Penetapan Kadar Fenolik Dalam Sampel ....................................... 13
a. Penentuan Operating Time (OT) ................................................ 13
b. Penetapan Panjan Gelombang Maksimal (λmak) ........................ 13
c. Penetapan Kurva Baku Asam Galat ........................................... 13
d. Penetapan Kadar Fenolik Dalam Sampel .................................. 13
F. Analisis Data ...................................................................................... 14
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 15
A. Pengeringan Daun Lempuyang wangi ............................................... 15
B. Ekstraksi ............................................................................................. 15
C. Fraksinasi ........................................................................................... 16
D. Uji Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH ............................. 16
E. Penentuan Kadungan Senyawa Fenolik Total ................................... 19
F. Hubungan Aktivitas Antioksidan dengan kandungan Fenolik Total . 20
vi
BAB IV KESIMPULAN .................................................................................. 22
A. Kesimpulan ......................................................................................... 22
B. Saran ................................................................................................... 22
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................... 23
LAMPIRAN ...................................................................................................... 27
vii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.
Rendemen
Hasil
Fraksinasi
Ekstrak
Etanol
Daun
Lempuyang wangi ......................................................................... 16
Tabel 2.
Kadar Fenolik Total dari Ekstrak Etanol Daun Lempuyang
wangi dan Fraksi-fraksi ................................................................. 20
Tabel 3.
Hubungan kadar aktivitas antioksidan (IC50) dengan kadar
fenolik total (GAE) ....................................................................... 20
viii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Tanaman Zingiber aromaticum Val. .............................................. 4
Gambar 2. Aktivitas Antioksidan dengan Nilai IC50 dari ekstrak
dan fraksi-fraksi ............................................................................... 17
Gambar 3. Nilai IC50 Sampel dan Vitamin E. .................................................. 18
Gambar 4. Kurva baku asam galat .................................................................... 19
Gambar 5. Kurva hubungan antara kadar fenolik total versus IC50 ................. 21
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.
Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Wangi ............................. 27
Lampiran 2.
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH .............. 28
Lampiran 3.
Perhitungan kosentrasi dengan metode DPPH dan IC50 ..... 29
Lampiran 4.
Kurva Baku Asam Galat ....................................................... 32
Lampiran 5.
Kandungan fenolik total ekstrak, fraksi n-heksan,
fraksi etil asetat dan fraksi etanol. ........................................ 32
x
DAFTAR SINGKATAN
UV
: Ultraviolet
VIS
: Visibel
µL
: Mikroliter
mL
: Mililiter
g
: Gram
µg
: Mikrogram
mg
: Miligram
nm
: Nanometer
µM
: Mikromol
xi
INTISARI
Pada penelitian sebelumnya tentang rimpang lempuyang wangi (Zingiber
aromaticum. Val) diketahui tanaman tersebut memiliki aktivitas antioksidan,
tanaman ini merupakan salah satu tanaman obat yang sering digunakan oleh
masyarakat, antara lain digunakan sebagai obat asma, merangsang membran
mukosa lambung dan menambah nafsu makan. Kandungan senyawa kimia dalam
tanaman ini adalah flavonoid, saponin dan minyak atsiri. Pada bagian daun belum
diteliti aktivitas antioksidan, oleh karena itu dalam penelitian ini bertujuan untuk
menentukan aktivitas antioksidan fraksi-fraksi serta menetapkan kadar fenolik
total dalam daun lempuyang wangi.
Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi dan pelarut etanol. Untuk
fraksinasi metode sonikasi dengan pelarut etanol, n-heksan dan etil asetat.
Aktivitas antioksidan dari ekstrak dan fraksi ditetapkan dengan DPPH dan
kandungan total senyawa fenolik ditetapkan dengan metode Folin-ciocalteu.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa nilai IC50 pada ekstrak etanol sebesar
276,75 ppm, fraksi n-heksan sebesar 255,24 ppm, fraksi etil asetat sebesar 224,89
ppm, fraksi etanol sebesar 420,39 ppm, dan vitamin E sebesar 6,488 ppm.
Kandungan fenolik total untuk ekstrak etanol 55,876 GAE, fraksi n-heksan
sebesar 20,552 GAE, fraksi etil asetat 94,309 GAE, dan fraksi etanol sebesar
35,559 GAE. Hubungan antara aktivitas antioksidan dan kadar fenolik totalnya
adalah 46,31% aktivitas antioksidan yang disumbang oleh senyawa fenolik.
Kata kunci : Lempuyang wangi (Zingiber aromaticum. Val), Antioksidan,
Fenolik, DPPH.
xii