AKTIVITAS PENANGKAPAN RADIKAL EKSTRAK ETANOL DAUN LEMPUYANG EMPRIT (Zingiber amaricans Bl.) DAN Aktivitas Penangkapan Radikal Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Emprit (Zingiber Amaricans Bl.) Dan Fraksi-Fraksinya Dengan Metode DPPH Serta Penetapan Kadar Feno
AKTIVITAS PENANGKAPAN RADIKAL EKSTRAK ETANOL
DAUN LEMPUYANG EMPRIT (Zingiber amaricans Bl.) DAN
FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA
PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTALNYA
SKRIPSI
Oleh:
MISS AFNAN MADENG
K100100130
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
AKTIVITAS PENANGKAPAN RADIKAL EKSTRAK ETANOL
DAUN LEMPUYANG EMPRIT (Zingiber amaricans Bl.) DAN
FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA
PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTALNYA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
MISS AFNAN MADENG
K100100130
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
i
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr. wb
Alhamdulillahirrabbil’alamiin, segala puji syukur bagi Allah SWT yang
telah melimpahkan rahmat dan hidayah sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian dan menyusun skripsi yang berjudul “Aktivitas Penangkap Radikal
Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Emprit (Zingiber amaricans Bl.) dan FraksiFraksinya Dengan Metode DPPH serta Penetapan Kadar Fenolik Totalnya ”
sebagai salah satu syarat untuk mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) di
Fakultas
Farmasi
Universitas
Muhammadiyah
Surakarta.
Penulis
ingin
mengucapkan terimakasih kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta dan penguji skripsi.
2. Ibu Arifah Sri Wahyuni, M.Sc., Apt., selaku pembimbing akademik.
3. Bapak Dedi Hanwar, M.Si., Apt., selaku pembimbing skripsi.
4. Bapak Broto Santoso, M.Sc., Apt., selaku penguji skripsi.
5. Seluruh Staf dan Laboran.
6. Kedua orang tua, saudara dan seluruh keluarga besar tercinta, serta seluruh
teman-teman.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi penulis maupun
pembaca.
Wassalamu’alaikum wr. wb.
Surakarta, 18 Desember 2014
Penulis
iv
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ....................................................................................... i
HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................... ii
HALAMAN DEKLARASI ............................................................................. iii
KATA PENGANTAR .................................................................................... iv
DAFTAR ISI ................................................................................................... v
DAFTAR TABEL ........................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... ix
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... x
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................ xi
INTISARI ........................................................................................................ xii
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah .................................................................. 1
B. Rumusan Masalah ........................................................................... 3
C. Tujuan Penelitian ............................................................................. 3
D. Tinjuan Pustaka ............................................................................... 3
1. Tanaman Lempuyang Emprit (Zingiber amaricans Bl.)......... 3
a. Sistematika Tanaman Lempuyang Emprit ....................... 3
b. Nama umum/dagang.......................................................... 4
c. Morfologi Tumbuhan ........................................................ 4
d. Khasiat ............................................................................... 4
e. Kandungan Kimia.............................................................. 4
2. Antioksidan ............................................................................. 6
3. Aktivitas Penangkapan Radikal .............................................. 7
4. DPPH (1,1-Diphenyl-2-Picrylehydrazyl) ................................ 8
5. Senyawa fenolik ...................................................................... 8
E. Landasan Teori ................................................................................ 9
F. Hipotesis .......................................................................................... 10
BAB II METODE PENELITIAN .................................................................... 11
A. Kategori Penelitian ......................................................................... 11
v
B. Variabel penelitian ......................................................................... 11
C. Alat dan Bahan ............................................................................... 11
1. Alat yang Digunakan ............................................................... 11
2. Bahan yang Digunakan ............................................................ 11
D. Tempat Penelitian........................................................................... 12
E. Jalan Penelitian............................................................................... 12
1. Penyiapan Bahan...................................................................... 12
2. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Emprit ............. 12
3. Fraksinasi ................................................................................. 12
4. Pembuatan Reagen ................................................................... 12
a. Pembuatan Larutan Stok 0,2% ............................................ 12
b. DPPH ................................................................................... 13
c. Asam Galat .......................................................................... 13
d. Vitamin E ............................................................................. 13
5. Penetuanan Aktivitas Penangkapan Radikal ............................. 13
Metode DPPH ........................................................................... 13
6. Penentuan Senyawa Fenolik ..................................................... 13
a. Kurva Baku Asam galat ...................................................... 13
b. Penetapan Kadar Fenolik Total .......................................... 14
F. Analisis Data .................................................................................. 14
1. Aktivitas Penangkapan Radikal ................................................ 14
2. Kadar Fenolik Total ................................................................. 14
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 15
A. Pengeringan Daun Lempuyang Emprit ......................................... 15
B. Ekstraksi ........................................................................................ 15
C. Fraksinasi ...................................................................................... 16
D. Penetapan Kadar Fenolik Total ..................................................... 17
E. Penentuan Aktivitas Penangkapan Radikal Dengan Metode
DPPH ………………………………………………………………18
F. Hubungan Antara Aktivitas Penangkapan Radikal dengan
Kadar fenolik Total ....................................................................... 20
vi
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 22
A. Kesimpulan ................................................................................... 22
B. Saran .............................................................................................. 22
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 23
LAMPIRAN
................................................................................................. 27
vii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Kadar fenolik total (GAE) tiap 10 mg sampel .................................. 18
Tabel 2. Nilai IC50 dari Ekstrak etanol, fraksi etil asetat, fraksi n-heksan,
fraksi etanol, dan vitamin E (pembanding) ...................................... 19
Tabel 3. Hubungan antara aktivitas penangkapan radikal (IC50) dengan
kadar fenolik total (GAE) ................................................................. 20
viii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar1. Kandungan kimia lempuyang emprit: (A) 2,6,9- humulatrien8-one (zerumbon), (B) stigmasterol, (C) beta-sitosterol, (D)
kampesterol, (E) kolesterol (Riyanto, 2007) .................................. 5
Gambar 2. Komponen utama dalam rimpang lempuyang emprit: (A)
alpha humulene, (B) humulene oxide, (C) linalool, (D) betaeudesmol, (E) beta-selinen, (F) 12-oxabicyclo (Wahyuni &
Bermawie, 2010) ............................................................................ 5
Gambar 3. Kandungan kimia lempuyang emprit: (A) monoterpen, (B)
sesquiterpen, (C) benzil heptanoat (Sukari et al., 2008) ............... 6
Gambar 4. Reaksi antara DPPH dengan atom H yang berasal dari
antioksidan (Prakash et al., 2001) .................................................. 7
Gambar 5. Reaksi antara senyawa fenol dengan reagen Folin-Ciocalteu
(Purba et al., 2014) ......................................................................... 9
Gambar 6. Kurva baku asam galat .................................................................... 17
Gambar 7. Kurva hubungan IC50 dan kadra fenolik total ................................. 20
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.
Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Emprit ................................. 27
Lampiran 2.
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH ................. 28
Lampiran 3.
Perhitungan kosentrasi dengan metode DPPh dan IC50 ........... 29
Lampiran 4.
Kurva Baku Asam Galat............................................................ 31
Lampiran 5.
kandungan fenolik total ekstrak, fraksi n-heksan, fraksi etil
asetat dan fraksi etanol. ............................................................. 32
x
DAFTAR SINGKATAN
DPPH
: Difenil Pikrilhidrazil
g
: Gram
GAE
: Gallic acid equivalent
IC50
: Inhibition Concentration 50
mg
: Miligram
mL
: Mililiter
nm
: Nanometer
UV
: Ultraviolet
VIS
: Visibel
µg
: Mikrogram
µL
: Mikroliter
µM
: Mikromol
xi
INTISARI
Zerumbon merupakan salah satu kandungan kimia yang ada didalam
tanaman alam, senyawa ini berfungsi sebagai agen kemopreventif melawan
kanker usus besar dan kanker kulit, sebagai anti proliferasi dan menginduksi
apoptosis. Zerumbon merupakan konstituen utama yang terdapat dalam
lempuyang emprit. Penelitian ini bertujuan menentukan aktivitas penangkapan
radikal serta penetapan kadar fenolik total pada ekstrak etanol daun lempuyang
emprit dan fraksi-fraksinya.
Ekstrak diperoleh dari metode maserasi dengan pelarut etanol. Ekstrak
difraksinasi dengan metode sonikasi menggunakan 3 pelarut yaitu: n-heksan, etil
asetat dan etanol. Ekstrak dan hasil fraksinasi dilakukan uji aktivitas penangkapan
radikal dengan metode DPPH (1,1–diphenyl–2-pikrilhidrazil) serta penetapan
kadar fenolik total menggunakan metode Folin–Ciocalteu.
Hasil penelitian menunjukkan kadar fenolik total (GAE) yang diperoleh
berturut-turut adalah 38,51 mg/g, 17,83 mg/g, 38,51 mg/g, dan 20,78 mg/g.
Aktivitas penangkapan radikal dengan nilai IC50 pada ekstrak sebesar
398,85 µg/mL ,fraksi n-heksan 485,23 µg/mL, fraksi etil asetat 412,45 µg/mL
dan fraksi etanol 494,65 µg/mL. Zerumbon merupakan kandungan kimia yang
terbesar dalam lempuyang emprit dan bukan golongan fenolik, sehingga
kandungan fenolik total yang didapat kecil, dan ini ditunjukkan aktivitas
penangkapan radikal semua fraksi sama.
Kata kunci : Lempuyang emprit (Zingiber americans Bl), penangkapan radikal,
fenolik, DPPH.
xii
DAUN LEMPUYANG EMPRIT (Zingiber amaricans Bl.) DAN
FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA
PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTALNYA
SKRIPSI
Oleh:
MISS AFNAN MADENG
K100100130
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
AKTIVITAS PENANGKAPAN RADIKAL EKSTRAK ETANOL
DAUN LEMPUYANG EMPRIT (Zingiber amaricans Bl.) DAN
FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA
PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTALNYA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
MISS AFNAN MADENG
K100100130
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
i
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr. wb
Alhamdulillahirrabbil’alamiin, segala puji syukur bagi Allah SWT yang
telah melimpahkan rahmat dan hidayah sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian dan menyusun skripsi yang berjudul “Aktivitas Penangkap Radikal
Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Emprit (Zingiber amaricans Bl.) dan FraksiFraksinya Dengan Metode DPPH serta Penetapan Kadar Fenolik Totalnya ”
sebagai salah satu syarat untuk mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) di
Fakultas
Farmasi
Universitas
Muhammadiyah
Surakarta.
Penulis
ingin
mengucapkan terimakasih kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta dan penguji skripsi.
2. Ibu Arifah Sri Wahyuni, M.Sc., Apt., selaku pembimbing akademik.
3. Bapak Dedi Hanwar, M.Si., Apt., selaku pembimbing skripsi.
4. Bapak Broto Santoso, M.Sc., Apt., selaku penguji skripsi.
5. Seluruh Staf dan Laboran.
6. Kedua orang tua, saudara dan seluruh keluarga besar tercinta, serta seluruh
teman-teman.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi penulis maupun
pembaca.
Wassalamu’alaikum wr. wb.
Surakarta, 18 Desember 2014
Penulis
iv
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL ....................................................................................... i
HALAMAN PENGESAHAN ......................................................................... ii
HALAMAN DEKLARASI ............................................................................. iii
KATA PENGANTAR .................................................................................... iv
DAFTAR ISI ................................................................................................... v
DAFTAR TABEL ........................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... ix
DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... x
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................ xi
INTISARI ........................................................................................................ xii
BAB I PENDAHULUAN ............................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah .................................................................. 1
B. Rumusan Masalah ........................................................................... 3
C. Tujuan Penelitian ............................................................................. 3
D. Tinjuan Pustaka ............................................................................... 3
1. Tanaman Lempuyang Emprit (Zingiber amaricans Bl.)......... 3
a. Sistematika Tanaman Lempuyang Emprit ....................... 3
b. Nama umum/dagang.......................................................... 4
c. Morfologi Tumbuhan ........................................................ 4
d. Khasiat ............................................................................... 4
e. Kandungan Kimia.............................................................. 4
2. Antioksidan ............................................................................. 6
3. Aktivitas Penangkapan Radikal .............................................. 7
4. DPPH (1,1-Diphenyl-2-Picrylehydrazyl) ................................ 8
5. Senyawa fenolik ...................................................................... 8
E. Landasan Teori ................................................................................ 9
F. Hipotesis .......................................................................................... 10
BAB II METODE PENELITIAN .................................................................... 11
A. Kategori Penelitian ......................................................................... 11
v
B. Variabel penelitian ......................................................................... 11
C. Alat dan Bahan ............................................................................... 11
1. Alat yang Digunakan ............................................................... 11
2. Bahan yang Digunakan ............................................................ 11
D. Tempat Penelitian........................................................................... 12
E. Jalan Penelitian............................................................................... 12
1. Penyiapan Bahan...................................................................... 12
2. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Emprit ............. 12
3. Fraksinasi ................................................................................. 12
4. Pembuatan Reagen ................................................................... 12
a. Pembuatan Larutan Stok 0,2% ............................................ 12
b. DPPH ................................................................................... 13
c. Asam Galat .......................................................................... 13
d. Vitamin E ............................................................................. 13
5. Penetuanan Aktivitas Penangkapan Radikal ............................. 13
Metode DPPH ........................................................................... 13
6. Penentuan Senyawa Fenolik ..................................................... 13
a. Kurva Baku Asam galat ...................................................... 13
b. Penetapan Kadar Fenolik Total .......................................... 14
F. Analisis Data .................................................................................. 14
1. Aktivitas Penangkapan Radikal ................................................ 14
2. Kadar Fenolik Total ................................................................. 14
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ........................................................ 15
A. Pengeringan Daun Lempuyang Emprit ......................................... 15
B. Ekstraksi ........................................................................................ 15
C. Fraksinasi ...................................................................................... 16
D. Penetapan Kadar Fenolik Total ..................................................... 17
E. Penentuan Aktivitas Penangkapan Radikal Dengan Metode
DPPH ………………………………………………………………18
F. Hubungan Antara Aktivitas Penangkapan Radikal dengan
Kadar fenolik Total ....................................................................... 20
vi
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 22
A. Kesimpulan ................................................................................... 22
B. Saran .............................................................................................. 22
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 23
LAMPIRAN
................................................................................................. 27
vii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Kadar fenolik total (GAE) tiap 10 mg sampel .................................. 18
Tabel 2. Nilai IC50 dari Ekstrak etanol, fraksi etil asetat, fraksi n-heksan,
fraksi etanol, dan vitamin E (pembanding) ...................................... 19
Tabel 3. Hubungan antara aktivitas penangkapan radikal (IC50) dengan
kadar fenolik total (GAE) ................................................................. 20
viii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar1. Kandungan kimia lempuyang emprit: (A) 2,6,9- humulatrien8-one (zerumbon), (B) stigmasterol, (C) beta-sitosterol, (D)
kampesterol, (E) kolesterol (Riyanto, 2007) .................................. 5
Gambar 2. Komponen utama dalam rimpang lempuyang emprit: (A)
alpha humulene, (B) humulene oxide, (C) linalool, (D) betaeudesmol, (E) beta-selinen, (F) 12-oxabicyclo (Wahyuni &
Bermawie, 2010) ............................................................................ 5
Gambar 3. Kandungan kimia lempuyang emprit: (A) monoterpen, (B)
sesquiterpen, (C) benzil heptanoat (Sukari et al., 2008) ............... 6
Gambar 4. Reaksi antara DPPH dengan atom H yang berasal dari
antioksidan (Prakash et al., 2001) .................................................. 7
Gambar 5. Reaksi antara senyawa fenol dengan reagen Folin-Ciocalteu
(Purba et al., 2014) ......................................................................... 9
Gambar 6. Kurva baku asam galat .................................................................... 17
Gambar 7. Kurva hubungan IC50 dan kadra fenolik total ................................. 20
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.
Ekstrak Etanol Daun Lempuyang Emprit ................................. 27
Lampiran 2.
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH ................. 28
Lampiran 3.
Perhitungan kosentrasi dengan metode DPPh dan IC50 ........... 29
Lampiran 4.
Kurva Baku Asam Galat............................................................ 31
Lampiran 5.
kandungan fenolik total ekstrak, fraksi n-heksan, fraksi etil
asetat dan fraksi etanol. ............................................................. 32
x
DAFTAR SINGKATAN
DPPH
: Difenil Pikrilhidrazil
g
: Gram
GAE
: Gallic acid equivalent
IC50
: Inhibition Concentration 50
mg
: Miligram
mL
: Mililiter
nm
: Nanometer
UV
: Ultraviolet
VIS
: Visibel
µg
: Mikrogram
µL
: Mikroliter
µM
: Mikromol
xi
INTISARI
Zerumbon merupakan salah satu kandungan kimia yang ada didalam
tanaman alam, senyawa ini berfungsi sebagai agen kemopreventif melawan
kanker usus besar dan kanker kulit, sebagai anti proliferasi dan menginduksi
apoptosis. Zerumbon merupakan konstituen utama yang terdapat dalam
lempuyang emprit. Penelitian ini bertujuan menentukan aktivitas penangkapan
radikal serta penetapan kadar fenolik total pada ekstrak etanol daun lempuyang
emprit dan fraksi-fraksinya.
Ekstrak diperoleh dari metode maserasi dengan pelarut etanol. Ekstrak
difraksinasi dengan metode sonikasi menggunakan 3 pelarut yaitu: n-heksan, etil
asetat dan etanol. Ekstrak dan hasil fraksinasi dilakukan uji aktivitas penangkapan
radikal dengan metode DPPH (1,1–diphenyl–2-pikrilhidrazil) serta penetapan
kadar fenolik total menggunakan metode Folin–Ciocalteu.
Hasil penelitian menunjukkan kadar fenolik total (GAE) yang diperoleh
berturut-turut adalah 38,51 mg/g, 17,83 mg/g, 38,51 mg/g, dan 20,78 mg/g.
Aktivitas penangkapan radikal dengan nilai IC50 pada ekstrak sebesar
398,85 µg/mL ,fraksi n-heksan 485,23 µg/mL, fraksi etil asetat 412,45 µg/mL
dan fraksi etanol 494,65 µg/mL. Zerumbon merupakan kandungan kimia yang
terbesar dalam lempuyang emprit dan bukan golongan fenolik, sehingga
kandungan fenolik total yang didapat kecil, dan ini ditunjukkan aktivitas
penangkapan radikal semua fraksi sama.
Kata kunci : Lempuyang emprit (Zingiber americans Bl), penangkapan radikal,
fenolik, DPPH.
xii