AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN PAPASAN (Coccinia grandis L.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Papasan(Coccinia Grandis L.) Dan Fraksi-Fraksinya Dengan Metode Dpph Serta Penetapan Kadar Fenolik Totaln
23
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN PAPASAN
(Coccinia grandis L.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE
DPPH SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTALNYA
SKRIPSI
Oleh:
NAIMAH LATEH
K100100041
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
24
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN PAPASAN
(Coccinia grandis L.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE
DPPH SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTALNYA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
NAIMAH LATEH
K100100041
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
i
25
26
27
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr. wb
Alhamdulillahirrabbil’alamiin, segala puji syukur bagi Allah SWT yang
telah melimpahkan rahmat dan hidayah sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian dan menyusun skripsi yang berjudul “Aktivitas Antioksidan Ekstrak
Etanol Daun Papasan (Coccinia grandis L.) dan Fraksi-fraksinya Dengan Metode
DPPH Serta Penetapan Kadar Fenolik Totalnya ” sebagai salah satu syarat untuk
mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) di Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta. Penulis ingin mengucapkan terimakasih kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Bapak Dedi Hanwar, M.Si., Apt., selaku pembimbing skripsi.
3. Ibu Zakky Cholisoh, Ph.D., Apt., selaku pembimbing akademik.
4. Bapak Andi Suhendi, M.Sc., Apt dan Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St selaku
penguji skripsi.
5. Kedua orang tua dan seluruh keluarga besar tercinta, serta seluruh temanteman.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi penulis maupun
pembaca.
Wassalamu’alaikum wr. wb.
Surakarta, 13 Desember 2014
Penulis
iv
28
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .......................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN..........................................................................
ii
HALAMAN DEKLARASI .............................................................................
iii
KATA PENGANTAR ....................................................................................
iv
DAFTAR ISI ...................................................................................................
vi
DAFTAR TABEL ........................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................
ix
DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................
x
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................
xi
INTISARI ........................................................................................................ xii
BAB I PENDAHULUAN ................................................................................
1
A. Latar Belakang Masalah ................................................................
1
B. Perumusan Masalah .......................................................................
2
C. Tujuan Masalah .............................................................................
2
D. Tinjauan Pustaka ............................................................................
3
1. Tanaman Papasan (Coccinia grandis L.) .................................
3
a. Klasifikasi ..........................................................................
3
b. Morfologi Tanaman ............................................................
3
c. Kandungan Kimia ..............................................................
4
d. Manfaat Tanaman ...............................................................
4
2. Radikal bebas............................................................................
4
3. Antioksidan ..............................................................................
4
4. DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil) ..........................................
5
5. Ekstraksi ..................................................................................
5
6. Fraksinasi .................................................................................
6
E. Landasan teori ................................................................................
6
F. Hipotesis .........................................................................................
7
BAB II METODE PENELITIAN ...................................................................
8
A. Jenis Penelitian...............................................................................
8
v
29
B. Variabel penelitian ........................................................................
8
C. Alat dan Bahan ..............................................................................
8
1. Alat yang digunakan ................................................................
8
2. Bahan yang digunakan ............................................................
8
D. Jalannya Penelitian ........................................................................
9
1. Determinasi Tanaman .............................................................
9
2. Pengumpulan Bahan ...............................................................
9
3. Pengeringan dan Penyerbukan ................................................
9
4. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Papasan ..............................
9
5. Pembuatan Fraksi n-Heksan, Etil Asetat, dan Etanol ..............
9
6. Pembuatan Larutan Stok Uji ................................................... 10
a. Pembuatan Larutan Stok 0,2% Ekstrak Etanol dan
Fraksi-fraksi Daun Papasan ............................................... 10
b. DPPH ................................................................................ 10
c. Asam galat.......................................................................... 10
d. Vitamin E .......................................................................... 10
7. Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Menggunakan Spektrofotometri ............................................. 10
8. Penetapan Kadar Fenolik Dalam Sampel ............................... 10
a. Penentuan Operating Time (OT) ...................................... 10
b. Penetapan Panjang Gelombang Maksimal (λmak) .............. 11
c. Penetapan Kurva Baku Asam Galat .................................. 11
d. Penetapan Kadar fenolik Dalam Sampel ........................... 11
E. Analisis Data ................................................................................. 11
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 13
A. Ekstrak Daun Papasan .................................................................. 13
B. Uji Aktivitas Penanagkap Radikal dengan Metode DPPH ........... 13
C. Penentuan Kandungan Senyawa Fenolik Total ............................. 15
D. Hubungan
Kandungan
Fenolik
Total
dengan
Aktivitas
Antioksidan ................................................................................... 17
vi
30
BAB IV KESIMPULAN ................................................................................ 19
A. Kesimpulan .................................................................................. 19
B. Saran ............................................................................................. 19
DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 20
LAMPIRAN .................................................................................................... 23
vii
31
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil pengujian aktivitas antiradikal ............................................... 16
Tabel 2. Hubungan antara aktivitas antioksidan (IC50) dengan kadar
fenolik total (GAE) .......................................................................... 18
viii
32
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Daun Coccinia grandis L. ........................................................... 3
Gambar 2.
Donasi Proton dari antioksidan ke radikal DPPH ...................... 5
Gambar 3. Ekstrak daun papasan.................................................................. 13
Gambar 4.
Grafik aktivitas penangkap radikal (%), ekstrak papasan
(EKS), fraksi n-heksan (FNH), fraksi etil asetat (FEA),
fraksi etanol (FET) dan vitamin E. Konsentrasi sampel
sebanding dengan aktivitas antiradikalnya ................................. 14
Gambar 5.
Kurva Baku Asam Galat ............................................................. 16
Gambar 6.
Aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 (ppm) dan kadar
fenolik ekstrak (EKS), fraksi n-heksan (FNH), fraksi etil
asetat (FEA), dan fraksi etanol (FET). ....................................... 17
ix
33
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Hasil Perhitungan Kadar Fenolik ................................................. 23
Lampiran 2. Penentuan Panjang Gelombang Maks .......................................... 27
Lampiran 3. Alat Penelitian .............................................................................. 28
Lampiran 4. Surat Keterangan Penelitian ......................................................... 29
x
34
DAFTAR SINGKATAN
DPPH : 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil
GAE : Gallic and Equivalent
g
: Gram
mg
: Miligram
mL
: Mililiter
nm
: Nanometer
OT
: Operating Time
UV
: Ultraviolet
VIS
: Visibel
µg
: Mikrogram
µL
: Mikroliter
µM
: Mikromol
xi
35
INTISARI
Buah dan akar papasan (Coccinia grandis L.) secara empirik digunakan
untuk pengobatan seperti penyembuhan luka, ulkus, sakit kuning, diabetes dan
antipiretik. Papasan memiliki kandungan kimia antara lain flavonoid, saponin,
fenolik. Bagian daun papasan belum diteliti aktivitas antioksidannya, oleh karena
itu penelitian ini bertujuan untuk menentukan aktivitas antioksidan fraksi-fraksi
dan ekstrak etanol daun papasan serta menetapkan kadar fenolik total. Metode
ekstraksi yang digunakan adalah meserasi dengan menggunakan etanol 96% dan
fraksinasi menggunakan pelarut heksan, etil asetat, dan etanol. Aktivitas
antioksidan ditetapkan dengan DPPH. Kandungan total fenolik ditetapkan dengan
metode Folin-Ciocalteu. Hasil penelitian menunjukkan potensi antioksidan
ekstrak, fraksi n-heksan, etil asetat dan etanol dengan nilai IC50 berturut-turut
sebesar 300,18; 325,34; 342,91 dan 559,91 ppm. Kandungan fenolik berturut-turut
adalah 28,50; 21,52; 63,59 dan 28,66 GAE. Ekstrak etanol daun papasan dan
fraksi-fraksinya tidak memiliki hubugan kadar felolik terhadap aktivitas
antioksidan.
Kata kunci : daun papasan (Coccinia grandis L.), fenolik, antioksidan, DPPH
xii
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN PAPASAN
(Coccinia grandis L.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE
DPPH SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTALNYA
SKRIPSI
Oleh:
NAIMAH LATEH
K100100041
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
24
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN PAPASAN
(Coccinia grandis L.) DAN FRAKSI-FRAKSINYA DENGAN METODE
DPPH SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK TOTALNYA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
NAIMAH LATEH
K100100041
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
i
25
26
27
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum wr. wb
Alhamdulillahirrabbil’alamiin, segala puji syukur bagi Allah SWT yang
telah melimpahkan rahmat dan hidayah sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitian dan menyusun skripsi yang berjudul “Aktivitas Antioksidan Ekstrak
Etanol Daun Papasan (Coccinia grandis L.) dan Fraksi-fraksinya Dengan Metode
DPPH Serta Penetapan Kadar Fenolik Totalnya ” sebagai salah satu syarat untuk
mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) di Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta. Penulis ingin mengucapkan terimakasih kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Bapak Dedi Hanwar, M.Si., Apt., selaku pembimbing skripsi.
3. Ibu Zakky Cholisoh, Ph.D., Apt., selaku pembimbing akademik.
4. Bapak Andi Suhendi, M.Sc., Apt dan Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St selaku
penguji skripsi.
5. Kedua orang tua dan seluruh keluarga besar tercinta, serta seluruh temanteman.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi penulis maupun
pembaca.
Wassalamu’alaikum wr. wb.
Surakarta, 13 Desember 2014
Penulis
iv
28
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .......................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN..........................................................................
ii
HALAMAN DEKLARASI .............................................................................
iii
KATA PENGANTAR ....................................................................................
iv
DAFTAR ISI ...................................................................................................
vi
DAFTAR TABEL ........................................................................................... viii
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................
ix
DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................
x
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................
xi
INTISARI ........................................................................................................ xii
BAB I PENDAHULUAN ................................................................................
1
A. Latar Belakang Masalah ................................................................
1
B. Perumusan Masalah .......................................................................
2
C. Tujuan Masalah .............................................................................
2
D. Tinjauan Pustaka ............................................................................
3
1. Tanaman Papasan (Coccinia grandis L.) .................................
3
a. Klasifikasi ..........................................................................
3
b. Morfologi Tanaman ............................................................
3
c. Kandungan Kimia ..............................................................
4
d. Manfaat Tanaman ...............................................................
4
2. Radikal bebas............................................................................
4
3. Antioksidan ..............................................................................
4
4. DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil) ..........................................
5
5. Ekstraksi ..................................................................................
5
6. Fraksinasi .................................................................................
6
E. Landasan teori ................................................................................
6
F. Hipotesis .........................................................................................
7
BAB II METODE PENELITIAN ...................................................................
8
A. Jenis Penelitian...............................................................................
8
v
29
B. Variabel penelitian ........................................................................
8
C. Alat dan Bahan ..............................................................................
8
1. Alat yang digunakan ................................................................
8
2. Bahan yang digunakan ............................................................
8
D. Jalannya Penelitian ........................................................................
9
1. Determinasi Tanaman .............................................................
9
2. Pengumpulan Bahan ...............................................................
9
3. Pengeringan dan Penyerbukan ................................................
9
4. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Papasan ..............................
9
5. Pembuatan Fraksi n-Heksan, Etil Asetat, dan Etanol ..............
9
6. Pembuatan Larutan Stok Uji ................................................... 10
a. Pembuatan Larutan Stok 0,2% Ekstrak Etanol dan
Fraksi-fraksi Daun Papasan ............................................... 10
b. DPPH ................................................................................ 10
c. Asam galat.......................................................................... 10
d. Vitamin E .......................................................................... 10
7. Penentuan Aktivitas Antioksidan dengan Metode DPPH
Menggunakan Spektrofotometri ............................................. 10
8. Penetapan Kadar Fenolik Dalam Sampel ............................... 10
a. Penentuan Operating Time (OT) ...................................... 10
b. Penetapan Panjang Gelombang Maksimal (λmak) .............. 11
c. Penetapan Kurva Baku Asam Galat .................................. 11
d. Penetapan Kadar fenolik Dalam Sampel ........................... 11
E. Analisis Data ................................................................................. 11
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 13
A. Ekstrak Daun Papasan .................................................................. 13
B. Uji Aktivitas Penanagkap Radikal dengan Metode DPPH ........... 13
C. Penentuan Kandungan Senyawa Fenolik Total ............................. 15
D. Hubungan
Kandungan
Fenolik
Total
dengan
Aktivitas
Antioksidan ................................................................................... 17
vi
30
BAB IV KESIMPULAN ................................................................................ 19
A. Kesimpulan .................................................................................. 19
B. Saran ............................................................................................. 19
DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 20
LAMPIRAN .................................................................................................... 23
vii
31
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Hasil pengujian aktivitas antiradikal ............................................... 16
Tabel 2. Hubungan antara aktivitas antioksidan (IC50) dengan kadar
fenolik total (GAE) .......................................................................... 18
viii
32
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Daun Coccinia grandis L. ........................................................... 3
Gambar 2.
Donasi Proton dari antioksidan ke radikal DPPH ...................... 5
Gambar 3. Ekstrak daun papasan.................................................................. 13
Gambar 4.
Grafik aktivitas penangkap radikal (%), ekstrak papasan
(EKS), fraksi n-heksan (FNH), fraksi etil asetat (FEA),
fraksi etanol (FET) dan vitamin E. Konsentrasi sampel
sebanding dengan aktivitas antiradikalnya ................................. 14
Gambar 5.
Kurva Baku Asam Galat ............................................................. 16
Gambar 6.
Aktivitas antioksidan dengan nilai IC50 (ppm) dan kadar
fenolik ekstrak (EKS), fraksi n-heksan (FNH), fraksi etil
asetat (FEA), dan fraksi etanol (FET). ....................................... 17
ix
33
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Hasil Perhitungan Kadar Fenolik ................................................. 23
Lampiran 2. Penentuan Panjang Gelombang Maks .......................................... 27
Lampiran 3. Alat Penelitian .............................................................................. 28
Lampiran 4. Surat Keterangan Penelitian ......................................................... 29
x
34
DAFTAR SINGKATAN
DPPH : 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil
GAE : Gallic and Equivalent
g
: Gram
mg
: Miligram
mL
: Mililiter
nm
: Nanometer
OT
: Operating Time
UV
: Ultraviolet
VIS
: Visibel
µg
: Mikrogram
µL
: Mikroliter
µM
: Mikromol
xi
35
INTISARI
Buah dan akar papasan (Coccinia grandis L.) secara empirik digunakan
untuk pengobatan seperti penyembuhan luka, ulkus, sakit kuning, diabetes dan
antipiretik. Papasan memiliki kandungan kimia antara lain flavonoid, saponin,
fenolik. Bagian daun papasan belum diteliti aktivitas antioksidannya, oleh karena
itu penelitian ini bertujuan untuk menentukan aktivitas antioksidan fraksi-fraksi
dan ekstrak etanol daun papasan serta menetapkan kadar fenolik total. Metode
ekstraksi yang digunakan adalah meserasi dengan menggunakan etanol 96% dan
fraksinasi menggunakan pelarut heksan, etil asetat, dan etanol. Aktivitas
antioksidan ditetapkan dengan DPPH. Kandungan total fenolik ditetapkan dengan
metode Folin-Ciocalteu. Hasil penelitian menunjukkan potensi antioksidan
ekstrak, fraksi n-heksan, etil asetat dan etanol dengan nilai IC50 berturut-turut
sebesar 300,18; 325,34; 342,91 dan 559,91 ppm. Kandungan fenolik berturut-turut
adalah 28,50; 21,52; 63,59 dan 28,66 GAE. Ekstrak etanol daun papasan dan
fraksi-fraksinya tidak memiliki hubugan kadar felolik terhadap aktivitas
antioksidan.
Kata kunci : daun papasan (Coccinia grandis L.), fenolik, antioksidan, DPPH
xii