UJI IDENTIFIKASI BAKTERI ASAM LAKTAT ISOLAT 18A SECARA FENOTIPIK.

UJI IDENTIFIKASI BAKTERI ASAM LAKTAT ISOLAT 18A SECARA
FENOTIPIK

SKRIPSI

Diajukan untuk Melengkapi Tugas-Tugas dan Memenuhi
Persyaratan untuk Mencapai Gelar Sarjana Kedokteran Hewan

Oleh
HENDRO SUKOCO
NIM. 1109005062

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
UNIVERSITAS UDAYANA
DENPASAR
2015

i

UJI IDENTIFIKASI BAKTERI ASAM LAKTAT ISOLAT 18A SECARA
FENOTIPIK

SKRIPSI

Diajukan untuk Melengkapi Tugas-Tugas dan Memenuhi
Persyaratan untuk Mencapai Gelar Sarjana Kedokteran Hewan

HENDRO SUKOCO
NIM. 1109005062

Menyetujui / Mengesahkan :

Pembimbing I

Pembimbing II

Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si
NIP. 19700122 199512 1 001

Prof. Ir. Nyoman Semadi Antara, MP., Ph.D

NIP. 19610923 198702 1 001


DEKAN FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
UNIVERSITAS UDAYANA

Dr. drh. I Nyoman Adi Suratma, M.P
NIP. 19600305 198703 1 001
Tanggal Lulus :

i

Setelah mempelajari dan menguji dengan sungguh-sungguh kami
berpendapat bahwa tulisan ini baik ruang lingkup maupun kualitasnya dapat
diajukan sebagai skripsi untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran Hewan.

Ditetapkan di Denpasar, tanggal ………………………………………

Panitia Penguji,

Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si
Ketua


Prof. Ir. Nyoman Semadi Antara, MP.,Ph.D
Sekretaris

Prof. Dr. drh. I Nyoman Suarsana, M.Si
Anggota

dr. Komang Januartha Putra Pinatih, M. Kes
Anggota

Dr.drh. I Gusti Ayu Agung Suartini, M.Si
Anggota

ii

iii

RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan pada tanggal 10 Januari 1992 di Sampang, Madura,
Jawa Timur. Penulis adalah anak ketiga dari tiga bersaudara pasangan Bapak

Purwo Saroyo dan Ibu Kurniawati. Penulis memulai pendidikan di Taman KanakKanak di Madura, dilanjutkan di Sekolah Dasar Negeri 4 Sambimulyo,
Banyuwangi dan tamat pada tahun 2005, kemudian melanjutkan pendidikan
Sekolah Menengah Pertama di SMP Negeri 1 Bangorejo, Banyuwangi dan lulus
pada tahun 2008, dan melanjutkan pendidikan Sekolah Menengah Atas di SMA
PGRI Purwoharjo, Banyuwangi dan lulus pada tahun 2011. Pada Juli 2011,
penulis diterima di Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana Denpasar,
Bali melalui jalur SNMPTN. Selama duduk di bangku kuliah penulis aktif dalam
berbagai kegiatan ekstrakurikuler seperti Minpro P-LO, Minpro Vesica dan
organisasi lainnya. Penulis melakukan penelitian selama satu semster, di bidang
Mikrobiologi dengan judul “Identifikasi Bakteri Asam Laktat Isolat 18A Secara
Fenotipik ” sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Kedokteran
Hewan (S.KH) pada Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana.

i

ABSTRAK
Bakteri Asam Laktat (BAL) memiliki kemampuan dalam menghambat
pertumbuhan bakteri patogen, salah satunya adalah BAL isolat 18A. Penelitian ini
bertujuan untuk mengetahui spesies BAL dari isolat 18A yang diidentifikasi
dengan uji konvensional dan uji KIT API 50 CH.

Penelitian ini merupakan penelitian observasional deskriptif, dengan objek
penelitian berupa bakteri asam laktat isolat 18A asal kolon sapi bali. BAL isolat
18A direkulturisasi, dengan penumbuhan pada media MRS, uji katalase, dan
pewarnaan Gram. Uji identifikasi isolat dengan uji produksi gas CO2, uji
pertumbuhan pada NaCL 15%, uji pertumbuhan pada Suhu 100C, dan uji
pertumbuhan pada pH 9,6. Konfirmasi isolat hasil identifikasi juga dilakukan
dengan uji kit API (Standard Analytical Profile Index) 50 CH.
Hasil rekulturisasi menunjukkan isolate 18A mampu tumbuh dengan baik pada
media MRS broth, bersifat katalase negatif, Gram positif, berbentuk bulat, dan berantai.
Hasil identifikasi mengindikasikan bahwa isolat 18A bersifat homofermentatif, mampu
tumbuh pada suhu 100C, dan tidak tumbuh pada pH 9,6. Uji fermentasi dengan
menggunakan perangkat kit API 50 CH, menunjukkan bahwa isolat 18A mampu
mendegradasi 15 komponen gula, yaitu komponen gula no : 5, 10, 11, 12, 13, 22, 24, 25,
26, 27, 28, 29, 30, 31, dan 39.
Hasil identifikasi secara konvensional dapat disimpulkan bahwa isolate 18A
merupakan genus Lactococcus. Dan berdasarkan uji konfirmasi menggunakan Kit API 50
CHL disimpulkan bahwa isolat 18A merupakan bakteri Lactococcus Lactis ssp lactis 1.

Kata kunci: Bakteri asam laktat, isolat 18A, uji konvensional, Kit API 50 CH.


ii

ABSTRACT
Lactic Acid Bacteria (LAB) is a bacteria that has the ability to inhibit the
pathogenic bacteria growth, including isolates 18A. The aim of this study is to
determine the species of LAB isolates 18A which were identified by conventional
tests and API 50 CH test.
This study was a descriptive observational study, with lactic acid bacteria
isolates 18A obtained from bali cattle’s colon as an object. LAB isolates 18A then
were re-cultured, with growth in MRS media, catalase test, and Gram staining.
Identification test were performed by CO2 production test, growth in the presence
of 15% NaCl, growth at 10°C, and growth at pH 9.6. Confirmation test were
performed using API 50 CH (Standard Analytical Profile Index).
The results indicated that LAB isolate 18A were able to grow MRS broth
media, catalase-negative, Gram-positive, and spherical-chain in shape.
Identification test revealed that the bacteria is homofermentative, were able to
grow at 10°C, and do not grow at pH 9.6. Fermentation test using API 50 CH
showed that LAB isolates 18A were able to degrade 15 sugar components, consist
of no: 5, 10, 11, 12, 13, 22, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30 , 31, and 39.
Based on conventional identification results, it can be concluded that BAL

isolates 18A is a Lactococcus. In addition, the result of API 50 CHL test showed
that BAL isolates 18A is a Lactococcus lactis ssp lactis 1.

Keywords: Lactic acid bacteria, isolates 18A, conventional test, API 50CH test

iii

UCAPAN TERIMA KASIH

Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa berkat
rahmat dan karuniaNya penelitian dan penulisan skripsi yang berjudul
“Identifikasi Bakteri Asam Laktat Isolat 18A Secara Fenotipik” dapat
terselesaikan. Skripsi ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar
sarjana kedokteran hewan pada Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan ucapan terima kasih dan
penghargaan yang setinggi-tingginya kepada :
1. Bapak Dr. drh. I Nyoman Adi Suratma, M.P, selaku Dekan Fakultas
Kedokteran Hewan Universitas Udayana.
2. Bapak Dr. drh. I Wayan Suardana, M.Si. selaku pembimbing pertama
yang telah meluangkan waktu untuk membimbing dalam pelaksanaan

penelitian dan penulisan skripsi sehingga skripsi ini dapat terselesaikan
dan dengan diikutsertakan dalam program penelitian Hibah Bersaing 2014.
3. Bapak Prof. Ir. Nyoman Semadi Antara, MP., Ph.D selaku pembimbing
kedua yang telah meluangkan waktu untuk membimbing dalam
pelaksanaan penelitian dan penulisan skripsi sehingga skripsi ini dapat
terselesaikan.
4. Para dosen penguji yang telah memberi masukan yaitu Prof. Dr. drh. I
Nyoman Suarsana, M.Si, dr. Komang Januartha Putra Pinatih, M. Kes, dan
Dr. drh. I Gusti Ayu Agung Suartini, M.Si
5. Bu Nursini selaku Staf Bagian Laboratorium Biosains Universitas
Udayana atas bantuan dan bimbingannya dalam proses penelitian ini.
6. Bapak dan Ibu dosen, staf pimpinan dan pegawai pada Fakultas
Kedokteran Hewan Universitas Udayana atas segala bimbingan dan
bantuannya selama mengikuti masa perkuliahan sehingga penulis dapat
meraih gelar sarjana kedokteran hewan.
7. Kedua orang tua yang saya cintai, kasihi dan sangat saya banggakan
Bapak Purwo Saroyo dan Ibu Kurniawati. Terima kasih banyak atas kasih
sayang dan doa yang tiada hentinya; serta motivasi dan didikan yang
iv


selama ini sudah diberikan dengan penuh dengan kesabaran dan
pengertian.
8. Kakak-kakak tercinta Haris Krisuma dan Yuli Koestini yang tanpa henti
memberi dukungan dan segala kasih sayang sebagai saudara.
9. Yohana Maria Febrisky Bolly dan Ferbian Milas Siswanto yang selama ini
memberikan semangat dan motivasi untuk menyelesaikan skripsi ini.
10. Sahabat-sahabatku tercinta yang selalu ada dan memberi semangat dalam
suka maupun duka Sriwahyuni, Yana, Annisa, dan Khoirul Anwar.
11. Teman-teman satu penelitian BAL yang dengan caranya masing-masing
telah membantu kelancaran penelitian ini.
12. Rekan-rekan seperjuangan angkatan 2011B yang menemani perjuangan
penulis selama mengikuti jenjang perkuliahan dan praktikum dari awal
hingga akhir di Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Udayana,
terimakasih atas segalanya.
Penulis menyadari skripsi ini masih jauh dari sempurna dan untuk itu
segala kritik dan saran penulis harapkan demi sempurnanya skripsi ini. Sebagai
akhir kata penulis berharap skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua.

Denpasar, 3 Maret 2015


Penulis

v

DAFTAR ISI

Halaman
HALAMAN JUDUL. ……………………………………………………..
i
LEMBAR PERSETUJUAN ……………………………………………….
ii
RIWAYAT HIDUP ………………………………………………………… iv
ABSTRAK …………………………………………………………………..
v
UCAPAN TERIMA KASIH ………………………………………………. vii
DAFTAR ISI ………………………………………………………………..
ix
DAFTAR GAMBAR …………………..…………………………………...
xi
DAFTAR TABEL ………………………………………………………...

xii
BAB I PENDAHULUAN …………………………………………………..
1.1 Latar Belakang …………………………………………………….
1.2 Rumusan Masalah …………………………………………………
1.3 Tujuan Penelitian ………………………………………………….
1.4 Manfaat Penelitian ………………………………………………...

1
3
4
4
4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA …………………………………………..
2.1 Bakteri Asam Laktat (BAL)……………………………………….
2.1.1 Pengertian Bakteri Asam Laktat (BAL)………………………
2.1.2 Klasifikasi Bakteri Asam Laktat ………………………...........
2.1.3 Karakteristik Bakteri Asam Laktat ….………………………..
2.2.4 Senyawa Antimikroba Yang Dihasilkan Bakteri Asam Laktat.
2.2.5 Peran Bakteri Asam Laktat Terhadap Dunia Kesehatan dan -

5
5
5
5
7
9

Pangan ………………………………………………………
2.2.6 Bakteri Asam Laktat Pada Saluran Pencernaan ………………
2.2 Sapi Bali …………………………………………………………...
2.3 Teknik Identifikasi Konvensional dan Uji Kit API 50 CHL………
2.4 Kerangka Konsep ………………………………………………….

16
19
19
20
21

BAB III METODE PENELITIAN ………………………………………...
3.1 Objek Penelitian …………………………………………………...
3.2 Bahan Penelitian …………………………………………………...
3.3 Alat-Alat Penelitian ……………………………………………......
3.4 Rancangan Penelitian ……………………………………………...
3.5 Prosedur Penelitian ………………………………………………...
3.5.1 Kultivasi Isolat 18A …………………………….....................
3.5.2 Uji Identifikasi Isolat 18A….………………………………...
3.5.3 Konfirmasi Bakteri Asam Laktat Hasil Identifikasi dengan Uji Kit API 50 CHL ………………………………………….
3.6 Analisis Data ………………………………………………………
3.7 Lokasi dan Waktu Penelitian ……………………………………...

23
23
23
23
24
24
24
25

vi

26
26
26

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN …………………………………..
4.1 Kultivasi Isolat 18A ……………………………………………………..

4.1.1 Penanaman Pada Media MRS Broth …………………………
4.1.2 Uji Katalase …………………………………………………..
4.1.3 Pewarnaan Gram ……………………………………………..
4.2 Uji Identifikasi Isolat 18A ………………………………………..
4.2.1 Uji Produksi Gas CO2 ………………………………………..
4.2.2 Uji Pertumbuhan Suhu 10oC ………………………………...
4.2.3 Uji Pertumbuhan pada pH 9,6 ……………………………….
4.2.4 Analisis Genus dari Isolat 18A ……………………………...
4.3 Konfirmasi Bakteri Asam Laktat Hasil Identifikasi dengan Uji Kit
50 CHL …………………………………………………………….

27
27
27
28
29
31
31
31
32
32
34

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ……………………………………
5.1 Kesimpulan ………………………………………………………..
5.2 Saran ……………………………………………………………….

37
37
37

DAFTAR PUSTAKA

38

LAMPIRAN

44

vii

DAFTAR GAMBAR
Gambar

Teks

Halaman

Kerangka Konsep Penelitian …………………………………………
Hasil Penanaman 18A Pada Media MRS Broth ………
Hasil Uji Katalase Pada Isolat 18A………………………….
Hasil Pewarnaan Gram Isolat 18A yang Dilihat Di bawah Mikroskop
Dengan Perbesaran 1000 kali …………………………….
5. Hasil uji kit API 50 CHL inkubasi 24 jam ……………………………
1.
2.
3.
4.

viii

22
27
28
29
34

DAFTAR TABEL
Tabel

Teks

Halaman

1. Perbedaan antara genus dalam bakteri asam laktat …………………... 7
2. Karakteristik 3 sub grup genus Lactobacillus sp ………………………..
8
3. Bakteriosin yang mengandung lanthionin …………………………… 12
4. Berbagai jenis bakteriosin Kelas II dan aktivitasnya ………………… 13
5. Bakteriosin Kelas III yang dihasilkan oleh bakteri asam laktat ……… 14
6. Bakteriosin Kelas IV yang dihasilkan bakteri asam laktat…………… 14
7. Beberapa bakteri asam laktat yang dapat menghasilkan bakteriosin … 15
8. Sirsak Sebelum dan Sesudah Fermentasi …………………………….. 18
9. Hasil Kultivasi Isolat 18A…………………………………………….. 30
10. Hasil Uji Identifikasi Isolat 18A……………………………………… 32
11. Identifikasi Bakteri Asam Laktat Isolat 18A Menggunakan Kit API
50 CHL ………………………………………………………………. 35

ix