Isolasi Steroid Triterpenoid dari Sponge Chalinula Sp dan Identifikasi secara Spektrofotometri Ultraviolet dan Inframerah
Lampiran 1. Hasil identifikasi sponge
45
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Gambar sponge Chalinula sp
46
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Gambar simplisiadan serbuk sponge Chalinula sp
Gambar simplisiasponge Chalinula sp
Gambar serbuk sponge Chalinula sp
47
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4.Gambar mikroskopik serbuk simplisia sponge Chalinula sp
a
Keterangan gambar:
a. Spikula mikrosklera monoaxon tipe microxea.
48
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Bagan kerja penelitian
SpongeChalinula sp
dipisahkan dari pengotor
dicuci dengan air kran mengalir
ditiriskan
ditimbang
Berat spongeChalinula sp = 2,8 kg
dipotong dadu
dikeringkan
dalam
lemari
pengering dengan suhu 40-50oC
selama 6 hari
ditimbang
Berat simplisia spongeChalinula sp = 420 g
dihaluskan dengan blender
Serbuk spongeChalinula sp
Karakterisasi serbuk
simplisia
Pemeriksaan:
- Makroskopik
- Mikroskopik
Penetapan:
- kadar air
- kadar sari larut air
- kadar sari larut etanol
- kadar abu total
- kadar abu tidak larut
asam
Pemeriksaan golongan
senyawa kimia
Pembuatan
ekstrak n-heksan
̵ Alkaloid
̵ Flavonoid
̵ Saponin
̵ Tanin
̵ Glikosida
̵ Steroid/Triter
penoid
49
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Bagan pembuatan ekstrakn-heksan simplisia sponge Chalinula sp
Serbuk sponge(300 g)
dimasukkan kedalam bejana tertutup
direndam dengan n-heksan selama 3 jam
dimasukkan ke dalam perkolator
dituangkan pelarut n-heksan secukupnya
sampai semua serbuk simplisia terendam
dan terdapat selapis cairan penyari di atas
serbuk simplisia
ditutup mulut perkolator dengan plastik
dan aluminium foil dan dibiarkan selama
24 jam
dibuka kran perkolator setelah 24 jam
dibiarkan perkolat menetes dengan
kecepatan 1 mL/menit
cairan
ditambahkan
berulang-ulang
penyari secukupnya sehingga selalu
terdapat selapis cairan penyari di atas
simplisia, dihentikan perkolasi ketika
hasil 500 mg perkolat diuapkan di atas
penangas air tidak meninggalkan sisa.
Ampas
Perkolat
dipekatkan dengan
Rotary evaporator
pada suhu 40-50˚C
dikeringkan dengan
hair dryer
Ekstrak kental n-heksan
sponge Chalinula sp
dianalisis
ekstrak
secara KLT
diisolasi secara
KLT preparatif
Isolat
diKLT dua arah
Isolat
diidentifikasi secara
spektrofotometri UV
dan IR
Spektrum
50
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. Perhitungan hasil penetapan kadar
a. Perhitungan hasil penetapan kadar air
volume air (mL)
Kadar air = berat sampel (g) � 100%
1. Sampel 1
Berat sampel
= 5,00 g
Volume air
= 0,2mL
Kadar air
0,2 mL
= 5,00 g x100%
= 4% v�b
2. Sampel 2
Berat sampel
= 5,00 g
Volume air
= 0,2mL
Kadar air
0,2 mL
= 5,00 g x100%
= 4% v�b
3. Sampel 3
Berat sampel
=5,00 g
Volume air
= 0,1mL
Kadar air
Kadar air rata – rata
0,1 mL
= 5,00 g x100%
= 2% v�b
4% + 4% + 2%
=
3
= 3,33% v�b
51
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7.(Lanjutan)
b. Perhitungan hasil penetapan kadar sari larut air
Kadar sari larut air =
berat sari
berat simplisia
x
100
20
x 100%
1. Kadar sari larut air I
Berat cawan
Berat cawan + berat sari
Berat sampel
Berat sari
=
Kadar sari larut air
= 48,6167 g
= 48,7638 g
= 5,0012 g
= 0,1471 g
0,1471 g 100
x
x 100%
5,0012 g 20
Lampiran 7.(Lanjutan)
= 14,7064%
2. Kadar sari larut air II
Berat cawan
= 48,6153 g
Berat cawan + berat sari
= 48,7581 g
Berat sampel
= 5,0032 g
Berat sari
= 0,1428 g
Kadar sari larut air
0,1428 g 100
= 5,0032 g x
x 100%
20
= 14,2708%
3. Kadar sari larut air III
Berat cawan
= 48,6173 g
Berat cawan + berat sari
= 48,7631 g
Berat sampel
= 5,0050 g
Berat sari
= 0,1458 g
Kadar sari larut air
0,1458 g 100
= 5,0050 g x
x 100%
20
= 14,5654%
Kadar sari larut air rata–rata=
14,7064% + 14,708% + 14,5654%
3
= 14,51%
Lampiran 7.(Lanjutan)
52
Universitas Sumatera Utara
c. Perhitungan hasil penetapan kadar sari larut etanol
berat sari
100
Kadar sari larut etanol =
x
x100%
berat simplisia
20
1. Kadar sarilarut etanol I
Berat Cawan
=48,6174 g
Berat Cawan + Berat Sari
=48,4211 g
Berat Sampel
= 5,0023 g
Berat sari
=0,1963 g
=
Kadar sari larut etanol
0,1963g 100
x
x100%
5,0023 g 20
= 19,6209%
2. Kadar sari larut etanol II
Berat Cawan
=48,6157 g
Berat Cawan + Berat Sari
=48,4254 g
Berat Sampel
= 5,0015 g
Berat sari
=0,1903 g
0.1903 g 100
= 5,0015 g x 20 x100%
Kadar sari larut etanol
= 19,0243%
3. Kadar sari larut etanol III
Berat Cawan
=48,6175 g
Berat Cawan + Berat Sari
=48,8117 g
Berat Sampel
= 5,0021 g
Berat sari
=0,1942 g
0,1942 g 100
Kadar sari larut etanol= 5,0021 g x 20 x 100%
= 19,4118%
Kadar sarilarut etanol rata-rata=
19,6209%+19,0243%+19,4118%
3
= 19,35%
Lampiran 7.(Lanjutan)
53
Universitas Sumatera Utara
d. Perhitungan hasil penetapan kadar abu total
Kadar abu total
=
berat abu
berat simplisia
x 100%
1. Sampel I
=2,0015 g
Berat simplisia
=0,6107 g
Berat abu
0,6107 g
= 2,0015 g x100%
Kadar abu total
=30,5121%
2. Sampel II
=2,0022 g
Berat simplisia
Berat abu
=0,6271 g
Kadar abu total
0,6271 g
= 2,0022 g x100%
= 31,3205%
3.Sampel III
Berat simplisia
=2,0004 g
Berat abu
=0,6159 g
0,6159 g
Kadar abu total= 2,0004 g x100%
= 30,7889%
Kadarabu total rata-rata=
30,5121% + 31,3205% + 30,7889%
3
=30,87%
Lampiran 7.(Lanjutan)
e. Perhitungan hasil penetapan kadar abu tidaklarut asam
54
Universitas Sumatera Utara
Kadar abu tidak larut asam
=
berat abu
berat simplisia
x100%
1. Sampel I
Berat simplisia
=2,0015 g
Berat abu
=0,0972 g
Kadar abu tidak larut asam
=
0,0972 g
2,0015 g
x 100%
= 4,8563%
2. Sampel II
Berat simplisia
= 2,0022 g
Berat abu
= 0,1043 g
Kadar abu tidak larut asam
=
0,1043 g
2,0022 g
x 100%
=5,2092%
3.Sampel III
Berat simplisia
=2,0004 g
Berat abu
= 0,1026 g
Kadar abu tidak larut asam
=
0,1026 g
2,0004 g
x 100%
=5,1289%
Kadarabu tidak larut asam rata-rata=
4,8563% + 5,2092 % + 5,1289%
3
= 5,06%
55
Universitas Sumatera Utara
45
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Gambar sponge Chalinula sp
46
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Gambar simplisiadan serbuk sponge Chalinula sp
Gambar simplisiasponge Chalinula sp
Gambar serbuk sponge Chalinula sp
47
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 4.Gambar mikroskopik serbuk simplisia sponge Chalinula sp
a
Keterangan gambar:
a. Spikula mikrosklera monoaxon tipe microxea.
48
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Bagan kerja penelitian
SpongeChalinula sp
dipisahkan dari pengotor
dicuci dengan air kran mengalir
ditiriskan
ditimbang
Berat spongeChalinula sp = 2,8 kg
dipotong dadu
dikeringkan
dalam
lemari
pengering dengan suhu 40-50oC
selama 6 hari
ditimbang
Berat simplisia spongeChalinula sp = 420 g
dihaluskan dengan blender
Serbuk spongeChalinula sp
Karakterisasi serbuk
simplisia
Pemeriksaan:
- Makroskopik
- Mikroskopik
Penetapan:
- kadar air
- kadar sari larut air
- kadar sari larut etanol
- kadar abu total
- kadar abu tidak larut
asam
Pemeriksaan golongan
senyawa kimia
Pembuatan
ekstrak n-heksan
̵ Alkaloid
̵ Flavonoid
̵ Saponin
̵ Tanin
̵ Glikosida
̵ Steroid/Triter
penoid
49
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Bagan pembuatan ekstrakn-heksan simplisia sponge Chalinula sp
Serbuk sponge(300 g)
dimasukkan kedalam bejana tertutup
direndam dengan n-heksan selama 3 jam
dimasukkan ke dalam perkolator
dituangkan pelarut n-heksan secukupnya
sampai semua serbuk simplisia terendam
dan terdapat selapis cairan penyari di atas
serbuk simplisia
ditutup mulut perkolator dengan plastik
dan aluminium foil dan dibiarkan selama
24 jam
dibuka kran perkolator setelah 24 jam
dibiarkan perkolat menetes dengan
kecepatan 1 mL/menit
cairan
ditambahkan
berulang-ulang
penyari secukupnya sehingga selalu
terdapat selapis cairan penyari di atas
simplisia, dihentikan perkolasi ketika
hasil 500 mg perkolat diuapkan di atas
penangas air tidak meninggalkan sisa.
Ampas
Perkolat
dipekatkan dengan
Rotary evaporator
pada suhu 40-50˚C
dikeringkan dengan
hair dryer
Ekstrak kental n-heksan
sponge Chalinula sp
dianalisis
ekstrak
secara KLT
diisolasi secara
KLT preparatif
Isolat
diKLT dua arah
Isolat
diidentifikasi secara
spektrofotometri UV
dan IR
Spektrum
50
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7. Perhitungan hasil penetapan kadar
a. Perhitungan hasil penetapan kadar air
volume air (mL)
Kadar air = berat sampel (g) � 100%
1. Sampel 1
Berat sampel
= 5,00 g
Volume air
= 0,2mL
Kadar air
0,2 mL
= 5,00 g x100%
= 4% v�b
2. Sampel 2
Berat sampel
= 5,00 g
Volume air
= 0,2mL
Kadar air
0,2 mL
= 5,00 g x100%
= 4% v�b
3. Sampel 3
Berat sampel
=5,00 g
Volume air
= 0,1mL
Kadar air
Kadar air rata – rata
0,1 mL
= 5,00 g x100%
= 2% v�b
4% + 4% + 2%
=
3
= 3,33% v�b
51
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 7.(Lanjutan)
b. Perhitungan hasil penetapan kadar sari larut air
Kadar sari larut air =
berat sari
berat simplisia
x
100
20
x 100%
1. Kadar sari larut air I
Berat cawan
Berat cawan + berat sari
Berat sampel
Berat sari
=
Kadar sari larut air
= 48,6167 g
= 48,7638 g
= 5,0012 g
= 0,1471 g
0,1471 g 100
x
x 100%
5,0012 g 20
Lampiran 7.(Lanjutan)
= 14,7064%
2. Kadar sari larut air II
Berat cawan
= 48,6153 g
Berat cawan + berat sari
= 48,7581 g
Berat sampel
= 5,0032 g
Berat sari
= 0,1428 g
Kadar sari larut air
0,1428 g 100
= 5,0032 g x
x 100%
20
= 14,2708%
3. Kadar sari larut air III
Berat cawan
= 48,6173 g
Berat cawan + berat sari
= 48,7631 g
Berat sampel
= 5,0050 g
Berat sari
= 0,1458 g
Kadar sari larut air
0,1458 g 100
= 5,0050 g x
x 100%
20
= 14,5654%
Kadar sari larut air rata–rata=
14,7064% + 14,708% + 14,5654%
3
= 14,51%
Lampiran 7.(Lanjutan)
52
Universitas Sumatera Utara
c. Perhitungan hasil penetapan kadar sari larut etanol
berat sari
100
Kadar sari larut etanol =
x
x100%
berat simplisia
20
1. Kadar sarilarut etanol I
Berat Cawan
=48,6174 g
Berat Cawan + Berat Sari
=48,4211 g
Berat Sampel
= 5,0023 g
Berat sari
=0,1963 g
=
Kadar sari larut etanol
0,1963g 100
x
x100%
5,0023 g 20
= 19,6209%
2. Kadar sari larut etanol II
Berat Cawan
=48,6157 g
Berat Cawan + Berat Sari
=48,4254 g
Berat Sampel
= 5,0015 g
Berat sari
=0,1903 g
0.1903 g 100
= 5,0015 g x 20 x100%
Kadar sari larut etanol
= 19,0243%
3. Kadar sari larut etanol III
Berat Cawan
=48,6175 g
Berat Cawan + Berat Sari
=48,8117 g
Berat Sampel
= 5,0021 g
Berat sari
=0,1942 g
0,1942 g 100
Kadar sari larut etanol= 5,0021 g x 20 x 100%
= 19,4118%
Kadar sarilarut etanol rata-rata=
19,6209%+19,0243%+19,4118%
3
= 19,35%
Lampiran 7.(Lanjutan)
53
Universitas Sumatera Utara
d. Perhitungan hasil penetapan kadar abu total
Kadar abu total
=
berat abu
berat simplisia
x 100%
1. Sampel I
=2,0015 g
Berat simplisia
=0,6107 g
Berat abu
0,6107 g
= 2,0015 g x100%
Kadar abu total
=30,5121%
2. Sampel II
=2,0022 g
Berat simplisia
Berat abu
=0,6271 g
Kadar abu total
0,6271 g
= 2,0022 g x100%
= 31,3205%
3.Sampel III
Berat simplisia
=2,0004 g
Berat abu
=0,6159 g
0,6159 g
Kadar abu total= 2,0004 g x100%
= 30,7889%
Kadarabu total rata-rata=
30,5121% + 31,3205% + 30,7889%
3
=30,87%
Lampiran 7.(Lanjutan)
e. Perhitungan hasil penetapan kadar abu tidaklarut asam
54
Universitas Sumatera Utara
Kadar abu tidak larut asam
=
berat abu
berat simplisia
x100%
1. Sampel I
Berat simplisia
=2,0015 g
Berat abu
=0,0972 g
Kadar abu tidak larut asam
=
0,0972 g
2,0015 g
x 100%
= 4,8563%
2. Sampel II
Berat simplisia
= 2,0022 g
Berat abu
= 0,1043 g
Kadar abu tidak larut asam
=
0,1043 g
2,0022 g
x 100%
=5,2092%
3.Sampel III
Berat simplisia
=2,0004 g
Berat abu
= 0,1026 g
Kadar abu tidak larut asam
=
0,1026 g
2,0004 g
x 100%
=5,1289%
Kadarabu tidak larut asam rata-rata=
4,8563% + 5,2092 % + 5,1289%
3
= 5,06%
55
Universitas Sumatera Utara