Isolasi Steroid Triterpenoid dari Sponge Chalinula Sp dan Identifikasi secara Spektrofotometri Ultraviolet dan Inframerah
ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI SPONGEChalinula sp
DAN IDENTIFIKASI SECARA SPEKTROFOTOMETRI
ULTRAVIOLET DAN INFRAMERAH
SKRIPSI
OLEH:
RIYANI
NIM 131524037
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI SPONGE Chalinula sp
DAN IDENTIFIKASI SECARA SPEKTROFOTOMETRI
ULTRAVIOLET DAN INFRAMERAH
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk mencapai
Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
RIYANI
NIM 131524037
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI SPONGE Chalinula sp
DAN IDENTIFIKASI SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET
DAN INFRAMERAH
yarat untuk memperolehgelar SarjOLEH:
RIYANI
NIM 131524037
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal : 25 Juli 2016
Disetujui Oleh:
Pembimbing I
Panitia Penguji,
Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt.
NIP 195112231980032002
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt.
NIP 195107231982032001
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt.
NIP 195107231982032001
Pembimbing II
Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt
NIP 195109081985031002
Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt.
NIP 195310301980031002
Popi Patilaya, M.Sc., Apt
NIP 197812052010121004
Medan, Agustus 2016
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah melimpahkan
rahmat dan anugerah-Nya sehingga penulis menyelesaikan skripsi ini yang
berjudul “Isolasi Steroid/Triterpenoid dari Sponge Chalinula Sp dan Identifikasi
secara Spektrofotometri Ultraviolet dan Inframerah”. Skripsi ini diajukan sebagai
salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara.
Penulis mengucapkan terimakasih kepada IbuDr. Masfria, M.S., Apt.,
selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah
memberikan bantuan dan fasilitas selama masa pendidikan. Ibu Dra.Aswita Hafni
LubisM.Si., Apt., (Almh.), Ibu Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., dan Bapak Dr.
Panal Sitorus, M.Si., Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu,
bimbingan, motivasi dan nasihat selama penelitian dan penulisan skripsi ini
berlangsung. Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., Bapak Drs. Suryadi
Achmad, M.Sc., Apt., dan Bapak Popi Patilaya, M.Sc., Apt.,selaku dosen penguji
yang telah memberikan arahan, kritikan dan saran dalam penyusunan skripsi
ini.Bapak Prof. Dr. Karsono, Apt.,selaku pembimbing akademik yang selalu
memberikan bimbingan dan motivasi selama masa pendidikan serta Bapak dan
Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah
membimbing penulis selama masa pendidikan.
Penulismengucapkanterimakasih danpenghargaan yang tuluskepada Bapak
Sampe, Ibu Turisiyah dan Adik Gilang Raka atas doa dan dorongan baik moriil
maupun materiil dalam penyelesaian skripsi ini.
iv
Universitas Sumatera Utara
Penulis menyadari skripsi ini masih belum sempurna, oleh karena
itudiharapkan kritik dan saran yang membangun untuk penyempurnaannya.
Harapan saya semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan
kefarmasian.
.
Medan, Juli 2016
Penulis,
Riyani
NIM 131524037
v
Universitas Sumatera Utara
SURAT PERNYATAAN
Saya yang bertanda tangan di bawah ini,
Nama
: Riyani
Nomor Induk Mahasiswa
: 131524037
Program Studi
: S-1 Farmasi Ekstensi
: Isolasi
:
: Steroid/Triterpenoid Dari Sponge
Chalinula
Sp
Dan
Identifikasi
Secara
Spektrofotometri Ultraviolet Dan Inframerah
Judul skripsi
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari
hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri dan belum pernah diajukan orang lain
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di Perguruan Tinggi dan bukan plagiat
karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam
skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia
menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk
dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, Juli 2016
Yang membuat pernyataan,
Riyani
NIM 131524037
vi
Universitas Sumatera Utara
ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI SPONGE Chalinula sp DAN
IDENTIFIKASI SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET DAN
INFRAMERAH
ABSTRAK
Sponge merupakan biota laut yang mengandung senyawa metabolit
sekunder aktif sehingga berpotensi untuk dikembangkan dalam bidang
pengobatan. Senyawa metabolit sekunder yang umumnya terdapat di dalam
sponge yaitu alkaloid dan steroid/triterpenoid. Sponge mempunyai aktivitas
sitotoksik, antitumor, antivirus, antimikroba, antiinflamasi dan antikanker. Sponge
jenis Chalinula sp yang digunakan terdapat di Teluk Tapian Nauli Sibolga,
Kecamatan Paruiaha, Tapanuli Tengah provinsi Sumatera Utara. Tujuan
penelitian untuk mengetahui karakteristik simplisia, pemeriksaan golongan
senyawa kimia, isolasi dan identifikasi senyawa steroid/triterpenoid dari sponge
Chalinula sp.
Ekstraksi dilakukan secara perkolasi menggunakan pelarut n-heksan.
Ekstrak yang diperoleh dianalisis secara kromatografi lapis tipis (KLT) dengan
berbagai perbandingan fasegerakn-heksan-etilasetat dan sebagai penampak bercak
pereaksi Liebermann-Burchard (LB), dilanjutkan isolasi secara KLT preparatif.
Isolat yang diperoleh diuji kemurniannya secara KLT dua arah dan diidentifikasi
secara spektrofotometri UV dan IR.
Hasil karakteristik simplisia sponge diperoleh kadar air 3,33%, kadar sari
larut air 14,51%, kadar sari larut etanol 19,35%, kadar abu total 30,87% dan kadar
abu tidak larut asam 5,06%. Hasil pemeriksaan golongan senyawa kimia
menunjukkan adanya senyawa steroid/triterpenoid, alkaloid, glikosida dan
saponin. Hasil KLT preparatif dengan fase gerak (80:20) diperoleh isolat
berwarna merah ungu dan diuji kemurniannya secara KLT dua arah dengan harga
Rf 0,55. Hasil identifikasi isolat secara spektrofotometri UV diperoleh absorbansi
maksimum pada panjang gelombang 206,2 nm dan secara spektrofotometri IR
menunjukkan adanya gugus fungsi -OH, CH-alifatik, C≡C, C=C, -CH2 dan C-O.
Isolat yang diperoleh termasuk golongan senyawa triterpenoid.
Kata kunci: Sponge Chalinula sp, steroid/triterpenoid, spektrofotometri
ultraviolet dan inframerah.
vii
Universitas Sumatera Utara
ISOLATIONOF STEROIDS/TRITERPENOIDS COMPOUNDS
OFChalinula sp SPONGE AND IDENTIFICATION WITH ULTRAVIOLET
AND INFRARED SPECTROPHOTOMETRY
ABSTRACT
Sponge is marine life contains active secondary metabolites that could be
developed in the medical. Secondary metabolites compounds of sponge are
alkaloids and steroids/triterpenoids. Sponge have activities of cytotoxic,
antitumour, antiviral, antimicrobial, antiinflamatory and anticancer. Chalinula sp
sponge can be found in coastal waters in gulf of Tapian Nauli Sibolga, Kecamatan
Paruiaha, Tapanuli Tengah of North Sumatera. The aim of this research was to do
determined the characterization of dried materials, examination of chemical
compounds, isolation and identification of steroid/triterpenoid compounds of
sponge Chalinula sp.
Extraction was percolated with n-hexane solvent. Extracts were analyzed
by thin layer chromatography (TLC) withvariouscomparisons of mobile phase of
n-hexane-ethylacetate and used as reagent Liebermann- Burchard (LB), then
isolated using preparative TLC.Isolates tasted of purity with two wayTLC and
identified with UV and IR spectrophotometry.
The characterization results of Chalinula sp sponge dried materials
exhibited the water value 3.33%, water solubleextract value 14.51%,
ethanolsoluble extract value 19.35%,totalash value 30.87% and in acid insoluble
ash value 5.06%. The results of screening for chemical compounds
containsteroids/triterpenoids, alkaloids, glycosides and saponins presences. The
results of preparative TLC using mobile phase(80:20) obtained scarlet isolates and
tested purity with two way TLC obtained Rf 0.55. The results of isolates
identification
obtained
with
UV
spectrophotometry
exhibited
a
maximumabsorbanceat wavelength 206.2 nmand IR spectrophotometry exhibited
the presences OH, CH-aliphatic, C≡C, C=C,CH2, andC-O. These isolates was
triterpenoids compounds.
Key words: Chalinula sp sponge, steroid/triterpenoid, ultraviolet and infrared
spectrophotometry.
viii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ..........................................................................................................
i
HALAMAN JUDUL .....................................................................................
ii
LEMBAR PENGESAHAN ..........................................................................
iii
KATA PENGANTAR ..................................................................................
iv
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT ..............................................
vi
ABSTRAK ....................................................................................................
vii
ABSTRACT ...................................................................................................
viii
DAFTAR ISI ..................................................................................................
ix
DAFTAR TABEL .........................................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................
xv
BAB I PENDAHULUAN ..........................................................................
1
1.1 Latar Belakang .........................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah .................................................................
2
1.3 Hipotesis ..................................................................................
2
1.4 Tujuan Penelitian .....................................................................
3
1.5 Manfaat Penelitian ...................................................................
3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................
4
2.1 Uraian Hewan ...........................................................................
4
2.1.1 Habitat Sponge ................................................................
4
2.1.2 Morfologi Sponge ...........................................................
4
2.1.3 Reproduksi Sponge .........................................................
7
2.1.4 Klasifikasi Sponge ..........................................................
8
ix
Universitas Sumatera Utara
2.1.5 Sistematika Sponge Chalinula sp ...................................
9
2.2 Metode Ekstraksi ......................................................................
10
2.3 Uraian Kimia .............................................................................
11
2.3.1 Alkaloid ..........................................................................
11
2.3.2 Glikosida .........................................................................
12
2.3.3 Saponin ...........................................................................
12
2.3.4 Steroid/Triterpenoid ........................................................
13
2.4 Kromatografi ..............................................................................
14
2.4.1 Kromatografi Lapis Tipis ................................................
14
2.4.2 Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ...............................
16
2.4.3 KLT Dua Arah ................................................................
16
2.5 Spektrofotometri .......................................................................
17
2.5.1 Spektrofotometri sinar ultraviolet (UV) ..........................
17
2.5.2 Spektrofotometri Inframerah ..........................................
18
BAB III METODE PENELITIAN.................................................................
20
3.1 Alat dan Bahan ...........................................................................
20
3.1.1 Alat yang digunakan .......................................................
20
3.1.2 Bahan yang digunakan ....................................................
20
3.2 Penyiapan Sponge ....................................................................
21
3.2.1 Pengumpulan sponge ......................................................
21
3.2.2 Identifikasi sponge ..........................................................
21
3.2.3 Pengolahan sponge .........................................................
21
3.3 Pembuatan Larutan Pereaksi ....................................................
22
3.3.1 Larutan pereaksi asam klorida 2N ................................
22
3.3.2Larutan pereaksi Bouchardat ........................................
22
x
Universitas Sumatera Utara
3.3.3 Larutan pereaksi Mayer ................................................
22
3.3.4 Larutan pereaksi Dragendorff .......................................
22
3.3.5 Larutan pereaksi Molisch ..............................................
22
3.3.6 Larutan pereaksi besi (III) klorida 1% ...........................
22
3.3.7 Larutan pereaksi Liebermann-Burchard .......................
23
3.3.8 Larutan pereaksi air-kloroform .....................................
23
3.3.9 Larutan pereaksi timbal (II) asetat 0,4 N .......................
23
3.3.10 Larutan pereaksi kloralhidrat ........................................
23
3.4 Karakterisasi simplisia .............................................................
23
3.4.1 Pemeriksaan makroskopik ............................................
23
3.4.2 Pemeriksaan mikroskopik .............................................
23
3.4.3 Penetapan kadar air .......................................................
24
3.4.4 Penetapan kadar sari larut air ..........................................
24
3.4.5 Penetapan kadar sari larut etanol ....................................
25
3.4.6 Penetapan kadar abu total .............................................
25
3.4.7 Penetapan kadar abu tidak larut asam ….. .......................
25
3.5 Pemeriksaan Golongan Senyawa Kimia ..................................
25
3.5.1 Pemeriksaan alkaloida ..................................................
26
3.5.2 Pemeriksaan flavonoid ..................................................
26
3.5.3 Pemeriksaan saponin .....................................................
26
3.5.4 Pemeriksaan tanin .........................................................
26
3.5.5 Pemeriksaan glikosida ..................................................
27
3.5.6 Pemeriksaan steroid/triterpenoid .....................................
27
3.6 Pembuatan Ekstrak ..................................................................
28
3.7Analisis Ekstrak n-Heksan Secara KLT ..................................
28
xi
Universitas Sumatera Utara
3.8 Isolasi
Senyawa Steroid/TriterpenoidSecara KLT
Preparatif ...................................................................................
29
3.9 Uji Kemurnian Isolat ..................................................................
29
3.9.1 Uji kemurnian isolat secara KLT dua arah ......................
29
3.10 Identifikasi Isolat ........................................................................
30
3.10.1 Identifikasi isolat secara spektrofotometri UV ..............
30
3.10.2Identifikasi isolat secara spektrofotometri IR .................
30
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................
31
4.1 Identifikasi Sponge .................................................................
31
4.2 Karakterisasi Simplisia ...........................................................
31
4.2.1 Pemeriksaan makroskopik .............................................
31
4.2.2 Pemeriksaan mikroskopik ...............................................
31
4.2.3 Pemeriksaan karakterisasi simplisia ...............................
32
4.3 Pemeriksaan Golongan Senyawa Kimia .................................
33
4.4 Ekstraksi Serbuk Simplisia .....................................................
34
4.5 Analisis Ekstrak n-Heksan Secara KLT .................................
34
4.6 Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid .....................................
35
4.7 Uji kemurnian isolat secara KLT dua arah .............................
36
4.8 Identifikasi Isolat Secara Spektrofotometri Ultraviolet ..........
37
4.9 Identifikasi Isolat Secara Spektrofotometri Inframerah ..........
38
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN.........................................................
41
5.1 Kesimpulan .............................................................................
41
5.2 Saran ........................... ..............................................................
41
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................
42
LAMPIRAN ..................................................................................................
44
xii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
4.1 Hasil
pemeriksaan
karakterisasi simplisia dari sponge
Chalinula sp ....................................................................................... 32
4.2 Hasil pemeriksaan golongan senyawa kimia dari sponge
Chalinula sp ...................................................................................... 33
4.3 Hasil analisis spektrum inframerah ................................................... 40
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
2.1
Halaman
Tipe spikula ....................................................................................... 7
2.2 Struktur dasar steroid .......................................................................... 14
4.1
Kromatogram KLT ekstrak n-heksan sponge Chalinula sp
dengan fase gerak n-heksan-etilasetat ............................................... 34
4.2
Kromatogram hasilKLT preparatif .................................................... 35
4.3
Kromatogram isolat hasilKLT preparatif .......................................... 36
4.4
Kromatogram hasil KLT dua arah dari isolat murni ......................... 37
4.5
Spektrum ultraviolet dari isolat murni sponge Chalinula sp ............. 38
4.6
Spektrum inframerah dari isolat murni sponge Chalinula sp ............ 39
xiv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1 Identifikasi sponge ............................................................................... 44
2 Gambar sponge Chalinula sp ............................................................. 45
3 Gambar simplisia dan serbuk sponge Chalinula sp ........................... 46
4 Mikroskopik serbuk simplisia sponge Chalinulasp ........................... 47
5 Bagan kerja penelitian ......................................................................... 48
6 Bagan pembuatan ekstrak
n-heksan simplisia sponge
Chalinula sp ......................................................................................... 49
7 Perhitungan hasil penetapan kadar ......................................................
50
xv
Universitas Sumatera Utara
DAN IDENTIFIKASI SECARA SPEKTROFOTOMETRI
ULTRAVIOLET DAN INFRAMERAH
SKRIPSI
OLEH:
RIYANI
NIM 131524037
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI SPONGE Chalinula sp
DAN IDENTIFIKASI SECARA SPEKTROFOTOMETRI
ULTRAVIOLET DAN INFRAMERAH
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk mencapai
Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
RIYANI
NIM 131524037
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI SPONGE Chalinula sp
DAN IDENTIFIKASI SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET
DAN INFRAMERAH
yarat untuk memperolehgelar SarjOLEH:
RIYANI
NIM 131524037
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal : 25 Juli 2016
Disetujui Oleh:
Pembimbing I
Panitia Penguji,
Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt.
NIP 195112231980032002
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt.
NIP 195107231982032001
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt.
NIP 195107231982032001
Pembimbing II
Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt
NIP 195109081985031002
Dr. Panal Sitorus, M.Si., Apt.
NIP 195310301980031002
Popi Patilaya, M.Sc., Apt
NIP 197812052010121004
Medan, Agustus 2016
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah melimpahkan
rahmat dan anugerah-Nya sehingga penulis menyelesaikan skripsi ini yang
berjudul “Isolasi Steroid/Triterpenoid dari Sponge Chalinula Sp dan Identifikasi
secara Spektrofotometri Ultraviolet dan Inframerah”. Skripsi ini diajukan sebagai
salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara.
Penulis mengucapkan terimakasih kepada IbuDr. Masfria, M.S., Apt.,
selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah
memberikan bantuan dan fasilitas selama masa pendidikan. Ibu Dra.Aswita Hafni
LubisM.Si., Apt., (Almh.), Ibu Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt., dan Bapak Dr.
Panal Sitorus, M.Si., Apt., selaku pembimbing yang telah memberikan waktu,
bimbingan, motivasi dan nasihat selama penelitian dan penulisan skripsi ini
berlangsung. Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., Bapak Drs. Suryadi
Achmad, M.Sc., Apt., dan Bapak Popi Patilaya, M.Sc., Apt.,selaku dosen penguji
yang telah memberikan arahan, kritikan dan saran dalam penyusunan skripsi
ini.Bapak Prof. Dr. Karsono, Apt.,selaku pembimbing akademik yang selalu
memberikan bimbingan dan motivasi selama masa pendidikan serta Bapak dan
Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah
membimbing penulis selama masa pendidikan.
Penulismengucapkanterimakasih danpenghargaan yang tuluskepada Bapak
Sampe, Ibu Turisiyah dan Adik Gilang Raka atas doa dan dorongan baik moriil
maupun materiil dalam penyelesaian skripsi ini.
iv
Universitas Sumatera Utara
Penulis menyadari skripsi ini masih belum sempurna, oleh karena
itudiharapkan kritik dan saran yang membangun untuk penyempurnaannya.
Harapan saya semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan
kefarmasian.
.
Medan, Juli 2016
Penulis,
Riyani
NIM 131524037
v
Universitas Sumatera Utara
SURAT PERNYATAAN
Saya yang bertanda tangan di bawah ini,
Nama
: Riyani
Nomor Induk Mahasiswa
: 131524037
Program Studi
: S-1 Farmasi Ekstensi
: Isolasi
:
: Steroid/Triterpenoid Dari Sponge
Chalinula
Sp
Dan
Identifikasi
Secara
Spektrofotometri Ultraviolet Dan Inframerah
Judul skripsi
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari
hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri dan belum pernah diajukan orang lain
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di Perguruan Tinggi dan bukan plagiat
karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam
skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia
menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk
dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, Juli 2016
Yang membuat pernyataan,
Riyani
NIM 131524037
vi
Universitas Sumatera Utara
ISOLASI STEROID/TRITERPENOID DARI SPONGE Chalinula sp DAN
IDENTIFIKASI SECARA SPEKTROFOTOMETRI ULTRAVIOLET DAN
INFRAMERAH
ABSTRAK
Sponge merupakan biota laut yang mengandung senyawa metabolit
sekunder aktif sehingga berpotensi untuk dikembangkan dalam bidang
pengobatan. Senyawa metabolit sekunder yang umumnya terdapat di dalam
sponge yaitu alkaloid dan steroid/triterpenoid. Sponge mempunyai aktivitas
sitotoksik, antitumor, antivirus, antimikroba, antiinflamasi dan antikanker. Sponge
jenis Chalinula sp yang digunakan terdapat di Teluk Tapian Nauli Sibolga,
Kecamatan Paruiaha, Tapanuli Tengah provinsi Sumatera Utara. Tujuan
penelitian untuk mengetahui karakteristik simplisia, pemeriksaan golongan
senyawa kimia, isolasi dan identifikasi senyawa steroid/triterpenoid dari sponge
Chalinula sp.
Ekstraksi dilakukan secara perkolasi menggunakan pelarut n-heksan.
Ekstrak yang diperoleh dianalisis secara kromatografi lapis tipis (KLT) dengan
berbagai perbandingan fasegerakn-heksan-etilasetat dan sebagai penampak bercak
pereaksi Liebermann-Burchard (LB), dilanjutkan isolasi secara KLT preparatif.
Isolat yang diperoleh diuji kemurniannya secara KLT dua arah dan diidentifikasi
secara spektrofotometri UV dan IR.
Hasil karakteristik simplisia sponge diperoleh kadar air 3,33%, kadar sari
larut air 14,51%, kadar sari larut etanol 19,35%, kadar abu total 30,87% dan kadar
abu tidak larut asam 5,06%. Hasil pemeriksaan golongan senyawa kimia
menunjukkan adanya senyawa steroid/triterpenoid, alkaloid, glikosida dan
saponin. Hasil KLT preparatif dengan fase gerak (80:20) diperoleh isolat
berwarna merah ungu dan diuji kemurniannya secara KLT dua arah dengan harga
Rf 0,55. Hasil identifikasi isolat secara spektrofotometri UV diperoleh absorbansi
maksimum pada panjang gelombang 206,2 nm dan secara spektrofotometri IR
menunjukkan adanya gugus fungsi -OH, CH-alifatik, C≡C, C=C, -CH2 dan C-O.
Isolat yang diperoleh termasuk golongan senyawa triterpenoid.
Kata kunci: Sponge Chalinula sp, steroid/triterpenoid, spektrofotometri
ultraviolet dan inframerah.
vii
Universitas Sumatera Utara
ISOLATIONOF STEROIDS/TRITERPENOIDS COMPOUNDS
OFChalinula sp SPONGE AND IDENTIFICATION WITH ULTRAVIOLET
AND INFRARED SPECTROPHOTOMETRY
ABSTRACT
Sponge is marine life contains active secondary metabolites that could be
developed in the medical. Secondary metabolites compounds of sponge are
alkaloids and steroids/triterpenoids. Sponge have activities of cytotoxic,
antitumour, antiviral, antimicrobial, antiinflamatory and anticancer. Chalinula sp
sponge can be found in coastal waters in gulf of Tapian Nauli Sibolga, Kecamatan
Paruiaha, Tapanuli Tengah of North Sumatera. The aim of this research was to do
determined the characterization of dried materials, examination of chemical
compounds, isolation and identification of steroid/triterpenoid compounds of
sponge Chalinula sp.
Extraction was percolated with n-hexane solvent. Extracts were analyzed
by thin layer chromatography (TLC) withvariouscomparisons of mobile phase of
n-hexane-ethylacetate and used as reagent Liebermann- Burchard (LB), then
isolated using preparative TLC.Isolates tasted of purity with two wayTLC and
identified with UV and IR spectrophotometry.
The characterization results of Chalinula sp sponge dried materials
exhibited the water value 3.33%, water solubleextract value 14.51%,
ethanolsoluble extract value 19.35%,totalash value 30.87% and in acid insoluble
ash value 5.06%. The results of screening for chemical compounds
containsteroids/triterpenoids, alkaloids, glycosides and saponins presences. The
results of preparative TLC using mobile phase(80:20) obtained scarlet isolates and
tested purity with two way TLC obtained Rf 0.55. The results of isolates
identification
obtained
with
UV
spectrophotometry
exhibited
a
maximumabsorbanceat wavelength 206.2 nmand IR spectrophotometry exhibited
the presences OH, CH-aliphatic, C≡C, C=C,CH2, andC-O. These isolates was
triterpenoids compounds.
Key words: Chalinula sp sponge, steroid/triterpenoid, ultraviolet and infrared
spectrophotometry.
viii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ..........................................................................................................
i
HALAMAN JUDUL .....................................................................................
ii
LEMBAR PENGESAHAN ..........................................................................
iii
KATA PENGANTAR ..................................................................................
iv
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT ..............................................
vi
ABSTRAK ....................................................................................................
vii
ABSTRACT ...................................................................................................
viii
DAFTAR ISI ..................................................................................................
ix
DAFTAR TABEL .........................................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................
xv
BAB I PENDAHULUAN ..........................................................................
1
1.1 Latar Belakang .........................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah .................................................................
2
1.3 Hipotesis ..................................................................................
2
1.4 Tujuan Penelitian .....................................................................
3
1.5 Manfaat Penelitian ...................................................................
3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................
4
2.1 Uraian Hewan ...........................................................................
4
2.1.1 Habitat Sponge ................................................................
4
2.1.2 Morfologi Sponge ...........................................................
4
2.1.3 Reproduksi Sponge .........................................................
7
2.1.4 Klasifikasi Sponge ..........................................................
8
ix
Universitas Sumatera Utara
2.1.5 Sistematika Sponge Chalinula sp ...................................
9
2.2 Metode Ekstraksi ......................................................................
10
2.3 Uraian Kimia .............................................................................
11
2.3.1 Alkaloid ..........................................................................
11
2.3.2 Glikosida .........................................................................
12
2.3.3 Saponin ...........................................................................
12
2.3.4 Steroid/Triterpenoid ........................................................
13
2.4 Kromatografi ..............................................................................
14
2.4.1 Kromatografi Lapis Tipis ................................................
14
2.4.2 Kromatografi Lapis Tipis Preparatif ...............................
16
2.4.3 KLT Dua Arah ................................................................
16
2.5 Spektrofotometri .......................................................................
17
2.5.1 Spektrofotometri sinar ultraviolet (UV) ..........................
17
2.5.2 Spektrofotometri Inframerah ..........................................
18
BAB III METODE PENELITIAN.................................................................
20
3.1 Alat dan Bahan ...........................................................................
20
3.1.1 Alat yang digunakan .......................................................
20
3.1.2 Bahan yang digunakan ....................................................
20
3.2 Penyiapan Sponge ....................................................................
21
3.2.1 Pengumpulan sponge ......................................................
21
3.2.2 Identifikasi sponge ..........................................................
21
3.2.3 Pengolahan sponge .........................................................
21
3.3 Pembuatan Larutan Pereaksi ....................................................
22
3.3.1 Larutan pereaksi asam klorida 2N ................................
22
3.3.2Larutan pereaksi Bouchardat ........................................
22
x
Universitas Sumatera Utara
3.3.3 Larutan pereaksi Mayer ................................................
22
3.3.4 Larutan pereaksi Dragendorff .......................................
22
3.3.5 Larutan pereaksi Molisch ..............................................
22
3.3.6 Larutan pereaksi besi (III) klorida 1% ...........................
22
3.3.7 Larutan pereaksi Liebermann-Burchard .......................
23
3.3.8 Larutan pereaksi air-kloroform .....................................
23
3.3.9 Larutan pereaksi timbal (II) asetat 0,4 N .......................
23
3.3.10 Larutan pereaksi kloralhidrat ........................................
23
3.4 Karakterisasi simplisia .............................................................
23
3.4.1 Pemeriksaan makroskopik ............................................
23
3.4.2 Pemeriksaan mikroskopik .............................................
23
3.4.3 Penetapan kadar air .......................................................
24
3.4.4 Penetapan kadar sari larut air ..........................................
24
3.4.5 Penetapan kadar sari larut etanol ....................................
25
3.4.6 Penetapan kadar abu total .............................................
25
3.4.7 Penetapan kadar abu tidak larut asam ….. .......................
25
3.5 Pemeriksaan Golongan Senyawa Kimia ..................................
25
3.5.1 Pemeriksaan alkaloida ..................................................
26
3.5.2 Pemeriksaan flavonoid ..................................................
26
3.5.3 Pemeriksaan saponin .....................................................
26
3.5.4 Pemeriksaan tanin .........................................................
26
3.5.5 Pemeriksaan glikosida ..................................................
27
3.5.6 Pemeriksaan steroid/triterpenoid .....................................
27
3.6 Pembuatan Ekstrak ..................................................................
28
3.7Analisis Ekstrak n-Heksan Secara KLT ..................................
28
xi
Universitas Sumatera Utara
3.8 Isolasi
Senyawa Steroid/TriterpenoidSecara KLT
Preparatif ...................................................................................
29
3.9 Uji Kemurnian Isolat ..................................................................
29
3.9.1 Uji kemurnian isolat secara KLT dua arah ......................
29
3.10 Identifikasi Isolat ........................................................................
30
3.10.1 Identifikasi isolat secara spektrofotometri UV ..............
30
3.10.2Identifikasi isolat secara spektrofotometri IR .................
30
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .......................................................
31
4.1 Identifikasi Sponge .................................................................
31
4.2 Karakterisasi Simplisia ...........................................................
31
4.2.1 Pemeriksaan makroskopik .............................................
31
4.2.2 Pemeriksaan mikroskopik ...............................................
31
4.2.3 Pemeriksaan karakterisasi simplisia ...............................
32
4.3 Pemeriksaan Golongan Senyawa Kimia .................................
33
4.4 Ekstraksi Serbuk Simplisia .....................................................
34
4.5 Analisis Ekstrak n-Heksan Secara KLT .................................
34
4.6 Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid .....................................
35
4.7 Uji kemurnian isolat secara KLT dua arah .............................
36
4.8 Identifikasi Isolat Secara Spektrofotometri Ultraviolet ..........
37
4.9 Identifikasi Isolat Secara Spektrofotometri Inframerah ..........
38
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN.........................................................
41
5.1 Kesimpulan .............................................................................
41
5.2 Saran ........................... ..............................................................
41
DAFTAR PUSTAKA ....................................................................................
42
LAMPIRAN ..................................................................................................
44
xii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
4.1 Hasil
pemeriksaan
karakterisasi simplisia dari sponge
Chalinula sp ....................................................................................... 32
4.2 Hasil pemeriksaan golongan senyawa kimia dari sponge
Chalinula sp ...................................................................................... 33
4.3 Hasil analisis spektrum inframerah ................................................... 40
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
2.1
Halaman
Tipe spikula ....................................................................................... 7
2.2 Struktur dasar steroid .......................................................................... 14
4.1
Kromatogram KLT ekstrak n-heksan sponge Chalinula sp
dengan fase gerak n-heksan-etilasetat ............................................... 34
4.2
Kromatogram hasilKLT preparatif .................................................... 35
4.3
Kromatogram isolat hasilKLT preparatif .......................................... 36
4.4
Kromatogram hasil KLT dua arah dari isolat murni ......................... 37
4.5
Spektrum ultraviolet dari isolat murni sponge Chalinula sp ............. 38
4.6
Spektrum inframerah dari isolat murni sponge Chalinula sp ............ 39
xiv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1 Identifikasi sponge ............................................................................... 44
2 Gambar sponge Chalinula sp ............................................................. 45
3 Gambar simplisia dan serbuk sponge Chalinula sp ........................... 46
4 Mikroskopik serbuk simplisia sponge Chalinulasp ........................... 47
5 Bagan kerja penelitian ......................................................................... 48
6 Bagan pembuatan ekstrak
n-heksan simplisia sponge
Chalinula sp ......................................................................................... 49
7 Perhitungan hasil penetapan kadar ......................................................
50
xv
Universitas Sumatera Utara