Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Steroid Triterpenoid Dari Sponge Suberites diversicolor Becking & Lim
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA
STEROID/TRITERPENOID DARI SPONGE Suberites
diversicolor Becking & Lim
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
DEWI FRANSISKA SIAHAAN
NIM 121524197
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2015
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA
STEROID/TRITERPENOID DARI SPONGE Suberites
diversicolor Becking & Lim
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
DEWI FRANSISKA SIAHAAN
NIM 121524197
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2015
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah melimpahkan
rahmat dan anugerah-Nya sehingga penulis menyelesaikan skripsi ini yang
berjudul “Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Steroid/Triterpenoid Dari Sponge
Suberites diversicolor Becking & Lim”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu
syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara.
Penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi dan Ibu
Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si.,Apt., selaku Wakil Dekan I Fakultas Farmasi yang
telah memberikan fasilitas selama masa perkuliahan di Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara . Ibu Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt. dan Ibu
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt, selaku pembimbing yang telah memberikan waktu,
bimbingan, motivasi dan nasehat selama penelitian dan penulisan skripsi ini
berlangsung. Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., Ibu Dra. Herawaty Ginting,
M.Si., Apt. dan Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt. selaku dosen penguji
yang telah memberikan masukan, kritikan, arahan dan saran dalam penyusunan
skripsi ini. Ibu Kepala Laboratorium Fitokimia dan Staf-Staf Laboratorium
Fitokimia yang telah memberikan fasilitas dan petunjuk selama penelitian. Bapak
Hari Ronaldo Tanjung S.Si., M.Sc., Apt., selaku pembimbing akademis yang
selalu memberikan bimbingan dan motifasi selama masa pendidikan, serta Bapak
dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah
membimbing penulis selama masa pendidikan.
iv
Penulis mengucapkan terima kasih yang tak terhingga dan penghargaan
yang tulus kepada Ayahanda E. Siahaan, Alm Ibunda R. Rajagukguk, kakak,
abang, saya ucapkan terima kasih atas doa, dorongan dan pengorbanan baik moril
maupun materil dalam penyelesaian skripsi ini.
Penulis menyadari skripsi ini masih belum sempurna, oleh karena itu
diharapkan kritik dan saran yang membangun untuk penyempurnaannya. Harapan
saya semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan kefarmasian.
.
Medan, Juli 2015
Penulis,
Dewi Fransiska Siahaan
NIM 121524197
v
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA STEROID/TRITERPENOID
DARI SPONGE Suberites diversicolor Becking & Lim
ABSTRAK
Lautan Indonesia adalah bagian wilayah Indopasifik yang merupakan salah
satu pusat keanekaragaman biota laut terbesar di dunia. Salah satu contoh biota
laut adalah sponge. Sponge merupakan sumber senyawa bahan alam seperti
terpenoid, steroid dan alkaloid. Senyawa steroid/triterpenoid digunakan sebagai
obat kontrasepsi oral, antiinflamasi, antidiabetes, gangguan kulit dan kerusakan
hati. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karateristik simplisia,
mengisolasi senyawa steroid/triterpenoid dari sponge Suberites diversicolor
Becking & Lim dan mengidentifikasi isolat secara spektrofotometri ultraviolet
(UV) dan spektrofotometri inframerah (IR).
Serbuk simplisia sponge dilakukan karakterisasi dan pemeriksaan golongan
senyawa kimia kemudian diekstraksi secara maserasi dengan menggunakan cairan
penyari n-heksan. Maserat yang diperoleh dipekatkan dengan rotary evaporator
(±40oC), selanjutnya dianalisis secara kromatografi lapis tipis (KLT) dengan fase
gerak n-heksan-etilasetat dengan berbagai perbandingan dan sebagai penampak
bercak digunakan pereaksi Liebermann-Burchard (LB). Ekstrak n-heksan diisolasi
secara KLT preparatif mengggunakan fase gerak n-heksan-etilasetat selanjutnya
dilakukan uji kemurnian secara KLT satu arah dan KLT dua arah. Isolat yang
diperoleh diidentifikasi secara spektrofotometri UV dan spektrofotometri IR.
Hasil karakterisasi serbuk simplisia sponge diperoleh kadar air sebesar
2,65%, kadar sari yang larut dalam air 22,69%, kadar sari yang larut dalam etanol
16,5%, kadar abu total 25,58% dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 3,47%.
Hasil pemeriksaan senyawa kimia menunjukkan adanya senyawa golongan
steroid/triterpenoid, alkaloid, glikosida dan saponin. Hasil KLT ekstrak n-heksan
diperoleh fase gerak n-heksan-etilasetat (70:30) yang memberikan pemisahan
yang terbaik, hasil KLT preparatif diperoleh isolat murni Rf 0,64 berwarna merah
ungu dengan LB. Hasil identifikasi isolat secara spektrofotometri UVdiperoleh
absorbansi maksimum pada panjang gelombang 209,5 nm yang menunjukkkan
adanya gugus kromofor dan secara spektrofotometri IR menunjukkan adanya
gugus -OH, CH-alifatik, C=O, C=C, -CH2,-CH3 dan C-O.
Kata kunci: Sponge Suberites diversicolor Becking & Lim, Steroid/Triterpenoid,
Spektrofotometer ultraviolet dan inframerah.
vi
ISOLATION AND IDENTIFICATION OF COMPOUNDS
STEROID/TRITERPENOID OF SPONGE
Suberites diversicolor Becking & Lim
ABSTRACT
Indonesian seas are part Indopasifik region which is one of the centers of
diversity of marine life in the world. One example is amarine sponge. Sponge is a
source of compounds of natural materials such as terpenoid, steroid and alkaloid.
Compounds steroid/triterpenoid used as oral contraceptives, antiinflammatory,
antidiabetic, skin disorders and liver damage. The purpose of this study was to
determine the characteristics of crude drug, isolating the compounds
steroid/triterpenoid of sponge Suberites diversicolor Becking & Lim and identify
isolates by ultraviolet spectrophotometry (UV) and infrared spectrophotometry
(IR).
Simplicia sponge powder characterization and inspection group of
chemical compounds then extracted by maceratusing liquid n-hexane. Macerat
obtained was concentrated by rotaryevaporator (±40°C), then analyzed by thin
layer chromatography (TLC) with a mobile phase of n-hexane-ethylacetate with
various comparisons and used as reagent spotting Liebermann-Burchard (LB).
N-hexane extracts were isolated by preparative TLC use mobile phase n-hexaneethylacetate purity test is then performed by TLC one way and two way TLC.
Isolates were identified by UV and IR spectrophotometry.
Simplicia sponge powder characterization results obtained water content of
2.65%, the levels of water soluble extract 22.69%, levels of ethanol soluble
extract of 16.5%, total ash content of 25.58% and ash content insoluble 3.47%
acid. Test results indicate the presence of a compound chemical compound
steroid/triterpenoid, alkaloid, glycoside and saponin. TLC results obtained extract
n-hexane mobile phase n-hexane-ethylacetate (70:30) which gives the best
separation, the results obtained by preparative TLC Rf 0.64 isolate pure scarlet
with LB. Results UV spectrophotometry isolate identification shows maximum
absorbance obtained at a wavelength of 209.5 nm indicating the chromophore
group and IR spectrophotometry which the -OH, CH-aliphatic, C=O, C=C, -CH2,
-CH3 and C-O.
Key words: Sponge Suberites diversicolor Becking & Lim, Steroid/Triterpenoid,
Ultraviolet and Inframerah spectrophotometer.
vii
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL .....................................................................................................
i
HALAMAN JUDUL ................................................................................
ii
PENGESAHAN SKRIPSI .......................................................................
iii
KATA PENGANTAR .............................................................................
iv
ABSTRAK ................................................................................................
vi
ABSTRACT ..............................................................................................
vii
DAFTAR ISI ............................................................................................
viii
DAFTAR TABEL ....................................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR ...............................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN .............................................................................
xv
BAB I PENDAHULUAN ......................................................................
1
1.1 Latar Belakang .....................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah .............................................................
3
1.3 Hipotesis ...............................................................................
3
1.4 Tujuan Penelitian .................................................................
4
1.5 Manfaat Penelitian ...............................................................
4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..............................................................
5
2.1 Uraian Hewan ........................................................................
5
2.1.1 Habitat ..........................................................................
5
2.1.2 Morfologi dan anatomi .................................................
5
2.1.3 Reproduksi ....................................................................
10
2.1.4 Klasifikasi sponge .........................................................
11
viii
2.1.5 Sponge Suberites diversicolor Becking & Lim ...........
12
2.2 Uraian Kandungan ................................................................
12
2.2.1 Alkaloid .......................................................................
12
2.2.2 Glikosida .....................................................................
13
2.2.3 Saponin ........................................................................
14
2.2.4 Steroid/triterpenoid .....................................................
14
2.3 Metode Ekstraksi ..................................................................
16
2.4 Kromatografi ........................................................................
18
2.4.1 Kromatografi lapis tipis ..............................................
19
2.4.2 Kromatografi lapis tipis preparatif ..............................
20
2.4.3 Kromatografi lapis tipis dua arah ................................
22
2.5 Spektofotometer ..................................................................
23
2.5.1 Spektomotometer ultraviolet ......................................
23
2.5.2 Spektrofotometer inframerah .....................................
24
BAB III METODE PENELITIAN ...........................................................
25
3.1 Alat-alat yang digunakan .....................................................
25
3.2 Bahan-bahan yang digunakan ..............................................
25
3.3 Penyiapan Sampel ................................................................
26
3.3.1 Pengumpulan sponge .................................................
26
3.3.2 Identifikasi sponge ......................................................
26
3.3.3 Pengelolahan sponge ...................................................
26
3.4 Pembuatan Larutan Pereaksi ................................................
27
3.4.1 Larutan pereaksi asam klorida 2 N .............................
27
3.4.2 Larutan pereaksi natrium hidroksida 2 N ....................
27
ix
3.4.3 Larutan pereaksi Bouchardat .......................................
27
3.4.4 Larutan pereaksi Mayer ...............................................
27
3.4.5 Larutan pereaksi Dragendroff ......................................
27
3.4.6 Larutan pereaksi Liebermann-Burchard ......................
28
3.4.7 Larutan pereaksi besi (III) klorida 1% .........................
28
3.4.8 Larutan pereaksi air-kloroform ....................................
28
3.4.9 Larutan pereaksi Molish ..............................................
28
3.4.10 Larutan pereaksi timbal (II) asetat 0,4 N .....................
28
3.4.11 Larutan pereaksi asam nitrat 0,5 N ...............................
28
3.4.12 Larutan kloralhidrat .....................................................
28
3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia .....................................
29
3.5.1 Pemeriksaan makroskopik ...........................................
29
3.5.2 Pemeriksaan mikroskopik ............................................
29
3.5.3 Penetapan kadar air ......................................................
29
3.5.4 Penetapan kadar sari yang larut dalam air ...................
30
3.5.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol .............
30
3.5.6 Penetapan kadar abu total ............................................
31
3.5.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam ......
31
3.6 Pemeriksaan Senyawa Kimia ..................................................
31
3.6.1 Pemeriksaan alkaloid ...................................................
31
3.6.2 Pemeriksaan flavonoid ................................................
32
3.6.3 Pemeriksaan saponin ...................................................
32
3.6.4 Pemeriksaan tanin ........................................................
32
3.6.5 Pemeriksaan glikosida .................................................
32
x
3.6.6 Pemeriksaansteroid/triterpenoid ..............................
33
3.7 Pembuatan Ekstrak .............................................................
33
3.8 Analisis Ekstrak n-Heksan Secara KLT..............................
34
3.9 Pemisahan Isolat Secara KLT Preparatif ..........................
34
3.10 Uji Kemurnian ....................................................................
35
3.10.1 Uji kemurnian isolat secara KLT satu arah .............
35
3.10.2 Uji kemurnian isolat secara KLT dua arah .............
36
3.11 Identifikasi Isolat ................................................................
37
3.11.1 Identifikasi isolat secara spektrofotometri UV ........
37
3.11.2 Identifikasi isolat secara spektrofotometri IR .........
37
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .................................................
38
4.1 Hasil Identifikasi Sponge ...................................................
38
4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia .............................................
38
4.2.1 Pemeriksaan makroskopik ........................................
38
4.2.2 Pemeriksaan mikroskopik .........................................
38
4.2.3 Hasil pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia .....
39
4.3
Hasil Pemeriksaan Senyawa Kimia ....................................
40
4.4
Hasil Ekstraksi Serbuk Simplisia ........................................
42
4.5
Hasil Analisis Ekstrak n-Heksan Secara KLT ....................
42
4.6
Hasil Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid ........................
43
4.7 Hasil Identifikasi Isolat Secara Spektrofotometri UV Dan
Spektrofotometri Inframerah ..............................................
44
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................
45
5.1 Kesimpulan ..........................................................................
45
5.2
45
Saran ....................................................................................
xi
DAFTAR PUSTAKA ..............................................................................
46
LAMPIRAN .............................................................................................
49
xii
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
4.1 Hasil pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia dari sponge
Suberites diversicolor Becking & Lim ........................................
39
4.2 Hasil pemeriksaan senyawa kimia dari sponge Suberites
Becking & Lim .............................................................................
40
4.3 Harga Rf analisis KLT ekstrak n-heksan dari sponge Suberites
diversicolor Becking & Lim ........................................................
42
4.4 Hasil analisis spektrum inframerah ..............................................
45
xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1
Struktur tubuh sponge ..............................................................
7
2.2
Tipe aliran air pada porifera .....................................................
8
2.3
Tipe spikula ..............................................................................
9
2.4
Megasklera monoaxon .............................................................
9
2.5
Tipe mikrosklera ......................................................................
10
2.6
Struktur kimia isopren ..............................................................
14
2.7
Contoh struktur kimia triterpenoid ...........................................
15
2.8
Struktur steroid dan sistem penomorannya ..............................
15
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1.
Identifikasi sponge ................................................................
49
2.
Gambar sponge Suberites diversicolor Becking & Lim ........
50
3.
Gambar simplisia dan serbuk simplisia sponge Suberites
diversicolor Becking & Lim ...................................................
51
Mikroskopik serbuk simplisia sponge Suberites diversicolor
Becking & Lim .......................................................................
53
5.
Bagan kerja penelitian ............................................................
54
6.
Bagan pembuatan ekstrak n-heksan simplisia sponge
Suberites diversicolor Becking & Lim ..................................
55
Bagan isolasi senyawa steroid/triterpenoid dari ekstrak
n-heksan Suberites diversicolor Becking & Lim ...................
56
Kromatogram KLT ekstrak n-heksan sponge Suberites
diversicolor Becking & Lim ..................................................
57
9.
Kromatogram hasil KLT preparatif .......................................
58
10.
Kromatogram isolat hasil KLT preparatif ..............................
59
11.
Kromatogram hasil KLT dua arah dari isolat murni .............
60
12.
Spektrum ultraviolet dari isolat murni sponge Suberites
diversicolor Becking & Lim ..................................................
61
Spektrum IR dari isolat murni sponge Suberites diversicolor
Becking & Lim .......................................................................
Perhitungan hasil penetapan kadar ..........................................
62
63
4.
7.
8.
13.
14.
xv
STEROID/TRITERPENOID DARI SPONGE Suberites
diversicolor Becking & Lim
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
DEWI FRANSISKA SIAHAAN
NIM 121524197
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2015
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA
STEROID/TRITERPENOID DARI SPONGE Suberites
diversicolor Becking & Lim
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
DEWI FRANSISKA SIAHAAN
NIM 121524197
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2015
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa yang telah melimpahkan
rahmat dan anugerah-Nya sehingga penulis menyelesaikan skripsi ini yang
berjudul “Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Steroid/Triterpenoid Dari Sponge
Suberites diversicolor Becking & Lim”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu
syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara.
Penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi dan Ibu
Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si.,Apt., selaku Wakil Dekan I Fakultas Farmasi yang
telah memberikan fasilitas selama masa perkuliahan di Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara . Ibu Dra. Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt. dan Ibu
Dra. Suwarti Aris, M.Si., Apt, selaku pembimbing yang telah memberikan waktu,
bimbingan, motivasi dan nasehat selama penelitian dan penulisan skripsi ini
berlangsung. Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt., Ibu Dra. Herawaty Ginting,
M.Si., Apt. dan Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt. selaku dosen penguji
yang telah memberikan masukan, kritikan, arahan dan saran dalam penyusunan
skripsi ini. Ibu Kepala Laboratorium Fitokimia dan Staf-Staf Laboratorium
Fitokimia yang telah memberikan fasilitas dan petunjuk selama penelitian. Bapak
Hari Ronaldo Tanjung S.Si., M.Sc., Apt., selaku pembimbing akademis yang
selalu memberikan bimbingan dan motifasi selama masa pendidikan, serta Bapak
dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah
membimbing penulis selama masa pendidikan.
iv
Penulis mengucapkan terima kasih yang tak terhingga dan penghargaan
yang tulus kepada Ayahanda E. Siahaan, Alm Ibunda R. Rajagukguk, kakak,
abang, saya ucapkan terima kasih atas doa, dorongan dan pengorbanan baik moril
maupun materil dalam penyelesaian skripsi ini.
Penulis menyadari skripsi ini masih belum sempurna, oleh karena itu
diharapkan kritik dan saran yang membangun untuk penyempurnaannya. Harapan
saya semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi ilmu pengetahuan kefarmasian.
.
Medan, Juli 2015
Penulis,
Dewi Fransiska Siahaan
NIM 121524197
v
ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA STEROID/TRITERPENOID
DARI SPONGE Suberites diversicolor Becking & Lim
ABSTRAK
Lautan Indonesia adalah bagian wilayah Indopasifik yang merupakan salah
satu pusat keanekaragaman biota laut terbesar di dunia. Salah satu contoh biota
laut adalah sponge. Sponge merupakan sumber senyawa bahan alam seperti
terpenoid, steroid dan alkaloid. Senyawa steroid/triterpenoid digunakan sebagai
obat kontrasepsi oral, antiinflamasi, antidiabetes, gangguan kulit dan kerusakan
hati. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karateristik simplisia,
mengisolasi senyawa steroid/triterpenoid dari sponge Suberites diversicolor
Becking & Lim dan mengidentifikasi isolat secara spektrofotometri ultraviolet
(UV) dan spektrofotometri inframerah (IR).
Serbuk simplisia sponge dilakukan karakterisasi dan pemeriksaan golongan
senyawa kimia kemudian diekstraksi secara maserasi dengan menggunakan cairan
penyari n-heksan. Maserat yang diperoleh dipekatkan dengan rotary evaporator
(±40oC), selanjutnya dianalisis secara kromatografi lapis tipis (KLT) dengan fase
gerak n-heksan-etilasetat dengan berbagai perbandingan dan sebagai penampak
bercak digunakan pereaksi Liebermann-Burchard (LB). Ekstrak n-heksan diisolasi
secara KLT preparatif mengggunakan fase gerak n-heksan-etilasetat selanjutnya
dilakukan uji kemurnian secara KLT satu arah dan KLT dua arah. Isolat yang
diperoleh diidentifikasi secara spektrofotometri UV dan spektrofotometri IR.
Hasil karakterisasi serbuk simplisia sponge diperoleh kadar air sebesar
2,65%, kadar sari yang larut dalam air 22,69%, kadar sari yang larut dalam etanol
16,5%, kadar abu total 25,58% dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 3,47%.
Hasil pemeriksaan senyawa kimia menunjukkan adanya senyawa golongan
steroid/triterpenoid, alkaloid, glikosida dan saponin. Hasil KLT ekstrak n-heksan
diperoleh fase gerak n-heksan-etilasetat (70:30) yang memberikan pemisahan
yang terbaik, hasil KLT preparatif diperoleh isolat murni Rf 0,64 berwarna merah
ungu dengan LB. Hasil identifikasi isolat secara spektrofotometri UVdiperoleh
absorbansi maksimum pada panjang gelombang 209,5 nm yang menunjukkkan
adanya gugus kromofor dan secara spektrofotometri IR menunjukkan adanya
gugus -OH, CH-alifatik, C=O, C=C, -CH2,-CH3 dan C-O.
Kata kunci: Sponge Suberites diversicolor Becking & Lim, Steroid/Triterpenoid,
Spektrofotometer ultraviolet dan inframerah.
vi
ISOLATION AND IDENTIFICATION OF COMPOUNDS
STEROID/TRITERPENOID OF SPONGE
Suberites diversicolor Becking & Lim
ABSTRACT
Indonesian seas are part Indopasifik region which is one of the centers of
diversity of marine life in the world. One example is amarine sponge. Sponge is a
source of compounds of natural materials such as terpenoid, steroid and alkaloid.
Compounds steroid/triterpenoid used as oral contraceptives, antiinflammatory,
antidiabetic, skin disorders and liver damage. The purpose of this study was to
determine the characteristics of crude drug, isolating the compounds
steroid/triterpenoid of sponge Suberites diversicolor Becking & Lim and identify
isolates by ultraviolet spectrophotometry (UV) and infrared spectrophotometry
(IR).
Simplicia sponge powder characterization and inspection group of
chemical compounds then extracted by maceratusing liquid n-hexane. Macerat
obtained was concentrated by rotaryevaporator (±40°C), then analyzed by thin
layer chromatography (TLC) with a mobile phase of n-hexane-ethylacetate with
various comparisons and used as reagent spotting Liebermann-Burchard (LB).
N-hexane extracts were isolated by preparative TLC use mobile phase n-hexaneethylacetate purity test is then performed by TLC one way and two way TLC.
Isolates were identified by UV and IR spectrophotometry.
Simplicia sponge powder characterization results obtained water content of
2.65%, the levels of water soluble extract 22.69%, levels of ethanol soluble
extract of 16.5%, total ash content of 25.58% and ash content insoluble 3.47%
acid. Test results indicate the presence of a compound chemical compound
steroid/triterpenoid, alkaloid, glycoside and saponin. TLC results obtained extract
n-hexane mobile phase n-hexane-ethylacetate (70:30) which gives the best
separation, the results obtained by preparative TLC Rf 0.64 isolate pure scarlet
with LB. Results UV spectrophotometry isolate identification shows maximum
absorbance obtained at a wavelength of 209.5 nm indicating the chromophore
group and IR spectrophotometry which the -OH, CH-aliphatic, C=O, C=C, -CH2,
-CH3 and C-O.
Key words: Sponge Suberites diversicolor Becking & Lim, Steroid/Triterpenoid,
Ultraviolet and Inframerah spectrophotometer.
vii
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL .....................................................................................................
i
HALAMAN JUDUL ................................................................................
ii
PENGESAHAN SKRIPSI .......................................................................
iii
KATA PENGANTAR .............................................................................
iv
ABSTRAK ................................................................................................
vi
ABSTRACT ..............................................................................................
vii
DAFTAR ISI ............................................................................................
viii
DAFTAR TABEL ....................................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR ...............................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN .............................................................................
xv
BAB I PENDAHULUAN ......................................................................
1
1.1 Latar Belakang .....................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah .............................................................
3
1.3 Hipotesis ...............................................................................
3
1.4 Tujuan Penelitian .................................................................
4
1.5 Manfaat Penelitian ...............................................................
4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..............................................................
5
2.1 Uraian Hewan ........................................................................
5
2.1.1 Habitat ..........................................................................
5
2.1.2 Morfologi dan anatomi .................................................
5
2.1.3 Reproduksi ....................................................................
10
2.1.4 Klasifikasi sponge .........................................................
11
viii
2.1.5 Sponge Suberites diversicolor Becking & Lim ...........
12
2.2 Uraian Kandungan ................................................................
12
2.2.1 Alkaloid .......................................................................
12
2.2.2 Glikosida .....................................................................
13
2.2.3 Saponin ........................................................................
14
2.2.4 Steroid/triterpenoid .....................................................
14
2.3 Metode Ekstraksi ..................................................................
16
2.4 Kromatografi ........................................................................
18
2.4.1 Kromatografi lapis tipis ..............................................
19
2.4.2 Kromatografi lapis tipis preparatif ..............................
20
2.4.3 Kromatografi lapis tipis dua arah ................................
22
2.5 Spektofotometer ..................................................................
23
2.5.1 Spektomotometer ultraviolet ......................................
23
2.5.2 Spektrofotometer inframerah .....................................
24
BAB III METODE PENELITIAN ...........................................................
25
3.1 Alat-alat yang digunakan .....................................................
25
3.2 Bahan-bahan yang digunakan ..............................................
25
3.3 Penyiapan Sampel ................................................................
26
3.3.1 Pengumpulan sponge .................................................
26
3.3.2 Identifikasi sponge ......................................................
26
3.3.3 Pengelolahan sponge ...................................................
26
3.4 Pembuatan Larutan Pereaksi ................................................
27
3.4.1 Larutan pereaksi asam klorida 2 N .............................
27
3.4.2 Larutan pereaksi natrium hidroksida 2 N ....................
27
ix
3.4.3 Larutan pereaksi Bouchardat .......................................
27
3.4.4 Larutan pereaksi Mayer ...............................................
27
3.4.5 Larutan pereaksi Dragendroff ......................................
27
3.4.6 Larutan pereaksi Liebermann-Burchard ......................
28
3.4.7 Larutan pereaksi besi (III) klorida 1% .........................
28
3.4.8 Larutan pereaksi air-kloroform ....................................
28
3.4.9 Larutan pereaksi Molish ..............................................
28
3.4.10 Larutan pereaksi timbal (II) asetat 0,4 N .....................
28
3.4.11 Larutan pereaksi asam nitrat 0,5 N ...............................
28
3.4.12 Larutan kloralhidrat .....................................................
28
3.5 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia .....................................
29
3.5.1 Pemeriksaan makroskopik ...........................................
29
3.5.2 Pemeriksaan mikroskopik ............................................
29
3.5.3 Penetapan kadar air ......................................................
29
3.5.4 Penetapan kadar sari yang larut dalam air ...................
30
3.5.5 Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol .............
30
3.5.6 Penetapan kadar abu total ............................................
31
3.5.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam ......
31
3.6 Pemeriksaan Senyawa Kimia ..................................................
31
3.6.1 Pemeriksaan alkaloid ...................................................
31
3.6.2 Pemeriksaan flavonoid ................................................
32
3.6.3 Pemeriksaan saponin ...................................................
32
3.6.4 Pemeriksaan tanin ........................................................
32
3.6.5 Pemeriksaan glikosida .................................................
32
x
3.6.6 Pemeriksaansteroid/triterpenoid ..............................
33
3.7 Pembuatan Ekstrak .............................................................
33
3.8 Analisis Ekstrak n-Heksan Secara KLT..............................
34
3.9 Pemisahan Isolat Secara KLT Preparatif ..........................
34
3.10 Uji Kemurnian ....................................................................
35
3.10.1 Uji kemurnian isolat secara KLT satu arah .............
35
3.10.2 Uji kemurnian isolat secara KLT dua arah .............
36
3.11 Identifikasi Isolat ................................................................
37
3.11.1 Identifikasi isolat secara spektrofotometri UV ........
37
3.11.2 Identifikasi isolat secara spektrofotometri IR .........
37
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .................................................
38
4.1 Hasil Identifikasi Sponge ...................................................
38
4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia .............................................
38
4.2.1 Pemeriksaan makroskopik ........................................
38
4.2.2 Pemeriksaan mikroskopik .........................................
38
4.2.3 Hasil pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia .....
39
4.3
Hasil Pemeriksaan Senyawa Kimia ....................................
40
4.4
Hasil Ekstraksi Serbuk Simplisia ........................................
42
4.5
Hasil Analisis Ekstrak n-Heksan Secara KLT ....................
42
4.6
Hasil Isolasi Senyawa Steroid/Triterpenoid ........................
43
4.7 Hasil Identifikasi Isolat Secara Spektrofotometri UV Dan
Spektrofotometri Inframerah ..............................................
44
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ...................................................
45
5.1 Kesimpulan ..........................................................................
45
5.2
45
Saran ....................................................................................
xi
DAFTAR PUSTAKA ..............................................................................
46
LAMPIRAN .............................................................................................
49
xii
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
4.1 Hasil pemeriksaan karakterisasi serbuk simplisia dari sponge
Suberites diversicolor Becking & Lim ........................................
39
4.2 Hasil pemeriksaan senyawa kimia dari sponge Suberites
Becking & Lim .............................................................................
40
4.3 Harga Rf analisis KLT ekstrak n-heksan dari sponge Suberites
diversicolor Becking & Lim ........................................................
42
4.4 Hasil analisis spektrum inframerah ..............................................
45
xiii
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1
Struktur tubuh sponge ..............................................................
7
2.2
Tipe aliran air pada porifera .....................................................
8
2.3
Tipe spikula ..............................................................................
9
2.4
Megasklera monoaxon .............................................................
9
2.5
Tipe mikrosklera ......................................................................
10
2.6
Struktur kimia isopren ..............................................................
14
2.7
Contoh struktur kimia triterpenoid ...........................................
15
2.8
Struktur steroid dan sistem penomorannya ..............................
15
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1.
Identifikasi sponge ................................................................
49
2.
Gambar sponge Suberites diversicolor Becking & Lim ........
50
3.
Gambar simplisia dan serbuk simplisia sponge Suberites
diversicolor Becking & Lim ...................................................
51
Mikroskopik serbuk simplisia sponge Suberites diversicolor
Becking & Lim .......................................................................
53
5.
Bagan kerja penelitian ............................................................
54
6.
Bagan pembuatan ekstrak n-heksan simplisia sponge
Suberites diversicolor Becking & Lim ..................................
55
Bagan isolasi senyawa steroid/triterpenoid dari ekstrak
n-heksan Suberites diversicolor Becking & Lim ...................
56
Kromatogram KLT ekstrak n-heksan sponge Suberites
diversicolor Becking & Lim ..................................................
57
9.
Kromatogram hasil KLT preparatif .......................................
58
10.
Kromatogram isolat hasil KLT preparatif ..............................
59
11.
Kromatogram hasil KLT dua arah dari isolat murni .............
60
12.
Spektrum ultraviolet dari isolat murni sponge Suberites
diversicolor Becking & Lim ..................................................
61
Spektrum IR dari isolat murni sponge Suberites diversicolor
Becking & Lim .......................................................................
Perhitungan hasil penetapan kadar ..........................................
62
63
4.
7.
8.
13.
14.
xv