Isolasi Dan Identifikasi Senyawa Flavonoida Dalam Herba Pugun Tanoh (Curanga Fel-Terrae (Lour.) Merr)

Lampiran 1.HasilIdentifikasi Tumbuhan

48
Universitas Sumatera Utara

49
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Bagan Kerja Penelitian
Herba Pugun Tanoh
Dicuci
Disortir
Ditiriskan lalu ditimbang
Sortasi kering
Dikeringkan hingga kering
Simplisia
Diserbuk
Serbuk simplisia herba pugun tanoh
Dikarakterisasi
Ditimbang serbuk simplisia
Diekstraksi dengan etil asetat

Ampas etil asetat

Ekstrak Etil Asetat

Diisolasi dengan kromatografi kolom dan KLT
Diisolasi dengan preparatif dan KLT
beberapa fase gerak
Isolat
Diidentifikasi secara
spektrofotometri UV dan IR
Spektrum

50
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Tumbuhan Herba Pugun Tanoh Segar

Gambar 1. Tanaman pugun tanoh

Gambar 2. Daun pugun tanoh

51
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. Simplis
lisia herba pugun tanoh dan serbuk simplisia herba
her pugun tanoh

G
Gambar
3. Simplisia daun pugun tanoh

Gamb
mbar 4. Serbuk simplisia herba pugun tanoh
oh

52
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Bagiann m
mikroskopik dari simplisia herba pugun tanoh
noh

a

b
ac
d
e
f
g
h
i

Gambar
ar 5. Mikroskopik simplisia herba pugun tanoh
tan

Keterangan:

oksalat bentuk prisma
a. Kristal kalsium oks
b. Tulang daun
c. Rambut berkelenja
njar
d. Pembuluh angkut
kut bentuk
be
spiral
e. Stomata tipe anom
nomositik
f. lStomata tipe diasitik
dias
g. Sel tetangga
h. Epidermis bergari
aris
i. Trikoma
(Sinulingga; 2015).

53

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. Bagan skrining fitokimia dan karakterisasi simplisia
Herba pugun tanoh
Dicuci
Ditiriskan
Pemeriksaan makroskopik
Dikeringkan (diangin-anginkan)
Simplisia
Dihaluskan
Serbuk Simplisia

Skrining
Fitokimia

- Alkaloida
- Flavonoida
- Saponin
- Tanin
- Glikosida

- Antrakuinon
- Steroida/Triterpenoida

Karakterisasi
Simplisia

PembuatanEkstra
k

- Pemeriksaan Mikroskopik
- Pemeriksaan Makroskopik
- Penetapan kadar air
- Penetapan kadar sari yang larut dalam etanol
- Penetapan kadar sari yang larut dalam air
- Penetapan kadar abu total
- Penetapan kadar abu yang tidak larut
dalamasam

54
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7. Bagan pembuatan ekstrak etil asetat herba pugun tanoh

Serbuk Simplisia
Dimaserasi dengan pelarut etil asetat
dalam wadah gelap sampai terendam
selama 2 hari sambil sesekali diaduk
Disaring

Ampas

Maserat I
Dimaserasi dengan etil asetat
dan dibiarkan selama 2 hari
Disaring

Maserat II

Ampas
Dimaserasi dengan etil asetat

dan dibiarkan selama 2 hari
Disaring

Maserat III

Ampas
Dikumpulkan
Diuapkan dengan
rotary evaporator
dengan suhu ± 40ºC

Ekstrak kental etil asetat

55
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8. BaganIsolasi senyawa flavonoid dari herba pugun tanoh
Ekstrak Etil
asetat
Dikromatografi Kolom dengan fase gerak

n-heksana-etilasetat dan fase diam silika gel 60 H
Eluat
(31)
Dilakukan pengujian KLT
Diamati dengan sinar UV 366 nm
Eluat yang sama digabung

E1

E2

E7

E8

E9

E19

E20

E11

E10

E21

E12

E22

E13

E23

E24

E15

E14

E25

E26

E16

E27

E17

E28

E18

E29

Di uji KLT preparatif
Fluoresensi
dikerok
Isolat
Direndam dengan metanol 20 ml
Disaring

Residu

Filtrat
Dicuci dengan metanol
Isolat
KLT beberapa fase gerak
Satu noda
Isolat murni
Diidentifikasi secara UV dan IR
Spektrum
56
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. Perhitungan hasil penetapan kadar air

Kadar air =

volumeair (ml)

x 100%

beratsampel (g)

1. Sampel 1
Berat sampel

= 5,124 g

Volume air

= 0,4 ml

Kadar air

=

,

100%

,

= 7,806%
2. Sampel 2
Berat sampel

= 5,108 g

Volume air

= 0,4 ml

Kadar air

=

,

100%

,

= 7,83%
3. Sampel 3
Berat sampel

= 5,118 g

Volume air

= 0,4 ml

Kadar air

=

,
,

100%

= 7,815%
Kadar air rata – rata

=

,

%

, !%

,

%

!

= 7,817%

57
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10. Perhitungan hasil penetapan kadar sari yang larut dalam air
Kadar sari larut dalam air =

berat sari
berat simplisia

x

x 100%

1. Kadar sari larut dalam air I
Berat cawan

= 43,323 g

Berat cawan + berat sari

= 43,462 g

Berat sampel

= 5,003 g

Berat sari

= 0,139 g

Kadar sari larut dalam air

=

, !"
,

x

"

x 100%

= 13,89%
2. Kadar sari larut dalam air II
Berat cawan

= 43,149 g

Berat cawan + berat sari

= 43,276 g

Berat sampel

= 5,002 g

Berat sari

= 0,127 g

Kadar sari larut dalam air

=

,

x

,

x 100%

= 12,69%
3. Kadar sari larut dalam air III
Berat cawan

= 43,223 g

Berat cawan + berat sari

= 43,300 g

Berat sampel

= 5,001 g

Berat sari

= 0,077 g

Kadar sari larut dalam air

=

,

x

,

x 100%

= 13,29%
Kadar sari larut dalam air rata – rata =

!, "%

, "%

!, "%

!

= 13,29%

58
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. Perhitungan hasil penetapan kadar sari yang larut dalam etanol

Kadar sari larut dalam etanol

=

berat sari
berat simplisia

x

x 100%

1. Kadar sari larut dalam etanol I
Berat Cawan

= 47,837 g

Berat Cawan + Berat Sari

= 47,921 g

Berat Sampel

= 5,001 g

Berat sari

= 0,084 g

Kadar sari larut dalam etanol

=

,

x

,

x 100%

=8,39%
2. Kadar sari larut dalam etanol II
Berat Cawan

= 45,194 g

Berat Cawan + Berat Sari

= 45,301 g

Berat Sampel

= 5,003 g

Berat sari

= 0,107 g

Kadar sari larut dalam etanol

=

.
,

!

x

x100%

=10,69%
3. Kadar sari larut dalam etanol III
Berat Cawan

= 46,273 g

Berat Cawan + Berat Sari

= 47,001 g

Berat Sampel

= 5,002 g

Berat sari

= 0.728 g

Kadar sari larut dalam etanol

=

,

x

,

x 100%

=7,27%
Kadar sari larut dalam etanol rata-rata =

,!"%

, "%

,

%

!

= 8,78%

59
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 12. Perhitungan hasil penetapan kadar abu total
Kadar abu total

=

berat abu

x 100%

berat simplisia

1. Sampel I
Berat simplisia

= 2,010 g

Berat abu

= 0,197 g

Kadar abu total

=

, "

x100%

,

= 9,801%
2. Sampel II
Berat simplisia

= 2,003 g

Berat abu

= 0,202 g

Kadar abu total

=

,
,

!

x100%

= 10,085%
3.Sampel III
Berat simplisia

= 2,013 g

Berat abu

= 0,82 g

Kadar abu total

=

,
,

!

x100%

= 10,43%
Kadar abu total rata-rata

=

",

%

,

%

, !%

!

= 10,335%

60
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 13. Perhitungan hasil penetapan kadar abu tidak larut dalam asam
Kadar abu tidak larut dalam asam

=

berat abu
berat simplisia

x100%

1. Sampel I
Berat simplisia

= 2,010 g

Berat abu

= 0,052 g

Kadar abu tidak larut asam

=

,

x 100%

,

= 2,59%
2. Sampel II
Berat simplisia

= 2,003 g

Berat abu

= 0,035 g

Kadar abu tidak larut asam

=

, !
,

!

100%

= 1,75%
3.Sampel III
Berat simplisia

= 2,013 g

Berat abu

= 0,03 g

Kadar abu tidak larut asam

=

, !
,

!

x 100%

= 1,49%
Kadar abu tidak larut asam rata-rata=

, "%

,

%

, "%

!

= 1,943%

61
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14. Kromatogram dari ektrak etil asetat herba pogun tanoh dengan
fase gerak n-heksana-etil asetat

bp

tp

80:20

70:30

60:40

50:50

40:60

Keterangan: Fase diam silika gel GF254, fase gerak n-heksana-etil asetat,
penampak bercak sinar UV 366 nm, tp = titik penotolan, bp = batas
pengembangan.

62
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 15. Kromatogram KLT dari hasil fraksinasi Kolom
bp

tp

1

2

3

4

5

6

7

8

9

10

11

12 13 14

15

16

17 18

19

bp

tp

20

21

22

23

24

25

26

27

28

29

30

31

Keterangan: Fase diam silika gel GF254, fase gerak n-heksana-etilasetat (4:6),
penampak bercak sinar UV 366 nm, tp = titik penotolan, bp = batas
pengembangan.

63
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 16. Kromatogram hasil KLT Preparatif dari E20

bp

tp

Keterangan: Fase diam silika gel GF254, fase gerak n-heksana-etilasetat, penampak
bercak sinar UV 366 nm, tp = titik penotolan, bp = batas
pengembang.

64
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 17. Kromatogram KLT uji kemurnian

bp

tp

I

II

III

IV

Keterangan: Fase diam silika gel GF254, fase gerak n-heksana-etilasetat, penampak
bercak sinar UV 366 nm, tp=titik penotolan, bp=batas
pengembangan.
I. toluen-etil asetat (7:3) Rf : 0.38; II. Kloroform-etil asetat (5:5) Rf :
0.8; III. n-heksana-etil asetat (8:2) Rf: 0.24; IV. Metanol-etil asetat
(1:9) Rf: 0.11

65
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 18. Spektrum UV isolat dalam metanol

66
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 19. Spektrum UV isolat dalam metanol ditambah NaOH

67
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 20. Spektrum UV isolat dalam metanol ditambah AlCl3

68
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 21. Spektrum UV isolat dalam metanol ditambah AlCl3/HCl

69
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 22. Spektrum UV isolat dalam metanol ditambah Natrium Asetat

70
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 23. Spektrum UV isolat dalam metanol ditambah Natrium Asetat dan
asamborat

71
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 24. Spektrum IR isolat

72
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 25. Gambar alat spektrofotometer yang digunakan analisis isolat murni

A

B
Keterangan : A. Spektrofotometer ultraviolet
B. Spektrofotometer inframerah

73
Universitas Sumatera Utara