Uji In Vitro Aktivitas Antelmintik Ekstrak Etanol Daun Pugun Tanoh [Curanga fel-terrae (Lour.) Merr.]

Lampiran 2. Hasil identifikasi hewan

Lampiran 3. (Lanjutan)

Lampiran 4. Gambar tanaman dan daun pugun tanoh [Curanga fel-terrae (Lour.) Merr.]

Tanaman pugun tanoh

Lampiran 5. Gambar simplisia daun pugun aanoh dan serbuk simplisia daun pugun tanoh

Simplisia daun pugun tanoh

Lampiran 6. Hasil pemeriksaan mikroskopik daun pugun tanoh

Keterangan:

a. Kristal kalsium oksalat bentuk prisma b. Tulang daun

c. Rambut berkelenjar

d. Pembuluh angkut bentuk spiral e. Stomata tipe anomositik

f.lStomata tipe diasitik g. Sel tetangga

h. Epidermis bergaris i. Trikoma

a

b a c d f g h i e

Lampiran 7. Gambar seperangkat alat sokslet

Keterangan : 1: Air keluar, 2: Selang air keluar, 3: Pendingin bola, 4: Air masuk, 5: Statif, 6: Siphon sokslet, 7: Serbuk simplisia yang dibungkus dengan kertas saring dan diikat dengan benang, 8: Selang air masuk, 9: Ember berisi air dan pompa air, 10: Labu alas bulat 500 ml, 11: Pelarut dan batu didih, 12: Heating mantle, 13: Cok listrik, 14: Klem.

Lampiran 8. Ekstrak etanol daun pugun tanoh

Lampiran 10. Uji pengaruh etanol terhadap Pheretima posthuma

Cacing Pheretima posthuma

Tanpa perlakuan 0,5 % Hidup 1% Hidup 2% Mati

Lampiran 11. Uji aktivitas antelmintik terhadap Pheretima posthuma

Keterangan : 1: dalam salin (cacing hidup), 2: dalam etanol 0,5 % (cacing hidup), 3: dalam EEDPT 5 mg/ml (cacing mati), 4: dalam EEDPT 10 mg/ml (cacing mati), 5: dalam EEDPT 20 mg/ml (cacing mati), 6: dalam EEDPT 30 mg/ml (cacing mati), 7: Albendazole 20 mg/ml (cacing mati).

1 2

3 4

5 6

Lampiran 12. Larutan uji aktivitas antelmintik terhadap Pheretima posthuma

Keterangan: EEDPT 5 mg/ml, 10 mg/ml, 20 mg/ml, dan 30 mg/ml, larutan salin larutan etanol 0,5 %, suspensi albendazole 20 mg/ml.

Lampiran 14. Perhitungan kadar sari larut air simplisia daun pugun tanoh % Kadar sari larut dalam air =

x

100%

No. Berat sampel (g) Berat sari (g)

1. 5,026 0,173

2. 5,046 0,175

3. 5,078 0,164

a. % Kadar sari = x 100% 17,21%

20 100 x 5,026 0,173 

b.% Kadar sari = x 100% 17,34%

20 100 x 5,046 0,175 

c.% Kadar sari = x 100% 16,15%

20 100 x 5,078

0,164 _

% Rata-rata kadar sari larut dalam air = _16,90%

3 % 15 , 16 % 34 , 17 % 21 ,

Lampiran 15. Perhitungan kadar sari larut etanol simplisia daun pugun tanoh

% Kadar sari larut dalam etanol =

x

20 100

x

100%

No. Berat sampel (g) Berat sari (g)

1. 5,011 0,272

2. 5,018 0,213

3. 5,008 0,209

a. % Kadar sari = x100% 22,65%

20 100 x 5,011 0,227



b. % Kadar sari = x100% 21,22%

20 100 x 5,018

0,213 _

c. % Kadar sari = x 100% 20,87%

20 100 x 5,008 0,209



%Rata-rata kadar sari larut dalam etanol = 21,58%

3

20,87% 21,22%

% 65 ,

Lampiran 16. Perhitungan kadar abu total simplisia daun pugun tanoh

% Kadar abu total = x 100%

No. Berat sampel (g) Berat abu (g)

1. 2,0011 0,0498

2. 2,0004 0,0547

3. 2,0057 0,0586

a. % Kadar abu total = x 100% 2,49%

2,0011

0,0498 _

b. % Kadar abu total = x100% 2,73%

2,0004 0,0547



c. % Kadar abu total = x 100% 2,92%

2,0057 0,0586



Lampiran 17. Perhitungan kadar abu tidak larut asam simplisia daun pugun tanoh

% Kadar abu total = x 100%

No. Berat sampel (g) Berat abu (g)

1. 2,0011 0,0096

2. 2,0004 0,0089

3. 2,0057 0,0077

a. % Kadar abu total = x 100% 0,48%

2,0011 0,0096



b. % Kadar abu total = x100% 0,44%

2,0004

0,0089 _

c. % Kadar abu total = x 100% 0,38%

2,0057

0,0077 _

% Rata-rata kadar abu total = 0,43%

3

0,38% 0,44%

Lampiran 18. Perhitungan kadar air EEDPT

% Kadar air ekstrak = x 100%

No. Berat sampel (g) Volume awal (ml) Volume akhir (ml)

1. 5,007 1,20 1,40

2. 5,019 1,40 1,60

3. 5,015 1,60 1,80

% Kadar air = x 100%

a.% Kadar air = x100% 3,99%

5,007 1,20

-1,40 _

b.% Kadar air = x100% 3,98%

5,019 40 , 1 60 ,

1  _

c.% Kadar air = x100% 3,99%

5,015 1,60

-1,80 _

% Rata-rata kadar air = 3,99%

3

3,99% 3,98%

Lampiran 19. Perhitungan kadar sari larut air EEDPT

% Kadar sari larut dalam air =

x

100%

No. Berat sampel (g) Berat sari (g)

1. 5,007 0,584

2. 5,016 0,591

3. 5,011 0,589

a.% Kadar sari = x100% 58,32%

20 100 x 5,007 0,584 

b.% Kadar sari = x 100% 58,91%

20 100 x 5,016 0,591 

c.% Kadar sari = x 100% 58,77%

20 100 x 5,011

0,589 _

% Rata-rata kadar sari larut dalam air = _58,67%

3 % 77 , 58 % 91 , 58 % 32 ,

Lampiran 20. Perhitungan kadar sari larut etanol EEDPT

% Kadar sari larut dalam etanol =

x

100%

No. Berat sampel (g) Berat sari (g)

1. 5,025 0,718

2. 5,012 0,709

3. 5,030 0,712

a. % Kadar sari = x100% 71,44%

20 100 x 5,025 0,718



b. % Kadar sari = x 100% 70,73%

20 100 x 5,012

0,709 _

c. % Kadar sari = x 100% 70,77%

20 100 x 5,030 0,712



%Rata-rata kadar sari larut dalam etanol = 70,98%

3

70,77% 70,73%

% 44 , 71

 

Lampiran 21. Perhitungan kadar abu total EEDPT

% Kadar abu total = x 100%

No. Berat sampel (g) Berat abu (g)

1. 2,0050 0,0384

2. 2,0032 0,0366

3. 1,9979 0,0313

a. % Kadar abu total =

1,91% 100%

x 2,0050 0,0384



b. % Kadar abu total = x100% 1,83%

2,0032

0,0366 _

c. % Kadar abu total = x100% 1,57%

1,9979 0,0313



Lampiran 22. Perhitungan kadar abu tidak larut asam EEDPT

% Kadar abu total = x 100%

No. Berat sampel (g) Berat abu (g)

1. 2,0050 0,0070

2. 2,0032 0,0052

3. 1,9979 0,0074

a. % Kadar abu total = x 100% 0,35%

2,0050 0,0070



b. % Kadar abu total = x100% 0,25%

2,0032

0,0052 _

c. % Kadar abu total = x100% 0,37%

1,9979

0,0074 _

% Rata-rata kadar abu total = 0,32%

3

0,37% 0,25%

Lampiran 23. Perhitungan pengenceran etanol

Pengenceran etanol 96% menjadi etanol 0,5%, 1%, 2%, 4%, 6%, 8% dan 10% dalam 20 ml.

V1.N1=V2.N2 V1=

N1 V2.N2

- Etanol 0,5 % = 0,1 ml

96% 0,5% x ml

20 _

0,1 ml etanol 96% diencerkan dengan 19,9 ml aquadest

-Etanol 1 % = 0,2 ml

96% 1% x ml

20 _

0,2 ml etanol 96% diencerkan dengan 19,8 ml aquadest

-Etanol 2% = 0,4 ml

96% 2% x ml

20 _

0,4 ml etanol 96% diencerkan dengan 19,6 ml aquadest

-Etanol 4 % = 0,8 ml

96% 4% x ml

20 _

0,8 ml etanol 96% diencerkan dengan 19,2 ml aquadest

-Etanol 6 % = 1,25 ml

96% 6% x ml

20 _

1,25 ml etanol 96% diencerkan dengan 18,75 ml aquadest

-Etanol 8% = 1,6 ml

96% 8% x ml

20 _

1,6 ml etanol 96% diencerkan dengan 18,4 ml aquadest

-Etanol 10% = 2 ml

96% 10% x ml

20 _

Lampiran 24. Uji aktivitas antelmintik EEDPT

Waktu Paralisis Pheretima posthuma

Konsentrasi (mg/ml)

Waktu paralisis uji aktivitas

antelmintik (menit) Rata-rata

(menit) SD

I II II

Ekstrak 5 162 158 152 157,33 5,033

Ekstrak 10 88 95 82 88,33 6,506

Ekstrak 20 45 49 48 47,33 2,082

Ekstrak 30 50 47 51 49,33 2,082

Albendazole

20 74 78 80 77,33 3,005

Waktu kematian Pheretima posthuma

Konsentrasi (mg/ml)

Waktu kematian uji aktivitas

antelmintik (menit) Rata-rata

(menit) SD

I II II

Ekstrak 5 238 245 232 238,33 6,506

Ekstrak 10 160 162 152 158 5,292

Ekstrak 20 82 92 86 86,67 5,033

Ekstrak 30 56 51 58 55 3,605

Lampiran 25. Perhitungan penyiapan ekstrak

Perhitungan konsentrasi ekstrak kental daun pugun tanoh dalam 20 ml: - EEDPT 5 mg/ml = 5 mg/ml x 20 ml = 100 mg

- EEDPT 10 mg/ml = 10 mg/ml x 20 ml = 200 mg - EEDPT 20 mg/ml = 20 mg/ml x 20 ml = 400 mg - EEDPT 30 mg/ml = 30 mg/ml x 20 ml = 600 mg - Albendazole 20 mg/ml = 20 mg/ml x 20 ml = 400 mg - 0,5 Tween 80 = 0,5 % x 20 ml = 0,1 ml

Lampiran 26. Data statistik paralisis Pheretima posthuma Ringkasan Jumlah Sampel

Konsentrasi

Cases

Valid Missing Total

N Percent N Percent N Percent

waktu_paralisis_uji_akti vitas_antelmintik

ekstrak 5 mg/ml 3 100,0% 0 0,0% 3 100,0%

ekstrak 10 mg/ml 3 100,0% 0 0,0% 3 100,0%

ekstrak 20 mg/ml 3 100,0% 0 0,0% 3 100,0%

ekstrak 30 mg/ml 3 100,0% 0 0,0% 3 100,0%

albendazole 20 mg/ml 3 100,0% 0 0,0% 3 100,0%

Deskriptif Konsentrasi Statistic Std. Error waktu_paralisis_uji_a ktivitas_antelmintik

ekstrak 5 mg/ml Mean 157,3333 2,90593

95% Confidence Interval for Mean

Lower

Bound 144,8301

Upper

Bound 169,8366

5% Trimmed Mean .

Median 158,0000

Variance _25,333

Std. Deviation _5,03322

Minimum 152,00

Maximum _162,00

Range _10,00

Interquartile Range .

Skewness -,586 1,225

Kurtosis . .

ekstrak 10 mg/ml Mean 88,3333 3,75648

95% Confidence Interval for Mean

Lower

Bound 72,1705

Upper

Bound 104,4961

5% Trimmed Mean _.

Median 88,0000

Variance 42,333

Std. Deviation _6,50641

Minimum _82,00

Maximum 95,00

Range _13,00

Interquartile Range _.

Skewness ,230 1,225

Uji Normalitas

ekstrak 20 mg/ml Mean 47,3333 1,20185

95% Confidence Interval for Mean

Lower

Bound 42,1622

Upper

Bound 52,5045

5% Trimmed Mean .

Median _48,0000

Variance _4,333

Std. Deviation _2,08167

Minimum 45,00

Maximum _49,00

Range _4,00

Interquartile Range .

Skewness -1,293 1,225

Kurtosis . .

ekstrak 30 mg/ml Mean 49,3333 1,20185

95% Confidence Interval for Mean

Lower

Bound 44,1622

Upper

Bound 54,5045

5% Trimmed Mean _.

Median 50,0000

Variance _4,333

Std. Deviation _2,08167

Minimum _47,00

Maximum 51,00

Range _4,00

Interquartile Range _.

Skewness -1,293 1,225

Kurtosis . .

albendazole 20 mg/ml

Mean 77,3333 1,76383

95% Confidence Interval for Mean

Lower

Bound 69,7442

Upper

Bound 84,9225

5% Trimmed Mean _.

Median _78,0000

Variance 9,333

Std. Deviation _3,05505

Minimum _74,00

Maximum _80,00

Range 6,00

Interquartile Range _.

Skewness -,935 1,225

Konsentrasi

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig. Statistic df Sig. waktu_paralisis_uji_a

ktivitas_antelmintik

ekstrak 5 mg/ml ,219 3 . ,987 3 ,780

ekstrak 10 mg/ml ,187 3 . ,998 3 ,915

ekstrak 20 mg/ml ,292 3 . ,923 3 ,463

ekstrak 30 mg/ml ,292 3 . ,923 3 ,463

albendazole 20 mg/ml ,253 3 . ,964 3 ,637

a. Lilliefors Significance Correction

Perbandingan

Tukey HSD

(I)

Konsentrasi (J) Konsentrasi

Mean Difference

(I-J) Std. Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound Deskriptif

N Mean

Std.

Deviation Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower

Bound

Upper Bound

ekstrak 5 mg/ml 3 157,3333 5,03322 2,90593 144,8301 169,8366 152,00 162,00 ekstrak 10 mg/ml 3 88,3333 6,50641 3,75648 72,1705 104,4961 82,00 95,00 ekstrak 20 mg/ml 3 47,3333 2,08167 1,20185 42,1622 52,5045 45,00 49,00 ekstrak 30 mg/ml 3 49,3333 2,08167 1,20185 44,1622 54,5045 47,00 51,00

albendazole 20

mg/ml 3 77,3333 3,05505 1,76383 69,7442 84,9225 74,00 80,00 Total 1

5 83,9333 41,51844 10,72002 60,9412 106,9255 45,00 162,00

ANOVA

Sum of

Squares df

Mean

Square F Sig.

Between

Groups 23961,600 4 5990,400 349,634 ,000

Within Groups 171,333 10 17,133

Total 24132,933 14

Uji Homogenitas

Levene

Statistic df1 df2 Sig. 1,107 4 10 ,405

ekstrak 5 mg/ml

ekstrak 10 mg/ml 69,00000* 3,37968 ,000 57,8772 80,1228

ekstrak 20 mg/ml 110,00000* 3,37968 ,000 98,8772 121,1228

ekstrak 30 mg/ml 108,00000* 3,37968 ,000 96,8772 119,1228

albendazole 20 mg/ml 80,00000* 3,37968 ,000 68,8772 91,1228

ekstrak 10 mg/ml

ekstrak 5 mg/ml -69,00000* 3,37968 ,000 -80,1228 -57,8772

ekstrak 20 mg/ml 41,00000* 3,37968 ,000 29,8772 52,1228

ekstrak 30 mg/ml 39,00000* 3,37968 ,000 27,8772 50,1228

albendazole 20 mg/ml 11,00000 3,37968 ,053 -,1228 22,1228

ekstrak 20 mg/ml

ekstrak 5 mg/ml -110,00000* 3,37968 ,000 -121,1228 -98,8772

ekstrak 10 mg/ml -41,00000* 3,37968 ,000 -52,1228 -29,8772

ekstrak 30 mg/ml -2,00000 3,37968 ,973 -13,1228 9,1228

albendazole 20 mg/ml -30,00000* 3,37968 ,000 -41,1228 -18,8772

ekstrak 30 mg/ml

ekstrak 5 mg/ml -108,00000* 3,37968 ,000 -119,1228 -96,8772

ekstrak 10 mg/ml -39,00000* 3,37968 ,000 -50,1228 -27,8772

ekstrak 20 mg/ml 2,00000 3,37968 ,973 -9,1228 13,1228

albendazole 20 mg/ml -28,00000* 3,37968 ,000 -39,1228 -16,8772

albendazole 20 mg/ml

ekstrak 5 mg/ml -80,00000* 3,37968 ,000 -91,1228 -68,8772

ekstrak 10 mg/ml -11,00000 3,37968 ,053 -22,1228 ,1228

ekstrak 20 mg/ml 30,00000* 3,37968 ,000 18,8772 41,1228

ekstrak 30 mg/ml 28,00000* 3,37968 ,000 16,8772 39,1228

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Tukey HSDa

Konsentrasi N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3

ekstrak 20 mg/ml _{3 47,3333}

ekstrak 30 mg/ml 3 49,3333

albendazole 20 mg/ml _{3 77,3333}

ekstrak 10 mg/ml _{3 88,3333}

ekstrak 5 mg/ml 3 157,3333

Sig. ,973 ,053 1,000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 3,000.

Lampiran 27. Data statistik kematian Pheretima posthuma Ringkasan Jumlah Sampel

konsentrasi

Cases

Valid Missing Total

N Percent N Percent N Percent

Waktu_kematian_uji_ aktivitas_antelmintik

ekstrak 5 mg/ml 3 100,0% 0 0,0% 3 100,0%

ekstrak 10 mg/ml 3 100,0% 0 0,0% 3 100,0%

ekstrak 20 mg/ml 3 100,0% 0 0,0% 3 100,0%

ekstrak 30 mg/ml 3 100,0% 0 0,0% 3 100,0%

albendazole 20 mg/ml 3 100,0% 0 0,0% 3 100,0%

Deskriptif

Konsentrasi Statistic

Std. Error Waktu_kem atian_uji_a ktivitas_ant elmintik

ekstrak 5 mg/ml Mean 238,3333 3,75648

95% Confidence Interval for Mean

Lower

Bound 222,1705

Upper

Bound 254,4961

5% Trimmed Mean _.

Median _238,0000

Variance 42,333

Std. Deviation _6,50641

Minimum _232,00

Maximum 245,00

Range _13,00

Interquartile Range _.

Skewness ,230 1,225

Kurtosis . .

ekstrak 10 mg/ml Mean 158,0000 3,05505

95% Confidence Interval for Mean

Lower

Bound 144,8552

Upper

Bound 171,1448

5% Trimmed Mean .

Median _160,0000

Variance _28,000

Std. Deviation 5,29150

Minimum _152,00

Maximum _162,00

Range 10,00

Interquartile Range _.

Skewness -1,458 1,225

Kurtosis . .

95% Confidence Interval for Mean

Lower

Bound 74,1634

Upper

Bound 99,1699

5% Trimmed Mean _.

Median _86,0000

Variance 25,333

Std. Deviation _5,03322

Minimum _82,00

Maximum 92,00

Range 10,00

Interquartile Range _.

Skewness ,586 1,225

Kurtosis . .

ekstrak 30 mg/ml Mean 55,0000 2,08167

95% Confidence Interval for Mean

Lower

Bound 46,0433

Upper

Bound 63,9567

5% Trimmed Mean .

Median _56,0000

Variance _13,000

Std. Deviation 3,60555

Minimum _51,00

Maximum _58,00

Range 7,00

Interquartile Range .

Skewness -1,152 1,225

Kurtosis . .

albendazole 20 mg/ml

Mean 205,0000 5,50757

95% Confidence Interval for Mean

Lower

Bound 181,3028

Upper

Bound 228,6972

5% Trimmed Mean _.

Median 204,0000

Variance _91,000

Std. Deviation _9,53939

Minimum 196,00

Maximum _215,00

Range _19,00

Interquartile Range .

Skewness ,467 1,225

Kurtosis . .

Konsentrasi

Kolmogorov-Smirnova Shapiro-Wilk

Statistic df Sig

. Statistic df Sig.

Waktu_kematian_uji_aktivitas _antelmintik

ekstrak 5 mg/ml ,187 3 . ,998 3 ,915

ekstrak 10 mg/ml ,314 3 . ,893 3 ,363

ekstrak 20 mg/ml ,219 3 . ,987 3 ,780

ekstrak 30 mg/ml ,276 3 . ,942 3 ,537

albendazole 20

mg/ml ,208 3 . ,992 3 ,826

a. Lilliefors Significance Correction

Sig >0,05 maka dapat disimpulkan bahwa data kematian berdistribusi normal

Deskriptif

N Mean

Std.

Deviation Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Min Max Lower

Bound

Upper Bound

ekstrak 5 mg/ml 3 238,3333 6,50641 3,75648 222,1705 254,4961 232,00 245,00 ekstrak 10 mg/ml 3 158,0000 5,29150 3,05505 144,8552 171,1448 152,00 162,00 ekstrak 20 mg/ml 3 86,6667 5,03322 2,90593 74,1634 99,1699 82,00 92,00 ekstrak 30 mg/ml 3 55,0000 3,60555 2,08167 46,0433 63,9567 51,00 58,00 albendazole 20 mg/ml 3 205,0000 9,53939 5,50757 181,3028 228,6972 196,00 215,00 Total 15 148,6000 71,79017 18,53614 108,8439 188,3561 51,00 245,00

Perbandingan ANOVA

Sum of Squares df

Mean

Square F Sig. Between Groups 71754,267 4 17938,567 449,213 ,000

Within Groups 399,333 10 39,933 Total 72153,600 14

Uji Homogenitas

Levene

Statistic df1 df2 Sig.

Tukey HSD

(I)

konsentrasi (J) konsentrasi

Mean Difference

(I-J)

Std.

Error Sig.

95% Confidence Interval Lower Bound Upper Bound ekstrak 5 mg/ml

ekstrak 10 mg/ml 80,33333* 5,15967 ,000 63,3524 97,3142

ekstrak 20 mg/ml 151,66667* 5,15967 ,000 134,6858 168,6476

ekstrak 30 mg/ml 183,33333* 5,15967 ,000 166,3524 200,3142

albendazole 20 mg/ml 33,33333* 5,15967 ,001 16,3524 50,3142

ekstrak 10 mg/ml

ekstrak 5 mg/ml -80,33333* 5,15967 ,000 -97,3142 -63,3524

ekstrak 20 mg/ml 71,33333* 5,15967 ,000 54,3524 88,3142

ekstrak 30 mg/ml 103,00000* 5,15967 ,000 86,0191 119,9809

albendazole 20 mg/ml -47,00000* 5,15967 ,000 -63,9809 -30,0191

ekstrak 20 mg/ml

ekstrak 5 mg/ml

-151,66667* 5,15967 ,000 -168,6476 -134,6858

ekstrak 10 mg/ml -71,33333* 5,15967 ,000 -88,3142 -54,3524

ekstrak 30 mg/ml 31,66667* 5,15967 ,001 14,6858 48,6476

albendazole 20 mg/ml

-118,33333* 5,15967 ,000 -135,3142 -101,3524

ekstrak 30 mg/ml

ekstrak 5 mg/ml

-183,33333* 5,15967 ,000 -200,3142 -166,3524

ekstrak 10 mg/ml

-103,00000* 5,15967 ,000 -119,9809 -86,0191

ekstrak 20 mg/ml -31,66667* 5,15967 ,001 -48,6476 -14,6858

albendazole 20 mg/ml

-150,00000* 5,15967 ,000 -166,9809 -133,0191

albendazole 20 mg/ml

ekstrak 5 mg/ml -33,33333* 5,15967 ,001 -50,3142 -16,3524

ekstrak 10 mg/ml 47,00000* 5,15967 ,000 30,0191 63,9809

ekstrak 20 mg/ml 118,33333* 5,15967 ,000 101,3524 135,3142

ekstrak 30 mg/ml 150,00000* 5,15967 ,000 133,0191 166,9809

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

Tukey HSDa

Konsentrasi N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4 5

ekstrak 30 mg/ml _{3 55,0000}

ekstrak 20 mg/ml _{3 86,6667}

ekstrak 10 mg/ml _{3 158,0000}

albendazole 20

mg/ml 3 205,0000

ekstrak 5 mg/ml _{3 238,3333}

Sig. _{1,000 1,000 1,000 1,000 1,000}

DAFTAR PUSTAKA

Agung dan Tinton (eds). (2008). Buku Pintar Tanaman Obat. Cetakan 1, Jakarta : Agromedia Pustaka. Halaman 64-65.

Asih, A. (2014). Antihelmintik Infusa Daun Andong (Cordyline fruticosa) Terhadap Ascaridia galli secara in vitro. Jurnal. Universitas Atma Jaya Yogyakarta. Halaman 1-10.

Albonico, M., Bickle, Q., Ramsan, M., Montresor, A., Savioli, L., Taylor, M. (2003). Efficacy of Mebendazole and Levamisole Alone or In Combination Against Intestinal Nematode Infections After Repeated Targeted Mebendazole Treatment In Zanzibar. Bull. World Health Organanization. 1(81): 343–352.

Bairagi, A.O., Kabra, dan R.J., Mandade. (2011). Anthelmintic Activity of

Lawsonia inermis L. Leaves in Indian Adult Earthworm. Int of Res Pharm Biol Sci. 2(01): 237-240.

Bhawan, S., Hemalata, S., Sarla, S., Prakash, C.B., Somesh, T. (2011). Anthelmintic Potential of Certain Ethano Medical Plants of Uttarakhand State, India. J Chem Pharm Res. 3(5): 465-467.

Bidkar, J.S., Bhujbal, M.D., Ghanwa, D.D., Dama, G. Y. (2011). Antihelmintic Activity of Citras aurantium Linn. Int J Pharm Res Dev. 3(3): 67-72. Borah, S., Kakoti, B. B., Mahato, K., dan Kumar, M. (2013). Investigation of

in-vitro Anthelmintic Acitivity of Calamus leptospadix Griff. Shoot in Indian Adult Earthworm (Pheretima posthuma).J App Sci 3(06): 156-159. Budiyanti, R.T. (2010). Efek Antihelmintik Infusa Herba Sambiloto

(Andrographis paniculata, Nees) Terhadap Ascaris suum Secara In vitro.Skripsi. Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Halaman 1-56.

Choudhary, G.P. (2013). Anthelmintic Activity of Leaves of Coleus aromaticus Benth. Int. J Adv Pharm Bio Chem. 2(4): 609-610.

Dhaked, P.S., Ponigrahy, R.N., Kshirsagar, S. (2011). In-vitro Evaluation of Anthelmintic Activity of Caesalpinia pulcherima (Linn.) Flowers Extracts in Indian Earth Worms. Int J Pharm Sci Rev Res. 7(1): 89-91.

Data, SC. (2003). Fourth Edition Sistematic Botany. New Delhi: New age international (P) ltd. Publishers. Halaman 446.

Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi IV. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 1030-1031.

Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 319-320.

Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan. (2000). Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI.Halaman 3, 7-8, 10, dan 11.

Djatmiko, M., Purnowati, L.D., dan Suhardjono. (2009). Uji Daya Antelmintik Biji Waluh (Cucurbita moschata Durch) Terhadap Cacing Ascaridia galli

Secara In Vitro. Jurnal Ilmu Farmasi dan Farmasi Klinik. 6(1): 12-17. Dorland, W.A.N (2012). Kamus Saku Kedokteran Dorland Edisi Ke XXVII.

Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Halaman 581.

Entjang, I. (2003). Mikrobiologi dan Parasitologi untuk Akademi Keperawatan dan Sekolah Tenaga Kesehatan yang Sederajat. Bandung: PT. Citra Aditya Bakti. Halaman 229-230.

Fang, H, Ning, D.S., and Liang, X.Y. (2009). Studies on Technology Optimization for Extracting Triterpenoid Saponins from Picria felterrae by Multi-target Grading Method. Zhong Yao Cai. 32(12): 1902-1905.

Fithra, R.S. (2013). Efek Penyembuhan Luka Bakar dari Sediaan Gel Ekstrak Etanol Daun Puguh Tanoh (Curanga fel-terrae (Lour.) Merr.). Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi USU. Halaman 10-12.

Fitri, Sri, A. (2005). Uji In Vivo Efek Antelmintik Serbuk Kulit Buah Nanas Bogor Tua Terhadap cacing Lambung Domba. Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteiner. Halaman 724-731.

Flohr, C., Tuyen, L.N., Lewis, S., Minh, T.T., Campbell, J., Britton, J., Williams, H., Hien, T.T., Farrar, J., Quinnell, R.J. (2007). Low Efficacy of Mebendazole Against Hook Worm in Vietnam: Two Randomized Controlled Trials. Am. J. Trop. Med. Hyg. Halaman 76, 732–736.

Farnsworth, N.R. (1966). Biological and phytochemical screening of plants. J Pharm Sci. 55(3): 99; 225-276.

Githiori, J.B., Athanasiadou, S., Thamsborg, S.M. (2006). Use of Plants in Novel Approaches for Control of Gastrointestinal Helminths in Livestock with Emphasis on Small Ruminants. Veterinary Parasitology. 139:308-20. Globinmed. (2015). Detil Data Picria fel-terrae. [Diakses 15 Maret 2015];

Diambil dari file:///H:/penelitian/web/Globinmed%20%20Globinmed.htm. Gunawan dan Sulistia (eds). (2011). Farmakologi dan Terapi. Cetakan Kelima.

Harahap, U., Patilaya, P., Marianne, Yuliasmi, S., Husori, D.I., Prasetyo, B.E., Laila, L., Sumantri, I.B., dan Wahyuni, H.S. (2013). Profil Fitokimia Ekstrak Etanol Daun Puguntano [Curanga fel-terrae (Merr.) Lour.)] yang Berpotensi Sebagai Antiasma. Prosiding Seminar Nasional Sains dan Teknologi V Lembaga Penelitian Universitas Lampung.Halaman422-426. Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokimia. Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan

Iwang Soediro. Edisi II. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 102-103, 152. Harfina, F., Bahri, S., dan Saragih, A. (2012). Pengaruh Serbuk Daun Puguntano

(Curanga fel-terrae Merr.) Pada Pasien Diabetes Mellitus. Journal of Pharmaceutics and Pharmacology. 2(1): 112-118.

Hoste, H., Jackson, F., Athanasiadou, S., Thamsborg, S.M., dan Hoskin, S.O. (2006). The Effects of Tannin-rich Plants on Parasitic Nematodes in Ruminants. Trends in Parasitology. 22:253-61.

Huang Y, de Bruyne T, Apers S, Ma Y, Claeys M, Pieters L, Vlietinck A. (1999). Flavonoid Glucuronides from Picria fel-terrae. Phytochemistry. 62(8): 1701- 1703.

Huang Y, de Bruyne T, Apers S, Ma Y, Claeys M, van den Berghe D, Pieters L, Vlietinck, A. (1998). Complement-Inhibiting Cucurbitacin Glycosides from Picriafelterrae. Journal of Natural Products. 61(6): 757-761.

Humphries, D., Mosites, E., Otchere, J., Twum, W.A., Woo, L., Jones-Sanpei, H., Harrison, L.M., Bungiro, R.D., Benham-Pyle, B., Bimi, L., Edoh, D., Bosompem, K., Wilson, L.M., Cappello, M.. (2011). Epidemiology of Hookworm Infection in Kintampo North Municipality, Ghana: Patterns of Malaria Coinfection, Anaemia, and Albendazole Treatment Failure. Am. J. Trop. Med. Hyg. Halaman 84, 792–800.

Irianto, K. (2013). Parasitologi Medis. Bandung: Alfabeta. Halaman 350-351. Jie, M.Z., Li, S.W., Ya, J.G., Zheng, W., and Rui, Z.W., A. (2005). New

Picfeltarraenone Glycoside from Picria fel-terrae Merr. Guilin Sanjin Pharmaceutical Co. Ltd. 3:12.

Jeyathilakan, N., Murali, K., Anandaraj, A., Latha, B.R. dan Basith, S.A. (2010). Anthelmintic Activity of Essential Oils of Cymbopogan nardus and

Azadirachta indica on Fasciola gigantica. Tamilnadu J Veterinary and Animal Sciences.6(5): 204-209.

Joseph, T.S.O., Ofodile, L.N. dan Oguntoke, T. (2013). In Vitro evaluation of anthelmintic activity of crude extract of the leaves of Dalberqiella welwitschii. Int J Pharm Pharm Sci. 5(1): 33-34.

Juwita, N. A. (2009). Karakterisasi simplisia dan uji efek antiinflamasi ekstrak etanol daun pugun tanoh (Curanga fel-terrae Merr.) terhadap mencit jantan. Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi USU. Halaman 43-46.

Katikia, L.M., Chagasb, A.C.S., Bizzoc, H.R. (2011). Anthelmintic Activity of

Cymbopogon martini, Cymbopogon schoenanthus and Mentha piperita

Essential Oils Evaluated in Four Different In Vitro Test. Veterinary Parasitology. 183: 103-108.

Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. (2015). Kemenkes Berkomitmen Eliminasi Filariasis dan Kecacingan. [diakses 6 Agustus 2015]; Diambil dari :http://www.depkes.go.id/article/view/2382/kemenkes-berkomitmen- eliminasi-filariasis-dan-kecacingan.html.

Kotze, A.C., Cowling, K., Bagnall, N.H., Hines, B.M., Ruffell, A.P., Hunt, P.W., Coleman, G.T. (2009). Relative level of thiabendazole resistance associated with the E198A and F200Y SNPs in larvae of a multi-drug resistant isolate of Haemonchus contortus. Int. J. Parasitol. Drugs Drug. Resist. Halaman 2, 92–97.

Lalchhandama, K. (2010). Anthelmintic Resistance: The Song Remains The Same. Research Review Sa Vis, 10(4): 111-122.

Lansdown, R.V. (2011). Curanga amara. The IUCN Red List of Threatened Species:http://dx.doi.org/10.2305/IUCN.UK.20112.RLTS.T199703A9120 155.en.

Lewis, W. (2003). Medical botany. Plants affecting human health. John Wiley and sons, Inc, Halaman 515.

Leo, L.X. and Weller, P.F. (1996). An update on antiparasitic drugs. N Engl J Med, 334(18): 1178-1184.

Makkar, H. P. S. (1993). Antinutritional Factor in Food for Livestock in Animal Producting inDeveloping Country. British Society of Animal Production. 16: 69-85.

Mokoginta, E.P., Runtuwene, M.R.J., Wehantow, F. (2013). Pengaruh Ekstraksi Terhadap Aktivitas Penangkal Radikal Bebas Ekstrak Metanol Kulit Biji Pinang (Areca vestriaria Giselie). Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi. 2(4).

Mughal, T.A., Arshad, S., and Mahboob, S. (2013). Evaluation of Anthelmintic Activity of Some Members of Family Moraceae. J Med Plants Res.

7(30): 2275-2279.

Mukherjee, P. dan Houghton, P.J. (2009). Evaluation of Herbal Medicinal Products. USA: Pharmaceutical Press. Halaman 86.

Nitave, S.A., Patil, V.A. (2014). Comparative Evaluation of Anthelmintic Activity of Nerium indicum, Mill Flower Extract and Punica granatum, Linn peel and seed eztract in 1:1 Ratio and their Phytochemical Screening. Wrld J Pharm Pharm Sci. 3(06): 1438-1447.

Padal, S.B., Satyavathi, D. Sandhyadeepika. (2014). Ethnomedical Plants Used For Anthelmintic/Helminthiasis in Visakhapatnam District, Andhrapradesh, India. Int J Ethno Ethno. 1(02): 1-5.

Pagariya, A., Chatur, S., dan Nawab, F. (2013). In Vitro anthelmintic activity of root extract of Murraya koenigii (Linn) Spreng. Int J Pharmaceut Innov.

3(1): 111-114.

Patilaya, P., Husori, D.I. (2015). Preliminary Study on the Anthelmintic Activity of the leaf ethanolic extract of Indonesian Curanga fe-terrae (Lour.) Merr. Int J PharmTech Res. 8(3): 347-351.

Perry, L.M. (1980). Medicinal Plants of East and Southeast Asia. London: The MIT Press. Halaman 384.

Prichard, R.K. (2007). Parasitology: Markers for benzimidazole resistance in human parasitic nematodes?. United Kingdom: Cambridge University Press. 134: 1087-1092.

Prohati. (2015). Detil Data Picria fel-terrae Lour. [Diakses 6 Maret 2015]; Diambil dari http://www.proseanet.org/prohati2/browser.php?docsid=459.

Quattrocchi, F.L.S., Umberto. (2012). CRC World Dictionary of Medicinal and Poisonous Plants, Common Names, Scientific Names, Eponyms, Synonyms, and Etymology. Francis: CRC Press. Halaman 2925.

Ramadhani, D. (2014). Efek relaksasi ekstrak etanol daun pugun tanoh (Curanga fel-terrae (Lour.) Merr.) terhadap otot polos trakea marmut terisolasi dan pengaruhnya pada fosfodiesterase. Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi USU. Halaman 36-38.

Rajani, A., Hemamalini, K., Satyavati, D., Begum, A.S.K., Saradhi., N.D.V.R. (2013). Anthelmintic Activity of Methanolic Extract of Rhizomes of

Picrorrhiza kurroa Royal Ex. Benth. Int Res J Pharm 4(8): 143-144. Ratnawati, D., Supriyati, R., dan Ispamuji, D. (2013). Aktivitas antelmintik

ekstrak tanaman putri malu (Mimosa pudicia L) terhadap cacing gelang babi (Ascaris suum L). Posiding Semirata FMIPA Universitas Lampung: Halaman 87-91.

Reynoldson JA, Behnke JM, Pallant LJ, Macnish MG, Gilbert F, Giles S, Spargo RJ & Thompson RC (1997). Failure of pyrantel in treatment of human

hookworm infections (Ancylostoma duodenale) in the Kimberley region of North West Australia. Acta Trop. Halaman 68, 301-312.

Sanbayu, M.N.F. (2005) Efek Anthelmintik Ekstrak Air Kulit Buah Delima (Punica granatum L.) Terhadap Cacing Gelang (Ascaris Lumbricoides var. suum) Secara In Vitro dan In Vivo.Tesis. Universitas Surabaya. Halaman 19.

Senja, R.Y., Issusilaningtyas, E., Nugroho, A.K., Setyowati, E.P. (2014). The Comparison of Extraction Method and Solvent Variation on Yield and Antioxidant Activity of Brassica oleracea L. Var capitata f. Rubra Extract.

Trad Med J. 19(1): 43-48.

Shahidi, F and M. Naczk. (1995). Food Phenolics. Technomic Inc, Basel. Halaman 302.

Sharma, A., Gupta, S., Sachan, S., Mishra, A., Banarji, A. (2011). Anthelmintic Activity of Leaf of Saraca indica Linn. As J Pharm Life Sci.1(4): 391-395.

Sharma. S.K. (2010). Objective Zoology. India: KHRISHNA Prakash Media. Halaman 2200-2261.

Shri, V.K., Senthamarai, R., Vasuki, K., Venkateswara, R.A., Selvadurai, S. (2011). Anthelmintic Activity of Roots and Rhizomes of Corallocarpus epigaeus. J Nat Prod Plant Resour. 1(1): 81-84.

Sitorus, P., Harahap, U., Pandapotan, M., dan Barus, T. (2014). Isolation Of β -Sitosterol From n-Hexane of Picria fel-terrae Lour. Leave and Study Of Its Antidiabetic Effect in Alloxan Induced Diabetic Mice. International Journal of PharmTech Research. 6(1): 137-141.

Soedarto. (2008). Parasitologi Klinik. Surabaya: Airlangga University Press. Halaman 11.

Subash, K.R., Rao, N.J., Cheriyan, B.V., Bhaarati, G.M., Kumar, K. S. (2012). The Antelmintic Activity of Eupatorium triplinerve and Alpinia galanga

in Pheretima posthuma and Ascardia galli: A Comparative Study. J Clin Diag Res. 6(06): 947-950.

Sutherland, I.A., Leathwick, D.M. (2011). Anthelmintic Resistance in Nematode Parasites of Cattle: A Global Issue? Trends Parasitol. Halaman 27, 176– 181.

Sykur, C. Dan Hernani. (2002). Budidaya Tanaman Obat Komersial. Penebar Swadaya, Jakarta. Halaman 136.

Tekeshwar, K., Amit, A., Ajazuddin, Dhansay, D., Kushangra, N. (2011). Anthelmintic Activity of the Whole Plant of Bauhinia purpurea (Linn.).

Tiwow, D., Bodhi, W., dan Kojong, N.S. (2013). Uji Efek Antelmintik Ekstrak Etanol Biji Pinang (Areca catechu) Terhadap Cacing Ascaris Lumbricoides dan Ascaridia Galii secara In Vitro. Pharmacon jurnal ilmiah farmasi UNSRAT.2(2): 79-80.

Tjay, T.H., dan Rahardja, K. (2002). Obat Obat Penting Khasiat, Penggunaan dan Efek-Efek Sampingnya. Edisi keempat. Jakarta.PT Elexmedia komputindo kelompok gramedia. Halaman 196 – 205.

Tjahyanto, A. Dan Salim, C. (eds). (2013). Farmakologi Ulasan Bergambar. Jakarta: EGC. Halaman 513-520.

Tjokropranoto, R., Rosnaeni, Nathania. M.Y. (2011). Anthelmintic Effect of Ethanol Extract of Pare Leaf (Momordica charantia L.) Against Female

Ascaris suum Worm In Vitro, Jurnal Medika Planta. 1(4): 1334-1336. Tyler , V.E. (1976). Pharmacognosy. Lea & Febiger, Philadelphia. Halaman

87-89.

Urban, J., Kokoska, L., Langrova, I., and Matejkova, J. (2015). In Vitro

Anthelmintic Effects of Medicinal Plants Used in Czech Republic. 46(10-11): 808-813.

Vennila V and Nivetha R. (2015). Screening The In vitro anthelmintic activity of

Alternanthera sessilis Leaves. Wrld J Pharm Pharm Sci. 4(04): 1402-1415.

Vercruysse, J., Behnke, J.M., Albonico, M., Ame, S.M., Angebault, C., Bethony, J.M., Engels, D., Guillard, B., Hoa, N.T., Kang, G., Kattula, D., Kotze, A.C., McCarthy, J.S., Mekonnen, Z., Montresor, A., Periago, M.V., Sumo, L., Tchuem Tchuenté, L.A., Thach, D.T., Zeynudin, A., Levecke, B. (2011). Assessment of The Anthelmintic Efficacy of Albendazole in School Children in Seven Countries Where Soiltransmitted Helminths Are Endemic.P Lo S Negl. Trop. Dis. Halaman 29, e948.

Vercruysse, J., Albonico, M., Behnke, J.M., Kotze, A.C., Prichard, R.K., McCarthy, J.S., Montresor, A., Levecke, B. (2011). Is Anthelmintic Resistance a Concern For The Control of Human Soil-Transmitted Helminths?. Int J Paras: Drug and Drug Resistance. 1(2011): 14-27. Vincent, S., Vijayamirtharaj, R., Wilson, P., Saravanan, B., Jeevantham, R.,

Ramesh, R. (2011). Anthelmintic potential of Aerial Part of Clerodendrum phlomidis Linn, Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. 2(2): 329-333.

Wang LS, Li SH, Zou JM, Guo YJ, Sun HD. (2006). Two New Terpenoids from

Picria fel-terrae. Journal of Asian Natural Product Research. 8(6): 491 -494.

Wolstenholme, A.J., Fairweather, I., Prichard, R., von Samson-Himmelstjerna, G., Sangster, N.C. (2004). Drug resistance in veterinary helminths. Trends Parasitol. Halaman 20, 469–476

World Health Organization. (2015). Soil-Transmitted Helminth Infections.

[Diakses 18 Juli 2015]; diambil dari http://www.who.int/media centre/factsheets/fs366/en/.

World Health Organization. (2011). Quality Control Methods For Medicinal Plant Material. Switzherland: WHO. Halaman 19-25.

Wink, M. (2012). Medical plants: A Source of Anti Parasitic Secondary Metabolites. Molecules. 17: 12771-12791.

Wynn, S.G., Fougere, B.J. (2007). Introduction: Why Use Herbal Medicine. Dalam: Wynn, S.G., Fougere, B.J. (Ed). Veterinary Herbal Medicine: Library of Congress Cataloging-in Publication Data. ISBN: 10:0-323-029981.

Zhong, S.Q., Zhang, B.N., dan Huang, F.X. (1979). An Anti-Tumor Herb Cucao. China: Chin Tradit Herb Drugs Lett 3. Halaman 45–46.

Zou JM, Wang LS, Ma XM, Shi RB, Guo YJ. (2004). Isolation and Identification of A New Cucurbitacin from Picria fel-terrae. Acta Pharmacutica Sinica. 39(11): 910-912.

Zou JM, Wang LS, Niu XM, Sun HD, Guo YJ. (2005). Phenylethanoid Glycosides from Picria felterrae Lour. Journal of Integrative Plant Biology. 47(5): 632-636.

Zulkoni, H. Akhsin. (2010). Parasitologi. Yogyakarta: Nuha Medika. Halaman 71-72.

BAB III

METODE PENELITIAN

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental untuk mengamati efek ekstrak etanol daun pugun tanoh dalam berbagai konsentrasi terhadap waktu paralisis dan waktu kematian cacing Pheretima posthuma. Penelitian dilakukan dalam beberapa tahap meliputi penyiapan sampel, penyiapan hewan percobaan, pembuatan simplisia dan ekstrak etanol daun pugun tanoh beserta karakterisasi dan skrining fitokimia, uji aktivitas antelmintik ekstrak etanol daun pugun tanoh dan analisis data.

3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat-alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini meliputi blender (Panasonik), timbangan (Vibra AJ), mikroskop (Olympus), cawan datar (Coors), erlenmeyer, beaker glass, corong, alat destil, alat soklet, labu tentukur (Pyrex), tabung reaksi, pipet ukur (Iwaki Pyrex), oven (Dynamica), heating mentle (Boeco), labu alas bulat 500 ml (Duran), rotary evaporator (Stuart), cawan petri (CMSI), stopwatch (Croos), desikator (Iaswerk werti), bola karet (D&N), lumpang dan alu, lemari pengering, penangas air, krus porselin, spatula dan cawan alas bulat.

3.1.2 Bahan-bahan

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian adalah daun pugun tanoh, etanol 96% (Rudang Jaya) berkualitas teknis, bahan kimia lainnya berkualitas pro analisis seperti raksa (II) klorida, bismut (III) nitrat, asam nitrat pekat, asam nitran

0,5 N, kalium iodida, α-naftol, asam sulfat pekat (Merck), kristal natrium hidroksida (Univar), timbal (II) asetat, besi (III) klorida, asam asetat anhidrida, toluen, kloroform, asam klorida 2 N, asam klorida pekat, asam klorida encer, serbuk magnesium, serbuk seng, iodium, metanol, etil asetat, kloroform, isopropanol, eter, kloralhidrat, air suling, Tween 80, natrium klorida 0,9% (Widatarabakti) dan baku albendazole (PT. Indofarma).

3.2 Penyiapan Sampel

Penyiapan sampel meliputi pengambilan sampel dan identifikasi sampel.

3.2.1 Pengambilan sampel

Pengambilan sampel dilakukan secara purposif, yaitu tanpa membandingkan dengan bahan yang sama dari daerah lain. Tumbuhan pugun tanoh diambil dari Pajak Pancur Batu, Deli Serdang, Provinsi Sumatera Utara Bagian tanaman yang digunakan adalah daun. Hewan percobaan (cacing tanah) diambil dari Taman Obat Tradisional, Fakultas Farmasi, Jl. Tri Dharma, Pintu 4 Kampus USU, Medan, Provinsi Sumatera Utara.

3.2.2 Identifikasi sampel

Identifikasi tumbuhan dilakukan di Herbarium Bogoriense Bidang Botani Pusat Penelitian Biologi LIPI Bogor (Ramadhani, 2014). Spesimen hewan percobaan diidentifikasi oleh Laboratorium Taksonomi Hewan Departemen Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam USU.

3.3 Pembuatan Simplisia Daun Pugun Tanoh

Daun pugun tanoh dipetik dan disortir kemudian dicuci hingga bersih, ditiriskan dan ditimbang. Daun pugun tanoh dikeringkan dalam lemari pengering

pada suhu 30-35ºC untuk memperoleh simplisia. Simplisia yang telah kering ditimbang kemudian diblender menjadi serbuk hingga agak halus lalu dimasukkan ke dalam wadah tertutup dan disimpan pada suhu kamar.

3.4 Pembuatan Pereaksi 3.4.1 Pereaksi Mayer

Sebanyak 1,4 g raksa (II) klorida dilarutkan dalam air suling hingga 60 ml. Pada wadah lain ditimbang sebanyak 5 g kalium iodida lalu dilarutkan dalam 10lml air suling. Kedua larutan dicampurkan dan ditambahkan air suling hingga 100 ml (Ditjen POM., 1995).

3.4.2 Pereaksi Dragendorff

Sebanyak 0,8 g bismut (III) dilarutkan dalam 20 ml asam nitrat pekat. Pada wadah lain, sebanyak 27,2 g kalium iodida dilarutkan dalam 50 ml air suling. Kedua larutan kemudian dicampurkan dan didiamkan sampai memisah sempurna. Larutan yang jernih diambil dan diencerkan dengan air suling hingga volume larutan 100 ml (Ditjen POM., 1995).

3.4.3 Pereaksi Bouchardat

Sebanyak 4 g kalium iodida dilarutkan dalam air suling secukupnya, lalu ditambahkan 2 g iodium kemudian ditambahkan air suling hingga larutan 100 ml (Ditjen POM., 1995).

3.4.4 Pereaksi Liebermann-Burchard

Sebanyak 5 bagian volume asam sulfat pekat dicampurkan dengan 50 bagian volume etanol 96%. Kemudian ditambahkan dengan hati-hati 5 bagian volume asam asetat anhidrida ke dalam campuran tersebut dan dinginkan (Ditjen POM., 1995).

3.4.5 Pereaksi Molisch

Sebanyak 3 g α-naftol dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N dan dicukupkan hingga 100 ml (Ditjen POM, 1995).

3.4.6 Pereaksi asam klorida 2 N

Sebanyak 17 ml larutan asam klorida pekat diencerkan dengan air suling hingga 100 ml (Ditjen POM., 1995).

3.4.7 Pereaksi asam sulfat 2 N

Sebanyak 5,4 ml larutan asam sulfat pekat diencerkan dengan air suling sampai 100 ml (Ditjen POM., 1995).

3.4.8 Pereaksi natrium hidroksida 2 N

Sebanyak 8 g kristal natrium hidroksida dilarutkan dengan air suling sebanyak 100 ml (Ditjen POM., 1995).

3.4.9 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M

Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat dilarutkan dalam air suling bebas karbon dioksida sebanyak 100 ml (Ditjen POM., 1995).

3.4.10 Pereaksi besi (III) klorida 1% (b/v)

Sebanyak 1 g besi (III) klorida dilarutkan dalam air secukupnya dan diencerkan hingga 100 ml (Ditjen POM., 1995).

3.5 Karakterisasi Simplisia Daun Pugun Tanoh

Karakterisasi simplisia meliputi pemeriksaan organoleptik, mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari larut dalam air, penetapan kadar sari larut dalam etanol, penetapan kadar abu total dan penetapan kadar abu tidak larut asam.

3.5.1 Pemeriksaan organoleptik

Pemeriksaan organoleptik dilakukan dengan mengamati bentuk luar dari simplisia dan ekstrak etanol daun pugun tanoh, yaitu warna, bau, bentuk dan rasa.

3.5.2 Pemeriksaan mikroskopik

Pemeriksaan mikroskopik dilakukan terhadap serbuk simplisia daun pugun tanoh. Serbuk simplisia daun pugun tanoh ditaburkan diatas kaca objek yang telah ditetesi dengan larutan kloralhidrat dan ditutup dengan kaca penutup, kemudian diamati di bawah mikroskop.

3.5.3 Penetapan kadar air

Sebanyak 200 ml toluen dimasukkan ke dalam labu alas bulat, lalu ditambahkan 2 ml air suling, setelah alat dipasang, kemudian didestilasi selama 2 jam. Destilasi dihentikan dan dibiarkan dingin selama ± 30 menit, kemudian volume air dalam tabung penerima dibaca dengan ketelitian 0,05 ml.

Labu berisi toluen tersebut dimasukkan 5 g serbuk simplisia yang telah ditimbang seksama lalu dipanaskan hati-hati selama 15 menit kemudian setelah toluen mendidih, kecepatan toluen diatur 2 tetes per detik sampai sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes per detik. Air terdestilasi seluruhnya, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen.

Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, tabung penerima dibiarkan mendingin pada suhu kamar, setelah air dan toluen memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kadar air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (WHO., 2011).

3.5.4 Penetapan kadar abu total

Sebanyak 2 g serbuk yang telah digerus dimasukkan ke dalam krus porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Krus porselin dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, pemijaran dilakukan pada suhu 500-600°C selama 3 jam kemudian didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (WHO., 2011).

3.5.5 Penetapan kadar abu tidak larut dalam asam

Abu yang telah diperoleh dalam penetapan kadar abu dididihkan dalam 25lml asam klorida encer selama 5 menit. Bagian yang tidak larut asam dikumpulkan, disaring melalui kertas saring dan dipijar sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang dikeringkan (WHO., 2011).

3.5.6 Penetapan kadar sari larut dalam air

Sebanyak 5 g serbuk simplisia daun pugun tanoh, dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dilarutkan di dalam 1 L air suling) dalam labu tersumbat sambil sesekali dikocok selama 6 jam pertama, kemudian dibiarkan selama 18 jam, lalu disaring. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan penguap berdasar rata yang telah dipanaskan dan ditara. Sisa dipanaskan pada suhu 105°C sampai bobot tetap. Kadar sari yang larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI., 1995).

3.5.7 Penetapan kadar sari larut dalam etanol

Sebanyak 5 g serbuk yang telah dikeringkan di udara dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 96% dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali

selama 6 jam pertama dan kemudian dibiarkan selama 18 jam dan disaring. Sejumlah 20 ml filtrat pertama diuapkan sampai kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara. Sisa dipanaskan dalam oven pada suhu 105oC sampai diperoleh bobot konstan. Kadar sari yang larut dalam etanol dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Ditjen POM., 1995).

3.6 Skrining Fitokimia Simplisia Daun Pugun Tanoh

Skrining fitokimia serbuk simplisia meliputi pemeriksaan senyawa golongan alkaloid, flavonoid, tanin, glikosida, saponin dan steroid/triterpenoid.

3.6.1 Pemeriksaan alkaloida

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia ditambahkan 1 ml asam klorida 2 N dan 9oml air suling, dipanaskan di atas penangas air selama 2 menit. Setelah dingin lalu disaring dan filtrat digunakan untuk percobaan berikut:

a. filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereaksi Mayer akan terbentuk endapan berwarna putih atau kuning menunjukkan reaksi positif; b. filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereksi Bouchardat akan

terbentuk endapan berwarna coklat-hitam menunjukkan reaksi positif;

c. filtrat sebanyak 3 tetes ditambahkan 2 tetes larutan pereksi Dragendorff akan terbentuk endapan berwarna merah atau jingga menunjukkan reaksi positif.

Alkaloida dinyatakan positif jika terjadi endapan atau paling sedikit dua atau tiga dari percobaan di atas (Ditjen POM., 1995).

3.6.2 Pemeriksaan flavonoida

Larutan Percobaan:

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia disari dengan 10 ml metanol lalu direfluks selama 10 menit, disaring panas-panas melalui kertas saring berlipat,

filtrat diencerkan dengan 10 ml air suling. Setelah dingin ditambah 5 ml eter minyak tanah, dikocok hati-hati, didiamkan. Lapisan metanol diambil, diuapkan pada temperatur 40oC. Sisa dilarutkan dalam 5 ml etil asetat, disaring.

Cara Percobaan :

a. 1 ml larutan percobaan diuapkan hingga kering, sisanya dilarutkan dalam 1-2 ml etanol 96%, ditambahkan 0,5 g serbuk seng dan 2 ml asam klorida 2 N, didiamkan selama satu menit. Ditambahkan 10 ml asam klorida pekat, jika dalam waktu 2-5 menit terjadi warna merah intensif menunjukkan adanya flavonoida (glikosida-3-flavonol).

b. 1 ml larutan percobaan diuapkan hingga kering, sisanya dilarutkan dalam 1lml etanol 96%, ditambahkan 0,1 g magnesium dan 10 ml asam klorida pekat, terjadi warna merah jingga sampai merah ungu menunjukkan adanya flavonoida (Ditjen POM., 1995).

3.6.3 Pemeriksaan tanin

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia disari dengan 10 ml air suling lalu disaring. Filtratnya diencerkan dengan air suling sampai tidak berwarna. Ke dalam 2 ml filtrat ditambahkan 1-2 tetes larutan besi (III) klorida. Jika terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Farnsworth, 1966).

3.6.4 Pemeriksaan glikosida

Sebanyak 3 g serbuk simplisia disari dengan 30 ml campuran 7 bagian volume etanol 96% dan 3 bagian volume air suling. Selanjutnya ditambahkan 10lml HCl 2 N, direfluks selama 10 menit, didinginkan dan disaring. Pada 30 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M, dikocok, didiamkan selama 5 menit lalu disaring. Filtrat disari sebanyak 3 kali, tiap kali dengan 20 ml campuran 3 bagian volume kloroform dan 2 bagian volume

isopropanol. Lapisan air diambil kemudian ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes pereaksi Molisch, ditambahkan hati-hati 2 ml asam sulfat pekat. Jika terbentuk cincin warna ungu pada batas kedua cairan menunjukkan adanya ikatan gula (Ditjen POM., 1995).

3.6.5 Pemeriksaan saponin

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia dimasukkan ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan 10 ml air suling panas, didinginkan kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik. Timbulnya busa yang mantap setinggi 1-10 cm tidak kurang dari 10 menit yang tidak hilang dengan penambahan 1 tetes larutan asam klorida 2 N menunjukkan adanya saponin (Ditjen POM., 1995).

3.6.6 Pemeriksaan steroida/ triterpenoida

Sebanyak 1 g serbuk simplisia dimaserasi dengan 20 ml eter selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapkan dalam cawan penguap. Sisa dalam cawan penguap ditambahkan 2 tetes asam asetat anhidrida dan 1 tetes asam sulfat pekat. Timbulnya warna ungu atau merah kemudian berubah menjadi hijau biru menunjukkan adanya steroida/triterpenoida (Harborne, 1987).

3.7 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Pugun Tanoh

Serbuk simplisia diekstraksi secara sokletasi dengan menggunakan pelarut etanol 96%. Alat sokletasi dipasang, kemudian sebanyak 40 g serbuk simplisia daun pugun tanoh [Curanga fel-terrae (Lour.) Merr.] dibungkus dengan kertas saring kemudian dimasukkan ke dalam alat soklet. Pelarut etanol 96% sebanyak 400 ml dimasukkan ke dalam labu alas bulat dan dipanaskan pada suhu 80°C sampai tetesan siklus mendekati tidak berwarna/ tersari sempurna selama 18 jam. Filtrat kemudian dipekatkan dengan rotary evaporator pada suhu 50°C dan

diuapkan dengan penangas air kemudian dimasukkan ke dalam pendingin sehingga diperoleh ekstrak etanol daun pugun tanoh.

3.8 Karakterisasi dan Skrining Fitokimia Ekstrak

Karakterisasi dan skrining fitokimia ekstrak dilakukan dengan prosedur yang sama dengan karakterisasi dan skrining fitokimia pada simplisia daun pugun tanoh.

3.9 Uji Aktivitas Antelmintik Ekstrak Etanol Daun Pugun Tanoh 3.9.1 Hewan percobaan

Hewan percobaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah cacing tanah dewasa (Pheretima posthuma) dengan ukuran seragam (panjang 14 – 14,5 cm dan lebar 0,1 – 0,2 cm). Pheretima posthuma dikumpulkan dari tanah yang lembab, dicuci dengan air suling untuk menghilangkan pengotor dan diaklimasi dalam larutan salin selama 60 menit (Joseph, et al., 2013).

3.9.2 Uji pengaruh etanol terhadap Pheretima posthuma

Larutan etanol 96% diencerkan dengan salin hingga 20 ml untuk memperoleh larutan etanol 0,5; 1; 2; 4; 6; 8 dan 10%. Perhitungan pengenceran larutan etanol dapat dilihat pada Lampiran 20 halaman 59. Pheretima posthuma

dimasukkan secara terpisah ke dalam cawan petri yang masing-masing berisi larutan etanol dengan konsentrasi berbeda tersebut. Efek etanol terhadap

Pheretima posthuma diamati selama 5 jam.

3.9.3 Penyiapan sampel uji

Ditimbang 100, 200, 400 dan 600 mg ekstrak etanol daun pugun tanoh, kemudian masing-masing dimasukkan ke dalam vial yang sudah dikalibrasi 20

ml. Ekstrak dilarutkan dengan etanol 0,5% dan diencerkan sampai garis tanda. Albendazole disiapkan dengan mensuspensikan 1200 mg serbuk albendazole dalam lumpang yang berisi sejumlah larutan salin, lalu digerus. Sebanyak 0,3 ml Tween 80 ditambahkan ke dalam lumpang, kemudian digerus sampai terbentuk suspensi merata. Suspensi dipindahkan ke dalam labu erlenmeyer yang sudah ditara, kemudian dicukupkan dengan larutan salin sampai 60 ml sehingga diperoleh suspensi albendazole dengan konsentrasi 20 mg/ml. Perhitungan penyiapan suspensi ekstrak dan albendazole dapat dilihat pada Lampiran 22 halaman 61.

3.9.4 Uji aktivitas antelmintik

Uji aktivitas antelmintik dilakukan berdasarkan prosedur Patilaya dan Husori (2015). Hewan percobaan dibagi menjadi 7 kelompok yang masing-masing terdiri dari 3 ekor cacing Pheretima posthuma dengan perlakuan seperti pada Tabel 3.1.

Tabel 3.1. Perlakuan uji antelmintik ekstrak etanol daun pugun tanoh terhadap

Pheretima posthuma

Keterangan: EEDPT = ekstrak etanol daun pugun tanoh

Seluruh perlakuan dilakukan dalam cawan petri steril pada suhu kamar. Aktivitas antelmintik ekstrak daun pugun tanoh ditentukan berdasarkan waktu paralisis dan kematian melalui pengamatan terhadap motilitas dan morfologi cacing Pheretima posthuma selama 5 jam. Cacing Pheretima posthuma

Kelompok Perlakuan

I Pemaparan dalam 20 ml larutan salin steril (kontrol negatif) II Pemaparan dalam 20 ml larutan etanol 0,5% (kontrol pelarut) III Pemaparan dalam 20 ml suspensi albendazole 20 mg/ml (kontrol

positif)

IV Pemaparan dalam 20 ml larutan EEDPT 5 mg/ml V Pemaparan dalam 20 ml larutan EEDPT 10 mg/ml VI Pemaparan dalam 20 ml larutan EEDPT 20 mg/ml VII Pemaparan dalam 20 ml larutan EEDPT 30 mg/ml

dipindahkan ke dalam cawan petri berisi larutan salin bersuhu 40-50 ºC untuk memastikan hewan percobaan telah mati,.

3.10 Analisis Statistika

Data-data hasil penelitian disajikan dalam nilai rata-rata ± simpangan baku. Analisis statistika dilakukan menggunakan perangkat lunak SPSS versi 22.0 dengan metode analisis variansi (Anava) satu arah, apabila terdapat perbedaan signifikan, analisis dilanjutkan dengan uji Tukey. Analisis statistika dilakukan pada taraf kepercayaan 95%.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Identifikasi Tumbuhan

Hasil identifikasi tumbuhan yang dilakukan oleh Herbarium Bogoriense Bidang Botani, Pusat Penelitian Biologi LIPI Bogor menyebutkan bahwa tumbuhan yang digunakan adalah pugun tanoh [Curanga fel-terrae (Lour.) Merr.] suku Scrophulariaceae (Lampiran 1 halaman 56).

Pada penelitian ini bagian tumbuhan pugun tanoh yang digunakan adalah daun. Lampiran 4 halaman 62 menunjukkan bahwa secara visual daun pugun tanoh yang segar berwarna hijau muda sampai hijau tua, berbentuk bulat telur dengan tinggi 2-7 cm dan lebar 2-4 cm, ujung daun agak melancip, tepi daun beringgit dan permukaan daun bertekstur kasar. Daun terasa sangat pahit di lidah dan bila diremas daunnya tidak mengeluarkan bau. Hasil yang sama juga dilaporkan oleh Patilaya dan Husori (2015), Ramadhani (2014), Harahap, dkk. (2013), Fithra (2013) dan Juwita (2009).

4.2 Karakteristik Simplisia Daun Pugun tanoh

Hasil penelitian menunjukkan bahwa secara organoleptik simplisia daun pugun tanoh berwarna hijau (Lampiran 5 halaman 61). Simplisia daun pugun tanoh berasa pahit dan tidak berbau. Hasil yang sama juga dilaporkan oleh Patilaya dan Husori (2015), Ramadhani (2014), Fithra (2013) dan Juwita (2009).

Hasil pemeriksaan mikroskopik simplisia daun pugun tanoh dapat dilihat pada Lampiran 6 halaman 62. Daun pugun tanoh memiliki fragmen pengenal seperti trikoma, tulang daun, berkas pembuluh, rambut bersel banyak, kristal

kalsium oksalat bentuk prisma dan stomata dengan dua tipe yaitu diasitik dan anomositik. Hasil yang sama juga dilaporkan oleh Ramadhani (2014), Fithra (2013) dan Juwita (2009).

Pada penelitian ini simplisia daun pugun tanoh yang diperoleh memiliki nilai rendemen 27,82%. Menurut hasil penelitian Patilaya dan Husori (2015), rendemen simplisia daun pugun tanoh adalah 25,53%.

Hasil pemeriksaan kadar air, kadar sari larut dalam air dan etanol serta kadar abu dari simplisia daun pugun tanoh dapat dilihat pada Tabel 4.1. dan Lampiran 12–16 halaman 72-76. Kadar air simplisia daun pugun tanoh adalah 5,93%. Hal ini sesuai dengan persyaratan umum simplisia yaitu tidak lebih dari 10% (Depkes., 1995). Menurut Ramadhani (2014), kadar air simplisia daun pugun tanoh adalah 5,96% sedangkan menurut Fithra (2013), kadar air simplisia daun pugun tanoh mencapai 7,97%.

Tabel 4.1. Kadar air, kadar sari larut dalam air dan etanol serta kadar abu total dan tidak larut asam

Kadar sari larut air simplisia daun pugun tanoh mencapai 16,90%. Menurut Ramadhani (2014) dan Fithra (2013), kadar sari larut dalam air simplisia daun pugun tanoh masing-masing adalah 16,36% dan 16,18%.

Kadar sari larut dalam etanol simplisia daun pugun tanoh dalam penelitian ini adalah 21,58%, lebih tinggi dibandingkan hasil yang diperoleh oleh Ramadhani (2014) dan Fithra (2013) yaitu masing-masing 13,65% dan 14,54%.

No Parameter Hasil persentase (%)

1 Kadar air 5,93

2 Kadar sari larut air 16,90

3 Kadar sari larut etanol 21,58

4 Kadar abu total 2,71

Kadar abu total simplisia daun pugun tanoh adalah 2,71%. Menurut Ramadhani (2014), kadar abu total simplisia daun pugun tanoh adalah 8,56%, sedangkan menurut Fithra (2013), kadar abu total simplisia daun pugun tanoh mencapai 9,80%. Kadar abu tidak larut asam simplisia daun pugun tanoh yang diperoleh dalam penelitian ini adalah 0,43%. Menurut Ramadhani (2014) dan Fithra (2013), kadar abu tidak larut asam simplisia daun pugun tanoh masing-masing adalah 1,00% dan 0,98%.

4.3 Karakteristik Ekstrak Etanol Daun Pugun tanoh

Lampiran 8 halaman 64 menunjukkan bahwa secara organoleptik ekstrak etanol daun pugun tanoh yang dibuat secara sokletasi berwarna coklat dan konsistensinya kental, berasa pahit dan memiliki bau khas. Karakteristik tersebut sama dengan karakteristik ekstrak etanol daun pugun tanoh yang diperoleh secara maserasi oleh Patilaya dan Husori (2015) dan Fithra (2013).

Hasil penelitian menunjukkan bahwa rendemen ekstrak etanol daun pugun tanoh dengan metode sokletasi adalah 39,21%. Menurut Patilaya dan Husori (2015), rendemen ekstrak etanol daun pugun tanoh yang diperoleh dengan metode maserasi mencapai 33,25%. Rendemen ekstrak etanol daun pugun tanoh dengan metode sokletasi lebih tinggi dibandingkan metode maserasi. Hal tersebut disebabkan karena pemanasan dapat meningkatkan kelarutan komponen kimia tumbuhan dalam pelarut yang digunakan selama ekstraksi (Mokoginta, dkk., 2013; Harbone, 1996).

Hasil pemeriksaan kadar air, kadar sari larut dalam air dan etanol serta kadar abu ekstrak etanol daun pugun tanoh dapat dilihat pada Tabel 4.2. dan Lampiran 17-21 halaman 77-81. Hasil penetapan kadar air ekstrak etanol daun

pugun tanoh dalam penelitian ini adalah 3,99%. Hal ini sesuai dengan persyaratan kadar air secara umum yaitu tidak lebih dari 10% (Depkes., 1995). Menurut Fitra (2013), kadar air ekstrak etanol daun pugun tanoh yang diperoleh dengan metode maserasi yaitu 10,63 %.

Tabel 4.2. Kadar air, kadar sari larut dalam air dan etanol serta kadar abu total

dan tidak larut asam

Kadar sari larut air ekstrak etanol daun pugun tanoh dalam penelitian ini mencapai 58,67%. Menurut Fithra (2013), kadar sari larut dalam air simplisia daun pugun tanoh adalah 59,06%. Kadar sari larut dalam etanol ekstrak etanol daun pugun tanoh dalam penelitian ini adalah 70,98%, lebih tinggi dibandingkan hasil yang diperoleh oleh Fithra (2013) yaitu 70,44%.

Kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam ekstrak etanol daun pugun tanoh masing-masing adalah 1,77% dan 0,32%. Menurut Fithra (2013) kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam ekstrak etanol daun pugun tanoh yang diperoleh dengan metode maserasi yaitu 3,93% dan 0,35%.

4.4 Skrining Fitokimia Serbuk Simplisia dan Ekstrak

Hasil penelitian menunjukkan bahwa simplisia daun pugun tanoh dan ekstrak etanolnya yang diperoleh dengan metode sokletasi mengandung flavonoid, tanin, saponin, glikosida dan steroid/triterpenoid (Tabel 4.3). Kandungan golongan metabolit sekunder tersebut juga terdapat dalam ekstrak etanol daun

No _{Karakteristik Hasil Persentase (%)}

1 Kadar air 3,99

2 Kadar sari larut air 58,67

3 Kadar sari larut etanol 70,98

4 Kadar abu total 1,77

pugun tanoh yang diperoleh secara maserasi (Patilaya dan Husori, 2015; Fithra, 2013 dan Juwita, 2009) dan perkolasi (Harahap, dkk., 2013).

Tabel 4.3. Kandungan metabolit sekunder simplisia dan ekstrak etanol daun pugun tanoh

Keterangan: (+) : mengandung golongan senyawa (-) : tidak mengandung golongan senyawa

4.5 Aktivitas Antelmintik Ekstrak Etanol Daun Pugun tanoh 4.5.1 Hewan percobaan

Hasil identifikasi hewan percobaan yang dilakukan oleh Laboratorium Taksonomi Hewan, Departemen Biologi FMIPA USU menyebutkan bahwa hewan yang digunakan adalah cacing Pheretima posthuma (Lampiran 2 halaman 57). Cacing Pheretima posthuma memiliki warna tubuh bagian dorsal coklat keunguan, bagian ventral abu-abu keputihan, panjang tubuh 143-176 mm, diameter 3,5-6 mm dan jumlah segmen 125-137 (Lampiran 9 halaman 65).

Pheretima posthuma digunakan dalam penelitian ini karena memiliki kemiripan struktur anatomi dan fisiologis dengan cacing yang menginfeksi saluran cerna manusia (Vennila, et al., 2015; Nitave, et al, 2014; Borah, et al., 2013; Subash, et al., 2012; Sharma, et al., 2011; Sharma, 2010).

4.5.2 Pengaruh etanol terhadap Pheretima posthuma

Pengaruh pemberian etanol dalam berbagai konsentrasi terhadap

Pheretima posthuma dapat dilihat pada Tabel 4.4. dan Lampiran 10 halaman 66. Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi etanol yang tidak menyebabkan

No Golongan Metabolit Sekunder Simplisia Ekstrak

1 Alkaloid - -

2 Flavonoid + +

3 Tanin + +

4 Glikosida + +

5 Saponin + +

kematian Pheretima posthuma adalah tidak lebih dari 1%, namun etanol 1% menimbulkan perubahan morfologis seperti perubahan warna dan bentuk tubuh

Pheretima posthuma. Maka konsentrasi etanol yang digunakan sebagai pelarut dalam penelitian ini adalah 0,5%.

Tabel 4.4. Pengaruh etanol terhadap Pheretima posthuma

4.5.3 Aktivitas antelmintik

Aktivitas antelmintik ekstrak etanol daun pugun tanoh ditentukan berdasarkan waktu paralisis dan waktu kematian terhadap cacing Pheretima posthuma (Tabel 4.5. dan Lampiran 11 halaman 67). Tabel 4.5 menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun pugun tanoh (EEDPT) pada konsentrasi uji menyebabkan paralisis Pheretima posthuma.

Tabel 4.5. Uji aktifitas antelmintik terhadap Pheretima posthuma (n = 3)

Keterangan : EEDPT = Ekstrak etanol daun pugun tanoh Konsentrasi

Etanol (%)

Pengamatan Terhadap Cacing Pheretima posthuma

Kondisi Waktu Kematian (menit)

0,5 Hidup 0

1 Hidup 0

2 Mati 272

4 Mati 10

6 Mati 16

8 Mati 15

10 Mati 14

Sampel Waktu Paralisis

(menit)

Waktu Kematian (menit)

Larutan NaCl (kontrol negatif) _ _

Etanol 0,5% (kontrol pelarut) _ _

Albendazole 20 mg/ml (kontrol

positif) 77,33 ± 3,055 205,00 ± 9,539

EEDPT 5 mg/ml 157,00 ± 5,033 238,33 ± 6,506

EEDPT 10 mg/ml 88,33 ± 6,506 158,00 ± 5,292

EEDPT 20 mg/ml 47,33 ± 2,082 86,67 ± 5,033

Analisis statistika (Lampiran 25 halaman 85) menunjukkan bahwa efek paralisis EEDPT 20 mg/ml dan 30 mg/ml > EEDPT 10 mg/ml dan albendazole 20 mg/ml > EEDPT 5 mg/ml. Efek paralisis EEDPT terhadap Pheretima posthuma

dipengaruhi oleh konsentrasi. Semakin tinggi konsentrasi EEDPT, waktu paralisis semakin cepat.

Efek paralisis EEDPT yang diperoleh dengan metode sokletasi lebih lemah dibandingkan efek paralisis EEDPT hasil maserasi. Menurut Patilaya dan Husori (2015), efek paralisis pemberian EEDPT yang diperoleh dengan metode maserasi konsentrasi 10, 20 dan 30 mg/ml masing-masing terlihat pada 41,28; 23,27 dan 12,18 menit. Terdapat perbedaan waktu paralisis Pheretima posthuma

yang terpapar EEDPT yang diperoleh dengan metode maserasi dan EEDPT yang diperoleh dengan metode sokletasi, hal tersebut mungkin disebabkan oleh bedanya metode ekstraksi, konsentrasi pelarut yang digunakan, sumber tanaman, ukuran tubuh Pheretima posthuma dan waktu melakukan penelitian.

Tabel 4.5. juga menunjukkan bahwa EEDPT menyebabkan kematian

Pheretima posthuma. Efek kematian Pheretima posthuma dipengaruhi oleh konsentrasi EEDPT. Semakin tinggi konsetrasi EEDPT, waktu kematian

Pheretima posthuma semakin cepat. Analisis statistika (Lampiran 26 halaman 89) menunjukkan bahwa efek EEDPT 5, 10, 20 ,30 mg/ml dan albendazole 20 mg/ml berbeda secara signifikan (p < 0,05). Efek kematian EEDPT 30 mg/ml terhadap

Pheretima posthuma > EEDPT 20 mg/ml > EEDPT 10 mg/ml > albendazole 20 mg/ml > EEDPT 5 mg/ml.

Efek kematian EEDPT yang diperoleh dengan metode sokletasi lebih lemah dibandingkan efek kematian EEDPT hasil maserasi. Menurut Patilaya dan Husori (2015), efek kematian pemberian EEDPT yang diperoleh dengan metode

maserasi konsentrasi 10, 20 dan 30 mg/ml masing-masing terlihat pada 47,09; 27,41 dan 16,66 menit. Terdapat perbedaan waktu kematian Pheretima posthuma

yang terpapar EEDPT yang diperoleh dengan metode maserasi dan EEDPT yang diperoleh dengan metode sokletasi, hal tersebut mungkin disebabkan oleh bedanya metoda ekstraksi, konsentrasi pelarut yang digunakan, sumber tanaman, ukuran tubuh Pheretima posthuma dan waktu melakukan penelitian.

Secara umum, hasil penelitian menunjukkan bahwa EEDPT memiliki aktivitas antelmintik terhadap Pheretima posthuma. Aktivitas antelmintik EEDPT kemungkinan disebabkan oleh adanya senyawa tanin, saponin, flavonoid, steroid/terpenoid dan glikosida. Metabolit sekunder dapat bekerja sendiri atau dalam kombinasi sehingga menyebabkan paralisis (kelumpuhan) atau menyebabkan kematian cacing. Interaksi sinergis dari beberapa metabolit telah terbukti lebih efektif daripada metabolit tunggal (Mukherjee dan Houghton, 2009). Metabolit-metabolit tersebut dapat bertindak di satu atau beberapa lokasi target pada cacing (Wynn dan Fougere, 2007).

Tanin merupakan salah satu senyawa aktif yang mempunyai kemampuan mengendapkan protein dengan membentuk kompleks yang kuat (Makkar, 1993). Kemampuan tanin tersebut akan menyebabkan terjadinya penghambatan enzim dan kerusakan membran (Shahidi dan Naczk, 1995). Terhambatnya kerja enzim dapat menyebabkan proses metabolisme pencernaan terganggu sehingga cacing akan kekurangan nutrisi pada akhirnya cacing akan mati karena kekurangan tenaga. Membran cacing yang rusak karena tanin menyebabkan cacing paralisis yang akhirnya mati. Tanin dapat mengikat protein bebas pada saluran pencernaan cacing atau glikoprotein pada kutikula cacing sehingga mengganggu fungsi fisiologis seperti motilitas, penyerapan nutrisi dan reproduksi (Hoste, et al., 2006;

Githiori, et al., 2006). Tanin juga memiliki aktivitas ovisidal, yang dapat mengikat telur cacing yang lapisan luarnya terdiri atas protein sehingga pembelahan sel di dalam telur tidak akan berlangsung pada akhirnya larva tidak terbentuk (Tiwow, et al., 2013).

Saponin dapat menurunkan tegangan permukaan membran sel serta menghambat enzim asetil kolin sehingga dapat menimbulkan paralisis pada cacing (Tyler, 1976). Saponin juga mampu merusak membran mukosa pencernaan cacing sehingga mengganggu penyerapan makanan (Tjokropranoto, et al., 2011; Tyler, 1976) sehingga cacing akan kekurangan energi dan mengalami kematian (Mukherjee dan Houghton, 2009). Flavonoid menyebabkan degenerasi neuron pada tubuh cacing sehingga mengakibatkan kematian (Tjokropranoto, et al., 2011). Steroid mampu menginhibisi motilitas spontan cacing Pheretima posthuma

sehingga menyebabkan paralisis (Tjokropranoto, et al., 2011). Cara kerja glikosida adalah dengan mengganggu pembentukan energi pada cacing melalui fosforilasi oksidatif atau berikatan dengan glikoprotein pada kutikula cacing yang menyebabkan kematian cacing (Choudhary, 2013). Mekanisme kerja antelmintik senyawa metabolit sekunder telah diketahui, tetapi mekanisme efek antelmintik ekstrak etanol daun pugun tanoh masih belum jelas. Maka penelitian lanjutan perlu dilakukan untuk menjelaskan mekanisme kerja antelmintik EEDPT.

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa :

a. Karakteristik simplisia daun pugun tanoh yang meliputi kadar air, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol, kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam masing-masing adalah 5,93; 16,90; 21,58; 2,71 dan 0,43%. Karakteristik ekstrak etanol daun pugun tanoh yang meliputi kadar air, kadar sari larut air, kadar sari larut etanol, kadar abu total dan kadar abu tidak larut asam masing-masing adalah 3,99; 58,67; 70,98; 1,77 dan 0,32%.

b. Simplisia dan ekstrak etanol daun pugun tanoh mengandung golongan senyawa flavonoida, tanin, glikosida, saponin dan steroid/triterpenoid.

c. Ekstrak etanol daun pugun tanoh memiliki aktivitas antelmintik terhadap cacing

Pheretima posthuma. 5.2 Saran

Berdasarkan hasil penelitian ini, peneliti selanjutnya disarankan untuk meneliti mekanisme kerja antelmintik ekstrak etanol daun pugun tanoh.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Epidemiologi Kecacingan

Kecacingan merupakan penyakit endemik dan kronik yang diakibatkan oleh cacing parasit (Zulkoni, 2009). Infeksi cacing tidak hanya terjadi di negara tropis dan subtropis tetapi juga di berbagai daerah yang tingkat kebersihan lingkungannya rendah (Pagariya, et al., 2013). Badan Kesehatan Dunia memperkirakan lebih dari 1,5 miliar (24%) dari penduduk dunia terinfeksi cacing parasit dengan jumlah terbesar di wilayah Afrika, Amerika, Cina dan Asia Tenggara (WHO., 2015). Angka kecacingan mencapai 28% (Kemenkes., 2015) dan diperkirakan lebih dari 60% anak-anak terinfeksi cacing parasit di Indonesia (Tjay dan Rahardja, 2002).

Prevalensi infeksi cacing yang tinggi berdampak buruk bagi kesehatan, walaupun jarang menyebabkan kematian, namun infeksi cacing menyebabkan penderita khususnya anak-anak mengalami kekurangan gizi, kemunduran pertumbuhan fisik, mental, kognitif dan intelektual (Tiwow, dkk., 2013), pada orang dewasa menyebabkan menurunnya produktivitas kerja. Kecacingan dapat mengakibatkan menurunnya kualitas sumber daya manusia dalam jangka panjang (Zulkoni, 2010).

2.2 Penyebab Kecacingan

Filum utama cacing yang mempengaruhi kesehatan manusia yaitu filum Platyhelminthes dan filum Nemathelminthes. Filum Platyhelminthes terdapat 2 kelas penting, yaitu kelas Cestoda dan kelas Trematoda. Filum Nemathelminthes

yang penting adalah kelas Nematoda (Soedarto, 2008). Nematoda atau cacing bundar berbentuk bulat, tidak bersegmen, memiliki rongga tubuh dengan saluran pencernaan dan kelamin terpisah (Zulkoni, 2010). Nematoda menyebabkan infeksi pada usus, darah dan jaringan. Trematoda atau cacing pipih berbentuk seperti daun dan bersifat hermaphrodit kecuali cacing hati (Zulkoni, 2010). Cestoda atau cacing pita secara khas berbentuk pita yang besegmen, bersifat

hermaphrodit, tidak memiliki saluran pencernaan (Zulkoni, 2010) dan menempel pada usus (Tjahyanto dan Salim, 2013).

Infeksi cacing umumnya masuk melalui mulut atau luka di kulit atau lewat telur (kista) atau larvanya yang ada di atas tanah dan pembuangan kotoran yang dilakukan dengan sembarangan yang tidak memenuhi syarat kebersihan (Zulkoni, 2010; Tjay dan Rahardja, 2002). Kebiasaan penggunaan kotoran sebagai pupuk tanaman menyebabkan semakin luasnya pengotoran tanah. Persediaan air rumah tangga dan makanan tertentu, misalnya sayuran yang tidak dicuci bersih, kebiasaan makan masyarakat mengkonsumsi makanan mentah atau setengah matang sepeti ikan, kerang, daging atau sayuran akan meningkatkan penderita kecacingan, bila dalam makanan tersebut terdapat kista atau larva cacing maka dapat mengakibatkan kecacingan pada manusia (Entjang, 2003).

Tergantung dari jenisnya, cacing tetap bermukim dalam saluran cerna atau berpenetrasi ke jaringan. Cacing menyerap nutrisi dari tubuh manusia yang ditumpanginya, penyerapan ini akan menyebabkan kelemahan tubuh dan penyakit, dalam saluran pencernaan jika terdapat 20 ekor cacing dewasa, cacing-cacing tersebut bisa menyedot 2,8 g karbohidrat dan 0,7 g protein dalam sehari (Zulkoni, 2009; Tjay dan Rahardja, 2002). Gejala dan keluhan kecacingan dapat disebabkan oleh penyumbatan usus halus dan saluran empedu atau penarikan gizi yang

penting bagi tubuh. Sering kali gejala tidak begitu nyata dan hanya berupa gangguan lambung-usus, seperti mual, muntah, mulas, kejang-kejang dan diare berkala dengan hilangnya nafsu makan. Tuan rumah dapat menderita kekurangan darah akibat terinfeksi sejumlah cacing yang menghisap darah, misalnya disebabkan oleh cacing tambang, pita dan cambuk (Tjay dan Rahardja, 2002).

2.2.1 Infeksi nematoda

Infeksi nematoda yang sering dijumpai adalah: a. Onkoserkiasis (river blindness)

Penyakit ini disebabkan oleh Onchocerca volvulus yang ditandai dengan adanya benjolan dibawah kulit, ruam kulit yang terasa gatal dan lesi okular yang sering menyebabkan kebutaan (Tjahyanto dan Salim, 2013).

b. Enterobiasis (penyakit cacing kremi)

Penyebab penyakit ini adalah infeksi dari Enterobius vermicularis (Tjahyanto dan Salim, 2013). Cacing kremi biasanya menimbulkan gatal di sekitar dubur (anus) dan kejang hebat pada anak-anak. Infeksi ini dapat menyebabkan radang umbai-usus buntu akut (Tjay dan Rahardja, 2002). Gejala penyakit cacing kremi yaitu gatal disekitar dubur terutama pada malam hari pada saat cacing betina meletakkan telurnya, gelisah dan sukar tidur (Irianto, 2013).

c. Askariasis (penyakit cacing gelang)

Penyebab penyakit ini adalah Ascaris lumbricoides. Panjangnya 10-15 cm dan biasanya bermukim pada usus halus. Cacing betina mengeluarkan telur dalam jumlah sangat banyak, sampai 200.000 telur dalam sehari yang dikeluarkan dalam tinja (Tjay dan Rahardja, 2002). Gejala penyakit cacing gelang yaitu adanya rasa tidak enak pada perut (gangguan lambung), kejang perut, diselingi diare, kehilangan berat badan dan demam (Irianto, 2013).

d. Trikuriasis (penyakit cacing cambuk)

Agen penyebab penyakit ini adalah Trichuris trichiura. Umumnya terdapat di negara beriklim panas dan lembab. Cacing cambuk bermukim di mukosa usus halus dan usus besar dalam tubuh manusia, biasanya dengan menimbulkan kerusakan dan peradangan (Tjay dan Rahardja, 2002). Gejala penyakit cacing cambuk yaitu nyeri di ulu hati, kehilangan nafsu makan, diare dan anemia (Irianto, 2013).

e. Ankilostomiasis (penyakit cacing tambang)

Penyakit ini disebabkan oleh infeksi Ancylostoma duodenale dan Necator americanus. Cacing ini disebut cacing tambang atau cacing terowongan karena terdapat di daerah tambang dan terowongan di gunung. Penularannya terjadi oleh larva yang memasuki kulit kaki yang terluka. Setelah memasuki vena, larva menuju ke paru-paru dan bronki, akhirnya masuk ke saluran cerna (Tjay dan Rahardja, 2002). Cacing menempel pada mukosa usus dan menyebabkan anoreksia dengan gejala adanya luka mengakibatkan pendarahan usus kronis yang menyebabkan anemia, selain itu gejala penyakit ini adalah gangguan pencernaan berupa mual, muntah, diare, nyeri ulu hati, pusing, nyeri kepala, lemas, lelah dan gatal di daerah masuknya cacing (Irianto, 2013).

f. Trikinosis (cacing rambut)

Agen penyebab penyakit ini adalah Trichinella spiralis, biasanya disebabkan oleh konsumsi daging yang tidak cukup matang, khususnya babi (Tjahyanto dan Salim, 2013).

g. Strongiloidiasis (penyakit cacing benang)

Penyebab penyakit ini adalah Strongyloides stercoralis (Tjahyanto dan Salim, 2013). Penularannya lewat larva yang berbentuk benang yang menembus kulit.

3.6 Skrining Fitokimia Simplisia ... 31

3.6.1 Pemeriksaan alkaloid ... 31

3.6.2 Pemeriksaan flavonoid ... 31

3.6.3 Pemeriksaan tanin ... 32

3.6.4 Pemeriksaan glikosida ... 32

3.6.5 Pemeriksaan saponin ... 33

3.6.6 Pemeriksaan steroid/triterpenoid ... 33

3.7 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Pugun Tanoh ... 33

3.8 Karakterisasi dan Skrining Fitokimia Ekstrak ... 34

3.9 Uji Aktivitas Antelmintik EEDPT ... 34

3.9.1 Hewan percobaan ... 34

3.9.2 Uji pengaruh etanol terhadap P. posthuma ... 34

3.9.3 Penyiapan sampel uji ... 34

3.9.4 Uji aktivitas antelmintik ... 35

3.10 Analisis Statistika ... 36

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 37

4.1 Identifikasi Sampel ... 37

4.2 Karakteristik Simplisia Daun Pugun Tanoh ... 37

4.3 Karakteristik EEDPT ... 39

4.4 Skrining Fitokimia Serbuk Simplisia dan Ekstrak ... 40

4.5 Aktivitas Antelmintik EEDPT ... 41

5.1 Kesimpulan ... 46

5.2 Saran ... 46

DAFTAR PUSTAKA ... 47

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

3.1 Perlakuan uji antelmintik EEDPT ... 35

4.1 Kadar air, kadar sari larut dalam air dan etanol serta kadar abu total dan tidak larut asam simplisia daun pugun tanoh ... 38

4.2 Kadar air, kadar sari larut dalam air dan etanol serta kadar abu total dan tidak larut asam EEDPT ... 40

4.3 Kandungan metabolit sekunder dari simplisia dan EEDPT ... 41

4.4 Pengaruh etanol terhadap Pheretima posthuma ... 42

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Hasil identifikasi tumbuhan ... 55

2 Hasil identifikasi hewan ... 56

3 Surat albendazole ... 57

4 Tanaman pugun tanoh dan simplisia daun pugun tanoh [Curanga fel-terrae (Lour.)Merr] . ... 59

5 Simplisia daun pugun tanoh dan serbuk simplisia daun pugun tanoh ... 60

6 Hasil pemeriksaan mikroskopik daun pugun tanoh ... 61

7 Gambar seperangkat alat sokslet ... 62

8 Ekstrak etanol daun pugun tanoh ... 63

9 Pheretima posthuma ... 63

10 Uji pengaruh etanol terhadap Pheretima posthuma ... 64

11 Uji aktivitas antelmintik terhadap Pheretima posthuma ... 65

12 Larutan uji aktivitas antelmintik terhadap P. posthuma ... 66

13 Perhitungan kadar air simplisia daun pugun tanoh ... 67

14 Perhitungan kadar sari larut air simplisia daun pugun tanoh ... 68

15 Perhitungan kadar sari larut etanol simplisia daun pugun tanoh ... 69

16 Perhitungan kadar abu total simplisia daun pugun tanoh ... 70

17 Perhitungan kadar abu tidak larut asam simplisia daun pugun tanoh ... 71

22 Perhitungan kadar abu tidak larut asam EEDPT ... 76

23 Perhitungan pengenceran etanol ... 77

24 Uji aktivitas antelmintik EEDPT ... 78

25 Perhitungan penyiapan ekstrak ... 79

26 Uji Statistik paralisis Pheretima posthuma ... 80