UJI AKTIVITAS ANALGESIK EKSTRAK ETANOL 80% DAUN Marsilea crenata Presl. DENGAN METODE GELIAT PADA MENCIT Repository - UNAIR REPOSITORY

BAB III KERANGKA KONSEP

3.1. Uraian Kerangka Konseptual

  a, me me me me mi mi mi mili li li iki ki i k k i a a a kt kt kt t iv iv iv v it it it i it a a an an an an a a a a l l a a ge ge ge ge si si sik k k k (L (L (L ( as as asswaa wa a ti ti tii, , , , 2007; ; L La L L iz zzur ur r urma ma ma m n, n, n,

  Q ti ili iki k ki k b k f i l h t

  a, a d d d d d a ap apat didu crenata ju ju ju ju ga ga ga a a g m m m m em em em m em il l ik ik k ik i i i ka ka ka a a nd nd nd nd nd un un un n ung ga ga ga a n flavonoid

  a,

  a,

  ka a nd nd nd n nd nd un un un n ga ga ga ga a g n n n fl fl fl fl fl av av a av v on on on n oi oi oi oi oii d d d d d d qu qu qu u qu q er er er e ce ce ce c e c ti ti ti ti i t n. n n n M M M M M ak ak ak ak ak a

  1 S S S en en en en n n g gu gu gu g u Da Da Da Dari r r p p p en en en nel l lit it it it ia ia iaa n n n la la la la in in in jj j jug ug uga dike ke ke ke ta ta ta ta hu hu hu u u h u i i i i i ba ba ba b a hw hw hw w hw w a a a a d cr cr r cr cr c en en en n n at at at t a a a a a a me me me e mi mi mi mili li li liki ki ki ki k k k kan an an ndu du du ung ng ng gan an an an f f ffla la la l vo vo vo vo o vo o no no no o o id i id id i . . Pa Pa Pa P Pa d da d qu qu qu qu u q ad ad ad d ad ad ri ri ri i i fo fo fo fo fo li li li l l a a a a a a da da da d n n n n M. M. M M. M M. m m m in in inut u ut ut a a a a te te te te la la la la h h h di di di i d ke e ke k ke k t t tahui

  20 01 1; 1; 1; 1; 1;

  2

  2

  Semakin populernya daun M. crenata di kalangan masyarakat, karena diketahui memiliki banyak kegunaan, maka mulai dilakukan penelitian-penelitian terkait daun M.

  crenata tersebut. Salah satu penelitian yang sudah dilakukan

  9 9 6% 6% 6% daun pa pa pa pa p da da da d w w wan an an a n it it it it a a a a a a a pa pa pasc sc scam am amen en en op op op op au au au ause se se s , , ak k k ak k ak akan an an a an an a a m m m m m em em em em e m be be be be b ri ri ri ri r k ka k k n ef di di di ka k ka ka ka a re re re re n n na na n a na ka ka ka ka n n n n hi hi h hi i l lan ng ng ng ng n n n ny ny ny nya a aa p p p peg eg eg egal al al al p p p p ad ad ad ad a a aa pe pe pe pe rs rs rs r en n en en en di di di di d an an an an .

  9

  9

  9

  ya a a it it itu, u u, u, u, p p p p p ad ad ad d d a a a a pe pe pe e p mb mb mb mb mb b er er r er ia ia ia ia ia n n n n ek ek ek ek e st st t tra ra ra a k k k k k et et et t e an an an an an ol ol ol l o

  p p p p p p crenata a te te te t e rs rs rs rs eb eb eb eb b b ut ut t ut u ut . . . Sa S Sa Sa Sa a la la a a a la h h h h h s a sa sa s tu u tu tu p p p p p en en en e e el el el el l it it it it it ia ia i ia ia n yang sudah

  24

  Quercetin memiliki banyak fungsi, salah satu nya adalah sebagai analgesik. Mekanisme quercetin bekerja sebagai analgesik, yaitu dengan menghambat ekspresi COX-2, yang akan mengurangi produksi prostaglandin oleh asam arakidonat dan mengurangi rasa nyeri (Tawekijpokai, 2011; De Britto, 2013; Vijayalakshmi, 2015; Sulistyawati, 2016).

  crenata memiliki kandungan flavonoid. Pada daun M. quadrifolia dan M. minuta telah diketahui memiliki kandungan flavonoid quercetin. Maka, dapat diduga daun M. crenata juga memiliki kandungan flavonoid quercetin.

  Dari penelitian lain juga diketahui bahwa daun M.

  yaitu, pada pemberian ekstrak etanol 96% daun M. crenata pada wanita pascamenopause, akan memberikan efek nyaman dikarenakan hilangnya pegal pada persendian. Selain itu, tanaman M. trifolia dan M. quadrifolia yang juga masih satu genus dengan M. crenata, memiliki aktivitas sebagai analgesik (Laswati, 2007; Laizurman, 2011; Sengupta, 2012).

  ta ta ta ta t na na na a a m ma ma ma ma m n n n n M. M M M trii i ifo fo fo fo fo f li li li lia a a a da da da da d n n n M. M M. q q q q ua ua ua adr dr dr dr if if if if ifol ol ol ol o ia i ia ia ya y ya ya ya ng ng ng n g ng j j j j ug u ug ug ug u a a a a a ge ge ge g e e n nu nu nu n u n s ss s de de de d ng ng ng ng an an n n M. M M. c re reena na na n ta ta ta ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

  25 Berdasarkan hasil-hasil penelitian tersebut mengenai daun M. crenata, maka dapat diduga bahwa daun M. crenata memiliki aktivitas sebagai analgesik. Metode uji aktivitas analgesik metode geliat yang digunakan untuk mengetahui aktivitas analgesik dari ekstrak etanol 80% daun M. crenata, adalah dengan melihat jumlah geliat dari mencit. Mencit akan diinduksi nyeri dengan asam asetat, yang kemudian akan y g g , y g menyebabkan timbulnya geliat pada mencit sebagai respon menyeb b b b ab ab ab ab ab ka k ka ka ka n n n n ti ti ti ti ti i m mb mb mb mb b ul ul ul ul l ny ny ny a a a a g ge ge ge ge li ll li li li a at at at t p p p p p ad ad ad ad ad a a a mencit seba ny nyeri. Jumlah geliat mencit akan menurun jika bahan uji, y y eri. er er i. i i i. J J J J um m m m m m la la la a h h h h ge ge ge ge e li ll li li at at at at t m m m m m en e en en ci ci c ci t t t t ak ak ak an an an an an m m m m m en en en en n urun jika ur ur yaitu ekstrak etanol 80% daun M. crenata, yang diberikan y ya ya ya ya it i it it u u ek u ek ek k st st st st ra ra ra ra a a a k k k k k k k etan et et an anol ol ol

  8 0% 0% 0% 0% d d d d au au au u n n n n M. M M M. M. M. c c c c c re re re e e na na n na a t ta ta ta a , yang ke ke kepada mencit, memiliki aktivitas sebagai analgesik (Vogel, ke e pa pa pa pa a da da da aa m a m m m enci en en en ci ci cc i t, m m m m m m m m emil em em em il il il iki ik ik ik ii ak i akti ak ak tivi ti ti vi vi vi taas ta ta s s see se se ba ba ba ba ga g g ga ga i i i i an an an an an al al al al ge g g 2002).

  

8

  8

  20

  20

  20

  2

  20

  02 2 2). 2 )) ). ). ).

  02

  02

  02 ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

  26

  3.2 Bagan Kerangka Konseptual Daun Marsilea crenata Pada Marsilea Aktifitas

  Presl. quadrifolia dan analgesik pada Marsilea minuta satu senyawa genus dengan M. quercetin crenata terdapat senyawa quercetin yang memiliki aktivitas analgesik (De

  B Britto, 2013; B B Bri tto, 2013; Vij Vij

  V Vij Vijayalakshmi, 2015) Vij aya ay aya aya a lak lak lak lak lak l k shm shm shm shm hm h i, i, i, i i,

  2 2 201 5) Quercetin menghambat Quer e ekspresi COX-2, seh sehingga biosintesis Pada penelitian terdahulu an terdahul hul hul hul hu hu u u u Sk Skr Skrining fitokimia Skr Skr Skr k ini ini i ini in ini ni n ng i ng ng n fit fit fit fitoki fit o mia oki oki oki mia mia mia mia i prostaglandin terhambat prost berdasarkan pengalaman pengal al al ama ama ama ma n n n menunjukkan bahwa men men men m unj unj unj un ukk ukk ukk ukk an an an bah bah bah bah wa wa wa wa

  (Su (Sulistyawati, 2016) subyek uji wanita M. M M M. M. M M M. cre cre cre cre nata nat nat nat a a a i wani ani ani ani i ta ta ta ta dau daun M. crenata dau dau d dau au a au u n n n n pascamenopause, ekstrak use, e,

  e, e ek ek ek ek str str str t ak ak ak men men mengandung senyawa men n n n n n g gan gan n n n dun du d dun du d dun g s g s g s g seny eny eny enyawa awa awa awa flavonoid, dan jumlah flavon n noid n oid oid oid i , d , d , d , d d dan a an an jum jum jum jum um lah lah lah h etanol 96% daun M. d d d d aun aun aun aun u n M. M M M. M. crenata menimbulkan n n imb imb imb mb b b ulk ulk ulk k an an n flavonoid total flavon fla fla vo vo oid id d to to t ta to ta tal ter ter ter terbanyak terdapat t ban ban ban ban n yak yak yak y yak ak ter t dap pat p p at att rasa nyaman pada tubuh pad pad pad pad pad ad a ubu a t a t t ubu ub b u u h h h h h berupa hilangnya nyeri g gny ny ny ny a n a a n a yer ye yer y er er i i i i pada e pada ekstrak etanol pad pad pad a ee a e ks kst ks kstrak et e anoll e l (Tawekijpokai, 2011) (Ta (Ta (Ta (Ta (Ta T wek wek wek w ijpoka ijp ijp jp oka oka oka oka k i, i, , 201 201 201 201 2011)

  01 1) 1) 1))

  1 pada persendian ss end end nd nd n ian ian ia Penghambatan pada Pe Pen Pe Pe P (Laswati, 2007).

  20 07) 07 07) 07) 07) 7 .. respon nyeri

  20

  20

  20

  

Ekstrak etanol 80% Daun M. crenata memiliki aktivitas

analgesik dilihat dari penurunan jumlah geliat pada

mencit ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

  27

3.3. Hipotesa Penelitian

  Ekstrak etanol 80% daun M. crenata memiliki aktivitas sebagai analgesik dengan terlihatnya penurunan jumlah geliat mencit (Mus musculus) pada uji aktivitas analgesik dengan metode geliat. ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

BAB IV METODE PENELITIAN

4.1. Tempat dan Waktu Penelitian

  Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Departemen Farmakognosi dan Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Airlangga. gg

  4.2. Bahan-bahan yang Digunakan

  4.2. Baha a a a a n n- n ba ba ba ba ba ha ha ha ha a a n n n n ya ya y ya a n ng ng ng g Di Di Di Di Di Di g gu gu gu gu na na na na n a ka ka ka ka ka n n n n n

  4.2.1. Ba

  4.2.1. Bahan Tanaman B B Ba Ba a ha h ha ha h n n n Ta Ta Ta Ta a na na na na ma m n m ma ma m m n n n

  B Ba Ba Bahan yang akan digunakan adalah daun M. crenata Ba ha ha han ha n n n n yan ng n n ng ng n ng a a a aka ka ka ka n n n n di d di di gu gu gu guna na naka na k n ka ka n ad n n ad a a a ad ad al al al al ah ah ah h d d d d d a au au au u n n n n M

  ya ya ya yang didapat dari daerah Benowo, Surabaya pada bulan Mei a a ng ng ng g g d d d d id id id dap ap ap at dar a i ar ar ii da da daa er er e ah er ah ah B B Ben n n ow ow ow ow o, o, o, S S S ur ur ur ab ab ab b b ay ay ay ay ay a a a a a pa pa pa a aa da da da da da b

  20

  20

  20 2016, yang dipanen pada umur 2 bulan. Sebanyak 10 kg daun

  16

  16

  16

  16

  6 , ya ya y yang ng ng ng d d d d ip ip ip i an an an anen en en e p p p ada um um um mur ur urr 2 b b b b ul ul ul ulan an an an . . Se . S Se See e e ba ba ba ba a ny ny ny y ak ak a ak k

  6

  1

  1

  1

  1

  segar. Daun M. crenata dalam keadaan segar dikumpulkan se se e e ga ga ga ga a r. r. r. D D D D a au au au n M cc M M. M c cre re renata da re da daa lam m m ke ke ke k ad adaa ad aan aa n n se se s se se e g ga ga ga r r r r di d di di di di k k k k dan dibersihkan, lalu dikeringkan di bawah sinar matahari da da d da da n n n n di di d di di be be be b rs rrs rs ihkan, la laalu la lu lu lu di di di dike keri ke ke rr ng r ng g g ka k n di ka ka di b di di b b b a aw a w w w w w a ah ah ah s s s s s i in in in in a a ar a

  p pagi. pa p pa g gi gi gi i .

   4.2.2. Bahan Kimia

  4.2.2. Ba a a ha ha ha n n n n Ki Ki Ki K m m mi mi i a a a a a

  Bahan kimia yang digunakan dalam penelitian ini Ba Ba Ba Ba a ha ha ha ha n n n ki ki ki ki k mi mi mia a a y ya ya ya ya ng n ng ng g d d d d d ig ig ig ig g u un un un un n ak ak ak ak ak an a an an an dalam pen diantaranya, yaitu n-heksana, etil asetat, etanol 96% teknis, diantaranya, y ai ai ai i t tu tu tu u n n n n n - he h h he he h ks ks ks ks k ks an an an an an a a a, a e e e til asetat, etanol 96 ti ti

  CMC-Na 0,5%, asam asetat glacial, ibuprofen tablet generik 400 mg produksi Indo Pharma, aquades.

  28

  29

4.2.3. Hewan Uji

  

V

  g- ma ma maasi i s i s i ng ng n ng k k k k el el el el el e om om om m om di di di di be be be be b be ri ri r r ri ka ka ka ka n n n te te ttertt rt rter er er er a a a a pa pa pada da da da Gamb mb mb ba ar aa 4

  4

  4

  4.5. Sk Sk Sk Skem em em e a a a P Pe e e e P e mb mb mb m m ag ag ag g ia ia ia a a n n n n n n

  Uj Uj Uj jj i. i. i. i 4.3. . . . Al A A A A Al att t t – – Al Al Al l Al at at at a ya ya y ya ya y ng ng ng ng g Di Di Di D gu gu gu gu n n n ak ak ak k an an a an

  Al Al Al Al Al Al at at a at - - al al al al al a a at a at at ya ya ya y ng ng ng g di di ii gu gu gu na na na naka ka ka ka kaan n n n da da da da d da d a da la la la la la l m m m m m pe pe pe p ne ne ne ne n e li li li l t ti ti tt an

  blen en en de de de e r, r, r, r, tim im im m m m ba a ba ba ba b ng ng ng n g an an an a a ll l l ll i is iis is i iiss t ttr tr t tr tr ik k ik ik ik ik k ik, , , , i ti ti i ti ti t mb mb mb mb m an an an an a ga ga ga ga g n n n n n me me me m m nc nc n n nc it it it t , maserat pisah, ro o ota ta ta a ry ry y ry ry ev ev ev v ap ap ap ap p or or or r or at t t t or or or o , al al al al at su su su u nt n nt nt nt ik ik ik i i i , , , so o so so o nd nd d nd n e oral, pelat Gel 60 F 254 lamp p u u u u UV

  

V UV U U

  25

  V V

  25

  25

  25

  5

  4

  4

  4

  4 n n n nm dan 366 nm

  ke ke ke e lo lo lo l mp m m m mp m mp mpok ok ok b b bes es e er r rta ta ta p p p per er erla la laku ku ku kuan m m m aas as as in in in g g g

  V V V.

  Pada penelitian ini digunakan 36 ekor mencit jantan galur BALB/c yang berumur 2-3 bulan dengan berat badan 20 sampai 30 gram yang didapatkan dari Laboratorium Hewan Departemen Patologi Fakultas Kedokteran Universitas Brawijaya. Untuk mengurangi faktor-faktor yang dapat mempengaruhi hasil penelitian, digunakan hewan uji dengan galur, lingkungan dan makanan yang sama. Hewan uji sebanyak 36 ekor mencit selanjutnya dibagi ke dalam 6 kelompok uji, yaitu, kelompok kontrol positif, kelompok kontrol negatif, kelompok perlakuan I, kelompok perlakuan II, kelompok perlakuan III, dan kelompok perlakuan IV. Pembagian kelompok beserta perlakuan masing-masing kelompok yang diberikan tertera pada Gambar 4.5. Skema Pembagian Kelompok Uji.

  f,

  Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah blender, timbangan listrik, timbangan mencit, maserator, corong pisah, rotary evaporator, alat suntik, sonde oral, pelat KLT Silica Gel 60 F-254, lampu UV 254 nm dan 366 nm. digunakan hewan uj uj uj uj uj i i ii i d de de de e deng g g g g an a an an an n g g g g g g al al a al ur u , lingkungan dan mak sama. He He He wa wa wa wa a n n n n n n uj uj uj uj u j i i i i se se seba ba bany ny ny ny ak ak ak k

  36

  6

  6

  6 6 ek k ek ek or or or m m m m m m en en en en ci c c t selanjutnya

  daala la lam m m 6

  6 6 ke ke ke ke e e lo lo lo ll mp mp mp mp mp ok ok ok ok u u u ji ji ji i ji j , , , ya ya ya ya y it it it i it it it u u, u u u, , k k k k el el el e om om om om m o po po po p k k k k k ko ko ko ko kont nt nt n ro ro rol l l positif

  ko ko ko k o nt nt nt nt ro ro ro l l l l ne ne n ne e n ga ga ga g ga ati ti ti tif,

  f, f ke ke ke ke lo lo lo o mp mp mp mp ok ok ok ok p p p p er er er erla la laku ku ku k an an an n n an

  I I

  I I

  I II

  I , , ke ke ke e lo lo lo o mp mp mp mp mp ok ok ok pe

  ke k k k lo o o mp mp mp m mp o ok ok ok ok o p p p per er erla a a a aa a kuan n n n n an n I

  I I

  III

  II II

  II, da da da da n n n n ke ke ke ke lo lo lo lo mp mp mp m ok ok ok k p p p per er er e e er la la la l ku ku k kuan n n n n

  I I

4.3. Alat – Alat yang Digunakan

  ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

  30

4.4. Prosedur Penelitian

4.4.1. Pembuatan Ekstrak

  Serbuk halus daun M. crenata sebanyak 250 g diekstraksi dengan cara maserasi dengan pelarut n-heksana. Residu dari ekstraksi tersebut kemudian di maserasi dengan pelarut etil asetat dengan jumlah yang sama, dan langkah yang sama. Kemudian residu yang sudah dikeringkan dari hasil ekstrr hasil ekstraksi etil asetat tersebut dimaserasi dengan 1 L r a ak ak ak k si si si s e e e e ti ti t ti l l l l l as as a s et et et t t at t at at t t t t t er er er r se se s se bu bu bu bu t dimaserasi de pelarut etanol 80% selama 24 jam. Setelah didiamkan pela a r ru ru ru ru t t t t et et et e an an n n n ol ol ol oll l

  8

  8

  8

  8 8 0% 0% 0% 0% % s s se se e la la la a ma ma ma ma ma a

  2

  2

  2

  2

  4 4 4 ja ja ja ja a m m. m. m Setelah r re re re rendaman tersebut disaring dengan corong buchner yang re e nd nd nd nd d am am am m an n n n n t t t er e er er er se se see se se but bu b b bu bu t t t disa di di sa saari ri ri ri ng ng ng ng d d d d d d en en en n ga g ga ga g ga n n n n co o oro ro o o ng ng ng n ng buch di dihubungkan dengan pompa vakum untuk mendapatkan di di di d di hu hu hu hu hu bu bu bu bu b ng ng ng ng n gka kan kaa ka ka n de n de d de de de de de ng ng ng n ng n n n an an an an p p p p om om om om pa v pa pa pa v vak v ak ak aak kum um u um um um u u u u u nt nt n nt nt uk uk uk uk uk m e fi f fi filtratnya. Selanjutnya, dilakukan remaserasi dengan 750 ml fi lt ltra lt ra ra a t tn tn tnya ya ya ya . . Se S l la lla la la la nj nj nj nj njut nj nj nj ut ut utny ny ny ny

  a, a d

  a,

  a, d d dil il il il ak ak ak uk uk uk uk an r an an an r r em em em em aass a ser e er er r as as s s i i i i de de d d de de n n ng etanol 80%, setelah itu dilakukan penyaringan dan et et et t an an an n n nol ol ol ol

  8 80% 0 , 0% 0% , , se se s s tela laah la h h itu u u u d di di di la la la la ku ku ku ka ka ka n n n pe pe pe p e ny n ny ny ar ar ar a r i in in i

  8

  remaserasi dilakukan lagi dengan 750 ml etanol 80%. Filtrat re e e e e m ma ma m m ase sera se se ra ra si si si d d d d il il ilak akuk ak uk uk u an l l llag a i d a d de n ngan an an n

  7

  7

  7

  50 m m m m l l e et et et t t an an a a o ol ol ol ol

  5

  50

  50

  8

  8

  8

  yang diperoleh digabungkan dan dipekatkan dengan rotary y ya ya ya n ng n n g g g d d d d ip iper ip eee oleh dig igab ig ig ab ab abun ungk un un g gk gk an d an an an d d d an d an an an d d ip ip ip ek ek ek ek at a at a t ka ka ka a n n n n n de de de de d ng n n n n evaporator hingga didapatkan ekstrak kental. Langkah- ev e e ev e ap ap ap ap p o o or or or rat ator at or or hing ng ngga ng ga ga ga did d d d id id d ap apat ap ap at at a ka k n ek k k ek ek st st s ra st ra ra a k k k k ke k k ke ke nt nt nt nt t al al al .

  la langkah pembuatan ekstrak etanol 80% daun M. crenata la la la la ng ng ng g g ka k ka ka ka h h h h h h h pe pe pe p mbua m mb mb ua uata ua ta taan n n n ek ek ek ek st stra st ra r k k k k e et etan et an an nol o 8 ol ol

  8 8 0% 0% 0% % % d d d au au au au n M n n

  8

  da d da dapat dilihat pada Gambar 4.7. Skema Pembuatan Ekstrak da da a pa pa pa pa t d di d d d li li l li i ha ha ha ha ha h t t t t t pa p p pa pa da da d G da G G a am am am bar ba ba r r r 4 4.

  4.7 7.

  7.

  7 S S S S k k k ke ma ma ma ma P P P P P P em em em em em buata Etanol 80% Daun M. crenata. M M. M M c re re re r re na na na a ta ta ta ta Etan an n n n ol ol ol ol ol

  7.

  8

  8

  8

  8 8 0% 0% 0% 0% D D D D D au au au au u n n n n ..

  31

4.4.2. Skrining Fitokimia dengan Kromatografi Lapis Tipis Identifikasi Terpenoid

  Sedikit ekstrak dilarutkan dengan etanol 80% kemudian ditotolkan melalui pipa kapiler pada pelat KLT Silica Gel 60 F-254 sebagai fase diam. Fase gerak yang digunakan yaitu n-heksana : etil asetat = 4:1. Hasil KLT disemprot dengan penampak noda anisaldehid asam sulfat. Adanya terpenoid menimbulkan noda berwarna merah/merah ungu.

  Identifikasi Flavonoid

  Sedikit ekstrak dilarutkan dengan etanol 80% kemudian ditotolkan pada fase diam Silica Gel 60 F-254 dengan fase gerak butanol – asam asetat glasial – air (4:1:5) hasil KLT disemprot dengan penampak noda asam sitrat borat. Adanya flavonoid ditunjukkan dengan timbulnya noda berwarna kuning intensif. ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA disemprot denga ga g g g n n n n n p p pe pe e pena a amp mp mp mp mp ak ak noda anisaldehid as

  Adanya ya ya t t t er er er er e pe pe pe pe p n n noid d d d m m m en en en en e im im i im i m bu bu bu bu u lk lk lk k l an an an noda me me mera ra ra h/ h/ h/ h// me me me me e e ra ra ra a h h h h h un u un ungu gu gu u g . . .

  Id Id Id d

  I I en en en en n n ti ti t ti fi fi fi fi fi fi ka ka a k ka k si si sii F F F la la la la l l l vo vo vo vo v v v no no no noid id id id

  Se Se Se S dii i i i i i ki ki k ki t t t t t t tt ek ek ek ek st st st stra ra ra ak k k k di di di dila la la l ru ru ru u tk tk tkan an an an d d d en en en n e ga ga g ga a ga n n n n n n e e eta

  ke ke ke k m m mu mu mu m mu m di di di di an an an a d d dit it it ot ot ot ol ol olkaa ka n n n pa pa paada fas s e e ee di di diam am am S S S S il il il ill ic ic ic a a Ge Ge Ge Ge Ge l l l l l de e de de de n n ng ng g n g an an an an f fff as as as e eee ge ge g gera ra rak k k k butaaanol – a aasam m m a a a se se se s ta ta ta t t t gl gl gl gl gl as a as a a s ia a ia l l l l – – – ha ha ha h h s sii i s s l l l KL KL KL KLT T T T di di d d se mp p mp mpro ro ro rot t tt de de de de ng ng ng g an an an p p p pen en en e am am am m pa pa p pa k k k k k k n n no no o da da da da a a a a a bo bo bo b bo o ra ra ra a a t. t. t. t A A A da da da danya a a fl fl fl av av av avon on on on oi oi oi oi d d d di di di ditunj j jjuk uk uk k ka ka ka ka n n n n n de de de e de ng ng ng n g an an an an a a

  no no no o no n da da da da a b b b b er er e e e e wa wa wa w rn rn rn rn a a a ku ku ku kuni ni ni n ng ng ng in in in n te te tee ns ns ns nsif if if f.. .

  32

  

1

  1

  15

  5

  5

  5 5n 5n 5n 5 - - -

  5

  5 5 5 ≥ 1

  1

  1

  15

  

n n n n ≥ 4

  

4

  4

  4 Pa Pa Pa Pa Pa da da da a d p p p pen en ee el el el elit it itiaa a a n n n n in in in ini, i, i, i, d d d d ig ig ig g un un un unak k an an an an j j j um um um m m mla la la a h h h h me me me me nc nc nc n it

  ma ma ma ma ma si si si si si s ng n ng ng g g p p p p er r rr e e e k k k k k el el el ellom om m mpo po pok k k ad ad d ad a al al al alah ah ah ah a 6 6 6 e e eko k ko ko ko r r. r. r. r T T T T T er e er er er r da da da da daa pa pa pa pa pa a t t t t 6 k

  se e ehi hi hi h hi ng ng ng ga ga ga ga ga g d d d d d ib ib ib b b ut ut ut u u uh h h uh uh h uh h ka ka kaa k k n n n

  36 36 36 ek ek ekor or orr m m me me me me nc nc c nc n it it i it u u u u u nt nt n nt uk uk k uk k uk p p p p e en en en e elitian

  1

  ((6- 1) ) ) ) 1) 1)) ( ( ( ( ( n n n n- - -1) 1) 1) 1) ≥ ≥ ≥

  4.4.3 Penentuan Jumlah Hewan Uji

  6 n n = = = = ju j ju ju ju ju u m ml ml m ml m l ah ah ah ah ah h he h he he he he h wa a wa wa wa n n n n u u u ji ji ji ji ji i pe pe pe pe p r r r ke k k k k lompok pe pe pe pe e rl rl rl rl ak ak ak k k a ua a uan n n

  Hewan uji dibagi kedalam lima kelompok, yang dilakukan dengan menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap (RAL), yakni dengan melakukan pemberian nomor pada hewan uji, kemudian dilakukan pengundian. Jumlah minimal per kelompok mengikuti rumus Federer, yakni :

  (t-1) (n-1) ≥ 15 Dimana : t = kelompok perlakuan = 6 n = jumlah hewan uji per kelompok perlakuan maka : (t-1) (n-1) ≥ 15

  (6-1) (n-1) ≥ 15 5n-5 ≥ 15 n ≥ 4

  Pada penelitian ini, digunakan jumlah mencit masing- masing per kelompok adalah 6 ekor. Terdapat 6 kelompok, sehingga dibutuhkan 36 ekor mencit untuk penelitian ini.

  4.4.4. Persiapan Hewan Uji

  Sebelum digunakan, mencit terlebih dahulu diaklimatisasi selama 1 minggu di kandang mencit sesuai kelompoknya dengan tujuan mengadaptasikan hewan uji dengan lingkungan yang baru. Pada tahap ini dilakukan

  ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA Dimana a a a : : : t t t t = = = = ke ke ke ke e e lo lo o lo o mp mp mp mp mpok ok k k ok p p p p er er er e er la la a la la ku ku ku k u ku an an an an = = =

  ma m ma ma ma a k ka ka ka ka : : : ( ( (( t tt- -1) 1) 1) ( ( ( ( ( ( n n n n n - 1)

  5

  1

  1 1 ) 1 )) ≥ ≥ ≥ ≥

  

1

  1

  1

  15

  5

  5

4.4. Persiapan He He He wa wa wa a n n n n n Uj Uj U Uj U i ii i i

  ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

  33

  pengamatan terhadap keadaan umum hewan uji, meliputi berat badan dan keadaan fisiknya. Mencit yang sehat memiliki ciri-ciri bulu mengkilat, tidak ada kecacatan fisik, dan tidak ada luka pada kulit. Mencit yang dapat digunakan untuk penelitian adalah mencit yang dinyatakan sehat.

4.4.5. Preparasi Bahan Uji

4.4.5.1. Pe e e e e n n n n en en en en tu tu tu t u an an an a an an D D D D D D D o os os os is is is is is E E E E E ks k ks ks ks ks s tr t tr tr r ak ak ak ak ak k E E E E E tanol 80% Da 4.4.5.1. Penentuan Dosis Ekstrak Etanol 80% Daun M.

  crenata cren n n at at at at a at a a a a a M. M. M. M M cren

  Do Do Do D Do Dosis ekstrak etanol 80% daun M. crenata yang si si sii si s ek s s s s ekst ek ek st s st ra ra ra k k k et et et et an an an n ol ol ol 8

  8

  8

  8 8 0% 0% 0 d 0% 0% % % d d d d au au au au n n n n di d digunakan pada penelitian ini merupakan konversi dosis dari di di gu gu gu u u n n na na na ka ka ka ka aan a n n pa pa pa pada da da da da d a p p p p e en en en e e e n el el el el itia it it it ia ia ian n n n in in in in i i ii me me me me ru ru r pa ru pa pa p a ka ka ka k ka n n n n ko ko ko ko ko k nv nv nv nv nv er er er si do dosis ekstrak etanol 96% daun M. crenata pada penelitian do do o si si si si s s s s ek ek ek ek stra st st st ra r k ra et et ettan t t t an an nol ol 9 ol ol

  9 96% 6% 6% % d d dau au au au n M. n n n M. M. M. M. cc c r na re re re na na a ta ta ta ta a pa pa pa a da da da da

  9

  sebelumnya. Terdapat 4 dosis ekstrak yang digunakan dalam se e e e be be be b e lu l lu lu umn mn mn m ya ya ya y . Te Te Te erd rd rd d a at 4 ap ap ap

  4 dos sis s i ii ekss ks kstr tr tr trak ak ak ak y y y y an an an a g g g g g di d d d di g g g un un un n n a a a a ak

  4

  pe pe pe p penelitian ini, kelompok masing-masing dosis disebut e e ne ne ne n lii li li tian ti ti ti a an an i ii i ni ni ni, , ,, ke ke kelomp ke m ok mp k m m mas ss s ing in in in g g-ma maa ma si ssi s ng ng ng ng g d d d d d o o os os os i Kelompok Perlakuan I (KP I); Kelompok Perlakuan II (KP Ke Ke Ke K lo lo lo o o mp m ok mp mp mp ok ok Perlaku ok u u an I an an an

  

I

II (KP ( ( ( KP KP KP

  I I ); ) ); K K K K el ellom el om om om po pok po po k k k Pe Pe Pe Pe rl rl l ak ak ak ak u u u u

  II);

  II I

  II II); Kelompok Perlakuan III (KP III); dan Kelompok

  I II

  I ); ); ); ); K K K K K K el el el e om ompo om om po po ok k Pe Perl Pe Pe rl rl rl ak ak akua ak uan ua ua n n n II

  III (K (K (K (K P P P

  II II

II II

  I III) I) I) I ; ; ; ; da da da da n n n K Pe Pe Pe Pe Perlakuan IV (KP IV). Berikut dosis pada masing-masing Pe rl rl rl l ak ak ak k k ua ua ua ua n n n n n n

  IV V ( ( ( KP KP I KP KP

  IV IV

  I I V) V)) V) . .. Be Be Beeri ri ri k ku ku ku t t t do do d do si si s si si i s s s s pa p pa p pa pa da da da a m m m m m asin kelompok perlakuan: ke ke ke ke e l lo lo lo lo mp mp mp p p p ok ok o ok k p p p p er er er r r la la la ku ku ku k ku k an an a an : :: Dosis KP I = 2,25 mg/20 g mencit Do si si si s i i s s s s s KP KP K KP KP

  I = = = =

  I I

  2 2,

  2

  2

  2

  25

  2

2 m m m m m g/ g/ g/ g/ /

  25

  25

  20 20 g g g g g m m m m m en en en en n c ci ci ci ci t t t t

  Dosis KP II = 4,5 mg/20 g mencit Dosis KP P

  I I

  I I

  I I

  I II I = = = 4, 4, 4, 4, 4,

5 m m m mg mg mg /2 /2 /2 /2

  5

  5

  5

  5

  5

  2 2 g g g g g me me m me nc nc nc c i it i it it

  Dosis KP III = 6,75 mg/20 g mencit Dosis KP IV = 9 mg/20 g mencit

4.4.6. Pembuatan Larutan CMC Na 0,5% (Kontrol Negatif)

  Sejumlah 0,25 g CMC Na ditimbang lalu dikembangkan dalam 5 ml air hangat. Setelah ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

  34

  mengembang, CMC Na digerus sampai homogen, setelah itu ditambahkan akuades sampai 50 ml.

  4.4.7. Pembuatan Larutan Penginduksi Asam Asetat 0,6%

  Asam asetat glasial 0,3 ml dimasukkan dalam labu ukur 50 ml ditambahkan aquadest hingga volumenya 50 ml.

  4.4.8. Perhitungan dan Pembuatan Kontrol Positif

4.8. Perhitun un un u n ga ga ga ga a a n n n n n n da da da da d a n Pe n n Pe Pe mb mb mb mb u ua ua ta a a a n n n n Ko Ko Ko Ko o n n nt nt nt nt ro ro ro r o l l l Positif

  S Su S Su Su Su Suspensi kontrol positif menggunakan Ibuprofen. sp sp sp p p en en e e en si si si i i k k k k k k on o on on o on n tr tr t tr tr r r ol ol ol o ol o p p p p p os o os s it t t t if if if i i f m m m m men en en en en gg gg gg g g un un unakan I

Di Di Di D b Dibutuhkan suspensi Ibuprofen sebanyak 50 ml, diberikan Di b bu bu bu tu tu tu t u hk hk hk h h k a an an a a an n s ss us us us us pe p p pe pe n ns ns ns i i Ib i Ibup Ib Ib up up up ro ro ro o fe fe fe n se n n seba se s e e e ba ba b ba b ny ny ny y y y ak ak ak ak k k

  5

  5

  5

  5 5 ml,

  sebanyak 0,4 ml/20 g mencit/hari secara peroral. see e ba ba ba a a ny ny ny n y yak y ak 0 ak ak 0,4 m l/ / / /

  20

  2

  2

  20

  20 2 g g g g m m m en en en en ci ci ci c t/ t/ t/ t/ hari ha ha ha ri ri i s s sec ec ec ec ar aar arr r r a a a a pe pe pe e ror r r r r al al al al .

2 Dosis Ibuprofen untuk manusia = 400 mg/70 Do Do Do Do o si si si si s ss Ib Ib Ib up up uprofe fen f fe n n un untu un tuk tu k k manu m m u si si si i a = a aa = =

  20

  40 400 m mg mg mg m g /7 /7 /7

  40

  40

  7 kg k kg kg kg kg BB/hari g g g BB BB BB BB /h /h /h har ar ari ii

  7

  Dosis Ibuprofen untuk mencit = 400 mg x 0,0026 Do Do Do D Do o o sis si sii s s s Ib Ib Ib b up up up p ro ro ro ofe fen n n un un un untu t k me me me me nc nc nc it i i = = = =

  4

  4

  4

  4

  00

  00 00 m m m m g x g g x x x x 0, 0, 0,

  00

  00

  00

  26

  26

  26

  2

  26

  6

  = 1 = 1,04 mg/20 g

  1 ,0 ,0 ,0

  1

  4

  4

  4

  4 m m m m m g/ g/ g/ / //

  20

  20 mencit/hari (dalam 0,4 ml) menc me me me n nc nc it it it i it / /h /h /h ar r r r i i i i (d ((d (d (d d al

  2

  20

  20

4.4.9. Pelaksanaan Uji Aktivitas Analgesik

4.9. Pe la la laks ks ks ks a an an an aa a a aa aa n n n n n Uj Uj Uj Uj Uj i i i i ii Ak Ak Ak Ak Ak Ak k ti ti ti t tii i i vi vi vi vi vi vi i ta t ta ta t ta s s s An An An An An An a a al al a ge ge g ge e si si s si si si k k k k 1.

  1. Sebelum digunakan, mencit dipuasakan selama 8 jam Se Se e e be be be be e lu lu lu lu m m m m m m di di d di di gu gu gu gu na na na ka ka ka k n n, n, n, m m m m m e en en en n ci ci ci c t t t t t d di di di i puasakan selam namun tetap diberi minum air

  2. Pada hari pengujian, mencit ditimbang bobotnya.

  3. Setiap mencit diberi perlakuan sesuai kelompoknya seperti yang tertera pada 4.5. Skema Pembagian Kelompok Uji.

  35

  4. Setelah 30 menit, mencit diinduksi asam asetat 0,6% sebanyak 0,2 ml/20 g BB secara intraperitoneal.

  5. Setelah 5 menit, dilakukan penghitungan geliatan selama 30 menit dengan direkam.

  6. Semua data yang diperoleh dibuat tabel kemudian dilakukan analisis data.

  Langkah-langkah pelaksanaan uji aktivitas analgesik Langkah-la la la la la ng ng ng ng ng g k ka kah k k pe pe pe pe pe pe la la la la la k ks ks k ks anaan uji aktivitas ana dengan metode geliat dapat dilihat pada Gambar 4.6. Skema deng g g an an an m m m m m et e et et et et od od o od od d e e e e ge ge ge liat at at at d d d d ap ap ap att d d d d il il il i ih ih ih h at at a at t p p p p p ad ad a ad a a a Gambar 4.6

  K Kerja Uji Aktivitas Analgesik Ekstrak Etanol 80% daun M. Ke Ke Ke Ke K rj rj rj rj rj j a a Uj a Uj Ujj Uj Uj i ii i i i A A Ak Ak Ak Ak A ti ti ti i i i vi vi vi vi vi ta ta ta ta s s s s Anal An A A An A An An An An a al al al al al al a al ge g g ge ge ge si si s si si k k k k k k Ek Ek Ek E Ek k s st st st ra ra a a a k k Et E Et Et Et Et an an an ol o o o o o 80% d cr cr cr cr crenata. en en en n at at a at a t

  a. a a a a

  35

4.5. Skema Pembagian Kelompok Uji

  g- m ma ma m sing ng ng ng d d d dib ib ib iber er er eri i i su su su susp sp spen en en ensi eks ks ks k tr r trak ak ak ak e e eta ta ta no no n l l

  5

  5 5 mg mg mg mg mg / me me me menc nc ncit it itt , , , se eeba ba ba ba bany ny ny yak a a a 0,4

  

4

  

4

4 4 ml, se se secara o o o ora ra ra ra l lll. l Ke Ke Ke K ll l. l P P P Perlakuan I

  I III

  I I I (K (K (K (K P P P P II

  II ): ): ): 6 6 6 e e eko ko ko kor me me e nc n nc nc it iit it, , , d di di di d d i di ti ti ti mb mb mb b m an an an an

  g,

  g,

  g,

  g, m m ma ma ma m si si si s ng ng ng

  80

  5

  80 80 % % % % % d d

cr cr cr c c en e en n n en at at ata a a a da da da ala la la l m m m m CM CM CM C C C C C Na Na Na N 0 0,5 ,5 ,5 ,5% % % % de de de ng ng ng g an an an n d d d d os os s os ss is i is is

  4

  4 4 ,5 ,5 ,5 5 m m m m m g/2 me me m me m nc nc nc c it t it it i it , , , se se se ba ba ba b b ny ny ny n ak ak ak ak ak 0,4

4 ,4

4 ,4 m m m l, , l, l s sssec ec eccar ar ar a a a a or or or o a aal al al ll .

  Ke e l. l. l. l P P P P er er er e r la la la la la ku ku ku ku ku an an an n n

  III

  

I I ( ( ( ( KP KP KP KP P

  I I

  I I

  I II) ): ): ):

  6

  6 6 e e e ko ko ko ko ko ko k r r r r me me me me m e n nc n it, ditimbang masing- ma ma ma m si si si si si ng ng ng ng d d d d d ib ib ib b ib er er i i i su s s su su sp s sp sp p s en en en en si si i si si s e e e e ks ks ks ks k k trak etanol 80% d

  5

  5

Gambar 4.5. Skema Pembagian Kelompok Uji pada Uji Aktivitas Analgesik

  I I

  Ekstrak Etanol 80% daun M. crenata

  36 ekor mencit

  Kel. Kontrol Positif (K(+)): 6 ekor mencit, ditimbang, kemudian masing-masing diberi suspensi ibuprofen (1,04 mg/20 g BB mencit) dalam CMC Na 0,5% sebanyak 0,4 ml, secara oral.

  Kel. Kontrol Negatif (K(-)): 6 ekor mencit, ditimbang, kemudian masing-masing diberi suspensi CMC Na 0,5% sebanyak 0,4 ml, secara oral.

  Kel. Perlakuan I (KP I): 6 ekor mencit, ditimbang, kemudian masing-masing diberi suspensi ekstrak etanol 80% daun M. crenata dalam CMC Na 0,5% dengan dosis 2,25 mg/20 g BB mencit, sebanyak 0,4 ml, secara oral.

  Kel. Perlakuan II (KP II): 6 ekor mencit, ditimbang, kemudian masing-masing diberi suspensi ekstrak etanol 80% daun M. crenata dalam CMC Na 0,5% dengan dosis 4,5 mg/20 g BB mencit, sebanyak 0,4 ml, secara oral.

  Kel. Perlakuan III (KP III): 6 ekor mencit, ditimbang, kemudian masing-masing diberi suspensi ekstrak etanol 80% daun M. crenata dalam CMC Na 0,5% dengan dosis 6,75 mg/20 g BB mencit, sebanyak 0,4 ml, secara oral.

  Kel. Perlakuan IV (KP IV): 6 ekor mencit, ditimbang, kemudian masing-masing diberi suspensi ekstrak etanol 80% daun M. crenata dalam CMC Na 0,5% dengan dosis 9 mg/20 g BB mencit, sebanyak 0,4 ml, secara oral.

  ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

  masing-ma ma ma m si si i sing ng ng ng d d d d d ib b b ib ib b er eri i i su su su s s s s sp sp sp p en en en ensi si si C C C C MC Na 0,5% seban seca ca ca ra ra ra ra o o o o o ra ra ra r r l. l. l l. l Ke Ke Ke K K l. l. l. l P P P P er er err la la laku ku ku ku ku u k an an an an

  I I

  I I

  II ( ( ( ( KP KP KP KP I

  2 2 ,2 ,2 ,2 ,2

  

I

I I): ): ): ):

  6

  6 6 6 e e e e ko ko ko ko r r r me me me m nc n nc n it it it t it i i , , , di di di i ti ti ti ti mb mb mb mb mb an an an an a g

  g,

  g, g ke m m ma a a m asi si si sin ng ng ng - -ma a a a si si si i ng ng ng ng ng ng ng ng d d d d ib ib ib iber er er eri i i su su su su sp sp sp sp en en en n si si si s e eee ks ks kstr tr tr tr ak ak ak ak e e e e ta ta ta a no no no o no l l l

  80

  80

  80

  8 80 % % % % % d c c cr cr r cren en enat at at a a a da d lam m m CM CM CM MC C C Na Na Na N 0,5 5 % % % % de de de d ng ng ng an an an an d d d o os s s os is is i is

  2

  2

  2

II II

  ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

  36 4.6. Skema Kerja Uji Aktivitas Analgesik Ekstrak Etanol 80% daun M. crenata

  Mencit putih jantan (Mus musculus) sejumlah 30 ekor Kelompok Perlakuan Kelompok Kontrol

  Kp Kp I (6 ekor) K K Kp Kp K

  I I (6 (6 ( (6 eko e eko eko r r) r) r) ) Kp IV (6 ekor) Kp Kp II (6 ekor) Kp Kp K Kp Kp Kp

  I I

  II II (6 (6 (6 6 eko eko eko eko e r) r) r) r) r) Kp Kp III (6 ekor) K K Kp p

  II (6

  III (6 ( ( ( ekor) K- (6 eko K- (6 ekor) ko o o o r) r) r) K + (6 ekor) Diberi D D D D ibe ib ibe ibe b be be rr ri ri ri ri Diberi

  III

  III

  Dib Dib Diberi Diberi ib eri e i D b Dib Dib Dib Diberi ib er eri er er

• Diberi CMC- Diberi CM CM CM CM M C C C C C

  Diberi suspensi s pen sus sus sus pen pen en si si si si i suspensi sus sus sus sus suspensi pen pen p pen si si si sus sus suspensi sus pen pen pen pen e si si si Na 0,5 Na 0,5%, 0,4 ,5 5%, %, %, % , 0,4 0,4 0,4 0 4 suspensi ekstrak etanol ek eks eks ekstrak k tra tra tra ra a a a k k k k k eks eks ekstra eks eks ekstrak etanol tra tra tra k e k e k e k etan k e tan tan tan ol ol ol ol ol ol ekstrak etanol eks eks eks ks s tra tra tra r a k k k k eta eta eta eta no nol no n ml/ ml/20 g BB / /

  20 20 g g B g B g B B B B B ibuprofen 0,4 etaa etano etanol 80% eta o o ol o ol o 80% % % % % 80% dosis 4

  20

  80% 80% 80% 80% 80% dosis 2 dos dos dos dosis is 2 is 2 80% 80% dosis 3 80% 80% dos d dos sis is i is

  2

  2

  3 secara peroral sec c ara ar ara ara pe pe pe p ror ror r al al al l ml/20 g BB

  3

  3

  0,4 ml /20 g d d dosis 1 0,4 dos d is s s 1 0 1 0 1 0 1 0 ,4 ,4 ,4

  4 0,4 0,4 0,4 0,4 0,4 ml/20 g ml m ml /20 /20 /20 20 g g g 0,4 0,4 0,4 0,4 ml /20 g 4 ml ml ml ml /2 /2 /2 /2 2 0 g 0 g 0 g g secara peroral m ml/20 g BB ml/ m 20 g B g B g g B B B B B BB secara

  4

  BB secara BB B B sec sec ecara ara ara ra BB BB BB BB secara BB B sec ec ec e c ara a a a a a peroral sec sec sec secara ara ara ara perr peroral e o er er o o oral al pe pe peroral per per ora ra raa l ll l peroral pe per per o l ora ora ora l ll

  Set Set Se Setelah 30 menit, diberi induksi asam asetat 0,6% Set e ela ela ela h 3 h 3 h 3 30 m 0 m m m enit, eni eni eni tt dib t, dib dib dib eri eri eri ri in induk in in duksi asa duk duk asam a asa asa m aset m se set t at 0,6 at at 0,6 0,6 % % % se seb se sebanyak 0,4 ml/20 g mencit secara intraperitonial seb eb eb eb b any any any n ak ak 0,4 ak ak 0,4 0 4 0,4 0,4 ml ml ml ml ml ml /2 /20 /20 //20 /20 g g g men g men men men cit cit cit cit se cit se secar se cara i car a i a i a i ntr ntr ntr tr a aa ape ape ape ape rit rit rit rit r rit o o o oni a al al al l

  Setelah 5 menit, rekam dan hitung geliat S S Set Set Set e ela ela ela ela h 5 h 5 h 5 h 5 5 menit me me nit nit nit nit , r , r , r , r eka eka eka k k ka m d m d m d m d m an an an an n hit hit h t hit ung un ung ung n gel gel gel ge e iat iat ia iat a mencit selama 30 menit men men me men en c c cit se se selam se lam lam lam m a 3 a 3 a 3 3 0 m 0 m 0 m 0 m en eni een en t t t

  Keterangan :

  K+ = Kontrol positif (Suspensi Ibuprofen 1,04 mg/20 g BB mencit dalam CMC-Na 0,5%) K- = Kontrol negatif (CMC-Na 0,5%) Kp 1 = Kelompok perlakuan I (Dosis 1 ekstrak etanol 80% daun M.

  crenata 2,25 mg/20 g BB mencit) Kp 2 = Kelompok perlakuan II (Dosis 2 ekstrak etanol 80% daun M. crenata 4,5 mg/20 g BB mencit) Kp 3 = Kelompok perlakuan III (Dosis 3 ekstrak etanol 80% daun M. crenata 6,75 mg/20 g BB mencit) Kp 3 = Kelompok perlakuan IV (Dosis 4 ekstrak etanol 80% daun M. crenata 9 mg/20 g BB mencit)

Gambar 4.6. Skema Kerja Uji Aktivitas Analgesik Ekstrak Etanol 80% daun M. crenata

4.5. Skema Pembuatan Ekstrak Etanol 80% daun M. crenata

  C , lama = 4 hari

  37

  ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

• - Digiling

  - Diuapkan dengan
• Dimaserasi dengan n-heksana teknis
• Disaring dengan corong Buchner - Dicuci bersih lalu dikeringkan dengan suhu

  = 31

  ^o
>D Dim Dim im i D D m ase as as ras i d i i d i d d i en eng en n e a
• Dis Di Dis Disari ari ari r ng ng ng g ng den en den den den den gan gan gan g
• Disaring dengan corong Buchner - Diuapkan dengan

  Filtrat Residu Residu Filtrat Ekstrak n-Heksana daun

• Dimaserasi dengan etil asetat teknis
• Disaring dengan corong Buchner - Dimaserasi dengan etanol 80% te
• Diu D Diu Diuapk ap ap aa an an a a an an den den den en en en e gan gan gan an
>D Dim Dim Dim D m D D ase ase ase a ras ras ras i d i d d d e en
• Dis Dis Dis s i ari ari ari aa ng ng ng d den den den d
• Diu Diu Diu Diu D D D apk apk apk apk k p an an an a den den den den d gan gan gan an
• Diuapkan dengan

ADLN-PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

  rotary evaporator Daun M. crenata basah Serbuk kering

Gambar 4.7. Skema Pembuatan Ekstrak Etanol 80% Daun M. crenata

  rotary evaporator

  M. crenata Filtrat Residu

  Ekstrak etil asetat daun M. crenata

  rotary evaporator

  rot rot ot o ro o ar ary ary r r ev v ev ev ev v apo po po po ap apo ap ap a rat ra rra or or or o

  rot rot rot rotary a a a evapo apo apo aporat att rat or or or o Fil Fil Fil i l tra tra ra tra t a t t t Res Res Res Res Re s Re s R idu idu idu idu

  Res Res Res e id id idu u du Fil Fil Fil Filtra tra tra tratt t t ra ra ra ra a k n k n k n k n k - Hek Hek Hek e Hek sa sa san n a na d a d a d d a d daun aun aun n

  M. M. M. M M ccr cre cre cr nat nat nat at a a a a a Fil Fi Fil Fi l tra tra ra a t t t t

  Resi Ekstra k k k k eti eti eti eti l a l a l a l a set set set at a at da da dau d a d n M. M. M. cre re re e nat nat nat na a a a a

  M. crenata Ekstrak etanol 80% daun

  38

4.6. Kerangka Operasional Penelitian

  Daun M. crenata Ekstrak Et Ekstrak Etanol 80% daun M. crenata Et Et t an an an a an ol ol ol o l l

  8

  

8

8 80% 0% 0% % % % d d d d d au au au au u n n n n n M. M M crenata

Sk Skrining Kandungan ekstrak etanol 80% Sk Sk Sk Sk ri ri ri i n ni ni ni ng ng K ng g K K K K K K an an an an n n n n d dung du du d du d d ng ng ngan an an an e e ee ks ks ks ks tr tr tr ak ak ak ak eee e ta ta ta no no no no l l l 80 l

80 % % % % %

  

8

  

8

  80

  80

  8