EKSPLORASI MIKROBA ENZIM LIPOLITIK AIR P (1)
Proposal Penelitian
EKSPLORASI MIKROBA PENGHASIL ENZIM LIPOLITIK PADA
SUMBER AIR PANAS LEMO SUSU, PINRANG, SULAWESI SELATAN
ISRAN ASNAWI
H31109001
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR
2013
EKSPLORASI MIKROBA PENGHASIL ENZIM LIPOLITIK PADA
SUMBER AIR PANAS LEMO SUSU, PINRANG, SULAWESI SELATAN
Proposal penelitian ini diajukan sebagai salah satu syarat
untuk memperoleh gelar Sarjana Sains
Oleh
ISRAN ASNAWI
H31109001
MAKASSAR
2013
2
PROPOSAL
EKSPLORASI MIKROBA PENGHASIL ENZIM LIPOLITIK PADA
SUMBER AIR PANAS LEMO SUSU, PINRANG, SULAWESI SELATAN
Disusun dan diajukan oleh
ISRAN ASNAWI
H31109001
Proposal ini telah diperiksa dan disetujui oleh :
Pembimbing Utama
Dr. Hasnah Natsir M.Si
NIP. 19620320 198711 2 001
Pembimbing Pertama
Prof. Dr. Nunuk Hariani S. M.S
NIP. 19601215 198702 2 001
3
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN SAMPUL..............................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN...................................................................
iii
DAFTAR ISI .............................................................................................
iv
DAFTAR TABEL......................................................................................
vii
DAFTAR GAMBAR.................................................................................
viii
DAFTAR LAMPIRAN..............................................................................
ix
DAFTAR SIMBOL DAN SINGKATAN..................................................
x
BAB I PENDAHULUAN .......................................................................
1
1.1 Latar Belakang ........................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah ...................................................................
4
1.3 Maksud dan Tujuan Penelitian ................................................
4
1.3.1 Maksud Penelitian ...............................................................
4
1.3.2 Tujuan Penelitian..................................................................
5
1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA...............................................................
6
2.1
Tinjauan Umum Mikroba...............................................
6
2.1.1 Karakteristik Mikroba ..........................................................
6
2.1.2 Mikroba Termofilik ..............................................................
8
2.2 Tinjauan Umum Enzim ...........................................................
9
2.2.1 Enzim dan Penggolongannya...............................................
9
2.2.2 Enzim Lipase........................................................................
10
2.2.3 Enzim Lipase dari Mikroba..................................................
11
4
2.2.4 Enzim Lipase Termostabil....................................................
2.2.5 Manfaat Enzim Lipase..........................................................
2.3 Sumber Air Panas Lemo Susu, Pinrang, Sulawesi Selatan .....
12
15
17
BAB III METODE PENELITIAN...........................................................
18
3.1 Bahan Penelitian ....................................................................
18
3.2 Alat Penelitian .......................................................................
18
3.3 Waktu dan Tempat Penelitian.................................................
18
3.4 Prosedur Kerja dan Rancangan Percobaan.............................
19
3.4.1 Pengambilan Sampel ...........................................................
19
3.4.2 Pembuatan Media Pertumbuhan Mikroba ...........................
19
3.4.2.1 Pembuatan Media Pengaya ...............................................
19
3.4.2.2 Pembuatan Media Padat Pertumbuhan .............................
20
3.4.2.3 Pembuatan Media Seleksi .................................................
20
3.4.2.4 Pembuatan Media Inokulum dan Produksi .......................
20
3.4.3 Isolasi dan Pemurnian Mikroba Lipolitik ............................
21
3.4.4 Identifikasi Mikroba Lipolitik .............................................
21
3.4.5 Persiapan Inokulum dan Penentuan Waktu
Produksi Optimum Enzim Lipolitik.....................................
22
3.4.6 Produksi Enzim Lipolitik.....................................................
22
3.4.7 Uji Aktivitas Enzim Lipolitik ..............................................
22
3.4.8 Pengukuran Kadar Protein Enzim........................................
23
3.4.9 Penentuan Karakteristik Sifat Biokimia Enzim Lipolitik.....
24
3.4.9.1 Penentuan Suhu Optimum.................................................
24
3.4.9.2 Penentuan pH Optimum.....................................................
24
DAFTAR PUSTAKA................................................................................
25
LAMPIRAN..............................................................................................
29
5
6
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
Tabel 1. Lipase termostabil dari beberapa hasil penelitian........................
13
Tabel 2. Pemanfaatan Lipase di Bidang Industri Pangan..........................
16
Tabel 3. Pemanfaatan Lipase di Bidang Industri Non-Pangan..................
17
7
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
Gambar 1. Berbagai jenis bentuk mikroorganisme.........................................
6
Gambar 2. Kurva Pertumbuhan Mikroba..................................................
7
Gambar 3. Skema reaksi hidrolisis enzim lipase pada minyak zaitun.......
11
8
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
Lampiran 1. Prosedur Pembuatan Media Pertumbuhan............................
29
Lampiran 2. Pembuatan Buffer Fosfat.......................................................
32
Lampiran 3. Prosedur Pengukuran Kadar Protein.....................................
33
Lampiran 4. Prosedur Uji Aktivitas Lipolitik............................................
35
9
DAFTAR SIMBOL DAN SINGKATAN
BSA
: Bovine Serum Albumin
nm
: nanometer
µm
: mikrometer
OD
: Optical Density
pH
: potensial hidrogen
ppm
: part per million
rpm
: rotation per minute
indikator PP
: indikator Phenolphtalein
UV/Vis
: Ultraviolet/Visible
µL
: mikroliter
10
EKSPLORASI MIKROBA PENGHASIL ENZIM LIPOLITIK PADA
SUMBER AIR PANAS LEMO SUSU, PINRANG, SULAWESI SELATAN
ISRAN ASNAWI
H31109001
JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS HASANUDDIN
MAKASSAR
2013
EKSPLORASI MIKROBA PENGHASIL ENZIM LIPOLITIK PADA
SUMBER AIR PANAS LEMO SUSU, PINRANG, SULAWESI SELATAN
Proposal penelitian ini diajukan sebagai salah satu syarat
untuk memperoleh gelar Sarjana Sains
Oleh
ISRAN ASNAWI
H31109001
MAKASSAR
2013
2
PROPOSAL
EKSPLORASI MIKROBA PENGHASIL ENZIM LIPOLITIK PADA
SUMBER AIR PANAS LEMO SUSU, PINRANG, SULAWESI SELATAN
Disusun dan diajukan oleh
ISRAN ASNAWI
H31109001
Proposal ini telah diperiksa dan disetujui oleh :
Pembimbing Utama
Dr. Hasnah Natsir M.Si
NIP. 19620320 198711 2 001
Pembimbing Pertama
Prof. Dr. Nunuk Hariani S. M.S
NIP. 19601215 198702 2 001
3
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN SAMPUL..............................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN...................................................................
iii
DAFTAR ISI .............................................................................................
iv
DAFTAR TABEL......................................................................................
vii
DAFTAR GAMBAR.................................................................................
viii
DAFTAR LAMPIRAN..............................................................................
ix
DAFTAR SIMBOL DAN SINGKATAN..................................................
x
BAB I PENDAHULUAN .......................................................................
1
1.1 Latar Belakang ........................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah ...................................................................
4
1.3 Maksud dan Tujuan Penelitian ................................................
4
1.3.1 Maksud Penelitian ...............................................................
4
1.3.2 Tujuan Penelitian..................................................................
5
1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA...............................................................
6
2.1
Tinjauan Umum Mikroba...............................................
6
2.1.1 Karakteristik Mikroba ..........................................................
6
2.1.2 Mikroba Termofilik ..............................................................
8
2.2 Tinjauan Umum Enzim ...........................................................
9
2.2.1 Enzim dan Penggolongannya...............................................
9
2.2.2 Enzim Lipase........................................................................
10
2.2.3 Enzim Lipase dari Mikroba..................................................
11
4
2.2.4 Enzim Lipase Termostabil....................................................
2.2.5 Manfaat Enzim Lipase..........................................................
2.3 Sumber Air Panas Lemo Susu, Pinrang, Sulawesi Selatan .....
12
15
17
BAB III METODE PENELITIAN...........................................................
18
3.1 Bahan Penelitian ....................................................................
18
3.2 Alat Penelitian .......................................................................
18
3.3 Waktu dan Tempat Penelitian.................................................
18
3.4 Prosedur Kerja dan Rancangan Percobaan.............................
19
3.4.1 Pengambilan Sampel ...........................................................
19
3.4.2 Pembuatan Media Pertumbuhan Mikroba ...........................
19
3.4.2.1 Pembuatan Media Pengaya ...............................................
19
3.4.2.2 Pembuatan Media Padat Pertumbuhan .............................
20
3.4.2.3 Pembuatan Media Seleksi .................................................
20
3.4.2.4 Pembuatan Media Inokulum dan Produksi .......................
20
3.4.3 Isolasi dan Pemurnian Mikroba Lipolitik ............................
21
3.4.4 Identifikasi Mikroba Lipolitik .............................................
21
3.4.5 Persiapan Inokulum dan Penentuan Waktu
Produksi Optimum Enzim Lipolitik.....................................
22
3.4.6 Produksi Enzim Lipolitik.....................................................
22
3.4.7 Uji Aktivitas Enzim Lipolitik ..............................................
22
3.4.8 Pengukuran Kadar Protein Enzim........................................
23
3.4.9 Penentuan Karakteristik Sifat Biokimia Enzim Lipolitik.....
24
3.4.9.1 Penentuan Suhu Optimum.................................................
24
3.4.9.2 Penentuan pH Optimum.....................................................
24
DAFTAR PUSTAKA................................................................................
25
LAMPIRAN..............................................................................................
29
5
6
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
Tabel 1. Lipase termostabil dari beberapa hasil penelitian........................
13
Tabel 2. Pemanfaatan Lipase di Bidang Industri Pangan..........................
16
Tabel 3. Pemanfaatan Lipase di Bidang Industri Non-Pangan..................
17
7
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
Gambar 1. Berbagai jenis bentuk mikroorganisme.........................................
6
Gambar 2. Kurva Pertumbuhan Mikroba..................................................
7
Gambar 3. Skema reaksi hidrolisis enzim lipase pada minyak zaitun.......
11
8
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
Lampiran 1. Prosedur Pembuatan Media Pertumbuhan............................
29
Lampiran 2. Pembuatan Buffer Fosfat.......................................................
32
Lampiran 3. Prosedur Pengukuran Kadar Protein.....................................
33
Lampiran 4. Prosedur Uji Aktivitas Lipolitik............................................
35
9
DAFTAR SIMBOL DAN SINGKATAN
BSA
: Bovine Serum Albumin
nm
: nanometer
µm
: mikrometer
OD
: Optical Density
pH
: potensial hidrogen
ppm
: part per million
rpm
: rotation per minute
indikator PP
: indikator Phenolphtalein
UV/Vis
: Ultraviolet/Visible
µL
: mikroliter
10