Isolasi Senyawa Flavonoida Dari Bunga Mawar Putih (Rosa Hybrida L.)

ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI BUNGA TUMBUHAN MAWAR PUTIH (Rosa hybrida L.)

SKRIPSI

RUT SAMAYANA LUBIS 110802041

DEPARTEMEN KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN 2015

2

ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI BUNGA

TUMBUHAN MAWAR PUTIH (Rosa hybrida L.)

SKRIPSI

Diajukan untuk melengkapi tugas dan memenuhi syarat mencapai gelar sarjana sains

RUT SAMAYANA LUBIS 110802041

DEPARTEMEN KIMIA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN 2015

PERSETUJUAN

Judul : Isolasi Senyawa Flavonoida Dari Bunga Mawar

Putih (Rosa Hybrida L.)

Kategori : Skripsi

Nama Mahasiswa : Rut Samayana Lubis

Nomor Induk Mahasiswa : 110802041

Program Studi : Sarjana (S1) Kimia

Departemen : Kimia

Fakultas : Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

(FMIPA) Universitas Sumatera Utara Disetujui di

Medan, Agustus 2015 Komisi Pembimbing :

Pembimbing 2 Pembimbing 1

Lamek Marpaung, M.Phil, Ph.D Dr. Sovia Lenny, M.Si

NIP: 1952 0828 1982 031001 NIP: 1975 1018 2000 032001

Diketahui/ Disetujui oleh

Departemen Kimia FMIPA USU Ketua,

Dr. Rumondang Bulan Nst, MS NIP: 1954 0830 1985 03200

PERNYATAAN

ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI BUNGA MAWAR PUTIH (Rosa hybrida L.)

SKRIPSI

Saya mengakui bahwa skripsi ini adalah hasil kerja saya sendiri, kecuali beberapa kutipan dan ringkasan yang masing-masing disebutkan sumbernya.

Medan, Agustus 2015

RUT SAMAYANA LUBIS 110802041

PENGHARGAAN

Segala Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yesus Kristus karena atas berkat dan kasihNya yang senantiasa menyertai sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penulisan skripsi.

Ucapan terima kasih yang tak terhingga penulis sampaikan kepada kedua orang tua yang sangat saya sayangi dan cintai Charlos Lubis dan Anni Luceria Sianipar yang selalu memberikan kasih sayang, doa, motivasi, dukungan dan materi. Serta kepada adik penulis Ribka, Daniel, Debora yang juga selalu memberi dukungan kepada penulis. Penulis juga menyadari bahwa skripsi ini tidak akan selesai tanpa adanya bantuan dari berbagai pihak, maka penulis mengucapkan terima kasih yang luar biasa kepada:

1. Ibu Dr.Sovia Lenny,M.Si dan Bapak Lamek Marpaung, M.Phill,

Ph.D selaku dosen pembimbing yang telah banyak memberikan bimbingan, arahan, ilmu dan waktu kepada penulis selama penulis melakukan penelitian hingga penulisan skripsi ini selesai.

2. Ibu Dr. Rumondang Bulan Nst, MS selaku ketua Departemen

Kimia, Bapak Drs. Albert Pasaribu, M.Sc. selaku sekretaris Departemen Kimia.

3. Seluruh Bapak dan Ibu Dosen Departemen Kimia yang

memberikan ilmu dan motivasi.

4. Kepala Laboratorium Bapak Lamek Marpaung, M.Phil, Ph.D yang

juga sangat banyak memberikan bimbingan, ilmu, arahan, dan membantu saya khususnya pada saat mengerjakan penelitian serta kepercayaan kepada saya untuk menjadi assisten di lab KBA Hayati.

5. Sahabat penulis Siska Yuliani dan Benni P. Sianipar,S.Si yang

selalu mendukung penulis dan membuat penulis kembali semangat.

6. Teman-teman stambuk 2011 dan Assisten KBA Hayati yakni

teman-teman seperjuangan.

Akhir kata, penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat dan pengetahuan bagi semua pihak yang berkepentingan. Tuhan Yesus Memberkati.

ISOLASI SENYAWA FLAVONOIDA DARI BUNGA TUMBUHAN MAWAR PUTIH (Rosa hybrida L.)

ABSTRAK

Telah dilakukan isolasi senyawa flavonoida pada 900 gram bunga tumbuhan mawar putih (Rosa hybrida L.) secara ekstraksi maserasi dengan pelarut metanol. Lapisan metanol dipekatkan dan dihidrolisa dengan HCl 2 N. Filtratnya diekstraksi partisi dengan kloroform. Ekstrak pekat kloroform dianalisis dengan KLT. Pemisahan komponen dilakukan dengan menggunakan kromatografi kolom dengan fasa diam silika gel dan fasa gerak n-heksana:etil asetat dengan perbandingan (90:10) v/v, (80:20) v/v, (70:30) v/v dan (60:40) v/v. Hasil yang diperoleh adalah kristal jarum, berwarna kuning sebanyak 10 mg, titik lebur

154-1560 C dan Rf = 0.58. Struktur dianalisa dengan menggunakan Spektroskopi

UV-Visible, Inframerah (FT-IR) dan Resonansi Magnetik Inti Proton (1H-NMR). Dari

hasil analisa spektroskopi diduga bahwa senyawa yang diperoleh adalah senyawa flavonoid golongan flavonol.

ISOLATION OF FLAVONOID COMPOUND FROM FLOWER OF WHITE ROSE (Rosa hybrida L.)

ABSTRACT

Has been done isolation of flavonoid compound 900 gram flower of white rose (Rosa hybrida L.) with extraction maceration by methanol solvent. Methanol layer was concentrated and then hydrolized with HCl 2 N, then the filtrate was extracted with chloroform. The concentrated choloroform extract was analysed with TLC. The separation compound was done with Column Chromatography with silica gel as the stationary phase and n-hexane:ethyl acetate (90:10) v/v, (80:20) v/v,(70:30) v/v and(60:40) v/v as the mobile phase. The fractions from

n-hexane : aethy acetate (70:30) v/v were purified with TLC preparative and

recrystallized to get pure compound. The result is yellow crystal with weight 10

mg, melting point 154-1560 C dan Rf = 0.58. The structure was analyzed with

using UV-Visible, Fourier Transform Infra Red (FT-IR) and Proton Nuclear

Magnetic Resonancy (1H-NMR) Spectroscopy. From the analysis spectrocopy,

was estimated that isolated compound of flavonoid is flavonol.

DAFTAR ISI

Halaman

Persetujuan ii

Pernyataan iii

Penghargaan iv

Abstrak v

Abstract vi

Daftar isi vii

Daftar Tabel ix

Daftar Gambar x

Daftar Lampiran xi

BAB 1 Pendahuluan 1.1.Latar Belakang 1

1.2.Permasalahan 3

1.3.Tujuan Penelitian 3

1.4.Manfaat Penelitian 3

1.5.Lokasi Penelitian 3

1.6.Metode Penelitian 4

BAB 2 Tinjauan Pustaka 5

2.1. Tumbuhan Mawar Putih 5

2.2. Senyawa Flavonoida 7

2.3. Teknik Pemisahan 13

2.3.1. Ekstraksi 13

2.3.1.1. Perkolasi 14

2.3.1.2. Sokletasi 2.3.2. Kromatografi 15

2.3.2.1. Kromatografi Lapis Tipis 17

2.3.2.2.Kromatografi Kolom 18

2.3.2.2.Kromatografi Lapis Tipis Preparatif 19

2.4. Teknik Spektroskopi 19

2.4.1. Spektrofotometri UV-Visible 20

2.4.2. Spektrometri Infra Merah (FT-IR) 21

2.4.3. Spektrometri Resonansi Magnetik Inti Proton (1 H-NMR) 22

BAB 3 Bahan dan Metodologi Penelitian 23

3.1. Alat-alat 23

3.2. Bahan 23

3.3. Prosedur Penelitian 24

3.3.1. Penyediaan Sampel 24

3.3.2. Skrining Fitokomia 24

3.3.3. Ekstraksi dan Fraksinasi 25

3.3.3.1. Pemisahan Tanin 25

3.3.3.3. Hidrolisa 26

3.3.3.4. Ekstraksi Partisi dengan Kloroform 26

3.3.3.5. Pemisahan Komponen-Komponen dengan 26

Kromatografi Kolom 3.3.4. Analisis Kromatografi Lapis Tipis 27

3.3.5. Pemurnian Hasil Isolasi 27

3.3.5.1. Pemurnian Hasil Isolasi dengan Kromatografi 28

Lapis Tipis Preparatif 3.3.5.2. Rekristalisasi 28

3.3.5.3. Uji Kemurnian Hasil Isolasi dengan Kromatografi 28

Lapis Tipis 3.3.5.4. Uji Kemurnian Hasil Isolasi dengan Titik Lebur 28

3.3.6. Identifikasi Senyawa Hasil Isolas 3.3.6.1. Identifikasi dengan Spektrofotometer 29

UV-Visible 3.3.6.2.Identifikasi dengan Spektofotometer 29

Inframerah ( FT-IR ) 3.3.6.3. Identifikasi dengan spekrometer Resonansi 29

Magnetik Inti Proton (1H-NMR) 3.4. Bagan Skrining Fitokimia 30

3.5. Bagan Penelitian 32

BAB 4 Hasil dan Pembahasan 34

4.1. Hasil Penelitian 34

4.2. Pembahasan 38

BAB 5 Kesimpulan dan Saran 41

5.1. Kesimpulan 41

5.2. Saran 41

Daftar Pustaka 42

DAFTAR TABEL

Nomor Judul Halaman

Tabel

Tabel 2.1. Eluen yang digunakan untuk Kromatografi 16

Tabel 2.2. Fase Diam yang digunakan untuk Kromatografi Lapis Tipis 18

Tabel 4.1. Interpretasi Soektrum FT-IR Senyawa Hasil Isolasi 36

Tabel 4.2. Pergeseran Kimia 1H-NMR Senyawa Hasil Isolasi 37

DAFTAR GAMBAR

Nomor Judul Halaman

Gambar

Gambar 2.1. Struktur Senyawa Flavonoida 7

Gambar 2.2. Ikatan Hidrogen Flavonoida dan Silika Gel 17

Gambar 4.1. Spektrum Ultraviolet-Visible (UV-Vis) Senyawa Hasil Isolasi 34

Gambar 4.2. Spektrum Infra Red (IR) Senyawa Hasil Isolasi 35

Gambar 4.3. Spektrum Ultraviolet Spektrum 1H-NMR Senyawa Hasil Isolasi 36

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor Judul Halaman

Lampiran

Lampiran 1. Gambar Bunga Mawar Putih (Rosa hybrida L.) 45

Lampiran 2. Hasil Determinasi Tumbuhan Bunga Mawar Putih(R.hybrida L.) 46 Lampiran 3. Kromatogram Lapis Tipis Ekstrak Pekat Kloroform Tumbuhan 47 Bunga Mawar Putih (R.hybrida L.) Sebelum Kromatografi Kolom Lampiran 4. Kromatogram Lapisan Tipis Ekstrak Bunga Mawar 48

Putih (R.hybrida L.) Penggabungan Fraksi

Lampiran 5. Kromatogram Lapisan Tipis Ekstrak Bunga mawar 49

Putih (R.hybrida L.) Sebelum KLT Preparatif.

Lampiran 6. Kromatogram Lapisan Tipis Senyawa murni hasil isolasi 50

Lampiran 7. Spektrum Ultraviolet-Visible Beberapa Senyawa Flavonoida 51

Lampiran 8. Ekspansi Spektrum 1H-NMRSenyawa Hasil Isolasi 52

Pada δ=1,2-4,0 ppm

Lampiran 9. Ekspansi Spektrum 1H-NMR Senyawa Hasil Isolasi 53

Pada δ=0-10,0 ppm

Lampiran 10.Ekspansi Spektrum 1H-NMR Senyawa Hasil Isolasi 54

Pada δ=6,0-7,9 ppm

ISOLATION OF FLAVONOID COMPOUND FROM FLOWER OF WHITE ROSE (Rosa hybrida L.)

ABSTRACT

Has been done isolation of flavonoid compound 900 gram flower of white rose (Rosa hybrida L.) with extraction maceration by methanol solvent. Methanol layer was concentrated and then hydrolized with HCl 2 N, then the filtrate was extracted with chloroform. The concentrated choloroform extract was analysed with TLC. The separation compound was done with Column Chromatography

with silica gel as the stationary phase and n-hexane:ethyl acetate (90:10) v/v,

(80:20) v/v,(70:30) v/v and(60:40) v/v as the mobile phase. The fractions from

n-hexane : aethy acetate (70:30) v/v were purified with TLC preparative and

recrystallized to get pure compound. The result is yellow crystal with weight 10

mg, melting point 154-1560 C dan Rf = 0.58. The structure was analyzed with

using UV-Visible, Fourier Transform Infra Red (FT-IR) and Proton Nuclear

Magnetic Resonancy (1H-NMR) Spectroscopy. From the analysis spectrocopy,

was estimated that isolated compound of flavonoid is flavonol.

DAFTAR ISI

Halaman

Persetujuan ii

Pernyataan iii

Penghargaan iv

Abstrak v

Abstract vi

Daftar isi vii

Daftar Tabel ix

Daftar Gambar x

Daftar Lampiran xi

BAB 1 Pendahuluan 1.1.Latar Belakang 1

1.2.Permasalahan 3

1.3.Tujuan Penelitian 3

1.4.Manfaat Penelitian 3

1.5.Lokasi Penelitian 3

1.6.Metode Penelitian 4

BAB 2 Tinjauan Pustaka 5

2.1. Tumbuhan Mawar Putih 5

2.2. Senyawa Flavonoida 7

2.3. Teknik Pemisahan 13

2.3.1. Ekstraksi 13

2.3.1.1. Perkolasi 14

2.3.1.2. Sokletasi 2.3.2. Kromatografi 15

2.3.2.1. Kromatografi Lapis Tipis 17

2.3.2.2.Kromatografi Kolom 18

2.3.2.2.Kromatografi Lapis Tipis Preparatif 19

2.4. Teknik Spektroskopi 19

2.4.1. Spektrofotometri UV-Visible 20

2.4.2. Spektrometri Infra Merah (FT-IR) 21

2.4.3. Spektrometri Resonansi Magnetik Inti Proton (1 H-NMR) 22

BAB 3 Bahan dan Metodologi Penelitian 23

3.1. Alat-alat 23

3.2. Bahan 23

3.3. Prosedur Penelitian 24

3.3.1. Penyediaan Sampel 24

3.3.2. Skrining Fitokomia 24

3.3.3. Ekstraksi dan Fraksinasi 25

3.3.3.1. Pemisahan Tanin 25

3.3.3.3. Hidrolisa 26

3.3.3.4. Ekstraksi Partisi dengan Kloroform 26

3.3.3.5. Pemisahan Komponen-Komponen dengan 26

Kromatografi Kolom 3.3.4. Analisis Kromatografi Lapis Tipis 27

3.3.5. Pemurnian Hasil Isolasi 27

3.3.5.1. Pemurnian Hasil Isolasi dengan Kromatografi 28

Lapis Tipis Preparatif 3.3.5.2. Rekristalisasi 28

3.3.5.3. Uji Kemurnian Hasil Isolasi dengan Kromatografi 28

Lapis Tipis 3.3.5.4. Uji Kemurnian Hasil Isolasi dengan Titik Lebur 28

3.3.6. Identifikasi Senyawa Hasil Isolas 3.3.6.1. Identifikasi dengan Spektrofotometer 29

UV-Visible 3.3.6.2.Identifikasi dengan Spektofotometer 29

Inframerah ( FT-IR ) 3.3.6.3. Identifikasi dengan spekrometer Resonansi 29

Magnetik Inti Proton (1H-NMR) 3.4. Bagan Skrining Fitokimia 30

3.5. Bagan Penelitian 32

BAB 4 Hasil dan Pembahasan 34

4.1. Hasil Penelitian 34

4.2. Pembahasan 38

BAB 5 Kesimpulan dan Saran 41

5.1. Kesimpulan 41

5.2. Saran 41

Daftar Pustaka 42

DAFTAR TABEL

Nomor Judul Halaman

Tabel

Tabel 2.1. Eluen yang digunakan untuk Kromatografi 16

Tabel 2.2. Fase Diam yang digunakan untuk Kromatografi Lapis Tipis 18

Tabel 4.1. Interpretasi Soektrum FT-IR Senyawa Hasil Isolasi 36

Tabel 4.2. Pergeseran Kimia 1H-NMR Senyawa Hasil Isolasi 37

DAFTAR GAMBAR

Nomor Judul Halaman

Gambar

Gambar 2.1. Struktur Senyawa Flavonoida 7

Gambar 2.2. Ikatan Hidrogen Flavonoida dan Silika Gel 17

Gambar 4.1. Spektrum Ultraviolet-Visible (UV-Vis) Senyawa Hasil Isolasi 34

Gambar 4.2. Spektrum Infra Red (IR) Senyawa Hasil Isolasi 35

Gambar 4.3. Spektrum Ultraviolet Spektrum 1H-NMR Senyawa Hasil Isolasi 36

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor Judul Halaman

Lampiran

Lampiran 1. Gambar Bunga Mawar Putih (Rosa hybrida L.) 45

Lampiran 2. Hasil Determinasi Tumbuhan Bunga Mawar Putih(R.hybrida L.) 46 Lampiran 3. Kromatogram Lapis Tipis Ekstrak Pekat Kloroform Tumbuhan 47 Bunga Mawar Putih (R.hybrida L.) Sebelum Kromatografi Kolom Lampiran 4. Kromatogram Lapisan Tipis Ekstrak Bunga Mawar 48

Putih (R.hybrida L.) Penggabungan Fraksi

Lampiran 5. Kromatogram Lapisan Tipis Ekstrak Bunga mawar 49

Putih (R.hybrida L.) Sebelum KLT Preparatif.

Lampiran 6. Kromatogram Lapisan Tipis Senyawa murni hasil isolasi 50

Lampiran 7. Spektrum Ultraviolet-Visible Beberapa Senyawa Flavonoida 51

Lampiran 8. Ekspansi Spektrum 1H-NMRSenyawa Hasil Isolasi 52

Pada δ=1,2-4,0 ppm

Lampiran 9. Ekspansi Spektrum 1H-NMR Senyawa Hasil Isolasi 53

Pada δ=0-10,0 ppm

Lampiran 10.Ekspansi Spektrum 1H-NMR Senyawa Hasil Isolasi 54

Pada δ=6,0-7,9 ppm