AGUNG SUPRIflNTO PENGARUH SUMBER KARBON TE R H A D A P K E C E P A TA N P E R TU M B U H A N d a n K A N D U N G A N S TE R O ID K U L T U R K A L U S D IO S C O R E A PENTAPHYLLA L

  T A H A M A l i j A R . I N S ' A H AGUNG SUPRIflNTO

SKR I P SI :

  P EN GAR UH SUM BER KAR BON TER H AD AP K ECEP ATAN P ER TUM BUH AN d a n KAN D UN GAN STER OI D K U LTU R K ALUS D IOSCOR EA P EN TAP H YLLA L M I L I K.

  PER PU STA K A A N ■*UNIVERS

  1 TA S A

  1 R L A N G G A ' S U R A B A Y A

  f f -

  FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS A1RLANGGA

  P E H G R R U H S U m B E R K R R B

  I

  1 T E R H R D R P HECEPRTRfl PERTUfTlBUHRn d a n KRHDUHGRn STEROID KULTUR KRLU

  5 D 105 C RER PEnTRPHYLLR. L

SKRIPSI

  DIBURT UHTUK mEmEP.UH! TUGR

  5 RKHIR mEHCRPRI n e t o n c a m n n n c o n m a c i ULLI II | _)l II IJI II II I i I II II I II l-Jt

  1990

Q l a h :

  RGUnG SUPRIRriTD Q

  5 B 41068 Q

  DISETUJUI OLEH PEMBIMBING :

  K A T A P E N G A N T A R S e g a l a p u j i d a n s y u k u r p e n u l i s p a n j a t k a n k e h a d i r a t A l l o h S W T . a t a s s e g a l a r a h m a t d a n k a r u n i a n y a , s e h i n g g a p e n u l i s d a p a t m e n y e l e s a i k a n p e n y u s u n a n s k r i p s i y a n g b e r j u - d u l P E N G A R U H S U M B E R K A R B O N T E R H A D A P K E C E P A T A N P E R T U M B U H A N D A N K A N D U N G A N S T E R O I D K U L T U R K A L U S D I O S C O R E A P E N T A P H Y L L A L. g u n a m e m e n u h i t u g a s a k h i r m e n c a p a i g e l a r s a r j a n a farraa- si p a d a F a k u l t a s F a r m a s i U n i v e r s i t a s A i r l a n g g a . P a d a k e s e m p a t a n i n i p e n u l i s s a m p a i k a n u c a p a n t e r i m a k a s i h y a n g s e t u l u s n y a k e p a d a y a n g t e r h o r m a t :

  1. B a p a k DR. G u n a w a n I n d r a y a n t o d a n I b u D r a . L e s t a r i R a h a y u M S s e l a k u d o s e n p e m b i m b i n g , y a n g t e l a h m e m b e r i - k a n b i m b i n g a n d a n s a r a n - s a r a n .

  2. B a p a k - I b u d o s e n p e n g u j i y a n g t e l a h b e r k e n a n m e m e r i k s a d a n m e m b e r i k a n s a r a n .

  3. P a r a s t a f L a b o r a t o r i u m B i o t e k n o l o g i F a k u l t a s F a r m a s i U n i v e r s i t a s A i r l a n g g a y a n g b a n y a k m e m b e r i k a n b a n t u a n s e l a m a p e n e l i t i a n .

  4. S a u d a r a , s a h a b a t d a n s e m u a p i h a k y a n g t e l a h b a n y a k m e m ­ b e r i k a n b a n t u a n m o r i l m a u p u n m a t e r i i l .

  S e m o g a A l l a h S W T . m e m b e r i k a n b a l a s a n a t a s s e m u a b a n t u a n y a n g t e l a h d i b e r i k a n . A k h i r n y a p e n u l i s b e r h a r a p s e m o g a p e n e l i t i a n i n i b e r m a n f a a t b a g i p e n g e m b a n g a n i l m u p e n g e t a h u a n . S u r a b a y a , J u l i 1 9 9 0 P e n u l i s ,

  D A F T A R I S I 1 . K A T A P E N G A N T A R ........................................ i

  5 2 . 2 . M e d i a K u l t u r J a r i n g a n ........................

  15 3. K a n d u n g a n D i o s c o r e a s p . . .................

  15 2. N a m a D a e r a h ..................................

  15 1. K l a s i f i k a s i ..................................

  13 2 . 7 . T i n j a u a n T e n t a n g D i o s c o r e a p e n t a p h v l l a L.

  12 2 . 6 . K u l t u r J a r i n g a n s e b a g a i S u m b e r M e t a b o l i t S e k u n d e r ..........................................

  11 2 . 5 . K u l t u r K a l u s d a n k a r a k t e r i s t i k n y a ........

  9 2 . 4 . S u m b e r K a r b o n ...................................

  6 2 . 3 . K o n d i s i L i n g k u n g a n K u l t u r ...................

  5 2 . 1 . K u l t u r J a r i n g a n ................................

  2. D A F T A R I S I .............................................. i i i

  7. B A B II T I N J A U A N P U S T A K A .....................

  4

  1 1 . 2 . T u j u a n P e n e l i t i a n ..............................

  1 1 . 1 . L a t a r B e l a k a n g ..................................

  6 . B A B I P E N D A H U L U A N ............................

  5. D A F T A R I S T I L A H D A N S I N G K A T A N ..................... v i i

  4. D A F T A R G A M B A R .......................................... v i

  3. D A F T A R T A B E L ........................................... v

  15 N o . I s i H a l a m a n

  B A B I I I M E T O D O L O G I P E N E L I T I A N ...............

  16 3 . 1 . B a h a n ........................................

  16 3 . 1 . 1 . K a l u s ....................................

  16 3 . 1 . 2 . B a h a n K i m i a ............................

  16 3 . 1 . 3 . M e d i a P e r t u m b u h a n ....................

  16 3 . 2 . A 1 a t ...........................................

  17 3 . 3 . C a r a K e r j a .......................................

  17 3 . 3 . 1 . P e m b u a t a n M e d i a .......................

  17 3 . 3 . 2 . P e n a n a m a n d a n P e m i n d a h a n K a l u s ...

  19 3 . 3 . 3 . P e n g a m a t a n P e r t u m b u h a n K a l u s ..... ₂

  19 3 . 3 . 4 . E k s t r a k s i ...............................

  20 3 . 3 . 5 . A n a l i s a K u a l i t a t i p d e n g a n K L T ....

  3 . 3 . 6 . A n a l i s a K u a l i t a t i p d a n K u a n t i t a t i p

  21 d e n g a n H P L C . ............................

  B A B I V H A S I L P E N E L I T I A N .....................

  25 4 . 1 . P e m e r i k s a a n M a k r o s k o p i k .....................

  25 4 . 2 . H a s i l P e r h i t u n g a n I n d e k s P e r t u m b u h a n .... 2 6 4 . 3 . H a s i l P e m e r i k s a a n d e n g a n K L T ...............

  27 4 . 4 . H a s i l P e m e r i k s a a n d e n g a n H P L C .............

  29 B A B V P E M B A H A S A N ..............................

  35 B A B V I K E S I M P U L A N ..............................

  39 B A B V I I S A R A N - S A R A N .........................

  40 R I N G K A S A N ...............................................

  41 D A F T A R P U S T A K A ........................................

  42

  D A F TAtt T A B E L N o . T e k s H a l a m a n

  1. M a c a m s u m b e r k a r b o n d a n k o n s e n t r a s i y a n g d i p a k a i p e n e l i t i a n ....................................

  18

  2. K o m p o s i s i m e d i a M u r a s h i g e d a n S k o o g y a n g d i g u n a k a n p a d a p e n e l i t i a n ............................

  24

  3. P e m e r i k s a a n m a k r o s k o p i k k a l u s D i o s c o r e a p e n t a - p h v l l a L ..................................................

  25

  4. P e n g a r u h s u m b e r k a r b o n p a d a b e r b a g a i k o n s e n t r a s i t e r h a d a p i n d e k s p e r t u m b u h a n k u l t u r k a l u s D i o s c o r e a p e n t a p h v l l a L ..............................

  26

  5. P e n g a r u h s u m b e r k a r b o n t e r h a d a p k a n d u n g a n s t e r o i d k u l t u r k a l u s D i o s c o r e a p e n t a p h v l l a L.

  27

  6 . P e n g a r u h s u m b e r k a r b o n t e r h a d a p k a d a r s i t o s t e ­

  r o l r e l a t i p t e r h a d a p k o l e s t e r o l k u l t u r k a l u s D i o s c o r e a p e n t a p h v l l a L .

  34

  D A F T A R G A M B A R N o . T e k s H a l a m a n 1. K u r v a p e r t u m b u h a n s e l ...............................

  13

  2. G a m b a r h a s i l k r o m a t o g r a f i l a p i s t i p i s k a n d u n g - a n k a l u s D i o s c o r e a p e n t a p h v l l a L ............

  28

  3. K r o m a t o g r a m e k s t r a k k a l u s D i o s c o r e a p e n t a p h v - 1 1 a L. d e n g a n s u m b e r k a r b o n g l u k o s a 5 % ....

  29

  4. K r o m a t o g r a m e k s t r a k k a l u s D i o s c o r e a p e n t a p h v - 1 1 a L. d e n g a n s u m b e r k a r b o n g l u k o s a 5 % y a n g d i k o - e l u s i d e n g a n s t i g m a s t e r o l ( 5 : 1 )

  30

  5. K r o m a t o g r a m e k s t r a k k a l u s D i o s c o r e a p e n t a p h v - 1 1 a L. d e n g a n s u m b e r k a r b o n g l u k o s a 5 % y a n g d i k o - e l u s i d e n g a n s i t o s t e r o l d a n k a m p e s t e r o l ( 5 : 1 ) ............................................

  31

  6

  . G r a f i k k u r v a l i n i e r ( m g / m l V s a r e a p u n c a k )

  32

  7. G r a f i k i n d e k s p e r t u m b u h a n d a n k a d a r s i t o s t e - r o l k a l u s D i o s c o r e a p e n t a p h v l l a L. p e n g a r u h s u m b e r k a r b o n ............. . ........................

  33

  D A F T A R I S T I L A H D A N S I N G K A T A N

  B. A B e n z y l a m i n o p u r i n e ; B A P 2 , 4 D 2 , 4 - d i c h l o r o p h e n o x a c e t i c a c i d

  I P i n d e k s p e r t u m b u h a n D A A i n d o l e - 3 - a c e t i c a c i d M S M u r a s h i g e d a n S k o o g N A A a l f a - n a p h t h a l e n e a c e t i c a c i d K L T K r o m a t o g r a f i L a p i s a n T i p i s H P L C H i g h P r e s s u r e L i q u i d C h r o m a t o g r a p h y

  M

  I L U j

  p e r p u s t a k a a n U N IV ER SITA S A iR L A N G G ^ ” I

  S U R A B A Y A j B A B

  X P E N D A H U L U A N 1 . 1 . L a t a r B e l a k a n g .

  S e b a g a i m a n a t e l a h d i k e t a h u i , k e m a j u a n d i b i d a n g b i o t e k n o l o g i m e r o b u k a k e m u n g k i n a n b a r u d a l a m p r o d u k s i m e t a b o l i t s e k u n d e r d e n g a n t e k n i k k u l t u r j a r i n g a n t a - n a m a n . K a r e n a d e n g a n t e k n i k i n i d i d a p a t b e b e r a p a k e - u n t u n g a n - k e u n t u n g a n a n t a r a l a i n : k o n d i s i d a p a t d i - k o n t r o l , b e b a s d a r i p e n g a r u h m i k r o b a d a n i n s e k t a , t i -

  1

  2 d a k t e r g a n t u n g i k l i m d a n l e t a k g e o g r a f i s ( . ).

  H a l y a n g p e r l u d i p e r h a t i k a n d a l a m t e k n i k k u l t u r j a r i n g a n t a n a m a n a d a l a h k o m p o s i s i m e d i a p e r t u m b u h a n y a n g u m u m n y a t e r d i r i a t a s s u m b e r k a r b o n , s u m b e r n i ­ t r o g e n , m a k r o e l e m e n d a n m i k r o e l e m e n a n o r g a n i k , v i t a - m i n - v i t a m i n , h o r m o n p e r t u m b u h a n d a n m a t r i k s m e d i a a t a u a g a r . ( 3 , 4 ) U n t u k m e n i n g k a t k a n k e c e p a t a n p e r t u m b u h a n d e n g a n t e k n i k k u l t u r j a r i n g a n a g a r d i d a p a t h a s i l y a n g o p t i ­ m a l , d a p a t d i l a k u k a n d e n g a n c a r a m e n g u b a h - u b a h k o m p o ­ s i s i m e d i a p e r t u m b u h a n , m i s a l n y a k o n s e n t r a s i h o r m o n p e r t u m b u h a n , s u m b e r k a r b o n , s u m b e r n i t r o g e n a t a u s u m ­ b e r f o s f a t . (5)

  2 P e n e l i t i a n b e r i k u t d i m a k s u d k a n u n t u k m e n g e t a h u i p e n g a r u h s u m b e r k a r b o n p a d a b e r b a g a i k o n s e n t r a s i t e r ­ h a d a p p e r t u m b u h a n d a n k a n d u n g a n k u l t u r k a l u s D i o s c o ­ r e a p e n t a p h v l l a L. D a r i p e n e l i t i a n m e n g e n a i i n i s i a s i k a l u s D i o s c o r e a p e n t a p h v l l a L. d i k e t a h u i k e m a m p u a n p e m b e n t u k k a n d a n p e r t u m b u h a n k a l u s n y a . P e m b e n t u k a n k a l u s t e r j a d i r a t a - r a t a 7 s a m p a i 14 h a r i s e t e l a h p e - n a n a m a n e k s p l a n d e n g a n p e r t u m b u h a n y a n g l a m b a t . ( 6 ). T e l a h d i l a k u k a n p u l a o p t i m a s i m e d i a p e r t u m b u h a n d e n g a n c a r a m e n g u b a h - u b a h k o n s e n t r a s i h o r m o n p e r t u m b u h - h a n d i d a p a t m e d i a y a n g m e m b e r i k a n p e r t u m b u h a n k a l u s o p t i m a l , y a i t u m e d i a M u r a s h i g e d a n S k o o g ( M S ) y a n g

  2

  d i k o m b i n a s i d e n g a n h o r m o n p e r t u m b u h a n k i n e t i n p p m + 2 , 4 D 2 p p m d a n k i n e t i n 1 p p m + 2 , 4 D 4 p p m . K u l t u r k a l u s y a n g d i d a p a t k a n p a d a p e m e r i k s a a n d e n g a n k r o m a - t o g r a f i l a p i s t i p i s t e r d e t e k s i a d a n y a s t e r o l . (7) O p t i m a s i m e d i a p e r t u m b u h a n d a p a t p u l a d i l a k u k a n d e n g a n m e n g u b a h - u b a h k o n s e n t r a s i s u m b e r k a r b o n . P a d a u m u m n y a s u m b e r k a r b o n y a n g d a p a t d i g u n a k a n p a d a k u l ­ t u r j a r i n g a n a d a l a h : s u k r o s a , g l u k o s a , m a n n o s a , g a - l a k t o s a , d a n l a i n - l a i n , y a n g m a s i n g - m a s i n g a k a n m e m ­ b e r i k a n r e s p o n p e r t u m b u h a n b e r b e d a t e r g a n t u n g p a d a

  1 2

  s p e c i e s d a n k l o n . ( )

  3 P e n e l i t i a n t e n t a n g p e n g a r u h s u m b e r k a r b o n u n t u k k e b u t u h a n n u t r i s i k u l t u r j a r i n g a n a g a r m e m b e r i k a n p e r t u m b u h a n k a l u s y a n g o p t i m a l t e l a h d i l a k u k a n p a d a b e b e r a p a j e n i s t a n a m a n , y a i t u p e n e l i t i a n R o k e m e t . a l . d e n g a n m e n g u b a h - u b a h k o n s e n t r a s i s u k r o s a b e r h a s i l m e n d a p a t k a n k a d a r d i o s g e n i n d a r i k u l t u r D i o s c o r e a d e l t o i d e a 3 , 8 % b o b o t k e r i n g . K o n s e n t r a s i s u k r o s a y a n g d i g u n a k a n a d a l a h 1 , 5 % (

  8 ).

  P e n g a r u h k o n s e n t r a s i s u k r o s a y a n g d i g u n a k a n p a d a p e r t u m b u h a n k u l t u r k a l u s u n t u k p r o d u k s i m e t a b o l i t s e - k u n d e r , j u g a d i s e l i d i k i o l e h B e r l i n e t . a l . ( 1 9 8 6 ) , y a n g d e n g a n m e n a i k k a n k o n s e n t r a s i s u k r o s a d a r i

  2

  % m e n j a d i 1 0 % m e n y e b a b k a n a k u m u l a s i b e t a l a i n p a d a k u l t u r C h e n o p o d i u m r u b r u m s a m p a i 10 k a l i n y a . (9) H a r i y a n t o ( 1 9 8 7 ) m e n e l i t i p e n g a r u h s u m b e r k a r b o n t e r h a d a p p e r t u m b u h a n k u l t u r j a r i n g a n S o l a n u m m a m m o s u m L. d a n S o l a n u m t u b e r o s u m L . , y a n g m e n u n j u k k a n h a s i l t e r b a i k b e r t u r u t - t u r u t a d a l a h s u k r o s a , g l u k o s a d a n l a k t o s a . (

  2

  2

  ) D a r i b e b e r a p a p e n e l i t i a n y a n g t e l a h d i l a k u k a n m e n u n j u k k a n b a h w a k o n s e n t r a s i s u m b e r k a r b o n m e m p e n g a - r u h i k e c e p a t a n p e r t u m b u h a n p a d a k u l t u r j a r i n g a n t a n a m a n .

  4 1 . 2 . T u . iuan P e n e l i t i a n P e n e l i t i a n b e r i k u t b e r t u j u a n u n t u k m e n g e t a h u i p e n g a r u h s u m b e r k a r b o n g l u k o s a d a n s u k r o s a d e n g a n d e ­ n g a n m a s i n g - m a s i n g k o n s e n t r a s i 2%, 3 % d a n 5 % t e r h a d a p k e c e p a t a n p e r t u m b u h a n d a n k a n d u n g a n s t e r o i d k u l t u r k a l u s D i o s c o r e a p e n t a p h v l l a L. y a n g d i t a n a m p a d a m e d i a M u r a s h i g e d a n S k o o g ( M S ) y a n g d i m o d i f i k a s i d e n g a n p e n a m b a h a n h o r m o n p e r t u m b u h a n k i n e t i n 2 p p m d a n 2 , 4 D

  2 p p m .

  B A B

  XX T I N J A U A N P U S T A K A

  2 . 1 . K u l t u r J a r i n g a n K u l t u r j a r i n g a n d a p a t d i d e f i n i s i k a n s e b a g a i b a - g i a n a t a u j a r i n g a n t a n a m a n y a n g t e l a h d i p i s a h k a n d a r i t a n a m a n a s a l n y a d a n d i t u m b u h k a n d a l a m k e a d a a n s t e r i l p a d a s u a t u m e d i a b u a t a n d a n s e l - s e l n y a d a p a t t u m b u h d a n m e n g a d a k a n p e m b e l a h a n . K u l t u r d a p a t b e r u p a k u l ­ t u r o r g a n t e r t e n t u y a n g t e l a h t e r d i f e r e n s i a s i a t a u m a s s a s e l y a n g t a k t e r d i f e r e n s i a s i y a n g d i s e b u t k u l ­ t u r k a l u s . (

  2 )

  M e t o d e k u l t u r j a r i n g a n t a n a m a n d i d a s a r i o l e h t e o r i s e l d a r i S c h w a n ( 1 8 3 9 ) d a n S c h l e i d e n , y a n g m e - n y a t a k a n b a h w a s e l h e w a n d a n s e l t u m b u h a n m e r u p a k a n s a t u a n b i o l o g i t e r k e c i l y a n g m a m p u m e l a k u k a n a k t i v i - t a s h i d u p s e p e r t i m e t a b o l i s m e , r e p r o d u k s i d a n t u m b u h . M o r g a n m e n g e m u k a k a n b a h w a s e l j u g a m e m p u n y a i s i f a t t o t i p o t e n s i , y a i t u s e m u a s e l t u m b u h a n m e m b a w a i n f o r - m a s i g e n e t i k y a n g s a m a , d a n s e l d a l a m m e d i a d e n g a n l i n g k u n g a n y a n g c o c o k p a d a h a k e k a t n y a m a m p u m e n g a d a ­ k a n r e g e n e r a s i m e m b e n t u k o r g a n y a n g s a m a . P e n d a p a t i n i y a n g m e n j a d i d a s a r b e r k e m b a n g n y a t e k n i k k u l t u r j a r i n g a n . ( 1 0 )

  6 M e t o d e k u l t u r j a r i n g a n d a p a t d i m a n f a a t k a n u n t u k t u j u a n - t u j u a n t e r t e n t u d a l a m b i d a n g f a r m a s i , a n t a r a

  2

  l a i n ( ) :

  1. P r o d u k s i s e n y a w a t e r t e n t u y a n g b e r g u n a d a l a m b i ­ d a n g f a r m a s i a t a u d a l a m b i d a n g m e d i k .

  2. B i o t r a n s f o r m a s i s e n y a w a t e r t e n t u m e n j a d i s e n y a w a y a n g d a p a t d i g u n a k a n d a l a m b i d a n g f a r m a s i a t a u m e ­ d i k .

  3. P r o d u k s i s e n y a w a - s e n y a w a s p e s i f i k

  4. S e l e k s i g a l u r - g a l u r t a n a m a n u n g g u l u n t u k d i p a k a i p a d a b i d a n g p e r t a n i a n d a n h o r t i k u l t u r a .

  5. M u l t i p l i k a s i t a n a m a n s e c a r a c e p a t d a n s e r a g a m . P e n e r a p a n m e t o d e k u l t u r j a r i n g a n i n i d i a w a l i o l e h W h i t e ( 1 9 3 4 ) y a n g b e r h a s i l m e m b u a t k u l t u r j a r i n g a n d a r i a k a r t o m a t (S o l a n u m l v c o p e r s i c u m ) . (1) 2 . 2 . M e d i a K u l t u r J a r i n g a n . K o m p o s i s i d a r i m e d i a k u l t u r m e m e g a n g p e r a n a n y a n g s a n g a t p e n t i n g d a l a m k e b e r h a s i l a n k u l t u r j a r i n g a n . M e d i a y a n g d i g u n a k a n h a r u s m e m e n u h i k e b u t u h a n p e r t u m ­ b u h a n , p r o l i f e r a s i d a n b i o s i n t e s a , k a r e n a m e d i a t e r - s e b u t a k a n s a n g a t b e r p e n g a r u h t e r h a d a p p r o s e s p e r t u m ­ b u h a n k u l t u r d a n s i n t e s a m e t a b o l i t s e k u n d e r . A d a b e - b e r a p a m e d i a k u l t u r j a r i n g a n , a n t a r a l a i n : m e d i a

  7 M u r a s h i g e - S k o o g , B 5 , W h i t e , H e l l e r , G a m b o r g e t . a l . G a u t h e r e t , H i l d e b r a n d e t . a l . , y a n g p a d a d a s a r n y a s a ­ m a , d e n g a n m o d i f i k a s i p a d a k o m p o n e n d a n j u m l a h k o m p o - n e n n y a diniana d i s e s u a i k a n d e n g a n t u j u a n p e n e l i t i a n ( U ) . M e d i a s t a n d a r k u l t u r j a r i n g a n t e r d i r i a t a s k o m p o ­ n e n y a n g s e i m b a n g a n t a r a m a k r o e l e m e n d a n m i k r o e l e m e n , v i t a m i n , s u m b e r k a r b o n , s e n y a w a o r g a n i k , s u m b e r n i ­ t r o g e n d a n z a t p e n g a t u r t u m b u h . P e n a m b a h a n b a h a n o r ­ g a n i k s e p e r t i a i r k e l a p a , s a r i b u a h ( t o m a t , s e m a n g k a , j e r u k ) , e k s t r a k t a n a m a n ( e k s t r a k r a g i d a n g a n d u m ) d a n p r o t e i n h i d r o l i s a t d a p a t m e r a n g s a n g t e r j a d i n y a p e m b e ­

  ( 1 0 l a h a n s e l ) .

  K o m p o s i s i n o r m a l m e d i a y a n g d i g u n a k a n p a d a k u l t u r j a r i n g a n t a n a m a n u n t u k k e p e r l u a n n u t r i s i p a d a d a s a r ­ n y a t e r d i r i a t a s :

  1. S u m b e r K a r b o n M i s a l n y a : S u k r o s a , g l u k o s a , f r u k t o s a , l a k t o s a , m a n n o s a , g a l a k t o s a d a n l a i n - l a i n . D a r i p e r c o b a a n b e b e r a p a m a c a m k a r b o h i d r a t , s u k r o s a m e r u p a k a n k a r - b o h i d r a t t e r b a i k u n t u k s e l t a n a m a n , d i m a n a h a m p i r s e m u a k u l t u r m e n u n j u k k a n p e r t u m b u h a n y a n g o p t i ­ m a l . S u m b e r k a r b o n b i a s a d i t a m b a h k a n p a d a k o n s e n ­ t r a s i 2 0 . 0 0 0 - 4 5 . 0 0 0 m g / l t (1).

  8

  2 . M a k r o e l e r a e n a n o r g a n i k .

  N u t r i s i . m a k r o e l e m e n a n o r g a n i k y a n g t e r u t a m a d i b u -

  '

  t u h k a n u n t u k p e r t u m b u h a n m e l i p u t i N, P, M g , S, K, C a , C l . N i t r o g e n d i b u t u h k a n d a l a m j u m l a h b e - s a r , d i b e r i k a n d a l a m b e n t u k i o n n i t r a t d a n a t a u a m m o n i u m . M a g n e s i u m d a n s u l f u r d i b e r i k a n d a l a m b e n t u k M g S 0 4

   7 H

  K C 1 , K N O

  3 , K H

  2

  2

  2

  4

  2

  . n a m b a h a n C a C l H O d a n C a f N O j ^ H O a t a u b e n t u k g a r a m l a i n n y a u n t u k m e m e n u h i k e b u t u h a n k a l s i u m .

  2 S e d a n g k a n k l o r i d a d a l a m b e n t u k K c l * a t a u C a C l

  F o s f o r d a l a m b e n t u k N a l ^ P O ^ H

  2 O a t a u K H

  2 P O 4 . ( 3 , 8 )

  3. M i k r o e l e m e n a n o r g a n i k D i b u t u h k a n o l e h s e l t a n a m a n d a l a m j u m l a h k e c i l , N u t r i s i m i k r o e l e m e n y a n g d i p e r l u k a n s e l t a n a m a n t i n g g i a d a l a h C u , Z n , M n , F e , B o d a n M o , b e b e r a p a m e d i a j u g a m e n g a n d u n g C o d a n I ( 10 ) .

  4. V i t a m i n V i t a m i n d i p e r l u k a n d a l a m j u m l a h k e c i l , m e m p u n y a i f u n g s i m e n g k a t a l i s a s i s t e m e n s i m . T h i a m i n m e r u p a - k a n v i t a m i n e s s e n s i a l y a n g d i p e r l u k a n h a m p i r s e m u a k u l t u r j a r i n g a n t a n a m a n . A s a m n i k o t i n a t d a n p i r i d o k s i n m e r a n g s a n g p e r t u m b u h a n . M i o - i n o s i t o l d i -

  9 t a m b a h k a n p a d a b e b e r e p a m e d i a d e n g a n k o n s e n t r a s i

  1 0 0 m g / l t , d i m a k s u d k a n s e b a g a i f a k t o r p e r t u m b u h a n .

  V i t a m i n l a i n y a n g b i s a d i g u n a k a n a d a l a h a s a m p a r a a m i n o b e n z o a t , a s a m a s k o r b a t , b i o t i n , k h o l i n , s i a

  1 0 n o k o b a l a m i n , a s a m f o l a t d a n r i b o f l a v i n ( ).

  5. Z a t P e n g a t u r T u m b u h Z a t p e n g a t u r t u m b u h y a n g d i g u n a k a n u n t u k k e b a n y a k - k a n k u l t u r j a r i n g a n t a n a m a n t e r u t a m a k u l t u r k a l u s a d a l a h a u k s i n d a n s i t o k i n i n . A u k s i n m e m p u n y a i p e - r a n a n a n t a r a l a i n t e r h a d a p p e n g e m b a n g a n s e l , p e m b e n t u k a n k a l u s d a n p e r t u m b u h a n a k a r . S i t o k i n i n m e m p u n y a i p e r a n a n d a l a m p r o s e s p e m b e l a h a n s e l . T e r m a s u k dalara k e l o m p o k a u k s i n y a n g s e r i n g d i g u n a ­ k a n a d a a h I A A , 2 , 4 D, N A A , s e d a n g k a n d a r i s i t o k i ­ n i n a d a l a h k i n e t i n , B A d a n z e a t i n (3). 2 . 3 . K o n d i s i L i n g k u n g a n k u l t u r

  1 . p H .

  P a d a u m u m n y a p e r t u m b u h a n k u l t u r j a r i n g a n t a n a m a n b e r k i s a r a n t a r a p H 5 , 0 - 6 , 5 . M e n u r u t W h i t e p H o p t i m u m p e r t u m b u h a n k u l t u r j a r i n g a n a d a l a h 5 , 4 , s e d a n g k a n m e n u r u t T u l l e c k e e t . a l . d a r i h a s i l p e n e l i t i a n n y a p a d a e m p a t k u l t u r s u s p e n s i d e n g a n

  10 p e r t u m b u h a n a n t a r a 5 , 5 - 5 , 6 . B e b e r a p a m e d i a k u l t u r d i t a m b a h d e n g a n b u f f e r f o s f a t k a r e n a s e l a m a w a k t u p e r t u m b u h a n p H d a p a t b e r u b a h . N a m u n p e n a m - b a h a n n y a s a n g a t t e r b a t a s , k a r e n a p a d a k o n s e n t r a s i t i n g g i a k a n m e n g h a m b a t p e r t u m b u h a n k u l t u r ( 1 8 ) .

  2. T e m p e r a t u r M e n u r u t D e C a p i t e , t e m p e r a t u r o p t i m u m b e b e r a p a k u l t u r j a r i n g a n l e b i h t i n g g i d i b a n d i n g k a n d e n g a n t a n a m a n a s a l n y a , t e t a p i m e n u r u t R i k e r d a n H i l d e - b r a n d t s a m a d e n g a n t a n a m a n a s a l n y a . S e c a r a u m u m k u l t u r j a r i n g a n t a n a m a n a k a n t u m b u h d e n g a n b a i k p a d a t e m p e r a t u r 20* - 28* C d e n g a n t e m p e r a t u r o p ­ t i m u m 26* - 27* C. T e t a p i b e b e r a p a k u l t u r j a r i n ­ g a n t i d a k m e n g a l a m i k e r u s a k a n p a d a t e m p e r a t u r 5* - 1 0 “ C. ( 1 8 ) 3. P e n c a h a y a a n . K u l t u r s u s p e n s i t a n a m a n u m u m n y a t u m b u h d e n g a n p e n ­ c a h a y a a n r e d u p , m e s k i p u n T o r r e y d a n R e i n e r t m e l a - p o r k a n b a h w a k e c e p a t a n t u m b u h d a l a m k e a d a a n g e l a p m a u p u n t e r a n g u n t u k j a r i n g a n t a n a m a n a d a l a h s a m a . B l a k e r l y d a n S t e w a r d m e l a p o r k a n p e n c a h a y a a n p a d a k u l t u r j a r i n g a n H a p l o p a p p u s g r a v i l i s m e n g h a s i l k a n

  11 d a l a m k e a d a a n g e l a p d i h a s i l k a n k u l t u r y a n g r a p u h . ( 1 8 ) 2 . 4 . S u m b e r K a r b o n K a r b o h i d r a t d i s a m p i n g d i g u n a k a n s e b a g a i s u m b e r e n e r g i j u g a m e r u p a k a n s u m b e r n u t r i s i y a n g s a n g a t d i p e r l u k a n b a g i p e r t u m b u h a n t a n a m a n . P a d a t u m b u h a n a u t o t r o p s u m b e r e n e r g i d i p e r o l e h m e l a l u i h a s i l f o t o - s i n t e s i s d a r i k a r b o n , t e t a p i p a d a k u l t u r j a r i n g a n y a n g d i b i a k k a n d a l a m m e d i a b u a t a n , d i m a n a f u n g s i k l o - r o f i l d i t i a d a k a n m a k a d a l a m k u l t u r j a r i n g a n d i p e r l u - k a n p e n g g a n t i s u m b e r k a r b o n l a i n y a n g s e s u a i b a i k s e ­ b a g a i s u m b e r e n e r g i m a u p u n s e b a g a i s u m b e r n u t r i s i . S u k r o s a , l a k t o s a , g l u k o s a , f r u k t o s a d a n k a r b o h i ­ d r a t l a i n d a p a t d i g u n a k a n s e b a g a i s u m b e r e n e r g i y a n g d i p e r l u k a n u n t u k p e r t u m b u h a n s e l d a l a m m e d i a k u l t u r j a r i n g a n . M e n u r u t M a t h e s , M . C . ( 1 9 7 3 ) b e b e r a p a k a r ­ b o h i d r a t l a i n d a p a t d i g u n a k a n s e b a g a i p e n g g a n t i s u m ­ b e r k a r b o n , t e t a p i m a s i n g - m a s i n g s u m b e r k a r b o n t e r s e - b u t m e m b e r i k a n r e s p o n p e r t u m b u h a n k u l t u r y a n g b e r b e - d a - b e d a ( 1 3 ) . A d a n y a k o r e l a s i m a c a m s u m b e r k a r b o n y a n g d i g u n a ­ k a n p a d a p e r t u m b u h a n k u l t u r k a l u s u n t u k m e m p r o d u k s i m e t a b o l i t t e l a h d i l a p o r k a n o l e h R o k e m J S . e t . a l . ( 1 9 8 5 ) d e n g a n m e n g i s o l a s i d i o s g e n i n d a r i k u l t u r

  i r r r r r ^ i

  s U R d i g u n a k a n t e r n y a t a m e n g h a s i l k a n j u m l a h m e t a b o l i t d i o s g e n i n y a n g b e r b e d a ( 8 ). K u l t u r k a l u s d a n k a r a k t e r i s t i k n y a K u l t u r j a r i n g a n t a n a m a n y a n g p a l i n g u m u m a d a l a h k u l t u r k a l u s , d i m a n a m e r u p a k a n s u a t u m a s a y a n g t i d a k t e r d e f e r e n s i a s i d a r i s e l t a n a m a n . P e n e l i t i a n y a n g d i l a k u k a n o l e h W h i t e d a n k e m u d i a n G a u t h e r e t d a n N o - b e c o u r t p a d a t a h u n 1 9 3 0 m e m b u k t i k a n b a h w a k a l u s d a p a t t e r b e n t u k d a r i j a r i n g a n t a n a m a n y a n g t e r i s o l a s i . K a l u s d a p a t d i h a s i l k a n d a r i s e m u a b a g i a n t a n a m a n . C a r a y a n g u m u m a d a l a h d e n g a n m e n a n a m b a g i a n t a n a m a n y a n g t e l a h d i p o t o n g - p o t o n g d e n g a n u k u r a n t e r t e n t u , d i s t e - r i l k a n d a n d i t a n a m p a d a m e d i a k u l t u r y a n g s e s u a i ( 1 4 ) K a l u s t u m b u h s e l a m a p e r i o d e w a k t u y a n g t e r t e n t u b i a s a n y a s e l a m a d u a m i n g g u s a m p a i k i r a - k i r a t i g a b u l a n . P a d a a k h i r n y a a k a n d i c a p a i u k u r a n y a n g o p t i ­ m a l d a n p e r t u m b u h a n a k a n m e n u r u n . H a l t e r s e b u t d i - s e b a b k a n m a k i n b e r k u r a n g n y a n u t r i s i a t a u d e h i d r a s i m e d i a , t e r b e n t u k n y a m e t a b o l i t b e r a c u n , h a b i a n y a o k - s i g e n s e l i n t i j a r i n g a n ( 15 ) . K u r v a p e r t u m b u h a n k a l u s s e l a l u m e n g h a s i l k a n b e n ­ t u k " S " ( s i g m o i d ) . K e c e p a t a n p e r t u m b u h a n m e n c a p a i m a k s i m a l s e t e l a h f a s e l i n i e r d a n m e n j a d i k o n s t a n p a d a

  13 f a s e s t a s i o n e r , k a r e n a s e l m e n g a l a m i m a t u r a s i d a n p e r t u m b u h a n a k h i r n y a r a e n u r u n ( g a m b a r 1) ( 3 , 8 )

  Jum l*K Ml

  G a m b a r 1 : K u r v a p e r t u m b u h a n s e l t a n a m a n 2 . 6 . K u l t u r J a r i n g a n s e b a g a i S u m b e r M e t a b o l i t S e k u n d e r S a l a h s a t u t u j u a n d i k e m b a n g k a n n y a t e h n i k k u l t u r j a ­ r i n g a n t a n a m a n d a l a m p r o d u k s i m e t a b o l i t a d a l a h u n t u k m e n g a t a s i k e s u l i t a n y a n g s e r i n g t i m b u l p a d a p r o d u k s i m e t a b o l i t s e k u n d e r t a n a m a n s e c a r a k o n v e n s i o n a l . D e -

  14 n g a n t e h n i k k u l t u r j a r i n g a n t a n a m a n m u n g k i n d a p a t u n ­ t u k m e m p r o d u k s i s e n y a w a - s e n y a w a y a n g s a m a a t a u i d e n t i k d e n g a n t a n a m a n i n d u k n y a d a n a t a u s e n y a w a - s e n y a w a y a n g l a i n s a m a s e k a l i b a h k a n m u n g k i n t i d a k m a m p u m e m p r o d u k s i s e n y a w a s p e s i f i k d a r i t a n a m a n a s a l - n y a . K o n s e n t r a s i y a n g d i h a s i l k a n m u n g k i n l e b i h b e s a r , s a m a a t a u l e b i h k e c i l d a r i t a n a m a n a s a l n y a ( 2 ). K a u l d a n S t a b a , p a d a t a h u n 1 9 6 8 p e r t a m a k a l i m e n g i - s o l a s i d i o s g e n i n d a r i k u l t u r k a l u s D i o s c o r e a d e l t o i - d e a . d i h a s i l k a n d i o s g e n i n d e n g a n k o n s e n t r a s i m e n d e - k a t i 1 % b o b o t k e r i n g . D e n g a n p e n a m b a h a n k o l e s t e r o l p r o d u k s i d i o g e n i n m e n i n g k a t m e n j a d i 2 , 5 % b o b o t k e r i n g ( 1 6 ) , d a r i h a s i l p e n e l i t i a n R o k e m e t . a l . m e n g e n a i k u l t u r j a r i n g a n D i o c o r e a d e l t o i d e a d i c a p a i k a d a r

  8

  d i o s g e n i n 3 , 8 % b o b o t k e r i n g ( ), s e d a n g k u l t u r j a ­ r i n g a n D i o s c o r e a s v l v a t i c a m e n g a n d u n g d i o s g e n i n 1 , 2 % b o b o t k e r i n g ( 1 0 ). P e n e l i t i a n y a n g d i l a k u k a n T j o n d r o n e g o r o d a n k a w a n - k a w a n t e r h a d a p b e b e r a p a j e n i s D i o s c o r e a m e n u n j u k k a n • a d a n y a d i o s g e n i n d a r i k a l u s D i o s c o r e a b u l b i f e r a . D i o s c o r e a h i s p i d a d a n D i o s c o r e a e s c u l e n t a . A n a l i s a k u a n t i t a t i f d a r i e s k t r a k k a l u s D i o s c o r e a b u l b i f e r a p a d a m e d i a d e n g a n p e n a m b a h a n N A A d a n B A P m e m p u n y a i k a n d u n g a n d i o s g e n i n l e b i h t i n g g i 0 , 4 % d a r i ' p a d a d e n g a n 2 , 4 D ( 0 , 2 % ) ( 1 9 ) .

  T i n j a u a n t e n t a n g D i o s c o r e a

  1. K l a s i f i k a s i ( 1 7 , 2 0 , 2 1 ) D i v i s i A n a k D i v i s i K e l a s B a n g s a M a r g a J e n i s

  2. N a m a d a e r a h J a w a

  3. K a n d u n g a n D i o s c o r a e D i o s g e n i n p a d a b e r m a c a m - m a c a m m e n g a n d u n g a i r p r o t e i n

  2

  % t e n . s a p o n i n , k o m p o n e n p e n t a p h y l l a L . : S p e r m a t o p h y t a : A n g i o s p e r m a e : M o n o c o t y l e d o n a e : D i o s c o r e a c e a e : D i o s c o r e a : D i o s c o r e a p e n t a p h y l l a L . : h u w i s a w u t , h u w i d e w a t a , h u w i m a n t r i ( 1 7 , 2 0 ) . s p u m u m n y a t e r d a p a t p a d a u m b i d a r i j e n i s D i o s c o r e a . U m b i t e r u t a m a 6 0 - 8 0 % , d i s a m p i n g k a r b o h i d r a t 2 3 % , , s e j u m l a h k e c i l v i t a m i n B , C d a n k a r o - S e l a i n i t u u m b i m e n g a n d u n g s e n y a w a g l i k o s i d a s t e r o l , t a n i n , t r i g l i s e r i d a d a n k o m p o n e n - a s a m f e n o l a t ( 1 7 , 2 0 , 2 1 ) .

  1 3 -

  A. 1 3

  X X I M E T O D O L O G I P E N E L I T I A N 3 . 1 . B a h a n . 3 . 1 . 1 . K a l u s K a l u s D i o s c o r e a p e n t a p h v l l a L. d i p e r o l e h d a r i l a b o t a r i u m B i o k t e k n o l o g i j u r u s a n B i o l o g i F a r - raasi F a k u l t a s F a r m a s i U n i v e r s i t a s A i r l a n g g a . 3 . 1 * 2 . B a h a n K i m i a . B a h a n kiraia y a n g d i g u n a k a n a d a l a h p r o d u k s i E. M e r c k D a r m s t a d t d e n g a n d e r a j a t " p r o a n a l i s a " , k e c u a l i d i s e b u t k a n l a i n . A g a r y a n g d i g u n a k a n a d a l a h B a c t o a g a r , D i f c o C e n t r i f r i e d , D i f c o L a b o r a t o r i e s , D e t r o i t M i c h i g a n U S A . S u m b e r k a r b o n y a n g d i g u n a k a n s u k r o s a d a n g l u k o s a m o n o h y d r a t d a r i f e r a x l a b o r a t G M B H B e r l i n (W e s t ). 3 . 1 . 3 . M e d i a p e r t u m b u h a n . Y a n g d i g u n a k a n d a l a m p e n e l i t i a n i n i a d a l a h m e ­ d i a s t a n d a r M u r a s h i g e d a n S k o o g y a n g s e l a n j u t - n y a d i s e b u t m e d i a s t a n d a r M S ( t a b e l 2) d e n g a n s u m b e r k a r b o n p a d a b e r b a g a i k o n s e n t r a s i ( t a b e l

  1

   ) d a n d e n g a n p e n a m b a h a n z a t p e n g a t u r t u m b u h

  17 k i n e t i n 2 p p m d a n 2 , 4 D 2 p p m . 3 . 2 . A l a t . A l a t y a n g d i g u n a k a n d a l a m p e n e l i t i a n : - L a m i n a r a i r f l o w c a b i n e t , u n t u k p e n g e r j a a n a s e p t i s - A u t o c l a f , u n t u k s t e r i l i s a s i m e d i a - p H m e t e r F i s h e r , u n t u k m e n g u k u r p H m e d i a - M o n o p a n b a l a n c e - O v e n - C e n t r i f u g e - A l a t - a l a t g e l a s ( e r l e n m e y e r , b e k e r g l a s s d l l . ) - A l a t - a l a t u n t u k p e n g e r j a a n s t e r i l ( p i n s e t , s p a t e l d a n l a i n - l a i n ). 3 . 3 . C a r a K e r i a . 3 . 3 . 1 . P e m b u a t a n M e d i a P e m b u a t a n m e d i a d a l a m p e n e l i t i a n i n i d i l a k u k a n s e s u a i d e n g a n m e t o d a M u r a s h i g e d a n S k o o g d a l a m B h o j w a n i 1 9 8 3 ( 3 ) . S e m u a b a h a n k i m i a k o m p o n e n m e d i a M S d i b u a t d a n d i s i m p a n d a l a m l a r u t a n s t o k . U n t u k m e m b u a t m e d i a d e n g a n v o l u m e 1 l i ­ t e r d i g u n a k a n c a r a s e b a g a i b e r i k u t : M a s i n g - m a s i n g l a r u t a n s t o k d i p i p e t 10 m l d i -

  1 0 0

  18 k o s a s e b a g a i s u m b e r k a r b o n d e n g a n k o n s e n t r a s i y a n g t e r t e n t u ( T a b e l 1) k e m u d i a n d i t a m b a h

  1 0 0 0

  a q u a d e s t s a m p a i v o l u m e m e n d e k a t i m l s a m b i l d i a d u k d a n p H d i a t u r p a d a 5 , 7 d e n g a n p e ­ n a m b a h a n N a O H 0 , 1 N a t a u H C 1 0 , 1 N. S e t e l a h

  1

  d i t a m b a h a g a r % m e d i a d i t a m b a h a q u a d e s t s a m ­

  1 0 0 0

  p a i v o l u m e t e p a t m l . L a r u t a n l a l u d i p a - n a s k a n s a m b i l d i a d u k s a m p a i m e n d i d i h d a n j e r - n i h . D a l a m k e a d a a n p a n a s d i t u a n g k a n k e d a l a m b o t o l k u l t u r , k e m u d i a n d i t u t u p d e n g a n a l u m u - n i u m f o i l d a n d i i k a t d e n g a n t a l i . S e l a n j u t n y a d i s t e r i l k a n s e c a r a a u t o c l a f p a d a s u h u 1 2 1 * C

  2 0 s e l a m a m e n i t .

  T a b e l 1. M a c a m s u m b e r k a r b o n d a n k o n s e n t r a s i y a n g d i p a k a i p a d a p e n e l i t i a n .

  1 K o d e M e d i a S u m b e r K a r b o n K o n s e n t r a s i