AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN PACAR AIR (Impatiens balsamina L.) TERHADAP Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Pacar Air (Impatiens Balsamina L.) Terhadap Bakteri Streptococcus Pyogenes Dan Shigella Sonnei Serta Bioautografinya.
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN
PACAR AIR (Impatiens balsamina L.) TERHADAP
BAKTERI Streptococcus pyogenes DAN Shigella sonnei
SERTA BIOAUTOGRAFINYA
SKRIPSI
Oleh:
YENI MAISYAH
K100110098
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN
PACAR AIR (Impatiens balsamina L.)TERHADAP
BAKTERI Streptococcus pyogenes DAN Shigella sonnei SERTA
BIOAUTOGRAFINYA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
YENI MAISYAH
K100110098
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
i
ii
iii
iv
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN SAMPUL DALAM .............................................................. i
HALAMAN PENGESAHAN................................................................... ii
HALAMAN DEKLARASI...................................................................... iii
KATA PENGANTAR ............................................................................. iv
DAFTAR ISI ............................................................................................. v
DAFTAR TABEL .................................................................................. viii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................... ix
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................. x
DAFTAR SINGKATAN ......................................................................... xi
INTISARI................................................................................................ xii
BAB I. PENDAHULUAN ........................................................................ 1
A. Latar Belakang Masalah ....................................................... 1
B. Perumusan Masalah .............................................................. 2
C. Tujuan Penelitian .................................................................. 2
D. Tinjauan Pustaka ................................................................... 3
a. Tanaman Pacar Air (Impatiens balsamina L.) ................ 3
b. Streptococcus pyogenes .................................................. 4
c. Shigella sonnei ................................................................ 5
d. Antibakteri ...................................................................... 5
e. Uji Antibakteri ................................................................ 6
f. Bioautografi .................................................................... 7
E. Landasan Teori ..................................................................... 8
F. Hipotesis ............................................................................... 8
BAB II. METODE PENELITIAN ............................................................ 9
A. Definisi Operasional Penelitian ............................................ 9
B. Variabel Penelitian ................................................................ 9
v
C. Bahan dan Alat...................................................................... 9
1. Alat ................................................................................. 9
2. Bahan ........................................................................... 10
D. Tempat Penelitian .............................................................. 10
E. Jalannya Penelitian ............................................................ 10
1. Determinasi Tanaman ................................................... 10
2. Penyiapan Bahan ........................................................... 10
3. Ekstraksi ........................................................................ 11
4. Sterilisasi Alat dan Bahan ............................................. 11
5. Pembuatan Media .......................................................... 11
6. Identifikasi Bakteri ........................................................ 12
a. Pengecatan Bakteri................................................. 12
b. Uji Biokimia ........................................................... 12
c. Uji Katalase ............................................................ 12
d. Uji Hemolisis ......................................................... 13
7. Pembuatan Suspensi Bakteri ......................................... 13
8. Pembuatan Seri Konsentrasi ......................................... 13
9. Uji Antibakteri dengan Metode Difusi Agar ................. 14
10. Uji KLT Ekstrak Etanol ................................................ 14
11. Bioautografi .................................................................. 14
F. Analisis Data ...................................................................... 15
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................... 16
A. Determinasi Tanaman ........................................................ 16
B. Penyiapan Bahan Ekstraksi ................................................ 16
C. Hasil Identifikasi Bakteri ................................................... 17
1. Streptococcus pyogenes ................................................ 17
a. Pengecatan bakteri ................................................. 17
b. Uji Hemolisis .......................................................... 18
c. Uji Katalase ............................................................. 18
vi
2. Shigella sonnei .............................................................. 19
a. Pengecatan Bakteri................................................. 19
b. Uji Biokimia ........................................................... 19
D. Uji Aktivitas Antibakteri ................................................... 20
E. Hasil Kromatografi Lapis Tipis ......................................... 22
F. Hasil Bioautografi .............................................................. 25
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................... 27
A. Kesimpulan ........................................................................ 27
B. Saran .................................................................................. 27
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................. 28
LAMPIRAN ........................................................................................... 34
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 1.Bagian tanaman pacar air dan aktivitasnya ....................................... 3
Tabel 2.Hasil uji aktivitas antibakteri ......................................................... 21
Tabel 3.Hasil KLT ekstrak etanol daun pacar air
(Impatiens balsamina L.)………………………………………... 24
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.Identifikasi bakteri Streptococcus pyogenes ............................... 18
Gambar 2. Pengecatan Bakteri Shigella sonnei .......................................... 19
Gambar 3.Hasil uji biokimia bakteri Shigella sonnei. ................................ 20
Gambar 4. Uji aktivitas antibakteri ............................................................ 22
Gambar 5.Hasil uji KLT ekstrak etanol ...................................................... 25
Gambar 6. Uji bioautografi ekstrak etanol pacar air (Impatiens
balsamina L.) ........................................................... ............... 26
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1.Tanaman pacar air (Impatiens balsamina L.) ......................
34
Lampiran 2. Surat keterangan determinasi..............................................
35
Lampiran 3. Skema jalannya percobaan uji aktivitas..............................
37
Lampiran 4. Perhitungan seri konsentrasi ...............................................
38
Lampiran 5. Komposisi media ................................................................
39
Lampiran6. Komposisi cat gram .............................................................
41
Lampiran 7. Cara membuat pereaksi semprot.........................................
42
x
DAFTAR SINGKATAN
UV
:
Ultraviolet
IR
:
Infrared
KLT
:
Kromatografi Lapis Tipis
MH
:
Mueller Hinton
BHI
:
Brain Heart Infusion
KIA
:
Kligler Iron Agar
LIA
:
Lysine Iron Agar
MIO
:
Motility Indol Agar
DMSO
:
Dimetil Sulfoksida
S. pyogenes
:
Streptococcus pyogenes
S. sonnei
:
Escherichia coli
CFU
:
Colony Forming Unit
µL
:
Mikroliter
MIC
:
Minimum Inhibitory Concentration
mL
:
Mililiter
µg
:
Mikrogram
mg
:
Miligram
GAS
:
Group A Streptococcus
LB
:
Liebermann-Burchard
KOH
:
Kalium Hidroksida
WHO
:
World Health Organization
UMS
:
Universitas Muhammadiyah Surakarta
FKIP
:
Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan
xi
INTISARI
Infeksi merupakan masalah kesehatan yang sering dialami. Agen penyebab
infeksi antaralain bakteri baik Gram positif maupun Gram negatif. Penelitian
terdahulu membuktikan bahwa ekstrak etanol daun pacar air (Impatiens balsamina
L.) memiliki aktivitas antibakteri spektrum luas. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pacar air terhadap
Streptococcus pyogenes dan Shigella sonnei serta mengetahui senyawa yang
bertanggungjawab terhadap aktivitas antibakteri dengan metode bioautografi.
Daun pacar air dimaserasi menggunakan pelarut etanol 70%. Uji aktivitas
menggunakan metode difusi agar. Ekstrak dibuat seri konsentrasi 10000, 5000,
2500, dan 1250 µg/sumuran dengan kontrol positif kloramfenikol dan kontrol
negatif DMSO. Deteksi kandungan senyawa ekstrak dilakukan dengan metode
Kromatografi Lapis Tipis (KLT) menggunakan fase diam silika gel GF254nm dan
fase gerak etil-asetat : kloroform (7:3) v/v kemudian dilakukan bioautografi untuk
mendeteksi senyawa aktif antibakteri.
Hasil uji menunjukkan ekstrak etanol daun pacar air mempunyai aktivitas
antibakteri terhadap Streptococcus pyogenes danShigella sonnei yang ditunjukkan
dengan zona jernih disekitar sumuran. Hasil identifikasi senyawa dalam ekstrak
menunjukkan adanya senyawa golongan steroid, antron, antrakuinon, kumarin,
fenol, dan flavonoid. Hasil uji bioutografi ekstrak etanol daun pacar air dengan
konsentrasi 12,5% tidak menunjukkan adanya senyawa yang bertanggungjawab
sebagai antibakteri terhadap bakteri Streptococcus pyogenes dan Shigella sonnei.
Kata kunci: Pacar Air, Impatiens balsamina L., Antibakteri , Streptococcus
pyogenes, Shigella sonnei
xii
PACAR AIR (Impatiens balsamina L.) TERHADAP
BAKTERI Streptococcus pyogenes DAN Shigella sonnei
SERTA BIOAUTOGRAFINYA
SKRIPSI
Oleh:
YENI MAISYAH
K100110098
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN
PACAR AIR (Impatiens balsamina L.)TERHADAP
BAKTERI Streptococcus pyogenes DAN Shigella sonnei SERTA
BIOAUTOGRAFINYA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
YENI MAISYAH
K100110098
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
i
ii
iii
iv
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN SAMPUL DALAM .............................................................. i
HALAMAN PENGESAHAN................................................................... ii
HALAMAN DEKLARASI...................................................................... iii
KATA PENGANTAR ............................................................................. iv
DAFTAR ISI ............................................................................................. v
DAFTAR TABEL .................................................................................. viii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................... ix
DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................. x
DAFTAR SINGKATAN ......................................................................... xi
INTISARI................................................................................................ xii
BAB I. PENDAHULUAN ........................................................................ 1
A. Latar Belakang Masalah ....................................................... 1
B. Perumusan Masalah .............................................................. 2
C. Tujuan Penelitian .................................................................. 2
D. Tinjauan Pustaka ................................................................... 3
a. Tanaman Pacar Air (Impatiens balsamina L.) ................ 3
b. Streptococcus pyogenes .................................................. 4
c. Shigella sonnei ................................................................ 5
d. Antibakteri ...................................................................... 5
e. Uji Antibakteri ................................................................ 6
f. Bioautografi .................................................................... 7
E. Landasan Teori ..................................................................... 8
F. Hipotesis ............................................................................... 8
BAB II. METODE PENELITIAN ............................................................ 9
A. Definisi Operasional Penelitian ............................................ 9
B. Variabel Penelitian ................................................................ 9
v
C. Bahan dan Alat...................................................................... 9
1. Alat ................................................................................. 9
2. Bahan ........................................................................... 10
D. Tempat Penelitian .............................................................. 10
E. Jalannya Penelitian ............................................................ 10
1. Determinasi Tanaman ................................................... 10
2. Penyiapan Bahan ........................................................... 10
3. Ekstraksi ........................................................................ 11
4. Sterilisasi Alat dan Bahan ............................................. 11
5. Pembuatan Media .......................................................... 11
6. Identifikasi Bakteri ........................................................ 12
a. Pengecatan Bakteri................................................. 12
b. Uji Biokimia ........................................................... 12
c. Uji Katalase ............................................................ 12
d. Uji Hemolisis ......................................................... 13
7. Pembuatan Suspensi Bakteri ......................................... 13
8. Pembuatan Seri Konsentrasi ......................................... 13
9. Uji Antibakteri dengan Metode Difusi Agar ................. 14
10. Uji KLT Ekstrak Etanol ................................................ 14
11. Bioautografi .................................................................. 14
F. Analisis Data ...................................................................... 15
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................... 16
A. Determinasi Tanaman ........................................................ 16
B. Penyiapan Bahan Ekstraksi ................................................ 16
C. Hasil Identifikasi Bakteri ................................................... 17
1. Streptococcus pyogenes ................................................ 17
a. Pengecatan bakteri ................................................. 17
b. Uji Hemolisis .......................................................... 18
c. Uji Katalase ............................................................. 18
vi
2. Shigella sonnei .............................................................. 19
a. Pengecatan Bakteri................................................. 19
b. Uji Biokimia ........................................................... 19
D. Uji Aktivitas Antibakteri ................................................... 20
E. Hasil Kromatografi Lapis Tipis ......................................... 22
F. Hasil Bioautografi .............................................................. 25
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................... 27
A. Kesimpulan ........................................................................ 27
B. Saran .................................................................................. 27
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................. 28
LAMPIRAN ........................................................................................... 34
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 1.Bagian tanaman pacar air dan aktivitasnya ....................................... 3
Tabel 2.Hasil uji aktivitas antibakteri ......................................................... 21
Tabel 3.Hasil KLT ekstrak etanol daun pacar air
(Impatiens balsamina L.)………………………………………... 24
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.Identifikasi bakteri Streptococcus pyogenes ............................... 18
Gambar 2. Pengecatan Bakteri Shigella sonnei .......................................... 19
Gambar 3.Hasil uji biokimia bakteri Shigella sonnei. ................................ 20
Gambar 4. Uji aktivitas antibakteri ............................................................ 22
Gambar 5.Hasil uji KLT ekstrak etanol ...................................................... 25
Gambar 6. Uji bioautografi ekstrak etanol pacar air (Impatiens
balsamina L.) ........................................................... ............... 26
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1.Tanaman pacar air (Impatiens balsamina L.) ......................
34
Lampiran 2. Surat keterangan determinasi..............................................
35
Lampiran 3. Skema jalannya percobaan uji aktivitas..............................
37
Lampiran 4. Perhitungan seri konsentrasi ...............................................
38
Lampiran 5. Komposisi media ................................................................
39
Lampiran6. Komposisi cat gram .............................................................
41
Lampiran 7. Cara membuat pereaksi semprot.........................................
42
x
DAFTAR SINGKATAN
UV
:
Ultraviolet
IR
:
Infrared
KLT
:
Kromatografi Lapis Tipis
MH
:
Mueller Hinton
BHI
:
Brain Heart Infusion
KIA
:
Kligler Iron Agar
LIA
:
Lysine Iron Agar
MIO
:
Motility Indol Agar
DMSO
:
Dimetil Sulfoksida
S. pyogenes
:
Streptococcus pyogenes
S. sonnei
:
Escherichia coli
CFU
:
Colony Forming Unit
µL
:
Mikroliter
MIC
:
Minimum Inhibitory Concentration
mL
:
Mililiter
µg
:
Mikrogram
mg
:
Miligram
GAS
:
Group A Streptococcus
LB
:
Liebermann-Burchard
KOH
:
Kalium Hidroksida
WHO
:
World Health Organization
UMS
:
Universitas Muhammadiyah Surakarta
FKIP
:
Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan
xi
INTISARI
Infeksi merupakan masalah kesehatan yang sering dialami. Agen penyebab
infeksi antaralain bakteri baik Gram positif maupun Gram negatif. Penelitian
terdahulu membuktikan bahwa ekstrak etanol daun pacar air (Impatiens balsamina
L.) memiliki aktivitas antibakteri spektrum luas. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pacar air terhadap
Streptococcus pyogenes dan Shigella sonnei serta mengetahui senyawa yang
bertanggungjawab terhadap aktivitas antibakteri dengan metode bioautografi.
Daun pacar air dimaserasi menggunakan pelarut etanol 70%. Uji aktivitas
menggunakan metode difusi agar. Ekstrak dibuat seri konsentrasi 10000, 5000,
2500, dan 1250 µg/sumuran dengan kontrol positif kloramfenikol dan kontrol
negatif DMSO. Deteksi kandungan senyawa ekstrak dilakukan dengan metode
Kromatografi Lapis Tipis (KLT) menggunakan fase diam silika gel GF254nm dan
fase gerak etil-asetat : kloroform (7:3) v/v kemudian dilakukan bioautografi untuk
mendeteksi senyawa aktif antibakteri.
Hasil uji menunjukkan ekstrak etanol daun pacar air mempunyai aktivitas
antibakteri terhadap Streptococcus pyogenes danShigella sonnei yang ditunjukkan
dengan zona jernih disekitar sumuran. Hasil identifikasi senyawa dalam ekstrak
menunjukkan adanya senyawa golongan steroid, antron, antrakuinon, kumarin,
fenol, dan flavonoid. Hasil uji bioutografi ekstrak etanol daun pacar air dengan
konsentrasi 12,5% tidak menunjukkan adanya senyawa yang bertanggungjawab
sebagai antibakteri terhadap bakteri Streptococcus pyogenes dan Shigella sonnei.
Kata kunci: Pacar Air, Impatiens balsamina L., Antibakteri , Streptococcus
pyogenes, Shigella sonnei
xii