AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN PACAR AIR (Impatiens balsamina L.) TERHADAP Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Pacar Air (Impatiens Balsamina L.) Terhadap Bakteri Bacillus Subtilis Dan Escherichia Coli Serta Bioautografinya.
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN
PACAR AIR (Impatiens balsamina L.) TERHADAP
BAKTERI Bacillus subtilis DAN Escherichia coli
SERTA BIOAUTOGRAFINYA
SKRIPSI
Oleh:
AGUNG COKRO PRABOWO
K100110092
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN
PACAR AIR (Impatiens balsamina L.) TERHADAP
BAKTERI Bacillus subtilis DAN Escherichia coli
SERTA BIOAUTOGRAFINYA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
AGUNG COKRO PRABOWO
K100110092
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
i
PENGESAHAN SKRIPSI
Berjudul:
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN
PACAR AIR (Impatiens balsamina L.)TERHADAP
BAKTERI Bacillus subtilis DAN Escherichia coli
SERTA BIOAUTOGRAFINYA
ii
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya
yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan
Tinggi dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat
yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis
diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Saya bersedia dan sanggup menerima sanksi sesuai peraturan yang berlaku
apabila terbukti melakukan pemalsuan data dan plagiasi.
iii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb.
Alhamdulillahirobil’alamin, puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala
rahmat, dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan
judul Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Pacar air (Impatiens balsamina
L.) Terhadap Bakteri Bacillus subtilis Dan Escherichia coli Serta Bioautografinya
sebagai salah satu syarat mencapai Derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) Program
Studi Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Penulis mengucapkan trima kasih sebesar-besarnya kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St. selaku dosen Pembimbing utama dan
Pembimbing Akademik.
3. Ibu Astuti dan Bapak Sukarjo selaku orang tua.
4. Keluarga tercinta Wito Rahardian, Weti Rahmawati, Sentot Bahadur dan Eva
Rosadah.
5. Rekan Penelitian Yeni Maisyah dan Adhi Wardhana Amrullah.
Penulis menyadari bahwa naskah skripsi ini masih belum sempurna.
Semoga penelitian ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan
khususnya bidang farmasi.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb.
Surakarta, 18 Februari 2015
Penulis
iv
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL................................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN................................................................................ ii
DEKLARASI ......................................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv
DAFTAR ISI ............................................................................................................v
DAFTAR GAMBAR.. .......................................................................................... vii
DAFTAR TABEL. ............................................................................................... viii
DAFTAR LAMPIRAN. ......................................................................................... ix
DAFTAR SINGKATAN.. ...................................................................................... x
INTISARI………. . ................................................................................................ xi
BAB I. PENDAHULUAN ......................................................................................1
A. Latar Belakang Masalah .....................................................................1
B. Rumusan Masalah ...............................................................................2
C. Tujuan Penelitian ................................................................................2
D. Tinjauan Pustaka .................................................................................3
1. Tanaman Pacar Air (Impatiens balsamina L.) ............................3
a. Kandungan Kimia ................................................................ 3
b. Efek Farmakologis .............................................................. 3
2. Bacillus subtillis ..........................................................................3
3. Escherichia coli ...........................................................................4
4. Antibakteri ...................................................................................4
5. Uji Antibakteri .............................................................................5
6. Kromatografi Lapis Tipis ............................................................5
7. Bioautografi .................................................................................6
E. Landasan Teori ....................................................................................6
F. Hipotesis ..............................................................................................7
BAB II. METODE PENELITIAN ...........................................................................9
A. Kategori Penelitian.............................................................................9
B. Variabel Penelitian .............................................................................9
C. Alat dan Bahan ...................................................................................9
v
1. Alat ............................................................................................. 9
2. Bahan .......................................................................................... 9
D. Tempat Penelitian ..............................................................................9
E. Jalannya Penelitian ............................................................................9
1. Determinasi Tanaman ................................................................ 9
2. Pembuatan Simplisia ................................................................. 9
3. Ekstraksi .................................................................................... 9
4. Sterilisasi Alat dan Bahan ......................................................... 9
5. Pembuatan Media .................................................................... 10
6. Pembuatan Stok Bakteri .......................................................... 10
7. Pengecatan Gram ..................................................................... 10
8. Uji Biokimia .............................................................................11
9. Uji katalase .............................................................................. 11
10. Pembuatan Stok Larutan Uji ................................................... 11
11. Pembuatan Seri Konsentrasi .................................................... 11
12. Uji Aktivitas Antibakteri ......................................................... 11
13. Uji Kromatografi Lapis Tipis .................................................. 12
14. Uji Bioautografi........................................................................12
F. Analisis Data.....................................................................................12
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ..............................................................14
A. Determinasi Tanaman ......................................................................14
B. Ekstraksi Bahan ................................................................................14
C. Identifikasi Bakteri ...........................................................................14
D. Hasil Uji Antibakteri ........................................................................17
E. Uji Kromatografi Lapis Tipis ...........................................................21
F. Uji Bioautografi ................................................................................23
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ..............................................................25
A. Kesimpulan .......................................................................................25
B. Saran ..................................................................................................25
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................26
LAMPIRAN.. .........................................................................................................30
vi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Hasil pengecatan Gram Escherichia coli dan Bacillus subtilis.. ... 15
Gambar 2. Hasil uji biokimia Escherichia coli ............................................... 16
Gambar 3. Hasil uji biokimia Bacillus subtilis................................................ 17
Gambar 4. Hasil uji aktivitas ekstrak etanol daun pacar air terhadap
Escherichia coli dan Bacillus subtilis............................................ 18
Gambar 5. Hasil kromatografi lapis tipis ........................................................ 23
Gambar 6. Hasil uji bioautografi ..................................................................... 24
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Hasil biokimiawi Escherichia coli .….. ............................................. 16
Tabel 2. Hasil uji aktivitas.. .............................................................................. 18
Tabel 3. Hasil uji t.. .......................................................................................... 20
Tabel 4. Hasil kromatografi lapis tipis ............................................................. 24
viii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat keterangan determinasi tanaman pacar air.. ....................... 30
Lampiran 2. Tanaman pacar air ........................................................................ 32
Lampiran 3. Data pembuatan ekstrak ............................................................... 33
Lampiran 4. Data perhitungan konsentrasi ekstrak .......................................... 34
ix
DAFTAR SINGKATAN
µg
: Mikrogram
µL
: Mikroliter
BHI
: Brain Heart Infusion
CFU
: Colony Forming Unit
E.coli
: Escherichia coli
DMSO
: Dimetil Sulfoksida
UV
: Ultraviolet
KIA
: Kligler Iron Agar
LIA
: Lysine Iron Agar
mg
: Miligram
MH
: Mueller Hinton
mL
: Mililiter
MIO
: Motility Indol Agar
x
INTISARI
Bacillus subtilis dan Escherichia coli merupakan bakteri yang sering
menjadi penyebab infeksi di Indonesia. Berdasarkan penelitian sebelumnya
ekstrak etanol daun pacar air memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri
Staphylococcus aureus dan Bacillus cereus. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pacar air (Impatiens
balsamina L.) terhadap Bacillus subtilis dan Escherichia coli dengan metode
difusi agar secara sumuran, serta mengidentifikasi golongan senyawa dalam
ekstrak etanol daun pacar air yang mempunyai aktivitas antibakteri.
Metode maserasi dengan etanol 70% dilakukan dengan merendam daun
pacar air kering selama 3 hari. Ekstrak etanol daun pacar air diuji aktivitas
antibakterinya terhadap Bacillus subtilis dan Escherichia coli menggunakan
metode sumuran. Identifikasi golongan senyawa Kromatografi Lapis Tipis dengan
fase gerak etil asetat:kloroform (7:3) dan fase diam GF254nm.. Bioautografi kontak
dilakukan untuk mengetahui golongan senyawa yang memiliki aktivitas
antibakteri.
Hasil uji aktivitas menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun pacar air
mempunyai aktivitas antibakteri dengan menghasilkan zona jernih disekitar
sumuran. Hasil identifikasi kandungan senyawa mengunakan kromatografi lapis
tipis menunjukkan adanya alkaloid, antron, antrakinon, kumarin, flavonoid dan
fenolik dalam ekstrak. Hasil uji bioautografi belum dapat mengungkap golongan
senyawa yang memiliki aktivitas antibakteri.
Kata kunci: Pacar air, Impatiens balsamina L., Escherichia coli, Bacillus subtilis,
Antibakteri.
xi
PACAR AIR (Impatiens balsamina L.) TERHADAP
BAKTERI Bacillus subtilis DAN Escherichia coli
SERTA BIOAUTOGRAFINYA
SKRIPSI
Oleh:
AGUNG COKRO PRABOWO
K100110092
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN
PACAR AIR (Impatiens balsamina L.) TERHADAP
BAKTERI Bacillus subtilis DAN Escherichia coli
SERTA BIOAUTOGRAFINYA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
AGUNG COKRO PRABOWO
K100110092
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2015
i
PENGESAHAN SKRIPSI
Berjudul:
AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL DAUN
PACAR AIR (Impatiens balsamina L.)TERHADAP
BAKTERI Bacillus subtilis DAN Escherichia coli
SERTA BIOAUTOGRAFINYA
ii
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya
yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan
Tinggi dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat
yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis
diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Saya bersedia dan sanggup menerima sanksi sesuai peraturan yang berlaku
apabila terbukti melakukan pemalsuan data dan plagiasi.
iii
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb.
Alhamdulillahirobil’alamin, puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala
rahmat, dan hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan
judul Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Pacar air (Impatiens balsamina
L.) Terhadap Bakteri Bacillus subtilis Dan Escherichia coli Serta Bioautografinya
sebagai salah satu syarat mencapai Derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) Program
Studi Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Penulis mengucapkan trima kasih sebesar-besarnya kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St. selaku dosen Pembimbing utama dan
Pembimbing Akademik.
3. Ibu Astuti dan Bapak Sukarjo selaku orang tua.
4. Keluarga tercinta Wito Rahardian, Weti Rahmawati, Sentot Bahadur dan Eva
Rosadah.
5. Rekan Penelitian Yeni Maisyah dan Adhi Wardhana Amrullah.
Penulis menyadari bahwa naskah skripsi ini masih belum sempurna.
Semoga penelitian ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan
khususnya bidang farmasi.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb.
Surakarta, 18 Februari 2015
Penulis
iv
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL................................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN................................................................................ ii
DEKLARASI ......................................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv
DAFTAR ISI ............................................................................................................v
DAFTAR GAMBAR.. .......................................................................................... vii
DAFTAR TABEL. ............................................................................................... viii
DAFTAR LAMPIRAN. ......................................................................................... ix
DAFTAR SINGKATAN.. ...................................................................................... x
INTISARI………. . ................................................................................................ xi
BAB I. PENDAHULUAN ......................................................................................1
A. Latar Belakang Masalah .....................................................................1
B. Rumusan Masalah ...............................................................................2
C. Tujuan Penelitian ................................................................................2
D. Tinjauan Pustaka .................................................................................3
1. Tanaman Pacar Air (Impatiens balsamina L.) ............................3
a. Kandungan Kimia ................................................................ 3
b. Efek Farmakologis .............................................................. 3
2. Bacillus subtillis ..........................................................................3
3. Escherichia coli ...........................................................................4
4. Antibakteri ...................................................................................4
5. Uji Antibakteri .............................................................................5
6. Kromatografi Lapis Tipis ............................................................5
7. Bioautografi .................................................................................6
E. Landasan Teori ....................................................................................6
F. Hipotesis ..............................................................................................7
BAB II. METODE PENELITIAN ...........................................................................9
A. Kategori Penelitian.............................................................................9
B. Variabel Penelitian .............................................................................9
C. Alat dan Bahan ...................................................................................9
v
1. Alat ............................................................................................. 9
2. Bahan .......................................................................................... 9
D. Tempat Penelitian ..............................................................................9
E. Jalannya Penelitian ............................................................................9
1. Determinasi Tanaman ................................................................ 9
2. Pembuatan Simplisia ................................................................. 9
3. Ekstraksi .................................................................................... 9
4. Sterilisasi Alat dan Bahan ......................................................... 9
5. Pembuatan Media .................................................................... 10
6. Pembuatan Stok Bakteri .......................................................... 10
7. Pengecatan Gram ..................................................................... 10
8. Uji Biokimia .............................................................................11
9. Uji katalase .............................................................................. 11
10. Pembuatan Stok Larutan Uji ................................................... 11
11. Pembuatan Seri Konsentrasi .................................................... 11
12. Uji Aktivitas Antibakteri ......................................................... 11
13. Uji Kromatografi Lapis Tipis .................................................. 12
14. Uji Bioautografi........................................................................12
F. Analisis Data.....................................................................................12
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ..............................................................14
A. Determinasi Tanaman ......................................................................14
B. Ekstraksi Bahan ................................................................................14
C. Identifikasi Bakteri ...........................................................................14
D. Hasil Uji Antibakteri ........................................................................17
E. Uji Kromatografi Lapis Tipis ...........................................................21
F. Uji Bioautografi ................................................................................23
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ..............................................................25
A. Kesimpulan .......................................................................................25
B. Saran ..................................................................................................25
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................26
LAMPIRAN.. .........................................................................................................30
vi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Hasil pengecatan Gram Escherichia coli dan Bacillus subtilis.. ... 15
Gambar 2. Hasil uji biokimia Escherichia coli ............................................... 16
Gambar 3. Hasil uji biokimia Bacillus subtilis................................................ 17
Gambar 4. Hasil uji aktivitas ekstrak etanol daun pacar air terhadap
Escherichia coli dan Bacillus subtilis............................................ 18
Gambar 5. Hasil kromatografi lapis tipis ........................................................ 23
Gambar 6. Hasil uji bioautografi ..................................................................... 24
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Hasil biokimiawi Escherichia coli .….. ............................................. 16
Tabel 2. Hasil uji aktivitas.. .............................................................................. 18
Tabel 3. Hasil uji t.. .......................................................................................... 20
Tabel 4. Hasil kromatografi lapis tipis ............................................................. 24
viii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Surat keterangan determinasi tanaman pacar air.. ....................... 30
Lampiran 2. Tanaman pacar air ........................................................................ 32
Lampiran 3. Data pembuatan ekstrak ............................................................... 33
Lampiran 4. Data perhitungan konsentrasi ekstrak .......................................... 34
ix
DAFTAR SINGKATAN
µg
: Mikrogram
µL
: Mikroliter
BHI
: Brain Heart Infusion
CFU
: Colony Forming Unit
E.coli
: Escherichia coli
DMSO
: Dimetil Sulfoksida
UV
: Ultraviolet
KIA
: Kligler Iron Agar
LIA
: Lysine Iron Agar
mg
: Miligram
MH
: Mueller Hinton
mL
: Mililiter
MIO
: Motility Indol Agar
x
INTISARI
Bacillus subtilis dan Escherichia coli merupakan bakteri yang sering
menjadi penyebab infeksi di Indonesia. Berdasarkan penelitian sebelumnya
ekstrak etanol daun pacar air memiliki aktivitas antibakteri terhadap bakteri
Staphylococcus aureus dan Bacillus cereus. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun pacar air (Impatiens
balsamina L.) terhadap Bacillus subtilis dan Escherichia coli dengan metode
difusi agar secara sumuran, serta mengidentifikasi golongan senyawa dalam
ekstrak etanol daun pacar air yang mempunyai aktivitas antibakteri.
Metode maserasi dengan etanol 70% dilakukan dengan merendam daun
pacar air kering selama 3 hari. Ekstrak etanol daun pacar air diuji aktivitas
antibakterinya terhadap Bacillus subtilis dan Escherichia coli menggunakan
metode sumuran. Identifikasi golongan senyawa Kromatografi Lapis Tipis dengan
fase gerak etil asetat:kloroform (7:3) dan fase diam GF254nm.. Bioautografi kontak
dilakukan untuk mengetahui golongan senyawa yang memiliki aktivitas
antibakteri.
Hasil uji aktivitas menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun pacar air
mempunyai aktivitas antibakteri dengan menghasilkan zona jernih disekitar
sumuran. Hasil identifikasi kandungan senyawa mengunakan kromatografi lapis
tipis menunjukkan adanya alkaloid, antron, antrakinon, kumarin, flavonoid dan
fenolik dalam ekstrak. Hasil uji bioautografi belum dapat mengungkap golongan
senyawa yang memiliki aktivitas antibakteri.
Kata kunci: Pacar air, Impatiens balsamina L., Escherichia coli, Bacillus subtilis,
Antibakteri.
xi