Pengaruh Penambahan Amonium Sulfat dan Sukrosa pada Media Air Kelapa Terhadap Produksi dan Karakteristik Fisik Selulosa Mikrobial Acetobacter xylinum

31

LAMPIRAN

1. Komposisi Media Hestrin Scrahmm (HS) Agar dalam 1 Liter Media

Glukosa

= 20 g

Yeast extract = 5 g
Pepton

=5g

Na2HPO4

= 2,7 g

MgSO4.7H2O = 0,5 g
Asam sitrat

= 1,15 g

Agar

= 20 g

Semua bahan dilarutkan ke dalam 1 liter akuades dan di autoklaf pada suhu 121°C
selama 15 menit.

32

2. Uji Statistik ANOVA
Tests of Between-Subjects Effects
Dependent Variable: Tebal
Source

Type III Sum of

df

Mean Square

F

Sig.

Squares
33,602a

15

2,240

5,668

,000

Intercept

2901,241

1

2901,241

7340,511

,000

Sukrosa

22,821

3

7,607

19,246

,000

Amonium_Sulfat

9,339

3

3,113

7,876

,000

Sukrosa * Amonium_Sulfat

1,443

9

,160

,406

,923

Error

12,648

32

,395

Total

2947,491

48

46,250

47

Corrected Model

Corrected Total

a. R Squared = ,727 (Adjusted R Squared = ,598)

Multiple Comparisons
Dependent Variable: Rendemen
(I) Sukrosa

(J) Sukrosa

Mean

Lower

Upper

Bound

Bound

*

,80895

,000

-6,1926

-1,6425

*

,80895

,000

-9,9491

-5,3989

*

,80895

,000

-10,1252

-5,5751

*

,80895

,000

1,6425

6,1926

*

,80895

,000

-6,0315

-1,4814

*

,80895

,000

-6,2076

-1,6575

*

,80895

,000

5,3989

9,9491

20%

*

3,7564

,80895

,000

1,4814

6,0315

60%

-,1762

,80895

1,000

-2,4512

2,0989

*

,80895

,000

5,5751

10,1252

20%

*

3,9326

,80895

,000

1,6575

6,2076

40%

,1762

,80895

1,000

-2,0989

2,4512

40%

0%
40%
60%

-3,9176
-7,6740
-7,8502

3,9176
-3,7564
-3,9326

Bonferroni
0%
40%

0%
60%

95% Confidence Interval

J)

60%

20%

Sig.

Difference (I-

20%
0%

Std. Error

7,6740

7,8502

Based on observed means.
The error term is Mean Square(Error) = 3,926.
*. The mean difference is significant at the 0,05 level.

33

3. Alur Kerja Penyiapan Starter A. xylinum (Kholifah, 2010)

Air kelapa 2 liter
Disaring dengan kain sampai bersih
Dimasukkan kedalam beaker glass
Ditambahkan amonium sulfat dan sukrosa masingmasing 6 g dan 40 g
Ditambahkan asama asetat glasial 6 ml
Dipanaskan hingga mendidih dengan kompor listrik
Dimasukkan ke dalam botol masing-masing 500 ml
Ditutup dan ditunggu hingga dingin
Ditambahkan starter induk A. xylinum sebanyak 20 %
dari volume media
Diinkubasi selama 3 hari pada suhu ambient
Starter
Dihitung jumlah A. xylinum dan konsorsium bakteri
dengan metode TPC
Hasil

34

4. Alur Kerja Produksi Selulosa Mikrobial (Kholifah, 2010)

Air kelapa
Disimpan selama 3 hari
Disaring dengan kain sampai bersih
Ditambahkan amonium sulfat dan sukrosa sesuai
perlakuan
Ditambahkan asama asetat glasial 2 ml
Dipanaskan hingga mendidih dengan kompor listrik
Dimasukkan ke dalam toples masing-masing perlakuan
sebanyak 270 ml
Ditutup dan ditunggu hingga dingin
Ditambahkan starter A. xylinum sebanyak 30 ml
Diinkubasi selama 3 hari pada suhu ambient
Selulosa Mikrobial

35

5. Alur Kerja Pengukuran Rendemen Selulosa Mikrobial (AOAC, 1979)

Selulosa Mikrobial

Diangkat selama 30 detik

Ditimbang dengan neraca analitik

Hasil
Dihitung berdasarkan rumus rendemen

Rendemen

36

6. Alur Kerja Pengukuran Ketebalan Selulosa Mikrobial

Selulosa Mikrobial

Diangkat selama 30 detik

Diukur ketebalan dengan alat digital caliper
pada dua sisi yang berbeda
Hasil

37

7. Alur Kerja Pengukuran Kandungan Air (SNI 01-2891-1992)

Selulosa Mikrobial

Ditimbang 1 g dan dimasukkan ke dalam botol timbang
Ditimbang dengan neraca analitik
Dikeringkan dengan oven pada suhu 105°C selama 3 jam
Didinginkan dengan desikator
Ditimbang dengan neraca analitik
Diulangi prosedur yang sama sampai berat konstan
Hasil
Dihitung dengan rumus kandungan air
Kandungan air

38

8. Alur Pengukuran Daya Tarik Selulosa Mikrobial

Selulosa Mikrobial

Dicetak menggunakan dumbbell cutter

Ditarik dengan alat Gotech AI-7000M

Hasil

39

9. Alur Kerja Perhitungan A. xylinum

Media Sisa

Diambil sebanyak 1 ml
Dimasukkan ke dalam 9 ml akuades steril
Dilakukan pengenceran sampai 10-4
Diambil sebanyak 0,1 ml
Disebar pada media HS dengan hockey stick
Diinkubasi selama 48 jam pada suhu ambient
Dihitung jumlah koloni
Hasil

40

10.

Alur Kerja Perhitungan Konsorsium Bakteri

Media Sisa

Diambil sebanyak 1 ml
Dimasukkan ke dalam 9 ml akuades steril
Dilakukan pengenceran sampai 10-4
Diambil sebanyak 0,1 ml
Disebar pada media PCA dengan hockey stick
Diinkubasi selama 48 jam pada suhu ambient
Dihitung jumlah koloni
Hasil

41

11. Foto Kerja

Starter A. xylinum

TPC Konsorsium Bakteri

Media air kelapa
dengan perlakuan

TPC A. xylinum

Selulosa Mikrobial

Selulosa Mikrobial
Steril

Pembuatan media

Penambahan starter

Pengukuran ketebalan

Pencetakan dengan
dumble cutter

Selulosa mikrobial
setelah dicetak

Alat uji tarik Gotech
AI-7000M