VALIDASI METODE KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS- DENSITOMETRI PADA PENETAPAN KADAR IBUPROFEN DAN PARASETAMOL DALAM TABLET MERK NEO-RHEUMACYL

  

VALIDASI METODE KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS- DENSITOMETRI

PADA PENETAPAN KADAR IBUPROFEN DAN PARASETAMOL

® DALAM TABLET MERK NEO-RHEUMACYL

  

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)

  

Program Studi Farmasi

Diajukan oleh:

Sandra Ruby

  

NIM: 088114009

FAKULTAS FARMASI

  

VALIDASI METODE KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS- DENSITOMETRI

PADA PENETAPAN KADAR IBUPROFEN DAN PARASETAMOL

DALAM TABLET MEREK NEO-RHEUMACYL

  ®

SKRIPSI

  

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat

Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Farmasi

  

Diajukan oleh:

Sandra Ruby

NIM: 088114009

FAKULTAS FARMASI

  

Persetujuan Pembimbing

  

VALIDASI METODE KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS- DENSITOMETRI

PADA PENETAPAN KADAR IBUPROFEN DAN PARASETAMOL

®

  

DALAM TABLET MEREK NEO-RHEUMACYL

Skripsi yang diajukan oleh:

Sandra Ruby

  

NIM: 088114009

Telah disetujui oleh

Pembimbing Christine Patramurti, S.Si.,Apt.,M.Si.

  Pengesahan Skripsi Berjudul

HALAMAN PERSEMBAHAN

  Kupersembahkan karya ini untuk Kedua orangtua ku yang menyayangiku, sebagai ungkapan rasa hormat dan baktiku Kakakku yang selalu mendengar ceritaku dan menasehatiku dan Almamaterku.

  APA SAJA YANG KAMU MINTA DAN DOAKAN, PERCAYALAH BAHWA KAMU TELAH MENERIMANYA, MAKA HAL ITU AKAN DIBERIKAN KEPADAMU

  (MARKUS 11:24)

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA

  Saya menyatakan dengan sesungguhnya bahwa skripsi yang saya tulis ini

tidak memuat karya atau baian karya orang lain, kecuali yang telah disebutkan

dalam kutipan dan daftar pustaka, sebagaimana layakna karya ilmiah.

  Apabila di kemudian hari ditemukan indikasi plagiarisme dalam naskah

ini, maka saya bersedia menanggung segala sanksi sesuai peraturan perundang-

undangan yang berlaku.

  Yogyakarta, 23 Agustus 2011 Penulis Sandra Ruby

  

LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ILMIAH

UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS

  Yang bertanda tangan di bawah ini, saya mahasiswa Universitas Sanata Dharma: Nama : Sandra Ruby Nomor Mahasiswa : 088114009

  Demi perkembangan ilmu pengetahuan, saya memberikan kepada Perpustakaan Universitas Sanata Dharma karya ilmiah saya yang berjudul:

  

VALIDASI METODE KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS- DENSITOMETRI

PADA PENETAPAN KADAR IBUPROFEN DAN PARASETAMOL DALAM

®

  TABLET MEREK NEO-RHEUMACYL

  beserta perangkat yang diperlukan (bila ada). Dengan demikian saya memberikan kepada Perpustakaan Universitas Sanata Dharma hak untuk menyimpan, mengalihkan dalam bentuk media lain, mengelolanya dalam bentuk pangkalan data, mendistribusikan secara terbatas, dan mempublikasikannya di internet atau media lain untuk kepentingan akademis tanpa perlu meminta ijin dari saya ataupun memberi royalti kepada saya selama tetap mencantumkan nama saya sebagai penulis. Demikian pernyataan ini yang saya buat dengan sebenarnya. Dibuat di Yogyakarta Pada tanggal: 23 Agustus 2011 Yang menyatakan Sandra Ruby

  

PRAKATA

Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan atas berkat, rahmat, dan

penyertaannya sehingga skripsi yang berjudul Validasi Metode Kromatografi

  

Lapis Tipis- Densitometri Pada Penetapan Kadar Ibuprofen Dan Parasetamol

®

  

Dalam Tablet Merek Neo-Rheumacyl yang disusun untuk memenuhi syarat

mencapai gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Sanata Dharma Yogyakarta.

  Penyusunan skripsi ini telah didukung oleh banyak pihak. Pada

kesempatan ini penulis ingin mengucapkan terimakasih yang sebesar-besarnya

kepada:

1. Ipang Djunarko,Apt.,M.Sc selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  2. Christine Patramurti, M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing atas segala perhatian, dukungan, nasihat, kritik, saran, canda tawa, dan semangat yang terus memotivasi penulis dari proses kerja awal hingga proses akhir penyusunan skripsi ini.

  3. Jeffry Julianus, M.Si selaku dosen penguji atas saran dan kritik yang diberikan.

  4. Dra. M. M. Yetty Tjandrawati, M.Si selaku dosen penguji atas saran dan kritik yang diberikan.

  5. PT. Konimex yang telah bersedia memberikan senyawa standar yang berguna dalam penyusunan skripsi.

  6. Mas Bimo selaku laboran Kimia Analisis Instrumen yang telah banyak membantu, menyediakan waktu, canda tawa selama penulis melakukan penelitian.

  7. Mas Otok, Mas Parlan, Mas Kunto, Pak Timbul yang telah membantu penulis selama penelitian.

  8. Teman seperjuangan Susi dan Nona atas kebersamaan, bantuan, saran, kritik, dan canda tawa selama perkuliahan dan penelitian, sehingga penelitian ini dapat terselesaikan.

  9. Novi, Felicia, Cure, Dina, Sasa, Lele, Wiwi, There, Sari, Ayesa, Amel, Citra atas dukungan dan kebersamaannya selama penelitian di laboratorium.

  10. The finger atas kebersamaanya selama ini.

  11. Hans Gani atas dukungan, doa, bantuan, dan semangat kepada penulis.

  12. Teman-teman FST 2008 atas kebersamaanya, saran, kritik, dan canda tawanya.

  13. Semua orang yang telah membantu penulis yang tidak dapat disebutkan satu per satu, terimakasih atas segala bentuk perhatian dan bantuan yang diberikan.

  Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih memiliki banyak kekurangan. Oleh karena itu, penulis mengharapkan kritik dan saran yang berguna untuk membantu penulis memperbaiki skripsi ini. Akhir kata, semoga penelitian ini memberikan manfaat untuk perkembangan ilmu pengetahuan.

  Yogyakarta 23 Agustus 2011

  

DAFTAR ISI

  Halaman HALAMAN JUDUL ................................................................................................ i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ..................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ iii HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA .................................................................. v PRAKATA ............................................................................................................ vii DAFTAR ISI .......................................................................................................... ix DAFTAR TABEL ................................................................................................ xiii DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xvi

  INTISARI ........................................................................................................... xviii ABSTRACT ......................................................................................................... xix

  BAB I. PENGANTAR ............................................................................................. 1 A. Latar Belakang .................................................................................................... 1

  1. Permasalahan .................................................................................................. 3

  2. Keaslian penelitian ......................................................................................... 3

  3. Manfaat penelitian.. ........................................................................................ 4

  B. Tujuan Penelitian ................................................................................................. 5

  A. Ibuprofen ............................................................................................................. 6

  B. Parasetamol ......................................................................................................... 7

  C. Kromatografi Lapis Tipis .................................................................................... 8

  1. Tinjauan Umum .............................................................................................. 7

  2. Fase diam KLT ............................................................................................. 10

  3. Fase gerak KLT ............................................................................................ 11

  D. KLT Densitometri ............................................................................................. 12

  E. Validasi Metode Analisis .................................................................................. 14

  1. Ketepatan (accuracy) .................................................................................... 15

  2. Ketelitian (precision) .................................................................................... 17

  3. Linearitas ...................................................................................................... 17

  4. Selektivitas (Spesifitas) ................................................................................ 18

  5. Rentang ......................................................................................................... 18

  F. Landasan Teori................................................................................................... 18

  G. Hipotesis ........................................................................................................... 19

  BAB III. METODE PENELITIAN........................................................................ 20 A. Jenis dan Rancangan Penelitian ........................................................................ 20 B. Variabel Penelitian ............................................................................................ 20 C. Definisi Operasional .......................................................................................... 21

  E. Alat-alat Penelitian ............................................................................................ 21

  F. Tata Cara Penelitian .......................................................................................... 22

  1. Pembuatan Fase Gerak ................................................................................. 22

  2. Pembuatan larutan baku ibuprofen dan parasetamol .................................... 22

  3. Penetapan panjang gelombang pengamatan ................................................. 23

  4. Pembuatan kurva baku dan pengamatan nilai Retardation Factor .............. 24

  5. Penentuan recovery dan Coefficient Variation (CV) baku tunggal .............. 25

  6. Penentuan recovery dan CV baku campuran ............................................... 25

  7. Penentuan recovery dan CV baku dalam matrik sampel .............................. 26

  G. Analisis Hasil .................................................................................................... 27

  1. Selektivitas ................................................................................................... 27

  2. Linearitas ...................................................................................................... 27

  3. Akurasi ......................................................................................................... 27

  4. Presisi ............................................................................................................ 27

  5. Rentang ......................................................................................................... 27

  BAB IV. PEMBAHASAN ..................................................................................... 28 A. Pembuatan Fase Gerak ...................................................................................... 28 B. Pembuatan Larutan Baku .................................................................................. 28 C. Penetapan Panjang Gelombang Pengamatan .................................................... 29

  E. Penetapan Kurva Baku ...................................................................................... 37

  F. Validasi Metode Analisis .................................................................................. 40

  1. Selektivitas ................................................................................................... 40

  2. Linearitas ...................................................................................................... 41

  3. Akurasi ......................................................................................................... 41

  4. Presisi ............................................................................................................ 43

  5. Rentang ......................................................................................................... 44

  G. Penentuan Akurasi Presisi Baku dalam Sampel ................................................ 46

  BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ................................................................ 49 A. Kesimpulan ........................................................................................................ 50 B. Saran ................................................................................................................. 50 DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 51 LAMPIRAN .......................................................................................................... 51 BIOGRAFI PENULIS ........................................................................................... 86

  

DAFTAR TABEL

  Halaman Tabel I Nilai indeks polaritas pelarut ........................................................ 11 Tabel II Kategori metode pengujian ........................................................... 15 Tabel III Parameter analisis yang dibutuhkan dalam Validasi metode analisis

  ........................................................................................................ 15 Tabel IV Kriteria rentang recovery yang dapat diterima............................... 16 Tabel V Kriteria CV yang diterima ............................................................. 17 Tabel VI Campuran ibuprofen dan parasetamol .......................................... 24 Tabel VII Perbandingan nilai Rf baku dan sampel, serta nilai resolusi ......... 34 Tabel VIII Data Replikasi kurva baku ibuprofen ............................................ 39 Tabel IX Data Replikasi kurva baku parasetamol ........................................ 39 Tabel X Data % recovery parasetamol tunggal............................................ 43 Tabel XI Data % recovery ibuprofen tunggal .............................................. 43 Tabel XII Data % recovery campuran baku .................................................. 43 Tabel XIII Data %CV larutan parasetamol tunggal ........................................ 44 Tabel XIV Data %CV larutan ibuprofen tunggal ............................................ 45 Tabel XV Data Coefficient of Variation (CV) campuran baku ..................... 45 Tabel XVI Data % recovery dan CV baku parasetamol dan ibuprofen dalam matrik sampel ................................................................................. 47

  

DAFTAR GAMBAR

  Halaman Gambar 1 Rumus struktur ibuprofen ................................................................ 1 Gambar 2 Rumus struktur parasetamol ............................................................. 2 Gambar 3 Peralatan KLT Densitometer dan autosampler ............................... 3 Gambar 4 Gugus kromofor dan auksokrom pada parasetamol ....................... 30 Gambar 5 Gugus kromofor ibuprofen ............................................................ 31 Gambar 6 Spektra baku parasetamol konsentrasi 700 ppm, 980 ppm, 1260 ppm dan ibuprofen konsentrasi 400 ppm, 560 ppm, 720 ppm (λ maks=222 nm) ............................................................................... 31

  Gambar 7 Kromatogram baku ibuprofen 560 ppm ......................................... 33 Gambar 8 Kromatogram baku parasetamol 980 ppm .................................... 33 Gambar 9 Kromatogram sampel replikasi 1 ................................................... 33 Gambar 10 Bagian non polar ibuprofen dan parasetamol ................................ 34 Gambar 11 Interaksi parasetamol dengan fase diam ....................................... 35 Gambar 12 Interaksi ibuprofen dengan fase diam ............................................ 35 Gambar 13 Interaksi ibuprofen dengan fase gerak .......................................... 36 Gambar 14 Interaksi parasetamol dengan fase gerak ....................................... 36 Gambar 15. Kurva hubungan konsentrasi ibuprofen vs AUC .......................... 40 Gambar 16. Kurva hubungan konsenrasi parasetamol vs AUC ........................ 40

  Gambar 19 Kromatogram sampel tanpa adisi .................................................. 46 Gambar 20. Kromatogram sampel dengan penambahan adisi ........................... 47

  

DAFTAR LAMPIRAN

  Halaman Lampiran 1. Sertifikat analisis parasetamol ....................................................... 54 Lampiran 2. Sertifikat analisis ibuprofen .......................................................... 55 Lampiran 3. Data penimbangan baku ................................................................. 56 Lampiran 4. Spektra panjang gelombang parasetamol dan ibuprofen dengan perbandingan 7:4 ............................................................................ 57 Lampiran 5. Contoh perhitungan kadar parasetamol . ........................................ 58 Lampiran 6. Kromatogram seri larutan baku parasetamol replikasi III.............. 58 Lampiran 7. Data penentuan kurva baku parasetamol ...................................... 60 Lampiran 8. Persamaan kurva baku dan gambar kurva baku parasetamol ....... 60 Lampiran 9. Contoh perhitungan kadar ibuprofen ............................................ 61 Lampiran 10. Kromatogram seri baku ibuprofen replikasi III ............................. 61 Lampiran 11. Data penentuan kurva baku ibuprofen . ......................................... 63 Lampiran 12. Persamaan kurva baku dan gambar kurva baku ibuprofen ............ 64 Lampiran 13. Kromatogram validasi metode (parasetamol tunggal) .................. 64 Lampiran 14. Kromatogram Validasi metode (Ibuprofen tunggal) ..................... 67 Lampiran 15. Perolehan nilai AUC untuk validasi metode dan contoh perhitungan konsentrasi terukur baku parasetamol dan ibuprofen70

  Lampiran 17. Kromatogram validasi metode (campuran) ................................... 72 Lampiran 18. Nilai AUC validasi metode (campuran) ...................................... 78 Lampiran 19. Kromatogram sampel dan sampel adisi ....................................... 79 Lampiran 20. Nilai AUC sampel dan sampel yang diadisi baku ......................... 83 Lampiran 21. Contoh perhitungan recovery baku parasetamol dan ibuprofen dalam sampel ................................................................................. 83 Lampiran 22. Contoh perhitungan resolusi . ........................................................ 85

  

INTISARI

Ibuprofen dan parasetamol merupakan senyawa yang sering digunakan

sebagai obat nyeri sendi. Keduanya memiliki kelarutan yang baik dalam metanol

serta mempunyai serapan maksimum pada daerah UV yang berdekatan yaitu 221

nm dan 244 nm. Berdasarkan sifat fisika dan kimia senyawa, metode analisis yang

cocok adalah kromatografi lapis tipis-densitometri. Untuk menjaminan

karakteristik kinerja metode maka perlu dilakukan validasi

  Penelitian yang dilakukan bersifat non eksperimental deskriptif.

  

Ibuprofen dan parasetamol dipisahkan dengan menggunakan fase diam silika gel

  

60 F 254 , fase gerak heksan:etil asetat:asam asetat glasial dengan perbandingan

(4,4:5,6:0,55 ), dengan jarak pengembangan 10 cm, dan λ 222 nm, kemudian dianalisis secara kuantitatif dengan densitometer.

  Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan metode ini memenuhi

parameter selektivitas ,linearitas, akurasi, presisi, dan range sehingga metode ini

dapat digunakan untuk penetapan kadar parasetamol dan ibuprofen. Linearitas

dipenuhi dengan nilai koefisien korelasi 0,9980 pada konsentrasi 700-1260 ppm

untuk parasetamol dan 0,9987 pada konsentrasi 400-720 ppm untuk ibuprofen.

Metode ini memiliki akurasi yang baik pada konsentrasi parasetamol 980-1260

ppm, konsentrasi ibuprofen 560-720 ppm dengan nilai % recovery berturut-turut

96,28-105,73%, 98,08-104,68% 90,88-106,49%, 98,08%-102,26% dan memenuhi

presisi yang baik pada konsentrasi parasetamol 700-1260 ppm, ibuprofen 400-720

ppm dengan nilai CV < 16% sedangkan hasil resolusi yaitu 5,75 sehingga telah

memenuhi parameter selektivitas.

  

Kata kunci :Ibuprofen, Parasetamol, Validasi metode, KLT densitometri, Neo-

rheumacyl

  

ABSTRACT

  Ibuprofen and paracetamol are active compound which commonly use as over the counter drug for arthritis. Both have good solubility in ethanol and methanol and has a maximum absorption in the UV region adjacent to the 221 nm and 244 nm. Based on the physical and chemical properties of the compounds, analytical methods that suitable to analyze the mixture compounds is thin layer chromatography-densitometry. Performance characteristics of this method used is assured if the application meets the requirements of analytic, by doing validation.

  This research is non-experimental descriptive. Ibuprofen and paracetamol were separated by TLC method using silica gel 60 F 254 as the stationary phase, hexane:ethyl acetate:glacial acetic acid (4.4:5.6:0,55) as the mobile phase, with a migration distance 10 cm, and using UV detector at wavelength 222 nm, then analyzed quantitatively with a densitometer.

  Based on research done this method meet the parameters of selectivity, linearity, accuracy, precision, and range so that this method can be used for the assay of paracetamol and ibuprofen. The result showed that the method has a good

  

linearity with coefficient corelation (r) of 0,9980 at paracetamol concentration of

700 to 1260 ppm, and r=0,9987 at ibuprofen concentration of 400-720 ppm.This

method has a good acuracy at paracetamol concentration 980-1260 ppm,

ibuprofen 560-720 ppm with % recovery value 96,28-105,73%, 98,08-104,68%

90,88-106,49%, 98,08%-102,26% and has a good precision at paracetamol

concentration 700-1260 ppm,ibuprofen 400-720 ppm with %CV <16%, besides

this method has a good selectivity with resolution value 5,75.

  Keyword : Ibuprofen, Parasetamol, Validation method, KLT densitometry, Neo-

  rheumacyl

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Masalah Rematik merupakan salah satu penyakit yang sering diderita masyarakat Indonesia dengan keluhan nyeri, kaku, dan kelemahan sendi. Istilah rematik

  

sendiri berasal dari yunani, rheumatismos yang berarti mucus, suatu cairan yang

dianggap jahat mengalir dari otak ke sendi dan struktur lain tubuh sehingga

menimbulkan rasa nyeri atau dengan kata lain, setiap kondisi yang disertai kondisi

nyeri dan kaku pada sistem muskuloskeletal disebut reumatik termasuk penyakit

jaringan ikat (Mutschler , 1991).

  Para penderita rematik umumnya mengalami gejala-gejala pegal dan

radang pada sendi sehingga menimbulkan kemerahan, bengkak, nyeri, terasa

panas di sekitar sendi dan sulit digerakkan sehingga mengganggu aktivitas sehari-

hari penderita. Untuk mengurangi rasa nyeri biasanya diberikan obat yang

merupakan kombinasi beberapa zat aktif.

  Salah satu obat rematik yang banyak beredar di masyarakat adalah obat ®

merk Neo-rheumacyl dengan kombinasi ibuprofen 200 mg dan parasetamol 350

mg. Kombinasi tersebut dapat meningkatkan efek terapetik obat menjadi lebih

baik. Menurut Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan (1995), syarat

yang ditetapkan pada tablet parasetamol dan ibuprofen mengandung parasetamol

atau ibuprofen tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110% dari jumlah

  

yang tertera pada etiket. Oleh karena itu perlu dilakukan analisis secara tepat

terhadap obat yang beredar, untuk tetap menjamin kualitas dan kuantitas dari obat

yang banyak digunakan oleh pasien ini.

  Ibuprofen dan parasetamol memiliki kelarutan yang hampir sama,

keduanya larut dalam etanol dan metanol serta mempunyai serapan maksimum

pada daerah UV yang berdekatan yaitu 221 nm dan 244 nm (Direktorat Jenderal

Pengawas Obat dan Makanan, 1995). Berdasarkan sifat fisika dan kimia senyawa,

dan jumlah komponen zat aktif yang lebih dari satu maka analisis yang simultan

untuk menetapkan kadar sediaan yang mengandung dua komponen campuran

dapat dilakukan dengan metode Kromatografi lapis tipis - densitometri.

  Metode analisis KLT- densitometri ini dapat digunakan untuk analisis

preparatif, kualitatif dan kuantitatif secara bersamaan. Secara preparatif metode

ini akan memisahkan senyawa campuran. Sedangkan secara kualitatif dapat

menentukan nilai R f (retardation factor), sehingga nilai tersebut dapat digunakan

sebagai pembanding nilai bercak pada baku dan bercak sampel. Selain itu, secara

kuantitatif metode ini adalah metode yang paling sederhana yang dapat

menentukan kadar masing-masing komponen campuran, nilai resolusi, nilai CV

dan recovery yang menggambarkan akurasi presisi metode. Keuntungan lain dari

metode KLT ini yaitu sederhana, mudah dilakukan, sensitif, kecepatan pemisahan

tinggi, bisa dilakukan analisis kuantitatif sekaligus dengan kualitatif dan

memerlukan jumlah cuplikan yang sangat sedikit (Khopkar, 1990).

  Pada penelitian ini dilakukan serangkaian tahap analisis yaitu optimasi,

  

fase normal merupakan tahap lanjutan dalam rangkaian penelitian penetapan

®

kadar parasetamol dan ibuprofen dalam tablet Neo-rheumacyl . Berdasarkan hasil

optimasi diperoleh kondisi optimal menggunakan fase diam silika gel 60 F 254 dan

fase gerak merupakan campuran heksan:etil asetat:asam asetat glasial dengan

perbandingan (4,4:5,6:0,55) dengan volume totolan 3,0µl, dan jarak rambat 10 cm

yang selanjutnya di gunakan pada penelitian ini.

  Jenis karakteristik kinerja metode yang perlu dipertimbangkan dalam

validasi meliputi selektivitas, linearitas, akurasi, presisi, dan range (United States

Pharmacopeial Convention, 2007). Parameter selektivitas ditunjukkan dengan

nilai resolusi (Rs), linearitas yang baik dengan nilai koefisien korelasi (r), akurasi

dan presisi yang ditentukan dari nilai recovery serta koefisien variasi (Rohman,

2007).

  1. Permasalahan Berdasarkan latar belakang di atas, maka permasalahan yang muncul

adalah apakah metode penetapan kadar ibuprofen dan parasetamol dalam sediaan

  ®

tablet merek Neo-rheumacyl secara KLT menggunakan fase diam silika gel 60

F 254 dan fase gerak heksan:etil asetat: asam asetat glasial (4,4:5,6:0,55)

memenuhi parameter validasi yang baik, meliputi selektivitas, linearitas, akurasi,

presisi dan range?

  2. Keaslian penelitian Beberapa penelitian analisis ibuprofen dan parasetamol yang telah

dilakukan, yaitu Determination of Ibuprofen and Paracetamol in Binary Mixture

  

(2008), Validasi Metode Penetapan Kadar Campuran Parasetamol dan Ibuprofen

dalam tablet merk “X” secara Spektrofotometri UV dengan aplikasi metode

Panjang Gelombang Berganda oleh Andrianto (2009) dan Development And

Validation of Spectrophotometric Methods for Simultaneous Estimation of

Ibuprofen and Paracetamol in Soft Gelatin Capsule by Simultaneous Equation

Method oleh Gondalia, Mashru dan Savaliya (2010). Ketiganya meneliti

ibuprofen dan parasetamol secara simultan dengan metode spektrofotometri yang

berbeda.

  Penelitian lainnya adalah RP-HPLC Method for Simultaneous Estimation

of Paracetamol dan Ibuprofen in Tablets menggunakan fase gerak asetonitril dan

dapar fosfat dengan perbandingan (60:40 v/v, pH 7.0), pada kecepatan alir 0,8

ml/menit dengan detektor UV pada 260 nm penelitian dilakukan oleh Battu dan

Reddy (2009). Ada pula penelitian mengenai Validasi Metode Penetapan Kadar

Campuran Parasetamol dan Ibuprofen dengan Perbandingan 7:4 menggunakan

metode Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Fase Terbalik oleh Micell (2010).

Berdasarkan penelusuran yang telah dilakukan, penelitian ini belum pernah

dilakukan.

3. Manfaat penelitian

  a. Manfaat metodologis. Dari penelitian ini diharapkan dapat

memberikan sumbangan ilmiah bagi perkembangan ilmu pengetahuan mengenai

validasi metode kromatografi lapis tipis- densitometri untuk penetapan kadar

  ® ibuprofen dan parasetamol dalam tablet merk Neo-rheumacyl . b. Manfaat praktis. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan

informasi mengenai selektivitas, linearitas, akurasi, presisi, dan range metode

® penetapan kadar ibuprofen dan parasetamol dalam tablet Neo-rheumacyl .

B. Tujuan Penelitian

  Berdasarkan latar belakang permasalahan maka penelitian ini bertujuan

untuk membuktikan bahwa penetapan kadar ibuprofen dan parasetamol dengan

metode KLT-Densitometri memenuhi parameter-parameter validasi meliputi

selektivitas, linearitas, akurasi, presisi, dan range sehingga dapat digunakan untuk

  ® penetapan kadar ibuprofen dan parasetamol dalam tablet Neo-rheumacyl .

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Ibuprofen Ibuprofen merupakan obat anti inflamasi non steroid (NSAID)

  

(Mutschler , 1991), yang dapat menekan rasa nyeri dan radang, seperti nyeri

tulang dan sendi, pegal linu, dan terkilir (Direktorat Bina Farmasi Komunitas dan

Klinik Ditjen Bina Kefarmasian dan Alat Kesehatan Departemen Kesehatan,

2006). Dianjurkan untuk menggunakan dosis terendah untuk menghilangkan rasa

sakit, kembung atau demam (Druglib, 2011). _{HO CH 3 CH 3} O _{CH 3} Gambar 1. Rumus struktur Ibuprofen (Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan,

  

1995)

Ibuprofen mengandung tidak kurang dari 97,0% dan tidak lebih dari

103,0% C H O , dihitung terhadap zat anhidrat. Pemeriannya berupa serbuk

  13

  18

  2

hablur, putih hingga hampir putih, berbau khas lemah. Ibuprofen praktis tidak

larut dalam air, mudah larut dalam etanol, metanol, aseton, dan dalam kloroform,

sukar larut dalam etil asetat. Tablet Ibuprofen mengandung Ibuprofen tidak

kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada

etiket. Ibuprofen memiliki serapan maksimum pada panjang gelombang lebih

kurang 221 nm (Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan Makanan, 1995).

  

Ibuprofen memiliki pKa 4,4 (Druglib, 2011). Serapan jenis Ibuprofen dalam

1% metanol yaitu =14,5 (Dibbern, Muller, dan Wirbitzki, 2002).

1 B.

   Parasetamol Parasetamol merupakan obat analgesik antipiretik bukan termasuk

  golongan obat anti inflamasi non steroid (non-NSAID) yang memiliki efek

  

samping yang sangat kecil pada saluran pencernaan, tetapi konsumsi jangka

panjang dapat menyebabkan resiko kerusakan hati (Beers et al., 2003). Dosis

normal atau dosis yang dianjurkan adalah 650 mg/dosis tunggal dan di atas 3250

mg untuk dewasa (Druglib,2011). Parasetamol atau asetaminofen memiliki berat

molekul 151,6. Syarat kadar yang ditetapkan untuk tablet parasetamol tidak

kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% (Direktorat Jenderal Pengawas

Obat dan Makanan, 1995). _{OH N H O}

  H C ₃ Gambar 2. Rumus struktur Parasetamol (Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan

Makanan, 1995)

  Parasetamol berbentuk serbuk putih, tak berbau, rasa sedikit pahit, dapat

larut dalam air mendidih, dalam NaOH 1N, dan dalam etanol. Parasetamol

mengandung tidak kurang dari 98,0% dan tidak lebih dari 101,0% C

  8 H

  9 NO 2,

dihitung terhadap zat anhidrat, selain itu parasetamol memiliki pKa 9,5 dan

panjang gelombang maksimum 244 nm (Direktorat Jenderal Pengawas Obat dan

  

Makanan, 1995). Serapan jenis parasetamol dalam metanol pada 247 nm dengan

1% = 850 (Dibbern et al., 2002).

1 Penetapan kadar parasetamol dapat dilakukan dengan menggunakan

  

metode spektrofotometri. Metode nitrimetri yang spesifik terhadap senyawa

turunan amin aromatis primer sehingga dapat ditetapkan kadarnya (Direktorat

Jenderal Pengawas Obat dan Makanan, 1995).

C. Kromatografi Lapis Tipis 1. Tinjauan Umum

  Kromatografi merupakan prosedur pemisahan zat terlarut oleh suatu

proses migrasi diferensial oleh sistem yang terdiri dari dua fase atau lebih, salah

satu diantaranya bergerak secara kontinyu dalam arah tertentu dan didalamnya

zat-zat itu menunjukkan perbedaan mobilitas karena adanya perbedan adsorpsi,

partisi, kelarutan, tekanan uap, ukuran molekul atau kerapatan muatan ion.

Dengan pemisahan tersebut maka masing-masing zat dapat diidentifikasi atau

ditetapkan kadarnya dengan metode analitik (Direktorat Jenderal Pengawas Obat

dan Makanan, 1995).

  Kromatografi Lapis Tipis memisahkan komponen-komponen campuran

atas dasar perbedaan adsorpsi atau partisi oleh fase diam di bawah gerakan pelarut

pengembang (Mulja dan Suharman, 1995). Dengan demikian masing-masing zat

dapat diidentifikasi atau ditetapkan dengan metode analitik (Direktorat Jenderal

Pengawas Obat dan Makanan, 1995).

  KLT merupakan kromatografi planar. KLT dikembangkan oleh Izmailoff

dan Schraiber pada tahun 1938. Pada KLT, fase diamnya berupa lapisan yang

seragam (uniform) pada permukaan bidang datar yang didukung oleh lempeng

kaca, pelat aluminium, atau pelat plastik. Oleh karena itu dapat dikatakan bahwa

KLT merupakan bentuk terbuka dari kromatografi kolom (Rohman, 2009).

  Pemilihan pelarut yang digunakan untuk senyawa yang akan dianalisis

dengan metode KLT, harus dapat melarutkan analit dengan sempurna, mudah

menguap, viskositas rendah, serta dapat membasahi lapisan penyerap (Sherma and

Fried, 1996). Selain itu kepolaran fase gerak yang digunakan untuk mengelusi

harus disesuaikan berdasarkan kemampuannya untuk bersaing dengan permukaan

fase diam untuk berinteraksi dengan molekul yang terlarut (Gritter, 1985).

  

Semakin polar solut maka semakin tertahan kuat ke dalam adsorben polar. Solut-

solut non polar tidak mempunyai afinitas atau mempunyai sedikit afinitas yang

kecil terhadap adsorben polar, sementara solut-solut yang terpolarisasi memiliki

afinitas yang kecil terhadap adsorben polar disebabkan adanya interaksi dipol atau

interaksi-interaksi yang diinduksi oleh dipol. Solut-solut polar, terutama yang

mampu membentuk ikatan hidrogen, akan terikat kuat pada adsorben karenanya

butuh fase gerak yang relatif polar untuk mengelusinya. Berikut adalah urutan

polaritas solut-solut organik: alkana < alkena < aromatis < eter < ester < keton <

dan aldehid < tiol < amin dan amida < alkohol < fenol < asam-asam organik

(Gandjar dan Rohman, 2007).

  Menurut Mulja dan Suharman (1995), pada kromatogram KLT dapat

  Jarak yang ditempuh zat terlarut Rf = ................................... (1)

  Jarak yang ditempuh fase gerak Retardation factor (R f ) merupakan parameter karakteristik KLT. Harga

  

R didefinisikan sebagai perbandingan antara jarak senyawa dari titik awal dan

f

jarak tepi muka pelarut dari titik awal (Roth, 1994). Angka R f berjarak antara 0,00

sampai 1,00 dan hanya dapat ditemukan dua desimal (Stahl, 1985).

  Harga R f untuk senyawa murni dapat dibandingkan dengan harga R f

standar. Pengukuran yang sering dipakai lainnya menggunakan pengertian R x atau

R yang didefinisikan sebagai perbandingan antara jarak yang digerakkan oleh

std

senyawa yang tidak diketahui dengan jarak yang digerakan oleh senyawa standar

yang diketahui (Hardjono, 1983).

2. Fase diam KLT

  Fase diam yang sering digunakan dalam KLT adalah penjerap

(adsorben). Silika gel merupakan penjerap yang paling banyak digunakan dalam

KLT. Bahan pengikat yang sering ditambahkan untuk memperkuat melekatnya

pada lempeng adalah gipsum, dan silika gel atau dikenal dengan istilah “silika gel

G”. Sedangkan istilah “silika gel GF“ adalah identifikasi dipermudah dengan

penambahan zat yang berfluorosensi. Jenis-jenis bahan penjerap lainya adalah

alumina, selulosa, sefadex, poliamida, kieselguhr, dan amilum (Harborne, 1973).

  Fase diam normal yang tidak diaktifkan seluruh permukaanya dilapisi air.

Dengan kata lain, fase diam tersebut diduduki molekul yang sangat polar dan

membentuk ikatan hidrogen. Sebagian molekul air harus dihilangkan dengan

o pemanasan atau pengaktifkan, biasanya pada suhu 100-110

  C, agar diperoleh fase

3. Fase gerak KLT

  Fase gerak adalah medium angkut yang terdiri atas satu atau beberapa

pelarut. Fase gerak bergerak di dalam fase diam yaitu lapisan berpori karena ada

gaya kapiler. Fase gerak yang digunakan bertingkat mutu analitik dan bila

diperlukan sistem pelarut multikomponen, maka harus berupa suatu campuran

sederhana mungkin terdiri atas maksimum tiga komponen (Stahl,1985).

  Berikut adalah beberapa petunjuk dalam memilih dan mengoptimasi fase gerak:

a. Fase gerak harus mempunyai kemurnian yang sangat tinggi karena KLT

merupakan teknik yang sensitif. f

  

b. Daya elusi fase gerak harus diatur sedemikian rupa sehingga harga R solut

terletak antara 0,2-0,8 untuk memaksimalkan pemisahan (Rohman, 2009).

  Berikut ini merupakan tabel beberapa nilai indeks polaritas dari beberapa larutan yang sering digunakan:

Tabel I. Nilai indeks polaritas pelarut (Snyder et al., 1997)

Pelarut Indek Nilai eluotropik Lamda

  Polaritas Alumina C Silika maksimum ₁₈ (nm)

• Heksan 0,1 0,01 0,00 195
• Sikloheksan 0,2 0,04 -
• Toluen 2,4 0,29 0,22 284

  Tetrahidrofuran 4,0 0,45 3,7 0,53 212 Etil asetat - 4,4 0,58 0,48 256 Aseton 5,1 0,56 8,8 0,53 330 Metanol 5,1 0,95 1,0 0,7 205 Asetonitril 5,8 0,65 3,1 0,52 190

• Dimetilformamid 6,4 7,6 268 -
• Dimetilsulfoksida 7,2 0,62 268

  Air

• 10,2

  190

  

polaritas yang dimiliki pelarut maka pelarut semakin polar (Snyder, Kirkland, dan

Glajch, 1997).

  D. KLT Densitometri

Gambar 3. Peralatan KLT Densitometer dan Autosampler (Wall , 2005).