Uji analgetik ekstrak etanol 70% daun kepel [Stelechocarpus burahol [BI] Hook.f.& Th.] pada mencit putih jantan swiss dengan metode rangsang kimia - USD Repository

  

UJI ANALGETIK EKSTRAK ETANOL 70% DAUN KEPEL (Stelechocarpus

burahol (Bl) Hook. f. & Th) PADA MENCIT PUTIH JANTAN SWISS

  

DENGAN METODE RANGSANG KIMIA

SKRIPSI

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.)

  Program Studi Ilmu Farmasi Oleh:

  Indra Perdana NIM: 048114066 ii

iii

iv

  

Cukuplah kasih karunia-Ku bagimu, sebab justru dalam

kelemahanlah kuasaku menjadi sempurna

( II Korintus 12:9)

  I dedicated this work for: Jesus Christ All generous and kind persons, who give their blood for them who need it

  My Father and My Mother, who gave me life and love My little sister, Yipi for all the inspiration when I was confused for all you gave to me My honor Almamater

  And everybody who ever

entered my life v

vi

vii

  PRAKATA

  Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan karunia-Nya sehingga penyusun dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul: “Uji Analgetik

  Ekstrak Etanol 70% Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th) pada Mencit Putih Jantan Swiss dengan Metode Rangsang Kimia”, sebagai salah satu syarat untuk menyelesaikan pendidikan strata satu.

  Dalam menyusun skripsi ini penyusun banyak mendapat bantuan berupa bimbingan, dorongan, sarana, maupun finansial dari berbagai pihak. Untuk itu penyusun mengucapkan banyak terima kasih kepada

  1. Rita Suhadi, M.Si., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

  2. Arief Rahman Hakim, M.Si, Apt., selaku Dosen Pembimbing Utama atas bimbingan, pengarahan, dan dukungannya selama penelitian sampai penyusunan skripsi ini.

  3. Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku Dosen Penguji yang telah memberikan masukan, kritik,dan saran untuk kesempurnaan skripsi ini.

  4. dr. Fenty, selaku Dosen Penguji yang telah memberikan masukan, kritik,dan saran untuk kesempurnaan skripsi ini. viii

  7. Teman-teman seperjuanganku di Laboratorium, Anggi, Mei, Siska dan Filisia, yang banyak membantu saat penelitian.

  8. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu yang telah membantu penyelesaian skripsi ini.

  Penyusun menyadari bahwa penelitian yang telah dilakukan untuk penyusunan skripsi ini masih jauh dari kesempurnaan. Walaupun demikian penyusun berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi masyarakat dan perkembangan ilmu pengetahuan.

  Yogyakarta, Juni 2008 Penyusun ix

  

INTISARI

  Tanaman kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) sering digunakan oleh masyarakat Indonesia untuk menurunkan kadar kolesterol, memperlancar air seni (diuretik), pengobatan asam urat, alat pencegah kehamilan tradisional, dan juga sebagai deodoran alami.

  Penelitian ini termasuk dalam penelitian eksperimental murni dengan rancangan penelitian acak lengkap pola satu arah. Metode yang digunakan adalah metode induksi kimia. Empat puluh dua ekor mencit jantan, galur Swiss, berat badan antara 20-30 gram, umur 2-3 bulan, dibagi secara acak yaitu kelompok kontrol negatif yang diberi CMC-Na 0,5%, kelompok kontrol positif yang diberi parasetamol dosis 91 mg/kgBB, dan kelompok yang diberi perlakuan ekstrak etanol daun kepel per oral dalam 4 peringkat dosis berturut-turut sebesar 35 mg/kgBB; 140 mg/kgBB; 560 mg/kgBB; dan 2240 mg/kgBB. Limabelas menit kemudian mencit diinduksi asam asetat dosis 100 mg/kgBB secara intraperitonial. Geliat yang timbul diamati dan dicatat tiap 5 menit selama 60 menit. Jumlah kumulatif geliat diubah ke dalam bentuk persen penghambatan terhadap geliat. Data yang diperoleh dianalisis secara statistik dengan One-way ANOVA dilanjutkan dengan uji LSD dengan taraf kepercayaan 95%.

  Hasil penelitian menunjukkan ekstrak etanol daun kepel mempunyai efek analgetik. Persen penghambatan terhadap geliat untuk parasetamol dosis 91 mg/kgBB sebesar 55,71 % dan ekstrak etanol daun kepel dosis 35 mg/kgBB; 140 mg/kgBB; 560 mg/kgBB; dan 2240 mg/kgBB berturut-turut sebesar 38,04%; 58,21%; 77,75%; dan 43,24%.

  Kata kunci: analgetik, ekstrak etanol daun kepel x

  

ABSTRACT

  Kepel plants (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) often used by Indonesian people to decrease cholesterol level, diuretic, nerve acid therapy, prevent pregnancy traditionally, and natural deodorant.

  The genre of this research is pure experimental in which the program of this research is random research plan, complete, and one-direction pattern. The method used in this research is chemical induction method. The research uses 42 male mice of Swiss groove, it weights 20-30 grams, and the age is 2-3 months. The 42 mices are divided into 6 groups based on its treatment, are the group of negative control is given CMC-Na 0,5%, the group of positive control is given paracetamol dosage 91 mg/kgBB, and the group of treatment is given extract ethanol of kepel leaves per orally in four different various dosage respectively, i.e.: 35 mg/kgBW; 140 mg/kgBW; 560 mg/kgBW; and 2240 mg/kgBW. Fifteen minutes after the treatment, the mice is induced by acetate acid with dosage 100 mg/kgBB intra peritoneally. The writhes are watched closely and booked every 5 minutes in 60 minutes. The accumulation numbers of the writhes are transferred into the form of resistance percentage toward the writhes. The data which is got from the calculation, later, is analyzed statistically with one-way ANOVA test, then, the step is continued with LSD with interval 95%.

  The result showing that ethanolic extract of kepel’s leaves has analgetic effect. Analgetic effect paracetamol at 91 mg/kgBW respectively, 55.71% and ethanolic extract of kepel’s leaves at 35 mg/kgBW; 140 mg/kgBW; 560 mg/kgBW; and 2240 mg/kgBW, respectively, 38.04%; 58.21%; 77.75%; and 43.24%.

  Key words : analgetic, ethanolic exstract of kepel’s leaves

  xi

  

DAFTAR ISI

  Halaman HALAMAN JUDUL ...................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................. ii HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................ iii HALAMAN PERSEMBAHAN ..................................................................... iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ......................................................... v PERSETUJUAN PUBLIKASI........................................................................ vi PRAKATA ..................................................................................................... vii

  INTISARI ...................................................................................................... ix

  ABSTRACT ..................................................................................................... x

  DAFTAR ISI .................................................................................................. xi DAFTAR TABEL .......................................................................................... xv DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xviii DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xx BAB I. PENGANTAR ..................................................................................

  1 A. Latar Belakang ..........................................................................................

  1 B. Permasalahan .............................................................................................

  2 C. Keaslian Penelitian ....................................................................................

  3

  xii BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ..........................................................

  8 A. Tanaman Kepel ........................................................................................

  8 1. Keterangan Botani.............................................................................

  8 2. Deskripsi ...........................................................................................

  8 3. Kandungan kimia ..............................................................................

  9 4. Khasiat ..............................................................................................

  10 B. Flavonoid .................................................................................................

  10 1. Sifat kelarutan dan isolasi .................................................................

  11 2. Karakterisasi .....................................................................................

  12 3. Kegunaan ..........................................................................................

  12 C. Metode Penyarian .....................................................................................

  13 1. Infudasi .............................................................................................

  13 2. Maserasi ............................................................................................

  14 3. Perkolasi ............................................................................................

  14 D. Radikal Bebas dan Antioksidan ................................................................ 15 1. Radikal bebas ....................................................................................

  15 2. Antioksidan .......................................................................................

  17 E. Nyeri .........................................................................................................

  18 F. Analgetika .................................................................................................

  23

  xiii 1. Golongan analgetika narkotika .........................................................

  26 2. Golongan analgetika nonnarkotika ...................................................

  29 I. Landasan Teori .........................................................................................

  30 J. Hipotesis ..................................................................................................

  31 BAB III. METODOLOGI PENELITIAN ...................................................

  32 A. Jenis Rancangan Penelitian ......................................................................

  32 B. Variabel dan Definisi Operasional ...........................................................

  32 1. Variabel utama ..................................................................................

  32 2. Variabel pengacau ............................................................................

  32 3. Definisi operasional .........................................................................

  33 C. Bahan Penelitian ......................................................................................

  34 D. Alat atau Instrumen Penelitian ................................................................

  35 E. Tata Cara Penelitian .................................................................................

  36 1. Pembuatan sediaan uji ......................................................................

  36 2. Pemilihan hewan uji .........................................................................

  40 3. Penetapan kriteria geliat ...................................................................

  40 4. Uji pendahuluan ...............................................................................

  41 5. Pengujian efek analgetik kelompok perlakuan .................................

  45 6. Analisis data ......................................................................................

  47

  xiv 1. Penetapan dosis asam asetat .............................................................

  51 2. Penetapan kontrol negatif .................................................................

  53

  3. Penetapan dosis parasetamol dan dosis ekstrak etanol daun kepel ..................................................................................................

  55

  4. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol .......................................................................................

  59

  5. Penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak etanol daun kepel .................................................................

  61 D. Pengujian Efek Analgetik Kelompok Perlakuan ......................................

  64 E. Perbandingan Daya Analgetik Ekstrak Etanol Daun Kepel Antara Mencit Jantan dan Mencit Betina .............................................................

  70 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ......................................................

  73 A. Kesimpulan ..............................................................................................

  73 B. Saran .........................................................................................................

  73 DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................

  74 LAMPIRAN ..................................................................................................

  78 BIOGRAFI PENULIS .................................................................................. 112

  xv

  

DAFTAR TABEL

  Halaman Tabel 1. Jumlah kumulatif geliat pada penetapan dosis asam asetat ..........

  52 Tabel 2. Jumlah kumulatif geliat pada penetapan kontrol negatif .............. 54 Tabel 3. Jumlah kumulatif geliat dan % penghambatan terhadap geliat pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel .............................................................................................. 57

  Tabel 4. Hasil analisis uji LSD % penghambatan terhadap geliat pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ........

  58 Tabel 5. Jumlah kumulatif geliat dan % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol .................................................................................... 59

  Tabel 6. Hasil analisis uji LSD % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol .................................................................................... 61

  Tabel 7. Jumlah kumulatif geliat dan % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak ............................................................................................ 62

  Tabel 8. Hasil analisis uji LSD % penghambatan terhadap geliat pada

  xvi Tabel 10. Hasil analisis uji LSD % penghambatan terhadap geliat pada seluruh kelompok perlakuan ......................................................... 67 Tabel 11. Persen penghambatan terhadap geliat seluruh kelompok perlakuan pada mencit jantan dan mencit betina .......................... 70 Tabel 12. Data jumlah geliat mencit pada penetapan dosis asam asetat ....... 83 Tabel 13. Data jumlah geliat mencit pada penetapan kontrol negatif ........... 85 Tabel 14. Data jumlah geliat mencit pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ....................................................... 87 Tabel 15. Data % penghambatan terhadap geliat pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ................................... 89 Tabel 16. Data jumlah geliat mencit pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol ............................... 91 Tabel 17. Data % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol .................... 94 Tabel 18. Data jumlah geliat mencit pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat ekstrak etanol daun kepel ........................ 96 Tabel 19. Data % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak etanol daun kepel .............................................................................................

  98

  xvii Tabel 22. Data potensi relatif ekstrak terhadap parasetamol pada pengujian efek analgetik................................................................................ 109 Tabel 23. Data % penghambatan terhadap geliat seluruh kelompok perlakuan pada mencit jantan dan mencit betina ......................... 110

  xviii

  

DAFTAR GAMBAR

  Halaman Gambar 1. Struktur kimia isolat ekstrak etanol daun kepel ........................ 9 Gambar 2. Kerangka dasar tipe-tipe flavonoid ........................................... 11 Gambar 3. Perombakan asam arakhidonat .................................................

  21 Gambar 4. Mekanisme Nyeri ...................................................................... 22 Gambar 5. Struktur molekul Parasetamol ................................................... 25 Gambar 6. Skema kerja penelitian .............................................................. 48 Gambar 7. Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat pada penetapan dosis asam asetat ...................................................... 52 Gambar 8. Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat pada penetapan kontrol negatif .......................................................... 54 Gambar 9. (a) Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat,

  (b) Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ……………........................................................ 57

  Gambar 10. (a) Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat, (b) Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat

  xix Gambar 11. (a) Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat,

  (b) Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak ..................................................................

  62 Gambar 12. (a) Diagram batang rata-rata jumlah kumulatif geliat, (b) Diagram batang rata-rata % penghambatan terhadap geliat pada seluruh kelompok perlakuan ......................................

  66 Gambar 13. Diagram batang perbandingan efek analgetik seluruh kelompok perlakuan antara mencit jantan dan mencit betina ...................

  71 Gambar 14. Tanaman kepel .......................................................................... 80 Gambar 15. Buah kepel.................................................................................

  80 Gambar 16. Serbuk daun kepel ..................................................................... 81 Gambar 17. Ekstrak etanol daun kepel .........................................................

  81 Gambar 18. Empat peringkat dosis ekstrak etanol daun kepel .....................

  82 Gambar 19. Geliat mencit ............................................................................. 82 Gambar 20. Plot penyebaran vs tingkat geliat terhadap perlakuan ............... 103 Gambar 21. Plot penyebaran vs tingkat geliat terhadap jenis kelamin ......... 103

  xx

  

DAFTAR LAMPIRAN

  Halaman Lampiran 1. Surat determinasi tanaman kepel............................................

  78 Lampiran 2. Foto tanaman, buah, serbuk daun kepel, ekstrak etanol daun kepel, empat peringkat dosis ekstrak etanol daun kepel, dan geliat mencit..........................................................

  80 Lampiran 3. Data jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil analisis statistik pada penetapan dosis asam asetat .............................

  83 Lampiran 4. Data jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil analisis statistik pada penetapan kontrol negatif .................................

  85 Lampiran 5. Data jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil analisis statistik pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ............................................................................... 87

  Lampiran 6. Data % penghambatan terhadap geliat dan hasil analisis statistik pada penetapan dosis parasetamol dan ekstrak etanol daun kepel ............................................................................... 89

  Lampiran 7. Data jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil analisis statistik pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap parasetamol .............................................................................

  91

  xxi Lampiran 9. Data jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil analisis statistik pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak etanol daun kepel .......................................................

  96 Lampiran 10. Data % penghambatan terhadap geliat dan hasil analisis statistik pada penetapan selang waktu pemberian asam asetat terhadap ekstrak etanol daun kepel ........................................

  98 Lampiran 11. Data jumlah kumulatif geliat mencit dan hasil analisis statistik pada pengujian efek analgetik seluruh kelompok perlakuan .. 100 Lampiran 12. Data % penghambatan terhadap geliat dan hasil analisis statistik pada pengujian efek analgetik seluruh kelompok perlakuan ................................................................................. 106

  Lampiran 13. Data potensi relatif ekstrak terhadap parasetamol pada pengujian efek analgetik ......................................................... 109 Lampiran 14. Hasil analisis statistik % penghambatan terhadap geliat antara mencit jantan dan betina pada pengujian efek analgetik seluruh kelompok perlakuan ............................................................... 110

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Masyarakat Indonesia telah mengenal dan menggunakan obat tradisional

  sejak dahulu kala. Obat tradisional merupakan salah satu alternatif yang digunakan sebagai sarana perawatan kesehatan dan untuk menanggulangi berbagai macam penyakit diantaranya sebagai antiinflamasi dan nyeri. Penggunaan obat tradisional oleh masyarakat indonesia dilakukan karena obat tradisional dianggap relatif lebih aman, praktis dan mudah untuk dibuat.

  Nyeri merupakan suatu gejala yang umum dan sering terjadi mengikuti salah satu atau lebih penyakit. Hampir sebagian besar penyakit memberi gejala nyeri yang dimanifestasikan dalam bentuk rasa sakit pada organ atau jaringan pada tubuh (Anonim, 1991).

  Tanaman kepel (Stelechocarpus burahol (Bl.) Hook. f. & Th.) biasanya digunakan oleh masyarakat sebagai obat tradisional. Secara ilmiah, telah dilakukan banyak penelitian mengenai tanaman kepel. Pada pemberian infusa daun kepel memiliki aktivitas anti inflamasi (Sriwidodo, 2004). Mekanisme terjadinya inflamasi mirip dengan nyeri dimana terjadi pelepasan mediator-mediator penyebab pada daun kepel yang dapat menetralkan radikal bebas. Apabila radikal bebas di dalam tubuh jumlahnya berlebih maka dapat menyebabkan kerusakan jaringan.

  Adanya flavonoid dapat menetralkan radikal bebas sehingga jumlahnya akan berkurang dan rasa nyeri dapat dicegah.

  Seberapa besar daya analgetik tanaman kepel sampai sekarang belum diketahui, sehingga dalam penelitian ini akan dilakukan uji efek analgetik dari ekstrak etanol daun kepel pada mencit putih jantan dan akan dibandingkan pengaruh jenis kelamin mencit terhadap besarnya daya analgetik ekstrak etanol daun kepel.

  Pengujian efek analgetik yang dilakukan terhadap ekstrak etanol daun kepel menggunakan metode rangsang kimia. Hal ini dikarenakan metode rangsang kimia dapat digunakan sebagai langkah pengujian awal untuk mengetahui apakah suatu senyawa memiliki efek analgetik atau tidak, selain itu metode ini sederhana dan mudah dilakukan. Hewan uji yang digunakan dalam metode uji rangsang kimia adalah mencit sebagaimana tercantum dalam acuan (Turner, 1965).

B. Permasalahan

  Berdasarkan latar belakang tersebut maka permasalahan yang timbul antara lain adalah :

  1. Apakah ekstrak etanol daun kepel memiliki efek analgetik terhadap mencit putih

C. Keaslian Penelitian

  Penelitian mengenai Uji Analgetik Ekstrak Etanol 70% Daun Kepel pada Mencit Putih Jantan Swiss dengan Metode Rangsang Kimia belum pernah dilakukan sebelumnya. Adapun penelitian tentang tanaman kepel yang pernah dilakukan adalah:

  1. Toksisitas Akut Ekstrak Metanol dan Ekstrak Kloroform Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th) Terhadap Larva Artemia salina Leach (Widiastuti, 2000). Hasil menunjukkan bahwa ekstrak metanol menunjukkan efek toksik dengan LC 257

  50

  μg/ml, sedangkan ekstrak kloroform tidak toksik dengan LC 1053

  50 μg/ml.

  2. Pengaruh Infusa Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th) Terhadap Kadar Asam Urat Serum Darah Ayam Terinduksi Hati (Hening, 2002).

  Hasil menunjukkan bahwa infusa daun kepel dengan dosis 0,98 g/kgBB; 1,47 g/kgBB; dan 2,205 g/kgBB terbukti mampu menurunkan kadar asam urat dalam serum darah ayam. Makin tinggi dosis maka kemampuan menurunkan kadar asam urat semakin besar.

  3. Skrining Fitokimia dan Penentuan Identitas Makroskopik dan Mikroskopik Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th) (Oktaviani, 2002). Hasil pemisahan KLT menunjukkan bahwa daun kepel mengandung senyawa kimia

  HELA secara in vitro dengan LC setelah inkubasi selama 72 jam sebesar

  50

  334,10 μg/ml.

  5. Penurunan Asam Urat Darah Ayam Jantan Braille Hiperurisemia Oleh Fraksi Ekstrak Metanol Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th) (Sutomo, 2003). Hasil menunjukkan bahwa fraksi larut petroleum eter dosis 100 mg/kgBB dan fraksi tidak larut petroleum eter dosis 50; 100; dan 150 mg/kgBB mampu menurunkan kadar asam urat darah ayam hiperurisemia.

  6. Pembuatan Ekstrak Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th)

  ® ®

  Secara Kempa Langsung Dengan Kombinasi Avicel pH 102 dan Di-Cafos Sebagai Bahan Pengisi-Pengikat (Restiyaningsih, 2004). Hasil menunjukkan bahwa ekstrak daun kepel dapat dibuat jadi sediaan tablet dengan sifat fisik yang

  ®

  memenuhi persyaratan tablet dengan menggunakan kombinasi Avicel pH 102

  ® dan Di-Cafos sebagai bahan pengisi-pengikat.

  7. Toksisitas Akut-Oral Ekstrak Etanolik Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th) pada Mencit (Ariningsih, 2004). Hasil menunjukkan bahwa potensi ketoksikan akut-oral ekstrak etanolik daun kepel pada mencit tergolong hampir tidak toksik dan tidak menyebabkan kematian dengan harga LD-50 semu sebesar > 5635,7 mg/kgBB.

  8. Variasi Kadar Amprotab Sebagai Bahan Penghancur Dalam Pembuatan Tablet serap dan waktu hancur tablet. Semakin besar kadar Amprotab maka semakin besar daya serap tablet dan semakin cepat waktu hancur tablet.

  9. Uji Aktivitas Anti Inflamasi Infusa Daun Kepel Pada Tikus Jantan Wistar Dengan Metode Udema Kaki Belakang (Sriwidodo, 2004). Hasil menunjukkan bahwa sediaan infusa daun kepel yang diberikan per oral mempunyai daya anti inflamasi pada tikus yang diinduksi karagenin 1% secara subplanar. Daya anti inflamasi pada dosis 0,5; 1,0; 2,0; dan 3 g/kgBB masing-masing sebesar 44,33; 67,00; 71,29; dan 50,91%.

  10. Toksisitas Akut Infusa Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th) pada Mencit Jantan (Maspa, 2005). Hasil menunjukkan bahwa potensi ketoksikan akut infusa daun kepel pada mencit tergolong dalam kategori toksik ringan dan dengan harga LD semu sebesar > 8190 mg/kgBB.

  50

  11. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Flavonoid Antioksidan Penangkap Radikal Bebas Dari Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th) (Sunarni, 2006). Hasil menunjukkan bahwa peneliti berhasil mengisolasi dan mengindetifikasi senyawa flavonoid golongan flavon dalam fraksi etanol infusa daun kepel.

  12. Standarisasi Simplisia dan Ekstrak Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th) (Purwantiningsih, 2005). Hasil menunjukkan bahwa dalam fraksi

  Kandungan Senyawa Fenolik dan Flavonoid Totalnya (Supriyatna, 2007). Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun kepel mampu menurunkan kadar asam urat serum hingga 77,78% pada hari ke-19 setelah pemberian ekstrak etanol daun kepel dosis 400 mg/kgBB per oral.

  14. Uji Ekstrak Etanol Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th) Terhadap Aktivitas Enzim Xantin Oksidase Secara In Vitro (Aryadi, 2007). Hasil menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun kepel mempunyai potensi dalam menghambat aktivitas xantin oksidase sebesar 17,78 ± 2,69% pada konsentrasi 500 μg/ml.

  15. Uji Fraksi n-heksana Daun Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th) Terhadap Aktivitas Enzim Xantin Oksidase Secara In Vitro (Kurniawati, 2007).

  Hasil menunjukkan bahwa fraksi n-heksana daun kepel pada konsentrasi 0,5 dan

  5 μg/ml dapat menghambat aktivitas enzim xantin oksidase dengan presentasi penghambatan yang signifikan dibanding blanko, sedang pada konsentrasi 500

  μg/ml menyebabkan pengikatan aktivitas enzim xantin oksidase sebesar 15,00 ± 1,41%.

D. Manfaat Penelitian

  Penelitian ini memiliki beberapa manfaat, yaitu sebagai berikut :

  2. Manfaat praktis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat tentang kegunaan daun kepel sebagai analgetika.

E. Tujuan Penelitian

  1. Mengetahui adanya efek analgetik ekstrak etanol daun kepel terhadap mencit putih jantan.

  2. Mengetahui besarnya daya analgetik ekstrak etanol daun kepel terhadap mencit putih jantan.

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Tanaman Kepel

  1. Keterangan Botani

  Kepel (Stelechocarpus burahol (Bl) Hook. f. & Th) termasuk kedalam familia Annonaceae (Backer dan Bakhuizen, 1963). Dikenal denga beberapa nama daerah sebagai berikut :

  Sunda : burahol, turalak Jawa : kepel, kecindul, simpul, cindul (Hutapea, 1994)

  2. Deskripsi

  Habitat : pohon, tinggi ± 12 m Batang : tegak, bulat, berkayu, percabangan monodial, coklat.

  Daun : tunggal, lonjong, panjang 8-20 cm, lebar 4-6 cm, ujung dan pangkal meruncing, halus, pertulangan bawah menonjol mengkilat, hijau.

  Bunga : majemuk, bentuk tandan, tersebar di batang dan cabang, tangkai silindris, panjang 4 cm, benang sari dan putik halus kuning, mahkota lonjong, kuning. Buah : buni, bulat, kulit kasar, diameter 5 cm, coklat.

3. Kandungan kimia

  Daging buah, biji, dan akar Stelechocarpus burahol, mengandung saponin, flavonoid, dan polifenol, disamping itu bijinya juga mengandung alkaloida dan daunnya juga mengandung flavonoid dan polifenol (Hutapea, 1994). Sutomo (2003) dan Supriyatna (2007) melaporkan adanya flavonoid pada daun kepel. Sunarni (2006) berhasil mengisolasi dan mengidentifikasi senyawa flavonoid golongan flavon pada fraksi etanol ekstrak air daun kepel yaitu :

• Isolat A1 : 7,3’,4-trihidroksi-5-0-gula-flavon
• Isolat B2 : 5,4’-dihidroksi-7-0-tersubtitusi-3-0-gula fl
• Isolat B3 : 5,7,4’-trihidroksi-3-0-gula flavon
• Isolat B4a : 3,7,4’-trihidroksi flavon
• Isolat B4b : 3,7,3’,4’-tetrahidroksi-5-metilflavon Dari kelima isolat tersebut, isolat B4b memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi dibanding isolat lain. Hal ini mungkin dikarenakan isolat B4b mempunyai gugus o-diOH dan 3-OH bebas. Struktur kimia untuk kelima isolat di atas dapat dilihat pada gambar 1.

  OH OH O OH OH O OH O Gula Gula O O OH O RO O OH OH O OH OH O Gula OH O O

  

Isolat B2 Isolat B4a

OH

OH O OH

OH CH O ₃ Isolat B4b

  

Gambar 1. Struktur kimia isolat ekstrak etanol daun kepel (Sunarni, 2006)

4. Khasiat

  Daging buah kepel berkhasiat sebagai obat radang ginjal dan peluruh air seni (Hutapea, 1994). Dalam masyarakat buah kepel juga bermanfaat sebagai deodoran alami dan alat pencegah kehamilan tradisional (Siswono, 2002). Khasiat daun kepel antara lain sebagai pengobatan asam urat (Sutomo, 2003), menurunkan kadar kolesterol (Siswono, 2002) dan sebagai antiinflamasi (Sriwidodo, 2004).

B. Flavonoid

  Flavonoid merupakan kandungan khas tumbuhan hijau dan sebenarnya

  _{8 1} 2' _{3' 7} O _{2 1' 4'} B A C C C _{6 5 4 3 6' 5'}

  1a 1b Gambar 2. Kerangka flavonoid (1a) dan sistem penomoran turunan flavonoid (1b)

  (Robinson, 1995)

1. Sifat kelarutan dan isolasi

  Secara individual, kelarutan senyawa flavonoid sangat bermacam-macam sesuai dengan golongan dan substitusi yang terjadi. Flavonoid terdapat dalam bentuk bebas sebagai aglikon maupun terikat dengan gula sebagai glikosida. Adanya gula yang terikat flavonoid cenderung menyebabkan flavonoid lebih mudah larut dalam air. Dengan demikian glikosida flavonoid juga larut dalam pelarut polar seperti etanol, metanol, butanol, aseton, dimetilsulfida, dimetilformamida dan air.

  Sebaliknya, aglikon yang kurang polar seperti isoflavon, flavanon, flavon, serta flavonol yang termetoksilasi cenderung lebih mudah larut dalam pelarut nonpolar seperti eter, etil asetat, dan kloroform (Markham, 1988).

  Metode yang banyak dikembangkan untuk pemisahan dan karakterisasi flavonoid adalah kromatografi kertas. Sejumlah kecil sampel dapat dipisahkan dengan efisien dengan metode tersebut. Kromatografi lapis tipis (KLT) juga merupakan cara analisis cepat yang memerlukan bahan yang sangat sedikit. Penjerap

  2. Karakterisasi

  Pencirian golongan flavonoid dapat dilakukan berdasarkan reaksi warna dan sifat kelarutannya. Jika tidak ada pigmen yang mengganggu, flavonoid dapat dideteksi dengan diberi uap amonia dan akan memberikan warna-warna yang spesifik. Flavon dan flavonol menunjukkan warna kuning, kalkon dan auron menunjukkan warna lembayung sampai merah (Robinson, 1995).

  Flavonoid dengan alumunium klorida (AlCl ) membentuk senyawa

  3

  kompleks berwarna kuning. Reaksi yang terjadi antara AlCl dengan gugus hidroksi

  3

  dan karbonil yang bertetangga membentuk kompleks yang tahan asam, sedangkan reaksi yang terbentuk antara AlCl dengan gugus o-dihidroksi membentuk kompleks

  3 yang tak stabil dalam suasana asam (Markham, 1988).

  Larutan asam borat dan natrium asetat akan membentuk senyawa kompleks dengan gugus o-dihidroksi pada senyawa flavonoid baik pada cincin A atau B dari inti flavonoid. Efek dari pereaksi ini akan memberikan pergeseran panjang gelombang dan berguna pada analisis golongan flavonoid (Mabry dkk,1970).

  3. Kegunaan

  Flavonoid berkhasiat sebagai antiinflamasi, antialergi, antithrombolik, vasoprotektif sebagai penghambat promotor tumor dan untuk proteksi pada mukosa saluran cerna atau gastrik. Efek-efek tersebut berhubungan dengan pengaruh Beberapa penelitian melaporkan bahwa aktivitas antioksidan flavonoid ditentukan oleh gugus tertentu dalam struktur flavonoid tersebut. Karakteristik struktur flavonoid yang mampu memberikan efek antioksidan antara lain karena adanya (1) gugus katekol (o-dihidroksi) pada cincin B yang mempunyai sifat sebagai donor proton, (2) gugus pirogalol (trihidroksi) pada cincin B, (3) gugus 4-oxo pada cincin heterosiklik, (4) gugus 3-OH pada cincin heterosiklik, serta (5) gugus 5-OH dan 7- OH yang potensial pada keadaan tertentu (Middleton dkk, 2000 cit Ladoangin, 2004). Cos dkk (1998) melaporkan aktivitas flavonoid sebagai penurun kadar asam urat melalui penghambatan enzim xantin oksidase.

C. Metode Penyarian

  Penyarian merupakan peristiwa pemindahan massa. Zat aktif yang semula berada di dalam sel ditarik oleh cairan penyari, sehingga terjadi larutan zat aktif dalam cairan penyari tersebut. Secara umum penyarian dapat dibedakan menjadi infudasi, maserasi, dan perkolasi (Anonim, 1986).

  Infudasi merupakan proses penyarian yang umumnya digunakan untuk menyari zat kandungan aktif larut dalam air dari bahan-bahan nabati. Penyarian dengan cara ini menghasilkan sari yang tidak stabil dan mudah terserang oleh kuman dan kapang. Oleh sebab itu, sari yang diperoleh tidak boleh disimpan lebih dari 24

  Maserasi merupakan cara penyarian sederhana. Maserasi dilakukan dengan cara merendam serbuk simplisia dalam cairan penyari. Cairan penyari akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang mengandung zat aktif, zat aktif akan larut dan karena adanya perbedaan konsentrasi antara larutan zat aktif di dalam sel dengan yang di luar sel, maka larutan yang terpekat didesak ke luar. Peristiwa tersebut berulang, sehingga terjadi keseimbangan konsentrasi antara larutan di luar sel dan di dalam sel. Maserasi digunakan untuk penyarian simplisia yang mengandung zat aktif yang mudah larut dalam cairan penyari. Cairan penyari yang digunakan dapat berupa air, etanol, air-etanol atau pelarut lain (Anonim, 1986).

  Perkolasi adalah cara penyarian yang dilakukan dengan mengalirkan cairan penyari melalui serbuk simplisia yang telah dibasahi. Prinsip perkolasi adalah sebagai berikut: serbuk simplisia ditempatkan dalam suatu bejana silinder yang bagian bawahnya diberi sekat berpori. Cairan penyari dialirkan dari atas ke bawah melalui serbuk tersebut, sehingga cairan penyari akan melarutkan zat aktif sel-sel yang dilalui sampai mencapai keadaan jenuh (Anonim, 1986).

  Cara perkolasi lebih baik daripada dengan cara maserasi karena:

  1. Aliran cairan penyari menyebabkan adanya pergantian larutan yang terjadi dengan larutan yang konsentrasinya lebih rendah, sehingga meningkatkan derajat perbedaan konsentrasi,

  Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode perkolasi. Cairan penyari yang digunakan dalam penelitian ini adalah etanol 70%. Etanol digunakan sebagai penyari karena lebih selektif, kapang atau kuman sulit tumbuh dalam etanol di atas 20%, tidak beracun, bersifat netral, absorpsinya baik, dapat bercampur dengan air, panas yang digunakan untuk pemekatan lebih sedikit, dan mudah didapat (Anonim, 1986).

D. Radikal Bebas dan Antioksidan

1. Radikal Bebas

  Radikal bebas adalah suatu spesies yang mempunyai jumlah elektron ganjil atau elektron yang tidak berpasangan tunggal pada lingkaran luarnya. Elektron tidak berpasangan tersebut menyebabkan instabilasi dan bersifat reaktif. Radikal bebas akan merusak molekul yang elektronnya ditarik oleh radikal bebas tersebut sehingga menyebabkan kerusakan sel, gangguan fungsi sel, bahkan kematian sel. Molekul utama di dalam tubuh yang dirusak oleh radikal bebas yaitu DNA, lemak, dan protein (Setiati, 2003).

  Radikal bebas dalam tubuh diproduksi baik secara eksogen dan secara endogen. Secara endogen, radikal bebas diproduksi oleh mitokondria, membran plasma, lisosom, retikulum endoplasma, dan intisel. Secara eksogen, radikal bebas maupun lipoksigenase. Ketika terjadi kerusakan jaringan organ, jumlah radikal bebas meningkat seiring dengan peningkatan produksi peroksida, padahal tubuh memproduksi antioksidan endogen yang terbatas. Apabila jumlah radikal bebas makin banyak, antioksidan endogen tak mampu lagi melumpuhkannya secara efektif sehingga harus ada tambahan antioksidan dari luar (eksogen) yang berasal dari bahan makanan (Sibuea, 2004).

  Berikut ini adalah jenis-jenis dari radikal bebas :

  ⎯

  a. Radikal superoksida (O )

2 Radikal ini merupakan jenis radikal yang paling banyak dan terbentuk bila 1 molekul O menerima 1 elektron.

  2 ⎯

  O

  

2 → O

  2 Superoksidan bersifat reaktif atau reduktan dapat bereaksi dengan substansi ⎯

  biologik. Reaktivitas O sangat terbatas karena adanya dismutasi spontan yang

  2

  dapat terjadi pada pH fisiologik, membentuk H O dan O . Tetapi dengan

  2

  2

  2 ⎯

  terbatasnya reaktivitas O menyebabkan radikal ini dapat berdifusi dan bereaksi

  2 dengan substratnya dalam jarak yang relatif lebih jauh dari tempat asalnya.

  b. Hidrogen peroksida

  2-

⎯

  Penambahan 1 elektron pada radikal O menghasilkan ion peroksida O yang

  

2

  2

  tidak besifat radikal, dan pada pH fisiologik akan segera mengalami protonasi c. Radikal hidroksil

  ⎯ Radikal fisi homolitik O-O akan menghasilkan 2 molekul radikal hidroksil, OH .

  Reaksi homolitik ini dapat terjadi karena pengaruh panas atau radiasi ionisasi. Selain itu, radikal hidroksil juga dapat terbentuk dari H O dengan adanya ion-

  2

  2

• 2+

  ion logam (Fe , Cu ), menurut reaksi Fenton, dan dengan adanya kelator melalui reaksi Haber-Weiss:

  2+ 3+ . ¯

  Fe + H O + OH + OH

  2

  2

  → Fe

• 2+ . ¯

  Cu + H O + OH + OH

  2

  2

  → Cu Radikal hidroksil adalah oksidan yang sangat reaktif dan tidak stabil. Radikal bebas dapat bereaksi dengan hampir semua substrat biologik. Karena sangat reaktif efek radikal ini hanya berlangsung di daerah dengan tempat terbentuknya, dan dalam kondisi fisiologik normal tidak ditemukan radikal hidroksil dalam kadar besar (Gitawati, 1995).

  Dengan bertambahnya usia, radikal bebas yang terbentuk selama metabolisme normal dapat merusak DNA dan makromolekul lain sehingga terjadi penyakit-penyakit degeneratif, keganasan kematian sel-sel vital tertentu, yang pada akhirnya akan menyebabkan proses penuaan dan kematian bagi individu tersebut (Gitawati, 1995).

2. Antioksidan

  Menurut Setiati (2003), antioksidan dibedakan menjadi antioksidan eksogen dan antioksidan endogen. Antioksidan endogen atau sering disebut antioksidan primer terdiri atas enzim-enzim dan berbagai senyawa yang disintesis dalam tubuh yang bekerja dengan cara mencegah pembentukan radikal bebas baru. Contoh enzim yang merupakan antioksidan endogen yaitu superoksida dismutase (SOD), katalase, dan glutation peroksidase (GSH Px). Antioksidan eksogen atau yang dikenal juga sebagai antioksidan sekunder karena menangkap radikal dan mencegah reaksi berantai. Contohnya adalah vitamin E (tokoferol), vitamin C (askorbat), karoten, asam urat bilirubin, dan albumin.

  Menurut tempat aksinya pada fase air ataupun lipofil dari membran, antioksidan dibagi menjadi water-soluble dan lipid-soluble. Vitamin C dan urate termasuk dalam antioksidan hidrofil. Sedangkan retinoid, karotenoid, flavonoid, dan vitamin A termasuk dalam antioksidan lipofil (Middleton dkk, 2000 cit Ladoangin, 2004).

  Flavonoid telah dikenal dan merupakan suatu kelompok antioksidan polifenol yang banyak terdapat pada sayuran, buah-buahan, dan beberapa minuman seperti teh hijau dan anggur merah. Di dalam keluarga polifenol, flavonoid ternyata mempunyai sifat antioksidan yang amat kuat yang mencapai 20 kali sifat antioksidan vitamin E (Sitompul, 2003).

E. Nyeri

  Nyeri merupakan respon langsung terhadap kejadian atau peristiwa yang tidak menyenangkan yang berhubungan dengan kerusakan jaringan, seperti, luka, inflamasi, atau kanker (Rang dkk, 2003). Nyeri merupakan suatu perasaan pribadi dan memiliki ambang toleransi nyeri berbeda-beda bagi setiap orang (Tjay dan Rahardja, 2002).

  Nyeri dapat dibedakan berdasarkan waktu timbulnya nyeri yaitu: nyeri akut dan nyeri kronik (Anonim, 2001). Nyeri akut dengan kecepatan penjalaran antara 6- 30 meter per detik biasanya memiliki sebuah penyebab yang dapat ditegaskan. Nyeri kronik dengan kecepatan penjalaran antara 0,5-2 meter per detik sering kali tidak menandakan bahaya yang segera menimbulkan pencegahan dan pasien mungkin tidak mengartikan nyeri tersebut sebagai penyakit serius (Greene dan Harris, 2000).

  Nyeri berdasarkan sumbernya dapat dikategorikan menjadi nyeri somatik dan nyeri viseral. Jika nyeri somatik muncul dari kulit, dinamakan nyeri superfisial.

  Jika nyeri itu berasal dari otot, sendi, organ dalam atau jaringan connective, disebut nyeri dalam (Anonim, 2001).

  Tiga kelompok utama reseptor kulit yang telah diidentifikasi adalah :

  1. Mekanoreseptor (mendeteksi sentuhan ringan)

  2. Termoreseptor (mendeteksi panas)

  1. Serabut A- β : berukuran besar, bermielin, cepat dalam menyalurkan impuls (30- 100 meter/detik), memiliki ambang nyeri yang rendah dan merespon terhadap sentuhan ringan.

  2. Serabut A- δ : berukuran kecil, bermielin tipis, dan memiliki kecapatan konduksi yang lebih rendah (6-30 meter/detik). Serabut ini merespon terhadap tekanan, panas, zat kimia, dan memberi reaksi terhadap nyeri yang tajam, serta menimbulkan refleks penarikan diri atau gerakan cepat lainnya.

  3. Serabut C : berukuran kecil, tidak bermielin, dan memiliki kecepatan konduksi yang lambat (1-1,25 meter/detik). Serabut ini merespon terhadap seluruh jenis rangsang bahaya dan mentransmisikan nyeri yang lambat dan tumpul (Greene dan Harris, 2000).