PENETAPAN KADAR SIMVASTATIN DALAM SEDIAAN TABLET SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI DENGAN FASE GERAK METANOL-AIR

  

PENETAPAN KADAR SIMVASTATIN DALAM

SEDIAAN TABLET SECARA KROMATOGRAFI

CAIR KINERJA TINGGI DENGAN FASE GERAK

METANOL-AIR

  

SKRIPSI

OLEH:

AYU SARI ANASTASIA

NIM 111524039

  

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

  

PENETAPAN KADAR SIMVASTATIN DALAM

SEDIAAN TABLET SECARA KROMATOGRAFI

CAIR KINERJA TINGGI DENGAN FASE GERAK

METANOL-AIR

  

SKRIPSI

Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk

memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara

  

OLEH:

AYU SARI ANASTASIA

NIM 111524039

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

  

2013

PENGESAHAN SKRIPSI PENETAPAN KADAR SIMVASTATIN DALAM SEDIAAN TABLET SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI DENGAN FASE GERAK METANOL-AIR OLEH: AYU SARI ANASTASIA NIM 111524039

  Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Pada Tanggal: 12 Oktober 2013 Pembimbing I, Panitia Penguji,

  Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt. Prof. Dr. Siti M. Sinaga, M.Sc., Apt. NIP 195306191983031001 NIP 195008281976032002 Pembimbing II, Prof. Dr. rer. nat. E. De Lux Putra, S.U., Apt.

  NIP 195306191983031001 Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt. Prof. Dr. Jansen Silalahi, M.App.Sc., Apt.

  NIP 195201041980031002 NIP 195006071979031001 Drs. Syafruddin, M.S., Apt.

  NIP 194811111976031003 Medan, Oktober 2013 Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Dekan,

KATA PENGANTAR

  Bismillahirrahmanirrahiim, Puji syukur penulis ucapkan kepada Allah SWT atas segala limpahan

rahmat dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan

skripsi yang berjudul “Penetapan Kadar Simvastatin Dalam Sediaan Tablet

Secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Dengan Fase Gerak Metanol–Air”.

Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat guna memperoleh gelar Sarjana

Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

  Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan

terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra,

Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah

memberikan fasilitas dan masukan selama masa pendidikan dan penelitian,

kepada Prof. Dr. rer. nat. Effendy De Lux Putra, S.U., Apt., dan Drs. Fathur

Rahman Harun, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah banyak

memberikan bimbingan, arahan, dan bantuan selama masa penelitian dan

penulisan skripsi ini berlangsung. Penulis juga menyampaikan ucapan terima

kasih kepada a Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt., Prof. Dr. Jansen

Silalahi, M.App.Sc., Apt., dan Drs. Syafruddin, M.S., Apt., selaku dosen

penguji yang telah memberikan masukan dalam penyusunan skripsi ini serta

kepada Bapak Drs. Agusmal Dalimunthe, M.S., Apt., selaku dosen

pembimbing akademik yang selalu membimbing selama masa pendidikan.

  Penulis juga ingin menyampaikan rasa terima kasih serta penghargaan

yang tulus dan tak terhingga kepada orang tua tersayang Ayahanda Alm. Ir.

  

Sorinaik Batubara, M.T., dan Ibunda Hj. Dra. Wieke Widiaty atas doa dan

dukungan baik moril maupun materil, kakak tersayang, kerabat-kerabat, dan

sahabat-sahabat di Fakultas Farmasi USU semua atas motivasi dan segala

bantuan dalam penyelesaian skripsi ini.

  Semoga Tuhan Yang Maha Kuasa memberikan balasan yang berlipat

ganda kepada semua pihak yang telah membantu dalam penulisan skripsi ini.

  

Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangan. Oleh karena

itu, sangat diharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari semua

pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi

ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang farmasi.

  Medan, Oktober 2013 Penulis, Ayu Sari Anastasia NIM 111524039

PENETAPAN KADAR SIMVASTATIN DALAM SEDIAAN TABLET SECARA KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI DENGAN FASE GERAK METANOL-AIR ABSTRAK

  Simvastatin merupakan obat yang termasuk ke dalam golongan statin

yang digunakan sebagai penurun kadar kolesterol bagi pasien

hiperkolesterolemia. Obat ini merupakan obat semisintetik yang bekerja

dengan cara menginhibisi 3-hydroxy-3-methylglutaroyl-coenzyme A (HMG- CoA) reduktase serta menurunkan kadar LDL. Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menetapkan kadar simvastatin dalam tablet generik dan dagang.

  Penetapan kadar dilakukan secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi menggunakan kolom TC-C18 (4,6 × 150 mm) dengan fase gerak metanol-air o

  (80:20), sistem elusi isokratik pada suhu 40

  C, laju alir 1,5 ml/menit pada panjang gelombang 238 nm. Untuk menguji validitas metode ini, dilakukan uji validasi dengan parameter akurasi, presisi, batas deteksi, dan batas kuantitasi.

  Dari hasil penelitian yang dilakukan, diperoleh kadar tablet simvastatin generik yaitu: PT. Hexpharm Jaya 99,18 ± 0,41%, PT. Kimia Farma 105,26 ± 0,64%, PT. Novell 93,71 ± 0,30%, PT. Bernofarm 104,85 ± 0,36%. Sedangkan

  ®

untuk tablet dengan nama dagang berturut-turut untuk Zocor (PT. Merck

  ®

Sharp & Dohme) 99,06 ± 0,27%, Normofat (PT. Soho) 104,55 ± 0,25%,

  ® ®

Simbado (PT. Lapi) 105,58 ± 0,41%, Lesvatin (PT. Gracia Pharmindo)

104,55 ± 0,19%. Semua tablet yang dianalisis memenuhi persyaratan kadar

yang tercantum dalam United State Pharmacopeia (USP) edisi 32 tahun 2009 yaitu tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket. Hasil uji validasi dari metode ini diperoleh persen recovery

100,95% dengan RSD 0,65%, ini menunjukkan bahwa metode ini memiliki

ketepatan dan ketelitian yang baik dengan limit deteksi 2,5597 µg/ml dan limit kuantitasi 8,5326 µg/ml.

  Kata Kunci: Simvastatin, KCKT, Tablet, Generik, Nama Dagang, Metanol, Ai

  

DETERMINATION OF SIMVASTATIN IN TABLET BY HIGH

PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY WITH MOBILE

  

ABSTRACT

Simvastatin is a drug belonging to the class of statins used as lowering

cholesterol levels for patients with hypercholesterolemia. It is a semisynthetic

drug that works in a way inhibition 3-hydroxy-3-methylglutaroyl-Coenzyme A

(HMG-CoA) reductase and lowering LDL. The purpose of this study was to

establish the rate of simvastatin in tablet with generic and trading name.

  Determination is done using by High Performance Liquid Chromatography column TC-C18 5 μm (4.6 × 150 mm), by mobile phase o methanol-water (80:20) with isocratic elution system at a temperature of 40

  C, flow rate of 1.5 ml/min at λ 238 nm. To test the validity of this method,

experiments performed with parameter validation accuracy, precision, limit of

detection, and the limit of quantitation Results obtained from this research showed that the levels of

simvastatin with generic names are : PT. Hexpharm Jaya 99.18 ± 0.41%, PT.

  

Kimia Farma 105.26 ± 0.64%, PT. Novell 93.71 ± 0.30%, PT. Bernofarm

®

  104.85 ± 0.36%. As for the tablet with consecutive trading name for Zocor ®

  

(PT. Merck Sharp & Dohme) 99.06 ± 0.27%, Normofat (PT. Soho) 104.55 ±

®

  ®

0.25%, Simbado (PT. Lapi) 105.58 ± 0.41%, Lesvatin (PT. Gracia

Pharmindo) 104.55 ± 0.19%. All the analyzed simvastatin tablets meet the

requirements levels specified in United State Pharmacopeia (USP) 32 edition

2009, which contains not less than 90.0 percent and not more than 110.0

percent simvastatin of the labeled amount. Validation test results obtained from

this method percent recovery of 100.95% with RSD 0.65%, indicating that this

method has good accuracy and precision in detection limit 2.5597 µg/ml and a

quantitation limit 8.5326 µg/ml.

  Keywords: Simvastatin, HPLC, Tablet, Generic, Trade Name, Methanol, Water

  Halaman JUDUL ................................................................................................................ i HALAMAN JUDUL .......................................................................................... ii LEMBAR PENGESAHAN ................................................................................ iii KATA PENGANTAR ........................................................................................ iv ABSTRAK .......................................................................................................... vi ABSTRACT ........................................................................................................ vii DAFTAR ISI ....................................................................................................... viii DAFTAR TABEL ............................................................................................... xii DAFTAR GAMBAR .......................................................................................... xiii DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xv BAB I PENDAHULUAN ............................................................................

  1 1.1 Latar Belakang ..........................................................................

  1 1.2 Perumusan Masalah ...................................................................

  2 1.3 Hipotesis ....................................................................................

  3 1.4 Tujuan Penelitian .......................................................................

  3 1.5 Manfaat Penelitian .....................................................................

  4 BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................

  5 2.1 Simvastatin ................................................................................

  5 2.1.1 Uraian Bahan ....................................................................

  5 2.1.2 Farmakologi ....................................................................

  6 2.1.3 Efek Samping ...................................................................

  6 2.1.4 Dosis .................................................................................

  6

  2.3 Kromatografi Cair Kinerja Tinggi .............................................

  16 2.7 Penentuan Kadar Simvastatin dengan Metode KCKT .................

  21 3.5.1.2 Pembuatan Pelarut ...............................................

  21 3.5.1.1 Pembuatan Fase Gerak Metanol-Air ...................

  21 3.5.1 Penyiapan Bahan .............................................................

  20 3.5 Prosedur Penelitian ....................................................................

  19 3.4 Pengambilan Sampel .................................................................

  19 3.3 Bahan-bahan ..............................................................................

  19 3.2 Alat-alat .....................................................................................

  19 3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ...................................................

  17 BAB III METODE PENELITIAN ..................................................................

  16 2.8 Validasi Metode ..........................................................................

  15 2.6.9 Elusi Gradien dan Isokratik ..............................................

  8 2.4 Cara Kerja KCKT .......................................................................

  14 2.6.8 Fase Gerak ........................................................................

  14 2.6.7 Pengolah Data ..................................................................

  13 2.6.6 Detektor ............................................................................

  12 2.6.5 Fase Diam .........................................................................

  11 2.6.4 Kolom ...............................................................................

  11 2.6.3 Injektor ..............................................................................

  10 2.6.2 Pompa ...............................................................................

  10 2.6.1 Wadah Fase Gerak ...........................................................

  9 2.6 Komponen KCKT .......................................................................

  9 2.5 Jenis Pemisahan KCKT ..............................................................

  21

  BPFI ...................................................................

  21 3.5.2 Prosedur Analisis ............................................................

  21 3.5.2.1 Penyiapan Alat KCKT ........................................

  21

  3.5.2.2 Penentuan Perbandingan Fase Gerak yang Optimum ............................................................

  22 3.5.3 Analisis Kualitatif Menggunakan KCKT .......................

  23

  3.5.3.1 Uji Identifikasi Simvasatatin Menggunakan KCKT .............................................

  23 3.5.4 Analisis Kuantitatif .........................................................

  23 3.5.4.1 Pembuatan Kurva Kalibrasi Simvastatin ............

  23 3.5.4.2 Penetapan Kadar Sampel ....................................

  24

  3.5.4.3 Analisis Data Penetapan Kadar Secara Statistik ...............................................................

  24 3.5.5 Validasi Metode ..............................................................

  25 3.5.5.1 Kecermatan (Akurasi) .........................................

  25 3.5.5.2 Keseksamaan (Presisi) ......................................

  26

  3.5.5.3 Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ)

  27 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .........................................................

  28 4.1 Optimasi Komposisi Fase Gerak Metanol:Air ...........................

  28 4.2 Analisis Kualitatif .....................................................................

  32 4.3 Penentuan Kurva Kalibrasi ........................................................

  34 4.4 Kadar Simvastatin dalam Sampel ..............................................

  35 4.5 Hasil Uji Validasi ......................................................................

  36 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .........................................................

  39 5.1 Kesimpulan ...............................................................................

  39 5.2 Saran ..........................................................................................

  39

  LAMPIRAN ........................................................................................................

  42

  Halaman

  Tabel 1 . Perbandingan fase gerak terhadap retention time dan area

  dari hasil optimasi .............................................................................. 32

  Tabel 2 . Perbandingan retention time, area, height, dan USP tailing

  dari hasil spiking ................................................................................ 34

  

Tabel 3 . Kadar simvastatin dalam sediaan tablet ............................................ 35

Tabel 4 . Data hasil uji validasi tablet generik (PT. Hexpharm Jaya) .............. 37

Tabel 5 . Data hasil validasi ............................................................................. 91

Tabel 6 . Analisis data statistik persen perolehan kembali simvastatin

  pada sediaan tablet ............................................................................. 93

  Halaman Gambar 1. Struktur Simvastatin .....................................................................

  5 Gambar 2. Diagram Skematik Alat KCKT ....................................................

  10 Gambar 3. Tipe Injektor Katup Putaran .........................................................

  12 Gambar 4. Kromatogram menggunakan kolom TC-C18 (4,6 x 150 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (70:30) laju alir 1,5 ml/menit ...............................................................................

  29 Gambar 5. Kromatogram menggunakan kolom Agilent TC-C18 (4,6 x 150 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (80:20) laju alir 1,5 ml/menit ..................................................................

  29 Gambar 6. Kromatogram menggunakan kolom Agilent TC-C18 (4,6 x 150 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (85:15) laju alir 1,5 ml/menit ..................................................................

  30 Kromatogram menggunakan kolom Agilent TC-C18 (4,6 x Gambar 7. 150 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (80:20) laju alir 1,0 ml/menit ..................................................................

  30 Gambar 8. Kromatogram menggunakan kolom Agilent TC-C18 (4,6 x 150 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (85:15) laju alir 1,0 ml/menit ..................................................................

  31 Gambar 9. Kromatogram menggunakan kolom Agilent TC-C18 (4,6 x 150 mm) Perbandingan Fase Gerak Metanol:Air (70:30) laju alir 1,7 ml/menit ..................................................................

  31 Gambar 10. Kromatogram tablet simvastatin sebelum penambahan baku secara KCKT menggunakan kolom Agilent TC-C18 (4,6 x 150 mm) ......................................................................................

  33 Gambar 11. Kromatogram tablet simvastatin sesudah penambahan baku hasil spike secara KCKT menggunakan kolom Agilent TC- C18 (4,6 x 150 mm) ....................................................................

  33 Gambar 12. Kurva kalibrasi Simvastatin BPFI secara KCKT menggunakan kolom Agilent TC-C18 (4,6 x 150 mm) .............

  34 Gambar 13. Alat KCKT (Agilent) .................................................................

  96 Gambar 14. Wadah Fase Gerak .....................................................................

  96

  Gambar 17. Timbangan Analitik ..................................................................

  96

  Halaman Lampiran 1. Kromatogram penyuntikan simvastatin baku pada pembuatan kurva kalibrasi ........................................................

  42 Lampiran 2. Perhitungan persamaan regresi simvastatin ..............................

  44 Lampiran 3. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas kuantitasi (LOQ) simvastatin ................................................................................. 46 Kromatogram hasil penyuntikan simvastatin generik (PT Lampiran 4.

  Hexpharm Jaya) .......................................................................... 47

  Lampiran 5. Perhitungan kadar simvastatin generik (PT Hexpharm

  Jaya) ............................................................................................ 48

  Lampiran 6. Kromatogram hasil penyuntikan simvastatin generik (PT

  Kimia Farma) ............................................................................. 50

  

Lampiran 7. Perhitungan kadar simvastatin generik (PT Kimia Farma) ........ 51

Lampiran 8. Kromatogram hasil penyuntikan simvastatin generik (PT

  Novell) ........................................................................................ 53

  

Lampiran 9. Perhitungan kadar simvastatin generik (PT Novell) .................. 54

Lampiran 10. Kromatogram hasil penyuntikan simvastatin generik (PT

  Bernofarm) ................................................................................ 56

  

Lampiran 11. Perhitungan kadar simvastatin generik ( PT Bernofarm) ............ 57

_® Lampiran12. Kromatogram hasil penyuntikan simvastatin merek Zocor

  (PT Merck Sharp & Dohme) ................................................... 59 _®

  Lampiran 13. Perhitungan kadar simvastatin merek Zocor (PT Merck

  Sharp & Dohme) ....................................................................... 60

  Lampiran14. Kromatogram hasil penyuntikan simvastatin merek _®

  Normofat (PT Soho) .............................................................. 62 _®

  

Lampiran 15. Perhitungan kadar simvastatin merek Normofat (PT Soho) ....... 63

Lampiran16. Kromatogram hasil penyuntikan simvastatin merek _®

  ® Lampiran 18. Kromatogram hasil penyuntikan simvastatin merek

  Lesvatin ^® (PT Gracia Pharmindo) .......................................... 68

  Lampiran 19. Perhitungan kadar simvastatin merek Lesvatin ^®

  (PT Gracia Pharmindo) ............................................................................... 69 Lampiran 20. Contoh perhitungan penimbangan sampel ...............................

  72 Lampiran 21. Contoh perhitungan untuk mencari kadar tablet simvastatin generik (PT Hexpharm Jaya) ...............................

  73 Lampiran 22. Hasil pengolahan data penetapan kadar simvastatin tablet .....

  74 Lampiran 23. Kromatogram hasil penyuntikan dari simvastatin tablet dan bahan baku pada persen perolehan kembali pada rentang 80%, 100% dan 120% ................................................

  78 Lampiran 24. Perhitungan recovery dengan metode adisi standar ................

  87 Lampiran 25. Sertifikat Analisis Simvastatin BPFI ......................................

  94 Lampiran 26. Tabel Nilai Distribusi t ...........................................................

  95 Lampiran 27. Gambar alat KCKT, wadah fase gerak, vialautosampler, degasser dan timbangan analitik ..............................................

  96