Optimalisasi dan aplikasi spektrofotometri derivatif untuk penetapan kadar ternary mixtures dari parasetamol, ibuprofen dan kofein pada sediaan tablet

Lampiran 1. Foto sampel bodrex EXTRA® (Tempo Scan Pacific)

Spesifikasi sampel
Nama

: bodrex® EXTRA

Nomor Bet

: 020034

Tanggal Kadaluarsa : Januari 2017
Komposisi

: Parasetamol

: 350 mg

Ibuprofen

: 200 mg

Kofein

: 50 mg

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Foto alat

a

b

c

Keterangan: a. Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu 1800) dan Seperangkat PC
dengan Software UV Probe; b. Sonicator (Branson); c. Timbangan (Boeco)

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Contoh perhitungan transmitan (%) dan kesalahan fotometrik
Parasetamol dalam dapar fosfat pH 7,2
Absorbansi

= 0,65530

Transmitan (%) = antilog (2-A)
= antilog (2-0,65530)
= 22,11566
Transmitan

= 22,11566/100
= 0,22116

Maka kesalahan fotometrik parasetamol dalam dapar fosfat pH 7,2 adalah
dc
0,4343
=
dt
c

T (log T)
0,4343
dc
=
1%
0,2211 (log 0,2211)
c
= 3,00 %
Selisih persen kesalahan fotometrik parasetamol dalam buffer fosfat pH 7,2
dengan persen kesalahan terkecil adalah
= 3,00 % - 2,72 %
= 0,28 %

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. Titik zero-crossing untuk metode zero-crossing
a. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 1 Δλ 2
Nilai

Nilai
Nilai
Nilai amplitudo
λ (nm)
amplitudo
amplitudo
amplitudo
campuran
parasetamol
ibuprofen
kofein
272
-0,00790
-0,00800
0,00040
-0,00020
300,0
-0,00410
-0,00380
-0,00000

-0,00040
300,2
-0,00400
-0,00380
-0,00000
-0,00030
300,4
-0,00390
-0,00370
-0,00000
-0,00030
300,6
-0,00390
-0,00360
-0,00000
-0,00030
300,8
-0,00380
-0,00350
-0,00000

-0,00030
301
-0,00360
-0,00340
-0,00000
-0,00030
301,2
-0,00350
-0,00330
-0,00000
-0,00030
301,4
-0,00390
-0,00320
0,00000
-0,00020
301,6
-0,00320
-0,00300
0,00000

-0,00020
301,8
-0,00310
-0,00290
0,00010
-0,00020
303,6
-0,00210
-0,00210
-0,00000
-0,00010
307,4
-0,00080
-0,00080
-0,00000
-0,00000
307,6
-0,00070
-0,00070
-0,00000

-0,00000
307,8
-0,00070
-0,00070
-0,00000
-0,00000
308
-0,00060
-0,00070
-0,00000
-0,00000
308,2
-0,00060
-0,00060
-0,00000
-0,00000
308,4
-0,00050
-0,00050
-0,00000

0,00000
308,6
-0,00050
-0,00050
0,00000
0,00000
309
-0,00040
-0,00040
0,00000
0,00000
309,2
-0,00040
-0,00040
0,00000
0,00000
310
-0,00030
-0,00030
0,00000

0,00000
b. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 1 Δλ 4
Nilai
Nilai
Nilai
Nilai amplitudo
λ (nm)
amplitudo
amplitudo
amplitudo
campuran
parasetamol
ibuprofen
kofein
271,2
-0,00910
-0,00920
-0,00020

0,00030
271,4
-0,00900
-0,00890
-0,00020
0,00010
301,2
-0,00340
-0,00320
0,00000
-0,00020
c. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 1 Δλ 8
Tidak ada titik zero-crossing yang didapatkan

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. (Lanjutan)
d. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 1 Δλ 16
Nilai
Nilai
Nilai
λ (nm) Nilai amplitudo campuran amplitudo
amplitudo
amplitudo
parasetamol
ibuprofen
kofein
242,4
-0,00410
-0,00000
-0,00430
0,00020
242,6
-0,00420
-0,00040
-0,00410
0,00020
310,6
-0,00090
-0,00080
-0,00000
-0,00000
310,8
-0,00090
-0,00080
-0,00000
-0,00000
311
-0,00080
-0,00080
-0,00000
-0,00000
311,2
-0,00080
-0,00070
-0,00000
-0,00000
311,4
-0,00080
-0,00070
-0,00000
-0,00000
311,6
-0,00070
-0,00070
-0,00000
-0,00000
311,8
-0,00070
-0,00060
-0,00000
-0,00000
312
-0,00070
-0,00060
-0,00000
-0,00000
e. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 2 Δλ 2
Nilai
Nilai
Nilai
Nilai amplitudo
amplitudo
amplitudo
amplitudo
λ (nm)
campuran
parasetamol
ibuprofen
kofein
228,6
-0,00420
-0,00400
0,00040
-0,00020
232,6
0,02230
-0,00010
0,02200
0,00010
289,2
0,00490
-0,00010
0,00010
0,00480
291
0,00680
0,00030
0,00000
0,00680
f. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 2 Δλ 4
Nilai
Nilai
Nilai
Nilai amplitudo
λ (nm)
amplitudo
amplitudo
amplitudo
campuran
parasetamol
ibuprofen
kofein
290,6
0,00540
0,00030
0,00010
0,00540
302,8
0,00470
0,00480
-0,00010
0,00040
305,2
0,00340
0,00340
-0,00010
0,00020
309
0,00170
0,00170
0,00020
0,00000

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. (Lanjutan)
g. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 2 Δλ 8
Nilai
Nilai
Nilai
Nilai amplitudo
λ (nm)
amplitudo
amplitudo
amplitudo
campuran
parasetamol
ibuprofen
kofein
258,8
0,00190
0,00180
-0,00010
0,00020
259
0,00230
0,00230
-0,00010
0,00010
259,2
0,00270
0,00270
-0,00010
0,00000
288,8
0,00380
-0,00020
-0,00000
0,00390
289
0,00400
-0,00010
-0,00000
0,00410
289,2
0,00420
-0,00010
-0,00000
0,00420
289,4
0,00440
0,00000
-0,00000
0,00430
304,4
0,00400
0,00380
-0,00000
0,00040
305,6
0,00350
0,00340
0,00000
0,00030

h. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 2 Δλ 16
Nilai
Nilai
Nilai
Nilai amplitudo
λ (nm)
amplitudo
amplitudo
amplitudo
campuran
parasetamol
ibuprofen
kofein
348
-0,00270
-0,00300
-0,00040
-0,00020
373
0,00180
0,00180
0,00030
0,00020
i. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 3 Δλ 2
Nilai
Nilai
Nilai
Nilai amplitudo
amplitudo
amplitudo
amplitudo
λ (nm)
campuran
parasetamol
ibuprofen
kofein
290
0,00300
0,00020
0,00010
0,00280
308
0,00240
0,00220
-0,00000
0,00030
308,4
0,00230
0,00210
-0,00000
0,00020
308,8
0,00220
0,00200
-0,00000
0,00020
309
0,00210
0,00200
-0,00000
0,00020
309,4
0,00200
0,00190
-0,00000
0,00020
309,8
0,00190
0,00180
-0,00000
0,00020
310,2
0,00180
0,00170
-0,00000
0,00010
312,2
0,00120
0,00120
-0,00000
0,00010
313,6
0,00090
0,00090
-0,00000
0,00000
314
0,00080
0,00080
-0,00000
0,00000

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. (Lanjutan)
j. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 3 Δλ 4
Nilai
Nilai
Nilai
Nilai amplitudo
λ (nm)
amplitudo
amplitudo
amplitudo
campuran
parasetamol
ibuprofen
kofein
230,4
0,00640
0,00040
0,00640
0,00040
254,4
0,00240
0,00240
0,00030
0,00000
254,6
0,00260
0,00280
0,00010
-0,00000
257,4
0,00210
0,00200
-0,00000
0,00010
276,6
-0,00260
-0,00240
-0,00030
-0,00000
282,4
0,00080
0,00030
-0,00010
0,00080
k. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 3 Δλ 8
Nilai
Nilai
Nilai
Nilai amplitudo
amplitudo
amplitudo
amplitudo
λ (nm)
campuran
parasetamol
ibuprofen
kofein
228,6
0,01290
0,00000
0,01290
-0,00030
228,8
0,01310
-0,00000
0,01310
-0,00020
229
0,01320
-0,00000
0,01310
-0,00020
229,2
0,01310
-0,00010
0,01310
-0,00020
229,4
0,01300
-0,00010
0,01300
-0,00010
229,6
0,01280
-0,00010
0,01280
-0,00010
229,8
0,01250
-0,00020
0,01250
-0,00000
230
0,01210
-0,00020
0,01210
0,00000
230,2
0,01150
-0,00040
0,01160
0,00010
245
-0,00090
0,00000
-0,00080
0,00000
257
0,00240
0,00240
0,00000
-0,00030
257,2
0,00240
0,00240
0,00010
-0,00030
257,6
0,00230
0,00230
0,00010
-0,00030
258
0,00220
0,00220
0,00010
-0,00030
273
-0,00150
-0,00160
0,00000
0,00000
307,6
-0,00050
-0,00050
0,00000
-0,00000
307,8
-0,00050
-0,00050
0,00000
-0,00000
308
-0,00050
-0,00050
0,00000
-0,00000
308,2
-0,00050
-0,00050
0,00000
-0,00000
308,4
-0,00050
-0,00050
0,00000
-0,00000
308,6
-0,00050
-0,00050
-0,00000
-0,00000
308,8
-0,00050
-0,00050
-0,00000
-0,00000

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. (Lanjutan)
l. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 3 Δλ 16
Nilai
Nilai
Nilai
Nilai amplitudo
λ (nm)
amplitudo
amplitudo
amplitudo
campuran
parasetamol
ibuprofen
kofein
244,8
-0,01390
0,00010
-0,01380
-0,00010
268,2
-0,00330
-0,00020
0,00040
-0,00340
292,6
0,00340
0,00320
-0,00010
0,00030
292,8
0,00310
0,00320
-0,00010
0,00010
302,4
-0,00250
-0,00000
-0,00000
-0,00260
302,6
-0,00260
-0,00030
-0,00000
-0,00250
310,8
-0,00300
-0,00290
0,00000
-0,00030
311
-0,00300
-0,00280
0,00000
-0,00030
311,2
-0,00290
-0,00280
0,00000
-0,00030
311,8
-0,00270
-0,00260
-0,00000
-0,00020
312,2
-0,00260
-0,00250
-0,00000
-0,00020
312,8
-0,00240
-0,00220
0,00000
-0,00020
313
-0,00230
-0,00210
0,00000
-0,00010
313,2
-0,00220
-0,00210
0,00000
-0,00010
313,4
-0,00220
-0,00200
0,00000
-0,00010
313,6
-0,00210
-0,00190
0,00000
-0,00010
313,8
-0,00200
-0,00180
0,00000
-0,00010
314
-0,00190
-0,00170
0,00000
-0,00010
314,2
-0,00180
-0,00170
0,00000
-0,00010
314,4
-0,00180
-0,00160
0,00000
-0,00010
318,8
-0,00040
-0,00040
0,00000
0,00000
319
-0,00040
-0,00040
0,00000
0,00000
319,2
-0,00030
-0,00030
0,00000
0,00000
m. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 4 Δλ 8
Tidak ada titik zero-crossing ditemukan
n. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing spektrum campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan spektrum parasetamol, ibuprofen dan kofein pada
derivat 4 Δλ 16
Nilai
Nilai
Nilai
Nilai amplitudo
amplitudo
amplitudo
amplitudo
λ (nm)
campuran
parasetamol
ibuprofen
kofein
294,2
-0,01067
0,00040
0,00008
-0,01089
294,4
-0,01016
0,00028
0,00007
-0,01036
294,6
-0,00964
0,00015
0,00005
-0,00979

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. (Lanjutan)
n. (Lanjutan)
λ (nm)
294,8
295
295,2
295,4

Nilai amplitudo
campuran
-0,00909
-0,00852
-0,00794
-0,00738

Nilai
amplitudo
parasetamol
0,00004
0,00007
-0,00019
-0,00032

Nilai
amplitudo
ibuprofen
0,00002
-0,00002
-0,00007
-0,00013

Nilai
amplitudo
kofein
-0,00917
-0,00851
-0,00781
-0,00711

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Titik zero-crossing untuk metode ratio spectra zero-crossing
a. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing dari ratio spectra campuran
parasetamol, ibuprofen dan kofein dan ratio spectra ibuprofen dan kofein
pada derivat 1 Δλ 2 dengan parasetamol sebagai divisor
λ (nm) Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
campuran
ibuprofen
kofein
204,2
0,03341
-0,00027
0,02080
218,6
0,02998
0,00048
-0,03072
242,2
-0,00104
-0,00108
-0,00017
244,2
0,00101
-0,00019
0,00101
244,6
0,00137
-0,00003
0,00133
266,0
0,4114
0,00048
0,4162
266,8
0,04139
0,00026
0,04208
267
0,04149
0,00002
0,04241
267,2
0,04138
-0,00027
0,04257
276,6
-0,00873
-0,00848
-0,00022
283
-0,02873
-0,00040
-0,02844
283,2
-0,02971
-0,00026
-0,02927
283,4
-0,03058
-0,00020
-0,03002
283,8
-0,03190
-0,00007
-0,03155
284
-0,03281
-0,00008
-0,03257
284,2
-0,03349
-0,00006
-0,03362
284,4
-0,03402
-0,00010
-0,03460
285,8
-0,03929
0,00034
-0,03979
287,8
-0,04232
0,00045
-0,04236
b. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing dari ratio spectra campuran
parasetamol, ibuprofen dan kofein dan ratio spectra ibuprofen dan kofein
pada derivat 1 Δλ 4 dengan parasetamol sebagai divisor
λ (nm) Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
campuran
ibuprofen
kofein
212,4
0,05622
0,05584
0,00003
244,8
0,00153
-0,00006
0,00151
266,6
0,03991
0,00031
0,04018
266,8
0,04003
0,00013
0,04042
267
0,04014
-0,00002
0,04063
267,2
0,04022
-0,00013
0,04080
267,4
0,04028
-0,00018
0,04092
267,6
0,04034
-0,00019
0,04099
267,8
0,04039
-0,00017
0,04101
268
0,04043
-0,00010
0,04096
268,2
0,04048
0,00002
0,04086
268,4
0,4054
0,00018
0,04071
268,6
0,04058
0,00038
0,04049
272
0,02872
0,00004
0,02900

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (Lanjutan)
b. (Lanjutan)
λ (nm) Nilai amplitudo
campuran
284,2
-0,03311
284,4
-0,03388
284,6
-0,03462
284,8
-0,03533
285
-0,03603
285,2
-0,03670
285,4
-0,03732
285,6
-0,03792
285,8
-0,03844
286
-0,03881
286,2
-0,03910

Nilai amplitudo
ibuprofen
-0,00011
-0,00005
-0,00000
0,00003
0,00005
0,00008
0,00011
0,00015
0,00019
0,00024
0,00027

Nilai amplitudo
kofein
-0,03331
-0,03407
-0,03481
-0,03552
-0,03621
-0,03687
-0,03748
-0,03805
-0,03857
-0,03904
-0,03948

c. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing dari ratio spectra campuran
parasetamol, ibuprofen dan kofein dan ratio spectra ibuprofen dan kofein
pada derivat 1 Δλ 8 dengan parasetamol sebagai divisor
λ (nm) Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
campuran
ibuprofen
kofein
218,6
-0,02549
-0,00010
-0,02610
242,4
-0,00263
-0,00262
-0,00004
245,8
0,00240
-0,00009
0,00244
246
0,00264
-0,00001
0,00260
269
0,03550
0,00041
0,03552
269,2
0,03493
0,00019
0,03516
269,4
0,03431
-0,00004
0,03475
277
-0,00527
-0,00522
-0,00037
283,8
-0,03042
-0,00046
-0,03039
284
-0,03095
-0,00040
-0,03099
284,2
-0,03149
-0,00034
-0,03159
284,4
-0,03200
-0,00030
-0,03216
284,6
-0,03247
-0,00025
-0,03272
284,8
-0,03295
-0,00020
-0,03326
285
-0,03342
-0,00016
-0,03378
d. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing dari ratio spectra campuran
parasetamol, ibuprofen dan kofein dan ratio spectra ibuprofen dan kofein
pada derivat 1 Δλ 16 dengan parasetamol sebagai divisor
λ (nm) Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
campuran
ibuprofen
kofein
241,8
-0,00980
-0,00979
-0,00005

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (Lanjutan)
d.

(Lanjutan)

λ (nm)
242
249,2
249,4
265,8
266
266,2
277,2

Nilai amplitudo
campuran
-0,00918
0,00648
0,00681
0,02783
0,02769
0,02753
-0,00254

Nilai amplitudo
ibuprofen
-0,00930
0,00007
0,00016
0,00045
0,00037
0,00030
-0,00249

Nilai amplitudo
kofein
0,00009
0,00651
0,00674
0,02776
0,02769
0,02760
-0,00024

e. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing dari ratio spectra campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan ratio spectra parasetamol dan ibuprofen pada derivat 1 Δλ
2 dengan kofein sebagai divisor

λ (nm)
262,2
262,4
262,8
263
263,2
270,4
272,4
283,2
283,4
283,6
283,8
284

f.

Nilai amplitudo
campuran
-0,53656
-0,52117
-0,49174
-0,47864
-0,4633
-0,12507
-0,07632
0,09215
0,09630
0,10075
0,10636
0,11290

Nilai amplitudo
parasetamol
-0,53466
-0,51913
-0,48859
-0,47456
-0,46137
-0,12598
-0,07528
0,09272
0,09709
0,10150
0,10675
0,11301

Nilai amplitudo
ibuprofen
-0,00031
0,00024
0,00048
0,00018
-0,00038
0,00031
0,00038
-0,00033
-0,00021
-0,00011
0,00000
-0,00004

Nilai amplitudo pada titik zero-crossing dari ratio spectra campuran parasetamol,
ibuprofen dan kofein dan ratio spectra parasetamol dan ibuprofen pada derivat 1 Δλ
4 dengan kofein sebagai divisor

λ (nm)
276,6
283,8
284
284,2
284,4
284,6
284,8
285
285,2

Nilai amplitudo
campuran
-0,01241
0,11496
0,12083
0,12695
0,13337
0,14016
0,14725
0,15460
0,16225

Nilai amplitudo
parasetamol
-0,00010
0,11411
0,12005
0,12621
0,13263
0,13939
0,14644
0,15380
0,16145

Nilai amplitudo
ibuprofen
-0,01336
-0,00034
-0,00015
0,00003
0,00016
0,00024
0,00030
0,00036
0,00043

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (Lanjutan)
g. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing dari ratio spectra campuran
parasetamol, ibuprofen dan kofein dan ratio spectra parasetamol dan
ibuprofen pada derivat 1 Δλ 8 dengan kofein sebagai divisor
λ (nm) Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
campuran
parasetamol
ibuprofen
283,8
0,13706
0,13634
-0,00042
284
0,14394
0,14305
-0,00030
284,2
0,15132
0,15025
-0,00021
284,8
0,17592
0,17413
0,00011
h. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing dari ratio spectra campuran
parasetamol, ibuprofen dan kofein dan ratio spectra parasetamol dan
ibuprofen pada derivat 1 Δλ 16 dengan kofein sebagai divisor
Tidak ditemukan titik zero-crossing
i. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing dari ratio spectra campuran
parasetamol, ibuprofen dan kofein dan ratio spectra parasetamol dan kofein
pada derivat 1 Δλ 2 dengan ibuprofen sebagai divisor
λ (nm) Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
campuran
parasetamol
kofein
225,2
0,13398
0,13129
0,00017
j. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing dari ratio spectra campuran
parasetamol, ibuprofen dan kofein dan ratio spectra parasetamol dan kofein
pada derivat 1 Δλ 4 dengan ibuprofen sebagai divisor
Tidak ditemukan titik zero-crossing
k. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing dari ratio spectra campuran
parasetamol, ibuprofen dan kofein dan ratio spectra parasetamol dan kofein
pada derivat 1 Δλ 8 dengan ibuprofen sebagai divisor
λ (nm) Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
campuran
parasetamol
kofein
218,6
-0,03706
-0,00017
-0,03796
224,6
0,19366
0,19118
0,00020
l. Nilai amplitudo pada titik zero-crossing dari ratio spectra campuran
parasetamol, ibuprofen dan kofein dan ratio spectra parasetamol dan kofein
pada derivat 1 Δλ 16 dengan ibuprofen sebagai divisor
λ (nm) Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
Nilai amplitudo
campuran
parasetamol
kofein
217,8
-0,02583
0,00002
-0,02746
223,8
0,48477
0,48101
-0,00005

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. Kurva dan perhitungan kalibrasi parasetamol dengan
menggunakan metode zero-crossing pada derivat pertama λ
271,2 nm dengan Δλ 4 nm
0
0

2

4

6

8

10

12

14

16

-0,002

Nilai amplitudo

-0,004
-0,006
-0,008
-0,01
-0,012
-0,014
-0,016

No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Jumlah
Mean
a =

Konsentrasi (μg/mL)
X

Y
0,00000
-0,00227
-0,00459
-0,00686
-0,00919
-0,01144
-0,01370
-0,04805
-0,00686

0,0
2,5
5,0
7,5
10,0
12,5
15,0
52,50000
7,50000

XY
0,00000
-0,00568
-0,02295
-0,05145
-0,09190
-0,14300
-0,20550
-0,52048
-0,07435

X2
0,00000
6,25000
25,00000
56,25000
100,00000
156,25000
225,00000
568,75000
81,25000

Y2
0,00000
0,00001
0,00002
0,00005
0,00008
0,00013
0,00019
0,00048
0,00007

∑ XY − ∑ X ∑ Y / n
∑ X − (∑ X ) / n
2

2

− 0,52048 − (52,50000 )(− 0,04805) / 7
2
568,75000 − (52,50000 ) / 7
= –0,00091

=

Y =a X+b

b = Y −aX
= –0,00686 – (–0,00091)(7,50000)
= 0,00000

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. (Lanjutan)
Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = –0,00091X + 0,00000
r=

=

(∑ X 2

∑ XY − ∑ X ∑ Y / n
− (∑ X ) / n)(∑ Y − (∑ Y )
2

2

2

/n

)

− 0,52048 − (52,50000 )(− 0,04805) / 7

{568,75000 − (52,50000) / 7}{0,00048 − (− 0,04805) / 7}
2

2

= -0,99999

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7.

Kurva dan perhitungan kalibrasi ibuprofen dengan
menggunakan metode zero-crossing pada derivat pertama λ
242,2 nm dengan Δλ 16 nm

0
0

2

4

6

8

10

Nilai amplitudo

-0,001
-0,002
-0,003
-0,004
-0,005
-0,006
-0,007

No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Jumlah
Mean
a =

Konsentrasi (μg/mL)
X

Y
0,00000
-0,00105
-0,00211
-0,00319
-0,00428
-0,00537
-0,00645
-0,04805
-0,00686

0,0
1,5
3,0
4,5
6,0
7,5
9,0
31,50000
4,50000

XY
0,00000
-0,00158
-0,00633
-0,01436
-0,02568
-0,04028
-0,05805
-0,14627
-0,02090

X2
0,00000
2,25000
9,00000
20,25000
36,00000
56,25000
81,00000
204,75000
29,25000

Y2
0,00000
0,00000
0,00000
0,00001
0,00002
0,00003
0,00004
0,00010
0,00001

∑ XY − ∑ X ∑ Y / n
∑ X − (∑ X ) / n
2

2

− 0,14627 − (31,50000 )(− 0,02245) / 7
2
204,75000 − (31,50000 ) / 7
= −0,00072

=

Y =a X+b

b = Y −aX
= −0,00321 – (−0,00072)(4,50000)
= 0,00002

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7. (Lanjutan)
Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = −0,00072X + 0,00002
r=

=

(∑ X 2

∑ XY − ∑ X ∑ Y / n
− (∑ X ) / n)(∑ Y − (∑ Y )
2

2

2

/n

)

− 0,14267 − (31,50000 )(− 0,02245) / 7

{204,75000 − (31,50000) / 7}{0,00010 − (− 0,02245) / 7}
2

2

= -0,99998

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8. Kurva dan perhitungan kalibrasi kofein dengan menggunakan
metode zero-crossing pada derivat ketiga λ 302,4 nm dengan
Δλ16 nm
0
-0,0005

0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

Nilai amplitudo

-0,001
-0,0015
-0,002
-0,0025
-0,003
-0,0035
-0,004
-0,0045

No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Jumlah
Mean

a =

Konsentrasi (μg/mL)

X
0,00000
0,40000
0,80000
1,20000
1,60000
2,00000
2,40000
8,40000
1,20000

Y
0,00000
-0,00070
-0,00135
-0,00197
-0,00258
-0,00330
-0,00395
-0,01385
-0,00198

XY
0,00000
-0,00028
-0,00108
-0,00236
-0,00413
-0,00660
-0,00948
-0,02393
-0,00342

X2
0,00000
0,16000
0,64000
1,44000
2,56000
4,00000
5,76000
14,56000
2,08000

Y2
0,00000
0,00000
0,00000
0,00000
0,00001
0,00001
0,00002
0,00004
0,00001

∑ XY − ∑ X ∑ Y / n
∑ X − (∑ X ) / n
2

2

− 0,02393 − (8,40000 )(− 0,01385) / 7
2
14,56000 − (8,4 ) / 7
= − 0,00163

=

Y =a X+b

b = Y −aX
= − 0,00198 – (− 0,00163)(1,20000)
= − 0,00002

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8. (Lanjutan)
Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = −0,00163X −0,00002
r=

=

(∑ X 2

∑ XY − ∑ X ∑ Y / n
− (∑ X ) / n)(∑ Y − (∑ Y )
2

2

2

/n

)

− 0,02393 − (8,40000 )(− 0,01385) / 7

{14,56000 − (8,40000) / 7}{0,00004 − (− 0,01385) / 7}
2

2

= -0,99980

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. Kurva dan perhitungan kalibrasi parasetamol dengan
menggunakan metode ratio spectra zero-crossing pada derivat
pertama λ 270,4 nm dengan Δλ 2 nm (kofein 1,6 µg/mL sebagai
divisor)
0
-0,02 0

2

4

6

8

10

12

14

16

Nilai amplitudo

-0,04
-0,06
-0,08
-0,1
-0,12
-0,14
-0,16
-0,18
-0,2

No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Jumlah
Mean
a =

Konsentrasi (μg/mL)

X
0,00000
2,50000
5,00000
7,50000
10,00000
12,50000
15,00000
52,50000
7,50000

Y
0,00000
-0,03138
-0,06313
-0,09431
-0,12598
-0,15646
-0,18715
-0,65841
-0,09406

XY
0,00000
-0,07845
-0,31565
-0,70733
-1,25980
-1,95575
-2,80725
-7,12423
-1,01775

X2
0,00000
6,25000
25,00000
56,25000
100,00000
156,25000
225,00000
568,75000
81,25000

Y2
0,00000
0,00098
0,00399
0,00889
0,01587
0,02448
0,03503
0,08924
0,01275

∑ XY − ∑ X ∑ Y / n
∑ X − (∑ X ) / n
2

2

− 7,12423 − (52,50000 )(− 0,65841) / 7
2
568,75000 − (52,50000 ) / 7
= −0,01249

=

Y =a X+b

b = Y −aX
= −0,09406 – (− 0,01249)(7,50000)
= −0,00037

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. (Lanjutan)
Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = − 0,01249X − 0,00037
r=

=

(∑ X 2

∑ XY − ∑ X ∑ Y / n
− (∑ X ) / n)(∑ Y − (∑ Y )
2

2

2

/n

)

− 7,12423 − (52,50000 )(− 0,65841) / 7

{568,75000 − (52,50000) / 7}{0,08924 − (− 0,65841) / 7}
2

2

= -0,99998

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10.

Kurva dan perhitungan kalibrasi ibuprofen dengan
menggunakan metode ratio spectra zero-crossing pada
derivat pertama λ 242 nm nm dengan Δλ 16 nm
(parasetamol 10 µg/mL sebagai divisor)

0
0

2

4

6

8

10

-0,002

Nilai amplitudo

-0,004
-0,006
-0,008
-0,01
-0,012
-0,014
-0,016

No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Jumlah
Mean
a =

Konsentrasi (μg/mL)

X
0,00000
1,50000
3,00000
4,50000
6,00000
7,50000
9,00000
52,50000
7,50000

Y
0,00000
-0,00228
-0,00460
-0,00695
-0,00930
-0,01169
-0,01403
-0,04885
-0,00698

XY
0,00000
-0,00342
-0,01380
-0,03128
-0,05580
-0,08768
-0,12627
-0,31824
-0,04546

X2
0,00000
2,25000
9,00000
20,25000
36,00000
56,25000
81,00000
204,75000
81,25000

Y2
0,00000
0,00001
0,00002
0,00005
0,00009
0,00014
0,00020
0,00049
0,00007

∑ XY − ∑ X ∑ Y / n
∑ X − (∑ X ) / n
2

2

− 0,31824 − (31,50000 )(− 0,04885) / 7
2
204,75000 − (31,50000 ) / 7
= −0,00156

=

Y =a X+b

b = Y −aX
= −0,00698 – (−0,00156)(4,50000)
= 0,00005

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10. (Lanjutan)
Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = −0,00156X + 0,00005
r=

=

(∑ X 2

∑ XY − ∑ X ∑ Y / n
− (∑ X ) / n)(∑ Y − (∑ Y )
2

2

2

/n

)

− 0,31824 − (31,50000 )(− 0,04885) / 7

{204,75000 − (31,50000) / 7}{0,00049 − (− 0,04885) / 7}
2

2

= -0,99998

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11.

Kurva dan perhitungan kalibrasi kofein dengan
menggunakan metode ratio spectra zero-crossing pada
derivat pertama λ 272 nm dengan Δλ 4 nm (parasetamol 10
µg/mL sebagai divisor)

0,05
0,045

Nilai amplitudo

0,04
0,035
0,03
0,025
0,02
0,015
0,01
0,005
0
0

0,5

1

1,5

2

2,5

3

Konsentrasi (μg/mL)
No.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Jumlah
Mean
a =

X
0,00000
0,40000
0,80000
1,20000
1,60000
2,00000
2,40000
8,40000
1,20000

Y
0,00000
0,00677
0,01433
0,02153
0,02900
0,03604
0,04304
0,15071
0,02153

XY
0,00000
0,00271
0,01146
0,02584
0,04640
0,07208
0,10330
0,26178
0,03740

X2
0,00000
0,16000
0,64000
1,44000
2,56000
4,00000
5,76000
14,56000
2,08000

Y2
0,00000
0,00005
0,00021
0,00046
0,00084
0,00130
0,00185
0,00471
0,00067

∑ XY − ∑ X ∑ Y / n
∑ X − (∑ X ) / n
2

2

− 0,26178 − (8,40000)(0,15071) / 7
2
14,56000 − (8,40000 ) / 7
= 0,01807

=

Y =a X+b

b = Y −aX
= 0,02153 – (0,01807)(1,20000)
= – 0,00015

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. (Lanjutan)
Maka persamaan garis regresinya adalah: Y = 0,01807 X – 0,00015
r=

=

(∑ X 2

∑ XY − ∑ X ∑ Y / n
− (∑ X ) / n)(∑ Y − (∑ Y )
2

2

2

/n

)

− 0,26178 − (8,40000)(0,15071) / 7

{14,56000 − (8,40000) / 7}{0,00471 − (0,15071) / 7}
2

2

= 0,99993

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 12. Contoh Perhitungan LOD dan LOQ
Y = -0,00091X +0,00000
Slope = -0,00091
Konsentrasi
Nilai
No
(µg/mL)
Amplitudo
X
Y
1
0,0000
0,00000
2
2,50000
-0,00227
3
5,00000
-0,00459
4
7,50000
-0,00686
5
10,00000
-0,00919
6
12,50000
-0,01144
7
15,00000
-0,01370
Jumlah
-0,04805

SD

=

=

∑ (Y − Yi)

Yi

Y-Yi

0,0000
-0,00239
-0,00458
-0,00686
-0,00915
-0,01144
-0,01373
-0,00481

0,00000
0,00002
-0,00001
0,00000
-0,00004
0,00000
0,00003

(Y-Yi)2x10-12
8,16327
400,00000
165,30612
18,36735
1487,75510
2,04082
661,22449
2742,85714

2

n−2

2742,85714 x10 −12
5

= 0,00002

LOD

LOQ

3,3 x SD
slope
3,3 x 0,00002
=
− 0,00091
= -0,08448 µg/mL
= 0,08448 µg/mL
=

10 x SD
slope
10 x 0,00002
=
− 0,00091
= -0,25601 µg/mL
= 0,25601 µg/mL
=

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 13. Hasil perhitungan LOD dan LOQ
Metode Zero-crossing
Zat
Parasetamol
Ibuprofen
Kofein

Slope
-0,00091
-0,00072
-0,00163

Standar Deviasi
0,00002
0,00002
0,00003

LOD
(µg/mL)
0,08448
0,07997
0,06302

LOQ
(µg/mL)
0,25601
0,24235
0,19096

LOD
(µg/mL)
0,12819
0,07556
0,03731

LOQ
(µg/mL)
0,38846
0,22896
0,11306

Metode Ratio Spectra Zero-crossing
Zat
Parasetamol
Ibuprofen
Kofein

Slope
-0,01249
-0,00156
0,01807

Standar Deviasi
0,00049
0,00004
0,00020

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14. Contoh perhitungan kadar parasetamol, ibuprofen dan kofein
pada sediaan tablet
Berat 20 tablet adalah 15807,1 mg
Ditimbang analit setara dengan 100 mg parasetamol, maka jumlah analit yang
ditimbang adalah
=

100 mg
x 15807,1 mg
20 x 350 mg

= 225,816 mg
Kemudian dihitung kesetaraan ibuprofen yang terkandung dalam 225,816 mg
=

225,816 mg
x (20 x 200 mg)
15807,1 mg

= 57,14293
Kemudian dihitung kesetaraan kofein yang terkandung dalam 225,816 mg
=

225,816 mg
x (20 x 50 mg)
15807,1 mg

= 14,28573
Dilarutkan dengan dapar fosfat pH 7,2 dalam labu tentukur 250 ml sampai garis
tanda. Larutan kemudian dihomogenkan dengan sonicator selama 15 menit.
Larutan kemudian disaring, lebih kurang 25 ml filtrat pertama dibuang. Filtrat
selanjutnya ditampung. Dipipet 1,25 mL filtrat tersebut, dimasukkan kedalam labu
50 mL. Larutan ini selanjutnya digunakan untuk analisis.
Konsentrasi parasetamol
=

100 mg 1,25 mL
x
x 1000
50 mL
250 mL

= 10 µg/mL
Konsentrasi ibuprofen
=

57,14293 mg 1,25 mL
x
x 1000
250 mL
50 mL

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14. (Lanjutan)
= 5,714 µg/mL
Konsentrasi kofein
=

14,28573 mg 1,25 mL
x
x 1000
250 mL
50 mL

=1,429 µg/mL
Misal berat yang ditimbang adalah 225,5 mg, maka konsentrasi sesuai klaim
adalah
Parasetamol
=

225,5
x 10 µg/mL
225,816

= 9,986 µg/mL
Ibuprofen
=

225,5
x 5,714µg/mL
225,816

= 5,706 µg/mL
Kofein
=

225,5
x 1,429 µg/mL
225,816

= 1,427 µg/mL

Konsentrasi hitung dihitung dari persamaan kurva kalibrasi
Sebagai contoh nilai amplitudo parasetamol pada derivat pertama pada panjang
gelombang 271,2 nm metode spektrofotometri derivatif zero-crossing, adalah 0,00861
Persamaan kurva kalibrasi untuk parasetamol adalah Y = –0,00091X + 0,00000
Konsentrasi hitung
=

−0,00861 − 0,00000
−0,00091

= 9,46154 µg/mL

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14. (Lanjutan)
Kadar parasetamol
=

9,462
x 100,31% = 95,07%
9,986

Sebagai contoh nilai amplitudo ibuprofen pada derivat pertama pada panjang
gelombang 242,2 nm metode spektrofotometri derivatif zero-crossing, adalah 0,00427
Persamaan kurva kalibrasi untuk ibuprofen adalah Y = −0,00072X + 0,00002
Konsentrasi hitung
=

−0,00427 − 0,00002
−0,00072

= 5,9583 µg/mL

Kadar ibuprofen
=

5,9583
x 99,9% = 104,32%
5,706

Sebagai contoh nilai amplitudo kofein pada derivat pertama pada panjang
gelombang 302,4 nm metode spektrofotometri derivatif zero-crossing, adalah 0,00240
Persamaan kurva kalibrasi untuk kofein adalah Y = −0,00163X −0,00002
Konsentrasi hitung
=

−0,00240 + 0,00002
−0,00163

= 1,4601 µg/mL
Kadar kofein
=

1,460
x 99,04% = 101,34%
1,427

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 15. Spektrum sampel dengan menggunakan metode zero-crossing

PAR (λ 271,2 nm derivat 1 Δλ 4) scalling factor 1

IBU (λ 242,4 nm derivat 1 Δλ 16) scalling factor 1

KOF (λ 302,4 nm derivat 3 Δλ 16) scalling factor 100

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 16. Spektrum sampel dengan menggunakan metode ratio spectra
zero-crossing

PAR (λ 270,4 nm derivat 1 Δλ 2) scalling factor 1

IBU (λ 242 nm derivat 1 Δλ 16) scalling factor 1

KOF (λ 272 nm derivat 1 Δλ4) scalling factor 1

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 17. Kadar parasetamol dalam tablet

Metode
Zerocrossing

Ratio spectra
zero-crossing

Berat
sampel
(mg)
225,5
225,6
225,6
225,8
225,7
225,6
225,5
225,6
225,6
225,8
225,7
225,6

Nilai
Amplitudo
-0,00861
-0,00826
-0,00843
-0,00855
-0,00832
-0,00840
-0,12065
-0,11495
-0,11742
-0,11953
-0,11580
-0,11716

Konsentrasi
sesuai label
(µg/mL)
9,9860
9,9904
9,9904
9,9993
9,9949
9,9904
9,9860
9,9904
9,9904
9,9993
9,9949
9,9904

Konsentrasi
hitung
(µg/mL)
9,4615
9,0769
9,2637
9,3956
9,1429
9,2308
9,6301
9,1737
9,3715
9,5404
9,2418
9,3507

Kadar
(%)
95,04
91,14
93,01
94,25
91,76
92,68
96,73
92,11
94,10
95,71
92,75
93,89

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 18. Kadar ibuprofen dalam tablet

Metode
Zero-crossing

Ratio spectra
zero-crossing

Berat
sampel
(mg)
225,5
225,6
225,6
225,8
225,7
225,6
225,5
225,6
225,6
225,8
225,7
225,6

Nilai
Amplitudo
-0,00427
-0,00435
-0,00438
-0,00421
-0,00444
-0,00429
-0,00939
-0,00955
-0,00963
-0,00924
-0,00976
-0,00941

Konsentrasi
sesuai label
(µg/mL)
5,7060
5,7085
5,7085
5,7136
5,7111
5,7085
5,7060
5,7085
5,7085
5,7136
5,7111
5,7085

Konsentrasi
hitung
(µg/mL)
5,9583
6,0694
6,1111
5,8750
6,1944
5,9861
6,0513
6,1538
6,2051
5,9551
6,2885
6,0641

Kadar
(%)
104,32
106,22
106,95
102,72
108,35
104,76
105,95
107,69
108,59
104,12
110,00
106,12

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 19. Kadar kofein dalam tablet

Metode
Zerocrossing

Ratio spectra
zero-crossing

Berat
sampel
(mg)
225,5
225,6
225,6
225,8
225,7
225,6
225,5
225,6
225,6
225,8
225,7
225,6

Nilai
Amplitudo
-0,00240
-0,00232
-0,00230
-0,00237
-0,00236
-0,00233
0,02579
0,02501
0,02566
0,02604
0,02480
0,02533

Konsentrasi
sesuai label
(µg/mL)
1,4270
1,4276
1,4276
1,4289
1,4283
1,4276
1,4270
1,4276
1,4276
1,4289
1,4283
1,4276

Konsentrasi
hitung
(µg/mL)
1,4601
1,4110
1,3988
1,4417
1,4356
1,4172
1,4355
1,3924
1,4283
1,4494
1,3807
1,4101

Kadar
(%)
101,34
97,89
97,04
99,93
98,54
98,32
99,63
96,60
99,09
100,46
95,74
97,83

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 20. Perhitungan
statistik
kadar
menggunakan metode zero-crossing
No.
1
2
3
4
5
6
Jumlah
Rata-rata

Kadar (Xi) %
95,04
91,14
93,01
94,25
91,76
92,68
557,88
92,98 (X)

(Xi-X)
2,0600
-1,8400
0,0300
1,2700
-1,2200
-0,3000
0,0000
0,0000

parasetamol

dengan

(Xi-X)2
4,2436
3,3856
0,0009
1,6129
1,4884
0,0900
10,8214
1,8036

∑(Xi − X)2
10,8214
�
SD =
=�
= 1,4711
n−1
5
RSD = (1,4711/92,98)x100% = 1,58%

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 6; dk = 5, dari daftar tabel
distribusi t diperoleh nilai t tabel = 4,03
Data ditolak jika t hitung ≥ t tabel atau t hitung ≤ - t tabel
t hitung =

Xi − X

SD/√n

t hitung 1

: 2,0600/0,6006

= 3,4299

t hitung 2

: -1,8400/0,6006

= -3,0636

t hitung 3

: 0,0300/0,6006

= 0,0500

t hitung 4

: 1,2700/0,6006

= 2,1146

t hitung 5

: -1,2200/0,6006

= -2,0313

t hitung 6

: -0,3000/0,6006

= -0,4995

karena semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara :
µ = X ± t tabel x

SD
√n

= 92,98 ± (4,03 x

1,4711
√6

)

= 92,98 ± 2,42 µg/mL

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 21. Perhitungan
statistik
kadar
parasetamol
menggunakan metode ratio spectra zero-crossing
No.
1
2
3
4
5
6
Jumlah
Rata-rata

Kadar (Xi) %
96,73
92,11
94,10
95,71
92,75
93,89
565,2900
94,22 (X)

Xi-X
2,5150
-2,1050
-0,1150
1,4950
-1,4650
-0,3250
0,0000
0,0000

dengan

(Xi-X)2
6,3252
4,4310
0,0132
2,2350
2,1462
0,1056
15,2564
2,5427

∑(Xi − X)2
15,2564
�
SD =
=�
= 1,7468
n−1
5
RSD = (1,7468/94,22)x100% = 1,85%

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 6; dk = 5, dari daftar tabel
distribusi t diperoleh nilai t tabel = 4,03
Data ditolak jika t hitung ≥ t tabel atau t hitung ≤ - t tabel
t hitung =

Xi − X

SD/√n

t hitung 1

: 2,5150/0,7131

= 3,5267

t hitung 2

: -2,1050/0,7131

= -2,9518

t hitung 3

: -0,1150/0,7131

= -0,1613

t hitung 4

: 1,4950/0,7131

= 2,0964

t hitung 5

: -1,4650/0,7131

= -2,0543

t hitung 6

: -0,3250/0,7131

= -0,4557

karena semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara :
µ = X ± t tabel x

SD
√n

= 94,22 ± (4,03 x

1,7468
√6

)

= 94,22 ± 2,87 µg/mL

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 22. Perhitungan statistik kadar ibuprofen dengan menggunakan
metode zero-crossing
No.
1
2
3
4
5
6
Jumlah
Rata-rata

Kadar (Xi) %
104,32
106,22
106,95
102,72
108,35
104,76
633,32
105,55
∑(Xi −X)2

SD = �

n−1

Xi-X
-1,2333
0,6667
1,3967
-2,8333
2,7967
-0,7933
0,0000
0,0000
20,3947

=�

5

(Xi-X)2
1,5211
0,4444
1,9507
8,0278
7,8213
0,6294
20,3947
3,3991

=2,0196

RSD = (2,0196/105,55)x100% = 1,91%
Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 6; dk = 5, dari daftar tabel
distribusi t diperoleh nilai t tabel = 4,03
Data ditolak jika t hitung ≥ t tabel atau t hitung ≤ - t tabel
t hitung =

Xi − X

SD/√n

t hitung 1

: -1,2333/0,8245

= -1,4958

t hitung 2

: 0,6667/0,8245

= 0,8086

t hitung 3

: 1,3967/0,8245

= 1,6939

t hitung 4

: -2,8333/0,8245

= -3,4364

t hitung 5

: 2,7967/0,8245

= 3,3919

t hitung 6

: -0,7933/0,8245

= -0,9622

karena semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara :
µ = X ± t tabel x

SD
√n

= 105,55 ± (4,03 x

2,0196
√6

)

= 105,55 ± 3,32 µg/mL

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 23. Perhitungan statistik kadar ibuprofen dengan menggunakan
metode ratio spectra zero-crossing
No.
1
2
3
4
5
6
Jumlah
Mean

Kadar (Xi) %
105,95
107,69
108,59
104,12
110,00
106,12
642,47
107,07

Xi-X
-1,1283
0,6117
1,5117
-2,9583
2,9217
-0,9583
0,0000
0,0000

(Xi-X)2
1,2731
0,3741
2,2851
8,7517
8,5361
0,9184
22,1387
6,3253

∑(Xi − X)2
22,1387
�
SD =
=�
= 2,1042
n−1
5
RSD = (2,1042/107,07)x100% = 1,97%

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 6; dk = 5, dari daftar tabel
distribusi t diperoleh nilai t tabel = 4,03
Data ditolak jika t hitung ≥ t tabel atau t hitung ≤ - t tabel
t hitung =

Xi − X

SD/√n

t hitung 1

: -1,1283/0,8590

= -1,3135

t hitung 2

: 0,6117/0,8590

= 0,7120

t hitung 3

: 1,5117/0,8590

= 1,7597

t hitung 4

: -2,9583/0,8590

= -3,4438

t hitung 5

: 2,9217/0,8590

= 3,4011

t hitung 6

: -0,9583/0,8590

= -1,1156

karena semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara :
µ = X ± t tabel x

SD
√n

= 107,07 ± (4,03 x

2,1042
√6

)

= 107,07 ± 3,46 µg/mL

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 24. Perhitungan statistik kadar kofein dengan menggunakan
metode zero-crossing
No.
1
2
3
4
5
6
Jumlah
Mean

Kadar (Xi) %
101,34
97,89
97,04
99,93
98,54
98,32
593,06
98,84

Xi-X
2,4967
-0,9533
-1,8033
1,0867
-0,3033
-0,5233
0,0000
0,0000

(Xi-X)2
6,2333
0,9088
3,2520
1,1808
0,0920
0,2739
11,9409
3,4117

∑(Xi − X)2
11,9409
�
SD =
=�
= 1,5454
n−1
5
RSD = (1,5454/98,84)x100% = 1,56%

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 6; dk = 5, dari daftar tabel
distribusi t diperoleh nilai t tabel = 4,03
Data ditolak jika t hitung ≥ t tabel atau t hitung ≤ - t tabel
t hitung =

Xi − X

SD/√n

t hitung 1

: 2,4967/0,6309

= 3,9573

t hitung 2

: -0,9533/0,6309

= -1,5111

t hitung 3

: -1,8033/0,6309

= -2,8584

t hitung 4

: 1,0867/0,6309

= 1,7224

t hitung 5

: -0,3033/0,6309

= -0,4808

t hitung 6

: -0,5233/0,6309

= -0,8295

karena semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara :
µ = X ± t tabel x

SD
√n

= 98,84 ± (4,03 x

1,5454
√6

)

= 98,84 ± 2,54 µg/mL

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 25. Perhitungan statistik kadar kofein dengan menggunakan
metode ratio spectra zero-crossing
No.
1
2
3
4
5
6
Jumlah
Mean

Kadar (Xi) %
99,63
96,60
99,09
100,46
95,74
97,83
589,35
98,23

Xi-X
1,4050
-1,6250
0,8650
2,2350
-2,4850
-0,3950
0,0000
0,0000

(Xi-X)2
1,9740
2,6406
0,7482
4,9952
6,1752
0,1560
16,6894
4,7684

∑(Xi − X)2
16,6894
�
SD =
=�
= 1,8270
n−1
5
RSD = (1,8270/98,23)x100% = 1,86%

Jika taraf kepercayaan 99% dengan nilai α = 0,01; n = 6; dk = 5, dari daftar tabel
distribusi t diperoleh nilai t tabel = 4,03
Data ditolak jika t hitung ≥ t tabel atau t hitung ≤ - t tabel
t hitung =

Xi − X

SD/√n

t hitung 1

: 1,4050/0,7459

= 1,8837

t hitung 2

: -1,6250/0,7459

= -2,1787

t hitung 3

: 0,8650/0,7459

= 1,1597

t hitung 4

: 2,2350/0,7459

= 2,9965

t hitung 5

: -2,4850/0,7459

= -3,3317

t hitung 6

: -0,3950/0,7459

= -0,5296

karena semua data diterima, maka kadar sebenarnya terletak antara :
µ = X ± t tabel x

SD
√n

= 98,23 ± (4,03 x

1,8270
√6

)

= 98,23 ± 3,01 µg/mL

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 26. Contoh perhitungan uji perolehan kembali (%)
Berat 20 tablet adalah 15807,1 mg
Perolehan 80%
Perhitungan untuk penimbangan
Parasetamol
=

80
x100 = 80 mg
100

80 mg parasetamol tersebut berasal 70% dari tablet dan 30% berasal dari baku
parasetamol
Maka sampel yang ditimbang setara dengan
=

70
x 80 mg = 56 mg
100

Oleh karena itu sampel yang ditimbang adalah
=

56 mg
x 15807,1 mg = 126,457 mg
20 x 350 mg

Baku parasetamol yang ditambahkan adalah
=

30
x 80 mg = 24 mg
100

Ibuprofen
Ibuprofen yang terdapat dalam 126,457 mg sampel
=

126,457
x (20 x 200 mg) = 32 mg
15807,1

Baku ibuprofen yang ditambahkan adalah
=

80 mg
30
x 200 mg x
= 13,71 mg
350 mg
100

Kofein
Ibuprofen yang terdapat dalam 126,457 mg sampel
=

126,457
x (20 x 50mg) = 8 mg
15807,1

Baku ibuprofen yang ditambahkan adalah
=

80 mg
30
x 50 mg x
= 3,43 mg
100
350 mg

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 26. (Lanjutan)
Perhitungan untuk memperoleh perolehan kembali (% recovery)
=

A−

B
C x D x E x 100%
FxG

A= jumlah zat saat pengukuran (sampel + bahan baku)
B= sampel yang ditimbang
C= sampel setara 70% dari 80 mg parasetamol
D= 56 mg (70% dari 80 mg)
E= persentase kadar rata-rata parasetamol yang didapatkan
F= jumlah baku yang ditimbang
G= kadar baku dari sertifikat analisis
Contoh
=

76,4725 − (

126,4 mg
x 56 mg x 92,98 %)
126,457 mg
x 100%
24,1 mg x 100,07%

= 101,28%

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 26. (Lanjutan)
Perolehan 100%
Parasetamol
=

100
x100 = 100 mg
100

100 mg parasetamol tersebut berasal 70% dari tablet dan 30% berasal dari baku
parasetamol
Maka sampel yang ditimbang setara dengan
=

70
x 100 mg = 70 mg
100

Oleh karena itu sampel yang ditimbang adalah
=

70 mg
x 15807,1 mg = 158,071 mg
20 x 350 mg

Baku parasetamol yang ditambahkan adalah
=

30
x 100 mg = 30 mg
100

Ibuprofen
Ibuprofen yang terdapat dalam 158,071 mg sampel
=

158,071
x (20 x 200 mg) = 40 mg
15807,1

Baku ibuprofen yang ditambahkan adalah
=

30
100 mg
x 200 mg x
= 17,14 mg
100
350 mg

Kofein
Ibuprofen yang terdapat dalam 158,071 mg sampel
=

158,071
x (20 x 50mg) = 10 mg
15807,1

Baku ibuprofen yang ditambahkan adalah
=

100 mg
30
x 50 mg x
= 4,29 mg
350 mg
100

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 26. (Lanjutan)
Perhitungan untuk memperoleh perolehan kembali (% recovery)
=

A−

B
C x D x E x 100%
FxG

A= jumlah zat saat pengukuran (sampel + bahan baku)
B= sampel yang ditimbang
C= sampel setara 70% dari 100 mg parasetamol
D= jumlah parasetamol dalam sampel setara 70 %
E= persentase kadar rata-rata parasetamol yang didapatkan
F= jumlah baku yang ditimbang
G= kadar baku dari sertifikat analisis
Contoh

=

95,9619 − (

158,8 mg
x 70 mg x 92,98 %)
158,071 mg
x 100%
30 mg x 100,07%

= 101,84%

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 26. (Lanjutan)
Perolehan 120%
Parasetamol
=

120
x100 = 120 mg
100

120 mg parasetamol tersebut berasal 70% dari tablet dan 30% berasal dari baku
parasetamol
Maka sampel yang ditimbang setara dengan
=

70
x 120 mg = 84 mg
100

Oleh karena itu sampel yang ditimbang adalah
=

84 mg
x 15807,1 mg = 189,685 mg
20 x 350 mg

Baku parasetamol yang ditambahkan adalah
=

30
x 120 mg = 36 mg
100

Ibuprofen
Ibuprofen yang terdapat dalam 189,685 mg sampel
=

189,685
x (20 x 200 mg) = 48 mg
15807,1

Baku ibuprofen yang ditambahkan adalah
=

30
120 mg
x 200 mg x
= 20,57 mg
100
350 mg

Kofein
Ibuprofen yang terdapat dalam 189,685 mg sampel
=

189,685
x (20 x 50mg) = 12 mg
15807,1

Baku ibuprofen yang ditambahkan adalah
=

80 mg
30
x 50 mg x
= 5,14 mg
350 mg
100

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 26. (Lanjutan)
Perhitungan untuk memperoleh perolehan kembali (% recovery)
=

A−

B
C x D x E x 100%
FxG

A= jumlah zat saat pengukuran (sampel + bahan baku)
B= sampel yang ditimbang
C= sampel setara 70% dari 120 mg parasetamol
D= jumlah parasetamol dalam sampel setara 70 %
E= persentase kadar rata-rata parasetamol yang didapatkan
F= jumlah baku yang ditimbang
G= kadar baku dari sertifikat analisis
Contoh
=

113,8663 − (

189,9 mg
x 84 mg x 92,98 %)
189,685 mg
x 100%
36 mg x 100,07%

= 99,03%

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 27. Spektrum uji perolehan kembali metode zero-crossing

Parasetamol 80%

Ibuprofen 80%

Kofein 80%

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 27. (Lanjutan)

Parasetamol 100%

Ibuprofen 100%

Kofein 100%

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 27. (Lanjutan)

Parasetamol 120%

Ibuprofen 120%

Kofein 120%

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 28. Spektrum uji perolehan kembali metode ratio spectra zerocrossing

Parasetamol 80%

Ibuprofen 80 %

Kofein 80%

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 28. (Lanjutan)

Parasetamol 100%

Ibuprofen 100%

Kofein 100%

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 28. (Lanjutan)

Parasetamol 120%

Ibuprofen 120%

Kofein 120%

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 29.

Hasil uji perolehan kembali (%) parasetamol dengan
menggunakan metode zero-crossing dan ratio spectra zerocrossing

Metode Zero-crossing

No

1
2
3
4
5
6
7
8
9
Mean

Konsentrasi
(%)
80

100

120

Jumlah
Nilai
Amplitudo
-0,006999
-0,007000
-0,006970
-0,008782
-0,008555
-0,008780
-0,010400
-0,010420
-0,010420

Setelah
penambahan
baku (mg)
76,47252
76,48345
76,15553
95,96190
93,48064
95,94004
113,64772
113,86633
113,86633

Sebelum
penambahan
baku (mg)
52,04533
52,12768
52,12768
65,38617
65,34499
65,30381
78,19173
78,19173
78,19173

Berat
sampel
(mg)
126,4
126,6
126,6
158,8
158,7
158,6
189,9
189,9
189,9

Baku yang
ditambahkan (mg)
24,1
24,1
24,1
30
30
30
36
36
36

Persen
peroleha
kembali
(%)
101
101
100
102
94
100
98
99
98
99,49

Metode Ratio Spectra Zero-crossing

No

1
2
3
4
5
6
7
8
9
Mean

Konsentrasi
(%)
80

100

120

Jumlah
Nilai
Amplitudo
-0,09485
-0,09599
-0,09599
-0,12009
-0,11785
-0,12001
-0,14290
-0,14290
-0,14312

Setelah
penambahan
baku (mg)
75,63353
76,54610
76,54610
95,83800
94,04490
95,77316
114,09727
114,09727
114,27338

Sebelum
penambahan
baku (mg)
52,12768
52,04533
52,12768
65,38617
65,34500
65,30382
78,31525
78,19173
78,19173

Berat
sampel
(mg)
126,6
126,4
126,6
158,8
158,7
158,6
190,2
189,9
189,9

Baku yang
ditambahkan (mg)
24,1
24,1
24,1
30
30
30
36
36
36

Persen
peroleha
kembali
(%)
97
102
101
101
96
101
99
100
100
99,78

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 30.

Hasil uji perolehan kembali (%) ibuprofen dengan
menggunakan metode zero-crossing dan ratio spectra zerocrossing

Metode Zero-crossing

No

1
2
3
4
5
6
7
8
9
Mean

Konsentrasi
(%)
80

100

120

Jumlah
Nilai
Amplitudo
-0,003431
-0,003430
-0,003420
-0,004301
-0,004182
-0,004260
-0,005070
-0,005060
-0,005060

Setelah
penambahan
baku (mg)
48,11737
48,10345
47,96419
60,23276
58,57560
59,66180
70,94164
70,80239
70,80239

Sebelum
penambahan
baku (mg)
33,86761
33,81419
33,81419
42,41471
42,38800
42,36129
50,72143
50,72143
50,72143

Berat
sampel
(mg)
126,8
126,6
126,6
158,8
158,7
158,6
189,9
189,9
189,9

Baku yang
ditambahkan (mg)
13,7
13,7
13,7
17,1
17,1
17,1
20,7
20,7
20,7

Persen
peroleha
kembali
(%)
104
104
103
104
95
101
98
97
98
100,35

Metode Ratio Spectra Zero-crossing

No

1
2
3
4
5
6
7
8
9
Mean

Konsentrasi
(%)
80

100

120

Jumlah
Nilai
Amplitudo
-0,00756
-0,00761
-0,00754
-0,00946
-0,00914
-0,00939
-0,01117
-0,01117
-0,01117

Setelah
penambahan
baku (mg)
48,72199
49,04207
48,59396
60,88477
58,83631
60,43667
71,83128
71,70325
71,70325

Sebelum
penambahan
baku (mg)
34,35533
34,24696
34,30114
43,02552
42,89005
42,97133
51,45185
51,45185
51,45185

Berat
sampel
(mg)
126,8
126,4
126,6
158,8
158,3
158,6
189,9
189,9
189,9

Baku yang
ditambahkan (mg)
13,7
13,7
13,7
17,1
17,1
17,1
20,7
20,7
20,7

Persen
peroleha
kembali
(%)
105
108
104
104
93
102
98
98
98
101,2

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 31.

Hasil uji perolehan kembali (%) kofein dengan
menggunakan metode zero-crossing dan ratio spectra zerocrossing

Metode Zero-crossing

No

1
2
3
4
5
6
7
8
9
Mean

Konsentrasi
(%)
80

100

120

Jumlah
Nilai
Amplitudo
-0,00189
-0,00190
-0,00189
-0,00247
-0,00221
-0,00247
-0,00300
-0,00259
-0,00271

Setelah
penambahan
baku (mg)
11,45733
11,51860
11,45733
15,01094
13,41794
15,01094
18,25821
15,74617
16,48140

Sebelum
penambahan
baku (mg)
7,91614
7,92239
7,91614
9,92958
9,89831
9,91707
11,89300
11,84923
11,85549

Berat
sampel
(mg)
126,6
126,7
126,6
158,8
158,3
158,6
190,2
189,5
189,6

Baku yang
ditambahkan (mg)
3,4
3,4
3,4
4,4
4,4
4,4
5,3
5,3
5,3

Persen
peroleha
kembali
(%)
104
106
104
115
80
118
120
73
87
100,61

Metode Ratio Spectra Zero-crossing

No

1
2
3
4
5
6
7
8
9
Mean

Konsentrasi
(%)
80

100

120

Jumlah
Nilai
Amplitudo
0,02050
0,02050
0,02061
0,02680
0,02520
0,02514
0,03168
0,03082
0,03047

Setelah
penambahan
baku (mg)
11,42984
11,42984
11,49073
14,91721
14,03153
13,99832
17,61854
17,14249
16,94875

Sebelum
penambahan
baku (mg)
7,92865
7,91614
7,91614
9,92958
9,89832
9,92333
11,89300
11,84923
11,85549

Berat
sampel
(mg)
126,8
126,6
126,6
158,8
158,3
158,7
190,2
189,5
189,6

Baku yang
ditambahkan (mg)
3,4
3,4
3,4
4,4
4,4
4,4
5,3
5,3
5,3

Persen
peroleha
kembali
(%)
103
103
105
113
94
93
108
100
96
101,63

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 32. Tabel distribusi t
α
df
1
2
3
4
5

0,1
3,0777
1,8856
1,6377
1,5332
1,4759

6
7
8
9
10

0,05

0,025

0,01

0,005

0,0005

6,3138
2,9200
2,3534
2,1318
2,0150

12,706
4,3027
3,1824
2,7764
2,5706

31,821
6,9646
4,5407
3,7469
3,3649

63,657
9,9248
5,8409
4,6041
4,0321

636,62
31,599
12,924
8,6103
6,8688

1,4398
1,4149
1,3968
1,3830
1,3722

1,9432
1,8946
1,8595
1,8331
1,8125

2,4469
2,3646
2,3060
2,2622
2,2281

3,1427
2,9980
2,8965
2,8214
2,7638

3,7074
3,4995
3,3554
3,2498
3,1693

5,9588
5,4079
5,0413
4,7809
4,5869

11
12
13
14
15

1,3634
1,3562
1,3502
1,3450
1,3406

1,7959
1,7823
1,7709
1,7613
1,7531

2,2010
2,1788
2,1604
2,1448
2,1314

2,7181
2,6810
2,6503
2,6245
2,6025

3,1058
3,0545
3,0123
2,9768
2,9467

4,4370
4,3178
4,2208
4,1405
4,0728

16
17
18
19
20

1,3368
1,3334
1,3304
1,3277
1,3253

1,7459
1,7396
1,7341
1,7291
1,7247

2,1199
2,1098
2,1009
2,0930
2,0860

2,5835
2,5669
2,5524
2,5395
2,5280

2,9208
2,8982
2,8784
2,8609
2,8453

4,0150
3,9651
3,9216
3,8834
3,8495

21
22
23
24
25

1,3232
1,3212
1,3195
1,3178
1,3163

1,7207
1,7171
1,7139
1,7109
1,7081

2,0796
2,0739
2,0687
2,0639
2,0595

2,5176
2,5083
2,4999
2,4922
2,4851

2,8314
2,8188
2,8073
2,7969
2,7874

3,8193
3,7921
3,7676
3,7454
3,7251

26
27
28
29
30

1,3150
1,3137
1,3125
1,3114
1,3104

1,7056
1,7033
1,7011
1,6991
1,6973

2,0555
2,0518
2,0484
2,0452
2,0423

2,4786
2,4727
2,4671
2,4620
2,4573

2,7787
2,7707
2,7633
2,7564
2,7500

3,7066
3,6896
3,6739
3,6594
3,6460

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 33. Sertifikat analisis bahan baku parasetamol, ibuprofen dan
kofein

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 33. (Lanjutan)

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 33. (Lanjutan)

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 33. (Lanjutan)

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 33. (Lanjutan)

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 33. (Lanjutan)

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 34. Publikasi Jurnal

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 34. (Lanjutan)

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 34. (Lanjutan)

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 34. (Lanjutan)

Universitas Sumatera Utara