Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Fraksi-Fraksi Daun Beluntas (Pluchea indica (L.) Less.) Terhadap Bakteri Escherichia colidan Bacillus subtilis

Lampiran 1. Identifikasi Sampel

41
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Gambar tumbuhan dan simplisia daun beluntas (Pluchea indica (L.)
Less.)

Tumbuhan beluntas

Simplisia daun beluntas

42
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Gambar mikroskopik serbuk simplisia daun beluntas (Pluchea
indica (L.) Less.

1
2


3

Keterangan : 1. Stomata tipe anomositik
2. Pembuluh kayu berpenebalan spiral
3. Rambut penutup

43
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. Bagan Penelitian

1. Pembuatan serbuk simplisia, karakterisasi simplisia dan skrining fitokimia
Daun Beluntas
Dicuci dari pengotor hingga bersih
Ditiriskan
Ditimbang
Dikeringkan di lemari pengering
Simplisia
Dilakukan uji makroskopik
Dihaluskan

Serbuk simplisia

Karakterisasi simplisia :
- Mikroskopik
- Penetapan kadar air
- Penetapan kadar sari
larut air
- Penetapan kadar sari
larut etanol
- Penetapan kadar abu
total
- Penetapan kadar abu
yang tidak larut asam

Skrining fitokimia :
- Pemeriksaan alkaloida
- Pemeriksaan flavonoida
- Pemeriksaan glikosida
- Pemeriksaan saponin
- Pemeriksaan tanin

- Pemeriksaan
steroid/triterpenoid

44
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. (Lanjutan)

2. Pembuatan ekstark etanol , fraksi n-heksana, fraksi etilasetat dan fraksi air
daun beluntas (Pluchea indica (L.) Less.)
Serbuk simplisia 400 g
Dimaserasi dengan etanol 96 %
Maserat
Diuapkan dengan rotary evaporator
Dikeringkan dengan freeze dryer
Ekstrak etanol kental 50,51 g
Ditimbang 30 g untuk fraksinasi
Dilarutkan dengan aquadest
Difraksinasi dengan n-heksana


Dipekatkan
Fraksi n-heksana

Uji aktivitas antibakteri

Fraksi air

Dipekatkan

Difraksinasi dengan etilasetat

Fraksi n-heksana
kental 6,80 g
Fraksi etilasetat
Dipekatkan
Fraksi etilasetat kental 6,28 g

Fraksi air (sisa)
Dipekatkan
Fraksi air kental 8,25 g


Uji aktivitas antibakteri

Hasil

45
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. (Lanjutan)

3. Pengujian aktivitas antibakteri
Biakan murni bakteri
Diambil dengan jarum ose steril
Ditanam pada media NA miring
Diinkubasi pada suhu 35 + 2oC selama 18-24 jam
Stok kultur bakteri
Diambil 1 ose
Disuspensikan ke dalam 10 ml nutrient broth
Diukur kekeruhan suspense bakteri menggunakan
spektrofotometer pada panjang gelombang 580 nm

sampai diperoleh nilai transmitan 25-27%
Inokulum bakteri
Dimasukkan 0,1 ml inokulum ke dalam cawan petri
Dituang 20 ml media NA steril ke dalam cawan petri
Dihomogenkan dan dibiarkan hingga memadat
Media padat
Diletakkan beberapa pencadang kertas yang telah
direndam dalam ekstrak dengan berbagai konsentrasi
Diinkubasi pada suhu 35 + 2oC selama 18-24 jam
Diukur diameter hambat di sekitar pencadang kertas
Hasil

46
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Perhitungan hasil penetapan kadar

a. Perhitungan penetapan kadar air
Kadar air = volume air (ml)
X 100 %

berat sampel (g)

1. Sampel 1
Berat samel
Volume air
Kadar air

2. Sampel
Berat sampel
Volume air
Kadar air

3. Sampel 3
Berat sampel
Volume air
Kadar air

Kadar air rata – rata

=5g

= 0,35 ml
= 0,35
X 100 %
5
=7%
=5g
= 0,35 ml
= 0,35
X 100 %
5
=7%
=5g
= 0,4 ml
= 0,4
X 100 %
5
=8%
= 7%+7%+8%
3
= 7,33 %


47
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (Lanjutan)

b. Perhitungan penetapan kadar sari yang larut dalam air
Kadar sari larut dalam air =
Berat simplisia

1. Kadar sari larut dalam air I
Berat sampel
Berat sari
Kadar sari larut dalam air

Berat sari
20

X


100

X 100 %

= 5,009 g
= 0,214 g
= 0,214100
5,009 X 20 X 100 %
= 21,361 %

2. Kadar sari larut dalam air II
Berat sampel
Berat sari
Kadar sari larut dalam air

= 5,007 g
= 0,193 g
= 0,193100
X 100 %
X

5,007
20
= 19,273 %

3. Kadar sari larut dalam air III
Berat sampel
Berat sari
Kadar sari larut dalam air

= 5,042 g
= 0,214 g
= 0,214100
X 100 %
X
5,042
20
= 21,221 %

Kadar sari larut dalam air rata – rata = 21,361%+19,273%+21,221%
3
= 20,618 %

48
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (Lanjutan)

c.

Perhitungan penetapan kadar sari yang larut dalam etanol

Kadar sari larut dalam etanol =
Berat simplisia
20

Berat sari100

X

X 100 %

1. Kadar sari larut dalam etanol I
Berat Cawan

= 49,700 g

Berat Sampel

= 5,015 g

Berat sari

= 0,176 g

Kadar sari larut dalam etanol

= 0,176100
X 100 %
5,015 X 20

=

,
,

x

x 100%

= 17,547 %

2. Kadar sari larut dalam etanol II
Berat Sampel

= 5,069 g

Berat sari

= 0,143 g

Kadar sari larut dalam etanol

= 0,143100
5,069
20
= 14,105 %

3. Kadar sari larut dalam etanol III
Berat Sampel

= 5,009 g

Berat sari

= 0,173 g

Kadar sari larut dalam etanol

= 0,173100
X
X 100 %
5,009
20
= 17,268 %

Kadar sari larut dalam etanol rata-rata

= 17,54%+14,105%+17,268%
3
= 16,3067 %

49
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (Lanjutan)

d. Perhitungan penetapan kadar abu total
Kadar abu total= Berat abu total
Berat simplisia
1. Sampel I
Berat simplisia
Berat abu
Kadar abu total
=

,
,

x 100%

2. Sampel II
Berat simplisia
Berat abu
Kadar abu total
=

,

,

x100%

3.Sampel III
Berat simplisia
Berat abu
Kadar abu total

Kadar abu total rata-rata

X 100 %

= 2,0035 g
= 0,1272 g
= 0,1272
X 100 %
2,0035
= 6,3489 %
= 2,0282 g
= 0,1397g
= 0,1397
X 100 %
2,0282
= 6,8879 %
= 2,0091 g
= 0,1412 g
= 0,1412
X 100 %
2,0091
= 7,0282 %
= 6,389%+6,8879%+7,028%
3
= 6,7459 %

50
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. (Lanjutan)

e.

Perhitungan Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Dalam Asam

Kadar abu tidak larut dalam asam =

1. Sampel I
Berat simplisia
Berat abu
Kadar abu total

2. Sampel II
Berat simplisia
Berat abu
Kadar abu total

3.Sampel III
Berat simplisia
Berat abu
Kadar abu total

Berat abu
Berat simplisia X 100 %

= 2,0041 g
= 0,0199 g
= 0,0199
X 100 %
2,0041
= 0,99 %
= 2,0051 g
= 0,0210 g
= 0,0210
X 100 %
2,0051
= 1,04 %
= 2,0011 g
= 0,0205 g
= 0,0205 X 100 %
2,0011
= 1,02%

Kadar abu tidal larut asam rata-rata = 0,99%+1,04%+1,02%
3
= 1,017 %

51
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun beluntas
terhadap bakteri Eschericia coli

500

400

200

100

75

300

50

25

Blanko

52
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol daun beluntas
terhadap bakteri Bacillus subtilis

500

400
200

300

100

75

50

25

Blanko

53
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi etilasetat daun beluntas
terhadap bakteri Eschericia coli

500

200

400

300

100

75

50
25

Blanko

54
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi etilasetat daun beluntas
terhadap bakteri Bacillus subtilis

500

400

200

300

100

75

50

25

Blanko

55
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10. iGambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksana daun
beluntas terhadap bakteri Eschericia coli

500

400

100

200

Blanko

300

56
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. iGambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksana daun
beluntas terhadap bakteri Bacillus subtilis

500

400

200

300

100

Blanko

57
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 12.iGambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi air daun beluntas
terhadap bakteri Eschericia coli

500

400

200

100

Blanko
300

58
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 13.iGambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi air daun beluntas
terhadap bakteri Bacillus subtilis

500

400

200

100

Blanko

300

59
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol DaunBeluntas dan Fraksinya Terhadap Bakteri Escherichia coli
Kons.
mg/ml

Diameter Daerah Hambatan (mm)
D1

Ekstrak etanol
D2
D3

D*

D1

Fraksi n- heksana
D2
D3

D*

D1

Fraksi etilasetat
D2
D3

D*

D1

Fraksi air
D2
D3

D*

500

16

16

16,05

16

10,25

12

11,10

11,11

17,75

18

19,50

18,41

12

12,10

12,20

12,10

400

14,05

14,75

14,35

14,38

10

10,25

9,30

9,85

17,10

17,75

17,80

17,55

11,50

11

10,75

11,08

300

13,95

12,95

13,25

13,38

9

8,75

8,90

8,88

17,10

17,50

17,20

17,26

10

9,75

9,75

9,83

200

12

12,35

12,75

12,36

8,75

8

8,50

8,41

17,50

17

17

17,16

9

9

8,75

8,92

100

11,70

11

10,55

11,08

8,40

8,30

8

8,23

15,25

15

16

15,42

8,25

8

7,75

8

75

10

9,50

10

9,83

-

-

-

-

12,30

12

12,50

12,27

-

-

-

-

50

8,75

9

8

8,58

-

-

-

-

11,50

11

10,25

10,92

-

-

-

-

25

8

8

8

8

-

-

-

-

8

9,50

9

8,83

-

-

-

-

Blanko

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Keterangan : D*
= diameter rata-rata
(-)
= tidak ada daya hambat
Blanko = dimethyl sulfoxide (DMSO)

60
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 15. Hasil Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Beluntas dan Fraksinya Terhadap Bakteri Bacillus subtilis
Kons.
mg/ml

Diameter Daerah Hambatan (mm)
D1

Ekstrak etanol
D2
D3

D*

D1

Fraksi n- heksana
D2
D3

D*

D1

Fraksi etilasetat
D2
D3

D*

D1

Fraksi air
D2
D3

D*

500

17,70

17,10

17,15

17,31

11

10,50

10,20

10,56

18,10

18

18

18,03

9,10

8,75

8,75

8,87

400

14,05

14,75

14,35

15,05

10,10

10,20

9,10

9,80

17,50

17,50

17,75

17,50

8,50

7,50

7,50

7,83

300

13,95

12,95

13,25

14,47

9,5

9,75

9,70

9,55

17

17,75

17,25

17,33

7,25

7,50

7,50

7,41

200

12

12,35

12,75

12,76

9

9,30

9,50

9,26

16,20

16

17

16,40

7,10

7,25

7,25

7,38

100

11,70

11

10,55

10,43

8

8,20

8,30

8,16

14,10

14,20

14

14,10

7

7,05

7,05

7,03

75

10

9,50

10

9,13

-

-

-

-

11,30

12,50

11,25

11,68

-

-

-

-

50

8,75

9

8

8,5

-

-

-

-

10

9,50

11,25

10,25

-

-

-

-

25

8

8

8

8

-

-

-

-

8,65

9

9

8,88

-

-

-

-

Blanko

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

-

Keterangan : D*
= diameter rata-rata
(-)
= tidak ada daya hambat
Blanko = dimethyl sulfoxide (DMSO)

61
Universitas Sumatera Utara

Dokumen yang terkait

Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi N-Heksana, Etilasetat Dan Etanol Rumput Laut Coklat (Sargassum Polycystum C.Agardh) Terhadap Bakteri Escherichia Coli Dan Staphylococcus Aureus

5 45 83

Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Ceplukan (Physalis minima L.) Terhadap Bakteri Shigella dysenteriae, Escherichia coli Dan Salmonella typhimurium

21 148 72

Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi n-Heksana, Etilasetat Dan Etanol Daun Kecapi (Sandoricum koetjape Merr.) Terhadap Beberapa Bakteri Penyebab Penyakit Kulit Secara In Vitro

2 46 111

Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Fraksi-Fraksi Daun Beluntas (Pluchea indica (L.) Less.) Terhadap Bakteri Escherichia colidan Bacillus subtilis

1 47 78

Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Daun Beluntas (pluchea Indica L.) Terhadap Staphylococcus Aureus, Bacillus Subtilis, Dan Pseudomonas Aeruginosa - Ubaya Repository

0 0 1

Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Fraksi-Fraksi Daun Beluntas (Pluchea indica (L.) Less.) Terhadap Bakteri Escherichia colidan Bacillus subtilis

0 0 15

Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Fraksi-Fraksi Daun Beluntas (Pluchea indica (L.) Less.) Terhadap Bakteri Escherichia colidan Bacillus subtilis

0 0 2

Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Fraksi-Fraksi Daun Beluntas (Pluchea indica (L.) Less.) Terhadap Bakteri Escherichia colidan Bacillus subtilis

0 0 3

Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Fraksi-Fraksi Daun Beluntas (Pluchea indica (L.) Less.) Terhadap Bakteri Escherichia colidan Bacillus subtilis

0 0 14

Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol dan Fraksi-Fraksi Daun Beluntas (Pluchea indica (L.) Less.) Terhadap Bakteri Escherichia colidan Bacillus subtilis

0 0 3