POTENSI ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN KEMUNING (Murraya paniculata L.) DAN KULIT MANGGIS Potensi Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Kemuning (Murraya Paniculata L.) Dan Kulit Manggis (Garcinia Mangostana L.) Dengan Metode Ftc Dan Dpph.
POTENSI ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN
KEMUNING (Murraya paniculata L.) DAN KULIT MANGGIS
(Garcinia mangostana L.) DENGAN METODE FTC DAN DPPH
SKRIPSI
Oleh:
RANI YUNI MAKARYATI
K100100134
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2014
POTENSI ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN
KEMUNING (Murraya paniculata L.) DAN KULIT MANGGIS
(Garcinia mangostana L.) DENGAN METODE FTC DAN DPPH
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
RANI YUNI MAKARYATI
K100100134
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2014
i
1
2
3
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb.
Alhamdulillah, segala puji syukur hanya kepada Allah SWT yang telah
melimpahkan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan
judul “DAYA PEREDUKSI EKSTRAK ETANOL DAUN KEMUNING
(Murraya paniculata L.) DAN KULIT MANGGIS (Garcinia mangostana L.)
DENGAN METODE FTC DAN DPPH”. Skripsi ini disusun untuk memenuhi
salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Penulis dengan segala kerendahan hati mengucapkan terima kasih sebesarbesarnya kepada:
1.
Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2.
Bapak Broto Santoso, M.Sc., Apt dan Bapak Dedi Hanwar, M.Si., Apt selaku
dosen pembimbing skripsi yang telah memberikan bimbingan, ilmu dan
motivasi.
3.
Ibu Ika Trisharyanti DK, M.Farm., Apt. selaku Penguji I dan ketua sidang
tertutup skripsi.
4.
Bapak Andi Suhendi, M.Si, Apt. selaku Penguji II sidang tertutup skripsi.
5.
Bapak Sutikno dan Ibu Sri, Mbak Indah, Mas Aris, Kembaranku (Rina), dan
Mas Muzzamil, atas doa yang tiada henti.
6.
Sahabatku Ria, Anis dan semua pihak yang telah membantu dalam penulisan
skripsi ini.
Akhirukalam, semoga skripsi ini dapat bermanfaat khususnya dibidang
kefarmasian.
Wassalamu'alaikum wr. wb.
Surakarta, 25 September 2014
Penulis
iv
4
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .......................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN .........................................................................
ii
HALAMAN DEKLARASI..............................................................................
iii
KATA PENGANTAR ....................................................................................
iv
DAFTAR ISI ...................................................................................................
v
DAFTAR TABEL ...........................................................................................
viii
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................
ix
DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................
x
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................
xi
INTISARI.........................................................................................................
xii
BAB I PENDAHULUAN ...............................................................................
1
A. Latar Belakang ...............................................................................
1
B. Rumusan Masalah .........................................................................
2
C. Tujuan Penelitian ...........................................................................
3
D. Tinjauan Pustaka ...........................................................................
3
1. Radikal Bebas ...........................................................................
3
2. Antioksidan ...............................................................................
3
3. Kandungan Kimia ....................................................................
4
4. Senyawa Fenolat dan Flavonoid ...............................................
5
5. Uji Aktivitas Antioksidan .........................................................
6
E. Landasan Teori ...............................................................................
8
F. Keterangan Empiris ........................................................................
8
BAB II METODE PENELITIAN ....................................................................
9
A. Jenis Penelitian ...............................................................................
9
B. Variabel Penelitian ........................................................................
9
1. Variabel Bebas ..........................................................................
9
v
5
2. Variabel Tergantung ................................................................
9
3. Variabel terkendali ....................................................................
9
C. Alat dan Bahan ..............................................................................
9
1. Alat
......................................................................................
9
2. Bahan ......................................................................................
9
D. Jalannya Penelitian ........................................................................
10
1. Pengumpulan bahan ..................................................................
10
2. Jalannya Penelitian ....................................................................
10
a. Ekstraksi ............................................................................
10
b. Pembuatan reagen yang digunakan ...................................
10
1) Pembuatan larutan stok .................................................
10
c. Penentuan OT penetapan kadar fenol ................................
10
d. Penentuan OT penetapan kadar flavonoid ..........................
11
e. Penentuan λ maks penetapan kadar fenol ...........................
11
f. Penentuan λ maks penetapan kadar flavonoid ....................
11
g. Penetapan kadar fenol dan flavonoid total .........................
11
1) Penetapan fenol total ...................................................
11
2) Penetapan flavonoid total ...........................................
12
h. Pengukuran aktivitas antioksidan .......................................
12
1) Metode DPPH ...............................................................
12
2) Metode FTC ..................................................................
13
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Determinasi tanaman ...........................................................................
14
B. Ekstraksi
......................................................................................
14
C. Penentuan Kadar Fenolat dan Flavonoid Total ....................................
15
D. Uji Aktivitas Antioksidan ....................................................................
16
1. Metode DPPH.................................................................................
16
2. Metode FTC ...................................................................................
19
vi
6
E. Korelasi Kandungan Fenolat dan Flavonoid Total dengan
Aktivitas Antioksidan .........................................................................
21
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
......................................................................................
22
B. Saran ....................................................................................................
22
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................
23
LAMPIRAN ....................................................................................................
27
vii
7
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. OT Asam Galat .................................................................................. 11
Tabel 2. OT kuersetin ...................................................................................... 11
Tabel 3. Aktivitas antioksidan berdasarkan nilai IC50 ..................................... 18
Tabel 4. Hasil rerata % hambat peroksidasi lipid standar dan ekstrak
dengan metode FTC dan DPPH......................................................... 21
viii
8
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Struktur umum senyawa flavanoid kandungan utama
ekstrak daun kemuning ................................................................ 4
Gambar 2.
Struktur umum senyawa flavanoid kandungan utama kulit
manggis ......................................................................................... 4
Gambar 3.
Donasi proton dari antioksidan ke radikal DPPH ......................... 6
Gambar 4.
Pembentukan kompleks senyawa ................................................. 7
Gambar 5.
Mekanisme Asam Galat Vs Reagen Folin .................................... 15
Gambar 6.
Profil kurva baku asam galat dan kuersetin. ................................. 16
Gambar 7.
Grafik konsentrasi ekstrak kulit manggis dan vitamin E vs
% hambat menggunakan metode DPPH ...................................... 18
Gambar 8.
Gafik konsentrasi ekstrak daun kemuning vs % hambat
radikal menggunakan metode DPPH ............................................ 19
Gambar 9.
Profil absorbansi kontrol, sampel ekstrak dan standar
dengan metode FTC ...................................................................... 20
Gambar 10. Profil absorbansi kontrol, sampel ekstrak daun kemuning
dan standar dengan metode FTC .................................................. 21
ix
9
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Data Kurva Baku Asam Galat dan Quarsetin .............................
27
Lampiran 2. Detail Hasil Untuk Ekstrak Etanol Kulit Manggis .....................
28
Lampiran 3. Detail Hasil Untuk Ekstrak Etanol Daun Kemuning ..................
29
Lampiran 4. Perhitungan % Hambat Metode FTC Kulit Manggis dan
Daun Kemuning ..........................................................................
31
Lampiran 5. Perhitungan % Hambat Metode DPPH Kulit Manggis dan
Daun Kemuning ..........................................................................
x
33
10
DAFTAR SINGKATAN
µg
: Mikrogram
µl
: Mikroliter
µm
: Mikromolar
DPPH : 1,1-Diphenyl-2-Picryl-Hydrazyl
FTC
: Ferri (Iii) Thiocyanate
g
: Gram
GAE : Gallic Acid Equivalent
IC50
: Inhibitory Concentration 50 %
Kg
: Kilogram
M
: Molar
mg
: Miligram
mL
: Mililiter
nm
: Nanometer
P.a
: Pro Analisis
QE
: Quercetin Equivalent
UV
: Ultaviolet
xi
11
INTISARI
Daun kemuning (Murraya paniculata L.) dan kulit manggis (Garcinia
mangostana L.) merupakan beberapa dari banyak tanaman yang mengandung zat
pereduksi yang kuat di dalam tubuh. Rohman dan Riyanto, (2005) meneliti daya
antioksidan ekstrak etanol daun kemuning dengan metode DPPH memberikan
nilai IC50 sebesar 126,17 µg/mL dan antioksidan ekstrak kulit manggis dengan
pelarut metanol menggunakan metode DPPH memberikan nilai IC50 sebesar
11,117 µg/mL. Tujuan penelitian ini untuk menentukan aktivitas antioksidan dari
ekstrak etanol daun kemuning (M. paniculata, L.) dan kulit manggis (G.
mangostana, L.) dengan pembanding vitamin E menggunakan metode Ferri (III)
Thiocyanate (FTC) dan 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH). Penentuan
kandungan fenolat total pada ekstrak menggunakan reagen Folin- Ciocalteu
dengan standar asam galat dan dihitung sebagai Gallic Acid Equivalent (GAE)
sedangkan flavonoid menggunakan alumunium klorida dengan standar quersetin
dan dihitung sebagai Quercetin Equivalent (QE).
Ekstrak yang diperoleh ditetapkan senyawa fenol dan flavonoid dengan
spektrofotometri visibel didapatkan masing-masing kadarnya pada daun
kemuning sebesar 113,23±2,05 (GAE) dan 205,66±6,79 (QE) pada kulit manggis
didapatkan kadarnya sebesar 274,52±15,11 (GAE) dan 396,85±23,26 (QE).
Ekstrak kulit manggis, daun kemuning, dan vitamin E berurutan memiliki
aktivitas antioksidan, dengan nilai IC50 sebesar 21,24±1,68 µg/mL, 149,45±16
µg/mL, dan 12,990 µg/mL. Persen penghambatan peroksidasi lipid ekstrak kulit
manggis, daun kemuning dan vitamin E berurutan sebesar 44,505%±5,23,
39,246%±2,69 dan 82,72%. Daun kemuning memiliki kadar fenol dan flavonoid
dua kali lebih kecil dari kulit manggis namun nilai IC50 daun kemuning tujuh kali
lebih besar dari kulit, sedangkan dengan metode FTC ekstrak daun kemuning dan
kulit manggis tidak berkontribusi besar.
Kata Kunci: Fenol, flavonoid, DPPH, FTC, daun kemuning (Murraya
paniculata, L.), kulit manggis (Garcinia mangostana, L.)
xii
KEMUNING (Murraya paniculata L.) DAN KULIT MANGGIS
(Garcinia mangostana L.) DENGAN METODE FTC DAN DPPH
SKRIPSI
Oleh:
RANI YUNI MAKARYATI
K100100134
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2014
POTENSI ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL DAUN
KEMUNING (Murraya paniculata L.) DAN KULIT MANGGIS
(Garcinia mangostana L.) DENGAN METODE FTC DAN DPPH
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
RANI YUNI MAKARYATI
K100100134
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2014
i
1
2
3
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb.
Alhamdulillah, segala puji syukur hanya kepada Allah SWT yang telah
melimpahkan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan
judul “DAYA PEREDUKSI EKSTRAK ETANOL DAUN KEMUNING
(Murraya paniculata L.) DAN KULIT MANGGIS (Garcinia mangostana L.)
DENGAN METODE FTC DAN DPPH”. Skripsi ini disusun untuk memenuhi
salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Penulis dengan segala kerendahan hati mengucapkan terima kasih sebesarbesarnya kepada:
1.
Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2.
Bapak Broto Santoso, M.Sc., Apt dan Bapak Dedi Hanwar, M.Si., Apt selaku
dosen pembimbing skripsi yang telah memberikan bimbingan, ilmu dan
motivasi.
3.
Ibu Ika Trisharyanti DK, M.Farm., Apt. selaku Penguji I dan ketua sidang
tertutup skripsi.
4.
Bapak Andi Suhendi, M.Si, Apt. selaku Penguji II sidang tertutup skripsi.
5.
Bapak Sutikno dan Ibu Sri, Mbak Indah, Mas Aris, Kembaranku (Rina), dan
Mas Muzzamil, atas doa yang tiada henti.
6.
Sahabatku Ria, Anis dan semua pihak yang telah membantu dalam penulisan
skripsi ini.
Akhirukalam, semoga skripsi ini dapat bermanfaat khususnya dibidang
kefarmasian.
Wassalamu'alaikum wr. wb.
Surakarta, 25 September 2014
Penulis
iv
4
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .......................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN .........................................................................
ii
HALAMAN DEKLARASI..............................................................................
iii
KATA PENGANTAR ....................................................................................
iv
DAFTAR ISI ...................................................................................................
v
DAFTAR TABEL ...........................................................................................
viii
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................
ix
DAFTAR LAMPIRAN ...................................................................................
x
DAFTAR SINGKATAN ................................................................................
xi
INTISARI.........................................................................................................
xii
BAB I PENDAHULUAN ...............................................................................
1
A. Latar Belakang ...............................................................................
1
B. Rumusan Masalah .........................................................................
2
C. Tujuan Penelitian ...........................................................................
3
D. Tinjauan Pustaka ...........................................................................
3
1. Radikal Bebas ...........................................................................
3
2. Antioksidan ...............................................................................
3
3. Kandungan Kimia ....................................................................
4
4. Senyawa Fenolat dan Flavonoid ...............................................
5
5. Uji Aktivitas Antioksidan .........................................................
6
E. Landasan Teori ...............................................................................
8
F. Keterangan Empiris ........................................................................
8
BAB II METODE PENELITIAN ....................................................................
9
A. Jenis Penelitian ...............................................................................
9
B. Variabel Penelitian ........................................................................
9
1. Variabel Bebas ..........................................................................
9
v
5
2. Variabel Tergantung ................................................................
9
3. Variabel terkendali ....................................................................
9
C. Alat dan Bahan ..............................................................................
9
1. Alat
......................................................................................
9
2. Bahan ......................................................................................
9
D. Jalannya Penelitian ........................................................................
10
1. Pengumpulan bahan ..................................................................
10
2. Jalannya Penelitian ....................................................................
10
a. Ekstraksi ............................................................................
10
b. Pembuatan reagen yang digunakan ...................................
10
1) Pembuatan larutan stok .................................................
10
c. Penentuan OT penetapan kadar fenol ................................
10
d. Penentuan OT penetapan kadar flavonoid ..........................
11
e. Penentuan λ maks penetapan kadar fenol ...........................
11
f. Penentuan λ maks penetapan kadar flavonoid ....................
11
g. Penetapan kadar fenol dan flavonoid total .........................
11
1) Penetapan fenol total ...................................................
11
2) Penetapan flavonoid total ...........................................
12
h. Pengukuran aktivitas antioksidan .......................................
12
1) Metode DPPH ...............................................................
12
2) Metode FTC ..................................................................
13
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Determinasi tanaman ...........................................................................
14
B. Ekstraksi
......................................................................................
14
C. Penentuan Kadar Fenolat dan Flavonoid Total ....................................
15
D. Uji Aktivitas Antioksidan ....................................................................
16
1. Metode DPPH.................................................................................
16
2. Metode FTC ...................................................................................
19
vi
6
E. Korelasi Kandungan Fenolat dan Flavonoid Total dengan
Aktivitas Antioksidan .........................................................................
21
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan
......................................................................................
22
B. Saran ....................................................................................................
22
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................
23
LAMPIRAN ....................................................................................................
27
vii
7
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. OT Asam Galat .................................................................................. 11
Tabel 2. OT kuersetin ...................................................................................... 11
Tabel 3. Aktivitas antioksidan berdasarkan nilai IC50 ..................................... 18
Tabel 4. Hasil rerata % hambat peroksidasi lipid standar dan ekstrak
dengan metode FTC dan DPPH......................................................... 21
viii
8
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Struktur umum senyawa flavanoid kandungan utama
ekstrak daun kemuning ................................................................ 4
Gambar 2.
Struktur umum senyawa flavanoid kandungan utama kulit
manggis ......................................................................................... 4
Gambar 3.
Donasi proton dari antioksidan ke radikal DPPH ......................... 6
Gambar 4.
Pembentukan kompleks senyawa ................................................. 7
Gambar 5.
Mekanisme Asam Galat Vs Reagen Folin .................................... 15
Gambar 6.
Profil kurva baku asam galat dan kuersetin. ................................. 16
Gambar 7.
Grafik konsentrasi ekstrak kulit manggis dan vitamin E vs
% hambat menggunakan metode DPPH ...................................... 18
Gambar 8.
Gafik konsentrasi ekstrak daun kemuning vs % hambat
radikal menggunakan metode DPPH ............................................ 19
Gambar 9.
Profil absorbansi kontrol, sampel ekstrak dan standar
dengan metode FTC ...................................................................... 20
Gambar 10. Profil absorbansi kontrol, sampel ekstrak daun kemuning
dan standar dengan metode FTC .................................................. 21
ix
9
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Data Kurva Baku Asam Galat dan Quarsetin .............................
27
Lampiran 2. Detail Hasil Untuk Ekstrak Etanol Kulit Manggis .....................
28
Lampiran 3. Detail Hasil Untuk Ekstrak Etanol Daun Kemuning ..................
29
Lampiran 4. Perhitungan % Hambat Metode FTC Kulit Manggis dan
Daun Kemuning ..........................................................................
31
Lampiran 5. Perhitungan % Hambat Metode DPPH Kulit Manggis dan
Daun Kemuning ..........................................................................
x
33
10
DAFTAR SINGKATAN
µg
: Mikrogram
µl
: Mikroliter
µm
: Mikromolar
DPPH : 1,1-Diphenyl-2-Picryl-Hydrazyl
FTC
: Ferri (Iii) Thiocyanate
g
: Gram
GAE : Gallic Acid Equivalent
IC50
: Inhibitory Concentration 50 %
Kg
: Kilogram
M
: Molar
mg
: Miligram
mL
: Mililiter
nm
: Nanometer
P.a
: Pro Analisis
QE
: Quercetin Equivalent
UV
: Ultaviolet
xi
11
INTISARI
Daun kemuning (Murraya paniculata L.) dan kulit manggis (Garcinia
mangostana L.) merupakan beberapa dari banyak tanaman yang mengandung zat
pereduksi yang kuat di dalam tubuh. Rohman dan Riyanto, (2005) meneliti daya
antioksidan ekstrak etanol daun kemuning dengan metode DPPH memberikan
nilai IC50 sebesar 126,17 µg/mL dan antioksidan ekstrak kulit manggis dengan
pelarut metanol menggunakan metode DPPH memberikan nilai IC50 sebesar
11,117 µg/mL. Tujuan penelitian ini untuk menentukan aktivitas antioksidan dari
ekstrak etanol daun kemuning (M. paniculata, L.) dan kulit manggis (G.
mangostana, L.) dengan pembanding vitamin E menggunakan metode Ferri (III)
Thiocyanate (FTC) dan 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH). Penentuan
kandungan fenolat total pada ekstrak menggunakan reagen Folin- Ciocalteu
dengan standar asam galat dan dihitung sebagai Gallic Acid Equivalent (GAE)
sedangkan flavonoid menggunakan alumunium klorida dengan standar quersetin
dan dihitung sebagai Quercetin Equivalent (QE).
Ekstrak yang diperoleh ditetapkan senyawa fenol dan flavonoid dengan
spektrofotometri visibel didapatkan masing-masing kadarnya pada daun
kemuning sebesar 113,23±2,05 (GAE) dan 205,66±6,79 (QE) pada kulit manggis
didapatkan kadarnya sebesar 274,52±15,11 (GAE) dan 396,85±23,26 (QE).
Ekstrak kulit manggis, daun kemuning, dan vitamin E berurutan memiliki
aktivitas antioksidan, dengan nilai IC50 sebesar 21,24±1,68 µg/mL, 149,45±16
µg/mL, dan 12,990 µg/mL. Persen penghambatan peroksidasi lipid ekstrak kulit
manggis, daun kemuning dan vitamin E berurutan sebesar 44,505%±5,23,
39,246%±2,69 dan 82,72%. Daun kemuning memiliki kadar fenol dan flavonoid
dua kali lebih kecil dari kulit manggis namun nilai IC50 daun kemuning tujuh kali
lebih besar dari kulit, sedangkan dengan metode FTC ekstrak daun kemuning dan
kulit manggis tidak berkontribusi besar.
Kata Kunci: Fenol, flavonoid, DPPH, FTC, daun kemuning (Murraya
paniculata, L.), kulit manggis (Garcinia mangostana, L.)
xii