Hubungan Polimorfisme Gen Matriks Metaloproteinase-12 Dengan Kejadian Penyakit Paru Obstruktif Kronik Dibandingkan Dengan Non Penyakit Paru Obstruktif Kronik
LAMPIRAN 1
SURAT PERSETUJUAN KOMISI ETIK
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 2
SURAT IJIN PENELITIAN
Universitas Sumatera Utara
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 3
DAFTAR SAMPEL KEJADIAN PPOK DAN NON PPOK
PPOK
POLIMORFISME MMP-12
NO
KODE
AA
AG
GG
P1.
N227
√
-
-
P2.
S211
√
-
-
P3.
H212
√
-
-
P4.
J213
√
-
-
P5.
SO46
√
-
-
P6.
P050
√
-
-
P7.
KO43
√
-
-
P8.
TO42
√
-
-
P9.
G041
√
-
-
P10.
N040
√
-
-
P11.
H039
√
-
-
P12.
T038
√
-
-
P13.
N037
√
-
-
P14.
H036
√
-
-
P15.
S028
√
-
-
P16.
S027
√
-
-
P17.
S026
√
-
-
P18.
S024
√
-
-
P19.
N023
√
√
-
Universitas Sumatera Utara
P20.
N022
√
-
-
P21.
M021
√
-
-
P22.
S017
√
-
-
P23.
H016
√
-
-
P24.
N013
√
-
-
P25.
R009
√
-
-
P26.
T008
√
√
-
P27.
S006
√
-
-
P28.
T004
√
-
-
P29.
M124
√
-
-
P30.
M122
√
-
-
NON PPOK
POLIMORFISME MMP-12
NO
KODE
AA
AG
GG
N1.
M136
√
-
-
N2.
J137
√
-
-
N3.
J138
√
-
-
N4.
S140
√
-
-
N5.
S141
√
-
-
N6.
A142
√
-
-
N7.
N143
√
-
-
N8.
R144
√
-
-
N9.
F145
√
√
-
Universitas Sumatera Utara
N10.
D156
√
-
-
N11.
T154
√
-
-
N12.
T153
√
-
-
N13.
S152
√
-
-
N14.
S151
√
-
-
N15.
P150
√
-
-
N16.
M148
√
-
-
N17.
M147
√
-
-
N18.
I146
√
-
-
N19.
S167
√
-
-
N20.
A166
√
-
-
N21.
S165
√
-
-
N22.
S164
√
-
-
N23.
T162
√
-
-
N24.
T161
√
-
-
N25.
R159
√
-
-
N26.
M158
√
-
-
N27.
M157
√
-
-
N28.
A183
√
-
-
N29.
N181
√
-
-
N30.
J179
√
-
-
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 4
UJI STATISTIK PEARSON CHI SQUARE
Tabel 1. Hubungan antara polimorfisme gen MMP-12 dengan kejadian PPOK
POLIMORFISME
PPOK
TOTAL
NONPPOK
Nilai p*
n
%
n
%
n
%
AG
2
6.7%
1
3.3%
3
5.0%
AA
28
93.3%
29
96.7%
57
95.0%
GG
0
0
0
0
0
0
30
100.0%
30
100.0%
60
100.0%
TOTAL
0.5
*Significant with Fisher exact test
POLIMORFISME * SAMPLE Crosstabulation
SAMPLE
Total
PPOK
POLIMORFISME
AG
NONPPOK
Count
% within
2
1
3
6.7%
3.3%
5.0%
28
29
57
93.3%
96.7%
95.0%
SAMPLE
Count
AA
% within
SAMPLE
0
0
0
0%
0%
0%
Count
GG
% within
SAMPLE
Total
Count
% within
30
30
60
100.0%
100.0%
100.0%
SAMPLE
Chi-Square Tests
Value
Pearson Chi-
df
Asymp. Sig.
Exact Sig.
Exact Sig. (1-
(2-sided)
(2-sided)
sided)
a
1
.554
.000
1
1.000
.357
1
.550
.351
Square
Continuity
Correction
b
Likelihood Ratio
Fisher's Exact Test
Linear-by-Linear
1.000
.345
1
.500
.557
Association
N of Valid Cases
60
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 5
HARDY-WEINBERG EQUILIBRIUM CALCULATOR
Genotypes
AA
AG
GG
Observed
28
2
0
Compute Exp. H-W
Equilibrium Freq.
& Chi2 P-Value
Expected
28.03
1.93
0.03
H-W Freq
(93.44%)
(6.44%)
(0.11%)
Clear Form Values
P-Value = 0.8502
Allele
Frequencies
AA = 58
AG = 2
(96.67%)
(3.33%)
Genotypes
AA
AG
GG
Observed
29
1
0
Compute Exp. H-W
Equilibrium Freq.
& Chi2 P-Value
Expected
29.01
0.98
0.01
H-W Freq
(96.69%)
(3.28%)
(0.03%)
Clear Form Values
P-Value = 0.926
Allele
Frequencies
AA = 59
AG = 1
(98.33%)
(1.67%)
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 6
HASIL PENELITIAN PCR DAN RFLP
2 Mei 2015, PCR, sampel P1-P6
12 Mei 2015, PCR, sampel P7-P12
Universitas Sumatera Utara
27 Mei 2015, PCR, sampel P13-P30, N1-N10
27 Mei 2015, PCR, sampel N11-N30
Universitas Sumatera Utara
6 Juni 2015, RFLP, sampel P1-P6
19 Juni 2015, RFLP, sampel P7-P12
Universitas Sumatera Utara
2 Juli 2015, RFLP, sampel P13-P18
4 Juli 2015, RFLP, sampel P19-P30 dan N1-N16
Universitas Sumatera Utara
8 Juli 2015, RFLP, sampel N17-N30
29 Juli 2015, RFLP, sampel P19, P20, P21, P26, N9, N10
Universitas Sumatera Utara
6 Juni 2015, RFLP, sampel P1-P6, Inverse
19 Juni 2015, RFLP, sampel P7-P12, Inverse
Universitas Sumatera Utara
2 Juli 2015, RFLP, sampel P13-P18, Inverse
4 Juli 2015, RFLP, sampel P19-P30 dan N1-N16, Inverse
Universitas Sumatera Utara
8 Juli 2015, RFLP, sampel N17-N30, Inverse
29 Juli 2015, RFLP, sampel P19, P20, P21, P26, N9, N10, Inverse
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 7
DOKUMENTASI PENELITIAN
1. Bahan-bahan Penelitian
PCR mix (Go Taq® Green Master Mix (Promega USA)], Nuclease Free Water,
marker DNA, DNA Loading Dye
Primer forward MMP-12: 5’GTCAAGGGATGATATCAGCT-3’
Primer reverse MMP-12: 5’CTTCTAAACGGATCAATTCAG-3’
Enzim Restriksi Pvu II (Thermo scientific®)
2. Sampel Penelitian
Isolat DNA dengan penderita PPOK dan non PPOK
Universitas Sumatera Utara
3. Alat-alat Penelitian
Mesin PCR (Thermal Cycler)
Gel Casting Tray
Mesin Inkubator
Universitas Sumatera Utara
4. Proses Amplifikasi isolat DNA dengan Polymerase Chain Reaction
Universitas Sumatera Utara
5. Visualisasi Hasil Restriksi dengan Elektroforesa Gel Agarosa
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 8
DAFTAR RIWAYAT HIDUP
1. Identitas
Nama
: Ruth Agree Kartini Sihombing
Tempat/Tgl Lahir: Medan, 22 April 1987
Agama
: Kristen Protestan
Alamat
: Jl. Setia Jadi Gg Pribadi No.63 A Medan
2. Keluarga
Suami
: Andres Situmorang, S.Pd
Anak
: Daud Lionel Situmorang
3. Pendidikan
TK SW RK ST ANTONIUS VI, tamat tahun 1993
SD SW RK ST ANTONIUS VI, tamat tahun 1999
SMP SW RK BUDI MURNI-4, tamat tahun 2002
SMA NEGERI 8 MEDAN, Tamat tahun 2005
Jurusan Biologi, Fakultas MIPA USU, tamat tahun 2010
4. Riwayat Pekerjaan
•
Tentor di Bimbel Medika, tahun 2008
•
Staf pengajar di STIKES Imelda Medan, tahun 2015-sekarang
5. Perkumpulan profesi
-
Universitas Sumatera Utara
SURAT PERSETUJUAN KOMISI ETIK
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 2
SURAT IJIN PENELITIAN
Universitas Sumatera Utara
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 3
DAFTAR SAMPEL KEJADIAN PPOK DAN NON PPOK
PPOK
POLIMORFISME MMP-12
NO
KODE
AA
AG
GG
P1.
N227
√
-
-
P2.
S211
√
-
-
P3.
H212
√
-
-
P4.
J213
√
-
-
P5.
SO46
√
-
-
P6.
P050
√
-
-
P7.
KO43
√
-
-
P8.
TO42
√
-
-
P9.
G041
√
-
-
P10.
N040
√
-
-
P11.
H039
√
-
-
P12.
T038
√
-
-
P13.
N037
√
-
-
P14.
H036
√
-
-
P15.
S028
√
-
-
P16.
S027
√
-
-
P17.
S026
√
-
-
P18.
S024
√
-
-
P19.
N023
√
√
-
Universitas Sumatera Utara
P20.
N022
√
-
-
P21.
M021
√
-
-
P22.
S017
√
-
-
P23.
H016
√
-
-
P24.
N013
√
-
-
P25.
R009
√
-
-
P26.
T008
√
√
-
P27.
S006
√
-
-
P28.
T004
√
-
-
P29.
M124
√
-
-
P30.
M122
√
-
-
NON PPOK
POLIMORFISME MMP-12
NO
KODE
AA
AG
GG
N1.
M136
√
-
-
N2.
J137
√
-
-
N3.
J138
√
-
-
N4.
S140
√
-
-
N5.
S141
√
-
-
N6.
A142
√
-
-
N7.
N143
√
-
-
N8.
R144
√
-
-
N9.
F145
√
√
-
Universitas Sumatera Utara
N10.
D156
√
-
-
N11.
T154
√
-
-
N12.
T153
√
-
-
N13.
S152
√
-
-
N14.
S151
√
-
-
N15.
P150
√
-
-
N16.
M148
√
-
-
N17.
M147
√
-
-
N18.
I146
√
-
-
N19.
S167
√
-
-
N20.
A166
√
-
-
N21.
S165
√
-
-
N22.
S164
√
-
-
N23.
T162
√
-
-
N24.
T161
√
-
-
N25.
R159
√
-
-
N26.
M158
√
-
-
N27.
M157
√
-
-
N28.
A183
√
-
-
N29.
N181
√
-
-
N30.
J179
√
-
-
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 4
UJI STATISTIK PEARSON CHI SQUARE
Tabel 1. Hubungan antara polimorfisme gen MMP-12 dengan kejadian PPOK
POLIMORFISME
PPOK
TOTAL
NONPPOK
Nilai p*
n
%
n
%
n
%
AG
2
6.7%
1
3.3%
3
5.0%
AA
28
93.3%
29
96.7%
57
95.0%
GG
0
0
0
0
0
0
30
100.0%
30
100.0%
60
100.0%
TOTAL
0.5
*Significant with Fisher exact test
POLIMORFISME * SAMPLE Crosstabulation
SAMPLE
Total
PPOK
POLIMORFISME
AG
NONPPOK
Count
% within
2
1
3
6.7%
3.3%
5.0%
28
29
57
93.3%
96.7%
95.0%
SAMPLE
Count
AA
% within
SAMPLE
0
0
0
0%
0%
0%
Count
GG
% within
SAMPLE
Total
Count
% within
30
30
60
100.0%
100.0%
100.0%
SAMPLE
Chi-Square Tests
Value
Pearson Chi-
df
Asymp. Sig.
Exact Sig.
Exact Sig. (1-
(2-sided)
(2-sided)
sided)
a
1
.554
.000
1
1.000
.357
1
.550
.351
Square
Continuity
Correction
b
Likelihood Ratio
Fisher's Exact Test
Linear-by-Linear
1.000
.345
1
.500
.557
Association
N of Valid Cases
60
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 5
HARDY-WEINBERG EQUILIBRIUM CALCULATOR
Genotypes
AA
AG
GG
Observed
28
2
0
Compute Exp. H-W
Equilibrium Freq.
& Chi2 P-Value
Expected
28.03
1.93
0.03
H-W Freq
(93.44%)
(6.44%)
(0.11%)
Clear Form Values
P-Value = 0.8502
Allele
Frequencies
AA = 58
AG = 2
(96.67%)
(3.33%)
Genotypes
AA
AG
GG
Observed
29
1
0
Compute Exp. H-W
Equilibrium Freq.
& Chi2 P-Value
Expected
29.01
0.98
0.01
H-W Freq
(96.69%)
(3.28%)
(0.03%)
Clear Form Values
P-Value = 0.926
Allele
Frequencies
AA = 59
AG = 1
(98.33%)
(1.67%)
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 6
HASIL PENELITIAN PCR DAN RFLP
2 Mei 2015, PCR, sampel P1-P6
12 Mei 2015, PCR, sampel P7-P12
Universitas Sumatera Utara
27 Mei 2015, PCR, sampel P13-P30, N1-N10
27 Mei 2015, PCR, sampel N11-N30
Universitas Sumatera Utara
6 Juni 2015, RFLP, sampel P1-P6
19 Juni 2015, RFLP, sampel P7-P12
Universitas Sumatera Utara
2 Juli 2015, RFLP, sampel P13-P18
4 Juli 2015, RFLP, sampel P19-P30 dan N1-N16
Universitas Sumatera Utara
8 Juli 2015, RFLP, sampel N17-N30
29 Juli 2015, RFLP, sampel P19, P20, P21, P26, N9, N10
Universitas Sumatera Utara
6 Juni 2015, RFLP, sampel P1-P6, Inverse
19 Juni 2015, RFLP, sampel P7-P12, Inverse
Universitas Sumatera Utara
2 Juli 2015, RFLP, sampel P13-P18, Inverse
4 Juli 2015, RFLP, sampel P19-P30 dan N1-N16, Inverse
Universitas Sumatera Utara
8 Juli 2015, RFLP, sampel N17-N30, Inverse
29 Juli 2015, RFLP, sampel P19, P20, P21, P26, N9, N10, Inverse
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 7
DOKUMENTASI PENELITIAN
1. Bahan-bahan Penelitian
PCR mix (Go Taq® Green Master Mix (Promega USA)], Nuclease Free Water,
marker DNA, DNA Loading Dye
Primer forward MMP-12: 5’GTCAAGGGATGATATCAGCT-3’
Primer reverse MMP-12: 5’CTTCTAAACGGATCAATTCAG-3’
Enzim Restriksi Pvu II (Thermo scientific®)
2. Sampel Penelitian
Isolat DNA dengan penderita PPOK dan non PPOK
Universitas Sumatera Utara
3. Alat-alat Penelitian
Mesin PCR (Thermal Cycler)
Gel Casting Tray
Mesin Inkubator
Universitas Sumatera Utara
4. Proses Amplifikasi isolat DNA dengan Polymerase Chain Reaction
Universitas Sumatera Utara
5. Visualisasi Hasil Restriksi dengan Elektroforesa Gel Agarosa
Universitas Sumatera Utara
LAMPIRAN 8
DAFTAR RIWAYAT HIDUP
1. Identitas
Nama
: Ruth Agree Kartini Sihombing
Tempat/Tgl Lahir: Medan, 22 April 1987
Agama
: Kristen Protestan
Alamat
: Jl. Setia Jadi Gg Pribadi No.63 A Medan
2. Keluarga
Suami
: Andres Situmorang, S.Pd
Anak
: Daud Lionel Situmorang
3. Pendidikan
TK SW RK ST ANTONIUS VI, tamat tahun 1993
SD SW RK ST ANTONIUS VI, tamat tahun 1999
SMP SW RK BUDI MURNI-4, tamat tahun 2002
SMA NEGERI 8 MEDAN, Tamat tahun 2005
Jurusan Biologi, Fakultas MIPA USU, tamat tahun 2010
4. Riwayat Pekerjaan
•
Tentor di Bimbel Medika, tahun 2008
•
Staf pengajar di STIKES Imelda Medan, tahun 2015-sekarang
5. Perkumpulan profesi
-
Universitas Sumatera Utara