UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI EKSTRAK ETANOL BATANG INGGU (Ruta angustifolia [L.] Pers) Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Ekstrak Etanol Batang Inggu (Ruta angustifolia [L.] Pers) Terhadap Mencit Yang Diinfeksi Streptococcus mutans dan Staphylococus au
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI EKSTRAK
ETANOL BATANG INGGU (Ruta angustifolia [L.] Pers)
TERHADAP MENCIT YANG DIINFEKSI Streptococcus mutans
dan Staphylococus aureus
SKRIPSI
Oleh :
WINDY TRI RETNOSARI
K 100 090 001
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2013
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI EKSTRAK ETANOL
BATANG INGGU (Ruta angustifolia [L.] Pers) PADA MENCIT
YANG DIINFEKSI Staphylococcus aureus DAN Streptococcus
mutans
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
WINDY TRI RETNOSARI
K 100090001
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2013
i
KATA PENGANTAR
Bismillaahirrahmaanirrahiim.
Alhamdulillah, tiada kata yang lebih indah selain puji syukur kehadirat Alloh
SWT yang telah melimpahkan anugerah, karunia, dan hidayah-Nya kepada penulis,
sehingga penulis mampu menyelesaikan skripsi ini. Shalawat serta salam selalu
tercurah kepada Nabi Muhammad SAW, yang telah membawa risalah dan
membimbing umatnya menjadi umat yang beriman dan bertaqwa kepada Alloh SWT.
Skripsi berjudul “Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Ekstrak Etanol Batang Inggu (Ruta
angustifolia [L.] Pers) pada Mencit yang Diinfeksi Streptococcus mutans dan
Staphylococus aureus” ini disusun untuk menambah ilmu pengetahuan tentang
penggunaan tanaman inggu sebagai bahan alami yang memiliki aktivitas
menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans dan Staphylococus aureus
Dalam proses skripsi ini, penulis tidak lepas dari bantuan dan dukungan dari
berbagai pihak. Pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan ucapan terima
kasih kepada:
1.
Ibu Arifah Sri Wahyuni, M.Sc. Apt selaku dekan Fakultas Farmasi UMS dan
penguji
2.
Bapak Dr. Haryoto, M.Sc., selaku dosen pembimbing utama serta Bapak Andi
Suhendi, S.Farm.,Apt selaku dosen pembimbin pendamping
3.
Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech. St. selaku penguji
4.
Bapak, Ibu, kakak-kakak dan teman-teman saya yang selalu memberi semangat
dan menjadi inspirasi bagi penulis untuk segera menyelesaikan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari sempurna. Oleh karena
itu, saran serta kritik yang membangun demi perbaikan penulisan skripsi ini akan
sangat membantu.
iv
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ........................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN ...........................................................................
ii
DEKLARASI .....................................................................................................
iii
KATA PENGANTAR .......................................................................................
iv
DAFTAR ISI ......................................................................................................
vi
DAFTAR TABEL .............................................................................................
viii
DAFTAR GAMBAR .........................................................................................
ix
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................
x
DAFTAR SINGKATAN ...................................................................................
xi
INTISARI ..........................................................................................................
xii
BAB I. PENDAHULUAN .................................................................................
1
A. Latar Belakang Masalah ...............................................................
1
B. Rumusan Masalah .........................................................................
2
C. Tujuan Penelitian ..........................................................................
2
D. Tinjauan Pustaka ..........................................................................
3
1. Tanaman Inggu ......................................................................
3
2. Antibakteri ..............................................................................
4
3. Streptococcus mutans ..............................................................
5
4. Staphylococus aureus ..............................................................
6
E. Landasan Teori ..............................................................................
7
F. Hipotesis .......................................................................................
7
vi
BAB II. METODE PENELITIAN .....................................................................
8
A. Kategori Penelitian dan Variabel Penelitian .................................
8
1. Kategori Penelitian ..................................................................
8
2. Variabel Penelitian ..................................................................
8
B. Alat dan Bahan ..............................................................................
8
1. Alat ..........................................................................................
8
2. Bahan ......................................................................................
8
C. Jalannya Penelitian........................................................................
9
1. Ekstraksi ..................................................................................
9
2. Fraksinasi ................................................................................
10
3. Uji Identifikasi bakteri ............................................................
10
4. Uji Identifikasi Senyawa .........................................................
11
5. Uji Aktivitas Antibakteri.........................................................
11
D. Analisis Data .................................................................................
13
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ..........................................................
14
A. Identifikasi Tanaman ....................................................................
14
B. Fraksinasi Ekstrak Etanol Batang Inggu .......................................
14
C. Uji Identifikasi Bakteri .................................................................
15
D. Identifikasi Senyawa Fraksi Ekstrak Etanol Batang Inggu...........
17
E. Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Ekstrak Etanol Batang Inggu ....
18
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ..........................................................
20
A. Kesimpulan ...................................................................................
20
B. Saran .............................................................................................
20
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................
21
LAMPIRAN .......................................................................................................
25
vii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Pengelompokan hasil fraksinasi pertama ekstrak etanol batang inggu..14
Tabel 2. Pengelompokan hasil fraksinasi kedua ekstrak etanol batang inggu….15
Tabel 3. Pengelompokan hasil fraksinasi ketiga ekstrak etanol batang inggu… 15
Tabel 4. Hasil identifikasi senyawa fraksi ekstrak etanol batang inggu dengan
KLT dan beberapa pereaksi semprot..................................................17
Tabel 5. Jumlah pertumbuhan Streptococcus mutans dengan beberapa kelompok
perlakuan fraksi ekstrak etanol batang inggu …………………………………..18
Tabel 4. Jumlah pertumbuhan Staphylococcus aureus dengan beberapa
Kelompok perlakuan fraksi ekstrak etanolbatang inggu…………………19
viii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Tanaman inggu (Ruta angustifolia L.) ..........................................
3
Gambar 2. Uji katalase Staphylococcus aureus dan Streptococcus mutans ...
16
Gambar 3. Uji fermentasi manitol pada Staphylococcus aureus dan
Streptococcus mutans ....................................................................
16
Gambar 4. Profil kromatogram uji identifikasi senyawa ................................
17
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Keterangan Identifikasi……………………………………... 26
Lampiran 2. Surat Keterangan Pembelian Mencit……………………………… 28
Lampiran 3. Perhitungan Rendemen, Dosis, Jumlah Koloni, dan
Persen Koloni……………...... ...................................................
29
Lampiran 4. Analisis Data Menggunakan Uji Fisher Exact…………………
32
Lampiran 5. Gambar koloni Streptococcus mutans dan Staphylococcus aureus.. 39
x
DAFTAR SINGKATAN
BHI
: Brain Heart Infussion broth
BBPPTOOT : Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat
Tradisional
C
: Celcius
Cfu
: Colony forming unit
Cm
: Centimeter
CMC-Na
: Natrium karbosimetilselulosa
H2O2
:
H2SO4
: Asam Sulfat
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
KOH
: Kalium Hidroksida
KCV
: Kromatografi Cair Vakum
kgBB
: Kilogram Berat Badan
m
: Meter
mg
: Milligram
mL
: Milliliter
MH
: Mueller Hinton
MSA
: Mannitol Salt Agar
NaNO2
: Natrium Nitrit
nm
: Nanometer
Rf
: Retardation Factor
S.mutans
: Streptococcus mutans
S.aureus
: Staphylococcus aureus
SD
: Standar Deviasi
UV
: Ultraviolet
Hidrogen peroksida
xi
INTISARI
Kandungan utama pada tanaman inggu (Ruta angustifolia [L.] Pers) memiliki
aktivitas antibakteri pada Streptococcus mutans dan Staphylococcus aureus.
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui aktivitas antibakteri fraksi dari eksrak
etanol batang inggu (Ruta angustifolia [L.] Pers) pada mencit yang diinfeksi
Streptococcus mutans dan Staphylococcus aureus.
Ekstrak etanol dari batang inggu difraksinasi dengan metode Kromatografi
Cair Vakum (KCV) menggunakan pelarut heksan: kloroform untuk mendapatkan
fraksi ekstrak etanol batang inggu. Uji aktivitas antibakteri menggunakan 10
kelompok perlakuan, yaitu kontrol positif (33 mg/kgBB gentamisin), kontrol negatif
(0.4 mL normal salin), fraksi ekstrak etanol batang inggu dengan konsentrasi 0,3 ; 1,2
; 2,14 g/kgBB yang disuntikkan secara intraperitoneal pada mencit. Cairan
intraperitoneal yang diperoleh setelah perlakuan, dikultur pada media Mueller Hinton
dan dihitung jumlah koloninya dengan colony counter.
Hasil penelitian pada kontrol positif tidak terdapat pertumbuhan bakteri dan
pada kontrol negatif terdapat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans sebesar 3,14
x 107 CFU/mL dan bakteri Staphylococcus aureus sebesar 3,7 x 107 CFU/mL.
Perlakuan fraksi ekstrak etanol batang inggu pada konsentrasi 0,3 ; 1,2; 2,14 g/kgBB
terdapat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans 1,59 x 107 ; 8,05 x 106 ; 2,23 x
105 CFU/mL dan bakteri Staphylococcus aureus 6,4 x 106 ; 3,03 x 106 ; 2,23 x 105
CFU/mL. Fraksi ekstrak etanol batang inggu tidak memiliki aktivitas antibakteri yang
secara signifikan menurunkan jumlah bakteri pada mencit yang diinfeksi
Staphylococcus aureus dan Streptococcus mutans.
Kata kunci : Antibakteri, Ruta angustifolia [L.] Pers, Streptococcus mutans,
Staphylococus aureus.
xii
ETANOL BATANG INGGU (Ruta angustifolia [L.] Pers)
TERHADAP MENCIT YANG DIINFEKSI Streptococcus mutans
dan Staphylococus aureus
SKRIPSI
Oleh :
WINDY TRI RETNOSARI
K 100 090 001
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2013
UJI AKTIVITAS ANTIBAKTERI FRAKSI EKSTRAK ETANOL
BATANG INGGU (Ruta angustifolia [L.] Pers) PADA MENCIT
YANG DIINFEKSI Staphylococcus aureus DAN Streptococcus
mutans
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
WINDY TRI RETNOSARI
K 100090001
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2013
i
KATA PENGANTAR
Bismillaahirrahmaanirrahiim.
Alhamdulillah, tiada kata yang lebih indah selain puji syukur kehadirat Alloh
SWT yang telah melimpahkan anugerah, karunia, dan hidayah-Nya kepada penulis,
sehingga penulis mampu menyelesaikan skripsi ini. Shalawat serta salam selalu
tercurah kepada Nabi Muhammad SAW, yang telah membawa risalah dan
membimbing umatnya menjadi umat yang beriman dan bertaqwa kepada Alloh SWT.
Skripsi berjudul “Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Ekstrak Etanol Batang Inggu (Ruta
angustifolia [L.] Pers) pada Mencit yang Diinfeksi Streptococcus mutans dan
Staphylococus aureus” ini disusun untuk menambah ilmu pengetahuan tentang
penggunaan tanaman inggu sebagai bahan alami yang memiliki aktivitas
menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans dan Staphylococus aureus
Dalam proses skripsi ini, penulis tidak lepas dari bantuan dan dukungan dari
berbagai pihak. Pada kesempatan ini penulis ingin menyampaikan ucapan terima
kasih kepada:
1.
Ibu Arifah Sri Wahyuni, M.Sc. Apt selaku dekan Fakultas Farmasi UMS dan
penguji
2.
Bapak Dr. Haryoto, M.Sc., selaku dosen pembimbing utama serta Bapak Andi
Suhendi, S.Farm.,Apt selaku dosen pembimbin pendamping
3.
Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech. St. selaku penguji
4.
Bapak, Ibu, kakak-kakak dan teman-teman saya yang selalu memberi semangat
dan menjadi inspirasi bagi penulis untuk segera menyelesaikan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari sempurna. Oleh karena
itu, saran serta kritik yang membangun demi perbaikan penulisan skripsi ini akan
sangat membantu.
iv
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ........................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN ...........................................................................
ii
DEKLARASI .....................................................................................................
iii
KATA PENGANTAR .......................................................................................
iv
DAFTAR ISI ......................................................................................................
vi
DAFTAR TABEL .............................................................................................
viii
DAFTAR GAMBAR .........................................................................................
ix
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................
x
DAFTAR SINGKATAN ...................................................................................
xi
INTISARI ..........................................................................................................
xii
BAB I. PENDAHULUAN .................................................................................
1
A. Latar Belakang Masalah ...............................................................
1
B. Rumusan Masalah .........................................................................
2
C. Tujuan Penelitian ..........................................................................
2
D. Tinjauan Pustaka ..........................................................................
3
1. Tanaman Inggu ......................................................................
3
2. Antibakteri ..............................................................................
4
3. Streptococcus mutans ..............................................................
5
4. Staphylococus aureus ..............................................................
6
E. Landasan Teori ..............................................................................
7
F. Hipotesis .......................................................................................
7
vi
BAB II. METODE PENELITIAN .....................................................................
8
A. Kategori Penelitian dan Variabel Penelitian .................................
8
1. Kategori Penelitian ..................................................................
8
2. Variabel Penelitian ..................................................................
8
B. Alat dan Bahan ..............................................................................
8
1. Alat ..........................................................................................
8
2. Bahan ......................................................................................
8
C. Jalannya Penelitian........................................................................
9
1. Ekstraksi ..................................................................................
9
2. Fraksinasi ................................................................................
10
3. Uji Identifikasi bakteri ............................................................
10
4. Uji Identifikasi Senyawa .........................................................
11
5. Uji Aktivitas Antibakteri.........................................................
11
D. Analisis Data .................................................................................
13
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ..........................................................
14
A. Identifikasi Tanaman ....................................................................
14
B. Fraksinasi Ekstrak Etanol Batang Inggu .......................................
14
C. Uji Identifikasi Bakteri .................................................................
15
D. Identifikasi Senyawa Fraksi Ekstrak Etanol Batang Inggu...........
17
E. Uji Aktivitas Antibakteri Fraksi Ekstrak Etanol Batang Inggu ....
18
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ..........................................................
20
A. Kesimpulan ...................................................................................
20
B. Saran .............................................................................................
20
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................
21
LAMPIRAN .......................................................................................................
25
vii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Pengelompokan hasil fraksinasi pertama ekstrak etanol batang inggu..14
Tabel 2. Pengelompokan hasil fraksinasi kedua ekstrak etanol batang inggu….15
Tabel 3. Pengelompokan hasil fraksinasi ketiga ekstrak etanol batang inggu… 15
Tabel 4. Hasil identifikasi senyawa fraksi ekstrak etanol batang inggu dengan
KLT dan beberapa pereaksi semprot..................................................17
Tabel 5. Jumlah pertumbuhan Streptococcus mutans dengan beberapa kelompok
perlakuan fraksi ekstrak etanol batang inggu …………………………………..18
Tabel 4. Jumlah pertumbuhan Staphylococcus aureus dengan beberapa
Kelompok perlakuan fraksi ekstrak etanolbatang inggu…………………19
viii
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Tanaman inggu (Ruta angustifolia L.) ..........................................
3
Gambar 2. Uji katalase Staphylococcus aureus dan Streptococcus mutans ...
16
Gambar 3. Uji fermentasi manitol pada Staphylococcus aureus dan
Streptococcus mutans ....................................................................
16
Gambar 4. Profil kromatogram uji identifikasi senyawa ................................
17
ix
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1. Surat Keterangan Identifikasi……………………………………... 26
Lampiran 2. Surat Keterangan Pembelian Mencit……………………………… 28
Lampiran 3. Perhitungan Rendemen, Dosis, Jumlah Koloni, dan
Persen Koloni……………...... ...................................................
29
Lampiran 4. Analisis Data Menggunakan Uji Fisher Exact…………………
32
Lampiran 5. Gambar koloni Streptococcus mutans dan Staphylococcus aureus.. 39
x
DAFTAR SINGKATAN
BHI
: Brain Heart Infussion broth
BBPPTOOT : Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat
Tradisional
C
: Celcius
Cfu
: Colony forming unit
Cm
: Centimeter
CMC-Na
: Natrium karbosimetilselulosa
H2O2
:
H2SO4
: Asam Sulfat
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
KOH
: Kalium Hidroksida
KCV
: Kromatografi Cair Vakum
kgBB
: Kilogram Berat Badan
m
: Meter
mg
: Milligram
mL
: Milliliter
MH
: Mueller Hinton
MSA
: Mannitol Salt Agar
NaNO2
: Natrium Nitrit
nm
: Nanometer
Rf
: Retardation Factor
S.mutans
: Streptococcus mutans
S.aureus
: Staphylococcus aureus
SD
: Standar Deviasi
UV
: Ultraviolet
Hidrogen peroksida
xi
INTISARI
Kandungan utama pada tanaman inggu (Ruta angustifolia [L.] Pers) memiliki
aktivitas antibakteri pada Streptococcus mutans dan Staphylococcus aureus.
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui aktivitas antibakteri fraksi dari eksrak
etanol batang inggu (Ruta angustifolia [L.] Pers) pada mencit yang diinfeksi
Streptococcus mutans dan Staphylococcus aureus.
Ekstrak etanol dari batang inggu difraksinasi dengan metode Kromatografi
Cair Vakum (KCV) menggunakan pelarut heksan: kloroform untuk mendapatkan
fraksi ekstrak etanol batang inggu. Uji aktivitas antibakteri menggunakan 10
kelompok perlakuan, yaitu kontrol positif (33 mg/kgBB gentamisin), kontrol negatif
(0.4 mL normal salin), fraksi ekstrak etanol batang inggu dengan konsentrasi 0,3 ; 1,2
; 2,14 g/kgBB yang disuntikkan secara intraperitoneal pada mencit. Cairan
intraperitoneal yang diperoleh setelah perlakuan, dikultur pada media Mueller Hinton
dan dihitung jumlah koloninya dengan colony counter.
Hasil penelitian pada kontrol positif tidak terdapat pertumbuhan bakteri dan
pada kontrol negatif terdapat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans sebesar 3,14
x 107 CFU/mL dan bakteri Staphylococcus aureus sebesar 3,7 x 107 CFU/mL.
Perlakuan fraksi ekstrak etanol batang inggu pada konsentrasi 0,3 ; 1,2; 2,14 g/kgBB
terdapat pertumbuhan bakteri Streptococcus mutans 1,59 x 107 ; 8,05 x 106 ; 2,23 x
105 CFU/mL dan bakteri Staphylococcus aureus 6,4 x 106 ; 3,03 x 106 ; 2,23 x 105
CFU/mL. Fraksi ekstrak etanol batang inggu tidak memiliki aktivitas antibakteri yang
secara signifikan menurunkan jumlah bakteri pada mencit yang diinfeksi
Staphylococcus aureus dan Streptococcus mutans.
Kata kunci : Antibakteri, Ruta angustifolia [L.] Pers, Streptococcus mutans,
Staphylococus aureus.
xii