EFEKTIVITAS EKSTRAK SAMBILOTO (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila GPl-04 SECARA IN VITRO

  EFEKTIVITAS EKSTRAK SAMBILOTO ( Andrographis paniculata

  

(Burm.f.) Nees) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI

Aeromonas hydrophila GPl-04 SECARA IN VITRO

  

SKRIPSI

  Diajukan Untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana S-1

  Oleh :

LANGGENG RESTIKO

  1001070018

  

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO

2015

  HALAMAN PERSETUJUAN SKRIPSI EFEKTIVITAS EKSTRAK SAMBILOTO ( Andrographis paniculata

  (Burm.f.) Nees) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI Aeromonas hydrophila GPl-04 SECARA IN VITRO

  Oleh:

LANGGENG RESTIKO 1001070018

  Telah Diperiksa dan Disetujui Oleh Dosen Pembimbing Diajukan Untuk Memenuhi Sebagian Syarat Mencapai Derajat Sarjana S-

  1 Mengetahui, Pembimbing I Pembimbing II Dini Siswani Mulia, S.Pi, M.Si Drs. Arief Husin, M.Si NIK.2160124 NIK.2160062

  

PERSEMBAHAN

  Alhamdulillah, puji syukur kehadirat Allah SWT atas rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik.

  Skripsi ini saya persembahkan untuk : 1.

  Bapak dan Ibuku tercinta (Alm. H. Salimi Arif Yuwono dan Kholifah).

  2. AdiKu tercinta (Khusminatun Maenuroh).

  3. Keluarga besar (Bani Sumedi).

  4. Rekan-rekan mahasiswa seperjuangan Pendidikan Biologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto angkatan 2010.

  MOTTO

  “Tiada manusia yang sempurna, kesempurnaan manusia adalah Ia yang mampu belajar menjadi lebih baik”

  “AL-QUR’AN Penyuci Hati, Penyempurna Kehidupan” “Bukan sekedar seberapa jauh melangkah, tetapi juga seberapa banyak mengambil hikmah”

  “SEMANGAT KE DEPAN SEMANGAT MASA DEPAN”

  EFEKTIVITAS EKSTRAK SAMBILOTO ( Andrographis paniculata

  

(Burm.f.) Nees) TERHADAP PERTUMBUHAN BAKTERI

Aeromonas hydrophila GPl-04 SECARA IN VITRO

  Langgeng Restiko 1001070018

  Abstrak

  Kebutuhan terhadap protein ikan terus meningkat setiap tahunnya sehingga mendorong masyarakat untuk melakukan budidaya ikan. Namun, dalam proses budidaya ikan banyak mengalami kendala, salah satunya adalah timbulnya penyakit pada ikan. Penyakit MAS merupakan penyakit pada ikan yang disebabkan oleh bakteri Aeromonas hydrophila. Penanggulangan yang selama ini dilakukan dengan pemberian antibiotik sintetik. Pemberian antibiotik sintetik sudah efektif, tetapi menyebabkan bakteri menjadi resisten dan beresiko menimbulkan residu dalam tubuh ikan. Oleh karena itu, dibutuhkan bahan alami sebagai alternatif lain untuk mengganti antibiotik sintetik tersebut. Salah satu bahan alami yang diduga dapat digunakan yaitu tumbuhan sambiloto (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui keefektivan ekstrak sambiloto terhadap pertumbuhan bakteri

  

Aeromonas hydrophila GPl-04 secara in vitro. Penelitian dilaksanakan selama

  bulan April sampai Juli 2014 di Laboratorium Terpadu dan Laboratorium Biologi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto. Metode yang digunakan adalah metode eksperimen menggunakan Rancangan Acak Lengkap dengan 4 kali ulangan pada masing-masing konsentrasi, yaitu konsentrasi 20%, 40%, 60%, 80%, 100% (v/v), dan kontrol positif (kloramfenikol). Parameter yang diamati adalah zona hambat yang dihasilkan oleh ekstrak sambiloto dan antibiotik kloramfenikol. Analisis data yang dilakukan menggunakan Analysis of Variance (ANOVA) dengan uji F pada taraf kepercayaan 95% dilanjutkan dengan uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pada taraf kepercayaan 95%. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak sambiloto mempunyai kemampuan menghambat pertumbuhan bakteri A. hydrophila GPl-04, dan terdapat perbedaan yang bermakna antar perlakuan. Namun, berdasarkan tabel CLSI kemampuan penghambatan tersebut termasuk kategori resisten dan tidak efektif jika dibandingkan dengan antibiotik kloramfenikol. Hasil perbandingan kesetaraan ekstrak sambiloto dan antibiotik kloramfenikol adalah 1: 133.193 (satuan ppm).

  Kata kunci : Aeromonas hydrophila GPl-04, efektivitas, kloramfenikol, Sambiloto.

UCAPAN TERIMA KASIH

  Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala limpahan rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Efektivitas Ekstrak Sambiloto (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) Terhadap Pertumbuhan Bakteri Aeromonas hydrophila GPl-04 secara in vitro”.

  Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih setulus-tulusnya kepada Dini Siswani Mulia S.Pi, M.Si dan Drs. Arief Husin, M.Si yang telah berkenan membimbing dan mengarahkan penulis dalam penyelesaian skripsi ini. Selanjutnya penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Drs. Heri Maryanto, M.Si, dan Teguh Julianto S.Pd., M.Si selaku penguji yang telah memberikan sumbangan pemikiran dan saran untuk kesempurnaan skripsi ini.

  Penulisan skripsi ini terwujud atas dukungan dan bantuan dari berbagai pihak, oleh karena itu penulis mengucapkan terima kasih juga kepada :

  1. Drs. Ahmad, M.Pd., Dekan Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

  2. Drs. Arief Husin, M.Si., Kaprodi Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan Ilmu Pendidikan Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

  3. Segenap Dosen Program Studi Pendidikan Biologi Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah membembing dan memberikan ilmunya kepada penulis selama perkuliahan.

  4. Laboran Laboratorium Terpadu Pendidikan Biologi dan Laboran Laboratorium Biologi Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

  5. Bapak dan Ibuku tercinta (Alm. H. Salimi Arif Yuwono dan Kholifah), terimakasih atas doa, semangat, serta dukungan yang tiada henti sehingga saya dapat menyelesaikan skripsi ini dengan baik.

  6. AdiKu tercinta (Khusminatun Maenuroh), terimakasih doa dan semangatnya.

  7. Keluarga besar Bani Sumedi, terimakasih atas doa, bantuan dan semangatnya.

  8. Riris Sagita Fernandes, terimakasih telah menjadi bagian dari semangatku.

  9. Sahabatku Aldina yang menghantarkanku mencapai IPK 3, Nany, Hesti, Ida, Nengsih, Lily, Wahyudianto dan seluruh sahabatku Pendidikan Biologi angkatan 2010 lainya yang telah memberikan bantuan, saran, dan motivasi.

  10. Segenap kawan-kawan nuansa kost yang penuh kesan.

  11. Semua pihak yang telah membantu terselesainya skripsi ini yang tidak dapat disebutkan satu persatu baik secara langsung maupun tidak langsung telah memberikan bantuan dan semangat selama penyusunan skripsi ini. Semoga segala amal dan kebaikan yang telah diberikan senantiasa mendapat balasan yang berlipat dari Allah SWT. Penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberikan pengetahuan dan kemajuan untuk bidang pendidikan.

  Purwokerto, 24 Februari 2015 Penulis

  

DAFTAR ISI

  Halaman

  UCAPAN TERIMA KASIH ........................................................................ viii DAFTAR ISI ................................................................................................... x DAFTAR TABEL .......................................................................................... xiii DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xiv DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................. xv

  BAB I PENDAHULUAN 1.1. Latar Belakang ................................................................................. 1 1.2. Rumusan Masalah ........................................................................... 4 1.3. Tujuan Penelitian ............................................................................. 4 1.4. Batasan Ilmiah ................................................................................ 4 1.5. Manfaat Penelitian ........................................................................... 5 BAB II TINJAUAN PUSTAKA 1.1. Bakteri Aeromonas hydrophila ........................................................ 6 1.1.1. Klasifikasi A. hydrophila ..................................................... 6 1.1.2. Morfologi A. hydrophila ...................................................... 6 1.1.3. Habitat dan Penyebaran Bakteri A. hydrophila ................... 7 1.1.4. Penyakit Motile Aeromonas Septicemia (MAS) .................. 8 1.1.5. Penanggulangan Penyakit MAS ......................................... 9 1.1.6. Antibiotik Kloramfenikol ................................................... 10 1.2. Tumbuhan Sambiloto (Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees) ................................................................................................ 11 1.2.1. Klasifikasi Tumbuhan Sambiloto ........................................ 11 1.2.2. Deskripsi Tumbuhan Sambiloto .......................................... 11 1.2.3. Habitat Tumbuhan Sambiloto .............................................. 12 1.2.4. Kandungan Senyawa Sambiloto .......................................... 12 1.2.5. Manfaat Sambiloto ............................................................... 13 1.3. Metabolisme Sekunder .................................................................... 13 1.4. Senyawa Metabolit Sekunder .......................................................... 14 1.5. Penapisan Fitokimia Simplisia Sambiloto ....................................... 16 1.6. Uji Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Sambiloto............................ 17

  1.7. Ekstraksi ......................................................................................... 18 1.8.

  Maserasi ........................................................................................... 19

  BAB III METODE PENELITIAN 3.1. Waktu dan Tempat Penelitian ......................................................... 21 3.2. Alat dan Bahan ................................................................................ 21 3.2.1. Alat.... .................................................................................. 21 3.2.2. Bahan... ................................................................................ 22 3.3. Metode Penelitian ............................................................................ 23 3.4. Cara kerja ......................................................................................... 23 3.4.1. Pembuatan Simplisia Sambiloto .......................................... 23 3.4.2. Pembuatan Ekstrak Sambiloto ............................................. 23 3.4.3. Uji Fitokimia terhadap Simplisia Sambiloto ....................... 24 3.4.4. Uji Fitokimia Ekstrak Sambiloto dengan Bantuan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ......................................... 25 3.4.5. Sterilisasi Peralatan dan Medium Tumbuh .......................... 27 3.4.6. Pembuatan Medium Pertumbuhan Bakteri A. hydrophila GPl-04 ............................................................... 27 a.

  Pembuatan Medium TSA .............................................. 27 b. Pembuatan Medium TSB ............................................... 28 c. Pembuatan Medium GSP ............................................... 28 3.4.7. Purifikasi Isolat Bakteri A. hydrophila GPl-04 .................... 28 3.4.8. Pembuatan Larutan Kloramfenikol ...................................... 29 3.4.9. Uji Sensitivitas Antibiotik Kloramfenikol .......................... 29 3.4.10.

  Uji Daya Hambat Ekstrak Sambiloto Terhadap Bakteri

  A. hydrophila GPl-04 ........................................................... 30 3.5.

  Penentuan Jumlah Sel Bakteri A. hydrophila GPl-04...................... 30 3.6. Penentuan Kesetaraan Efektivitas Ekstrak Sambiloto dengan

  Antibiotik Pembanding Kloramfenikol .......................................... 31 3.7. Analisis Data .................................................................................. 32

  BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1. Ekstraksi Sambiloto ......................................................................... 33 4.2. Uji Fitokimia Simplisia Sambiloto .................................................. 34 4.3. Uji Fitokimia Ekstrak Sambiloto dengan Bantuan Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ..................................................... 36 4.4. Purifikasi Bakteri A. hydrophila GPl-04 ......................................... 38 4.5. Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila GPl-04 ............. 38 4.6. Uji Sensifitas Antibiotik Kloramfenikol ........................................ 40 4.7. Uji Daya Hambat Ekstrak Sambiloto terhadap Pertumbuhan Bakteri A. hydrophila GPl-04 .......................................................... 42 4.8. Kesetaraan Efektivitas Ekstrak Sambiloto dengan Antibiotik Pembanding Kloramfenikol ............................................................ 44 BAB V SIMPULAN DAN SARAN

  5.1 Simpulan .......................................................................................... 47

  5.2 Saran ................................................................................................ 47

  DAFTAR PUSTAKA ..................................................................................... 48 LAMPIRAN .................................................................................................... 52

  DAFTAR TABEL

  Halaman

Tabel 4.1. Bahan Pembuatan Ekstrak Sambiloto dan Hasilnya ..................... 33Tabel 4.2. Hasil Uji Fitokimia Simplisa Sambiloto ....................................... 35Tabel 4.3. Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) Ekstrak Sambiloto .... 37Tabel 4.5 Hasil Perhitungan Jumlah Koloni Bakteri A. hydrophila GPl- 04 ................................................................................................... 39Tabel 4.6 Hasil Uji Sensitifitas Antibiotik Kloramfenikol............................ 40Tabel 4.7 Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Sambiloto................................... 42

  DAFTAR GAMBAR

  Halaman

Gambar 2.1 Bakteri Aeromonas hydrophila .................................................... 7Gambar 2.2 Struktur Bangun Kloramfenikol ................................................... 10Gambar 2.3 Tumbuhan Sambiloto (Andrographis paniculata (Burm.f.)

  Nees) ............................................................................................. 12

Gambar 4.1 Bahan Pembuatan Ekstrak Sambiloto dan Hasilnya .................... 34Gambar 4.2 Hasil Uji Simplisia Sambiloto ..................................................... 36Gambar 4.3 Hasil Uji KLT Ekstrak Sambiloto ................................................ 37Gambar 4.4 Hasil Purifikasi Isolat Bakteri A. hydrophila GPl-04 ................... 38Gambar 4.5 Hasil Perhitungan Jumlah Koloni A. hydrophila GPl-04 dengan TPC ................................................................................... 39Gambar 4.6 Hasil Uji Sensitifitas Antibiotik Kloramfenikol........................... 41Gambar 4.7 Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Sambiloto ................................. 44Gambar 4.7 Kurva Hubungan Antara Konsentrasi Kloramfenikol dengan

  Diameter Zona Hambat ................................................................. 45