Uji Validasi Spektrofotometri Derivatif Dalam Melakukan Estimasi Terhadap Kandungan Kafein dan Natrium Benzoat Dalam Minuman Berenergi
UJI VALIDASI SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF DALAM
MELAKUKAN ESTIMASI TERHADAP KANDUNGAN
KAFEIN DAN NATRIUM BENZOAT
DALAM MINUMAN BERENERGI
SKRIPSI
OLEH:
LIA PUSVITA
NIM 121524060
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2014
i
Universitas Sumatera Utara
UJI VALIDASI SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF DALAM
MELAKUKAN ESTIMASI TERHADAP KANDUNGAN
KAFEIN DAN NATRIUM BENZOAT
DALAM MINUMAN BERENERGI
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
LIA PUSVITA
NIM 121524060
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2014
ii
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
UJI VALIDASI SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF DALAM
MELAKUKAN ESTIMASI TERHADAP KANDUNGAN
KAFEIN DAN NATRIUM BENZOAT
DALAM MINUMAN BERENERGI
OLEH:
LIA PUSVITA
NIM 121524060
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 27 Agustus 2014
PembimbingI,I,
Pembimbing
Panitia Penguji,
Prof.
Dr. UripHarahap,
Apt
Dr.
Muchlisyam,
M.Si., Apt.
NIP195006221980021001
195301011983031004
NIP
Prof.Dr. Jansen
SumadioHadisahputra,
Prof.
Silalahi, M.App.Sc., Apt.
NIP195006071979031001
1
11281983031002
NIP
Pembimbing II,
Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt.
NIP 195006221980021001
Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.
NIP195008281976032002
Dra. Sudarmi, M.Si., Apt.
NIP 195409101983032001
Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt.
NIP 195401101980032001
Medan, Agustus 2014
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Prof. Dr. SumadioHadisahputra, Apt.
NIP 195311281983031002
iii
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan rahmat
dan kasih_Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini yang berjudul
“Uji Validasi Spektrofotometri Derivatif Dalam Melakukan Estimasi Terhadap
Kandungan Kafein dan Natrium Benzoat Dalam Minuman Berenergi”. Skripsi ini
diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis juga mengucapkan terima kasih yang tulus
dan ilkhas kepadaBapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan
Fakultas Farmasi USU Medan yang telah memberikan fasilitas sehingga penulis
dapat menyelesaikan pendidikan demi memperoleh gelar sarjana farmasi. Bapak
Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt., dan Ibu Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.,
selaku Pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan, dan nasehat
selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. IbuMarianne, S.Si,
M.Si., Apt., selaku Penasehat Akademik yang telah memberikan bimbingan
kepada penulis selama masa perkuliahan. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas
Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama perkuliahan. Bapak dan Ibu
Staf Laboratorium Penelitian yangtelah memberikan fasilitas, petunjuk dan
membantu selama penelitian.
Terima kasih kepada Bapak Prof. Dr. Jansen Silalahi, M.App.Sc., Apt., Ibu
Dra. Sudarmi, M.Si., Apt., dan Ibu Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt., selaku
dosen penguji yang telah memberikan kritik, saran, dan arahan kepada penulis
dalam menyelesaikan skripsi ini.
Penulis mengucapkan terima kasih sebesar-besarnya kepada Ayahanda dan
iv
Universitas Sumatera Utara
Ibunda tercinta, Sunarto S.Pd., dan Uspa Lubis S.Pd., yang tiada hentinya
memberi semangat dan doa bagi kesuksesan penulis, juga kepada Kakak dan
Adikku tersayang, Novika, SKM., dan M. Andi Tia Darma yang selalu memberi
doa, motivasi dan semangat.Buat Teman dekat, M. Irfan, S.Kom., yang telah
banyak membantu serta memberi semangat dan motivasi sehingga penulisan
skripsi ini dapat terselesaikan dan buat teman-teman seperjuangan di
Laboratorium Penelitian: Putri, Dadang, Yudi, Ulul dan Kak Uti serta temanteman: Sonda, Ira, Futri, Arnis, Kak Dinda, Kak Eca, Zizi, Kak Maya, Fauzi, Kak
Tari dan teman-teman stambuk 2012 lainnya yang tidak dapat penulis sebutkan
satu-persatu namanya, terima kasih telah memberi bantuan, dukungan dan
motivasi dalam menyelesaikan penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari
kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis menerima
kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata, penulis berharap
semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan, Juli 2014
Penulis,
Lia Pusvita
NIM 121524060
v
Universitas Sumatera Utara
UJI VALIDASISPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF DALAM MELAKUKAN
ESTIMASI TERHADAP KANDUNGAN KAFEIN DAN NATRIUM BENZOAT
DALAM MINUMAN BERENERGI
ABSTRAK
Minuman energi adalah minuman yang mengandung satu atau lebih bahan
yang mudah dan cepat diserapoleh tubuh untuk menghasilkan energi dengan atau
tanpa bahan tambahanmakanan yang diizinkan.Tujuan penelitian ini adalah
menguji validasi metode spektrofotometri derivatif dalam melakukan estimasi
terhadap kandungan kafein dan natrium benzoat dalam minuman berenergi.
Metode penelitian yang dilakukan adalah pengambilan sampel secara
purposif terhadap minuman berenergi Kratingdaeng® dan M-150® dan melakukan
penetapan kadar terhadap kandungan kafein dan natrium benzoat dengan
spektrofotometri derivatif metode zero crossing pada serapan derivat kedua dalam
pelarut HCl 0,1N.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan kafein dalam sampel
Kratingdaeng® yang dianalisis sebesar(45,9049± 3,3325) mg dan sampel M-150®
sebesar (46,7314± 2,1077) mg sedangkan kandungan natrium benzoat
dalamsampel Kratingdaeng®sebesar (298,9807± 79,9639) mg/kg dan sampel M150® sebesar (283,0213± 37,6049)mg/Kg memenuhi persyaratan SNI 01-66842002 tentang minuman energiyaitu kafein maksimum 50 mg/sajian dan natrium
benzoat maksimum 600 mg/kg. Uji perolehan kembali kafein sebesar 101,03%
dan natrium benzoat sebesar 97,66%, sedangkan RSD kafein sebesar 4,96% dan
natrium benzoat sebesar 4,81%.
Dari hasil penelitian yang dilakukan maka metode spektrofotometri
derivatif yang digunakan memenuhi persyaratan akurasi dan presisi, dan dapat
digunakan untuk menetapkan kandungan kafein dan natrium benzoat dalam
minuman berenergi.
Kata kunci:Minuman Energi, Kafein, Natrium Benzoat, Spektrofotometri
Derivatif, Zero Crossing, Derivat Kedua, Validasi
vi
Universitas Sumatera Utara
VALIDATION TEST OF DERIVATIVE SPECTROFOTOMETRY IN
ESTIMATING THE CONTENT OFCAFFEINE AND SODIUM
BENZOATE IN ENERGYDRINKS
ABSTRACT
Energy drinks arebeveragesthat containoneormore ingredients that
areeasily and quicklyabsorbedby the bodytoproduce energywithorwithoutfood
additives thatarepermitted. The aim of this research is to test the validation of
derivative spectrophotometry method in estimating the content of caffeine and
sodium benzoate in energy drinks.
The method of this research was doneby purposive samplingto
Kratingdaeng® and M-150® energy drinks sample and determine the levels of
caffeine and sodium benzoate content using derivative spectrophotometry with
zero crossing method to second derivative absorption in HCl 0,1N.
The results of research showed that caffeine in Kratingdaeng® that were
analyzed are(45.9049± 3.3325) mg and M-150® are (46.7314± 2.1077) mg, and
content of sodium benzoate in Kratingdaeng® are (298,9807± 79,9639) mg/kg
and M-150® are (283.0213± 37.6049)mg/kgfulfilled requirement of SNI 01-66842002 on energy drinks are caffeine maximum 50 mg/serving and sodiumbenzoate
maximum 600 mg/kg.Recovery of caffeineare 101.03% and sodium benzoate are
97.66%. RSD of caffeine are 4.96%and sodium benzoate are 4.81%.
From the results of research was done so that derivative spectrophotometry
method fulfilled requirement of accuracy and precision and can used to
determinate of caffeine and sodium benzoate in energy drinks.
Keywords :Energy Drinks, Caffeine, Sodium Benzoate, Derivatif
Spectrophotometry, Zero Crossing, Second Order, Validation
vii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ................................................................................................ i
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................. iii
KATA PENGANTAR .......................................................................... iv
ABSTRAK ......................................................................................... vi
ABSTRACT ....................................................................................... vii
DAFTAR ISI ....................................................................................... viii
DAFTAR TABEL ...............................................................................
xii
DAFTAR GAMBAR ...........................................................................
xiii
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................
xvii
BAB IPENDAHULUAN ....................................................................
1
1.1
Latar Belakang ................................................................
1
1.2
Perumusan Masalah ........................................................
4
1.3
Hipotesis .........................................................................
4
1.4
Tujuan Penelitian ............................................................
5
1.5
Manfaat Penelitian ..........................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..........................................................
6
2.1
Minuman Berenergi ........................................................
6
2.2
Uraian Bahan ..................................................................
8
2.2.1 Kafein ..................................................................
8
2.2.2 Natrium Benzoat ..................................................
10
Spektrofotometri .............................................................
12
2.3.1 Hukum Lambert-Beer .........................................
14
2.3
viii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ................................................................................................ i
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................. iii
KATA PENGANTAR .......................................................................... iv
ABSTRAK ......................................................................................... vi
ABSTRACT ....................................................................................... vii
DAFTAR ISI ....................................................................................... viii
DAFTAR TABEL ...............................................................................
xii
DAFTAR GAMBAR ...........................................................................
xiii
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................
xvii
BAB IPENDAHULUAN ....................................................................
1
1.1
Latar Belakang ................................................................
1
1.2
Perumusan Masalah ........................................................
4
1.3
Hipotesis .........................................................................
4
1.4
Tujuan Penelitian ............................................................
5
1.5
Manfaat Penelitian ..........................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..........................................................
6
2.1
Minuman Berenergi ........................................................
6
2.2
Uraian Bahan ..................................................................
8
2.2.1 Kafein ..................................................................
8
2.2.2 Natrium Benzoat ..................................................
10
Spektrofotometri .............................................................
12
2.3.1 Hukum Lambert-Beer .........................................
14
2.3
viii
Universitas Sumatera Utara
2.3.2 Kegunaan Spektrofotometri..................................
15
Spektrofotometri Derivatif ..............................................
16
2.4.1 Komponen Spektrofotometri Derivatif .................
22
2.4.2 Kegunaan Spektrofotometri Derivatif ...................
22
Validasi Metode Analisis .................................................
24
2.5.1 Akurasi ................................................................
25
2.5.2 Presisi .................................................................
26
2.5.3 Batas Deteksi dan Kuantitasi ................................
26
2.5.4 Linieritas .............................................................
27
2.5.5 Rentang ...............................................................
27
BAB III METODE PENELITIAN ......................................................
28
2.4
2.5
3.1
Jenis Penelitian ...............................................................
28
3.2
Tempat dan Waktu Penelitian ..........................................
28
3.3
Alat ................................................................................
28
3.4
Bahan .............................................................................
28
3.5
Pengambilan Sampel ......................................................
28
3.6
Prosedur Penelitian .........................................................
29
3.6.1 Pembuatan Pereaksi .............................................
29
3.6.2 Pembuatan Larutan Induk Baku dan Larutan
Standar ................................................................
29
3.6.2.1Pembuatan Larutan Induk Baku Kafein
BPFI .......................................................
29
3.6.2.2Pembuatan Larutan Induk Baku Asam
Benzoat BPFI .........................................
29
3.6.2.3Pembuatan Larutan Satndar Kafein ...........
30
ix
Universitas Sumatera Utara
3.6.2.4Pembuatan Larutan Standar Asam
Benzoat .................................................
30
3.6.3 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum ...........
30
3.6.3.1Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum
Kafein.....................................................
30
3.6.3.2Pembuatan Spektrum SerapanMaksimum
Asam Benzoat ........................................
30
3.6.4 Pembuatan Spektrum Serapan Derivatif ..............
31
3.6.4.1Pembuatan Spektrum SerapanDerivatif
Kafein.....................................................
31
3.6.4.2Pembuatan Spektrum SerapanDerivatif
Asam Benzoat .........................................
31
3.6.5 Penentuan Zero Crossing ......................................
31
3.6.6 Penentuan Panjang Gelombang (λ) Analisis ........
31
3.6.7 Pembuatandan Penentuan Linieritas Kurva
Kalibrasi ...............................................................
32
3.6.7.1Pembuatandan Penentuan Linieritas
Kurva Kalibrasi Kafein ..........................................
32
3.6.7.2Pembuatan dan Penentuan Linieritas
Kurva Kalibrasi Asam Benzoat ..................
33
3.6.8 Penetapan JumlahKafein dan Natrium Benzoat
dalam Minuman Berenergi ....................................
33
3.6.9 Uji Validasi ..........................................................
35
3.6.9.1 Uji Akurasi ...............................................
35
3.6.9.2 Uji Presisi ................................................
36
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ..............................................
37
4.1 Hasil Penentuan Kurva Serapan Maksimum.....................
37
4.2
Hasil Penentuan Kurva Serapan Kafein dan Asam
Benzoat ..........................................................................
38
x
Universitas Sumatera Utara
4.3
Hasil Penentuan Kurva Serapan Derivat ..........................
39
4.3.1 Kurva Serapan DerivatPertama ............................
39
Hasil Penentuan Zero Crossing ........................................
39
4.4.1 Zero Crossing DerivatPertama..............................
39
4.5 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Analisis .................
40
4.6 Hasil Penentuan Linieritas Kurva Kalibrasi......................
45
4.6.1. Kurva Kalibrasi ...................................................
45
4.6.2. Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi .....................
46
Hasil PenentuanJumlah Kafein danNatrium Benzoat
dalam Sampel Minuman Berenergi ..................................
46
Hasil Uji Validasi ............................................................
48
4.8.1 Hasil Uji Akurasi ...................................................
48
4.8.2Hasil Uji Presisi ......................................................
49
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ...............................................
50
4.4
4.7
4.8
5.1
Kesimpulan ....................................................................
50
5.2
Saran ...............................................................................
50
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................
51
LAMPIRAN ........................................................................................
55
xi
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Panjang Gelombang Analisis dan Absorbansi .........................
42
Tabel 2.
47
Jumlah Kafein dan Natrium Benzoat dalam Sampel ..............
Tabel 3. Perolehan Kembali Kafein dan Natrium Benzoat dengan
Metode Penambahan Baku Standar pada Minuman M-150® .. ..
49
xii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Struktur Kafein ...............................................................
8
Gambar 2.
Struktur Natrium Benzoat ...............................................
10
Gambar 3.
Kurva Serapan Derivat Pertama sampai Derivat
Keempat .........................................................................
19
Gambar 4.
Kurva Sederhana Aplikasi Zero Crossing .........................
20
Gambar 5.
Kurva Sederhana Aplikasi Spektrum Derivatif ................
22
Gambar 6.
Kurva Serapan Maksimum Kafein 9 µg/mL .....................
37
Gambar 7.
Kurva Serapan Maksimum Asam Benzoat 5 µg/mL .........
37
Gambar 8.
Kurva Tumpang Tindih Serapan Kafein dalam berbagai
konsentrasi .....................................................................
38
Kurva Tumpang Tindih Serapan Asam Benzoat dalam
berbagai konsentrasi .......................................................
38
Gambar 10. Zero Crossing Kafein Derivat Pertama ............................
39
Gambar 11. Zero Crossing Asam Benzoat Derivat Pertama ................
40
Gambar 12. Kurva Tumpang Tindih Serapan Derivatif Pertama
Kafein 9 µg/mL dan Asam Benzoat 5 µg/mL dan
Campuran yang Didalamnya Terdapat Kafein 9 µg/mL
dan Asam Benzoat 5 µg/mL .............................................
40
Gambar 13. Zero Crossing Derivat Kedua Kafein 9 µg/mL pada λ =
293,40 nm ......................................................................
41
Gambar 14. Zero Crossing Derivat Kedua Asam Benzoat 5 µg/mL
pada λ = 213,20 nm .......................................................
41
Gambar 15. Kurva Tumpang Tindih Campuran Kafein 9 µg/mL dan
Asam Benzoat 5 µg/mL dengan Sampel Kratingdaeng®
dan M-150® .....................................................................
43
Gambar 16. Kurva Tumpang Tindih Campuran Kafein 9 µg/mL dan
Asam Benzoat 5 µg/mL dengan Sampel M-150® .............
44
Gambar 17. Kurva Tumpang Tindih Campuran Kafein 9 µg/mL dan
Asam Benzoat 5 µg/mL dengan Sampel Kratingdaeng® ...
44
Gambar 9.
xiii
Universitas Sumatera Utara
Gambar 18. Kurva Kalibrasi Kafein Pada Panjang Gelombang
293,40 nm .......................................................................
45
Gambar 19. Kurva Kalibrasi Asam Benzoat Pada Panjang
Gelombang 213,20 nm ....................................................
45
Gambar 20. Sampel Minuman Berenergi dan Spektrofotometer
Ultraviolet (UV) .............................................................
55
Gambar 21. Kurva Serapan Kafein 8 µg/mL .......................................
57
Gambar 22. Kurva Serapan Kafein 9 µg/mL .......................................
57
Gambar 23. Kurva Serapan Kafein 10 µg/mL .....................................
58
Gambar 24. Kurva Serapan Kafein 11 µg/mL .....................................
58
Gambar 25. Kurva Serapan Kafein 12 µg/mL .....................................
59
Gambar 26. Kurva Serapan Asam Benzoat 3 µg/mL ...........................
59
Gambar 27. Kurva Serapan Asam Benzoat 4 µg/mL ...........................
60
Gambar 28. Kurva Serapan Asam Benzoat 5 µg/mL ...........................
60
Gambar 29. Kurva Serapan Asam Benzoat 6 µg/mL ...........................
61
Gambar 30. Kurva Serapan Asam Benzoat 7 µg/mL ...........................
61
Gambar 31. Kurva Serapan Derivat Pertama Kafein 8 µg/mL .............
62
Gambar 32. Kurva Serapan Derivat Pertama Kafein 9 µg/mL .............
62
Gambar 33. Kurva Serapan Derivat Pertama Kafein 10 µg/mL ...........
63
Gambar 34. Kurva Serapan Derivat Pertama Kafein 11 µg/mL ...........
63
Gambar 35. Kurva Serapan Derivat Pertama Kafein 12 µg/mL ...........
64
Gambar 36. Kurva Serapan Derivat Pertama Asam Benzoat 3 µg/mL .
64
Gambar 37. Kurva Serapan Derivat Pertama Asam Benzoat 4 µg/mL .
65
Gambar 38. Kurva Serapan Derivat Pertama Asam Benzoat 5 µg/mL .
65
Gambar 39. Kurva Serapan Derivat Pertama Asam Benzoat 6 µg/mL .
66
xiv
Universitas Sumatera Utara
Gambar 40. Kurva Serapan Derivat Pertama Asam Benzoat 7 µg/mL .
66
Gambar 41. Kurva Serapan Derivat Kedua Kafein 8 µg/mL ................
67
Gambar 42. Kurva Serapan Derivat Kedua Kafein 9 µg/mL ................
67
Gambar 43. Kurva Serapan Derivat Kedua Kafein 10 µg/mL ..............
68
Gambar 44. Kurva Serapan Derivat Kedua Kafein 11 µg/mL ..............
68
Gambar 45. Kurva Serapan Derivat Kedua Kafein 12 µg/mL ..............
69
Gambar 46. Kurva Serapan Derivat Kedua Asam Benzoat 3 µg/mL ....
69
Gambar 47. Kurva Serapan Derivat Kedua Asam Benzoat 4 µg/mL ....
70
Gambar 48. Kurva Serapan Derivat Kedua Asam Benzoat 5 µg/mL ....
70
Gambar 49. Kurva Serapan Derivat Kedua Asam Benzoat 6 µg/mL ....
71
Gambar 50. Kurva Serapan Derivat Kedua Asam Benzoat 7 µg/mL ....
71
Gambar 51. Kurva Serapan Derivatif Kedua Kafein 9 μg/mL(λ =
293,40 nm) ......................................................................
72
Gambar 52. Kurva Serapan Derivatif Kedua Asam Benzoat 5 μg/mL
(λ= 213,20 nm) ................................................................
72
Gambar 53. Kurva serapan derivat kedua campuran yang di
dalamnya terdapat kafein 9 μg/mL dan asam benzoat 5
μg/mL..............................................................................
73
Gambar 54. Kurva Serapan Kratingdaeng® -1 .....................................
80
Gambar 55. Kurva Serapan Kratingdaeng® -2 ...................................
80
Gambar 56. Kurva Serapan Kratingdaeng® -3 ...................................
81
Gambar 57. Kurva Serapan Kratingdaeng® -4 ...................................
81
Gambar 58. Kurva Serapan Kratingdaeng® -5 ...................................
82
Gambar 59. Kurva Serapan Kratingdaeng® -6 ...................................
82
Gambar 60. Kurva Serapan M-150® -1 ...............................................
83
Gambar 61. Kurva Serapan M-150® -2 ..............................................
83
xv
Universitas Sumatera Utara
Gambar 62. Kurva Serapan M-150® -3 ..............................................
84
Gambar 63. Kurva Serapan M-150® -4 ..............................................
84
Gambar 64. Kurva Serapan M-150® -5 ..............................................
85
Gambar 65. Kurva Serapan M-150® -6 ..............................................
85
Gambar 66. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali M-150® -1 .........
99
Gambar 67. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali M-150® -2 .........
99
Gambar 68. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali M-150® -3 .........
100
Gambar 69. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali M-150® -4 .........
100
Gambar 70. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali M-150® -5 .........
101
Gambar 71. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali M-150® -6 .........
101
xvi
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran1.
Gambar dan Spesifikasi Sampel serta Gambar Alat
Spektrofotometer Ultraviolet (UV)................................ . 55
Lampiran 2.
Kurva Serapan Kafein dan Asam Benzoat .....................
57
Lampiran3.
Kurva Serapan Derivat Pertama Kafein dan Asam
Benzoat.........................................................................
62
Lampiran 4.
Kurva Serapan Derivat Kedua Kafein dan Asam
Benzoat......................................................................... . 67
Lampiran 5.
Kurva Serapan Panjang Gelombang Analisis ................. . 72
Lampiran 6.
Data Kalibrasi Kafein BPFI, Persamaan Regresi dan
Koefisien Korelasi ....................................................... . 74
Lampiran 7.
Data Kalibrasi Asam Benzoat BPFI, Persamaan
Regresi dan Koefisien Korelasi .................................... . 76
Lampiran 8.
Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas
Kuantitasi (LOQ) Kafein ............................................... . 78
Lampiran 9.
Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas
Kuantitasi (LOQ) Asam Benzoat ................................... . 79
Lampiran 10. Kurva Serapan Derivat Kedua Sampel .......................... . 80
Lampiran 11. Hasil Analisis Kadar Kafein dan Natrium Benzoat
dalam Sampel ................................................................ .
86
Lampiran 12. Contoh Perhitungan Jumlah Kafein dan Natrium
Benzoat dalam Sampel Kratingdaeng® .......................... . 87
Lampiran 13. Contoh Perhitungan Jumlah Kafein dan Natrium
Benzoat dalam Sampel M-150® .................................... . 90
Lampiran 14. Perhitungan Statistik Jumlah Kafein dan Natrium
Benzoat dalam Sampel Kratingdaeng® .......................... . 93
Lampiran 15. Perhitungan Statistik Jumlah Kafein dan Natrium
Benzoat dalam Sampel M-150® .................................... . 96
Lampiran 16. Kurva Serapan Uji Perolehan KembaliM-150® ............. . 99
Lampiran 17. Hasil Uji Perolehan Kembali Kafein dan Natrium
Benzoat Setelah Penambahan Masing-Masing Larutan
xvii
Universitas Sumatera Utara
Standar Pada Sampel .................................................... . 102
Lampiran 18. Contoh Perhitungan Uji Perolehan Kembali dengan
menggunakan Sampel M-150® ..................................... . 103
Lampiran 19. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Jumlah
Kafein ........................................................................... . 106
Lampiran 20. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Kadar
Natrium Benzoat .......................................................... . 107
Lampiran 21. Perhitungan Pembuatan HCl 0,1N ................................ . 108
Lampiran 22. Bagan Alir Prosedur Penelitian .................................... . 109
Lampiran 23. Daftar Nilai Distribusi t................................................. . 113
Lampiran 24. Sertifikat Pengujian Kafein .......................................... .
114
Lampiran 25. Sertifikat Pengujian Natrium Benzoat .......................... .
115
Lampiran 26. SNI 01-6684-2002 ........................................................ .
116
Lampiran 27. SNI 01-0222-1995 ........................................................ .
119
xviii
Universitas Sumatera Utara
MELAKUKAN ESTIMASI TERHADAP KANDUNGAN
KAFEIN DAN NATRIUM BENZOAT
DALAM MINUMAN BERENERGI
SKRIPSI
OLEH:
LIA PUSVITA
NIM 121524060
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2014
i
Universitas Sumatera Utara
UJI VALIDASI SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF DALAM
MELAKUKAN ESTIMASI TERHADAP KANDUNGAN
KAFEIN DAN NATRIUM BENZOAT
DALAM MINUMAN BERENERGI
SKRIPSI
Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
LIA PUSVITA
NIM 121524060
PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2014
ii
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
UJI VALIDASI SPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF DALAM
MELAKUKAN ESTIMASI TERHADAP KANDUNGAN
KAFEIN DAN NATRIUM BENZOAT
DALAM MINUMAN BERENERGI
OLEH:
LIA PUSVITA
NIM 121524060
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 27 Agustus 2014
PembimbingI,I,
Pembimbing
Panitia Penguji,
Prof.
Dr. UripHarahap,
Apt
Dr.
Muchlisyam,
M.Si., Apt.
NIP195006221980021001
195301011983031004
NIP
Prof.Dr. Jansen
SumadioHadisahputra,
Prof.
Silalahi, M.App.Sc., Apt.
NIP195006071979031001
1
11281983031002
NIP
Pembimbing II,
Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt.
NIP 195006221980021001
Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.
NIP195008281976032002
Dra. Sudarmi, M.Si., Apt.
NIP 195409101983032001
Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt.
NIP 195401101980032001
Medan, Agustus 2014
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Prof. Dr. SumadioHadisahputra, Apt.
NIP 195311281983031002
iii
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena limpahan rahmat
dan kasih_Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini yang berjudul
“Uji Validasi Spektrofotometri Derivatif Dalam Melakukan Estimasi Terhadap
Kandungan Kafein dan Natrium Benzoat Dalam Minuman Berenergi”. Skripsi ini
diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar sarjana farmasi pada
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.
Pada kesempatan ini penulis juga mengucapkan terima kasih yang tulus
dan ilkhas kepadaBapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan
Fakultas Farmasi USU Medan yang telah memberikan fasilitas sehingga penulis
dapat menyelesaikan pendidikan demi memperoleh gelar sarjana farmasi. Bapak
Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt., dan Ibu Prof. Dr. Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt.,
selaku Pembimbing yang telah memberikan waktu, bimbingan, dan nasehat
selama penelitian hingga selesainya penyusunan skripsi ini. IbuMarianne, S.Si,
M.Si., Apt., selaku Penasehat Akademik yang telah memberikan bimbingan
kepada penulis selama masa perkuliahan. Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas
Farmasi USU Medan yang telah mendidik selama perkuliahan. Bapak dan Ibu
Staf Laboratorium Penelitian yangtelah memberikan fasilitas, petunjuk dan
membantu selama penelitian.
Terima kasih kepada Bapak Prof. Dr. Jansen Silalahi, M.App.Sc., Apt., Ibu
Dra. Sudarmi, M.Si., Apt., dan Ibu Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt., selaku
dosen penguji yang telah memberikan kritik, saran, dan arahan kepada penulis
dalam menyelesaikan skripsi ini.
Penulis mengucapkan terima kasih sebesar-besarnya kepada Ayahanda dan
iv
Universitas Sumatera Utara
Ibunda tercinta, Sunarto S.Pd., dan Uspa Lubis S.Pd., yang tiada hentinya
memberi semangat dan doa bagi kesuksesan penulis, juga kepada Kakak dan
Adikku tersayang, Novika, SKM., dan M. Andi Tia Darma yang selalu memberi
doa, motivasi dan semangat.Buat Teman dekat, M. Irfan, S.Kom., yang telah
banyak membantu serta memberi semangat dan motivasi sehingga penulisan
skripsi ini dapat terselesaikan dan buat teman-teman seperjuangan di
Laboratorium Penelitian: Putri, Dadang, Yudi, Ulul dan Kak Uti serta temanteman: Sonda, Ira, Futri, Arnis, Kak Dinda, Kak Eca, Zizi, Kak Maya, Fauzi, Kak
Tari dan teman-teman stambuk 2012 lainnya yang tidak dapat penulis sebutkan
satu-persatu namanya, terima kasih telah memberi bantuan, dukungan dan
motivasi dalam menyelesaikan penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa dalam penulisan skripsi ini masih jauh dari
kesempurnaan, oleh karena itu dengan segala kerendahan hati, penulis menerima
kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhir kata, penulis berharap
semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan, Juli 2014
Penulis,
Lia Pusvita
NIM 121524060
v
Universitas Sumatera Utara
UJI VALIDASISPEKTROFOTOMETRI DERIVATIF DALAM MELAKUKAN
ESTIMASI TERHADAP KANDUNGAN KAFEIN DAN NATRIUM BENZOAT
DALAM MINUMAN BERENERGI
ABSTRAK
Minuman energi adalah minuman yang mengandung satu atau lebih bahan
yang mudah dan cepat diserapoleh tubuh untuk menghasilkan energi dengan atau
tanpa bahan tambahanmakanan yang diizinkan.Tujuan penelitian ini adalah
menguji validasi metode spektrofotometri derivatif dalam melakukan estimasi
terhadap kandungan kafein dan natrium benzoat dalam minuman berenergi.
Metode penelitian yang dilakukan adalah pengambilan sampel secara
purposif terhadap minuman berenergi Kratingdaeng® dan M-150® dan melakukan
penetapan kadar terhadap kandungan kafein dan natrium benzoat dengan
spektrofotometri derivatif metode zero crossing pada serapan derivat kedua dalam
pelarut HCl 0,1N.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa kandungan kafein dalam sampel
Kratingdaeng® yang dianalisis sebesar(45,9049± 3,3325) mg dan sampel M-150®
sebesar (46,7314± 2,1077) mg sedangkan kandungan natrium benzoat
dalamsampel Kratingdaeng®sebesar (298,9807± 79,9639) mg/kg dan sampel M150® sebesar (283,0213± 37,6049)mg/Kg memenuhi persyaratan SNI 01-66842002 tentang minuman energiyaitu kafein maksimum 50 mg/sajian dan natrium
benzoat maksimum 600 mg/kg. Uji perolehan kembali kafein sebesar 101,03%
dan natrium benzoat sebesar 97,66%, sedangkan RSD kafein sebesar 4,96% dan
natrium benzoat sebesar 4,81%.
Dari hasil penelitian yang dilakukan maka metode spektrofotometri
derivatif yang digunakan memenuhi persyaratan akurasi dan presisi, dan dapat
digunakan untuk menetapkan kandungan kafein dan natrium benzoat dalam
minuman berenergi.
Kata kunci:Minuman Energi, Kafein, Natrium Benzoat, Spektrofotometri
Derivatif, Zero Crossing, Derivat Kedua, Validasi
vi
Universitas Sumatera Utara
VALIDATION TEST OF DERIVATIVE SPECTROFOTOMETRY IN
ESTIMATING THE CONTENT OFCAFFEINE AND SODIUM
BENZOATE IN ENERGYDRINKS
ABSTRACT
Energy drinks arebeveragesthat containoneormore ingredients that
areeasily and quicklyabsorbedby the bodytoproduce energywithorwithoutfood
additives thatarepermitted. The aim of this research is to test the validation of
derivative spectrophotometry method in estimating the content of caffeine and
sodium benzoate in energy drinks.
The method of this research was doneby purposive samplingto
Kratingdaeng® and M-150® energy drinks sample and determine the levels of
caffeine and sodium benzoate content using derivative spectrophotometry with
zero crossing method to second derivative absorption in HCl 0,1N.
The results of research showed that caffeine in Kratingdaeng® that were
analyzed are(45.9049± 3.3325) mg and M-150® are (46.7314± 2.1077) mg, and
content of sodium benzoate in Kratingdaeng® are (298,9807± 79,9639) mg/kg
and M-150® are (283.0213± 37.6049)mg/kgfulfilled requirement of SNI 01-66842002 on energy drinks are caffeine maximum 50 mg/serving and sodiumbenzoate
maximum 600 mg/kg.Recovery of caffeineare 101.03% and sodium benzoate are
97.66%. RSD of caffeine are 4.96%and sodium benzoate are 4.81%.
From the results of research was done so that derivative spectrophotometry
method fulfilled requirement of accuracy and precision and can used to
determinate of caffeine and sodium benzoate in energy drinks.
Keywords :Energy Drinks, Caffeine, Sodium Benzoate, Derivatif
Spectrophotometry, Zero Crossing, Second Order, Validation
vii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ................................................................................................ i
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................. iii
KATA PENGANTAR .......................................................................... iv
ABSTRAK ......................................................................................... vi
ABSTRACT ....................................................................................... vii
DAFTAR ISI ....................................................................................... viii
DAFTAR TABEL ...............................................................................
xii
DAFTAR GAMBAR ...........................................................................
xiii
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................
xvii
BAB IPENDAHULUAN ....................................................................
1
1.1
Latar Belakang ................................................................
1
1.2
Perumusan Masalah ........................................................
4
1.3
Hipotesis .........................................................................
4
1.4
Tujuan Penelitian ............................................................
5
1.5
Manfaat Penelitian ..........................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..........................................................
6
2.1
Minuman Berenergi ........................................................
6
2.2
Uraian Bahan ..................................................................
8
2.2.1 Kafein ..................................................................
8
2.2.2 Natrium Benzoat ..................................................
10
Spektrofotometri .............................................................
12
2.3.1 Hukum Lambert-Beer .........................................
14
2.3
viii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ................................................................................................ i
LEMBAR PENGESAHAN ................................................................. iii
KATA PENGANTAR .......................................................................... iv
ABSTRAK ......................................................................................... vi
ABSTRACT ....................................................................................... vii
DAFTAR ISI ....................................................................................... viii
DAFTAR TABEL ...............................................................................
xii
DAFTAR GAMBAR ...........................................................................
xiii
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................
xvii
BAB IPENDAHULUAN ....................................................................
1
1.1
Latar Belakang ................................................................
1
1.2
Perumusan Masalah ........................................................
4
1.3
Hipotesis .........................................................................
4
1.4
Tujuan Penelitian ............................................................
5
1.5
Manfaat Penelitian ..........................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..........................................................
6
2.1
Minuman Berenergi ........................................................
6
2.2
Uraian Bahan ..................................................................
8
2.2.1 Kafein ..................................................................
8
2.2.2 Natrium Benzoat ..................................................
10
Spektrofotometri .............................................................
12
2.3.1 Hukum Lambert-Beer .........................................
14
2.3
viii
Universitas Sumatera Utara
2.3.2 Kegunaan Spektrofotometri..................................
15
Spektrofotometri Derivatif ..............................................
16
2.4.1 Komponen Spektrofotometri Derivatif .................
22
2.4.2 Kegunaan Spektrofotometri Derivatif ...................
22
Validasi Metode Analisis .................................................
24
2.5.1 Akurasi ................................................................
25
2.5.2 Presisi .................................................................
26
2.5.3 Batas Deteksi dan Kuantitasi ................................
26
2.5.4 Linieritas .............................................................
27
2.5.5 Rentang ...............................................................
27
BAB III METODE PENELITIAN ......................................................
28
2.4
2.5
3.1
Jenis Penelitian ...............................................................
28
3.2
Tempat dan Waktu Penelitian ..........................................
28
3.3
Alat ................................................................................
28
3.4
Bahan .............................................................................
28
3.5
Pengambilan Sampel ......................................................
28
3.6
Prosedur Penelitian .........................................................
29
3.6.1 Pembuatan Pereaksi .............................................
29
3.6.2 Pembuatan Larutan Induk Baku dan Larutan
Standar ................................................................
29
3.6.2.1Pembuatan Larutan Induk Baku Kafein
BPFI .......................................................
29
3.6.2.2Pembuatan Larutan Induk Baku Asam
Benzoat BPFI .........................................
29
3.6.2.3Pembuatan Larutan Satndar Kafein ...........
30
ix
Universitas Sumatera Utara
3.6.2.4Pembuatan Larutan Standar Asam
Benzoat .................................................
30
3.6.3 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum ...........
30
3.6.3.1Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum
Kafein.....................................................
30
3.6.3.2Pembuatan Spektrum SerapanMaksimum
Asam Benzoat ........................................
30
3.6.4 Pembuatan Spektrum Serapan Derivatif ..............
31
3.6.4.1Pembuatan Spektrum SerapanDerivatif
Kafein.....................................................
31
3.6.4.2Pembuatan Spektrum SerapanDerivatif
Asam Benzoat .........................................
31
3.6.5 Penentuan Zero Crossing ......................................
31
3.6.6 Penentuan Panjang Gelombang (λ) Analisis ........
31
3.6.7 Pembuatandan Penentuan Linieritas Kurva
Kalibrasi ...............................................................
32
3.6.7.1Pembuatandan Penentuan Linieritas
Kurva Kalibrasi Kafein ..........................................
32
3.6.7.2Pembuatan dan Penentuan Linieritas
Kurva Kalibrasi Asam Benzoat ..................
33
3.6.8 Penetapan JumlahKafein dan Natrium Benzoat
dalam Minuman Berenergi ....................................
33
3.6.9 Uji Validasi ..........................................................
35
3.6.9.1 Uji Akurasi ...............................................
35
3.6.9.2 Uji Presisi ................................................
36
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ..............................................
37
4.1 Hasil Penentuan Kurva Serapan Maksimum.....................
37
4.2
Hasil Penentuan Kurva Serapan Kafein dan Asam
Benzoat ..........................................................................
38
x
Universitas Sumatera Utara
4.3
Hasil Penentuan Kurva Serapan Derivat ..........................
39
4.3.1 Kurva Serapan DerivatPertama ............................
39
Hasil Penentuan Zero Crossing ........................................
39
4.4.1 Zero Crossing DerivatPertama..............................
39
4.5 Hasil Penentuan Panjang Gelombang Analisis .................
40
4.6 Hasil Penentuan Linieritas Kurva Kalibrasi......................
45
4.6.1. Kurva Kalibrasi ...................................................
45
4.6.2. Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi .....................
46
Hasil PenentuanJumlah Kafein danNatrium Benzoat
dalam Sampel Minuman Berenergi ..................................
46
Hasil Uji Validasi ............................................................
48
4.8.1 Hasil Uji Akurasi ...................................................
48
4.8.2Hasil Uji Presisi ......................................................
49
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ...............................................
50
4.4
4.7
4.8
5.1
Kesimpulan ....................................................................
50
5.2
Saran ...............................................................................
50
DAFTAR PUSTAKA ..........................................................................
51
LAMPIRAN ........................................................................................
55
xi
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1. Panjang Gelombang Analisis dan Absorbansi .........................
42
Tabel 2.
47
Jumlah Kafein dan Natrium Benzoat dalam Sampel ..............
Tabel 3. Perolehan Kembali Kafein dan Natrium Benzoat dengan
Metode Penambahan Baku Standar pada Minuman M-150® .. ..
49
xii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1.
Struktur Kafein ...............................................................
8
Gambar 2.
Struktur Natrium Benzoat ...............................................
10
Gambar 3.
Kurva Serapan Derivat Pertama sampai Derivat
Keempat .........................................................................
19
Gambar 4.
Kurva Sederhana Aplikasi Zero Crossing .........................
20
Gambar 5.
Kurva Sederhana Aplikasi Spektrum Derivatif ................
22
Gambar 6.
Kurva Serapan Maksimum Kafein 9 µg/mL .....................
37
Gambar 7.
Kurva Serapan Maksimum Asam Benzoat 5 µg/mL .........
37
Gambar 8.
Kurva Tumpang Tindih Serapan Kafein dalam berbagai
konsentrasi .....................................................................
38
Kurva Tumpang Tindih Serapan Asam Benzoat dalam
berbagai konsentrasi .......................................................
38
Gambar 10. Zero Crossing Kafein Derivat Pertama ............................
39
Gambar 11. Zero Crossing Asam Benzoat Derivat Pertama ................
40
Gambar 12. Kurva Tumpang Tindih Serapan Derivatif Pertama
Kafein 9 µg/mL dan Asam Benzoat 5 µg/mL dan
Campuran yang Didalamnya Terdapat Kafein 9 µg/mL
dan Asam Benzoat 5 µg/mL .............................................
40
Gambar 13. Zero Crossing Derivat Kedua Kafein 9 µg/mL pada λ =
293,40 nm ......................................................................
41
Gambar 14. Zero Crossing Derivat Kedua Asam Benzoat 5 µg/mL
pada λ = 213,20 nm .......................................................
41
Gambar 15. Kurva Tumpang Tindih Campuran Kafein 9 µg/mL dan
Asam Benzoat 5 µg/mL dengan Sampel Kratingdaeng®
dan M-150® .....................................................................
43
Gambar 16. Kurva Tumpang Tindih Campuran Kafein 9 µg/mL dan
Asam Benzoat 5 µg/mL dengan Sampel M-150® .............
44
Gambar 17. Kurva Tumpang Tindih Campuran Kafein 9 µg/mL dan
Asam Benzoat 5 µg/mL dengan Sampel Kratingdaeng® ...
44
Gambar 9.
xiii
Universitas Sumatera Utara
Gambar 18. Kurva Kalibrasi Kafein Pada Panjang Gelombang
293,40 nm .......................................................................
45
Gambar 19. Kurva Kalibrasi Asam Benzoat Pada Panjang
Gelombang 213,20 nm ....................................................
45
Gambar 20. Sampel Minuman Berenergi dan Spektrofotometer
Ultraviolet (UV) .............................................................
55
Gambar 21. Kurva Serapan Kafein 8 µg/mL .......................................
57
Gambar 22. Kurva Serapan Kafein 9 µg/mL .......................................
57
Gambar 23. Kurva Serapan Kafein 10 µg/mL .....................................
58
Gambar 24. Kurva Serapan Kafein 11 µg/mL .....................................
58
Gambar 25. Kurva Serapan Kafein 12 µg/mL .....................................
59
Gambar 26. Kurva Serapan Asam Benzoat 3 µg/mL ...........................
59
Gambar 27. Kurva Serapan Asam Benzoat 4 µg/mL ...........................
60
Gambar 28. Kurva Serapan Asam Benzoat 5 µg/mL ...........................
60
Gambar 29. Kurva Serapan Asam Benzoat 6 µg/mL ...........................
61
Gambar 30. Kurva Serapan Asam Benzoat 7 µg/mL ...........................
61
Gambar 31. Kurva Serapan Derivat Pertama Kafein 8 µg/mL .............
62
Gambar 32. Kurva Serapan Derivat Pertama Kafein 9 µg/mL .............
62
Gambar 33. Kurva Serapan Derivat Pertama Kafein 10 µg/mL ...........
63
Gambar 34. Kurva Serapan Derivat Pertama Kafein 11 µg/mL ...........
63
Gambar 35. Kurva Serapan Derivat Pertama Kafein 12 µg/mL ...........
64
Gambar 36. Kurva Serapan Derivat Pertama Asam Benzoat 3 µg/mL .
64
Gambar 37. Kurva Serapan Derivat Pertama Asam Benzoat 4 µg/mL .
65
Gambar 38. Kurva Serapan Derivat Pertama Asam Benzoat 5 µg/mL .
65
Gambar 39. Kurva Serapan Derivat Pertama Asam Benzoat 6 µg/mL .
66
xiv
Universitas Sumatera Utara
Gambar 40. Kurva Serapan Derivat Pertama Asam Benzoat 7 µg/mL .
66
Gambar 41. Kurva Serapan Derivat Kedua Kafein 8 µg/mL ................
67
Gambar 42. Kurva Serapan Derivat Kedua Kafein 9 µg/mL ................
67
Gambar 43. Kurva Serapan Derivat Kedua Kafein 10 µg/mL ..............
68
Gambar 44. Kurva Serapan Derivat Kedua Kafein 11 µg/mL ..............
68
Gambar 45. Kurva Serapan Derivat Kedua Kafein 12 µg/mL ..............
69
Gambar 46. Kurva Serapan Derivat Kedua Asam Benzoat 3 µg/mL ....
69
Gambar 47. Kurva Serapan Derivat Kedua Asam Benzoat 4 µg/mL ....
70
Gambar 48. Kurva Serapan Derivat Kedua Asam Benzoat 5 µg/mL ....
70
Gambar 49. Kurva Serapan Derivat Kedua Asam Benzoat 6 µg/mL ....
71
Gambar 50. Kurva Serapan Derivat Kedua Asam Benzoat 7 µg/mL ....
71
Gambar 51. Kurva Serapan Derivatif Kedua Kafein 9 μg/mL(λ =
293,40 nm) ......................................................................
72
Gambar 52. Kurva Serapan Derivatif Kedua Asam Benzoat 5 μg/mL
(λ= 213,20 nm) ................................................................
72
Gambar 53. Kurva serapan derivat kedua campuran yang di
dalamnya terdapat kafein 9 μg/mL dan asam benzoat 5
μg/mL..............................................................................
73
Gambar 54. Kurva Serapan Kratingdaeng® -1 .....................................
80
Gambar 55. Kurva Serapan Kratingdaeng® -2 ...................................
80
Gambar 56. Kurva Serapan Kratingdaeng® -3 ...................................
81
Gambar 57. Kurva Serapan Kratingdaeng® -4 ...................................
81
Gambar 58. Kurva Serapan Kratingdaeng® -5 ...................................
82
Gambar 59. Kurva Serapan Kratingdaeng® -6 ...................................
82
Gambar 60. Kurva Serapan M-150® -1 ...............................................
83
Gambar 61. Kurva Serapan M-150® -2 ..............................................
83
xv
Universitas Sumatera Utara
Gambar 62. Kurva Serapan M-150® -3 ..............................................
84
Gambar 63. Kurva Serapan M-150® -4 ..............................................
84
Gambar 64. Kurva Serapan M-150® -5 ..............................................
85
Gambar 65. Kurva Serapan M-150® -6 ..............................................
85
Gambar 66. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali M-150® -1 .........
99
Gambar 67. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali M-150® -2 .........
99
Gambar 68. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali M-150® -3 .........
100
Gambar 69. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali M-150® -4 .........
100
Gambar 70. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali M-150® -5 .........
101
Gambar 71. Kurva Serapan Uji Perolehan Kembali M-150® -6 .........
101
xvi
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran1.
Gambar dan Spesifikasi Sampel serta Gambar Alat
Spektrofotometer Ultraviolet (UV)................................ . 55
Lampiran 2.
Kurva Serapan Kafein dan Asam Benzoat .....................
57
Lampiran3.
Kurva Serapan Derivat Pertama Kafein dan Asam
Benzoat.........................................................................
62
Lampiran 4.
Kurva Serapan Derivat Kedua Kafein dan Asam
Benzoat......................................................................... . 67
Lampiran 5.
Kurva Serapan Panjang Gelombang Analisis ................. . 72
Lampiran 6.
Data Kalibrasi Kafein BPFI, Persamaan Regresi dan
Koefisien Korelasi ....................................................... . 74
Lampiran 7.
Data Kalibrasi Asam Benzoat BPFI, Persamaan
Regresi dan Koefisien Korelasi .................................... . 76
Lampiran 8.
Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas
Kuantitasi (LOQ) Kafein ............................................... . 78
Lampiran 9.
Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas
Kuantitasi (LOQ) Asam Benzoat ................................... . 79
Lampiran 10. Kurva Serapan Derivat Kedua Sampel .......................... . 80
Lampiran 11. Hasil Analisis Kadar Kafein dan Natrium Benzoat
dalam Sampel ................................................................ .
86
Lampiran 12. Contoh Perhitungan Jumlah Kafein dan Natrium
Benzoat dalam Sampel Kratingdaeng® .......................... . 87
Lampiran 13. Contoh Perhitungan Jumlah Kafein dan Natrium
Benzoat dalam Sampel M-150® .................................... . 90
Lampiran 14. Perhitungan Statistik Jumlah Kafein dan Natrium
Benzoat dalam Sampel Kratingdaeng® .......................... . 93
Lampiran 15. Perhitungan Statistik Jumlah Kafein dan Natrium
Benzoat dalam Sampel M-150® .................................... . 96
Lampiran 16. Kurva Serapan Uji Perolehan KembaliM-150® ............. . 99
Lampiran 17. Hasil Uji Perolehan Kembali Kafein dan Natrium
Benzoat Setelah Penambahan Masing-Masing Larutan
xvii
Universitas Sumatera Utara
Standar Pada Sampel .................................................... . 102
Lampiran 18. Contoh Perhitungan Uji Perolehan Kembali dengan
menggunakan Sampel M-150® ..................................... . 103
Lampiran 19. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Jumlah
Kafein ........................................................................... . 106
Lampiran 20. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Kadar
Natrium Benzoat .......................................................... . 107
Lampiran 21. Perhitungan Pembuatan HCl 0,1N ................................ . 108
Lampiran 22. Bagan Alir Prosedur Penelitian .................................... . 109
Lampiran 23. Daftar Nilai Distribusi t................................................. . 113
Lampiran 24. Sertifikat Pengujian Kafein .......................................... .
114
Lampiran 25. Sertifikat Pengujian Natrium Benzoat .......................... .
115
Lampiran 26. SNI 01-6684-2002 ........................................................ .
116
Lampiran 27. SNI 01-0222-1995 ........................................................ .
119
xviii
Universitas Sumatera Utara