Pengaruh Jenis Eksplan dan Komposisi Media Terhadap Pembentukan Tunas Tanaman Karet (Hevea brasiliensis Muell. Arg) Secara In Vitro

Lampiran 1. Data Pengamatan Persentase Munculnya Tunas (%)
Ulangan
Perlakuan
1
2
3
4
5
6
7
8
100
0
0
0
100
100
T1A1
100
0
0

0
100
0
T1A2
0
100
100
100
100
100
100
T1A3
0
0
100
100
T1A4
0
100
0

0
0
100
T1A5
0
100
100
0
0
T1A6
100
100
100
100
100
T2A1
100
100
0
100

100
100
100
100
T2A2
0
0
100
T2A3
100
100
100
100
100
100
T2A4
100
100
100
100

100
100
0
100
T2A5
0
0
0
0
100
T2A6
Total
500
300
600
500
600
500
500
900

9
0
100
100
0
100
100
0
100
100
100
100
800

10
100
100
0
100

100
100
100
100
0
700

11
100
0
100
0
200

12
0
100
0
100

13
100
0
100
200

14
100
100
100
0
0
300

15
0
100
100
100
300

Total Rataan
700
400
800
400
300
300
800
900
300
900
1000
200
7000

58,33
50,00
88,89
50,00

42,86
42,86
88,89
81,82
50,00
90,00
83,33
22,22
62,43

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Data Transformasi Persentase Munculnya Tunas Arcsin
Ulangan
Perlakuan
1
2
3
4
5

6
7
8
5,74
0,41
0,41
0,41
5,74
5,74
T1A1
5,74
0,41
0,41
0,41
5,74
0,41
T1A2
0,41
5,74
5,74

5,74
5,74
5,74
5,74
T1A3
0,41
0,41
5,74
5,74
T1A4
0,41
5,74
0,41
0,41
0,41
5,74
T1A5
0,41
5,74
5,74
0,41
0,41
T1A6
5,74
5,74
5,74
5,74
5,74
T2A1
5,74
5,74
0,41
5,74
5,74
5,74
5,74
5,74
T2A2
0,41
0,41
5,74
T2A3
5,74
5,74
5,74
5,74
5,74
5,74
T2A4
5,74
5,74
5,74
5,74
5,74
5,74
0,41
5,74
T2A5
0,41
0,41
0,41
0,41
5,74
T2A6
Total
29,91 18,43 36,46 30,32 35,25 29,51 30,32 52,46
Lampiran 3. Daftar Sidik Ragam Persentase Munculnya Tunas
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
0,05 Ket
Perlakuan
T
1
17,39
17,39
3,03
3,94 tn
A
5
61,21
12,24
2,13
2,31 tn
T*A
(interaksi)
5
70,72
14,14
2,46
2,31 **
Galat
96 551,44
5,74
Total
107 700,76
FK=
KK=

√P
9

10

11

12

13

14

0,41
5,74
5,74
0,41
5,74
5,74
0,41
5,74
5,74
5,74
5,74
47,13

5,74
5,74
0,41
5,74
5,74
5,74
5,74
5,74
0,41
40,98

5,74
0,41
5,74
0,41
12,29

0,41
5,74
0,41
6,55

5,74
0,41
5,74
11,88

5,74
5,74
5,74
0,41
0,41
18,03

Total

Rataan

0,41
42,20
24,58
46,32
5,74
24,58
18,84
18,84
5,74
46,32
52,46
18,43
5,74
52,06
58,20
14,31
17,62 417,14

3,52
3,07
5,15
3,07
2,69
2,69
5,15
4,77
3,07
5,21
4,85
1,59
3,74

15

1611,15
64,1627

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. Data Pengamatan Umur Munculnya Tunas (hari)
Ulangan
Perlakuan
1
2
3
4
5
6
7
8
21
0
0
0
21
21
T1A1
21
0
0
0
21
0
T1A2
0
21
21
21
21
21
21
T1A3
0
0
21
21
T1A4
0
21
0
0
0
21
T1A5
0
21
21
0
0
T1A6
14
14
14
14
14
T2A1
14
14
0
21
14
14
21
21
T2A2
0
0
14
T2A3
7
7
7
7
7
7
T2A4
7
0
7
7
7
7
0
7
T2A5
0
0
0
0
21
T2A6
Total
77
35
91
77
77
70
84
154

9
0
21
21
21
21
14
0
14
7
7
14
140

10
21
21
0
21
14
14
21
7
0
119

11
21
0
7
0
28

12
0
7
0
7

13
21
0
14
35

14
21
21
21
0
0
63

15
0
21
21
14
56

Total Rataan
147
84
168
105
63
63
119
147
49
70
63
35
1113

21,00
21,00
21,00
21,00
21,00
21,00
14,88
16,33
16,33
7,78
7,00
17,50
17,15

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Data Pengamatan Jumlah Tunas (tunas)
Perlakuan
T1A1
T1A2
T1A3
T1A4
T1A5
T1A6
T2A1
T2A2
T2A3
T2A4
T2A5
T2A6
Total

1
1,00
1,00
0,00
0,00
1,00
1,00
0,00
1,00
5,00

Ulangan
8
1,00
0,00
1,00
1,00
1,00
0,00
4,00
1,00
1,00
1,00
1,00

2
0,00
1,00
0,00
1,00
1,00
0,00

3
0,00
0,00
1,00
0,00
1,00
1,00
1,00
0,00
0,00
1,00
1,00
-

4
0,00
1,00
0,00
0,00
1,00
2,00
1,00
1,00
0,00

5
0,00
1,00
1,00
1,00
3,00
1,00
1,00
0,00

6
0,00
1,00
1,00
0,00
1,00
1,00
1,00
-

7
1,00
1,00
0,00
0,00
2,00
1,00
1,00
0,00
0,00

3,00

6,00

6,00

8,00

5,00

6,00

12,00

9
0,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
0,00
3,00
1,00
2,00
1,00

10
1,00
1,00
0,00
1,00
2,00
1,00
1,00
2,00
0,00

11
1,00
0,00
1,00
0,00
-

12
0,00
1,00
0,00

13
1,00
0,00
1,00
-

14
1,00
1,00
1,00
0,00
0,00

15
0,00
1,00
1,00
1,00
-

12,00

9,00

2,00

1,00

2,00

3,00

3,00

Total Rataan
7,00
4,00
8,00
5,00
3,00
3,00
13,00
10,00
7,00
9,00
12,00
2,00

0,58
0,50
0,89
0,63
0,43
0,43
1,44
0,91
1,17
0,90
1,00
0,22

83,00

0,76

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. Data Transformasi Jumlah Tunas √x+ 0,5
Perlakuan
T1A1
T1A2
T1A3
T1A4
T1A5
T1A6
T2A1
T2A2
T2A3
T2A4
T2A5
T2A6
Total

1
1,22
1,22
0,71
0,71
1,22
1,22
0,71
1,22
8,25

Ulangan
8
1,22
0,71
1,22
1,22
1,22
0,71
2,12
1,22
1,22
1,22
1,22

2
0,71
1,22
0,71
1,22
1,22
0,71

3
0,71
0,71
1,22
0,71
1,22
1,22
1,22
0,71
0,71
1,22
1,22
-

4
0,71
1,22
0,71
0,71
1,22
1,58
1,22
1,22
0,71

5
0,71
1,22
1,22
1,22
1,87
1,22
1,22
0,71

6
0,71
1,22
1,22
0,71
1,22
1,22
1,22
-

7
1,22
1,22
0,71
0,71
1,58
1,22
1,22
0,71
0,71

5,80

10,88

9,31

9,41

7,54

9,31

Lampiran 7. Data Sidik Ragam Jumlah Tunas
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
Perlakuan
T
1
0,51
0,51
6,22
A
5
0,98
0,20
2,39
T*A (interaksi)
5
0,71
0,14
1,74
Galat
96
7,86
0,08
Total
107
10,05
FK=
126,946
KK=
26,5845

13,33

9
0,71
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
0,71
1,87
1,22
1,58
1,22

10
1,22
1,22
0,71
1,22
1,58
1,22
1,22
1,58
0,71

11
1,22
0,71
1,22
0,71
-

12
0,71
1,22
0,71

13
1,22
0,71
1,22
-

14
1,22
1,22
1,22
0,71
0,71

15
0,71
1,22
1,22
1,22
-

13,44

10,70

3,86

2,64

3,16

5,09

4,38

Total Rataan
12,11
7,73
10,51
8,25
6,50
6,50
12,11
12,79
7,09
11,73
14,37
7,40

1,01
0,97
1,17
1,03
0,93
0,93
1,35
1,16
1,18
1,17
1,20
0,82

117,09

1,08

0,05 Ket
3,94 **
2,31 **
2,31 tn

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8. Data Pengamatan Panjang Tunas (cm)
Perlakuan
T1A1
T1A2
T1A3
T1A4
T1A5
T1A6
T2A1
T2A2
T2A3
T2A4
T2A5
T2A6
Total

1
0,45
0,20
0,00
0,00
0,15
0,45
0,00
0,20
1,45

2
0,00
0,40
0,00
0,25
0,50
0,00
1,15

3
0,00
0,00
0,30
0,00
0,25
0,35
0,30
0,00
0,00
0,40
0,20
1,80

4
0,00
0,60
0,00
0,00
0,20
0,10
0,65
0,30
0,00
1,85

5
0,00
0,35
0,40
0,30
0,15
0,45
0,20
0,00
1,85

6
0,00
0,22
0,15
0,00
0,35
1,20
0,80
2,72

Ulangan
7
8
0,50 0,35
0,30 0,00
0,85
0,20
0,00 0,30
0,00 0,00
0,15 0,10
0,15 0,20
0,70 0,85
0,00 0,40
0,00 0,20
1,80 3,45

9
0,00
0,50
1,10
0,00
0,15
0,50
0,00
0,15
0,30
0,90
0,10
3,70

10
0,25
0,15
0,00
0,15
0,15
0,40
0,15
0,30
0,00
1,55

11
0,30
0,00
0,25
0,00
0,55

12
0,00
0,60
0,00
0,60

13
0,20
0,00
0,30
0,50

14
0,40
0,20
0,15
0,00
0,00
0,75

Total Rataan
15
0,00
2,45
0,20
1,20
0,15
3,97
0,44
0,20
0,70
0,09
0,70
0,10
0,70
0,10
0,30
2,05
0,23
2,50
0,23
0,45
0,08
0,15
4,95
0,50
4,40
0,37
0,30
0,03
0,65 24,37
0,21

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. Data Transformasi Panjang Tunas √x+ 0,5
Perlakuan
T1A1
T1A2
T1A3
T1A4
T1A5
T1A6
T2A1
T2A2
T2A3
T2A4
T2A5
T2A6
Total

1
0,97
0,84
0,71
0,71
0,81
0,97
0,71
0,84
6,55

2
0,71
0,95
0,71
0,87
1,00
0,71
4,94

3
0,71
0,71
0,89
0,71
0,87
0,92
0,89
0,71
0,71
0,95
0,84
8,90

4
0,71
1,05
0,71
0,71
0,84
0,77
1,07
0,89
0,71
7,46

5
0,71
0,92
0,95
0,89
0,81
0,97
0,84
0,71
6,80

6
0,71
0,85
0,81
0,71
0,92
1,30
1,14
6,43

Lampiran 10. Data Sidik Ragam Panjang Tunas
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
Perlakuan
T
1
0,04
0,04
2,72
A
5
0,21
0,04
3,04
T*A (interaksi)
5
0,44
0,09
6,31
Galat
96
1,32
0,01
Total
107
2,01
FK=
76,364
KK=
14,122

Ulangan
7
8
1,00 0,92
0,89 0,71
1,16
0,84
0,71 0,89
0,71 0,71
0,81 0,77
0,81 0,84
1,10 1,16
0,71 0,95
0,71 0,84
7,43 9,79

9
0,71
1,00
1,26
0,71
0,81
1,00
0,71
0,81
0,89
1,18
0,77
9,85

10
0,87
0,81
0,71
0,81
0,81
0,95
0,81
0,89
0,71
7,35

11
0,89
0,71
0,87
0,71
3,17

12
0,71
1,05
0,71
2,46

13
0,84
0,71
0,89
2,44

14
0,95
0,84
0,81
0,71
0,71
4,01

Total Rataan
15
0,71
9,98
0,83
6,40
0,80
8,60
0,96
0,84
6,11
0,76
5,40
0,77
5,39
0,77
0,89
7,64
0,85
9,33
0,85
4,54
0,76
0,81
9,83
0,98
11,03
0,92
6,56
0,73
3,24 90,81
0,83

0,05 Ket
3,94 tn
2,31 **
2,31 **

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. Data Pengamatan Persentase Terbentuknya Daun (%)
Ulangan
Perlakuan
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0
0
0
0
0
0
0
T1A1
0
0
0
0
0
0
0
T1A2
0
0
0
0
0
0
100
100
T1A3
0
0
0
0
0
T1A4
0
0
0
0
0
0
0
T1A5
0
0
0
0
0
T1A6
0
0
0
0
0
0
T2A1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
T2A2
0
0
0
0
T2A3
100
100
0
100
100
100
0
T2A4
0
100
0
0
0
100
0
0
100
T2A5
0
0
0
0
0
0
T2A6
Total
0
100
100
100
0
200
100
200
200

10
0
100
0
0
0
0
0
0
0
100

11
0
0
0
0
-

12
0
0
0
0

13
0
0
0
0

14
0
0
0
0
0
0

Total Rataan

15
0
0
0
0
0

0

0
0
300
0
0
0
0
0
0
500
300
0
1100

0,00
0,00
33,33
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
50,00
25,00
0,00
9,03

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 12. Data Transformasi Persentase Terbentuknya Daun Arcsin √P
Ulangan
Perlakuan
1
2
3
4
5
6
7
8
9
0,41
0,41 0,41 0,41
0,41 0,41 0,41
T1A1
0,41
0,41 0,41
0,41 0,41 0,41 0,41
T1A2
0,41
0,41 0,41 0,41 0,41 0,41
5,74 5,74
T1A3
0,41 0,41
0,41
0,41 0,41
T1A4
0,41 0,41 0,41
0,41 0,41 0,41 0,41
T1A5
0,41
0,41 0,41
0,41 0,41
T1A6
0,41
0,41
0,41
0,41 0,41 0,41
T2A1
0,41
0,41 0,41 0,41 0,41 0,41 0,41 0,41 0,41
T2A2
0,41
0,41
0,41
0,41
T2A3
5,74 5,74 0,41 5,74 5,74 5,74 0,41
T2A4
0,41
5,74 0,41 0,41 0,41 5,74 0,41 0,41 5,74
T2A5
0,41
0,41 0,41
0,41 0,41 0,41
T2A6
3,24
7,76
9,79
8,98
3,24
13,50
8,98 15,12 15,12
Total

10
0,41
5,74
0,41
0,41
0,41
0,41
0,41
0,41
0,41
8,98

11
0,41
0,41
0,41
0,41
1,62

12
0,41
0,41
0,41
1,22

13
0,41
0,41
0,41
1,22

14
0,41
0,41
0,41
0,41
0,41
2,03

Total Rataan
15
0,41
4,86
0,41
3,24
0,41
19,65
2,18
0,41
3,24
0,41
2,84
0,41
2,84
0,41
0,41
3,65
0,41
4,46
0,41
2,43
0,41
0,41
30,72
3,07
20,86
1,74
3,65
0,41
1,62 102,43
0,89

Lampiran 13. Data Sidik Ragam Persentase Terbentuknya Daun
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
0,05 Ket
Perlakuan
T
1
5,09
5,09
2,54
3,94 tn
A
5
38,19
7,64
3,82
2,31 **
T*A
(interaksi)
5
45,77
9,15
4,58
2,31 **
Galat
96 192,05
2,00
Total
107 281,09
FK=
KK=

97,147
59,51

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14. Data Pengamatan Jumlah Daun (helai)
Perlakuan
T1A1
T1A2
T1A3
T1A4
T1A5
T1A6
T2A1
T2A2
T2A3
T2A4
T2A5
T2A6
Total

1
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00

2
0,00
0,00
0,00
0,00
1,00
0,00
1,00

3
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
2,00
0,00
2,00

4
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
2,00
0,00
0,00
2,00

5
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00

6
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
7,00
1,00
8,00

Ulangan
7
8
0,00 0,00
0,00 0,00
4,00
0,00
0,00 0,00
0,00 0,00
0,00 0,00
0,00 0,00
1,00 2,00
0,00 0,00
0,00 0,00
1,00 6,00

9
0,00
0,00
3,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
3,00
0,00
6,00

10
0,00
3,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
3,00

11
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00

12
0,00
0,00
0,00
0,00

13
0,00
0,00
0,00
0,00

14
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00

Total Rataan
15
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
10,00
1,11
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00 14,00
1,40
5,00
0,42
0,00
0,00
0,00 29,00
0,24

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 15. Data Transformasi Jumlah Daun √x+ 0,5
Perlakuan
T1A1
T1A2
T1A3
T1A4
T1A5
T1A6
T2A1
T2A2
T2A3
T2A4
T2A5
T2A6
Total

1
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
5,66

Ulangan
8
0,71
0,71
2,12
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
1,58
0,71
0,71

2
0,71
0,71
0,71
0,71
1,22
0,71

3
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
1,58
0,71
-

4
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
1,58
0,71
0,71

5
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71

6
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
2,74
1,22
-

7
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
1,22
0,71
0,71

4,76

8,65

7,24

5,66

7,50

6,88

Lampiran 16. Data Sidik Ragam Jumlah Daun
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
Perlakuan
T
1
0,08
0,08
0,93
A
5
1,53
0,31
3,40
T*A (interaksi)
5
1,87
0,37
4,16
Galat
96
8,65
0,09
Total
107
12,14
FK=
70,858
KK=
37,522

10,07

9
0,71
0,71
1,87
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
1,87
0,71

10
0,71
1,87
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71

11
0,71
0,71
0,71
0,71
-

12
0,71
0,71
0,71

13
0,71
0,71
0,71
-

14
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71

15
0,71
0,71
0,71
0,71
-

10,11

7,53

2,83

2,12

2,12

3,54

2,83

Total Rataan
8,49
5,66
10,11
5,66
4,95
4,95
6,36
7,78
4,24
12,24
10,68
6,36

0,71
0,71
1,12
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
1,22
0,89
0,71

87,48

0,80

0,05 Ket
3,94 tn
2,31 **
2,31 **

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 17.Komposisi Media Murashige dan Skoog (MS)

Bahan Kimia

Konsentrasi Media (mg/l)

Makro Nutrien (Stok I)
NH4 NO3
KNO3
CaCl2.2H2O
MgSO4.7H2O
KH2PO4

1650,000
1900,000
440,000
370,000
170,000

Mikro Nutrien (Stok II)
MnSO4.H2O
ZnSO4.7H2O
H3BO3
KI
Na2MoO4.2H20
CuSO4.5H2O
CoCl2.6H2O

6,900
8,600
6,200
0,830
0,250
0,025
0,025

Iron (Stok III)
FeSO4.7H2O
Na2.EDTA
Vitamin (Stok IV)
Nikotinic acid
Pyridoxin HCL
Thiamine HCL
Myo-inositol
Sukrosa
Agar

27,800
37,200

0,500
0,500
0,100
100,000
30.000,000
7.000,000

(Sumber: Murashige and Skoog, 1962)

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 18. Komposisi Medium Woody Plant Medium (WPM)

Bahan Kimia

Konsentrasi Media (mg/l)

Makro Nutrien (Stok I)
NH4 NO3
MgSO4.7H2O
KH2PO4
CaCl2.2H2O
Ca(NO3)2.4H2O
K2SO4

400,000
370,000
170,000
96,000
576,000
99,000

Mikro Nutrien (Stok II)
H3BO3
MnSO4.H2O
ZnSO4.7H2O
Na2MoO4.2H20
CuSO4.5H2O

6,200
16,900
8,600
0,250
0,250

Iron (Stok III)
FeSO4.7H2O
Na2.EDTA

27,800
37,300

Vitamin (Stok IV)
Nikotinic acid
Pyridoxin HCL
Thiamine HCL
Myo-inositol
Sukrosa
Agar

0,500
0,500
1,000
100,000
50.000,000
5.000,000

(Sumber : Gunawan (1992)

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 19. Kegiatan Penelitian
Jenis Kegiatan
Sterilisasi Alat
Pembuatan Media
Pengambilan Bahan Tanaman
Sterilisasi Bahan Tanaman
Persiapan Ruang Tanam
Subkultur
Penanaman
Pemeliharaan Eksplan
Peubah amatan
- Persentase munculnya eksplan
membentuk tunas(%)
- Umur Munculnya Tunas (hari)

1
X
X

2

Minggu ke –
3
4
5

6

X
X
X
X
X
X

X

X

X
X
X
X

- Jumlah tunas (tunas)

X

- Panjang tunas (cm)

X
X
X
X
X
X

-

Persentase terbentuknya daun (%)
Jumlah daun (helai)
Kehadiran Kalus
Warna Kalus
Morfogenesis

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 21. Foto Penelitian

T1A1

T1A2

T1A1

T1A2

T1A4

T1A5

T1A3

T1A3

T1A6

Universitas Sumatera Utara

T2A1

T2A2

T2A3

T2A1

T2A2

T2A3

T2A4

T2A5

T2A6

Universitas Sumatera Utara

DAFTAR PUSTAKA
Abbas BS dan S. Ginting. 1981. Influence of Rootstock and Scion on Girth
Increment in Rubber Trees. Buletin Balai Penelitian Perkebunan Medan.
Vol 12 : 145-152.
Andaryani, S. 2010. Kajian Penggunaan Berbagai Konsentrasi Bap Dan 2,4-D
Terhadap Induksi Kalus Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) Secara In Vitro.
Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret.
Budiman, H., 2012. Budidaya Karet Unggul Prospek Jitu Investasi Masa Depan.
Pustaka Baru Press, Yogyakarta.
Carron, M.P.dan F. Enjalric. 1983. Perspectives du micro bouturage de l’Hevea
brasiliensis. Caoutchoucs et Plastiques 627-628, 65-68
Damanik, S., M. Syakir, M. Tasma, dan Siswanta. 2010. Budidaya dan Pasca
Panen Karet. Pusat penelitian dan Pengembangan Perkebunan.
Delmer, D. P. dan Amor, Y. 1995. Cellulose biosynthesis. Plant Cell 7, 987-1000.
Fitriani, H. 2008. Kajian Konsentrasi BAP Dan NAA terhadap Multiplikasi
Tanaman Artemisia annua L. Secara In Vitro. Fakultas Pertanian
Universitas Sebelas Maret.
George, E. F., dan P. D. Sherrington. 1984. Plant Propagation by Tissue Culture.
Exegetics Limited. England.
Gunnatilleke, I.D. dan Samaranayake, C. 1988. Shoot Tip Culture as a Method of
Micropropagation of Hevea. Diakses dari Http://dl.nsf.ac.lk.
Gunawan LW. 1992. Teknik Kultur Jaringan Tumbuhan. Laboratorium Kultur
Jaringan Tanaman. PAU Bioteknologi IPB. Bogor.
Hanifah, N. 2008. Pengaruh Konsentrasi NAA dan BAP terhadap Pertumbuhan
Eksplan Jarak Pagar (Jatropha curcas L.) secara In Vitro. Skripsi Fakultas
Pertanian UNS. Surakarta.
Harahap, P. S., L. A. M. Siregar, dan Y. Husni. 2014. Kajian Awal : Respon
Eksplan Nodus dalam Inisiasi Tunas Mikro Tanaman Karet (Hevea
brasiliensis Muell Arg.) dalam Medium MS. Jurnal Online
Agroekoteknologi. Vol.3(1) : 229 – 237.
Haris, N., Sumarsono, dan M.P. Carron. 2009. Pengaruh Bahan Pra-Sterilan,
Tutup Tabung Kultur, Dan Musim Terhadap Tingkat Kontaminasi Eksplan
Pada Kultur Microcutting Karet. Menara Perkebunan, 2009 77(2), 89-99.

Universitas Sumatera Utara

Haris, N. 2013. Batang Bawah Klonal : Apakah Mungkin pada Tanaman Karet?.
www.ibriec.org, juli 2013 1(1), Hal. 20-24.
Hartmann, H.T., Kester, D.E., Davies, F.T., dan Geneve, R.L. 1990. Plants
Propagation and Practiese. Englewood Clifts. New Jersey: Prentice-Hall
International, Inc.
Hendaryono, D. P. S., dan A. Wijayanto.1994. Teknik Kultur Jaringan,
Pengenalan dan Petunjuk Perbanyakan Secara Vegetatip. Kanisius,
Yogyakarta.
Janudianto, P, A., Napitupulu, H., dan Rahayu. S. 2013. Panduan Budidaya Karet
Untuk Petani Skala Kecil. Rubber cultivation guide for small-scale
farmers. Lembar Informasi AgFor 5. Bogor, Indonesia: World
Agroforestry Centre (ICRAF) Southeast Asia Regional Program.
Jumroh, P.H. 2013. Pengaruh Periode Subkultur Terhadap Mikropropagasi Puar
Tenangau (Elettariopsis sp.).Fakultas Pertanian. Universitas Sumatera
Utara, Medan.
Kholida, M. 2007. Pengaruh Jenis Eksplan dan Zat Pengatur Tumbuh terhadap
Multiplikasi Adenium (Adenium obesum Roem. & Schult.) secara In Vitro.
Skripsi Fakultas Pertanian UNS. Surakarta.
Kosmiatin, M., A. Husni dan I. Mariska. 2005. Perkecambahan dan Perbanyakan
Gaharu Secara In Vitro. Jurnal Agrobiogen 1 (2) : 62 – 67.
Kresnawati, E. 2006. Pengaruh Zat Pengatur Tumbuh Naa Dan Kinetin Terhadap
Induksi Kalus Dari Daun Nilam (Pogostemon cablin Beth). Skripsi.
Universitas Muhammadiyah Surakarta.
Mardianto, K, 2011. Karakteristik Bunga dan Biji dalam Hubungannya dengan
Aktivitas Persilangan Tetua Karet. Warta Karet. Balai Penelitian Sungei
Putih.
Mariska, I., dan Ragapadmi, P. 2001. Perbanyakan Vegetatif Tanaman Tahunan
Melalui Kultur In Vitro. J. Litbang Pertanian. 20 (1).
Mariska, I dan D. Sukmadjaja. 2003. Perbanyakan Bibit Abaka Melalui Kultur
Jaringan.Balai Penelitian Bioteknologi dan Sumberdaya Genetik Pertanian.
Mendanha, A.B.L., Roberto, A. A.T., dan Adelson, B. F. 1998.
Micropropagation of rubber trees (Hevea brasiliensis Muell. Arg.). Genet.
Mol. Biol. vol. 21(3) São Paulo.
Miah, M., Nesawar, S. Islam, dan S. Hadiuzzaman. 2008. An Improved Protocol
for Multiple Shoot Regeneration from Seedling and Mature Explants of
Citrus macroptera ( M.). Plant. Tiss. Cult. & Biotech. 18(1): 17-24.

Universitas Sumatera Utara

Montoro P, MP Carron, L Lardet, A Clement-Demange dan J Leclercq. 2010.
Biotechnologies of rubber tree (Hevea brasiliensis). Aus Pac J Mol Biol
Biotechnol 18(1), 81-83.
Murashige, T. dan F. Skoog. 1962. A revised medium for rapid growth and
bioassays with tobacco tissue cultures. Physiol. Plant. 15:473-497.
Muhammad, N. N. 2015. Produk Berbasis Karet Alam Harus Jadi Produk
Pendukung Pembangunan Infrastruktur Nasional. Kementerian
Perdagangan. Siaran Pers Bersama.
Nayanakantha, N.M.C. dan P. Seneviratne (2007). Tissue culture of rubber: past,
present and future prospects. Ceylon J Sci 36(2), 116-125.
Nugroho, P.S. 2010. Karakterisasi Biologi Isolat-Isolat Rigidoporus microporus
Pada Tanaman Karet (Hevea brasiliensis) Asal Cilacap. Fakultas Pertanian
Universitas Sebelas Maret, Surakarta.
Normayati, C. H. dan Jamnah, A. R. 2014. Induction Of Shoots And Roots From
Vegetative Tissue Culture Of Hevea brasiliensis RRIM 2020. J. Trop.
Plant Physiol. 6 (2014): 1-9
Nursetiadi, E. 2008. Kajian Macam Media dan Konsentrasi BAP terhadap
Multifikasi Tanaman Manggis ( Garcinia mangostana L.) Secara
Invitro. Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Hal 11-12.
Paranjothy, K. dan Gandimathi, H. (1976). Tissue and Organ Culture of Hevea.
Proceedings of International. Rubber Conference, Kuala Lumpur,
Malaysia. Pp 59-84.
Pardal, S. J., Ika, M., E. G. Lestari., dan Slamet. 2004. Regenerasi Tanaman dan
Transformasi Genetik Salak Pondoh untuk Rekayasa Buah partenokarpi. J.
Bioteknologi Pertanian. 9 (2) : 49-55.
Pierik, R. L. M., 1987. In Vitro Culture of Hinger Plant. Martinus Nijhoft
Publisher. Netherlands.
Purwanto, A. 2008. Kajian Macam Eksplan Dan Konsentrasi Iba Terhadap
Multiplikasi TanamanManggis (Garcinia mangostana L.) Secara in vitro.
Fakultas Pertanian Universitas Sebelas Maret.
Rahmaniar, A. 2007. Pengaruh Macam Eksplan dan Konsentrasi 2,4Dichloropenoxyacetic acid (2,4-D) terhadap perkembangan Anthurium
(Anthurium plowmanii Croat.) pada Medium MS. Skripsi Fakultas
Pertanian UNS. Surakarta.

Universitas Sumatera Utara

Santoso, U. dan F. Nursandi. 2001. Kultur Jaringan Tanaman. Penerbit UMM,
Malang.
Seneviratne, P., A. W. Flegmann and G. A. S. Wijsekera. 1996. The Positional
Effect of The Explant on In Vitro Growth of Axillary Buds of Hevea
brasiliensis. Journal of The Rubber Research Institute of Sri Lanka. 78:
60-68 .
Setiawan, D. H., dan Andoko, A. 2005. Petunjuk Lengkap Budidaya Karet.
Agromedia Pustaka, Jakarta..
Sianturi, H. S. D., 2001. Budidaya Tanaman Karet. Fakultas Pertanian USU.
Medan.
Sofia, D. 1997. Pengaruh Berbagai Konsentrasi Benzyl Amino Purine dan
Cycocel Terhadap Pertumbuhan Embrio Kedelai (Glycine max L. Merr)
Secara In Vitro. Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan.
Steel, R.G dan J.H. Torrie, 1993. Prinsip Dan Prosedur Statiska (Pendekatan
Biometric) Penerjemah B. Sumantri. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
Steenis, C. G. G. K., 2005. Flora. PT. Pradnya Paramita. Jakarta.
Sundari, L., L. A. M. Siregar, dan D. S. Hanafiah. 2014. Kajian Awal : Respon
Eksplan Nodus dalam Inisiasi Tunas Mikro Tanaman Karet (Hevea
brasiliensis Muell Arg.) dalam Medium WPM. Jurnal Online
Agroekoteknologi. Vol.3(1) : 179-189.
Sumiarsi, N dan Priadi, D. 2002. Pengaruh Zat Pengatur Tumbuh BAP terhadap
Pertumbuhan Stek batang Sungkai (Peronema cunescens Jack) pada Media
Cair. Jurnal Alam, IX (2) : hal 32 – 37.
Wattimena, G.A; L. W. Gunawan; N. A. Mattjik; Endang. S; N. M. A. Wiendi dan
Andri. E. 1992. Bioteknologi Tanaman. Penerjemah Ahmad Sukarti
Abidin. Pusat Antar Universitas Bioteknologi IPB: Bogor.
Wetherell, D. F. 1982. Pengantar Propagasi Tanaman secara In Vitro Seri Kultur
Jaringan Tanaman. Avery Publishing Group, Inc. Wayne – NewJersey.
Wetter, L. R. dan F. Constabel. 1991. Metode Kultur Jaringan Tanaman. ITB
Press. Bandung.
Yoeman. 1990. Plant Cell Culture Technology. Blackwell Scientific Publications,
London.

Universitas Sumatera Utara

BAHAN DAN METODE
Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Microcutting Tanaman Karet
PT. Perkebunan Nusantara III Kebun Gunung Pamela Tebing Tinggi, Sumatera
Utara, Indonesia. Penelitian ini dimulai pada bulan Maret 2015 sampai dengan
Juli 2015.
Bahan dan Alat Penelitian
Bahan eksplan yang digunakan dalam penelitian ini adalah pucuk dan
bonggol yang memiliki satu mata tunas dari hasil primary culture tanaman karet
dengan genotipe 91 yang merupakan koleksi dari PTPN III, komposisi media
yang digunakan larutan stok media MS dan WPM sebagai media tumbuh tanaman
dengan NAA dan BAP sebagai zat pengatur tumbuh (ZPT) yang digunakan.
Bahan penyusun media lainnya, agar, aquadest steril, dan bahan lainnya yang
mendukung penelitian ini.
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Laminar Air Flow
Cabinet (LAFC), tabung uji, autoklaf, steri box, timbangan analitik, rak kultur,
hot plate dengan magnetik stirer, Erlenmeyer, gelas ukur, kaca tebal, pipet ukur,
pinset, gunting, scalpel, lampu bunsen, pH meter, oven, kertas plano, aluminium
foil, kompor gas, minisar, pipet mikro, tip, pipet tetes, dan alat-alat lainnya yang
mendukung penelitian ini.
Metode Penelitian
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap
(RAL) faktorial, dengan dua faktor perlakuan yaitu :
Faktor I

: Jenis eksplan yaitu:

Universitas Sumatera Utara

T1

: Eksplan pucuk

T2

: Eksplan bonggol

Faktor II : Komposisi media kultur dengan campuran zat pengatur tumbuh yaitu:
A1

: MS + BAP 0,5 mg/l

A2

: MS + BAP 1 mg/l

A3

: MS + BAP 1,5 mg/l + NAA 0,1 mg/l

A4

: WPM + BAP 0,5 mg/l

A5

: WPM + BAP 0,5 mg/l + NAA 0,25 mg/l

A6

: WPM + BAP 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l

Sehingga diperoleh kombinasi perlakuan sebagai berikut:
T1A1

T2A1

T1A2

T2A2

T1A3

T2A3

T1A4

T2A4

T1A5

T2A5

T1A6

T2A6

Jumlah perlakuan

: 12

Jumlah ulangan

: 15

Jumlah eksplan tiap tabung uji

:1

Jumlah seluruh eksplan

: 180

Jumlah seluruh tanaman

: 180

Adapun model liner dari sidik ragam penelitian sebagai berikut:
Yijk = µ + αi + βj + (αβ)ij + ε ijk
i = 1,2

j = 1,2,3,4,5,6

k = 1,2,3…15

Universitas Sumatera Utara

Yijk

= Nilai pengamatan unit percobaan pada perlakuan jenis eksplan ke-i,
media dengan campuran zat pengatur tumbuh ke-j, dan ulangan ke-k

µ

= Nilai tengah umum

αi

= Pengaruh jenis eksplan ke-i

βj

= Pengaruh media dengan campuran zat pengatur tumbuh ke-j

(αβ)ij = Nilai tambah pengaruh interaksi jenis eksplan ke-i dan media dengan
zat pengatur tumbuh ke-j
εijk

= Galat percobaan
Jika perlakuan berbeda nyata dalam sidik ragam maka dilanjutkan dengan

Uji Jarak Berganda Duncan (Duncan Multiple Range Test) pada α = 5%
(Steel and Torrie, 1995).

Universitas Sumatera Utara

PELAKSANAAN PENELITIAN
Sterilisasi Alat
Alat-alat dissecting-set dan glass ware yang akan digunakan untuk kultur
in vitro dicuci dan dikeringkan. Kemudian bungkus tabung dengan plastik tahan
panas atau letakkan pada rak tabung, sedangkan untuk botol biasanya bisa
langsung diletakkan pada autoklaf. Disterilkan tabung/botol dengan autoklaf pada
tekanan 1 atm dan suhu 121oC selama 60 menit. Setelah itu sterilkan secara kering
tabung/botol di dalam oven pada suhu 150oC selama 1-2 jam.
Pembuatan Media
MS (Murashige and Skoog)
Media yang digunakan adalah media Murashige and Skoog (MS) padat.
Sebelum dilakukan pembuatan media MS, dilakukan pembuatan larutan stok ZPT
BAP dan NAA. Larutan stok ZPT masing-masing dibuat 100 mg/100 ml. Larutan
stok BAP dan NAA disaring menggunakan minisar guna meningkatkan sterilitas
dari hormon tersebut dan dilakukan di Laminar Air Flow Cabinet (LAFC).
Pada pembuatan media MS, tahap pertama adalah membuat larutan stok
bahan kimia hara makro dengan pembesaran 10x, hara mikro dengan pembesaran
100x, larutan iron dengan pembesaran 50x, larutan vitamin dengan pembesaran
100x, sukrosa 30 g, myo-inositol 0,1 g dan agar 7 g. Tahap berikutnya, sukrosa
dimasukkan ke dalam beaker glass yang telah berisi akuades 750 ml, lalu diaduk
dengan menggunakan magnetic stirrer sebagai pengaduk. Kemudian ditambahkan
myo-inositol diaduk hingga larut. Dimasukkan larutan stok hara makro 75 ml,
larutan stok hara mikro 7,5 ml, iron 6 ml dan vitamin 3 ml. Kemudian larutan
ditempatkan menjadi 1500 ml. Keasaman diukur dengan pH meter. pH yang

Universitas Sumatera Utara

dikehendaki adalah 5,8, untuk mengatur pH yaitu menaikkan atau menurunkan pH
dapat digunakan larutan NaOH dan HCl 0,1 N. Letakkan agar mikrobiologi dan
dimasak di atas kompor gas sampai larutan mendidih dan bening (semua agar
telah larut). Larutan dipindahkan ke erlenmeyer berukuran 2000 ml dan ditutup
dengan aluminium foil. Hasil Media MS secara keseluruhan di sterilisasi dengan
tekanan 1 atm pada suhu 121°C selama 20 menit di autoklaf. Setelah proses
sterilisasi selesai, media dimasukkan ke ruang kultur dan dimasukkan ke ruangan
Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) untuk dibagikan ke 3 tabung erlenmeyer
berukuran 1000 ml dengan masing-masing tabung berisi 500 ml. Masukkan BAP
dan NAA menggunakan mikropipet ke masing-masing tabung uji sesuai
perlakuan. Dituangkan media ke dalam tabung uji berisikan 13 ml/tabung dan
ditutup dengan penutup tabung steril untuk subkultur, sehingga didapat ± 38
tabung uji, lalu dipisahkan untuk dua jenis eksplan masing-masing 15 tabung uji.
Tabung uji diberi label sesuai dengan perlakuan, selanjutnya disimpan dalam
ruang kultur sebelum digunakan.
WPM (Woody Plant Medium)
Media yang digunakan adalah media Woody Plant Medium (WPM).
Sebelum dilakukan pembuatan media WPM, dilakukan pembuatan larutan stok
ZPT BAP dan NAA. Larutan stok ZPT masing-masing dibuat 100 mg/100 ml.
Kemudian larutan stok BAP dan NAA disaring menggunakan minisar guna
meningkatkan sterilitas dari ZPT tersebut dan dilakukan di Laminar Air Flow
Cabinet (LAFC).
Pada pembuatan media WPM, tahap pertama adalah membuat larutan stok
bahan kimia hara makro dengan pembesaran 10x, hara mikro dengan pembesaran

Universitas Sumatera Utara

100x, larutan iron dengan pembesaran 50x, larutan vitamin dengan pembesaran
100x, sukrosa 50 g, myo-inositol 0,1 g dan agar 5 g. Tahap berikutnya, sukrosa
dimasukkan ke dalam beaker glass yang telah berisi aquades 750 ml, lalu diaduk
dengan menggunakan magnetik stirer sebagai pengaduk. Kemudian ditambahkan
myo-inositol diaduk hingga larut. Dimasukkan larutan stok hara makro 75 ml,
larutan stok hara mikro 7,5 ml, iron 6 ml dan vitamin 3 ml. Kemudian larutan
ditepatkan menjadi 1500 ml dengan menambahkan aquades. Keasaman diukur
dengan pH meter. pH yang dikehendaki adalah 5,8 untuk mengatur pH yaitu
menaikkan atau menurunkan pH dapat digunakan larutan KOH dan HCl 0,1 N.
Ditambahkan agar biotek dan dimasak di atas kompor gas sampai larutan
mendidih dan bening (semua agar telah larut). Larutan dipindahkan ke erlenmeyer
berukuran 2000 ml dan ditutup dengan aluminium foil dan diikat dengan tali
plastik. Kemudian media WPM di sterilisasi dengan tekanan 17,5 psi pada
suhu 121°C selama 20 menit di autoklaf. Setelah proses sterilisasi selesai, media
dimasukkan ke ruang kultur dan dimasukkan ke Laminar Air Flow Cabinet
(LAFC) untuk dibagikan ke 3 tabung erlenmeyer berukuran 1000 ml dengan
masing-masing tabung berisi 500 ml. Masukkan BAP dan NAA menggunakan
mikropipet ke masing-masing tabung uji sesuai perlakuan. Dituangkan media ke
dalam tabung uji berisikan 13 ml/tabung dan ditutup dengan penutup tabung steril
untuk subkultur, sehingga diperoleh ± 38 tabung uji lalu dipisahkan untuk dua
jenis eksplan masing-masing 15 tabung uji. Tabung uji diberi label sesuai dengan
perlakuan, selanjutnya disimpan dalam ruang kultur sebelum digunakan.

Universitas Sumatera Utara

Persiapan Ruang Tanam
Seluruh permukaan laminar air flow cabinet sebelumnya dibersihkan
terlebih dahulu menggunakan alkohol 96% lalu di sterilkan dengan sinar ultra
violet selama 1 jam sebelum proses penanaman dilakukan. Semua alat dan bahan
yang akan dipakai harus disemprot dengan alkohol 96% dan beberapa alat seperti
pinset, gunting, scalpel setelah disemprot lalu dibakar di dalam ke dalam laminar
air flow cabinet selama 1 menit. Hal ini dilakukan untuk menghindari resiko
bahan penelitian terkontaminasi. Steribox dihidupkan dan disediakan alkohol 70%
untuk membersihkan alat yang telah digunakan.
Subkultur
Setelah selesai tahap kultur primer (±6 minggu), eksplan yang
menghasilkan tunas selanjutnya diperbanyak. Proses perbanyakan dilakukan
dengan memotong tunas baru menjadi bagian yang lebih kecil, dan selanjutnya
dikulturkan pada medium baru. Pada tahap ini terdapat tiga bentuk eksplan, yaitu
stock eksplan (bonggol) yang merupakan eksplan awal yang diperoleh dengan
memisahkan tunas baru yang terbentuk, nodal eksplan (nodus) yang diperoleh dari
bagian batang tunas baru, serta shoot eksplan (pucuk) yang merupakan bagian
apikal tunas baru, biasanya mengandung beberapa daun muda. Eksplan yang
digunakan pada penelitian ini adalah eksplan stock (bonggol) dan shoot (pucuk).
Kedua eksplan tersebut dikulturkan di

6 medium baru.

Eksplan yang akan

dikulturkan ke dalam media tanam diletakkan di piringan kaca tebal dengan alas
kertas plano. Kemudian eksplan ditanamkan ke dalam tabung uji sesuai dengan
perlakuan, setiap tabung uji terdiri dari 1 eksplan. Kemudian ujung tabung uji
ditutup dengan menggunakan kain kasa steril yang dibalut dan diikat benang.

Universitas Sumatera Utara

Kegiatan penanaman dilakukan di LAFC dan di bawah api bunsen. Tabung uji
diletakkan di rak kultur di bawah cahaya dan ruangan memiliki air conditioner
dengan suhu 18oC. Kondisi pemeliharaan dan lingkungan kultur sama seperti pada
tahap kultur primer. Satu siklus tahap multiplikasi adalah empat minggu, dan
tahap ini dapat diulang antara 3 – 12 siklus tergantung jumlah planlet yang
diinginkan.
Pemeliharaan Eksplan
Tabung-tabung uji diletakkan pada rak kultur di dalam ruang kultur.
Ruangan ini diusahakan bebas dari bakteri dan cendawan, dimana setiap hari
disemprot dengan alkohol 96% atau dan disemprot formalin agar bebas dari
organisme yang menyebabkan terjadi kontaminasi. Dalam penelitian ini suhu
ruangan kultur yang digunakan + 20-25°C, paling optimum 18oC dan intensitas
cahaya 2000 lux serta dengan kondisi ruangan memiliki air conditioner dengan
hefa yang dibersihkan selama 6 bulan sekali. Apabila mengalami kontaminasi,
segera diambil dari rak kultur agar mencegah kontaminasi ke tabung lainnya.
Peubah Amatan
Persentase Eksplan Membentuk Tunas (%)
Pengamatan dilakukan pada akhir percobaan berdasarkan jumlah
tunas yang muncul dari keseluruhan ulangan.
Persentase terbentuknya tunas = jumlah tunas yang terbentuk x 100%
jumlah eksplan seluruhnya (per perlakuan)
Umur Muncal Tunas
Kemunculan tunas dihitung umur kemunculannya berdasarkan hari ke
berapa munculnya tunas.

Universitas Sumatera Utara

Jumlah Tunas (tunas)
Dihitung pada akhir penelitian dengan menghitung jumlah tunas baru
yang terbentuk dari setiap eksplan dan jumlah tunas baru yang terbentuk dibagi
dengan jumlah ulangan.
Panjang Tunas (cm)
Panjang tunas diukur pada tunas tertinggi dengan menggunakan kertas
milimeter yang diukur dari tempat munculnya tunas (pangkal) sampai ujung tunas
tertinggi. Panjang tunas keseluruhan dari setiap perlakuan dibagi dengan jumlah
ulangan. Pengukuran dilakukan pada akhir penelitian.
Persentase Terbentuknya Daun (%)
Jumlah daun dihitung dari daun yang terbentuk yang telah terbuka
sempurna pada eksplan. Pengamatan dilakukan pada akhir penelitian. Persentase
terbentuknya daun dihitung pada akhir penelitian dengan rumus:
Persentase terbentuknya daun = jumlah daun yang terbentuk x 100%
jumlah eksplan seluruhnya (per perlakuan)
Jumlah Daun (helai)
Jumlah daun dihitung dari daun yang terbentuk yang telah terbuka
sempurna pada eksplan yang dilakukan pada akhir percobaan.
Kehadiran Kalus (visual)
Kehadiran kalus dilihat dari ada atau tidaknya kemunculan kalus dari
tunas-tunas samping yang bersifat positif atau negatif bagi penelitian. Dilihat pada
akhir percobaan.
Warna Kalus (visual)
Kehadiran warna kalus dilihat dari ada atau tidaknya kemunculan warna
yang berbeda atau tidak dari kalus. Dilihat pada akhir percobaan.

Universitas Sumatera Utara

Morfogenesis
Kemunculan tunas adventif dari jaringan pangkal batang, ujung batang
atau lainnya.

Universitas Sumatera Utara

HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Dari hasil analisis data yang dilakukan, diperoleh bahwa perlakuan jenis
eksplan yang berbeda memberikan pengaruh nyata terhadap jumlah tunas. Pada
perlakuan komposisi media yang berbeda memberikan pengaruh nyata terhadap
jumlah tunas, panjang tunas, persentase terbentuknya daun, dan jumlah daun.
Untuk interaksi antara jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda
memberikan pengaruh nyata terhadap pernsentase munculnya tunas, panjang
tunas, persentase terbentuknya daun, dan jumlah daun.
Persentase Munculnya Tunas (%)
Hasil pengamatan serta sidik ragam terhadap parameter persentase
munculnya tunas pada perlakuan jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda
(Lampiran 1-3) belum menunjukkan pengaruh yang nyata, akan tetapi interaksi
antara perlakuan jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda memberikan
pengaruh yang nyata terhadap persentase munculnya tunas.
Rataan persentase munculnya tunas dari perlakuan jenis eksplan dan
komposisi media yang berbeda dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Pengaruh perlakuan jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda
terhadap persentase munculnya tunas (%) 4 minggu setelah subkultur
Media
Jenis
eksplan A1
A2
A3
A4
A5
A6
Rataan
T1
58,33b 50,00bc 88,89a 50,00bc 42,86c 42,86c 55,49
T2
88,89a 81,82a 50,00bc 90,00a 83,33a 22,22d 69,38
Rataan
73,61
65,91
69,44
70,00
63,10
32,54 62,43
Keterangan: *Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada baris dan kolom yang sama
menunjukkan tidak berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
**Perlakuan T1= pucuk; T2= Bonggol.
Perlakuan A1= MS + BAP 0,5 mg/l, A2= MS + BAP 1 mg/l; A3= MS + BAP 1,5
mg/l + NAA 0,1 mg/l; A4= WPM + BAP 0,5 mg/l; A5= WPM BAP 0,5 mg/l +
NAA 0,25 mg/l; A6= WPM BAP 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l.

Universitas Sumatera Utara

Tabel 1, memperlihatkan persentase munculnya tunas tertinggi pada
interaksi jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda terdapat pada perlakuan
T2A4 yaitu T2 (bonggol) dan A4 (WPM + BAP 0,5 mg/l) dengan rataan
(90,00) % dan terendah terdapat pada perlakuan T2A6 yaitu T2 (bonggol) dan A4
(WPM + BAP 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l) dengan rataan (22,22) %. Perlakuan
T2A4, T2A1, T1A3, T2A5, T2A2 berbeda nyata dengan perlakuan T1A1, T1A2,
T2A3, T1A4, T1A5, T1A6, T2A6.
Gambar eksplan sebelum dan sesudah membentuk tunas pada salah satu
perlakuan dapat dilihat pada gambar 1 dan gambar 2.

Gambar 1. Eksplan bonggol sebelum Gambar 2. Eksplan bonggol setelah
membentuk tunas
membentuk tunas
Umur Munculnya Tunas (hari)
Hasil pengamatan terhadap parameter umur munculnya tunas pada
perlakuan jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda (Lampiran 4). Rataan
umur munculnya tunas dari perlakuan jenis eksplan dan komposisi media dapat
dilihat pada Tabel 2.
Tabel 2. Pengaruh perlakuan jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda
terhadap umur munculnya tunas (hari) 4 minggu setelah subkultur
Media
Jenis
eksplan A1
A2
A3
A4
A5
A6
Rataan
T1
21,00
21,00
21,00 21,00
21,00 21,00
21,00
T2
14,88
16,33
16,33
7,78
7,00 17,50
13,30
17,94
18,67
18,67 14,39
14,00 19,25
17,15
Rataan
Keterangan:

Perlakuan T1= pucuk; T2= Bonggol.

Universitas Sumatera Utara

Perlakuan A1= MS + BAP 0,5 mg/l, A2= MS + BAP 1 mg/l; A3= MS + BAP 1,5
mg/l + NAA 0,1 mg/l; A4= WPM + BAP 0,5 mg/l; A5= WPM BAP 0,5 mg/l +
NAA 0,25 mg/l; A6= WPM BAP 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l.

Jumlah Tunas
Hasil pengamatan serta sidik ragam terhadap parameter jumlah tunas pada
perlakuanjenis eksplan dan komposisi media yang berbeda (Lampiran 5-7)
menunjukkan pengaruh yang nyata terhadap jumlah tunas pada 4 minggu setelah
subkultur, akan tetapi interaksi antara perlakuan jenis eksplan dan komposisi
media yang berbeda belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap jumlah
tunas.
Rataan jumlah tunas dari perlakuan jenis eksplan dan komposisi media
yang berbeda dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Pengaruh perlakuan jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda
terhadap jumlah tunas (tunas) 4 minggu setelah subkultur
Media
Jenis
eksplan
A1
A2
A3
A4
A5
A6
Rataan
T1
0,58
0,50
0,89
0,63
0,43
0,43
0,58b
T2
1,44
0,91
1,17
0,90
1,00
0,22
0,94a
1,01a 0,70c
1,03a 0,76b 0,71c
0,33d
0,76
Rataan
Keterangan : *Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada baris dan kolom yang sama
menunjukkan tidak berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
**Perlakuan T1= pucuk; T2= Bonggol.
Perlakuan A1= MS + BAP 0,5 mg/l, A2= MS + BAP 1 mg/l; A3= MS + BAP 1,5
mg/l + NAA 0,1 mg/l; A4= WPM + BAP 0,5 mg/l; A5= WPM BAP 0,5 mg/l +
NAA 0,25 mg/l; A6= WPM BAP 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l.

Tabel 3, memperlihatkan jumlah tunas tertinggi pada perlakuan jenis
eksplan terdapat pada perlakuan T2 (bonggol) dengan rataan (0,94) dan terendah
pada perlakuan T1 (pucuk) dengan rataan(0,58). Perlakuan jenis eksplan dengan
perlakuan T2 berbeda nyata dengan perlakuan T1. Untuk perlakuan komposisi
media yang berbeda memperlihatkan jumlah tunas tertinggi terdapat pada
perlakuan A1 (MS + BAP 0,5 mg/l) dengan rataan (1,01) tunas, sedangkan
terendah pada perlakuan A6 (WPM BAP 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l) dengan rataan

Universitas Sumatera Utara

(0,33). Komposisi media A1dan A3 berbeda nyata terhadap perlakuan A2, A4,
A5, dan A6.
Panjang Tunas (cm)
Hasil pengamatan serta sidik ragam terhadap parameter panjang tunas
pada perlakuan jenis eksplan (Lampiran 8-10) belum menunjukkan pengaruh yang
nyata terhadap panjang tunas pada 4 minggu setelah subkultur, sedangkan
komposisi media yang berbeda serta interaksi antara perlakuan jenis eksplan dan
komposisi media yang berbeda memberikan pengaruh yang nyata terhadap
panjang tunas.
Rataan panjang tunas dari perlakuan jenis eksplan dan komposisi media
yang berbeda dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Pengaruh perlakuan jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda
terhadap panjang tunas (cm) 4 minggu setelah subkultur
Media
Jenis
eksplan
A1
A2
A3
A4
A5
A6
Rataan
T1
0,20d 0,15de
0,44a
0,09f
0,10e
0,10e
0,18
T2
0,23c
0,23c
0,08f
0,50a
0,37b
0,03f
0,24
0,22
0,19
0,26
0,29
0,23
0,07
0,21
Rataan
Keterangan : *Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada baris dan kolom yang sama
menunjukkan tidak berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
**Perlakuan T1= pucuk; T2= Bonggol.
Perlakuan A1= MS + BAP 0,5 mg/l, A2= MS + BAP 1 mg/l; A3= MS + BAP 1,5
mg/l + NAA 0,1 mg/l; A4= WPM + BAP 0,5 mg/l; A5= WPM BAP 0,5 mg/l +
NAA 0,25 mg/l; A6= WPM BAP 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l.

Tabel 4, memperlihatkan panjang tunas tertinggi pada interaksi perlakuan
jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda tertinggi terdapat pada perlakuan
T2A4 yaitu T2 (bonggol), A4 (WPM + BAP 0,5 mg/l) dengan rataan (0,50) dan
terendah pada perlakuan T2A6 yaitu T2 (bonggol), A6 (WPM BAP 0,5 mg/l +
NAA 0,5 mg/l) dengan rataan (0,03). Perlakuan T2A4 dan T1A3 berbeda nyata

Universitas Sumatera Utara

dengan perlakuan T2A5, T1A1,T2A1, T2A2, T1A2, T1A5, T1A6, T1A4, T2A3,
T2A6.
Persentase Terbentuknya Daun (%)
Hasil pengamatan serta sidik ragam terhadap parameter persentase
terbentuknya daun pada perlakuan jenis eksplan belum menunjukkan pengaruh
yang nyata, sedangkan komposisi media yang berbeda dan interaksi

antara

perlakuan jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda memberikan pengaruh
yang nyata terhadap persentase terbentuknya daun (Lampiran 11-13).
Rataan persentase terbentuknya daun dari perlakuan jenis eksplan dan
komposisi media yang berbeda dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Pengaruh perlakuan jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda
terhadap persentase terbentuknya daun (%) 4 minggu setelah subkultur
Media
Jenis
eksplan A1
A2
A3
A4
A5
A6
Rataan
T1
0,00d 0,00d 33,33b
0,00d
0,00d
0,00d
5,56
T2
0,00d 0,00d
0,00d 50,00a 25,00c
0,00d
12,50
0,00
0,00
16,67
25,00
12,50
0,00
9,03
Rataan
Keterangan : *Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan
berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
**Perlakuan T1= pucuk; T2= Bonggol.
Perlakuan A1= MS + BAP 0,5 mg/l, A2= MS + BAP 1 mg/l; A3= MS + BAP 1,5
mg/l + NAA 0,1 mg/l; A4= WPM + BAP 0,5 mg/l; A5= WPM BAP 0,5 mg/l +
NAA 0,25 mg/l; A6= WPM BAP 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l.

Tabel 5, memperlihatkan persentase terbentuknya daun tertinggi pada
interaksi perlakuan jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda terdapat pada
perlakuan T2A4 yaitu T2 (bonggol), A4 (WPM + BAP 0,5 mg/l) dengan rataan
(50,00) % dan terendah terdapat pada perlakuan T1A1, T1A2, T1A4, T1A5,
T1A6, T2A1, T2A2, T2A3, T2A6 yaitu dengan jenis eksplan T1 (pucuk) dan T2
(bonggol) dengan masing-masing media A1 (MS + BAP 0,5 mg/l), A2 (MS +
BAP 1 mg/l), A4 (WPM + BAP 0,5 mg/l), A5 (WPM BAP 0,5 mg/l + NAA 0,25

Universitas Sumatera Utara

mg/l), A6 (WPM BAP 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l), A3 (MS + BAP 1,5 mg/l +
NAA 0,1 mg/l) dengan rataan (0,00). Perlakuan T2A4 berbeda nyata dengan
seluruh perlakuan.
Jumlah Daun (helai)
Hasil pengamatan serta sidik ragam terhadap parameter jumlah daun pada
perlakuan jenis eksplan belum menunjukkan pengaruh yang nyata, sedangkan
komposisi media yang berbeda dan interaksi antara perlakuan jenis eksplan dan
komposisi media yang berbeda memberikan pengaruh yang nyata terhadap jumlah
daun (Lampiran 14-16).
Rataan jumlah daun dari perlakuan jenis eksplan dan komposisi media
yang berbeda dapat dilihat pada Tabel 6.
Tabel 6. Pengaruh perlakuan jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda
terhadap jumlah daun (helai) 4 minggu setelah subkultur
Media
Jenis
eksplan
A1
A2
A3
A4
A5
A6
Rataan
T1
0,00d 0,00d 1,11b 0,00d
0,00d
0,00d
0,19
T2
0,00d 0,00d 0,00d 1,40a
0,42c
0,00d
0,30
0,00
0,00
0,56
0,70
0,21
0,00
0,24
Rataan
Keterangan :

*Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan
berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
**Perlakuan T1= pucuk; T2= Bonggol.
Perlakuan A1= MS + BAP 0,5 mg/l, A2= MS + BAP 1 mg/l; A3= MS + BAP
1,5 mg/l + NAA 0,1 mg/l; A4= WPM + BAP 0,5 mg/l; A5= WPM BAP 0,5 mg/l
+ NAA 0,25 mg/l; A6= WPM BAP 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l.

Tabel 6, memperlihatkan jumlah daun tertinggi pada interaksi perlakuan
jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda terdapat pada perlakuan T2A4
yaitu T2 (bonggol), A4 (WPM + BAP 0,5 mg/l) dengan rataan (1,40) daun dan
terendah terdapat pada perlakuan T1A1, T1A2, T1A4, T1A5, T1A6, T2A1,
T2A2, T2A3, T2A6 yaitu dengan jenis eksplan T1 (pucuk) dan T2 (bonggol)
dengan masing-masing media A1 (MS + BAP 0,5 mg/l), A2 (MS + BAP 1 mg/l),

Universitas Sumatera Utara

A4 (WPM + BAP 0,5 mg/l), A5 (WPM BAP 0,5 mg/l + NAA 0,25 mg/l), A6
(WPM BAP 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l), A3 (MS + BAP 1,5 mg/l + NAA 0,1
mg/l) dengan rataan (0,00). Perlakuan T2A4 berbeda nyata dengan seluruh
perlakuan.

Gambar 3. Eksplan setelah membentuk daun pada perlakuan T2 (bonggol) dan
media A4 (WPM + BAP 0,5 mg/l)
Tabel 7. Rekapitulasi Peubah Amatan Sidik Ragam pada Multiplikasi Tunas
Mikro Tanaman Karet Pada Jenis Eksplan dan Komposisi Media yang
Berbeda (4 minggu setelah subkultur)
Perlakuan
Peubah Amatan
T
A
TxA
a
Persentase Munculnya Tunas (%)
tn
tn
**
Umur Muncul tunas (hari)a
a
Jumlah Tunas (tunas)
**
**
tn
a
Panjang Tunas (cm)
tn
**
**
a
Persentase terbentuknya Daun (%)
tn
**
**
Jumlah Daun (helai)a
tn
**
**
Kehadiran Kalus
Ada
ada
ada
Warna Kalus
Ada
ada
ada
Morfogenesis
Tidak ada Tidak ada
Tidak ada
Keterangan: T= Jenis eksplan
A= komposisi media yang berbeda
TxA= interaksi jenis eksplan dengan komposisi media yang berbeda
**= sangat nyata pada taraf 5 %
tn= tidak nyata
a= transformasi data

Kehadiran Kalus

Universitas Sumatera Utara

Kehadiran kalus ditemukan pada perlakuan T2 (jenis eksplan bonggol)
dan media A5 (WPM + BAP 0,5 mg/l + NAA 0,25 mg/l). Kehadiran kalus
muncul pada minggu ke-3 setelah subkultur. Kalus terdapat pada bekas potongan
bonggol.

Gambar 4. Kehadiran kalus dari eksplan T2 (bonggol) dan media A5
(WPM + BAP 0,5 mg/l + NAA 0,25 mg/l).

Warna Kalus
Kalus yang terbentuk memiliki warna putih kehijauan. Warna kalus yang
terbentuk dapat diamati secara visual.
Morfogenesis
Berdasarkan kemunculan terbentuknya tunas mikro tanaman karet,maka
tidak diperoleh kemunculan tunas dliuar jaringan meristem aksilar (pangkal
batang, ujung batang, atau bagian lain dari eksplan).
Pembahasan
Pengaruh Eksplan terhadap Pembentukan Tunas Tanaman Karet Secara In
Vitro

Universitas Sumatera Utara

Dari hasil analisis data secara statistik diketahui bahwa perlakuan jenis
eksplan memberikan pengaruh yang nyata terhadap jumlah tunas dan
belummemberikan pengaruh nyata pada peubah amatan lain.
Pada peubah amatan jumlah tunas tertinggi pada perlakuan jenis eksplan
terdapat pada perlakuan T2 (bonggol) dengan rataan (0,94) dan terendah pada
perlakuan T1 (pucuk) dengan rataan (0,58). Pada eksplan pucuk, tunas yang
muncul hanya berjumlah satu yang berasal dari tunas pucuk yang memanjang,
sedangkan pada eksplan bonggol dengan satu mata tunas jumlah tunas tertinggi
adalah tiga tunas yang terdapat pada pangkal batang. Jaringan meristem organ
bonggol tanaman mikro merupakan jaringan yang dapat membentuk tunas apabila
jaringan tersebut ditempatkan pada komposisi medium dan zat pengatur tumbuh
yang sesuai. Hal ini juga didukung oleh Gunnatilleke dan Samaranayake (1988)
yang menyatakan bahwa terjadi pemanjangan tunas aksilar dan pada beberapa
pengkulturan, masing-masing tunas tanaman karet menghasilkan dua tunas aksilar
dibawah tunas terminal dengan panjang 0.5 – 0.7 cm dan tumbuhnya tunas aksilar
dilihat dalam waktu seminggu pada semua media dan tunas terminal tumbuh lebih
cepat dari tunas aksilar pada tanaman karet. Sedangkan hasil dari penelitian ini
tunas aksilar lebih baik pertumbuhannya daripada tunas terminal. Hal ini dapat
disebabkan oleh pengaruh kondisi fisiologis eksplan dan hormon endogen.
Menurut Yusnita (2003) kondisi fisiologis, ukuran eksplan, serta bagian tanaman
yang diambil merupakan hal-hal yang harus dipertimbangkan dalam memilih
eksplan yang akan digunakan sebagai bahan awal kultur.
Menurut Gunatilleke dan Samaranayake (1988) yang menyatakan bahwa
respon eksplan tunas pucuk tanaman karet pada media dengan tambahan ZPT

Universitas Sumatera Utara

mengalami pertumbuhan yang lambat. Hal ini dikaitkan dengan pertumbuhan
tunas hanya muncul dari titik tumbuh terminalnya saja. Hal ini mungkin
disebabkan belum diperolehnya komposisi medium dan zat pengatur tumbuh yang
sesuaiuntuk mendorong pertumbuhan pucuk aksilar. Paranjothy dan Gandimathi
(1976) yang mencoba mengkulturkan tunas ujung pucuk (panjang 2-3 cm), yang
berasal dari perbanyakan pertama dengan biji. Walupun tunas ini mengalami
perakaran di medium cair MS, namun tunas tersebut mengalami kegagalan
pertumbuhan pada medium MS padat.
Pengaruh Komposisi Media yang Berbeda terhadap Pembentukan Tunas
Tanaman Karet Secara In Vitro
Dari hasil analisis data secara statistik diperoleh bahwa perlakuan
komposisi media yang berbeda memberikan pengaruh yang nyata

terhadap

jumlah tunas, panjang tunas, persentase munculnya daun, dan jumlah daun.
Panjang tunas, persentase munculnya tunas dan jumlah daun dibahas pada
interaksi jenis eksplan dan komposisi media yang berbeda karena memberikan
pengaruh yang nyata terhadap peubah amatan tersebut.
Pada peubah amatan jumlah tunas tertinggi terdapat pada perlakuan A1
(MS + BAP 0,5 mg/l) dengan rataan (1,01) tunas, sedangkan terendah pada
perlakuan A6 (WPM BAP 0,5 mg/l + NAA 0,5 mg/l) dengan rataan (0,33). Hal ini
menunjukkan bahwa penambahan zat pengatur tumbuh pada media dapat
mempengaruhi jumlah tunas pada tanaman karet. BAP dengan konsentrasi lebih
tinggi daripada NAA atau tanpa NAA akan mendorong pembelahan sel dan
pembentukan tunas. Hal ini didukung oleh penelitian Harahap et al. (2014) yang
menyatakan bahwa didapat medium MS terbaik untuk multiplikasi pertumbuhan
tunas aksilar karet yaitu medium MS yang ditambahkan BAP 0,5mg/l, medium

Universitas Sumatera Utara

MS yang ditambahkan BAP 1,0 mg/l dan NAA 0 mg/l, dan medium MS yang
ditambahkan BAP 1,5 mg/l dan NAA 0,1 mg/l. Hal ini juga didukung oleh
Gunnatilleke dan Samaranayake (1988) yang menyatakan bahwa hanya dengan
0.5 mg/l dan 4.0 mg/l BAP dan 0.5 mg/l BAP yang dikombinasi dengan 0.1 mg/l
IBA maka terjadi pemanjangan tunas aksilar dan pada beberapa pengkulturan,
masing-masing tunas tanaman karet menghasilkan dua tunas aksilar dibawah
tunas terminal dengan panjang 0.5 – 0.7 cm. Menurut Wattimena et al. (1992)
ploriferasi tunas aksilar hanya memerlukan sitokinin dalam konsentrasi yang
tinggi tanpa auksin atau auksin dalam konsentrasi yang rendah sekali.
Pengaruh Interaksi Jenis Eksplan da