Bioaktivitas ekstrak karang lunak Sinularia sp dan Lobophytum sp hasil fragmentasi di perairan Pulau Pramuka, Kepulauan Seribu, Jakarta
BIOAKTIVITAS EKSTRAK KARANG LUNAK Siizztlnrin sp dan
Loboplzytz~msp HASIL FRAGMENTASI DI PERAIRAN
PULAU PRAMUKA, KEPULAUAN SERIBU, JAKARTA
IIS TRIYULIANTI
SEKOLAH PASCASARJANA
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
2009
PERNYATAAN MENGENAI TESIS DAN
SUMBER INFORMASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis dengan judul Bioaktivitas Ekstrak
Karang Lunak Sinularia sp dan Lobophytum sp Hasil Fragmentasi Buatan di
Kedalaman 3m dan 10m adalah karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing
dan belum pemah diajukan dalam bentuk apapun kepada perguman tinggi manapun.
Sumber infonnasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun yang
tidak diterbirkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam
Daftar Pustaka dibagian akhir tesis ini.
Bogor, Februari 2009
Iis Triyulianti
NIM C551060071
ABSTRACT
IIS TRKULIANTI. Bioactivity of Extracts So$ Corals Sinztlaria sp and
Lobophytzm?sp froni FrapnentatioT~sYields at 3 and 10 Mepes Depth at P~anizrka
Islai~d,Thaozrsand Island, Jakarta. Under direction of NEVIATY P . ZAMANI and
HEFM EFFENDI.
Soft c o ~ a lis ktlowr7 as one of nzari~7einvertebrates producing secondary
metabolite conlpolinds which have biological activities (bioactii~e). The study was
ait~ledto investigate the bioactive conpozind of Si~zlulariasp a17d Lobophytztnz sp froni
artz$cialfr.ngme?ltations at 3 and I 0 meters depth. It was conducted in Pramzika
Islmld waters of Kepilauan Seribu. The isolation of bioactive compound process
involved extraction,j?aciionatiorz and chron~atographicpurz&utioil. Ident1~7catio~1
of
the active isolate was conducted by Gas Chrontatography-Mass spectroscopy m7d
then pz~tside by side with Wiley 7~1.1
database. Disc dfisiotz method was condztcted
to obsewed inhibition activivfrom seco~zdarymetabolites compounds of marine so$
coral Sinularia sp. and Lobophytum sp. Crude exhacts inhibition activity of
Sinirlaria sp on Escherichia coli and Staphylococctrs aztrezrs was lesser than
Lobophytidm sp. 77ze highest inhibition on bacterial growth ivas exhibited by so$
coral crztde extracts which came froni frapneiltation at 10 rnehes depth from
Lobophytzrm sp i.e. 7,8 mm. The 21-h LCjo of so$ coral extrncts for Artemia sali~ia
were 15,146ppn1 (Sitrzrlaria sp} mrd 201,93ppm (Lobophytunl sp}.
Keywords: Bioactive conipoztnd, Sirzularia sp, Lobophyhra~sp, Inhibitation, Pramuka
Island
Hasil pengukuran parameter fisika-kimia lingkungan pada tiga bulan
penvakilan musim di dua kedalaman lokasi penanaman karang lunak hasil
fragmentasi buatan (Siiiularia sp dan Lobophytztni sp) menunjukkan bahwa kondisi
lingkungan perairan dari parameter yang temkur masih berada pada kisaran ambang
batas baha mutu air laut yany telah diputuskan olelt Kettlentriart Lingh~~ngan
Hidup
kehiclupan biota. Uji statistik tlilakukan denyan
No.5 I Tah~in2004 untuk menduk~~ny
menggunakan analisis sidik ragam (ANOVA) terhadap hasil pengukuran parameter
fisika-kimia lingkungan lokasi penanaman karang lunak hasil fragmentasi buatan
tidak berbeda nyata (PXl.05) baik antar musim maupun antar dua kedalaman lokasi
penanaman.
Senyawa bioaktif yang diperoleh dari ekstrak karang lunak Lobophytzm sp di
kedalaman 3 dan I0 meter hasil fragmentasi buatan mempunyai kekuatan sedang dan
ekstrak kasar Simlarin sp berkekuatan lemah. Perbedaan bioaktifitas pada dua
kedalaman yang diujikan diduga karena produksi senyawa bioaktif yang dihasilkan
sebagai hasil samping kegiatan metabolisme sekunder dipengamhi oleh lingkungan
laut sekitarnya.
Nilai LC50 24 jam yang dihasilkan dari perhitungan untuk karang lunak jenis
Sinzrlaria sp terpilih (kedalaman 10 m) adalah sebesar201,93 ppm yang masuk dalam
kategori toksik dan nilai LC50 untuk karang lunak jenis Lobophytum sp terpilih adalah
sebesar 15,146 ppm dan masuk ke dalam kategori sangat toksik
Noda yang ditunjukkan pada Kromatogafi Lapis Tipis (KLT)
mengindikasikan keberadaan senyawa bioaktif yang ditunjukkan oleh nilai Rf
(Retardaction finctioiz). Nilai Rf yang diperoleh dari fraksi Lobophytz~msp hasil
fragmentasi di kedalaman 3 m adalah 0,33; 0,67; 0,73 dan untuk fraksi jenis yang
sama di kedalaman 10 m adalah 0,46; 0,66; 0,90. Fraksi Sinularia sp hasil
fragmentasi di kedua kedalaman tidak menunjukkan keberadaan spot atau senyawa
yang terikat pada fase diam silica gel. Untuk menguji bioaktifitas eaksi hasil
pemurnian kolom kromatografi terhadap bakteri Escherichia coli dan
Stnphytlococcits nzrrezts maka dilakukan uji bioautografi. Fraksi yang diindikasikan
terdapat senyawa bioal;tif menunjukkan keaktifannya dalam menghambat bakteri
E.coli namun tidak terhadap S.azrreus.
Identifikasi awal senyawa aktif secara biologi berdasarkan berat molekul
senyawa hasil analisis kromatogafi gas dibandingkan dengan pustaka kimia pada
data base Wiley 711.1. Berdasarkan pola fragmentasi ion ditunjukkan oleh keberadaan
satu puncak dominan pada fraksi aktif Lobophytuni sp hasil fragmentasi di kedalaman
3 m terjadi pada waktu retensi 5.55 dengan persentasi area 36.71% yang diduga
adalah senyawa 2-endo-(l-oxacyclohex-2-yloxy)bicyclo[2.2.l]heptane dan untuk
fraksi aktif karang lunak jenis sama di kedalaman 10 m terjadi pada waktu retensi
5.52 dengat] persentasi area 13.83 dan diduya scbagai senyawa .ALPHA.-HYDROX-Y-i'I~Kr~US.i-.LlETIIYI.EI\~OXY-6.6-DII~lET~IYI.BICYCLO(i.
I. Ij1-IEPTW1E
0Hak Cipta milik P B , tahun 2009
Hak Cipta dilindungi Undang-Undang
Dilarang mengutip sebagian atau selzrruh karya tzrlis ini tanpa mencantumkan atau
tnenyebzrtkan sumbernyn. Pengutipatr hanya zintuk kepentingml pendidihl,
penelitimz, penzrlisan karya ilmiah, penyrsrinan laporan, penulisan kritik, atazr
titijaumi slratzr maslah; dan pe?zgutipan iersebut tidak merugihn kepentitzgan yatg
wajar IPB.
Dilarm~gn1e17gumur?tkan&I
rnen7perbm~yaksebagian ntazr selziruh Kaiya tzrlis
dalam bentzrk apa putt tanpa izin IPB
HALAMAN PENGESAHAN
Judul Tesis
:
Nama Mahasiswa
NIM
Program Studi
:
:
:
Bioaktivitas Ekstrak Karang Lunak Sinularia sp dan
Lobophyfz~nz sp Hasil Fragmentasi di Perairan Pulau
Pramuka, Kepulauan Seribu, Jakarta
Iis Triyulianti
C551060071
Ilmu Kelautan
Disetujui
Komisi Pembimbing
I
Dr. Ir. Neviaty Putri Zamani. M.Sc
Ketua
~r.rkr.natIr. Hehi Effendi M.Phil
Anggota
Diketahui
Ketua Program Studi
Ilmu Kelautan
Tanggal Ujian : 6 Maret 2009
Tanggal Lulus :
I 3 hi;i;Y
2009
viii
PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala karunia-Nya
sehingga karya ilmiah ini berhasil diselesaikan. Tema yang dipilih dalam penelitian
yang dilaksanakan pada bulan Juni 2007 - Desember 2008 ialah senyawa bioaktif
karang lunak hasil fragmentasi dengan judul Bioaktivitas Ekstrak Karang Lunak
Siiiularia sp dan Lobophytlrn? sp Hasil Fragmentasi pada Kedalaman 3 m dan 10 m di
Perairan Pulau Pramuka, Kepulauan Seribu, Jakarta.
Tesis ini berisikan tentang penapisan senyawa bioaktif dari karang lunak hasil
fragmentasi pada kedalaman berbeda untuk kemudian dilihat potensi bioaktivitasnya
dan mencoba menelusuri jenis senyawanya dengan melakukan isolasi dan
identifikasi. Hasil dari penelitian ini diharapkan dapat menambah khasanah ilmu
pengetahuan mengenai bahan-bahan alami dari organisme laut serta
merekomendasikan upaya perbanyakkan melalui fiagmentasi untuk kepentingan
kegiatan penelitian dan konservasi.
Kendala dan permasalahan tidak luput dari kegiatan ini mulai dari awal
hingga akhir pelaksanaamya, sehingga diiasa tidak munglun dapat terselesaikan
tanpa bantuan, dukungan, dorongan dan kerjasama dari semua pihak yang telah
membantu hingga usainya kegiatan penelitian.
Terima kasih penulis ucapkan kepada ibu Dr. Ir. Neviaty P. Zamani, M.Sc dan
bapak Dr. Ir. Hefni Effendi, M.Phi1 selaku pembimbing, serta bapak Prof. Dr. Ir. Dedi
Soedharma, DEA, ibu Mukzijat Kawaroe, M.Si d m seluruh peneliti "Kajian Bioaktif
Karang Lunak (0ctocorallia:Alcyonacea) Sinzrlnria sp, Lobophytzim sp dan
Snrcophyton sp Hasil Fragmentasi Buatan sebagai Penyedia Bahan Obat-Obatan dari
Laut" karena telah memberikan kesempatan kepada penulis untuk mengikuti kegiatan
pe~elitianini. Ungkapan terima kasih yang tak terhingga juga penulis sampaikan
untuk bapak, ibu, kakakku tercinta mba Nining dan mas Wawan serta dua adikku Ade
dan Teguh atas doa dan kasih sayangnya yang tidak putus-putusnya hingga penulis
dapat menyelesaikan tesis ini. Sentuhan akhir dari prakata ini, penulis tujukan
kepada seluruh teman-teman dan staf PS. IKL -Dept ITK-IPB, terima kasih atas
jalinan persahabatan dalam suasana kebersamaan dan kekeluargaan yang terus terbina
d m terjaga hingga penyelesaian tesis ini.
Akhir kata, semoga tesis ini dapat berguna dalam rangka pengembangan ilmu
dan pengetahuan khususnya di bidang bahan alami dari laut (Mnrine Natzrrnl
Product).
Bogor, Februari 2009
Iis Triyulianti
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Jakarta pada Tanggal 3 1 Mei 1976 dari ayah Kusnun dan
ibu Sudaningsih. Penulis merupakan putri ketlga dari lima bersaudara.
Tahun 1994 penulis lulus dari SMA Negeri 39 Jakarta dan pada tahun yang
sama lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB. Penulis
memilih Program Studi Manajemen Sumberdaya Perairan, Jurusan Manajemen
Sumberdaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan dan lulus tahun 1999.
Selama mengikuti perkuliahan, penulis aktif menjadi asisten mata kuliah
Avertebrata Air, Ikhtiologi dan Ekologi Perairan selama dua periode yaitu tahun
ajaran 199611997 dan 199711998. Asisten mata kuliah Limnologi tahun ajaran
199711998 , Bioteknologi Perairan tahun ajaran 199811999, Biologi Laut tahun
ajaran 199711998, Fisiologi Hewan Air tahun ajaran 199711998. Selama menjadi
mahasiswa, penulis aktif di Himpunan Mahasiswa Manajemen Sumberdaya Perairan
(HIMASPER) pada Biro Penelusuran Literatur (BPL-HIMASPER).
Tahun 2006 penulis melanjutkan pendidikan Strata dua (S2) di Institut
Pertanian Bogor pada Program Studi Ilmu Kelautan (PS IKL) minat Biologi Laut
dengan biaya sendiii. Tahun 2007 penulis menerima beasiswa BPPS (on going) dari
Direktorat Pendidikan Tinggi, Departemen Pendidikan Nasional untuk satu tahun atas
rekomendasi dari Universitas Muhammadiyah Sukabumi.
Selama menjadi
mahasiswa SPs P B di PS ML, penulis aktif sebagai bendahara Wahana Interaksi
Mahasiswa Pasca Sarjana IKL (WATERMASS IKL)tahun 200612007.
UCAPAN TERIMA KASIH
Tesis ini dapat terselesaikan dengan adanya banyak dukungan dan bantuan
dari berhagai pihak. Untuk itu penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada :
1. Direktorat Pendidikan Tinggi (Dirjen Dikti) karena penelitian ini didanai oleh
Program Hibah Bersaing X V .
2. Seluruh tim peneliti "Kajian Bioaktif Karang Lunak (0ctocora1lia:Alcyonacea)
Gorgonian sp, Lobophyizrm sp, Sarcophyfonsp Hasil Fragmentasi Buatan Sebagai
Penyedia Bahan Obat-obatan dari Luat" yang diketuai oleh Dr. Ir. Hefni Effendi,
M.Phil serta Prof Dr. Dedi Soedharma, DEA dan Ir. Mukzijat Kawaroe, M.Si
selaku anggota peneliti.
3. Dr. Ir. Neviaty P. Zamani, M.SC dan bapak Dr. Ir. Hefni Effendi, M.Phi1 selaku
ketua dan anggota komisi pembimbing,
4.
Seluruh rekan-rekan yang terkait dengan penelitian Program Hibah Bersaing XV
Laboratorium Biologi Laut, Departemen Ilmu dan Teknologi Kelautan, Institut
Pertanian Bogor (Dondi, Windika, Tia, Alin, Patrick, bapak Beginner, bapak
Supamo, mba Citra dan mba Meutia).
5. Tony Yusman B.Sc heserta selumf staf Laboratorium Produktivitas dan
Lingkungan Perairan Dept. MSP-IPR (mba Anna, bu Wulan, kak Heri, pa Yayat,
Budi dan Aan) yang telah banyak memberikan arahan serta penyediaan fasilitas
laboratorium selama penelitian.
6. Ibu Emma dan seluruh staf Laboratorium Mikrobiologi, Departemen Teknologi
Hasil Perikanan, Institut Pertanian Bogor.
7. Bapak Jaswanto dan seluruh staf PUSLABFOR-MABES POLRI.
8. Rekan-rekan IKL'06 yang sangat saya sayangi (bang Rico, Dondi, Ojon, mba
Ema, Ria, Mila, Ratih, Alul, Chatrin, pa Faisal, Degen, Ira, Mukti dan pa
Ngadiran)
9. Program Mitra Bahari, Departemen Kelautan dan Perikanan Repuhlik Indonesia
karena telah membantu penulis dalam penyelesaian tugas ini melalui beasiswa
COREMAP, semoga tulisan ini dapat bermanfaat bagi pengembangan program di
instansi ini.
DAFTAR IS1
Halaman
DAFTAR TABEL
xw
DAFTAR GAMBAR ...................... .................. .....................................
DAFTAR LAMPIRAN
xviii
ssi
PENDAHULUAN
Latar Belakang
1
Pemmusan Masalah
3
Hipotesis Penel
5
Tujuan dan Manfaat Penelitian
5
Kerangka Penelitian
7
TlNJAUAN PUSTAKA
Karang Lunak (Soft Coral)
7
Karang Lunak sebagai Organisme Uji
8
Klasfikas
8
Morfologi dan Anatomi Karang Lunak sebagai Organisme Uji .....
9
Senyawa Bioaktif Karang Luna
12
Senyam Terpenoid Karang Lunak
14
Ekstraksi dan Fraksinasi......................................................................
18
Kromatogr
20
Kromatografi Lapis Tipis ........................ .................. ...................
21
Kromatograf~Kolom
21
Kromatografi Lapis Gas ..............................................................
22
Altivitas Bakteri
..
. .
UJI Toksls~tas .................... .............................................
22
.............. .....
Al.temin snliiza
24
26
F&or LingkunganMabitat Penanaman Karang lurid Sit7ulo~tnsp d m
Lobopkj~tumsp terhadap Produksi Senya~vaBioak3if Karang Lunak
27
RlETODE PENELITIAN
IVahIu dan Tempat Penelitian
30
Bahan dan Alat
30
...
Xlll
Metoda Penelitian
33
35
...
35
Fraksinasi Karang Lunak Uji (Si~tularinsp dan Lobophymn sp) ...
38
Ekstraksi Karang Lunak Uji (Sinulnria sp dan Lobophj)rum sp)
Identifikasi Senyawa Bioktif
Smpel
Hasil
Fraksinasi
dengan
Kromatografi Lapis Tpis (Thin Lnyer Chrommtograpltj)).......... .....
Pemurnian Senyawa Bioaktif
dengan Kromatografi Kolom
Kromatograti Gas - Spektroskopi Massa (KG-MS) ......... ......... .....
.. .
.
.
Uji Bioalit~vitas...................................................................................
40
dan
40
43
Pembuatan Media Agar
43
Isolasi dan Penyegaran Bakteri .............. .....................................
43
Uji Bioal;tivitas terhadap Balcteri Patogen ....................................
44
Analisa Alrtivitas Antimihob Senyawa Hasil Fraksinasi (Bioautograii)
44
46
47
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
48
Koleksi Karang Lunak Uj'
48
Kondisi Linghngan Sebagai Habitat Karang Lunak Hasil
Fragmentasi
49
Parameter Fisika Lingkungan Perairan ............. ............. ..... .....
50
Parameter Kimia Lingkungan Perairan ................. ...................
53
Ekstraksi dan Bioaktivitas Senyawa Ekstrak Kasar
Karang Lunak Sinularia sp dan Lobophytujn sp.. ..........................
Ekstraksi dan Maseras'
58
58
Bioaktivitas Senyawa Ekstrak Kasar Karang Lunak
Sinulnria sp dan Loboph)~tumsp Hasil Fragmentasi ............ .....
61
Uji Brimze Shrimp Lerlrnl Toxicit?, (BSLT) Senyawa Ekstrak Kasar
Karang Lunak Sinulc~riasp dan Lobophytuin Hasil Fragmentasi
63
Fraksinasi Kromatogr&~ Lapis Tipis (KLT) dan Deteksi Aktivitas
Antibakteri dengan Bioautografi
66
xiv
Fraksinasi
dengan
Kromatografi
Kolom
dan
Deteksi
Alctivitas
Antimikroba dengan Bioautografi
71
sy
Identifikasi Fraksi Aktif Karang Lunak Lobophyruin sp dan Sit~trlnric~
Hasil Fragmentasi di Kedalaman 3 & 10 m ..................................
Pembahas
74
83
Kondisi Lingkungan Sebagai Habitat Karang Lunak Hasil
Fragmentasi
83
Parameter Fisika Lingkungan
84
Parameter Kimia Lingkungan
88
Ekstraksi dan Bioaktivitas Senyawa Ekstrak Kasar Karang
Lunak Sinularia sp d m Lobophytum sp
Ekstraksi d m Maserasi
91
91
Bioalctivitas Senyawa Ekstrak Kasar Karang Lunak
Sinularia sp d m Lobophytum sp Hasil Fragmentasi.................
94
Uji Brine Shrimp Lethal Toxicity (BSLT) Senyawa Ekstrak Kasar
Karang Lunak Sit~ulariasp dan Lobophytum H a i l Fragmentasi
103
Fraksinasi Kromatograli Lapis Tipis (KLT) dan Deteksi
Aktivitas Antib&eri dengan Bioautografi .... ........................... .....
104
Fraksinasi dengan Kromatografi Kolom dan Deteksi
&ivitas Antimikroba dengan Bioautograi? ..................................
105
Identifikasi Fraksi Alitif Karang Lunak Lobop~~y;lum
sp dan
Si~zz~lnria
sp Hasil Fragmentasi di Kedalarnan 3 & 10 m ...............
106
SIMPULAN DAN SARAN
113
113
DAFTAR PUSTA
115
122
DAFTAR TABEL
Halaman
1. Jenis-jenis senyawa terpen dari beberapa karang lunak ......................
17
2. Beberapa pelarut organik dan sifat fisiknya
19
3. Kategon toksisitas bah
25
4. Alat dan bahan yang digunakan dalam fragmentasi karang lunak ......
30
5. Alat dan bahan kegiatan pengukuran parameter lingkrungan ................
31
6. Alat dan bahan kegiatan ekstraksi dan uji bioalirtivitas .........................
32
7. Hasil pengukuran parameter lingAwgadokasi penanaman karang lunak
Sinularia sp dan Lobophytum sp hasil fiagmentasi buatan ...................
50
8. Nilai rata-rata berat ekstrak kasar serta nilai rendemen (b/v) karang lunak
Sinularia sp dan Lobophj~tumsp di kedalaman 3 dan 10 m ..................
58
9. Nilai LC50 (ppm) ekstrak karang lunak Sinularia sp dan Lobophytum sp hasil
fragmentasi di kedalaman 10 m
64
10. Nilai Rf fraksi organik ekstrak kasar senyawa karang lunak uji ..........
68
11. Fraksi yang terbentuk sebagai hasil pemurnian Colunzn Chromatography
71
ekstrak kasar karang lunak uji
12. Kelompok senyawa hail identifikasi dengan kromatografi gas-speA*oskopi
massa menggunakan database Wiley 7 n l untuk kaksi &if Lobophyrum sp
kedalaman 10 m
76
13. Kelompok senyawa hasil identifikasi dengan kromatografi gas-speA~roskopi
massa menggunakan database Wiley 7 n l untuk fraksi aktif Lobophytunz sp
kedalaman 3
79
14. f(elompok senyawa hasil identifikasi dengan kromatografi gas-speA.oskopi
massa menggunakan database Wiley 7n.l untuk fraksi aktif Sintrlnria sp
kedalaman 10 m .... .............. ........................... ......... ......... ..... ......... .....
82
15. Matriks hasil analisa bioalctivitas ekstrak karang lunak Sir?ulmin sp d m
Lobophyrum sp hasil fragmentasi buatan pada kedalaman 3 dan 10 m di
perairan Pulau Prarnuka, Kepulauan Senbu, Jakarta ..... ..............
.... .....
91
xvi
DAFTAR GAMBAR
Halaman
1. Diagram alir berfikir (kerangka pernikiran) .......................................
6
2. Polip Octocorallia dengan 8 buah tentakel pinnate (Wagener 2000) ....
7
3. Morfolo@ Octocorallia (Bayer, 1956)
10
4. Lokasi penanaman fiagmen karang lunak Sitzularin sp dan Lobophytum sp di
gosong Pulau Pramuka, Kepulauan Seribu, Jakarta ................... ..........
31
5. Rak fragmentasi (A), Substrat (B) dan Rak dengan substrat dan fraggen pada
lokasi penanaman di gosong Pulau Pramuka (C) ................................
34
6. Diagram alur ekstraksi karang lunak uji ............ ................................
37
7. Diagram alir proses Fraksinasi
39
8 Diagram alir proses fraksinasi GC-MS
42
9 Diagram alir dari proses pengujian bioaktivitas ekstrak terhadap bakteri
patoge
45
10 Diagam alir uji toksisitas dengan A. salina (Mclaughlin 1998) .. ..... .....
46
I IaSirzulnrin sp di bawah air (A) dan diatas air (B) ...................................
48
I l b Sirz~,rlnrinsp di bawah air (A) dan diatas air (B) ..................................
49
12 Hasil pengukuran suhu
(OC):
kecepatan arus (ddet) dan kecerahan (m)
perairan lokasi penanaman karang lunak uji hasil fragmentasi bulan Agustus
2007, Desernber 2007 dan April 2008
51
13 Hasil pengukuran salinitas (psu), pH, Oksigen terlarut ( m g ) lokasi
penanaman karang lunak uji hasil fragmentasi bulan Agustus 2007, Desember
2007 dan april 2008 ............................................................................
54
14 Hasil pengukwran fosfat (mdl), nimt (rndl) dan nitrat (rng) lokasi
penanaman karang lunak uji hail fra,gnentasi bulan Awstus 2007, Desember
2007 dan april2008
56
15 Berat ekstrak kasar karang lundi Sitzulnrin sp dan Loboplzytt~msp hasil
fragmentmi di kedalaman 3 dan 10 m ( X* SD) ......................... ........ .
59
16 Persentase rendernen karang lunak jenis Sirzularin sp dan Loboplzynon sp hail
rra,gnentasi buatan di kedalaman 3 dan 10 rn ( X* SD) ......... ..............
60
17 Diameter zona hambat ekstrak kasar karang lunak jenis uji h a i l fragmentasi
dan kontrol terhadap pertumbuhan bakeri E.coli ................................
62
18 Diameter zona hambat ekstrak kasar karang lunak Sinularia sp, Lobophytum
sp hasil fragmentasi dan kontrol terhadap pertumbuhan balcen S.nureu
63
19 Grafik regresi kematian A. salina (hubungan antara log konsentrasi dengan
mortalitas) terhadap ebtrak kasar karang lunak jenis Sinula~insp ......
64
20 Gra€ik kematian A. snlirta (hubungan antara log konsentrasi dengan
mortalitas) terhadap ekstrak kasar karang lunak jenis Lobophyllrm sp .
65
21 (a) Kultur A. snlinn pada media air laut steril, (b) Uji Toksisitas menggunakan
A.snlirz
66
22 Fraksinasi dengan corong (tabung) pemisah dari awal-akhir (A-C) .....
67
23 Contoh h a i l kromatografi lapis tipis (KLT) yang dipindai dengan sinar UV
pada X = 254 nm
69
24aHasil uji bioautografi fiaksi padapelarut Chlorofom : Metanol(10:l)
70
24bHasil Uji Autobiografi Fraksi pada pelarut Petroleum ether : Dietil ether (1 :1)
...........................................................................................................
25aHasil Uji Autobiografi Fraksi padapelarut Chloroform : Metanol(10:l)
70
70
25b Hasil Uji Autobiografi Fraksi pada pelarut Petroleum ether : Dietil ether (1:l)
70
26 Hasil uji bioaktivitas fiaksi (Al-A10) hasil pemumian kolom kromatografi
terhadap bakteri indikator E.coli ................ ......... .... ............................
72
27 Has11 j i bioaktivitas fralisi (BI-BIO) hail pemurnian kolom kromatograli
terhadap bakteri indikator E.coli ................................ .........................
73
28 Hasil uji bioaktivitas terhadap balteri indicator E-coli fraksi (Cl-CIO) dan
fraksi (Dl-DlO) ..................................................................................
29 Kromatogram hail KG-MS atau GC-MS fraksi &if
74
Lobophyrum sp h a i l
fragmentasi buatan di kedalaman 10 m (AS-A10) .......................... .....
75
30 Shuktur molekwl senyawa Elemol (C15H260) dengan rincian padanan nama
lainnya menurut database Wiley 7n.l ..................................................
77
31 Shuhmr molekul senyawa I-Naphthalenemethanol, decahydro-5-(5-hydros!;-
3-methyl-3-pentenyl)-1,4a-dimethyl-6-methylene-,
[IS-
[I.alpha.,4a.alpha,5.alpha.(E),Sa.beta]]-$$ Labda-S(20),13-diene-15,19-diol;
(E)- $$ (+)-Agathadiol $$ Agathadienediol $$ Agathadiol $$ Agathadiol
78
(C20H340) menunlt database Wiley 7
32 Kromatogram hasil KG-MS atau GC-MS fraksi aktif Lobophjdurn sp hasil
fragmentasi buatan di kedalaman 3 m (B2-B3)....................................
79
33 Stmkur molekul senyawa 2,4-diisopropenyl-l-methyl-l-vynyl-cyclohesane
(C15H24) menurut database Wiley 7n.
80
34 Kromatogram hasil KG-MS atau GC-MS fraksi aktif Lobophyru~nsp hasil
fragmentasi buatan di kedalaman 3 m (Cl-C2) ....................................
80
35 Stmhmr molekul senyawa 1, 2-Benzenedicarbosylic acid, diiooctyl ester
(C24H3804) menurut database Wiley 7n.
81
36 Kromatograrn hasil KG-MS atau GC-MS fiaksi aktif Lobophyhlm sp hasil
fraggentasi buatan di kedalaman 3 m (Cl-C2) ....................................
82
37 S p e L m massa senyawa Elemol (Cl5H260) ....................................
107
38 SpeL;trum massa senyawa 2.alpha-hydroxy-3-trans,3-methyleneoxy-6,6-
dimethylbicyclo(3.1.l)heptane $$ Spiro[bicyclo[3.1.1]heptane-3,2'-osir~-2ol,6,6-dimethyl (1.alpha,2.beta,3.alpha,j.alpha.)-(CAS) ..................
108
39 SpeLtrum massa senyawa l-Naphthalenemethanol, decahydro-5-(5-hydroxy-
3-methyl-3-pentenyl)-1,4a-dimeth>~1-6-methylene-,
[IS-
[l.aIpha.,4a.alpha,5.alpha.(E),8abeta]]-$$ Labda-8(20),13-diene-15,19-dial:
(E)- $$ (+)-Agathadiol $$ Agathadienediol $$ Agathadiol $$ Agathadio
40 Spekctrum
massa
ylox~)bicyclo[2.2.llheptan
senj7a\va
108
2-endo-(l-osacyclohes-2110
41 Spektrum massa senyawa 2,4-diisopropenyl-l-methyl-1
-vinyl-cyclohexanel 11
PENDAHULUAN
Latar Belakang
I
Loboplzytz~msp HASIL FRAGMENTASI DI PERAIRAN
PULAU PRAMUKA, KEPULAUAN SERIBU, JAKARTA
IIS TRIYULIANTI
SEKOLAH PASCASARJANA
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
2009
PERNYATAAN MENGENAI TESIS DAN
SUMBER INFORMASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa tesis dengan judul Bioaktivitas Ekstrak
Karang Lunak Sinularia sp dan Lobophytum sp Hasil Fragmentasi Buatan di
Kedalaman 3m dan 10m adalah karya saya dengan arahan dari komisi pembimbing
dan belum pemah diajukan dalam bentuk apapun kepada perguman tinggi manapun.
Sumber infonnasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun yang
tidak diterbirkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam
Daftar Pustaka dibagian akhir tesis ini.
Bogor, Februari 2009
Iis Triyulianti
NIM C551060071
ABSTRACT
IIS TRKULIANTI. Bioactivity of Extracts So$ Corals Sinztlaria sp and
Lobophytzm?sp froni FrapnentatioT~sYields at 3 and 10 Mepes Depth at P~anizrka
Islai~d,Thaozrsand Island, Jakarta. Under direction of NEVIATY P . ZAMANI and
HEFM EFFENDI.
Soft c o ~ a lis ktlowr7 as one of nzari~7einvertebrates producing secondary
metabolite conlpolinds which have biological activities (bioactii~e). The study was
ait~ledto investigate the bioactive conpozind of Si~zlulariasp a17d Lobophytztnz sp froni
artz$cialfr.ngme?ltations at 3 and I 0 meters depth. It was conducted in Pramzika
Islmld waters of Kepilauan Seribu. The isolation of bioactive compound process
involved extraction,j?aciionatiorz and chron~atographicpurz&utioil. Ident1~7catio~1
of
the active isolate was conducted by Gas Chrontatography-Mass spectroscopy m7d
then pz~tside by side with Wiley 7~1.1
database. Disc dfisiotz method was condztcted
to obsewed inhibition activivfrom seco~zdarymetabolites compounds of marine so$
coral Sinularia sp. and Lobophytum sp. Crude exhacts inhibition activity of
Sinirlaria sp on Escherichia coli and Staphylococctrs aztrezrs was lesser than
Lobophytidm sp. 77ze highest inhibition on bacterial growth ivas exhibited by so$
coral crztde extracts which came froni frapneiltation at 10 rnehes depth from
Lobophytzrm sp i.e. 7,8 mm. The 21-h LCjo of so$ coral extrncts for Artemia sali~ia
were 15,146ppn1 (Sitrzrlaria sp} mrd 201,93ppm (Lobophytunl sp}.
Keywords: Bioactive conipoztnd, Sirzularia sp, Lobophyhra~sp, Inhibitation, Pramuka
Island
Hasil pengukuran parameter fisika-kimia lingkungan pada tiga bulan
penvakilan musim di dua kedalaman lokasi penanaman karang lunak hasil
fragmentasi buatan (Siiiularia sp dan Lobophytztni sp) menunjukkan bahwa kondisi
lingkungan perairan dari parameter yang temkur masih berada pada kisaran ambang
batas baha mutu air laut yany telah diputuskan olelt Kettlentriart Lingh~~ngan
Hidup
kehiclupan biota. Uji statistik tlilakukan denyan
No.5 I Tah~in2004 untuk menduk~~ny
menggunakan analisis sidik ragam (ANOVA) terhadap hasil pengukuran parameter
fisika-kimia lingkungan lokasi penanaman karang lunak hasil fragmentasi buatan
tidak berbeda nyata (PXl.05) baik antar musim maupun antar dua kedalaman lokasi
penanaman.
Senyawa bioaktif yang diperoleh dari ekstrak karang lunak Lobophytzm sp di
kedalaman 3 dan I0 meter hasil fragmentasi buatan mempunyai kekuatan sedang dan
ekstrak kasar Simlarin sp berkekuatan lemah. Perbedaan bioaktifitas pada dua
kedalaman yang diujikan diduga karena produksi senyawa bioaktif yang dihasilkan
sebagai hasil samping kegiatan metabolisme sekunder dipengamhi oleh lingkungan
laut sekitarnya.
Nilai LC50 24 jam yang dihasilkan dari perhitungan untuk karang lunak jenis
Sinzrlaria sp terpilih (kedalaman 10 m) adalah sebesar201,93 ppm yang masuk dalam
kategori toksik dan nilai LC50 untuk karang lunak jenis Lobophytum sp terpilih adalah
sebesar 15,146 ppm dan masuk ke dalam kategori sangat toksik
Noda yang ditunjukkan pada Kromatogafi Lapis Tipis (KLT)
mengindikasikan keberadaan senyawa bioaktif yang ditunjukkan oleh nilai Rf
(Retardaction finctioiz). Nilai Rf yang diperoleh dari fraksi Lobophytz~msp hasil
fragmentasi di kedalaman 3 m adalah 0,33; 0,67; 0,73 dan untuk fraksi jenis yang
sama di kedalaman 10 m adalah 0,46; 0,66; 0,90. Fraksi Sinularia sp hasil
fragmentasi di kedua kedalaman tidak menunjukkan keberadaan spot atau senyawa
yang terikat pada fase diam silica gel. Untuk menguji bioaktifitas eaksi hasil
pemurnian kolom kromatografi terhadap bakteri Escherichia coli dan
Stnphytlococcits nzrrezts maka dilakukan uji bioautografi. Fraksi yang diindikasikan
terdapat senyawa bioal;tif menunjukkan keaktifannya dalam menghambat bakteri
E.coli namun tidak terhadap S.azrreus.
Identifikasi awal senyawa aktif secara biologi berdasarkan berat molekul
senyawa hasil analisis kromatogafi gas dibandingkan dengan pustaka kimia pada
data base Wiley 711.1. Berdasarkan pola fragmentasi ion ditunjukkan oleh keberadaan
satu puncak dominan pada fraksi aktif Lobophytuni sp hasil fragmentasi di kedalaman
3 m terjadi pada waktu retensi 5.55 dengan persentasi area 36.71% yang diduga
adalah senyawa 2-endo-(l-oxacyclohex-2-yloxy)bicyclo[2.2.l]heptane dan untuk
fraksi aktif karang lunak jenis sama di kedalaman 10 m terjadi pada waktu retensi
5.52 dengat] persentasi area 13.83 dan diduya scbagai senyawa .ALPHA.-HYDROX-Y-i'I~Kr~US.i-.LlETIIYI.EI\~OXY-6.6-DII~lET~IYI.BICYCLO(i.
I. Ij1-IEPTW1E
0Hak Cipta milik P B , tahun 2009
Hak Cipta dilindungi Undang-Undang
Dilarang mengutip sebagian atau selzrruh karya tzrlis ini tanpa mencantumkan atau
tnenyebzrtkan sumbernyn. Pengutipatr hanya zintuk kepentingml pendidihl,
penelitimz, penzrlisan karya ilmiah, penyrsrinan laporan, penulisan kritik, atazr
titijaumi slratzr maslah; dan pe?zgutipan iersebut tidak merugihn kepentitzgan yatg
wajar IPB.
Dilarm~gn1e17gumur?tkan&I
rnen7perbm~yaksebagian ntazr selziruh Kaiya tzrlis
dalam bentzrk apa putt tanpa izin IPB
HALAMAN PENGESAHAN
Judul Tesis
:
Nama Mahasiswa
NIM
Program Studi
:
:
:
Bioaktivitas Ekstrak Karang Lunak Sinularia sp dan
Lobophyfz~nz sp Hasil Fragmentasi di Perairan Pulau
Pramuka, Kepulauan Seribu, Jakarta
Iis Triyulianti
C551060071
Ilmu Kelautan
Disetujui
Komisi Pembimbing
I
Dr. Ir. Neviaty Putri Zamani. M.Sc
Ketua
~r.rkr.natIr. Hehi Effendi M.Phil
Anggota
Diketahui
Ketua Program Studi
Ilmu Kelautan
Tanggal Ujian : 6 Maret 2009
Tanggal Lulus :
I 3 hi;i;Y
2009
viii
PRAKATA
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala karunia-Nya
sehingga karya ilmiah ini berhasil diselesaikan. Tema yang dipilih dalam penelitian
yang dilaksanakan pada bulan Juni 2007 - Desember 2008 ialah senyawa bioaktif
karang lunak hasil fragmentasi dengan judul Bioaktivitas Ekstrak Karang Lunak
Siiiularia sp dan Lobophytlrn? sp Hasil Fragmentasi pada Kedalaman 3 m dan 10 m di
Perairan Pulau Pramuka, Kepulauan Seribu, Jakarta.
Tesis ini berisikan tentang penapisan senyawa bioaktif dari karang lunak hasil
fragmentasi pada kedalaman berbeda untuk kemudian dilihat potensi bioaktivitasnya
dan mencoba menelusuri jenis senyawanya dengan melakukan isolasi dan
identifikasi. Hasil dari penelitian ini diharapkan dapat menambah khasanah ilmu
pengetahuan mengenai bahan-bahan alami dari organisme laut serta
merekomendasikan upaya perbanyakkan melalui fiagmentasi untuk kepentingan
kegiatan penelitian dan konservasi.
Kendala dan permasalahan tidak luput dari kegiatan ini mulai dari awal
hingga akhir pelaksanaamya, sehingga diiasa tidak munglun dapat terselesaikan
tanpa bantuan, dukungan, dorongan dan kerjasama dari semua pihak yang telah
membantu hingga usainya kegiatan penelitian.
Terima kasih penulis ucapkan kepada ibu Dr. Ir. Neviaty P. Zamani, M.Sc dan
bapak Dr. Ir. Hefni Effendi, M.Phi1 selaku pembimbing, serta bapak Prof. Dr. Ir. Dedi
Soedharma, DEA, ibu Mukzijat Kawaroe, M.Si d m seluruh peneliti "Kajian Bioaktif
Karang Lunak (0ctocorallia:Alcyonacea) Sinzrlnria sp, Lobophytzim sp dan
Snrcophyton sp Hasil Fragmentasi Buatan sebagai Penyedia Bahan Obat-Obatan dari
Laut" karena telah memberikan kesempatan kepada penulis untuk mengikuti kegiatan
pe~elitianini. Ungkapan terima kasih yang tak terhingga juga penulis sampaikan
untuk bapak, ibu, kakakku tercinta mba Nining dan mas Wawan serta dua adikku Ade
dan Teguh atas doa dan kasih sayangnya yang tidak putus-putusnya hingga penulis
dapat menyelesaikan tesis ini. Sentuhan akhir dari prakata ini, penulis tujukan
kepada seluruh teman-teman dan staf PS. IKL -Dept ITK-IPB, terima kasih atas
jalinan persahabatan dalam suasana kebersamaan dan kekeluargaan yang terus terbina
d m terjaga hingga penyelesaian tesis ini.
Akhir kata, semoga tesis ini dapat berguna dalam rangka pengembangan ilmu
dan pengetahuan khususnya di bidang bahan alami dari laut (Mnrine Natzrrnl
Product).
Bogor, Februari 2009
Iis Triyulianti
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Jakarta pada Tanggal 3 1 Mei 1976 dari ayah Kusnun dan
ibu Sudaningsih. Penulis merupakan putri ketlga dari lima bersaudara.
Tahun 1994 penulis lulus dari SMA Negeri 39 Jakarta dan pada tahun yang
sama lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB. Penulis
memilih Program Studi Manajemen Sumberdaya Perairan, Jurusan Manajemen
Sumberdaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan dan lulus tahun 1999.
Selama mengikuti perkuliahan, penulis aktif menjadi asisten mata kuliah
Avertebrata Air, Ikhtiologi dan Ekologi Perairan selama dua periode yaitu tahun
ajaran 199611997 dan 199711998. Asisten mata kuliah Limnologi tahun ajaran
199711998 , Bioteknologi Perairan tahun ajaran 199811999, Biologi Laut tahun
ajaran 199711998, Fisiologi Hewan Air tahun ajaran 199711998. Selama menjadi
mahasiswa, penulis aktif di Himpunan Mahasiswa Manajemen Sumberdaya Perairan
(HIMASPER) pada Biro Penelusuran Literatur (BPL-HIMASPER).
Tahun 2006 penulis melanjutkan pendidikan Strata dua (S2) di Institut
Pertanian Bogor pada Program Studi Ilmu Kelautan (PS IKL) minat Biologi Laut
dengan biaya sendiii. Tahun 2007 penulis menerima beasiswa BPPS (on going) dari
Direktorat Pendidikan Tinggi, Departemen Pendidikan Nasional untuk satu tahun atas
rekomendasi dari Universitas Muhammadiyah Sukabumi.
Selama menjadi
mahasiswa SPs P B di PS ML, penulis aktif sebagai bendahara Wahana Interaksi
Mahasiswa Pasca Sarjana IKL (WATERMASS IKL)tahun 200612007.
UCAPAN TERIMA KASIH
Tesis ini dapat terselesaikan dengan adanya banyak dukungan dan bantuan
dari berhagai pihak. Untuk itu penulis mengucapkan banyak terima kasih kepada :
1. Direktorat Pendidikan Tinggi (Dirjen Dikti) karena penelitian ini didanai oleh
Program Hibah Bersaing X V .
2. Seluruh tim peneliti "Kajian Bioaktif Karang Lunak (0ctocora1lia:Alcyonacea)
Gorgonian sp, Lobophyizrm sp, Sarcophyfonsp Hasil Fragmentasi Buatan Sebagai
Penyedia Bahan Obat-obatan dari Luat" yang diketuai oleh Dr. Ir. Hefni Effendi,
M.Phil serta Prof Dr. Dedi Soedharma, DEA dan Ir. Mukzijat Kawaroe, M.Si
selaku anggota peneliti.
3. Dr. Ir. Neviaty P. Zamani, M.SC dan bapak Dr. Ir. Hefni Effendi, M.Phi1 selaku
ketua dan anggota komisi pembimbing,
4.
Seluruh rekan-rekan yang terkait dengan penelitian Program Hibah Bersaing XV
Laboratorium Biologi Laut, Departemen Ilmu dan Teknologi Kelautan, Institut
Pertanian Bogor (Dondi, Windika, Tia, Alin, Patrick, bapak Beginner, bapak
Supamo, mba Citra dan mba Meutia).
5. Tony Yusman B.Sc heserta selumf staf Laboratorium Produktivitas dan
Lingkungan Perairan Dept. MSP-IPR (mba Anna, bu Wulan, kak Heri, pa Yayat,
Budi dan Aan) yang telah banyak memberikan arahan serta penyediaan fasilitas
laboratorium selama penelitian.
6. Ibu Emma dan seluruh staf Laboratorium Mikrobiologi, Departemen Teknologi
Hasil Perikanan, Institut Pertanian Bogor.
7. Bapak Jaswanto dan seluruh staf PUSLABFOR-MABES POLRI.
8. Rekan-rekan IKL'06 yang sangat saya sayangi (bang Rico, Dondi, Ojon, mba
Ema, Ria, Mila, Ratih, Alul, Chatrin, pa Faisal, Degen, Ira, Mukti dan pa
Ngadiran)
9. Program Mitra Bahari, Departemen Kelautan dan Perikanan Repuhlik Indonesia
karena telah membantu penulis dalam penyelesaian tugas ini melalui beasiswa
COREMAP, semoga tulisan ini dapat bermanfaat bagi pengembangan program di
instansi ini.
DAFTAR IS1
Halaman
DAFTAR TABEL
xw
DAFTAR GAMBAR ...................... .................. .....................................
DAFTAR LAMPIRAN
xviii
ssi
PENDAHULUAN
Latar Belakang
1
Pemmusan Masalah
3
Hipotesis Penel
5
Tujuan dan Manfaat Penelitian
5
Kerangka Penelitian
7
TlNJAUAN PUSTAKA
Karang Lunak (Soft Coral)
7
Karang Lunak sebagai Organisme Uji
8
Klasfikas
8
Morfologi dan Anatomi Karang Lunak sebagai Organisme Uji .....
9
Senyawa Bioaktif Karang Luna
12
Senyam Terpenoid Karang Lunak
14
Ekstraksi dan Fraksinasi......................................................................
18
Kromatogr
20
Kromatografi Lapis Tipis ........................ .................. ...................
21
Kromatograf~Kolom
21
Kromatografi Lapis Gas ..............................................................
22
Altivitas Bakteri
..
. .
UJI Toksls~tas .................... .............................................
22
.............. .....
Al.temin snliiza
24
26
F&or LingkunganMabitat Penanaman Karang lurid Sit7ulo~tnsp d m
Lobopkj~tumsp terhadap Produksi Senya~vaBioak3if Karang Lunak
27
RlETODE PENELITIAN
IVahIu dan Tempat Penelitian
30
Bahan dan Alat
30
...
Xlll
Metoda Penelitian
33
35
...
35
Fraksinasi Karang Lunak Uji (Si~tularinsp dan Lobophymn sp) ...
38
Ekstraksi Karang Lunak Uji (Sinulnria sp dan Lobophj)rum sp)
Identifikasi Senyawa Bioktif
Smpel
Hasil
Fraksinasi
dengan
Kromatografi Lapis Tpis (Thin Lnyer Chrommtograpltj)).......... .....
Pemurnian Senyawa Bioaktif
dengan Kromatografi Kolom
Kromatograti Gas - Spektroskopi Massa (KG-MS) ......... ......... .....
.. .
.
.
Uji Bioalit~vitas...................................................................................
40
dan
40
43
Pembuatan Media Agar
43
Isolasi dan Penyegaran Bakteri .............. .....................................
43
Uji Bioal;tivitas terhadap Balcteri Patogen ....................................
44
Analisa Alrtivitas Antimihob Senyawa Hasil Fraksinasi (Bioautograii)
44
46
47
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
48
Koleksi Karang Lunak Uj'
48
Kondisi Linghngan Sebagai Habitat Karang Lunak Hasil
Fragmentasi
49
Parameter Fisika Lingkungan Perairan ............. ............. ..... .....
50
Parameter Kimia Lingkungan Perairan ................. ...................
53
Ekstraksi dan Bioaktivitas Senyawa Ekstrak Kasar
Karang Lunak Sinularia sp dan Lobophytujn sp.. ..........................
Ekstraksi dan Maseras'
58
58
Bioaktivitas Senyawa Ekstrak Kasar Karang Lunak
Sinulnria sp dan Loboph)~tumsp Hasil Fragmentasi ............ .....
61
Uji Brimze Shrimp Lerlrnl Toxicit?, (BSLT) Senyawa Ekstrak Kasar
Karang Lunak Sinulc~riasp dan Lobophytuin Hasil Fragmentasi
63
Fraksinasi Kromatogr&~ Lapis Tipis (KLT) dan Deteksi Aktivitas
Antibakteri dengan Bioautografi
66
xiv
Fraksinasi
dengan
Kromatografi
Kolom
dan
Deteksi
Alctivitas
Antimikroba dengan Bioautografi
71
sy
Identifikasi Fraksi Aktif Karang Lunak Lobophyruin sp dan Sit~trlnric~
Hasil Fragmentasi di Kedalaman 3 & 10 m ..................................
Pembahas
74
83
Kondisi Lingkungan Sebagai Habitat Karang Lunak Hasil
Fragmentasi
83
Parameter Fisika Lingkungan
84
Parameter Kimia Lingkungan
88
Ekstraksi dan Bioaktivitas Senyawa Ekstrak Kasar Karang
Lunak Sinularia sp d m Lobophytum sp
Ekstraksi d m Maserasi
91
91
Bioalctivitas Senyawa Ekstrak Kasar Karang Lunak
Sinularia sp d m Lobophytum sp Hasil Fragmentasi.................
94
Uji Brine Shrimp Lethal Toxicity (BSLT) Senyawa Ekstrak Kasar
Karang Lunak Sit~ulariasp dan Lobophytum H a i l Fragmentasi
103
Fraksinasi Kromatograli Lapis Tipis (KLT) dan Deteksi
Aktivitas Antib&eri dengan Bioautografi .... ........................... .....
104
Fraksinasi dengan Kromatografi Kolom dan Deteksi
&ivitas Antimikroba dengan Bioautograi? ..................................
105
Identifikasi Fraksi Alitif Karang Lunak Lobop~~y;lum
sp dan
Si~zz~lnria
sp Hasil Fragmentasi di Kedalarnan 3 & 10 m ...............
106
SIMPULAN DAN SARAN
113
113
DAFTAR PUSTA
115
122
DAFTAR TABEL
Halaman
1. Jenis-jenis senyawa terpen dari beberapa karang lunak ......................
17
2. Beberapa pelarut organik dan sifat fisiknya
19
3. Kategon toksisitas bah
25
4. Alat dan bahan yang digunakan dalam fragmentasi karang lunak ......
30
5. Alat dan bahan kegiatan pengukuran parameter lingkrungan ................
31
6. Alat dan bahan kegiatan ekstraksi dan uji bioalirtivitas .........................
32
7. Hasil pengukuran parameter lingAwgadokasi penanaman karang lunak
Sinularia sp dan Lobophytum sp hasil fiagmentasi buatan ...................
50
8. Nilai rata-rata berat ekstrak kasar serta nilai rendemen (b/v) karang lunak
Sinularia sp dan Lobophj~tumsp di kedalaman 3 dan 10 m ..................
58
9. Nilai LC50 (ppm) ekstrak karang lunak Sinularia sp dan Lobophytum sp hasil
fragmentasi di kedalaman 10 m
64
10. Nilai Rf fraksi organik ekstrak kasar senyawa karang lunak uji ..........
68
11. Fraksi yang terbentuk sebagai hasil pemurnian Colunzn Chromatography
71
ekstrak kasar karang lunak uji
12. Kelompok senyawa hail identifikasi dengan kromatografi gas-speA*oskopi
massa menggunakan database Wiley 7 n l untuk kaksi &if Lobophyrum sp
kedalaman 10 m
76
13. Kelompok senyawa hasil identifikasi dengan kromatografi gas-speA~roskopi
massa menggunakan database Wiley 7 n l untuk fraksi aktif Lobophytunz sp
kedalaman 3
79
14. f(elompok senyawa hasil identifikasi dengan kromatografi gas-speA.oskopi
massa menggunakan database Wiley 7n.l untuk fraksi aktif Sintrlnria sp
kedalaman 10 m .... .............. ........................... ......... ......... ..... ......... .....
82
15. Matriks hasil analisa bioalctivitas ekstrak karang lunak Sir?ulmin sp d m
Lobophyrum sp hasil fragmentasi buatan pada kedalaman 3 dan 10 m di
perairan Pulau Prarnuka, Kepulauan Senbu, Jakarta ..... ..............
.... .....
91
xvi
DAFTAR GAMBAR
Halaman
1. Diagram alir berfikir (kerangka pernikiran) .......................................
6
2. Polip Octocorallia dengan 8 buah tentakel pinnate (Wagener 2000) ....
7
3. Morfolo@ Octocorallia (Bayer, 1956)
10
4. Lokasi penanaman fiagmen karang lunak Sitzularin sp dan Lobophytum sp di
gosong Pulau Pramuka, Kepulauan Seribu, Jakarta ................... ..........
31
5. Rak fragmentasi (A), Substrat (B) dan Rak dengan substrat dan fraggen pada
lokasi penanaman di gosong Pulau Pramuka (C) ................................
34
6. Diagram alur ekstraksi karang lunak uji ............ ................................
37
7. Diagram alir proses Fraksinasi
39
8 Diagram alir proses fraksinasi GC-MS
42
9 Diagram alir dari proses pengujian bioaktivitas ekstrak terhadap bakteri
patoge
45
10 Diagam alir uji toksisitas dengan A. salina (Mclaughlin 1998) .. ..... .....
46
I IaSirzulnrin sp di bawah air (A) dan diatas air (B) ...................................
48
I l b Sirz~,rlnrinsp di bawah air (A) dan diatas air (B) ..................................
49
12 Hasil pengukuran suhu
(OC):
kecepatan arus (ddet) dan kecerahan (m)
perairan lokasi penanaman karang lunak uji hasil fragmentasi bulan Agustus
2007, Desernber 2007 dan April 2008
51
13 Hasil pengukuran salinitas (psu), pH, Oksigen terlarut ( m g ) lokasi
penanaman karang lunak uji hasil fragmentasi bulan Agustus 2007, Desember
2007 dan april 2008 ............................................................................
54
14 Hasil pengukwran fosfat (mdl), nimt (rndl) dan nitrat (rng) lokasi
penanaman karang lunak uji hail fra,gnentasi bulan Awstus 2007, Desember
2007 dan april2008
56
15 Berat ekstrak kasar karang lundi Sitzulnrin sp dan Loboplzytt~msp hasil
fragmentmi di kedalaman 3 dan 10 m ( X* SD) ......................... ........ .
59
16 Persentase rendernen karang lunak jenis Sirzularin sp dan Loboplzynon sp hail
rra,gnentasi buatan di kedalaman 3 dan 10 rn ( X* SD) ......... ..............
60
17 Diameter zona hambat ekstrak kasar karang lunak jenis uji h a i l fragmentasi
dan kontrol terhadap pertumbuhan bakeri E.coli ................................
62
18 Diameter zona hambat ekstrak kasar karang lunak Sinularia sp, Lobophytum
sp hasil fragmentasi dan kontrol terhadap pertumbuhan balcen S.nureu
63
19 Grafik regresi kematian A. salina (hubungan antara log konsentrasi dengan
mortalitas) terhadap ebtrak kasar karang lunak jenis Sinula~insp ......
64
20 Gra€ik kematian A. snlirta (hubungan antara log konsentrasi dengan
mortalitas) terhadap ekstrak kasar karang lunak jenis Lobophyllrm sp .
65
21 (a) Kultur A. snlinn pada media air laut steril, (b) Uji Toksisitas menggunakan
A.snlirz
66
22 Fraksinasi dengan corong (tabung) pemisah dari awal-akhir (A-C) .....
67
23 Contoh h a i l kromatografi lapis tipis (KLT) yang dipindai dengan sinar UV
pada X = 254 nm
69
24aHasil uji bioautografi fiaksi padapelarut Chlorofom : Metanol(10:l)
70
24bHasil Uji Autobiografi Fraksi pada pelarut Petroleum ether : Dietil ether (1 :1)
...........................................................................................................
25aHasil Uji Autobiografi Fraksi padapelarut Chloroform : Metanol(10:l)
70
70
25b Hasil Uji Autobiografi Fraksi pada pelarut Petroleum ether : Dietil ether (1:l)
70
26 Hasil uji bioaktivitas fiaksi (Al-A10) hasil pemumian kolom kromatografi
terhadap bakteri indikator E.coli ................ ......... .... ............................
72
27 Has11 j i bioaktivitas fralisi (BI-BIO) hail pemurnian kolom kromatograli
terhadap bakteri indikator E.coli ................................ .........................
73
28 Hasil uji bioaktivitas terhadap balteri indicator E-coli fraksi (Cl-CIO) dan
fraksi (Dl-DlO) ..................................................................................
29 Kromatogram hail KG-MS atau GC-MS fraksi &if
74
Lobophyrum sp h a i l
fragmentasi buatan di kedalaman 10 m (AS-A10) .......................... .....
75
30 Shuktur molekwl senyawa Elemol (C15H260) dengan rincian padanan nama
lainnya menurut database Wiley 7n.l ..................................................
77
31 Shuhmr molekul senyawa I-Naphthalenemethanol, decahydro-5-(5-hydros!;-
3-methyl-3-pentenyl)-1,4a-dimethyl-6-methylene-,
[IS-
[I.alpha.,4a.alpha,5.alpha.(E),Sa.beta]]-$$ Labda-S(20),13-diene-15,19-diol;
(E)- $$ (+)-Agathadiol $$ Agathadienediol $$ Agathadiol $$ Agathadiol
78
(C20H340) menunlt database Wiley 7
32 Kromatogram hasil KG-MS atau GC-MS fraksi aktif Lobophjdurn sp hasil
fragmentasi buatan di kedalaman 3 m (B2-B3)....................................
79
33 Stmkur molekul senyawa 2,4-diisopropenyl-l-methyl-l-vynyl-cyclohesane
(C15H24) menurut database Wiley 7n.
80
34 Kromatogram hasil KG-MS atau GC-MS fraksi aktif Lobophyru~nsp hasil
fragmentasi buatan di kedalaman 3 m (Cl-C2) ....................................
80
35 Stmhmr molekul senyawa 1, 2-Benzenedicarbosylic acid, diiooctyl ester
(C24H3804) menurut database Wiley 7n.
81
36 Kromatograrn hasil KG-MS atau GC-MS fiaksi aktif Lobophyhlm sp hasil
fraggentasi buatan di kedalaman 3 m (Cl-C2) ....................................
82
37 S p e L m massa senyawa Elemol (Cl5H260) ....................................
107
38 SpeL;trum massa senyawa 2.alpha-hydroxy-3-trans,3-methyleneoxy-6,6-
dimethylbicyclo(3.1.l)heptane $$ Spiro[bicyclo[3.1.1]heptane-3,2'-osir~-2ol,6,6-dimethyl (1.alpha,2.beta,3.alpha,j.alpha.)-(CAS) ..................
108
39 SpeLtrum massa senyawa l-Naphthalenemethanol, decahydro-5-(5-hydroxy-
3-methyl-3-pentenyl)-1,4a-dimeth>~1-6-methylene-,
[IS-
[l.aIpha.,4a.alpha,5.alpha.(E),8abeta]]-$$ Labda-8(20),13-diene-15,19-dial:
(E)- $$ (+)-Agathadiol $$ Agathadienediol $$ Agathadiol $$ Agathadio
40 Spekctrum
massa
ylox~)bicyclo[2.2.llheptan
senj7a\va
108
2-endo-(l-osacyclohes-2110
41 Spektrum massa senyawa 2,4-diisopropenyl-l-methyl-1
-vinyl-cyclohexanel 11
PENDAHULUAN
Latar Belakang
I