sedangkan pada efisiensi perkecambahan embrio somatik primer hanya 84.0. Hal serupa pernah dilaporkan Sukmadjaja 2005 yang mendapatkan embrio
somatik sekunder dihasilkan relatif sama dengan embrio somatik primer pada media dengan kandungan GA
3
pada cendana
9. Aklimatisasi
Tahapan akhir dari perbanyakan tanaman dengan teknik kultur jaringan adalah aklimatisasi planlet. Akllimatisasi merupakan masa penyesuaian tanaman
in vitro yang akan dipindah ke lapang. Aklimatisasi dilakukan dengan
memindahkan planlet ke media aklimatisasi dengan intensitas cahaya rendah dan kelembaban nisbi tinggi, kemudian secara berangsur-angsur kelembabannya
diturunkan dan intensitas cahayanya dinaikkan Yusnita 2003. Tahap ini merupakan tahap yang kritis karena kondisi iklim di rumah kaca atau rumah
plastik dan di lapangan sangat berbeda dengan kondisi di dalam botol kultur. Tabel 8. Pengaruh aklimatisasi pada embrio somatik 4 MST
Kondisi ES yang diaklimatisasi
Jumlah ES yang hidup
Jumlah embrio somatik
2 MST 3 MST
4 MST Efisiensi
aklimatisasi
ES tanpa akar ES berakar
20 20
14 19
8 19
1 18
5 90
Keterangan : Media aklimatisasi yang digunakan adalah campuran humus dan tanah dengan penambahaan vitamin morel wetmore.
Dari hasil percobaan didapatkan informasi bahwa ES yang berakar dapat bertahan hidup sedangkan ES tanpa akar tidak dapat bertahan hidup Tabel 8.
Gambar 15. Fase pendewasaan embrio somatik sekunder dengan penambahan 2.5 mgl ABA A = fase globular, B = fase
jantung
, C = fase terpedo, D = fase kotiledon
A B
D C
Tabel 8 memperlihatkan bahwa efisiensi aklimatisasi dari planlet ES yang berakar sebesar 90. Hal ini sangat berbeda jauh terhadap ES tanpa akar diamana
efisiensinya hanya sebesar 5. Tebel 9 menunjukan perbedaan yang signifikan terjadi setiap minggu pada planlet
embrio somatik yang hidup. Planlet ES tanpa akar dan planlet ES berakar pada minggu pertama setelah aklimatisasi data tidak ditampilakan semuanya masih
bertahan hidup 100. Planlet ES yang mati pada minggu ke 2 mulai terlihat terutama pada planlet ES yang tidak memiliki akar. Hal tersebut berlangsung terus
menerus hingga minggu ke 4 hanya satu planlet ES yang bertahan hidup sedangkan pada ES yang berakar mampu bertahan hidup sebanyak 18 planlet ES.
Keberhasilan aklimatisasi ES tidak terlepas dari jumlah akar yang terbentuk pada saat induksi perakaran. Semakin banyak akar yang terbentuk
maka akan semakin besar peluang ES bertahan hidup ketika diaklimatisasi. ES yang mampu bertahan hidup ketika diaklimatisasi memiliki warna yang cerah dan
segar Gambar 16A, dan 16B sedangkan ES tanpa akar umumnya batang dan daun berwarna kuning dan layu ketika diaklimatisasi Gambar 16C dan 16D,
Akibatnya daun dan batang menjadi transparan, berwarna hijau muda hingga pucat dengan kandungan klorofil yang rendah Olmos Hellin 1998.
Tingginya efisiensi aklimatisasi ES yang berakar dikarenakan kondisi awal ES. Hal ini didukung oleh Rohayati dan Marlina 2009 yang menyatakan
keberhasilan aklimatisasi sangat tergantung dari kondisi awal planlet. Pertumbuhan ES yang diaklimatisasi akan semakin optimum sejalan dengan
berkembangnya akar. Semakin berkembangnya akar maka akan semakin optimum pertumbuhan tanaman tersebut Gambar 16E sedangkan planlet ES tanpa akar
akan mengalami kematian karena planlet ES tanpa akar tidak sanggup membentuk akar Gambar 16F. akar pada kondisini ini akan lebih aktif dalam menyerap hara
pada media tanam, hal tersebut terbukti dengan bertambahnya panjang dan jumlah akar.
Gambar 16E dan 16F menunjukan bahwa pertumbuhan akar setelah aklimatisasi selama 4 minggu bertambah panjang jika dibandingkan dengan ES
sebelum diaklimatisasi Gambar 16B, 16C, dan 16D. Hal ini diduga karena keaktifan dari hormon auksin yang terdapat pada jaringan akar yang bekerja
optimal ketika ES berada didalam tanah. Dalam kondisi gelap auksin lebih aktif bekerja terutama pada akar sehingga terjadi pertambahan panjang dan jumlah dari
akar tersebut . Hal tersebut menyebabkan terjadinya pemanjangan pada akar Gambar 16E semakin banyak akar maka semakin banyak hara yang diserap
sehingga pertumbuhan ES semakin optimum.
10. Grafting
