Mempelajari Spesifisitas Alkohol, Spesifisitas Posisi, dan Pengaruh Suhu terhadap Aktivitas Lipase Ekstraselular dari Kapang Mucor javanicus M26 II/2

r'7Pt
/

J 0>
/0\1
EPELAJAR! SPESIF1SITAS ALKOH OL, SPESIF1 S ITAS POS1Sl, DAN
PENGARUH SUH UTERH ADAP AKTIVITAS LPASE EKSTRASELULAR
DAR! KAPANGMucorjnius M26

1112

Oleh
RKZA K H AFIQUDSIY A

F02498067

2003
JURUSAN TEKNOLOGl PANGAN DAN GIZl
FAKULTASTEKNOLOGl PERTANIAN
INSTITUTPERTANIANBOGOR
BOGOR


Rikza Khai Qudsiyya. F02498067. Mempelajari Spesiisitas Alkohol, Spesiisitas
Posisi, dan Pengaruh Suhu teradap Aktivitas Lipase Ekstraselular dari Kapang
Mucor javanicus M26 1112. Di bawah bimbingan Lilis Nuraida dan Ratih

Dewanti-Hariyadi.
NGSN




Enim lipase banyak in i industri pangan. Oleh ea iu,
pengetahuan tentang karakterisasi m tersbut sangat diperlukan agar kerja
enim dapat optimal. Sumber-suber lipase dapat dibagi dalam tiga kelompok,
yaitu i, n, n mikrob•. i antar. ketiga sumbr tersebut, lipase
mikrob. sang.t· potensial untuk dikmbn karena mikroba d.pat berkembang
biak dengan cepat dan ik memuuhkan tepat yng luas untuk mu, tidak
berganung pad. musim, pngonrolan faktor in lebih mudah, dan dapat
diproduksi setiap waku. Pada mikroorganisme, lipase dapat ditemukan sebagai
enzim ekstraselular dan intraselular.

Enzim lipase mengkatalisis reaksi esteriikasi dan hidrolisis. Reaksi
esteriikasi adalah reaksi pembentukan ester dari alkohol dan asam lemak. Reaksi
hidrolisis adalah reaksi pemn trigliserida menjadi m lemak bebas,
gliserida parsial (monogliserida atu digliserida), dan gliserol. Faktor-faktor yang
mempengarubi itas enim lipase adalab sebagai briknt: (a) pH; (b) suhu;
(c) konsentrasi substrat; (d) konsentrasi ; (e) kalsium; dan (I) ion besi.
Penelitian i betujuan untuk mengetahui aktivitas lipase eksraselular
Mucor javanicus M26 WZ trhad.p alkohol dengan berbagai panjang rantai
(butanol, oktanol, n lauril alkohol), posisi OH (butanol primer, butanol
sekunder, dan butanol tersier), dan jumlah OH (etilen gikol dan gliserol),
spesiisitas posisi, serta pengauh suhu terhadap aktivitas esteriikasi dan
hidrolisis. Pada penelitian im, produksi enzim lipase menggunakan media Blain el
al. (1978) yang telab dimodiikasi oleh Nuraida e/ al. (2000) dengan mengganti
glukosa dengan minyak sawit sebagai induser.
Aktivitas estriikasi dianalisis degan metode Hariyadi (I995) yang
mengukur jumlah asam lemak sebeln dan sesudah esteriikasi dengan
menggunakan metode Lowy dan Tinsley (I975). Analisis bidrolisis diukur
dengan metode Lieield et af. (1984). Analisis spesiisitas posisi dilakukan
dengan metode Sugihara e/ al. (I 994).
Aktivitas esterisi enzim lipase ekstraselular yang berasal dari Mucor

javnicus M26 1112 terhadap alkohol dengan bem.gai panjang rantai yang
meliputi butanol, okrano� dan lanril alkohol menunjukkan babwa aktivitas
esteriikasi tertingi terhadap oktanol (5.36 mmol ALB teresterkanlg
protein.menit), akan te!ap; itasny. tidak bemed. ny.ta dengan alkohol
lainnya. Pengujian terhadap alkohol dngan berbagai posisi OH, yaitu butanol
primer, butanol sekunder, dan butanol tersier. menunjukkan bahwa aktivitas
esteikasi tertinggi tetjadi pada butanol primer (6.81 mmol ALB teresterkanlg
protein.memt) dan akivitasnya berbda nyata dengan alkohol lainnya. Pengujian
terhad.p alkohol dengan bb.gai jundab OH mnunjukkan babw. aktivitas
esteriikasi terhad.p gliserol lbih tingi (6.82 mmol ALB teresterkanlg

protein.menit), akan tetapi tidak berbeda nyata dengan etilen glikol (5.84 mmol
LB teresterkanlg protein.menit).
Pengujian terhadap spesiisitas posisi menunjukkan bahwa enzim lipase
yang berasal dari Mucor jnicus M26 1112 memiliki spesiisitas posisi 1, 3 yaitu
lebih menyukai asam lemak pada posisi 1 dan 3 daripada asam lemak pada posisi

.Em i memiliki suhu optimum reaksi esteriikasi
pada 40-50°C dan reaksi hidrolisis pada suhu 40°C.


2 dalam reaksi hidrolisis.

MEMPELAJARI SPESIFISITAS ALKOHOL, SPESIFISITAS POSISI, DAN
PENGARUH SUHU TERHADAP AKTIVITAS LIPASE EKSTRASELULAR
DARl KAPANG

Mucorjavanicus M26 1112

Oleh
RKZA KHAFI QUDSIYYA
F02498067

SKRIPSI
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
pada Jurusan Teknologi Pangan dan Gizi
FakuItas Teknologi Pertanian
Institut Pertanian Bogor

2003

JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN DAN GIZI
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR

INSTITUT PERTANIAN BOGOR
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTTAN

EPELAJARl SPESFISITAS ALKOHOL, SPESFISlT AS POSISI, DAN
PENGARUH SUHU TERHADAP AKTIVITAS LPASE EKSTRASELULAR
DARl KAPANG Mucorjicus M26l1/2

SKPSI
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
SARlANA TEKNOLOGI PERTANIAN
pada Jurusan Teknologi Pangan dan ii
Fakultas Teknologi Pertanian
Institut Pertanian Bogor

Oleh

ZA KHAFI QUDSIYA
F02498067
Dilahirkan pada tangga1 2 Januari 1980 di Bogor
Tanggallulus

Dr.

. Ratih

18 Maret 2003

Ir. Lilis Nuraida, M.Sc

Dosen Pembimbing I

KATAPENGANTAR

Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT karena atas
rahmat dan iin-Nya penulis dapat menyeJesaikan skripsi


1m.

Skripsi yang

berjudul "MempeJajari Spesiisitas Alkohol, Spesiisitas Posisi, dan Pengaruh
Subu terhadap Aktivitas Lipase Ekstraselular dari Kapang Mucor javanius M26
1112" dibuat sebagai salab satu syarat untuk mmproleb gelar Sarjana Teknoloi

Pertanian pada Juusan Teknoloi Pangan dan ii, Fakultas Teknologi Pertanian,
lnstitut Pertanian Bogor.
1.

Pada kesempatan i, penulis menguapkan terima kasih kepada :

Dr. . Lis Nurida, M.Sc selaku dosen pembimbing I atas bimbingan dan
dorongan yang diberikan kepada enulis baik pada saat pelaksanaan penelitian
maupun 8aat penulisannya.

2.


Dr. Ir. Ratih Dewanti-Hariyadi, M.Sc selaku dosen pembimbing II yang telah
memberikan bimbingan dan pengarahan dalam menyelesaikan skripsi ini.

3.

Dr. If. Slamet Budijanto, M.Agr selaku dosen penguji yang telah neluangkan
waktu dan nenberikan nasukan serta saran uotuk perbaikan skripsi ini.

4.
5.
6.

Ibu, Bapak, dan Ade Fu yang selalu sabar memberikan dukungan yang tiada
terbatas.
Tim lipase (Julita dan Wiwin) atas kerja sa dan kebersamaannya.

Pak Sidik, Pak Koko, Pak Mul, Pak Rojak, Mbak i, Mas Tauik, Pak Kama,
aim.

7.


Bi

Oh,

dan

tenan-ten

lab.

mikro

PAU

atas

bantuan

dan


dukungannya pada saat penelitian.
Tenan-tenan angkatan '98 (Diini. Fanny, ia, Hertina, Ira, Isti, Mirna, Rina,
Uwi, Ruswandi, Mardiyanto, dan Sekti), LNA, Forkoners, dan ten-tenan
seperJuangan

laionya

yang

telah

neouojukkan

indahnya

ber-ukhuwah

islamiyyah.
8.


Tenan-ten Radar 6 (Rini dan Sima), Manajenen Mutu Plus (Tatiek, Heti,

dan Vania), PG 3 5 (Diah, Ristanti, Yuliawati, Siti, Yuli, Eni, Eno, NUT, ri,
Eti, Emi, dill atas keceriaan dan dukungannya.

9.

Pihak-pihak lain yang tidak bisa disebutkan satu persatu.

11

Penulis menyadari skripsi ini masih banyak kekurangannya. Oleh karena
itu, kritik dan saran perbaikan dari pembaca sangat diharapkan. Semoga skripsi ini
bermanfaat untuk kepentingan pengembangan ilmu pengetahuan.

Boger, Maret 2003
Penulis

III

DAFTAR lSI
Halaman
KATA PENGANTAR ...
DAFTARISI ....
DAFTARTABEL

.......... ........... .... ......... ........... ......

.............................

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..

DAFTARGABAR................................................................... ...............
DAFTARLAPRAN ......................... ................ ..............

VJJ

.

PENDAHULUAN

........

.

......

.

.......

v
I

.

I.

III

1

. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .. . . . . .

A. Latar Belakang .................................................................... . ..............

1

B. Tujuan Penelitian ............................................................

2

.

3

II. TINJAUAN PUSTAKA .... .............

.

A. Enzim Lipase . . ........... ........ . ...

3

.

5

B. Lipase Mikroba ...
C. Produksi Enim Lipase ............. ..........................................................

10

.

12

F. Aplikasi Lipase pada lndustri Pangan ..
G. KapangMucorjavanicus

....

.

.

.

._.....

..

.....

.

...

13

.. . .

16

III. BAHAN DAN ETODE PENELITIAN ..........

16

A. Baban dan Alat
....

B. Metode Penelitian

1.

........ 17
17

Produksi Enzim Lipase Ekstraselular .

18

2. Pengujian Spesiisitas Jenis Alkohol ..............

19

3. Pengujian Spesiisitas Posisi. ................... ..........

.

4.

Pengaruh Suhu terbadap Aktivitas Esterikasi .

....

.....................

.

C. Metode Analisis ................................................................

.

Pengukuran Konsentrasi Protein dengan Metrode Bradford .

2. Pengukuran Aktivitas Esteriikasi ...........

.

19

. .. ...... 19

5. Pengaruh Suhu terhadap Aktivitas Hidrolisis .....
1.

6
7

D. Faktor yang Mempengaruhi Aktivitas Enzim Lipase
E. Spesifisitas Lipase ...................

.

20
20
21

IV

3.

Analisis lumlah Asam Lemak

22

4.

Ekstraksi Asam Lemak Bebas . .

23

5.

Analisis sm Lemak dengan Kromatograi Gas ."

6.

Analisis ktivitas Hidrolisis

23
25

IV. HASL DANPEBAHASAN .... . ..............................
A Pengujian Spesiisitas Jenis Alkohol

...........

.

....

27

..

................. ............... .... 27

1. Aktivitas Esteriikasi terhadap Alkohol dengan Berbagai
Panjang Rantai
2.

...................................................

...... 27

.

Aktivitas Estesi terhadap Alkohol dengan Berhagai

Posisi OR

...........................................................

. .

.............. 29

3 . Aktivitas Estikasi terhadap Alkohol dengan Berhagai
Jumlah OR .........................

B . Pengujian SpesiisitasPosisi ....

"'

..

.

. ..

..

.

.

...

.

31

.. ........ ..

32

...

C. Pengaruh Suhu terhadap ktivitas Lipase Ekstraselular ................ ....
1.

Aktivitas Esteriikasi .....

2.

Aktivitas Hidrolisis .............. ..........

,' . .

.

.......

.

34

..

.

V. KESPULAN DAN �·N .....

36
39
. ...... ......... ...... 3 9

A. Kesimpulan .
B. Saran . ............. ..........

.

39
40

DAFTARPUSTAKA
LAPN . .................

.

34

.

44

v
lal