Pemanfaatan Chitosan dan Trichoderma harzianum untuk Peningkatan Mutu Benih Pinus merkusii

PEMANFAATAN CEHTOSAIY DAN Trichoderrrta
haniumm UNTUK PENINGKATAN MUTU
BENIH Pinus merkmii

PROGRAM PGSCASAR3rANA
TNS'I1'IUT PERTAMIAN B W Q R

zoo2

RAHAYU WLANDINX. P d t m Chitom d m Trihoderma harzianum
wuk Peningkatm Mutu Benih Pinus merkarssid. DEbimbing oleh Dr. Xr.
SUPRlYANTO dm Ir. I G.K, TAPA DARMA, MSc.
Di pasemian, bnih Pinus merksii sangat rentan terhmhp m g a n
Fusaritim sp. sehgai pmyehab penyakit lodoh, yang menyerang h g b &ar atau
&d
k g semi sehingga semai m j d i rebah, layu dm akhhya mi.
Patagen ini, juga mayerang bnifr di p a e m a h setelah k i h ditanam hkgga
s e m i h m w 7 minggu, se:@ga plinaungm terhadap h i h dm semai sangat
diplukan kfiususrrya
m a d e tersebut. Perlindungm t e r W p benih dapat
dW&m secara kimiawi yaitu dmgm m

m fungisicla dm W e r i s i d a
atau balun kimia b.Selain itu juga &pat d i h k i h n secara frayati, dsdnya

~~

dengan maggmahm cadawan antagonis.
Ddam pehian ini &&&an
plapisan bnih dengin mer~ggunakan
chitosan ymg be&
dari e b a k h l i t udmg dm lrersifkt nun toksik ser~zt
mnggmikan cendawan antagonis y&u Trichodermu harziunurn, Bebrapa
perlakuan pefapisan knifx ( d e ~ m
konsentrasi cbitasazx dan teknk inkuhi ymg
k r M ) d k h k a n wtuk rraexlgetahui p n g m h y a terhadap pningkatan vigor
k i h , p m u m b h m semi pinus dm p b m m p patogen ladoh,
Selmh perldum pehpisrtn benih tmyata &pat naeningkatkan kualita
knih (daya kkecmbah, kecetun&& dan k e s f : r " ~ p d atumbuh), k d t a s
semai (thggi dm dan-1
d m mnekan serangm patagen lodoh. B e r h k a n
pengujb seclua in :nitro, chitusan d q m kowntmi 2% marnpu m-ht

prtumbFmarium sp. tringga 62%, sedimgkm T. harziaraztm dapat
menghamht perturnFusarium sp. hingga 33%. Pada pngujian s e c m ex
vitro, pekpisan knih Bmgm T. kapzianztm tanpa diilcuti dengm inicubi
mmkrik:mhas1 yang paling kik.

W Y U WULANDINE. Utilization of CWosan and Trichoderma harzianurn to
Enhance S d Qu&y of Pinus merkersir'. Under the direction of Dr. lr.
SUPiZTYANTO and Ir. I G,K, TAPA DARMA, MSG.
Pinus merkzisii is m~~eptibfe
to d a q i i - o f f disease in nursery due to soilb m e pathgenic h g i (Fusarium sp.), which attacks an root and stem of seedling
and causing death. The pat'troga attacks seeds in nufsery just &er seed sowing
until 7 week-old seedlings, so that there is a need to protect the 4 s and the
seedlings from pathogenic attack during this period. Seed protection could be
done either c M c d y , i-e. by application of fungicide, bactericide and other
chemicals, or biologically, i.e. using magonistic h g i .
In this research, seeds were coated using chitasan, which is a non-toxic
compound that was extracted from shrimp shell. Additionally, Trichoderma
hamiurtm, an antagonistic fungus, were used also for coating. Six seed-coating
treatments (%om cambination of wing dfirent concentrations of chitom sand
djfferent incubation techniques) were tested to investigate their e&ts on seed

vigor e-,
s d h g growth imgrovernent and damphg-~ffsuppression,
It is found that all tested treatments improved seed quality (gemhation,
speed of gerrnination and synchranizatian of emergence), seedling quality (bight
md biomass) and damping-off suppression. Based on in vitm test, chitosan 1%
inhibited F~l~~miurn
sp. growth up to 62%, while T. hamianurn up to 33%. In ex
vitro test, it is found that seed coating with T.harziaaum without any incubation
process gave the kst result.

Dengm ini saya m e n y a h W w a tesis yang brju8ul Pemanhtan
Chitom dan Trichoderma harzianum untulc P&&t:m

Mutu B e d Pinus

merkztsii, &I& knar mempakm hasi kmya d k i d m klm p e d

dipubbikm,
Semua s m k r data dan ~onnasiymg d i g h tehh dinyatakan secwa
jelas dan dapat dipriksa kehmrmnya.

PEMANFAATAN CJEPXTOSAN DAN Trt'chodexma
kaniaptum UNTTIK PENINGUTAN MUTU
BEND3 Rnm xnexkmii

Tesis
sebagai dab satu syarat mtuk menpmleh gelar
M~tgistmSains pada
Program Studi i h u Peqetahuan Kehutanan

Judul Tesis

: PcrnanfnfaatanChitasan dan I kichderma hurztanum Untuk

Peningkatan Mutu Benik Pzntis merhxzi

Nama

: Rahayu Wulandini

NRP

: PI4500011

Program Studi

: llmu Pengetahuan Kehutaw

Dr. Ir. Supriyanto
Ketua

2 . Ketua Program Studi
Ilmu Pengetahuan Kehutanm

d&&--

Prof. Dr. fr. Cecew Kusrnana MS

Ir. I G.K. Tapa Darma. MSc
Anggota

Penulis dil&irkm di Jakarta p d a tanggal 12 Desember 1974 sebagai putri
bungsu dari E3apak Dardjak Wirdxqutra dm Ibu hsiyatun Nurwulan.

Pmdidikan sarjaaxa ditempuh di J w w m M a f f a , Hutan, F d d t a s Kehutanan
IPB, fdus pda tzlhun 1997. Pada tahun 200Q pen& mendapt kernpatan wrtuk

mlanjutkan ke program q i s t e r sains di Program Studi I
h Pengetahm
Kehut-

Program Pascmmjam IPB.

Beasiswa pdidikm pascasarjm

dipemleh dari Xndflnesia Forest Seed Project.
Penulis bekerja di Direktorat Perbedm
J d d R

e

T~ixtaman Hutan,

Dkektomt

~ Laban
~
idm Perhutanan SosS, Depmkemen Kchutanan

Rqublik JnBomsirt sejak tahun 1998 di Jakarta.

Puji syukux p d i s pranjatkan k e p h AH&

SWT atas %gala k d a - N y a

sehingga tesis ini &pat diselesaikm Tema y a q dipilih dakm penelitian y m g

dilafcdm sejak txtfan Mwet sampai dewm Agustus 2002 hi hhh peningkatan
mukr benih,

d q a n judul P d t m Chitosan dan Trichoderma karzianum

m u k P&gk&m Mum B e d Pilaus merhsii.

Penulis mengucapkan te-

kasih kepada Bapak Dr. Ir. Supriyanto dm

Bapak fr. i G.K Tapa Damns, MSc s e h b s e n pemtribihg yang tefEah b y &

memk&an pengetahm dan waktunya, serta Bapak Drs. S h n Taka Nuhmma,
MS s e l h dosen pnguji, Terima kasih diucagkm kep& Departemen Kehutwm

y a q teIah mem-

kep&

kesempatan hagi pnulis untuk: mlmjutlrran studi dm

Indonesia Forest Seed Project ymg telah m b & m beasiswa

p e n d i d i i di Program P a s c e a n a IPB, S e b itu pnulis mngucapkan t e h

kasih kepada Direktur SEAMEO BXOTROP ymg telah mmgijirrlran penulis untuk
mng@m

fasilitas Labratorim SiRrikukur, beserta st& ymg m r n k t u

=lam petielitian Kepada Diyah P u r w h g , p u b menlgucapkm t

am kehsamamya s e h

mr*;a

perk-

h

kasih

Ungkapan twim kas& p n u k

s m p i k a n pula k q d a kedua orangtua, suami serta M a k - k M , atas =gala doa

dan duicungan yang dibakm,
semoga tesis ini lxlmmht.

DAFTAR JSI

DAFTAR TABEL ................................................................................................
Ki

DAFTAR LAMPIRAN.......................................................................................
Av
PENDAHULUAN ................................................................................................
1
Lam Belak-ang .............................................................................................
1
Tujuan Penelitian .........................................................................................
4

Mipatesis ......................................................................................................
5
TIN JAUAN PUSTAKA .......................................................................................
6
P e n a n g m Benih Pinus merhsii ................................................................
6
Penyakit Lodoh .........................................................................................
7
PmUuan Benih ........................*...
,
.
.
.
..***...............................................
8
Pelryliszux Benih k n g a n Chitom ...............................................
9
............is..
Pelagisan Be& D e q p Cendawan. Antagonis....................
.
.
.
11

.
.
.

BAWAN DAN METODE .................................d...................+..........................I?
...
Tempt dan Waktu Peneliti
m
17
Metode Penel~trrtn
,
.
,
.
.....................................................................
$7
Penyedim dan Perbanyakan Ixrokulum Cendawm
19
UJIAnwonisme in v i m ..........................................*...***.............*.*.........*.*
20
Pengmh Chitasan T a W p P
e
w Cendawan (uji in vitm)
21
Perbanyakan I a h l u m Cendawm Patogen ................................................
-22

......................................................................
...................................
..
.............
Perskpm Media Tanam ...............................................*.............................
22
23
...................................................
Pehpisan Be& Pims merkusii ...........
.
.
.
............................................................................
UJIAntagonisme ex vitro
-27'
Pengamatan ................................................................................................
-27
WASXL PENELITIAN .........................................................................................
29
Penyediaan dm P
~
~ Imkulum
n
yCendawm
~
.....................................
29
Uji Antaganisme in vitro .............
-33
35
P e n g d Chitasan T e r W p Pertumbufian Cedawan (uji in vitro).............
..
.
.
.....................................39
UJIAntagonisme ex v i m ...................................
. . ......,...

KESIMPULAM DAN S A M ............................................................................
66
Kesimpulan .................................................................................................
66
..................................................................
Saran ...................
.........
66
DAFTAR PUSTAKA .........................................................................................
-67

2,

5.

Perturnbutran Trichoderms hrzianum pa& media PDA d m d i a MMN ......3 3

Jumlah canidia Trichodrma harzimum seklum dan setelah
priming
dan inkubasi....................................................................................................
59

16, Gejala mangan Woh pada kdi Pinus m e r h i i (a), pre-emergence
dumping-o$f(b) dan bdoh batang (c)... . .... ...... ,. .. .. ........
46

...... . .... ... .. ...

..

1 7, ;Tun&& benih yang tidak brkwambah pada setiap pexlairw pelapisan knih

...,60

'18. Trickockrma harziatoum m e h d q i benih ymg berkecambaxx dari patogen
p y e b a b p y a k i t lodoh mMui zone perlindungan yang dikem-ya
di ddam rhizosfer (Sumber : Day 1998).......,....,.....,..,....* .*, ......,.,..........,
.,. ,,.,.6 1

Pa-*
pertumbuh in vitro Fusarium sp. aleh T hamianurn pda
media MEA.....................
.
.
....................................... .
.
............................
71

A d i s i s ragam p e n g a d chitosan tmhadap persentas p e e b a t a n tumbuh
Fwarium sp...................................... .................................................................
71

Anafisii ragam pmganrh plapisan knih t m b d q persentaw daya

hrkecambak ........................................................................................................
72

Pmganxh plapisan benifr terhdap persentase daya baksambah be&

Pengaruh pelapisan hnih t m M p berat k-

.....................
....75
n bdoh..............................76

total semi (q).

16. P a q p n ~ hpelzrpisan b e d terhadap pmntase m a

..............74

PENDANULUAN
Latar Behkang

Pembaqpman Hutan T
-

Industri (HTI) ditujukan uxltuk m m p r W

pradukt%tas M a n hutan, Saat irri Pinus merkusii (pinus) menduduki pwhgkat

kedua sehgzti jenis ymg dtazlam dalam program HTI. Luas prmamm per t a b
diperlciralran mencapai 163,160 fia d q a n kcbut-

b i h sebanyak 6.22 1 kg.

Ke~ersediaanIxdh diuir.wg oleh s u m k be1121 yang ada yaitu sehas 853 ha d e q n
praduksi sebaxlyak 3.888 kg per tahun (-hut

200 1).

Keberhzrsh pernbaqwm BTX ditarkukm aleh bmhgai War, & satu
dimtmya &d&

ketersedh knifx yang tremtu didam jmhh y q cukup*

Mum bib mexrjadi War p m a t u k e k k i l a n pemmm secara ekonomis.
Pengunaan knih krmutu rendah &an menghasilkm tamma yang ti&

seragam

d q m pememse tumiwh rexxrjah,d m dapat mmjadi w m k inokukrm bagi penyakit
yang tmbawa aleh hnih (I@

2000). Qkh karma itu, pgguman h i h kmrrtu

mjd p t i n g . Mutu bmih yang tinggi dicirilcan oleh : (1) thgkat k m w a h ymg
tinggi, (2) daya b r k m b a h yang tinggi, (3) vigor ymg ti%@, (4) bbns dari

p y a k i t yang terbawa

dan ( 5 ) k a s a l dari sumbf3r k d h yang dapat

c%ipext:anggungjawabEran.
Di pmamh, knih pinus sangat rentan t e r W p s m q p patogen lodoh.

Patogen W h mngakthtkan twrgian akar atau pmgkal latang semai m b w u k

sehingga dm@di rebah, layu d m akhirnya mti. Patogen irai mnyermg be&

di pefsernaian setelatr bmih ditarxam fiirrgga senaai kmur 7 mhggu ( A c l w d

1 9971, x h g g a %lama @ode tersebut d i p r l h prliiwgm twlmdap knih dm
sen-&

Perlindungm t e r M p benih dap&

nmam-

fmgiskh dan W&ida

atau macegah perhim*

ditaLkan

W w i dengan

se@afa

atau bzahan kirnia fain yang m r q u mmkm

patagen sejak

dishpan h g g a kkwambh.

Pmlindungan yang K i a ciapat d i U h secara byati yaitu deagan m e n g g d a n

patogen hrih d m patogen pe@uni

agen byati mtuk meq&&an

&hya

tanah,

d e w m e q g m d m cendawm antagonis (Copeland dan McDonald 1985).

Pengaddim hyati akhir-akhir hi nrendapat

pbth

bar d q a n maakin

mningbtnya perhatian mush tmhadap lhgkmgan &'bat

madah ymg

ditimbdkm akh pggunaan bahan kimia, Tidak *perti pestisida sintetik yang
&gat m t w n u h mikroorgmkme dalam kkmm yang luas, perkhan

trerrih secasa

hay& mdiki target yang s a p i t yaltu h y a rnembu13u.h satu jenirr yang spesifk
selling@ lllemh-

k

e

b elrob@tax& dan r e a n .

PmMuan brill Sebe1~1llp
-

nxempakan bentuk dai peningkm mutu

b e d (Taylor ef al. X 998). Pehgkatan mutu benib diBeEmisitran sehagai

~~

paska p e n w.tuk menhgbtkm perkecmbahan bmih dan pertwnbufian semi a m

drht-

m j a d h W h sehgai a g a pembawa balm lain

perlindungan tmamm. D&ki
@riming), 2 ) plapisan be&

ixai mencrrkup

as&

untuk

yaitu I ) p e r m 'tridrasi

(seed coating) dan 3) pembersihm h i h d a i

kotoradkantaminandan seleksi h k k m kriteria 6sik f seed condifioning).
Teknik pekpisan ken& teM dkm-

mxsa k

o

d pada knih

tanaman brtikukura, p r t i p e l a p b benih &ngm mqgmdm cendawan

antagonis Trichoderma karzianum dm agen peqikaz Pelgel, telah munjutrlran Mil.

y m g nyata d a b mmgendahn m g a n patogen bdoh (Taylor et al. 19941, Pada
benih maman kehutanan teknik hi helm banyak dizlpbikan dan xrrasih d d m

&p

pexcabazur (Thomen dan Schmidt 1999). Gurer (1998)

pr?r~abnan

pelqisan k d h pinus d q a n mmggrmakan cendawm T. pseudobningii dm %en
p n g b t chitosan-lignosuiphomte unhrk mngeradalikm penyakit loduh ymg

dbbabkan oteh F w r i u m acuminatum.

Beberap mi menmjukkan bahwa chitom biapolimer yang k m s d dari
elat& kulit udang d m h i f a t non toksik, dikategofikrur setlagai green chemicad
(van dm Wolf 2002 a) ymg mmpu n m g b n h t pertamcendawan patogen,

twmxiuk p a t o p p q e b b penyakit ladah

kbmpa jenis
( l d k m e et al.

1999; Reddy et ai. 1999; Seo ef 01. $992). Chi~asanyang d i a p h ~ k mmelalui

pelapim W, penyempxotm dam, pelapkn benih dan penam-

ddqmrktur &pat

kdafam tanafi

mnghluksi ketah2anan hang terfiadap mmgm F. oxyspum,

seperti yang dicoWan gada tanman tomt (
dalm La5rme er a!, 1999).

m

u d m T h d u f t 1992, diacu

Perlakuan pendahduan d q m chitosan juga

mnhgkatkm respon ketahnm semi t o m mMui pmghmhtan pertumbpatogen di jdngm a k a terlurtr dm mmgaktifb s e j d realcsi ptaham

tenmsuk p e d m m stdtural, Chitom

~~ beperm bxbagai anti jamur

juga mmpxlcuat sistem akw dan &tang

serta kpem S R : ~ @ pupuk yang dapat

meninmkarr ~ " k e c m b h m h ~ r n m ~ .
Trichodemu spp. $elah Ima d i k e d sbagai agen t>iokontxol yang baik kmna
berpganrh ter-

pngdalian genyalrit d k q h g b~~

terhadap

penhgkatan pertumbuhm tanaman.

Bebrapa penelit& telah dl&ukan dm

mnunjuXc.Jcan W w a Trichodma sp. mampu mmghnbat p r k u m b m patogen

penyetb penyakit lodoh Rhizoctunia sg. dm Fusa~iurn sp. p d a d pinus
(Hemwan 1996) dm T, hnianupn

srta

T, pseudohningii mampu mnghmbat F,

oxysporerm dan R solmi (A~kllliid1997).
Sehubmgm dmgm hid di atas &a

cfhakan pexh unkrk m e W 8 n

peneWm tentang perMum pra tanam Zrexxifi P i m merkusii dm k m m & h

penerapaffnya t w W p lmih-benih tamman Irehutanan h b y a dab upaya

medngkatb mum I d h xfiingga diharapkzm bib p g ditanam &pat tahan dari
penyakit Woh yang m n y m g d i h p awal prtumbihmya dan selastjutnya &pat
tern

tumbuh dan k k e m h g menjadi bibit yang sehat. Bahan k h i a dan cendawan

antagonis yang akan d i u j h d z h n pelitian ini adalah chitasan dan T. hurzianerm.

Tujuan Penelitian

Penelitiaxx ini tlertujuan ~

u mkg u j i e k k t i h s pehpisan trenih P i m

merkusii d q m mmggmmkan chitosan dan &wan

mnmngkath vigor be&

lodoh

aniagonis

T harzianum &dam

p e r t u m t > h semai pinus dan m m e h m g a n patogen

Wipotsis

Hipotesis yary; diuji dalm penelltian ini adaIah pelapisan hnih Pinus merhsii

dengm chitusazx dim T.harzianuna m e n h g k a h vigor knih dan pertumbpinw3dan mmpu menekan semngm patogen lodoh.

senmi

TTNJAUAN PUSTAKA
Penarngolnan Benih Pirrm mrkmii

Pinus rnerhii mmpakm jenis asli p o b n hutan Indonesia detxgan s e h
alaminya di Aceh, s e k h Danau Taba (Sumatera Utara) dm K c h i (Jamb$ Jerk

ini tehh d i k e m w m di Jawa di whyah kerja PT. Perhutmi. S u m k h i h pinw
kmda di Ctjambu dm Banjaran (dawa Barat), Batwaden dm Pazxinggm (Jaws
Tengah), Jemlxr dm Banyuwangi B m t (Jawa Timur) (Nwhmybi et a!, 2000).
Tin&& kernadam fisiologis benih pinus &am%

hrwarna fiijau nta dengm skk bewcuna c o b t . -wan

dengm kulh kerncut ymg

kmcut berdkmeter 2,0 -

2,8 cm d m panjmg 5 - 9 cm. Jumlah kdi per kerncut sf:W23 butir. B

d pip&

h h t u k bulat telur yang p a n j w y a 6 - 7 mm dan pada tepi Iuar tmdapat sayag

ksar yang mudah l e p . Berat per 1O
. W butis b i h (KA 9,70/a)adafah. 2Q,3 gr (BTP
2000) atau xkitar 50.000 butirkg.

Bemi pinus merupdcm b m i yang kaya lemak;. Setiap knih meqandmg
50% lemak ymg terdapat d d m endospama,

Benh pinus d i m krwatak

artodoks sampai saat ixri masih banyak ditemui kendala penproses pen-

viabibs s e l m

(Mirov 1967, diacu dafam S i W 1999).

AspergiIIus sp., Rhizopus sp. d m Fusarium sp. mervpakan cendawan perm&

k i h pinus yang dominluL

C m ~

g

~ cmdawm
a
dn a m hgisida

Benlate h y a marry>u menelran smmgan Aspergillus sp. dm Fusarr'um ssp.

Persentase semgan R h i z o p sp, mmqu ditekm dengan perlainran pmbkuaxl pada

suhu -1 5

OC

s
e
w 14 ha& dangka31 m g a n Aspergillus sp. dapt ditekm dengan

p e r k k m a h dapw strail (i!ami*bar dan Robi 19971,

Benih pinus kckdw air 5 - 8%, d i s i rnenggmdm wadah pWik dab
kaleng ymg kedap udara d

W Dry Cold Storage padzl sufiu 4 - 8 'C dan RH 40 -

60%. Dabm kondisi pnyhqamn hi viabilitas b
b
e
n
h
i dapltt dipertahankan simp6 2

(BTP 2000).
PerMuaxl pndahuluan bib d q m w a m e r b y a dalaan Hz02 1%

s e k 24 jam dapat menin&ath daya bmkecambah Sampwi 85% (BTP 2000).
Pafaku~tn invigormi d q a n osrno-conditioning dmgan rxlenggudcan lanrta~a
osmotik PEG 6000 p&

tekanan -5 bar s e b 8

hari dapat mnhgkatkm daya

IxrkecamW m j a d i 97% dan menywempakkan p e m m u h rdikula (Setyawan
1993). PerUwm invigorad dmgm mapi-conditioning dengan m q g g m b serbuk

gergmji s e h 2 M pads suhu 20 "C efektif menin&h
30Ph fS*

viabilitrts bib hingga

1999).

Media tumbutr d yang b i k dagat kwpa campuran

pasir d m

kompas (mi0 7 : 2 : 1) dan sthp 1 kg d i a diberi pup& TSP 1 d o k d m , dan
media tanah ymg digudcan sebajknya mengmdw cendawan miirorhiza ymg

cocok (BTP 2000).

Serangan patagen lodoh &pat terjadi p& tiga fbse

~~inang seperti

dijelasaztn dafam Achmd f 1993 p k u :
1, Serangm pada bexriXx yang i.>aru

bed

mwi bus&.

szlja

d i t m dan klum berkecambah sehhgga

Gej& ini disebut brfofi l d h .

2, Serangm pada hnih ymg s&
atas permham tanah yang

krkemnbah tetapi b l u m s
e
w m c u l di

mrryehbkm ircslxnbah mati dalarn tan&. Eejala ini

disebut d q a n bdok dalam tanah (pre-emergence dumpip2g--ofl,
3. Serqan pda knih ymg tekh k r k e a m h h dm telah m

d di

atas

p r m u k m tanah, yang dkbut lodoh h a n g (post-emergence darnping-08 d m

fodoh tajuk (late damping-off).
Patagen lodoh banyak terjadi di p e r s e e pada mat setelah knih diarram
hhgga semai berumur 7 mkggu (Achrzlad t 997). Periyakit aadah &w dkIla&m

oleh kkap j e r k cendawan patogen p@uni

tan&

+i

Pydhium spp,,

Phytopthora spp., Fusnrium spp. dan Rhizocfonia spp., juga d a p t d k ~ b l r a naleh
cendawan saprofit seperti Alternoria spp. p& kondisi y m g kuczlng menguntmgkan.

S e d pinus yang terserang penyakit tadoh ~ ~ f ~ g a penggentingm
hni
padTi
&her a h , menyebabkm d ti&

h a t lagi mnyaslgga

pucuk akibatnya

semi mnjadi rebclh, lap dm a k b y a mti.

Pedakuan Ben&
Pdrasig dari. p h k u a n k d h adafith p m e q m k h g a i cara untuic
mningkatkm k u d h bet&, misalnya d e w cara :
-

priming, W j u a n untuk nmh&hn kemmpakm perkecmbhm

-

%ik, m b h y a dengan pemamm, lrertujuan urrtulr membunuh patogen m
g
terhwa h i h (seed borne pathogen)

-

kimiawi dan hayati, M u j u a n untuk m n g w g m g d bun& drtri patagen
ymg terbawa bib atau untuk mlindungi bmih dari s m q p patogen t&
tanah (soid borne pathogen) (van dm Wolf 2002 b).

Perlakuan b a h deqan teknik pefapkm, m e n j a d h bnih s e b a i %en
pembawa balm lain yang dibutuhh

urrtuk nmhgkatkan perk^^ dm

p e r l i n d q tmmmq m k h y a : X) pup&, 2) z ~ t =t a m

tumbuh, 3) f'uqisida d m

insektisich, 4) m e & tikus dm b u g , 5 ) mikrusimbian (darhiza, rhkmbia d m
fhkia), 6 ) cendawm antagonis. B a b a n - b tersebut jarmg d i g d m pada bnih
yang sarna d m pztda w&u ymg mma (Schmidt 2000).

Pehpisorn kmih Dengan Chitman
Chitosan m p a k m pokdmida ymg b e r d dari bbtang perahan, tmtarxaa

udang, y a h polher dan glukosamin yang dMilasi. Chitom mmpakm
biopolima yang terdiri Bari satu m q a i empat unit IxmIang 2 &-2

bxy-Beta-

D glukosa, k h t & spesif& dan mengazrdung Eungsi amin dal&m rant& karbnnya

d m bemuatan p s i t i brlaw~nan deqan pohkarida alam W y a , sehingga
nmhbulkm s s t - s a t tertentu d&m fhhibilitasnya ymg mnyebabkan mofekul
temtxrt hrsifaf resisten t a W p stress m c : h i k ( J ~ a kPemlitian
i
Perkma Laut
Slipi 2002).

Mekmisme Chitusan dahm Meningbtkotn Pertahman Tanaman
Chitom berkemmpuan untuk rrmginduksi respon pertaharm tamma &dm
spektr~nymg luas dm fl~enwjuXrkansifat ~

~ antiUterid
d
d m, antivird

f Anonim 2002; Ldkmme 1999;M d y ef a!. 1999).

Chitasan maginduksi tmmmi mtuk mehgkatkaxx biosintesis ligin d m
Ii-i

dirading seI tanaman sehingga d i n d ' i sel tamman mmjadi 1eM b t dm

mnghambat p""t"si

cendawan psrtogen (Reddy et 01. 1999). Chitasan j u g

m y e b b pewMan &&logis padin tamman sf:hgga t a m m a tmhhdar dari

cendawm patogen yang mas& mMui a h dan dam

Tanaman yang & p a t h

perhhm d q m chitosan mmunjxkkan b e h p a

p r u b biokhhwi, yaitu menhgkatnya produksi emhenzim hidrolisis ymg
h i - F a t antifungal seperti chit-,

cfrito-

dtux bta- 1, J - g l u w baik pa&

b
u
nmupun pada aka (Cuero et a/. 1 992).

Chitosnn dapat nmhgkatkan produksi ammasam fenal ( M y ef al. 1999),

fititaaleh (Cuero et ui, 1992) dan m a m g m g a k u m h i jasmonic acid, yang
m p k m shyat mbkd ymg dipreap sebagai komponen m
r
m
l dim pengatwan

gen pemknan tanaman (Anoninn 2002).

Mebnisme Chitman &lam Menghambat Pedumbuhan Cmdawan Patugen

Cfiitom mmyebabkan disorganki XI-sel cendawan wars

cept

=perti

meningkatnya vakuoXas*i p e b a h dinding sel, distorsi hifa dm agregasi sitoplasma

(Li&mme

ef

a/. 1999). A k t i v h chitom ini brhubmgazr dengan perubahan

pemeabilitas m b r a n plasma (Leubrr dan StSssel 1986; b u s s et ai. 1989, diacu

didmi

~~

1999) $an p e m b k

e

d DNA wndawm patogen

(Hndwiger d m Luscfxlte 1931, diacu dalm Laihnme 19991,

PehpLm Bedla Dengout Cendawan Antagunb

PerMuan be&

secm hayati &pat

d i k h k m antara lain d e q m

mmdmth cmdawan antagonis. Perhkam benih dmgm cam pfapisan benih

d q m m g g u m k m T. hrziunum mxxmjuldran hasil yang npta da1m
mgendalikm m g a n patogen lodoh pala h i h tamman horeikuftura.

Pada

p e r l a k : ~id c e n h w antagonis &an lwxehdungi benih dm akar tamman dari.
serangm patogen sehingga

~~tan2lman mmjadi xmnhgkat (Taylor et al,

1 994).
Agar per-

krilh seem hzlyati &pat berfxasil d q m h i k m k a haus

disiapkan bioprofectmfyang berkuafitas thggi. Bioprotectanf y m g &@an
1) me-

kk-Lrah

lxarus

v h b h dan vigor thg& dahm arti p r o p p h y a harus m p u

dan menmuhi tujuan yang diharaph, 2)

t o b terhakp

pageringrug ~ b a bsetelah sekd p e r m knih a h &imgan m q a i d q m
w a h aJran ditamm.

PerWu2tn benih

frrtyati frants mencakup komponen-komponen yang

~rr$uk.mgpertuml>uhan &oargmknx

pertumbulm miiaoorgmisme ymg dingidan tersebut pada knih

me*ht

m admya kompetisi d w m flow m i h drsn karma bgkmgn

y&u k

tidak

(Maude 1997). A& dm f&or yang

yang

~~%perti pH, nutrim 8an kelembaban,
L~~

hams dicip-

wtuk d u f r u r y g pertun-

ymg dihginkzln tempi sekdigw ~

~ o o r ~ m e

i prkmbhm
m &oorgmkme
~

pesaiqgya (Taybr d m Harman 1WU), yaitu rneliputi :
1 , B&m

bagi mikrotra,

Chitin d m selulosa mmpu rrteni3lgkatkan &ti*

T. hamaturn dalam

mengeWkan R. solmi attnu P* uitimurn (Wannan et 02. 1981, d k u &lam Taylor

dan Warrnm 199U).
2. Dmjstt K
-

(pH).

Trickoderma spp. &pat t d u h baik pada hgkwgrn h - p H rendah
mmntaazl W e r i

bbih menyulcai pH ymg mndekati netral, Kdit be&

yetng

m n d i k i kenmsmm yang krvariasi akm meqmgaruhi a p b i bioprotectant.
3. Koloxxisasi
Keuntungan dari

~~ solid

matric priming dmgm

~~

bioprotectant adafah miholm mgkolonisasi prmukaan bib selama masa

priming*
4. W&u

Efektifitas perlaxrum bnih wars hayati tmgazltung pada kewptatan
bioptectant untuk mengkolonisasi bnih. Pythium spp. berkecounhh d d m walctu

ditanzlm sementara spra Trichoderma spg. k k e c m b a h

2 jam segera me& be&

setelah 14+benihditttnam.
5. P e n g d te@u

lmsma bdhan toksik lain

Ada k k p keuntungzm ymg d13#?r~leh
dari m e d u k m perkdam hayati
dengm tratban tab& ( W i a pesisida).
&imumIc;tn

Pertama, M a n toksik: &pat

p m g d bun& dzlri kartrpetisi flora

terhadap bioprotectunf,

&Q

Kedua, pengaruix bioprofecdanfdan agen kirnia &pat k s & t aditif dm shw& unttrfr

melawan mupatogen atau patagen yang kompkh.

Teknik ApIiki Pads Benih
Maude (1997) naenjelaskan trnhwa cmdawan &pat
d i 3 h l berrtik &b,

S C ~ T Qh X~ l ~ v

s e d e r b Secara umum ~

o

o

d i r t p l i h i h gada knih

m ~ e h l da m ~ k S dd e w

tekIl&

r yang
g diaplikasikan
~
dmgm teM-telmik

tersekt mmpu krtitfian dwan b i k x b a d a h pyimpanan,
~

PerMmn Imh dmgm cara ke&g V i y a
sgom c d a w 8 n

~~ dengan mew-

Sejumlah spora ditarnbahlran ke baih

d i k m m dmgan air atau wen ad& lain +i

= sekhmmya telah

~~bxyl-mthyI-ce11ufose
4 %

atau gnrm arabic. Benih dm spora dicampur s e h i i a s e 1 d knih diE.muti ofeh
spara,

K e g q y h semai untuk muncut ke pemxukaan tanah dapnt diseirabkazr h n a
serangan patogen atau n x d & Esiolagis (Bemet et a]. 1992).

karnbinzlsi perhhm knih wars bialogis dan &hb&

Qleh sehb itu

dam &embmgkan.

Ken&

ymg sefimgk& m w d add& bioprotectmt ti&

dalam

j d y a n g cuXnrp @a h i h ufftuiE metindmghya s e b proses p e k e .
Bebrapa t e U y a q telah d i k ~ ~ dapt
a n b p a solid matrix primirzg

danfilrn cmfing.
1. ,Wid Matrix Priming ( S W )

Pada tekniir. SMP yang dikemhgkm okh Taylor eb al. (19933 pa& bnih
k&imun, bioprotectan~ b u k k a n ke dalam suspensi cair diikuti dengan

pem-

partikel padat (wntohnya Agro-Lig).

Sebjutnya M dkkubasi

~ ~ 4 h a r i ~ s u h u 2 U o
P aCd a. s a a t ~ n i h a k a n d i t a n a m , ~ e l p a d a t y m g

t>erleMm d ~ h m g Pada
.
saat priming ini jumlah prop@

Trichodem sp. (colony

forming unifs) manrpu nmhgkat mnjadi 10 M.Ape-Lig m e ~ p m y d
pH 4,1 dm
m n g d u n g mtrien inorgmik ymg thggi sehingga mnciptEak-an lingkmgrn yang

i d 4 kt@pertumtnrtran Trickoderma sp. T i e fhktor ymg d & u q perhghtan

eff:kt#m hiopmltecdant mMui t e M SMF addah terjadi kolanisasi pada

sm, lklgkqafx
perkembangan biurprotectanf .
g e m h knilr sehm

pH d m n*

yang sesuai untulc

2. Film Coafing

Pada tekdk fiIm coating ymg dikemhgkm ohh Taylor et ad, (1 991),
t d a p a t tiga k a q n e n p n h g yaitu suspensi pngkat, partikel padat

dan

bioprotectant. S w p i pexrgkat ymg digmdm adaXah Pedgel, methyl ce&hsc: dan
Polyox. Bafaan patiket padat y a q paling efektii digmxhn yaiht Agro-Lig. Pads

teknk ini bioprotectant dicampufkm k&hm

suspeflsi p g i k a t dazl d i q r o k

ke benih yang trerada di ddam drum y q knputas, Seteah perbkuitn pelapisan,

M d h k u b i pada k e f e m b h (W) t@i
Inlcubasi

selama 4

kasj,

pada suhu 25 'C.

RH tinggi mnkgkatkan perkembangbiakm Trichuderma sp, menjadi

60 kdi.

K o m b i i i Irnin ymg dilakihmya adatah t e r n double-coating, Dalam
teknik ini s q m s i pmgikat y a q mngandung bioprofectunt d i i r o t k a n kegada

bed,

Pektpisan k&ua dWuka31 dengm mencampwkaxl partikd padat di dahm

Polyox. L a p h g&

hi mun&inlran bioprotecbanf dilepas secara per&.

Bioprotectmt d1ehkkan paling dekat dengan. permukaaxl h&

dm-

keanudian dikutl:

Xapisan pf:ngtmt b g h luar ymg m b w w knih dan bioprotectunt.
Pada h i h pinus, Gurer (1998) meUW percabam dengan teknik

chitasan-Egmsulpbnate flIm coubing.

h g k & pertma yang d & h h add&

d e w mkmtkan chitusan 3% ke ddam m m
pseudoku~ingij

~~

k&&m

t 1%.

h t a n chitasan

Suspeflsi conidia T.

asetat

dicampurkan d w n bnih.. Sefanjutnya tKnifi diceluph -k

dan k e m u d b
h t a n sadium

Kgnudphomte 5%,

M e h b m Antagonistik Trkhmhma hadmum
Mekmism dabm antagonism antar jasad re& digolungkarn dalam tiga

me-,

yaitu arrtibiosis, koqetisi darr mikopmitism (Baker dan Cook 1974,

Hjeljurd d m Tronsmo 1 998).
Melcanisme antbiosis m e f i b a k &lit

k u u n atau enzim elrstraseluler

yang dibasim oleh d w antagonis (Wells 1988, & m u &hAclunad 19973.

DAN METODE
Tempat d m W a h PeneIithn

Penelitian B W d m di Lahmtorium Silddtur SEAklEO-BIOTRQP
Bogor pa& bdan Wet

dewan Agustus 2002.

MeEode PeneIitistn

Penelitirtn, diawdi d e w uji pendahufuazl yimg bertujuan untrr2r. : 1)
m d a p a t h satu jenis c&wm

virufensi pa&

patogerr penyebab penyakit lodoh yang d

b t , 2) peremajaan kembali isolat m d c e n h m antagonis T,

karzianum, 3) mwji kemampuan anteonism $ari T. harzianum tmMap

&wan

prttogen secara in vvifro, 4) menguji pengad chitusan t e r W p

pexeumhhm cermdawm patagen dm T. harzianarm secant in vitro, 5 ) rnmentkommtrasi chitom ymg &an digwukm dalam pfapisan b e d ,
Apabila dari uji pembhuluafl yang dikkkan wars in viiro diperobh hasfi
chitusan dan K harzianum mafnpu mwkm pertumhhm c d a w a n patogen, maka

d W u h pengujian di Itngangan (ex vitro).
p l i t i a n disajilranpada Gambar 1.

Bagm a k tdxip-tahap kegiatan

+Uji
-I Virulensi

I
r
Lar. Ctiiiaspm
wetat dan tar.
Sodium lignusutphanate

*

I
( 1.Benih Uontrol (Air destiMa)
Palapisan b n i h

a
f

cO
.I

Q*I
CCI

t

B)

f

a

k

Media PatQgen

I

3.Pelapisan dengan Chitusan 0 3 %
4,Pelapisan dengan Chitasan t %

5.Pelapisan dengan Cend. Antagonis * SMP
6.Pefapisan dengan Csnd. Antaganis +

Stedfisasi

Media Tanam

1

I

I I

Uii PendabuIum

Penyediman dan Perbanyakan boldurn Cmdawm

Cendawan Patogen
Cendawan patagen pnyebetb lodoh brad rfasi isolasi potongm pm&d
batang dpinus benunur 2 miqgu d m 4 rninggu ymg terserang penyakit bdoh

di persernaian Poq~pokLad&, KPN Cianjur.
batzrng dicuci d q a n air h i l a t a s t d k

Potoqan &d

d

h distedkm

dmgm nxrerhn &dam larutan NaOCI 1% s e h 2 me& cSan d i b h la@ dengm
air desthta st*
y

sefnnjutnya dikerhgkm dengan mktakkamya dalam cawan petri

q beralaskarx kertrrs swing steril.

ditempatkan p&da naedia PDA' dan

Potoqm pm&d btmg kern*

d i i b a s i pada suhu kame, Pa& hari ke-4 m q a k &-pa

jmis cmdawm

patagen tumbuh pa& mdia PDA, s b j u t n y a isolat-isaht tersebut:d i m d k a n .
Selanjutnya dakukm uji vkdexlsi uxatuk m e n a t d m jenis cehwan y q

paling kuat mayehbkm penyakit lodoh Ujji videmi d h h k m dmgm menanam
sen& hmmm 15 hmi pada d i a tanam di

dmgm masing-masing j d &wan

dalam plybag yang telrmfi diinokulasi

patogen. Jmdah semai ymg d b x m pa&

setiap pertakuan s h y & 20 d d e w dua kali pengulangan. Pengmtan
dihkdm tmhdq persentase semai yaxlg tasaanly penyakit bduh. Sam hht ymg
paling kuat w + r u l d y a

~~untuk pmeW selmjutnya,

Cendawn htagunis

Iwht c e b w a n antagonis T. harzianecm diperoleh d u i Litbang Mikrobiologi
LIP1 Bogor dan d i h h k m pe-jaan

b h t pads, d PDA u n e mempwofeh

isalat murni T. h i a m . Xsolat m u d K hamianurn selanjutnya diprbanyak pada
media PDA atau M M ~ ? untuk diambl conidbya.

Conidia ?i

harziamm

sehjutnya d i p m h n untuk puuaff p h p b benih.
produktfitas coni8h dipelajari dari studi

Faktor-faaaor yang &gk&kan

pustaka. Untuk mengetahui b a n y h y a conidia ymg diproduksi mzlka 8
pexhitmgttn j m h h conidia per satu mg material T. harziamm dmgan mmghaemacytometer.

Uji a n t a g o h wara cendawan antagonis dmgan cendawan patoga
dmgm cam nmmam patongan isobt T. harziumcm dm Fusurium sg.

&&&an

yang bmmm 5 hari d h n satu cawan Petri k m e r 9 cm y q M i medk

MEA'

ad.

Potoqm isoh murni diletdhn khwanan arah &ngm jar& 5 cm Jar&

kedua isolat ke tepi cawm Petri masing-masing 2 cm Uji antagonism ini dilakukan
d d m 3 kali u h g a n . Pmgamatan &akukan setiap hwi Persentaw pengtmhtan

2 ~ a ~ o l h ~ k a i ~ i n ~ ~ ~( oM~ M
P D
N12gr~~lctoAgw,
A
) :
3 g r n % t l t ~ 0 . 5 g r ~ & ~ ,
SOml Iar.
50ml far.
5 O m l far. (NN4hWU4,1 ml h.F C I , 3 ml h.
MgW4.m0
3

~

&la&

&

W

t

Urn4,

~

~

~

~

)

:

1 2g r P 0
e p t ogn e , 2r 0 g ~ 2 U tg r &~g r d a n I O O O m l a i r

r l - r2
Persenease p n g h m h m (%I = -x IOU %
r1
Ketermgan :
rl

=

jzui-jari koloni Fusmium sp. yang m u j u ke ujung cawan Petri

rz

=

jari-jar; koloni Fwmium sp. yang m u j u ke koloni T. harzianuna

Pengaruh Chitosour Terhstdap Pertumbuhan Cendslwarn (uji ifl * o )
Chitasan (Siarn Bionet Limited) d i s i a p h kedafam b u k lamtan chitosan
axtat. Chltosan dengm komxntrasi ydtu Ph, 0,5%,

fwlv) dhwtkm d q m asam asetat 1% (v/v).

I%, 1,S%, 2%, 2,5% dm 3%
Lmtan tersebut kemudiztn

dkntrikgasi masing-masing ~ I a m a
15 menit,

Pengamtm gertmhhm cendawan

~~ pada cawan-cawan Petri y a q

krisi me& PDA yang ditmkhkm d e w Iwrutan cliitasafl aWat d q a n k b a g a i

kammtmi (9:l v/v).

P&

3

b d cawan Petri per kommtmsi chitusan d i t m

patongan @is i7 hamimm dan Fusarium sp. (0 6 m). PaBa ethp cawan Petri

ditanam 1 ptang cmdawan. Cawan Petri dihhbttsi psnda suhu kmm (26°C 28'C).
P d u h a n cmdawan (diameter koloni minus diameter potangan cendawan)

diukur

hari s e b 7 .&I

Pa& h;ari ke-7 d i h g pemntase p n g b m h a n

p e r t u m h h . Persatwe peqghmbm add& p q p q a n

~~~ eendawan

ymg ditumbuhkm pzrda media d m p pemnbahim chitosan d

i

W

i dexlgan

Penditb Utama

Perbmyakan InakuIum Cendawm PatP e r b y d m inoWum cmdawan patagen d i h k h n pada d i a camguran
pair, fi&ncuran tnji jagwg dan air (96:4:20 gf/g~/ml). Media s e h y a k 100 gr

~~ke dalam botol k a a kemudian disterikarr didam oeokhf (1 21
1 atm) ~~ 1 jam, P&
masing-masing media yang srarfah steriX tersebut,

tersebut

'C,

Persimtpan Media Tmam

M

e tanam yang digmidm addah c q u r a n top soil dan pasir (1:1) yang

tefah distedkan. lnofculasi cendawarr patogerr d

i

id
e
w nmcmpuckan 3,5

gr media ptugen ymg telair dkhpkasl dengal 200 gr media
p a & , k~~

&am-

t2wm

cfafam g e h

15 ml air Seed. Wad& tanam sebjutnya &utug

dengm plastik, dan didiamkan s e b 4 M. Setelah 4

dilakukm pemmmm

'be& pinus kantmf dm I d h yang telah d i k i perhkmn pehpisan,

Pehpism m
i
hE~irt
~&II!FE~'

Bnih pinus b r a d dari Swder Be4nih Banjaran di Jawa Brrrat, dimen pada

Man Oktabr 2001, dan tebh dishpan d W DCS selama 8 tatlan.
1.

B d Kantd(Aird&ta)
Be& direndam didam air destilata selama 24 jam.

B d yang tenggehm

(tKnih bemas) distedkm permhamya dengm merendam ddfm larutan NaOCl
0,5% s e b 1 menit mtuk m q m o f e h

b d h yang aseptik. h n i h sehjutnya

dibilws k h p k d i dmgm air destilata s t d kcmudim M h diirerhgmginkan
dmgan mletdckannya dzlXam wadttkr, yang tefah d&i

Benih bmas dan asep~ikdire&

kwtm saring stwil.

d d m laruEan chitam asetat 0,5% dm

4. Pebpiw Ben& d e n w Chitwan 1%

Chitom diskqkarx d e q m kommtmi 1% (w/v). Chitom dihekarr dengan

asam metat 1% (vlv).

Larum tersebut kemudh disentrifugwi masing-masing

5. Pekpim JBenitr dengatn
(S W I

benih (Img

=

T. hrxrziQPrurn-t- Pertmrha Solid M d r k Priming

I ,8 x lo6 conidia). Selanjutmya benih dicekrpkm ke dalam b t a n

sodium Egnosuiphomte 5%, setelah itu

M dikering-BT~

t 9981, Larutan sodium lipsulptronate 5% (w/v) d

dibM dm-

(modi&mi G w r

i wb@

hpisan pgm,

m h t w a dalam air destihta sterif.

per^^

S M P dilakvlran d e q m cara mmmhhkm bib pada media

priming selrtma 2 h
i
.Media priming terdki x j , darj: b:uk

ke dalam btol &a, dhtup c f q m

steril : air stmil = 2 : 1,2 : 2,s gram dimas-

pMik dan diberi 2-3 lubnng halus agar

gergzji kayu sengon

0 2

t e r d ( S i W $999) seprti pada

Untuk mengetahui pertumbuhan T. hanianum, satu butir benih yang baru saja

dilapisi direndam dalam 1 ml air st&

untuk d W m g jumlah wdhya, demikian

pula dengan benih yang telah diinkubas'~Penghhngan ini diutang sebanyak 3 kali.

I: hmzimrum + pedakam inkubasi pada RH tin@$
Benih berms clan aseptik dimasuWcan ke dalam larutan chitom asetat 1%y w

6. Pelapisan Benih den-

telah ditambahkan conidia T. h i a n u r n berunnrr 7 hari dengan konsentrasi 10 mglgr

benih. Sehjutnya benih dicelupkan ke dalam larutan sodium lignosulpbnate 5%,
setelah itu benih dikeringanghkau

Gambar 2.

Pelapisan benih dengan Trichoderma hanianum yang diikuti dengan
inkubasi pada kelembaban tin& (a) dm pelapisan benih dengan teknik
SMF' (b).

Per-

hkubasi d d d d a n de-

cara meqinkubasi

benitt di

atas

air

dingin s e b 4 bari pada s d w kanm dahm kondisi gehp (Taylor et ad. 1993)
seperti p& Gambar 2,

Untuk mngetahui p e r t u m b h T. karzianum, satu butir b i h yang baru saja

dikpisi &rendam dafam 1 ml air steril a u k , d-

jmd& conidbya, demilcian

pula d q a n b a i h yang teM diinkubi. Penghituqan ixli d i u w sebanyak 3 Mi.

tX:&

Sehjutnya be& d i c e h p k ke d a b fmtansodium Iignawlphonate 5%,

Rancangan Acak Lmgkap (Mattjik dan Swnertajaya 2000), Be&

i

1,2,3,4,5,6,7
1,2,3
Y ij
nihi t o w
ke-j
i.~. = ratammum

j

=
=
=

yang -ti

pada perkhan pc:hpii

umum model

Waf ke-i dim ulangan

sidik ragam, ddilnrrjutkan dmgm uji ni.fai t@

dengan Uji Jar& Beqanda Duncan.

Uji Antagonisme ex v&m

Ben% ymg telah dihpisi Bitanam pada xnedi tanam yang telalx diinokulasi

d q m d w a n patagen.

Wad& tanam & e m p a t h di rl.slam nunah kaca

Penyiraman d k h k m wtiap sore hari M
a
n mmggunakan rnir h

Pengmmtan
Pengmtan B W W terfradap tolok ukur sehagai krikut :
2 . Daya B&xmbah

Daya b

e

r

(DB)
k kn
~ih ~difritunlg b e r k k a n persentaw jumhh total be&

yang M m m b a h pada hmi ke-7 d m hari ke-21 (ISTA 1999).

DB (%)

-

JumlahKNpadzlharike-7-1-JWKNpadaMke-21

J u d & bmih yang di-

x IWh

per etnaal. ( 3 e t d

=

24 jam) dm dimulai pada h
ike-1 sampai dengan fiari ke-21

dengm ~ m u ss e a i k k u t :

4. Tinggi Semai

T k g i s e d (cm) diukur pada saat smai kmur 28 hari.

5. Biomassa

Biomass%diulrur kdasarkm j d a h totid berat kmhg smai p d a akhir
p e n g m m . Pengeringan dilakukm dengan metode oven 70 C
'

48 jam.

6. Serangm Penyakit Lodoh
Serangarx penyakit ladah dhhmg lmdasarkan pmentase jumM totd

c
h
i

benitr dm semi yang terserang penyakit lodoh dengan m u s sebagai krikut :

-

Sermgan Lodoh (%)

Jumfah hnitx dan s e d yang terserang lodoh
x 100%

3umm hnih yaqj d i t m

HASIL PENELITIAN
Uii Pendahulllsn
Penyediaan dan Perbanyakan Znolollm Cendawan
Cendawan Patogen

Berdamkan has'd pernumian diperoleh dua jenis cendawan patogen penyebab
penyakit lodoh, yaitu Fusarium sp. dan F. oxysporum. Adapun k a d k r h k isolat

Fwarium sp. yang ditumbuhkan pada media PDA dan inkubasi pada suhu kamar,
yaitu d i i e r koloni yang berumur 3 hari sebesar 2,3 cm,miselia berwama putih dan
b a g i i dasamya berwarna ungu, hifa bemku~anlebar 2 p,microconidia berukuran
panjang 7 pn clan macroconidia berukuran panjang 12 p.m. Medii PDA (iika cawan
petrinya dibalik) berwarna coklat tua keunguaa (Gambar 3).

(a)

(b)

to)

Gambar 3. Fusatium sp. : (a) koloni pada media PDA; (b) hifa dan (c) microconidia

Ihakteristik isolat l? ogaporum yang ditumbuhkan pada media dan inkubasi

pada sulm kamat, yaitu dkmeter koloni yang bemmur 3 hari sebesar 3,3 em, miselia
berwarna putih dan bagian dasamya berwama merah muda, hifa berukuran lebar 3

microconidia berukmm panjang 7 p,macroconidia berukuran panjang 12-14

~ T Q

j
m dan W o s p o r a berukuran diameter 7 pm, Pada hifa terdapat false head yang
menempel pada phialid yang @k,

dkt ini llletumjukkan W e r i s t i k I?

oxysporm (Burgess et al. 1988). Media FDA (jika cawan pethya dibalil) kmarna
coklat muda (Gambar 4).

Gambar4. Fzmrim oxyspoonrm : (a) koloni pada media PDA; (b) hih, (c)

mimonidia dan macroconidia.

H a d uji virulensi memmjukkan bahwa Fmmium sp. menrpakan jenis yang
paling kuat menyebabkan penyakit lodoh pada semai p b (Tabel 1) sebingga jenis
ini digunakan untuk p e n e b seIrm@tnya.

dilakukanpada media PDA.

Pe-

isolat Fusmium sp.

Tabel 1. Persentase s e w a n penyakit lodoh (%) yang disebabkan oleh Fusarium sp.
dm Fusarium oxysporum.

Fusmium sp.

30

F. oxysponun

15

C.V.= 13.61%

Cendawan Antagonis

Kamkteristik T. harziunznn yang dhmbuhkan pada media PDA dan dijnkubasi
pada suhu kamar, yaitu diameter koloni yang benrmur 3 hari sebesar 5,4 an, miselia
berwatna

putih dan tipis, hifa beruiolran lebar 5 p n clan conidia berbentuk bulat

berwana kuning dan hijau d e w diameter 4 p. Media PDA (jika cawan petrinya

(4
Cambar 5 . Trichoderma hmn'an~n: (a) koloni pada media FDA, (b) hi% dan (c)
con&
(a)

(b)

Hasil uji pendahullusn menunjukkan conidi I: hanianum lebih banyak

diproduksi pada media MMN d i m k a n pada media PDA (Gambar 6) sehingga
untuk pelapisan benih pada tahap peneliti selanjutnya I: hanianum diperbaqak

pada media MMN.

Gambar 6. Trichoderma harzianum b e m u r 7 hari : (a) pada media PDA, (b) pada
media MMN
Pada media MMN, isolat yang berumur 7 hari memproduksi conidia berwama

hijau tua sebQnyak 1,8 x 106/mg cendawan, sedangkan isolat pada media PDA
memproduksi conidia berwarna kuning sebanyak 1,5 x 1o6/mg cendawan Media
MMN merupakan media yaug kaya nutrisi sehingga conidia dapat diproduksi dalam

jumlah yang banyak. Perbedaan pertumbuhan T. hmzianum pada mdia PDA dan
MMN dkjikan pada Tabel 2.

Tak12. Pertumbuha Trichoderma hrzianum pa$a d i a PDA dan media MMN

-

r 0,55 cm
r = f,43 cm
r = 2,5 cm
k l i u m b e r w m putih

d m tipis, wnidia hrwarraa
r = 3,6 cm

miseEum kwm put&
dm tipis, canidkt h a r n a
hijau
r = 4,2 crn
miselirun lmwarna putih
d m tipis, coxnidia bmwarna
Ejau tua
r=4,2cm
dsefium kmama put&
dan tipis, conk% bwarna
hijau tua

Wji htagoobme in vitm

Mas2 perrgujian antagonism secara in vifro men,unjddm W w a T harzianum
menghmbat p e r t u m b h Fusarium sp. hingga 33% ( L a m p h 1). P A hari ke-5,
pa&

mat jar;-jari Fusarium sp. yang menuju ke arah cawan Petri (rl) mmapai 1,8

cm, jari-jari Fw~riumsp. yang m u j u ke wah kubni T: harzianm (rd mencapai 1,2

c m Pada daerah pertemuan miselia kedua jenis cendawan ini terdapat sedikit warna
kuning kecoklatan (Gambar 7).

Gambar 7. Uji antagonisme in v i m antara Trichodenna hmzirmtlm (Th), dengan
Fusarium sp. ( F ) pada media MEA.

Kemampuan antagonistik T. hmzianum dapat dilihat dari pertumbubannya yang
lebih cepat d i i d i n g Fusarium sp. Walaupuu ditumbuhkan pada media dan kondisi
yang mma, kecepatan tumbuh kedua cendawan tersebat berbeda. Pada had ke-5 jari-

jari koloni T. haniamm mencapai 4,2 cm dan sudah memenuhi cawan Petri,
sementara jwi-jari koloni Fusarium sp, hanya mencapai 2,2 cm (Gambar 7 dan
Gambar 8).

Hasil pengujian statist& menunjukkan chitosan berpengaruh sangat nyata mtuk
menghnbat pertumbuhan Fusarium sp. dan T. harziunum (Lampiran 3 dan
Lampiran 4).

Fusarim sp. merupakan jenis yang paling terbambat oleh penambahan
chitosan

Penghambatan pertumbuhan tertinggi (66%) tejadi jika konsenimi

chitosan mencapai 2,5% (Tabel 3 dan Gambar 9).

-bar

9. PertumbuhanFmmium sp. pada berbagai konsentrasi chitosan.

Fmarium sp. yang tumbuh pada media kontrol (PDA) memiliki miselia lembut
yang kemudian bbang-cabang membentuk jala kasar.

Mula-mula miselium

t?erwarnaputih dan kemudian berubah menjadi merah muda keunguan. Media PDA

berubah warnanya menjadi ungu. Pada media ymg ditambahkan chitosan konseotrasi
0,5% sampai dengan 1,5%,

ndselium berubah warna nmjadi putih keunguan,

sementara media PDA mas& tetap berwama uagu. Pada chitom ko&

2%

sampai dengan 3%, miselium berubah menjadi semakin putih dan wama media PDA

juga berubah menjadi putih

Pada jenis 7: hurzianum penambahan chitosan mampu menghambat
pertumbuhan T. hanianum hingga 31% namun nilai pengbambatan ini masih

& ' b a d penghambatan yang terjadi pada Fwarium sp. (Tabel 3 dan G&

-bar

10).

10. Pertumbuhan Trichoderma hmzianum pada berbagai konsentrasi

chitosan.

Pada media kontrol T. haizianum membentuk koloni berwama put& kehijauan

dan pada hari ke-7 sudah terbentuk conidia berwama putih dan kuning yang
menyebar. Pada media yang dit*
conidia tidak terbentuk.

chitosan, koloni berwama kekunhgan dan

Pa& Tabel 3 &pat dilihat &wa

pm&mLram prtumbuban ar&

rdd

Fusariurn sp. pada kofxsentrasi 3% mqW penunnnan EIal ini disekbkm h e m
adanya k e s d h t e h d a h mhtkm chitom ke &lam media PDA, mengingat

pada kamtrasi 3% tersebut viskositas lamtan chitom rebitif tin&,

Hd seruga

juga t6adi pada T. h i a n u r n pads k o m m s i 2,5% dm 3%.

Berdwmkm Mil ppjb di atas, diteeaplcan komtrasi cchitosan 0,5% d m
1% y m g akan

karma pada ko-i

~~ u&uk pehpisan M pada tahap

sebjutnya,

tersebut chitosan &ah m q u mqhmbat pwhdmhm

Fusarium sp. dan viskositas lamtan cfiaasan rehtif rendah.

daya berkecambafr,vigor benib d m pmtumbuhan d.

~~a~

PeXapisan b d h kpmjgmh sangat q a t a terhadap daya b r k w m h h k d a

(Lampixan 5).

Daya b e r k e m h h W tanprt pehpkm (Mkantrol) m
a

mencapai 23% dan 25%. Daya betkecambah b m h yang d~kpisi Beharzianum dan &u

chitom (31%

T,

- 63%) lebih tinggi d M h g k m dmjpn M

kontral (Gambns 1I).

b g s q ditanam (tanpa &i

inkubasi) paling tin@

daya ~ ~ b a h r y a

d i W i dengan h i h ymg setelah ditapisi dmgm T. ~ i u n u mdkhbztsi
pada R H tinggi dan dan y m g m d a p & palakunn SMP, Hal hi berhitan era*
dengaaa dbititas hokuhm, &in

efi:ktif d d m m k r t n patogen lodoh.

wpat d i g h &a

inokulum tersebut lebih

Kotrtrd (N20)

Kontlol
(CWOOH)

CRi0,5%

Chit 1%

Th +S1vtP

Th + inkubasi

Th

Perlakuan Benih

-

Catam : an& ynng diikuti oleh h m f ymg
CV

tidak bc*

nyahl pa& t a d uji 1%

2,93 %

Gambw 1. I . Pengamh pelapisan benih terhadap persentase daya berkecambah benih
I'immc,r
naerkusii.
Perlakuan pelapisan benih berpenganrh sangat nyata terhadag keserempakrtn
tumbuh (Lampiran 61, Keserempakan tumbuk benih menggambarkan vigor kekuatan

tumbuh benih. Benih yang dilapisi dengan T Irarziamm lebik vigor dibandingkan

dengm benih yang dilapisi dengan chitasan (Gambar 12)

19% dan 2 I%, dan perbedaan kansentrasi chitosan tidak berbda nyata pengaruhnya

terhadap keserempakan tumbuk ini.

Perbedaan teknik pelapism benih clengan 7: harziumrm tidak berbeda nyata
pengstruhnya terhadap keserempakan tumbuh wdaupun demikian benih tanpa
inkubasi tumbuh paling serernpak (53%) cliikuti dengan tehik inkubasi pada 'REI
tinggi (40%) dm teknik SMP (26%). Nampak dalam teknik S M P kurrtng mampu

rneningkatkan vigor benih walaupun dengan teknik ini kasilnya mash iebi h bai k
dibandingkan dengan pelrtpisan h i h dengan chitosan dan kontrol.

Kontrd (F42O)

KontroI
Chit 0.5%
~~JcUU1-I~

Chl -f%

TR + SMP

Th + ~nkubaa

fh

Perlakuan Benih

-

Calaim : angka yang & h t i oleh hunrfyang sama, ti& beCV 10.77 %

nyab pa& W r r j i 1%

Gambar 1 2 . Pengm h pelapisan beni h terhadap persentase keserempakan tumbuh
benib Pinus m r h s i i .

Tolok ukur kecepatan tumbuh sangat nyata dipengamhi oleh pelapisan benik
(Lampiran 7).

Benih yang dilapisi dengan 7: hmztamm Iebik cepat tumbuh

djbandingkan d e n p k

h yang dilapisi dengan chitosan dan benih kantrol (Gambar

13). Benih yang dilapisi dengan

X harziarwm Iebih Wat: tumbuh 2 sztmpai 4 kali

Iebih cepat. dibmdingkan dengan kuntrol.

Catatan : an& yaw diikuti oleh huruf yang sama, lid& hrb& nyata p d a tar& rrji 1%
CV = 8-89 96

Gmbar 1 3. Pengamh pelapisan h n i h terhadap persentaw kecepatan tumbuh beni h
Pims merkPrsit.
Pdapisan benih bqengawfr nyata terhadap tinggi s e m i dm gengmh masingmasing perlakuan tidak berbda nyata (Lampiran 81, namun demikian pelapisan benih

chitosan dm kantroi (Crztmbar 14). Tinggi s e m i ttertinggi dicapai oleh pdapisan T.
harziamm tanpa inkubasi (4,6 cm), diikuti dengan teknik SMF (4,4 cm) dm teknik

Chi 0,5%

Pertakuan Benih

Gmbar 1 4. Pengarufi pdapisan benih terhadap tinggi s e m i Pims rnerkusii.
Pelapism benih berpengaruh sangat nyata terhadap biomass s e m i (Lampiran

dibandingkan dengan biomassa dari benih yang dilapisi dengm cfritosan (ma-rata 14
mg) dan kontrol (rata-rata 12 mg) sepmi twlihat pada Gambar 15.
Pelagism benih dengan chitosan pengaruhnya tidak berbeda nyata dengan

kontrol bahkm pa& kansmtrasi chitosan yang Iebih tinggi terjadi sedikit penunrnan
tinggi dan biomassa semai.

Pelapism benih dengan T. harzicnmrm, tanpa inkubasi, menghasilkan biornassa
tertinggi (20 mg) dibandingkan dengan kedua teknik lainnya. S e m i yang turnbuh

dari benih yang diinkubasi pertumbuhan tin&

dan biarnassanya mengalami

Catatan : angka yang diikuti obh huruf yang %ma, tidak tK:rMa nyata pa& tarafuji I%

C V = 9,17 O/o

PengaruR Petspissrn Benilx Terhadap Penekanan Serangan Lodoh
Pdapisan benifr berpengaruh sangat nyaia terhadap peneka