III. BAHAN DAN METODE
A. Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian dilaksanakan pada bulan September 2010 – Juli 2011 pada tebu umur 3
bulan. Pengambilan sampel nematoda tanah dilakukan di plot percobaan lahan pertanaman tebu PT Gunung Madu Plantations GMP, Lampung Tengah.
Identifikasi nematoda dilakukan di Laboratorium Hama-Penyakit Tumbuhan Fakultas Pertanian Universitas Lampung.
B. Alat dan Bahan
Alat yang digunakan dalam penelitian adalah sebagai berikut : sekop, nampan, ember, karung berukuran 10 kg, kertas label, saringan 100
μm, 38 μm, 53 μm, mikrokop bedah stereo dan compound, kaca preparat, cover gelas, cawan petri,
botol 250 ml, pengait nematoda, pipet tetes, beker gelas, hand counter, sentrifius, dan stopwach. Sedangkan bahan yang digunakan adalah:
ajir, bambu berukuran 30 cm sebanyak 9 buah, tali rafia berwarna, kantong plastik berukuran 1kg
, sampel tanah, aquades, larutan Golden X campuran aquades, formalin, gliserin
dengan perbandingan 40:3:1 larutan gula, dan air.
C. Pelaksanaan Penelitian
1. Rancangan Percobaan
Perlakuan dalam penelitian ini disusun dalam Rancangan Petak Terbagi split plot dengan lima ulangan kelompok. Pengelompokan dilakukan berdasarkan
jaraknya terhadap sumber air. Petak utama adalah sistem olah tanah, sedangkan anak petak adalah pemberian mulsa. Sistem olah tanah terdiri atas perlakuan
tanpa olah tanah TOT dan olah tanah intensif menurut PT. GMP OTI, sedangkan pemberian mulsa terdiri atas perlakuan pemberiaan mulsa bagas 80
tonhektar dan tanpa mulsa. Lahan percobaan terdiri atas 5 petak besar yang masing-masingnya memiliki
luasan 100 x 200 m. Tiap petak besar dibagi empat petak kecil satuan percobaan dengan luasan masing-masing 25 x 25 meter kemudian diberi label A,
B, C, dan D. Perlakuan tanpa olah tanah terletak pada plot A dan B, sedangkan perlakuan tanpa olah tanah terletak pada plot C dan D . Pemberian mulsa
dilakukan secara acak pada plot A atau B dan plot C atau D Gambar 3.
Gambar 3. Bagan Plot Percobaan Atas izin: Fajri 2012 Keterangan
: OTI = Olah Tanah Intensif tidak ada reduksi olah tanah TOT = Tanpa Olah tanah reduksi olah tanah total
K = Kelompok Ulangan
Pada setiap plot OTI dan TOT ditambahkan BBA mixcampuran 80 tonha. Penambahan BBA mix pada plot OTI dilakukan saat pengolahan tanah, sedangkan
pada TOT penambahan dilakukan dengan menaburkan di permukaan tanah. Pupuk kimiawi berupa Urea, TSP dan MOP ditambahkan pada semua plot
percobaan dengan dosis 300 : 200 : 300 kgha. Perlakuan pemulsaan bagas dilakukan secara acak pada plot percobaan, sedangkan penyemprotan herbisida
dilakukan hanya pada plot A dari tiap blok. Perlakuan sistem olah tanah pada plot OTI dilakukan dalam empat tahap.
Pemupukan BBA 80 tonha dilakukan setelah pembajakan pertama. Kemudian dilakukan pembajakan tahap kedua. Olah tanah tahap ketiga menggunakan garu
dan olah tanah tahap keempat dilakukan pada semua plot yaitu membuat alur tanam sekaligus penambahan pupuk kimiawi. Selanjutnya tebu varietas RGM 00-
838 ditanam pada semua plot percobaan dengan sistem double row berjarak 80 cm dan antar double row berjarak 130 cm. Perlakuan yang diberikan pada plot TOT
yaitu pemotongan rumpun tunas tebu yang tumbuh yang dilakukan sebelum pembuatan alur tanam dan setelah penanaman. Penambahan BBA mix dan mulsa
bagas diberikan pada plot TOT setelah tebu ditanam dan rumpun tebu dibersihkan.
2. Pengambilan sampel
Pengambilan sampel tanah dilakukan pada saat tebu berumur 3 bulan, tebu ditanam pada bulan Juli 2010. Dari setiap petak percobaan sampel tanah diambil
pada 12 titik sub sampel dengan menggunakan bor tanah Gambar 4. Sampel
tanah diambil sampai kedalaman 20 cm dan kemudian disatukan sebagai sampel komposit. Masing
– masing sampel dimasukkan ke dalam kantong plastik dan diberi label. Sampel tanah diambil secara melingkar dengan monolith sebagai
pusatnya, empat titik berjarak 3 m dari pusat dan delapan titik berjarak 3 m dari titik pertama Susilo Karyanto, 2005
6
Gambar 4 . Posisi sub sampel tanah terhadap pusat petak percobaan Keterangan:
= titik pengambilan sampel = monolith 50 cm x 50 cm x 30 cm
3. Ekstraksi dan Identifikasi Nematoda
Metode ekstraksi nematoda dari tanah yang digunakan adalah metode penyaringan dan sentrifugasi dengan larutan gula Gafur dan Swibawa, 2004.
Larutan gula disiapkan dengan cara melarutkan 500 gr gula dalam air sehingga volume larutan menjadi 1000 ml.
6m
Sebanyak 300 cc tanah dimasukkan kedalam ember, kemudian ditambahkan air sebanyak 2 liter, diremas-remas sambil diaduk dan didiamkan selama 3 menit.
Suspensi didekantasi dengan menggunakan saringan berdiameter 1 mm dan ditampung dalam ember lain. Tanah dan kotoran dari ember pertama dibuang.
Kemudian suspensi yang berada di ember ke dua didekantasi dengan saringan berdiameter 5,3 µm dan ditampung dalam ember ke tiga. Suspensi yang berada di
ember ke tiga didekantasi dengan saringan berdiameter 3,8 µm. Bagian yang ada pada saringan dikumpulkan kedalam tabung sentrifius dan
disentrifius dengan kecepataan 3500 rpm selama 5 menit. Setelah itu, supernatan dibuang dan endapannya ditambahi larutan gula dan diaduk merata dengan larutan
gula kemudian disentrifius dengan kecepatan 1000 rpm selama 2 menit. Setelah itu suspensi nematoda dicuci menggunakan saringan berdiameter 3,8 µm.
Suspensi nematoda yang ada di dalam saringan dibilas dengan air untuk membersihkan larutan gula dan kemudian suspensi nematoda dimasukkan ke
dalam botol suspsensi. Fiksasi dilakukan untuk mengawetkan nematoda hasil ekstraksi. Sebelum
difiksasi nematoda dimatikan dengan cara memanaskan botol suspensi pada suhu 50
– 70 º C. Kemudian, didiamkan sampai dingin, lalu ke dalam botol tersebut ditambahkan larutan Golden X formalin 1,15 ml, glycerin 0,28 ml, aquades 8,6
ml sehingga suspensi menjadi 15 ml. Kelimpahan nematoda dihitung dengan cara mengambil suspensi sebanyak 3 ml
dari 15 ml kemudian dituang kedalam cawan petri bergaris. Nematoda dihitung di bawah mikroskop bedah stereo binokuler dengan perbesaran 40 kali dengan
bantuan hand counter. Kelimpahan nematoda dalam 300 cc tanah adalah rata-rata dari tiga kali penghitungan dikalikan 5.
Identifikasi nematoda sampai tingkat genus dilakukan terhadap 100 nematoda yang diambil secara acak. Satu persatu nematoda dalam suspensi diamati
dibawah mikroskop stereo binokuler, sekitar 10-20 nematoda diletakkan pada kaca preparat, selanjutnya nematoda ditutup dengan coverglass. Nematoda
kemudian diamati morfologinya di bawah mikroskop majemuk dengan perbesaran 100
– 400 kali. Nematoda diidentifikasi sampai tingkat genus dengan menggunakan buku Smart dan Ngayen 1998, Andrassy 1993, Goodey 1963
serta Mai dan Lyon 1975. Nematoda kemudian dikelompokkan menurut kelompok makannya. Kelompok
makan nematoda dapat diketahui dari genus nematoda atau struktur stomanya. Nematoda dikelompokkan menjadi: nematoda parasit tumbuhan, nematoda
pemakan bakteri, nematoda pemakan jamur, nematoda omnivora, nematoda predator, dan nematoda pemakan alga. Kelimpahan kelompok makan nematoda
adalah kelimpahan relatif dari 100 individu nematoda yang diidentifikasi dan diambil secara acak.
D. Analisis Data
Data kelimpahan seluruh nematoda dan kelimpahan relatif kelompok makan nematoda dianalisis ragam dengan menggunakan Rancangan Petak Terbagi dan
pemisahan nilai tengahnya diuji Beda Nyata Terkecil BNT.
I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Tebu Saccharum officinarum L. merupakan tanaman perkebunan yang tergolong dalam kelompok rumput-rumputan famili Poaceae. Tanaman ini banyak
dibudidayakan di daerah tropis dan subtropis. Tanaman tebu mempunyai sifat yang khas, sebab mulai dari pangkal sampai ujung batangnya mengandung air
gula dengan kadar mencapai 20. Air gula ini dapat diproses untuk menghasilkan kristal-kristal gula Tim Penulis Penebar Swadaya, 1992.
Kebutuhan gula di Indonesia semakin meningkat seiring dengan peningkatan jumlah penduduk, namun kebutuhan tersebut tidak selalu dapat dipenuhi oleh
produksi dalam negeri. Berbagai upaya telah dilakukan pemerintah guna meningkatkan produksi gula nasional, walaupun upaya tersebut kadang terhambat
oleh berbagai kendala. Salah satu kendala tersebut adalah gangguan OPT, yaitu hama, penyakit, dan gulma Indriyani Sumiarsih, 1994. Apabila kehilangan
hasil akibat serangan OPT dapat diselamatkan maka program peningkatan produksi gula dapat dicapai tanpa perluasan lahan perkebunan tebu.
PT. Gunung Madu Plantations adalah salah satu perkebunan tebu terbesar di luar Jawa. Sampai dengan tahun 2010
PT. GMP memiliki luas areal tebu sekitar
25.000 hektar, dengan produksi gula dalam setahunnya dapat mencapai 190.000 ton. Dengan kata lain, produktivitas perkebunan tebu di PT GMP adalah
sebanyak 7,6 ton gula per hektar. PT GMP telah menerapkan sistem pengelolaan lahan secara intensif sejak
dimulainya perkebunan tebu yaitu sekitar tahun 1975. Sebagai dampak pengelolaan lahan secara intensif, maka belakangan ini muncul berbagai
masalah. Di antara masalah tersebut adalah penurunan aktivitas biota tanah termasuk berbagai kelompok makan nematoda penyokong kesehatan tanah serta
munculnya gangguan OPT yaitu hama dan penyakit yang meliputi nematoda parasit tumbuhan
Anonim, 2011
a
.
Serangan nematoda dapat menyebabkan kerusakan dan kehilangan hasil baik secara kualitatif maupun kuatitatif.
Nematoda menyerang akar sehingga menyebabkan fungsi berbagai sistem yang berperan dalam pertumbuhan tanaman
menjadi tidak normal. Disamping itu, tanaman yang terserang nematoda menjadi
lebih rentan terhadap patogen tanaman seperti bakteri dan cendawan. Pada populasi tinggi nematoda menyebabkan kerusakan yang parah dan bahkan dapat
mematikan tanaman Dropkin, 1992 Aktivitas nematoda tanah dipengaruhi oleh kondisi tanah. Tekstur tanah,
komposisi kimiawi tanah, kebasahan dan suhu tanah, serta bahan organik tanah mempengaruhi perkembangan nematoda.
Berdasarkan sumber makanannya nematoda dapat dikelompokkan menjadi nematoda nir-parasit tumbuhan yang meliputi nematoda pemakan bakteri,
pemakan jamur, nematoda predator dan nematoda parasit tumbuhan herbivora.