SINTESIS DAN KARAKTERISASI SERTA UJI PENDAHULUAN AKTIVITAS ANTIKANKER BEBERAPA SENYAWA ORGANOTIMAH(IV) 4-NITROBENZOAT TERHADAP SEL LEUKEMIA L-1210 (SYNTHESIS, CHARACTERIZATION AND PRELIMINARY ANTICANCER ACTIVITY TEST OF SOME ORGANOTIN(IV) 4-NITROBENZOATES

ABSTRACT
SYNTHESIS, CHARACTERIZATION AND PRELIMINARY
ANTICANCER ACTIVITY TEST OF SOME
ORGANOTIN(IV) 4-NITROBENZOATES
AGAINST LEUKEMIA CELLS L-1210
By
Sherly Nurimani

In this study, it was performed the synthesis of dibutyltin(IV) di-4-nitrobenzoate,
diphenyltin(IV) di-4-nitrobenzoate and triphenyltin(IV) 4-nitrobenzoate
compounds through two-step reactions. The first step was the formation of the
organotin(IV) hydroxide or oxide by reacting the organotin(IV) chloride and
NaOH, then reacting the organotin(IV) hydroxide or oxide with 4-nitrobenzoic
acid to produce the final compound. The results of synthesis were in the form of
white solid with percent yield for dibutyltin(IV) di-4-nitrobenzoate,
diphenyltin(IV) di-4-nitrobenzoate and triphenyltin(IV) 4-nitrobenzoate of 87.27;
88.33, and 86.53%, respectively with optimum reflux time of 4 hours.

The initial compounds and the compounds synthesized were characterized using
IR and UV spectrophotometer to identify the functional group and max contained
in the compound. Furthermore, microelemental analysis was also done using the

microelemental analyzer to compounds synthesized. Based on the data from
microanalysis, the compounds obtained were quite pure as the differences in data
obtained compared to the theoretical calculations of in the range of 1-5%. The
IC50 values obtained from preliminary anticancer activity against leukemia cells
L-1210 for dibutyltin(IV) di-4-nitrobenzoate, diphenyltin(IV) di-4-nitrobenzoate
and triphenyltin(IV) 4-nitrobenzoate
were 18.8; 8.8, and 2.27 µg/mL,
respectively.

ABSTRAK
SINTESIS DAN KARAKTERISASI SERTA UJI PENDAHULUAN
AKTIVITAS ANTIKANKER BEBERAPA SENYAWA
ORGANOTIMAH(IV) 4-NITROBENZOAT
TERHADAP SEL LEUKEMIA L-1210

Oleh
Sherly Nurimani

Pada penelitian ini, telah dilakukan sintesis senyawa dibutiltimah(IV) di-4nitrobenzoat, difeniltimah(IV) di-4-nitrobenzoat dan trifeniltimah(IV) 4nitrobenzoat melalui dua tahap. Tahap pertama yaitu pembentukan senyawa
antara organotimah(IV) hidroksida atau oksida dari organotimah(IV) klorida dan

NaOH, kemudian direaksikan dengan asam 4-nitrobenzoat untuk menghasilkan
senyawa akhir. Dari hasil sintesis diperoleh produk berupa padatan berwarna
putih dengan rendemen 87,27; 88,33, dan 86,53 % untuk masing-masing senyawa
dibutiltimah(IV) di-4-nitrobenzoat, difeniltimah(IV) di-4-nitrobebzoat dan
trifeniltimah(IV) 4-nitrobenzoat dengan waktu refluks optimum 4 jam.
Senyawa awal dan senyawa hasil sintesis dikarakterisasi dengan menggunakan
spektrofotometer IR dan UV untuk melihat gugus fungsi dan max yang terdapat
pada senyawa. Selain itu dilakukan juga analisis unsur dengan menggunakan
microelemental analyzer terhadap senyawa hasil sintesis. Berdasarkan data hasil
mikroanalisis, senyawa yang diperoleh telah murni karena perbedaan data yang
diperoleh dengan perhitungan secara teori masih berkisar 1-5%. Uji pendahuluan
aktivitas antikanker terhadap sel leukemia L-1210 diperoleh nilai IC50 untuk
senyawa dibutiltimah(IV) di-4-nitrobenzoat, difeniltimah(IV) di-4-nitrobenzoat
dan trifeniltimah(IV) 4-nitrobenzoat beturut-turut adalah 18,8; 8,8; dan 2,27
µg/mL.

i

DAFTAR ISI

Halaman
DAFTAR ISI................................................................................................... i
DAFTAR TABEL .......................................................................................... iii
DAFTAR GAMBAR...................................................................................... iv
I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang ..................................................................................... 1
B. Tujuan Penelitian.................................................................................. 4
C. Manfaat Penelitian................................................................................ 5
II. TINJAUAN PUSTAKA
A. Senyawa Organologam ....................................................................... 6
B. Asam 4-nitrobenzoat ........................................................................... 8
C. Timah (Sn) .......................................................................................... 9
D. Senyawa Organotimah ........................................................................ 10
1. Senyawa organotimah halida ....................................................... 11
2. Senyawa organotimah hidroksida dan oksida ............................... 12
3. Senyawa organotimah karboksilat ............................................... 13
4. Aplikasi senyawa organotimah .................................................... 14
E. Analisis Senyawa Organotimah ......................................................... 15
1. Analisis spektroskopi IR senyawa organotimah .......................... 15
2. Analisis spektroskopi UV-Vis senyawa ........................................ 17

3. Analisis unsur dengan menggunakan microelemental
analyzer..........................................................................................19
F. Uji Pendahuluan Aktivitas Antikanker Senyawa Organotimah
Terhadap Sel Leukemia L-1210.......................................................... 19
1. Analisis Probit ............................................................................... 20
G. Kanker ................................................................................................ 21
H. Darah ................................................................................................... 23
1. Sel darah putih (leukosit)................................................................ 24
2. Leukemia ........................................................................................ 25

ii

III. METODOLOGI PENELITIAN
A. Waktu dan Tempat Penelitian..................................................... 27
B. Alat dan Bahan............................................................................ 27
C. Metode Penelitian ....................................................................... 28
1. Sintesis senyawa dibutiltimah(IV) oksida.............................. 28
2. Sintesis senyawa dibutiltimah(IV) di-4-nitrobenzoat ............ 29
3. Sintesis senyawa difeniltimah(IV) dihidroksida.....................29
4. Sintesis senyawa difeniltimah(IV) d-4-nitrobenzoat ............. 30

5. Sintesis senyawa trifeniltimah(IV) hidroksida....................... 31
6. Sintesis senyawa trifeniltimah(IV) 4-nitrobenzat .................. 31
7. Pengujian aktivitas antikanker ............................................... 32
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Sintesis...................................................................................... 35
1. Sintesis senyawa dibutiltimah(IV) oksida.............................. 35
2. Sintesis senyawa dibutiltimah(IV) di-4-nitrobenzoat ............ 36
3. Sintesis senyawa difeniltimah(IV) dihidroksida.................... 37
4. Sintesis senyawa difeniltimah(IV) di-4-nitrobenzoat ............ 38
5. Sintesis senyawa trifeniltimah(IV) hidroksida....................... 40
6. Sintesis senyawa trifeniltimah(IV) 4-nitrobenzat .................. 40
B. Karakterisasi Menggunakan Spektrofotometer IR .................. 42
1. Asam 4-nitrobenzoat .............................................................. 42
2. Senyawa dibutiltimah(IV) oksida dan dibutiltimah(IV)
di-4-nitrobenzoat .................................................................... 42
3. Senyawa difeniltimah(IV) oksida dan difeniltimah(IV)
di-4-nitrobenzoat .................................................................... 44
4. Senyawa trifeniltimah(IV) oksida dan trifeniltimah(IV)
di-4-nitrobenzoat .................................................................... 46
C. Karakterisasi Menggunakan Spektrofotometer UV ................. 48

1. Asam 4-nitrobenzoat .............................................................. 48
2. Senyawa dibutiltimah(IV) oksida dan dibutiltimah(IV)
di-4-nitrobenzoat .................................................................... 49
3. Senyawa difeniltimah(IV) oksida dan difeniltimah(IV)
di-4-nitrobenzoat .................................................................... 50
4. Senyawa trifeniltimah(IV) oksida dan trifeniltimah(IV)
di-4-nitrobenzoat .................................................................... 52
D. Analisis Unsur Menggunakan Microelemental Analyzer ........ 54
E. Uji Aktivitas Antikanker Terhadap Sel Leukemia L-1210 ..... 55
V. SIMPULAN DAN SARAN
A. Simpulan................................................................................... 62
B. Saran ......................................................................................... 63
DAFTAR PUSTAKA.............................................................................. 64
LAMPIRAN............................................................................................. 68

1

I.

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Jumlah penderita penyakit kanker di Indonesia belum diketahui secara pasti,
tetapi peningkatan dari tahun ke tahun dapat dibuktikan sebagai salah satu
penyebab kematian, menurut GLOBOCAN dengan jumlah penduduk 240 juta,
terdapat kasus penyakit kanker sebanyak 292.600 pada tahun 2008
(GLOBOCAN, 2010). GLOBOCAN juga memperkirakan bahwa sampai
dengan tahun 2030, diperikirakan terdapat 21,4 juta pasien terjangkit kanker
setiap tahunnya dan dari jumlah itu 13,2 juta diantaranya diprediksi
meninggal. GLOBOCAN merupakan agensi internasional yang mengadakan
penelitian mengenai jumlah rata-rata penderita kanker di seluruh dunia pada
tahun 2008.
Kanker adalah penyakit degeneratif yang ditandai dengan keadaan sel yang
membagi secara terus-menerus (poliferasi) tanpa kontrol dan memiliki
kemampuan untuk menyebar (metastatis) ke jaringan yang berlainan secara
patologi (Hawariah, 1998a).
Pengobatan konvensional yang umum dilakukan pada penyakit kanker
diantaranya dengan pembedahan, kemoterapi, dan radioterapi (Apantaku,

2

2002). Namun, terapi kanker secara pembedahan tidak dapat dilakukan
khususnya pada sel kanker yang telah menyebar, sementara pengobatan
kemoterapi dan radiasi dapat menimbulkan efek samping meskipun
pengobatan kemoterapi mampu mengeluarkan keseluruhan kanker (Hawariah,
1998b). Oleh karena itu, usaha pencarian agen kanker dengan efek samping
minimum sangat diperlukan dalam pengobatan penyakit kanker, salah satunya
dengan menggunakan senyawa organotimah yang dikenal lebih efektif dan
efisien (Pellerito and Nagy, 2002).
Senyawa organotimah adalah senyawa yang mengandung sedikitnya satu
ikatan kovalen C-Sn. Sebagian besar senyawa organotimah dapat dianggap
sebagai turunan dari RnSnX4-n(n = 1-4) dan diklasifikasikan sebagai mono-,
di-, tri-, dan tetra- organotimah(IV) tergantung pada gugus alkil (R) atau aril
(Ar) yang terikat pada Sn (Pellerito and Nagy, 2002).
Studi aktivitas antikanker senyawa-senyawa organotimah(IV) sebagai bahan
alternatif antikanker telah banyak dilakukan dan masih menarik untuk terus
dilakukan mengingat potensi besar yang terdapat dalam senyawa golongan ini
(Gielen, 1998; de Vos et al., 1998; Gielen, 2003; Glesson et al., 2008; Li et
al., 2008; Rehman et al., 2009; Hadi and Rilyanti, 2010). Diantara berbagai

kompleks organotimah dengan molekul biologi, kompleks organotimah
karboksilat memiliki sifat biologi yang lebih kuat dibanding kompleks lainnya
diantaranya menunjukkan aktivitas biologi sebagai antibakteri (Bonire et al.,
1998; Mahmood et al., 2003), antitumor (De Vos et al., 1998), antifungi
(Ruzika et al., 2002; Mahmood et al., 2003; Hadi et al., 2007; Hadi et al.,

3

2008) dan antikanker (Hadi and Rilyanti, 2010). Oleh sebab itu pada
penelitian ini dipilih senyawa organotimah(IV) karboksilat, dengan asam 4nitrobenzoat sebagai asam karboksilatnya.
Pada penelitian sebelumnya oleh Aini (2010), menggunakan asam salisilat
sebagai asam karboksilatnya diperoleh nilai IC50 γ,86 g/mL, Sari (2011),
menggunakan asam benzoat sebagai asam karboksilatnya diperoleh nilai IC50
5,γβ g/mL, dan Elianasari (2012), menggunakan asam 4-hidroksibenzoat
sebagai asam karboksilatnya diperoleh nilai IC50 β,4β g/mL. Dari ketiga
penelitian di atas, suatu senyawa dikatakan aktif sebagai antikanker apabila
memiliki nilai IC50 ≤ 50 µg/mL (Mans et al., 2000). Asam 4-nitrobenzoat
dapat membentuk ikatan dengan dipol atau ion lain baik yang memiliki
kerapatan elektron tinggi maupun rendah dibandingkan dengan asam benzoat,
asam salisilat, dan asam 4-hidroksibenzoat. Perubahan sifat kimia fisika

tersebut berpengaruh terhadap aktivitas analgesik dari senyawa turunan nitro
benzoat (Petra, 2012). Sehingga pada penelitian kali ini, diharapkan senyawa
organotimah(IV) 4-nitrobenzoat mempunyai aktivitas sebagai antikanker dan
memiliki nilai IC50 lebih kecil dari penelitian sebelumnya.
Penelitian ini dilakukan untuk mensintesis dan mengkarakterisasi senyawa
dibutiltimah(IV) di-4-nitrobenzoat, difeniltimah(IV) di-4-nitrobenzoat dan
trifeniltimah(IV) 4-nitrobenzoat. Senyawa yang diperoleh dikarakterisasi
menggunakan spektrofotometer IR, spektrofotometer UV-Vis, dan
microelemental analyzer. Masing-masing senyawa dibutiltimah(IV) oksida,
difeniltimah(IV) dihidroksida dan trifeniltimah(IV) hidroksida direaksikan

4

dengan asam 4-nitrobenzoat sebagai asam karboksilatnya, menghasilkan
dibutiltimah(IV) di-4-nitrobenzoat, difeniltimah(IV) di-4-nitrobenzoat, dan
trifeniltimah(IV) 4-nitrobenzoat. Ketiga senyawa tersebut diuji dan
dibandingkan aktivitas antikankernya terhadap sel leukemia L-1210. Setelah
diketahui aktivitas antikankernya kemudian dibandingkan dengan asam 4hidroksibenzoat (Elianasari, 2012), asam benzoat (Sari, 2011) dan asam
salisilat (Aini, 2010) dari penelitian sebelumnya.
Prosedur untuk sintesis masing-masing senyawa organotimah(IV) karboksilat

pada penelitian ini diadopsi dari prosedur yang dilakukan oleh Bonire et al.
(1998); Szorcsik et al. (2002); Hadi et al. (2008); Hadi et al. (2009); Hadi and
Rilyanti (2010), sedangkan prosedur untuk pengujian aktivitas antikanker
diadopsi dari prosedur yang dilakukan oleh Katrin dan Winarno (2008).
Bila telah diketahui dan diperoleh data aktivitas awalnya, maka untuk
penelitian selanjutnya, akan lebih mudah pengembangannya sebagai new
metal-based drugs yang akan sangat berguna dan memegang peranan penting
di bidang farmasi dan kedokteran.

B. Tujuan Penelitian
Tujuan dari penelitian ini adalah sebagai berikut:
1. Mensintesis senyawa dibutiltimah(IV) di-4-nitrobenzoat, difeniltimah(IV)
di-4-nitrobenzoat dan trifeniltimah(IV) 4-nitrobenzoat.
2. Mengkarakterisasi senyawa awal dibutiltimah(IV) diklorida,
difeniltimah(IV) diklorida dan trifeniltimah(IV) klorida serta senyawa hasil

5

sintesis dibutiltimah(IV) di-4-nitrobenzoat, difeniltimah(IV) di-4nitrobenzoat dan trifeniltimah(IV) 4-nitrobenzoat, dengan rendemen
tertinggi dari variasi waktu refluks menggunakan spektofotometer IR, UVVis, dan microelemental analyzer (tidak termasuk asam 4-nitrobenzoat).
3. Menguji dan membandingkan aktivitas antikanker dari senyawa
dibutiltimah(IV) di-4-nitrobenzoat, difeniltimah(IV) di-4-nitrobenzoat dan
trifeniltimah(IV) 4-nitrobenzoat terhadap sel leukemia L-1210.

C. Manfaat Penelitian
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan sumbangsih terhadap
perkembangan ilmu pengetahuan khususnya di bidang organologam dan
menambah jenis senyawa organologam yang dapat digunakan dalam bidang
farmasi dan kedokteran yaitu sebagai new metal-based drugs (obat berbasis
logam).

6

II.

TINJAUAN PUSTAKA

A. Senyawa Organologam

Senyawa organologam merupakan senyawa dimana minimal terdapat satu
atom karbon dari gugus organik yang berikatan langsung dengan logam pusat.
Istilah organologam biasanya didefinisikan agak longgar, dan senyawa yang
mengandung ikatan karbon dengan fosfor, arsen, silikon ataupun boron
termasuk dalam kategori ini. Tetapi untuk senyawa yang mengandung ikatan
antara atom logam dengan oksigen, belerang, nitrogen ataupun dengan suatu
halogen tidak termasuk sebagai senyawa organologam. Sebagai contoh suatu
alkoksida seperti (C3H7O4)Ti tidaklah termasuk senyawa organologam, karena
gugus organiknya terikat pada Ti melalui atom oksigen. Sedangkan senyawa
(C6H5)Ti(OC3H7)3 adalah senyawa organologam karena terdapat satu ikatan
langsung antara karbon C dari gugus fenil dengan logam Ti. Dari bentuk
ikatan pada senyawa organologam, senyawa ini dapat dikatakan sebagai
jembatan antara kimia organik dan anorganik (Cotton dan Wilkinson, 1989).
Berdasarkan ikatannya, senyawa organologam dapat dikelompokkan menjadi
tiga golongan:

7

1. Senyawa ionik dari logam elektropositif
Senyawa ini terbentuk bila suatu radikal organik terikat pada logam dengan
keelektropositifan yang sangat tinggi, misalnya logam alkali atau alkali
tanah. Senyawa-senyawa ini tidak stabil di udara, mudah terhidrolisis
dalam air dan tidak larut dalam pelarut hidrokarbon. Kestabilannya
bergantung pada kestabilan radikal organiknya.
2. Senyawa organologam dengan ikatan σ (sigma)
Senyawa ini memiliki ikatan σ dua pusat dua elektron yang terbentuk
antara gugus organik dan atom logam dengan keelektropositifan rendah.
Pada umumnya, senyawa organologam dengan ikatan ini memiliki ikatan
utama kovalen dan sifat kimianya adalah dari kimiawi karbon yang
disebabkan karena beberapa faktor, yaitu:
a. Kemungkinan penggunaan orbital d yang lebih tinggi, seperti pada
SiR4 yang tidak tampak dalam CR4.
b. Kemampuan donor alkil atau aril dengan pasangan elektron
menyendiri.
c. Keasaman Lewis sehubungan dengan kulit valensi yang tidak penuh
seperti pada BR2 atau koordinasi tak jenuh seperti ZnR2.
d. Pengaruh perbedaan keelektronegatifan antara ikatan logam-karbon
(M-C) atau karbon-karbon (C-C).
3. Senyawa organologam dengan ikatan nonklasik
Dalam senyawa organologam dengan ikatan nonklasik ini terdapat jenis
ikatan antara logam dengan karbon yang tidak dapat dijelaskan secara

8

ikatan ionik atau pasangan elektron. Senyawa ini terbagi menjadi dua
golongan:
a. Senyawa organologam yang terbentuk antara logam-logam transisi
dengan alkena, alkuna, benzene, dan senyawa organik tak jenuh
lainnya.
b. Senyawa organologam yang memiliki gugus-gugus alkil berjembatan.
(Cotton dan Wilkinson, 1989).

B. Asam 4-nitrobenzoat

Asam 4-nitrobenzoat adalah senyawa organik dengan rumus molekul
C6H4(COOH)NO2, berat molekul sebesar 167,2 gram/mol, yang memiliki titik
leleh sebesar 237°C. Asam 4-nitrobenzoat berupa serbuk yang berwarna putih
kekuningan yang dapat digunakan sebagai pewarna, kosmetik dan obatobatan. Senyawa ini larut dalam metanol dan dietil eter (Wikipedia, 2012).

Gambar 1. Struktur asam 4-nitrobenzoat (Wikipedia, 2012).

Adanya perbedaan keelektronegatifan atom C dengan atom lain, seperti atom
C dan N akan membentuk distribusi elektron tidak simetrik atau dipol yang
mampu membentuk ikatan dengan dipol atau ion lain baik yang memiliki
kerapatan elektron tinggi maupun rendah. Struktur yang mengandung gugus

9

N-basa dan karbonil dalam larutan dapat membentuk siklik akibat adanya
daya tarik-menarik dipol-dipol. Dalam bentuk siklik inilah obat-obat tersebut
berinteraksi dengan reseptor analgesik, bila gugus C=O dihilangkan atau
diganti dengan gugus lain misalnya CH2, aktivitas analgesiknya akan hilang.
Hal ini disebabkan oleh hilangnya daya tarik-menarik dipol-dipol dan
kemampuan membentuk siklik, sehingga senyawa tidak dapat berinteraksi
secara serasi dengan reseptor analgesik (Petra, 2012).

C. Timah (Sn)

Timah atau Stannum (Sn) memiliki nomor atom 50 merupakan logam lemah
yang berwarna putih keperakan yang sukar dioksidasi oleh udara pada
temperatur kamar. Dalam tabel periodik timah termasuk golongan IV A dan
periode 5 bersama-sama dengan karbon, silikon, germanium dan timbal.
Timah lebih bersifat elektronegatif dibandingkan timbal, tetapi lebih bersifat
elektropositif dibandingkan karbon, silikon dan germanium (Dainith, 1990).
Timah merupakan logam putih dan melebur pada suhu 232°C. Timah larut
dalam asam dan basa, senyawa–senyawa oksidanya dengan asam atau basa
akan membentuk garam. Timah tidak reaktif terhadap oksigen bila dilapisi
oleh oksida film dan tidak reaktif terhadap air pada suhu biasa, tetapi akan
mempengaruhi kilauannya (Svehla,1985).
Timah memiliki tiga bentuk alotrop, yaitu timah abu-abu (α), timah putih ( )
dan timah rombik ( ). Pada suhu ruang, timah lebih stabil sebagai logam
timah putih (-Sn) dalam bentuk tetragonal. Sedangkan pada suhu rendah,

10

timah putih berubah menjadi timah abu-abu (-Sn) berbentuk intan kubik
berupa nonlogam. Perubahan ini terjadi cepat karena timah membentuk
oksida film. Peristiwa ini dikenal sebagai plak timah atau timah plague.
Timah putih mempunyai densitas yang lebih tinggi daripada timah abu-abu
(Petruci, 1999).
Timah dalam bentuk senyawaannya memiliki tingkat oksidasi +2 dan +4,
tingkat oksidasi +4 lebih stabil dari pada +2. Pada tingkat oksidasi +4, timah
menggunakan seluruh elektron valensinya, yaitu 5s2 5p2 dalam ikatan,
sedangkan pada tingkat oksidasi +2, timah hanya menggunakan elektron
valensi 5p2 saja. Tetapi perbedaan energi antara kedua tingkat ini rendah
(Cotton dan Wilkinson, 1989).

D. Senyawa Organotimah

Senyawa organotimah adalah senyawa-senyawa yang mengandung sedikitnya
satu ikatan kovalen C-Sn. Sebagian besar senyawa organotimah dapat
dianggap sebagi turunan dari RnSnX4-n (n = 1-4) dan diklasifikasikan sebagai
mono-, di-, tri-, dan tetra- organotimah(IV) tergantung pada jumlah gugus
alkil (R) atau aril (Ar) yang terikat. Gugus (R) pada senyawaan organotimah
biasanya metil, butil, oktil atau fenil, sedangkan gugus (X) biasanya adalah
klorida, fluorida, oksida, hidroksida, suatu karboksilat atau suatu thiolat
(Pellerito and Nagy, 2002).
Ikatan Sn-X memiliki derajat ion tertentu bergantung pada anion (X) dan alkil
(R). Sebagai contoh, titik leleh dari (CH3)3SnX bervariasi untuk: fluorida

11

(300ºC) > klorida (37ºC) > bromida (27ºC) > iodida (3,4ºC) (Tayer, 1988).
Kecenderungan terhidrolisis dari senyawa organotimah lebih lemah
dibandingkan senyawa Si atau Ge yang terikat dan ikatan Sn-O dapat bereaksi
dengan larutan asam. Senyawa organotimah tahan terhadap hidrolisis atau
oksidasi pada kondisi normal walaupun dibakar menjadi SnO2, CO2, dan H2O.
Kemudahan putusnya ikatan Sn-C oleh halogen atau reagen lainnya bervariasi
berdasarkan gugus organiknya dan urutannya meningkat dengan urutan: Bu
(paling stabil) < Pr < et < me < vinil < Ph < Bz < alil < CH2CN < CH2CO2R
(paling tidak stabil).
Penggabungan SnR4 melalui gugus alkil tidak teramati sama sekali. Senyawasenyawa dengan rumus R3SnX atau R2SnX2 tergabung secara luas melalui
jembatan X sehingga meningkatkan bilangan koordinasi Sn menjadi lima,
enam atau bahkan tujuh. Dalam hal ini, F lebih efektif dibandingkan unsurunsur halogen lainnya. Sebagai contoh Me3SnF memiliki struktur trigonal
bipiramida, Me2SnF2 memiliki struktur oktahedral sedangkan jembatan Cl
yang lebih lemah memiliki struktur terdistorsi (Van der Weij, 1981).
1. Senyawa organotimah halida
Senyawa organotimah halida dengan rumus umum RnSnX4-n (n = 1-3; X = Cl-,
Br-, I-) pada umumnya merupakan padatan kristalin dan sangat reaktif.
Organotimah halida ini dapat disintesis secara langsung melalui logam timah,
Sn(II) atau Sn(IV) dengan alkil halida yang reaktif. Metode ini secara luas
digunakan untuk pembuatan dialkiltimah dihalida. Sintesis langsung ini
ditinjau ulang oleh Murphy dan Poller melalui persamaan reaksi:

12

2 EtI + Sn

Et2Sn + I2

Metode lain yang sering digunakan untuk pembuatan organotimah halida
adalah reaksi disproporsionasi tetraalkiltimah dangan timah(IV) klorida.
Caranya adalah dengan mengubah perbandingan material awal, seperti
ditunjukkan pada persamaan reaksi berikut:
3 R4Sn +
R4Sn +

SnCl4
SnCl4

4 R3SnCl
2 R2SnCl2

Senyawa organotimah klorida digunakan sebagai kloridanya dengan memakai
logam halida lain yang sesuai seperti ditunjukkan pada persamaan reaksi
berikut:
R4SnCl4-n + (4-n) MX

R4SnX4-n + (4-n) MCl

(X = F, Br atau I; M = K, Na, NH4) (Cotton dan Wilkinson, 1989).

2. Senyawa organotimah hidroksida dan oksida

Produk kompleks yang diperoleh melalui hidrolisis dari trialkiltimah halida
dan senyawa yang berikatan R3SnX, merupakan rute utama pada trialkiltimah
oksida dan trialkiltimah hidroksida. Prinsip tahapan intermediet ditunjukkan
pada reaksi di bawah ini:

13

OH
R3SnX

R3Sn

XR3SnOSnR3X

XR3SnOSnR3OH

X

R2SnO

atau
R3SnOH

(Cotton dan Wilkinson, 1989).

3. Senyawa organotimah karboksilat
Senyawa organotimah karboksilat pada umumnya dapat disintesis melalui
dua cara yaitu dari organotimah oksida atau organotimah hidroksidanya
dengan asam karboksilat, dan dari organotimah halidanya dengan garam
karboksilat. Metode yang biasa digunakan untuk sintesis organotimah
karboksilat adalah dengan menggunakan organotimah halida sebagai material
awal. Organotimah halida direaksikan dengan garam karboksilat dalam
pelarut yang sesuai, biasanya aseton atau karbon tetraklorida. Reaksinya
adalah sebagai berikut:

RnSnCl4-n + (4-n) MOCOR

RnSn(OCOR)4-n + (4-n) MCl

Reaksi esterifikasi dari asam karboksilat dengan organotimah oksida atau
hidroksida dilakukan melalui dehidrasi azeotropik dari reaktan dalam toluena,
seperti ditunjukkan pada reaksi berikut:
R2SnO + 2 R’COOH

R2Sn(OCOR’)2 + H2O

R3SnOH + R’COOH

R3SnOCOR’ + H2O

(Cotton dan Wilkinson, 1989).

14

4. Aplikasi senyawa organotimah
Senyawa organotimah memiliki aplikasi yang luas dalam kehidupan seharihari. Aplikasi senyawa organotimah dalam industri antara lain sebagai
senyawa stabilizer polivinilklorida, pestisida nonsistematik, katalis
antioksidan, antifouling agents dalam cat, stabilizer pada plastik dan karet
sintetik, stabilizer untuk parfum dan berbagai macam peralatan yang
berhubungan dengan medis dan gigi. Untuk penggunaan tersebut, kurang
lebih 25.000 ton timah dipergunakan per tahun (Pellerito and Nagy, 2002).
Mono dan diorganotimah digunakan secara luas sebagai stabilizer
polivinilklorida untuk mengurangi degradasi polimer polivinilklorida
tersebut. Empat tipe utama penstabil timah berdasarkan gugus alkilnya yaitu:
oktil, butil, fenil dan metil. Dimana oktiltimah memiliki kandungan timah
paling sedikit, paling kurang efisien. Ligan-ligan utama yang digunakan
untuk membedakan berbagai penstabil timah yaitu, asam tioglikolat ester dan
asam karboksilat. Senyawa organotimah yang paling umum digunakan
sebagai katalis dalam sintesis kimia yaitu katalis mono dan diorganotimah.
Senyawa organotimah merupakan senyawa yang baik untuk pembuatan
polisilikon, poliuretan dan untuk sintesis poliester. Senyawa organotimah
ditemukan berikutnya antara lain sebagai biocide (senyawa yang mudah
terdegradasi), sebagai pestisida yang pertama kali diperkenalkan di Jerman
yaitu dari senyawa trifeniltimah asetat pada akhir 1950-an (Cotton dan
Wilkinson, 1989).

15

Dalam beberapa penelitian, diketahui senyawa organotimah(IV) karboksilat
yang menunjukkan sifat sebagai antimikroorganisme sehingga dapat
berfungsi sebagai antifungi dan antimikroba (Bonire et al., 1998). Diketahui
bahwa kompleks di- dan triorganotimah halida dengan berbagai ligan yang
mengandung nitrogen, oksigen, dan sulfur memiliki aktivitas biologi dan
farmakologi dan digunakan sebagai fungisida dalam pertanian, bakterisida,
dan agen antitumor (Jain et al., 2003).

E. Analisis Senyawa Organotimah

Pada penelitian yang akan dilakukan kemurnian senyawa organotimah dari
hasil sintesis dikarakterisasi menggunakan spektroskopi IR, UV-Vis, dan
microelemental analyzer.

1. Analisis spektroskopi IR senyawa organotimah
Pada spektroskopi IR, radiasi infra merah dengan rentangan panjang
gelombang dan intensitas tertentu dilewatkan terhadap sampel. Molekulmolekul senyawa pada sampel akan menyerap seluruh atau sebagian radiasi
itu. Penyerapan ini berhubungan dengan adanya sejumlah vibrasi yang
terkuantisasi dari atom-atom yang berikatan secara kovalen pada molekulmolekul itu. Penyerapan ini juga berhubungan dengan adanya perubahan
momen dari ikatan kovalen pada waktu terjadinya vibrasi. Bila radiasi itu
diserap, radiasi itu akan diteruskan. Detektor akan menangkap radiasi yang
diteruskan itu dan mengukur intensitasnya. Informasi intensitas akhir radiasi
tiap panjang gelombang kemudian ditampilkan sebagai grafik panjang

16

gelombang versus intensitas radiasi yang dinamakan spektra (Supriyanto,
1999).
Karena setiap tipe ikatan yang berbeda mempunyai sifat frekuensi vibrasi
yang berbeda, dan karena tipe ikatan yang sama dalam dua senyawa berbeda
terletak dalam lingkungan yang sedikit berbeda, maka tidak ada dua molekul
yang berbeda strukturnya akan mempunyai bentuk spektrum IR yang tepat
sama (Sastrohamidjojo, 1988).
Dari daerah IR yang luas, yang biasa dikenal dan dipakai untuk
spektrofotometri IR dengan batas bilangan gelombang (v) 4000-670 cm-1.
Terdapat dua jenis informasi yang dapat dimanfaatkan dalam spektrum IR ,
yaitu informasi daerah gugus fungsi (4000-1600 cm-1). Dengan menggunakan
analisis spektroskopi IR terhadap senyawa organotimah karboksilat, dapat
ditunjukkan adanya serapan vibrasi ulur Sn-O pada bilangan gelombang 500400 cm-1 dan Sn-C pada bilangan gelombang 600-500 cm-1. Selain itu dapat
pula ditunjukkan beberapa karakteristik absorpsi gelombang IR dari asam
karboksilat seperti yang terdapat pada Tabel 1.

17

Tabel 1. Serapan karakteristik IR untuk asam-asam karboksilat

Tipe Getaran
Uluran O-H
Uluran C=O
Uluran C-O
Tekukan O-H
Tekukan O-H dimer
(Fesenden dan Fessenden, 1986).

Posisi serapan
-1

cm
2860 – 3300
1700 - 1725
1210 – 1330
1300 – 1440
~925

m
3,0 – 3,5
5,8 – 5,88
7,5 – 8,26
6,94 – 7,71
~10,8

2. Analisis spektroskopi UV-Vis senyawa organotimah
Spektroskopi sinar UV-Vis akan mengalami transisi elektronik sebagai akibat
penyerapan radiasi sinar UV dan sinar tampak oleh senyawa yang dianalisis.
Transisi tersebut pada umumnya antara orbital ikatan atau pasangan bebas dan
orbital bukan ikatan atau orbital anti ikatan. Agar elektron dalam ikatan sigma
tereksitasi maka diperlukan energi paling tinggi dan akan memberikan serapan
pada 120-200 nm (1 nm =10-7 cm =10Ǻ ). Daerah ini dikenal sebagai daerah
ultraviolet hampa, karena pada pengukuran tidak boleh ada udara, sehingga
sukar dilakukan dan relatif tidak banyak memberikan keterangan untuk
penentuan struktur.
Di atas 200 nm merupakan daerah eksitasi elektron dari orbital p, orbital d dan
orbital π terutama sistem π terkonjugasi mudah pengukurannya dan
spektrumnya memberikan banyak keterangan. Kegunaan spektrofotometer
UV-Vis ini terletak pada kemampuannya mengukur jumlah ikatan rangkap
atau konjugasi aromatik di dalam suatu molekul. Spektrofotometer ini dapat
secara umum membedakan diena terkonjugasi dari diena tidak terkonjugasi,
diena terkonjugasi dari triena dan sebagainya. Letak serapan dapat

18

dipengaruhi oleh substituen dan terutama yang berhubungan dengan
substituen yang menimbulkan pergeseran dalam diena terkonjugasi dan
senyawa karbonil (Sudjadi,1985).
Pada spektroskopi UV-Vis, spektrum tampak (vis) terentang dari sekitar 400
nm (ungu) sampai 750 (merah ) sedangkan spektrum ultraviolet (UV)
terentang dari 200-400 nm. Informasi yang diperoleh dari spektroskopi ini
adalah adanya ikatan rangkap atau ikatan terkonjugasi dan gugus kromofor
yang terikat pada ausokrom. Semua molekul dapat menyerap radiasi dalam
daerah UV-Vis karena mereka mengandung elektron, baik sekutu maupun
menyendiri, yang dapat dieksitasikan ke tingkat energi yang lebih tinggi.
Panjang gelombang terjadinya adsorpsi tergantung pada kekuatan elektron
terikat dengan kuat dan diperlukan radiasi berenergi tinggi atau panjang
gelombang yang pendek atau eksitasinya. Hal ini berarti suatu elektron dalam
orbital (bonding) dieksitasikan ke orbital antibonding.
Identifikasi kualitatif senyawaan organik dalam daerah ini jauh lebih terbatas
daripada dalam daerah inframerah, dikarenakan pita serapan pada daerah UVVis terlalu lebar dan kurang terperinci. Tetapi gugus-gugus fungsional
tertentu seperti karbonil, nitro, dan sistem tergabung menunjukan puncak
karakteristik dan dapat diperoleh informasi yang berguna mengenai ada
tidaknya gugus tersebut dalam suatu molekul (Day dan Underwood, 1998).

19

3. Analisis unsur dengan menggunakan microelemental analyzer
Mikroanalisis adalah penentuan kandungan unsur penyusun suatu senyawa
yang dilakukan dengan menggunakan microelemental analyzer. Unsur yang
umum ditentukan adalah karbon (C), hidrogen (H), nitrogen (N) dan sulfur
(S). Sehingga alat yang biasanya digunakan untuk tujuan mikroanalisis ini
dikenal sebagai CHNS microelemental analyzer. Hasil yang diperoleh dari
mikroanalisis ini dibandingkan dengan perhitungan secara teori. Walaupun
seringnya hasil yang diperoleh berbeda, perbedaan biasanya antara 1–5 %,
namun analisis ini tetap sangat bermanfaat untuk mengetahui kemurnian suatu
sampel (Costech Analytical Technologies, 2011).

F. Uji Pendahuluan Aktifitas Antikanker Senyawa Organotimah
terhadap Sel Leukemia-L-1210

Salah satu cara uji pendahuluan dalam penentuan senyawa yang berkhasiat
sebagai antikanker adalah dengan uji daya hambat terhadap pertumbuhan sel
leukemia L-1210. Sel leukemia L-1210 merupakan sel tumor yang tumbuh
dengan cepat dengan presentase sel hidup cukup tinggi dan memiliki tingkat
pertumbuhan 100 %. Jika suatu zat toksisk terhadap sel leukemia L-1210,
pada umunya bersifat toksik terhadap sel-sel abnormal lainnya (Bulan dkk.,
2004). Sel leukemia L-1210 yang menjadi target uji aktivitas antikanker ini
adalah sel leukemia yang diperoleh dari sel limfosit tikus putih betina jenis
DBA (Dilute Brown Non-Agouti Mouse) yang berumur 8 bulan. Sel leukemia
ini diambil dari The Institute of Physical and Chemical Research, Japan yang
secara rutin telah digunakan untuk uji senyawa antikanker, baik in vitro

20

maupun in vivo (Hoshino et al., 1966). Ekstrak kasar dari suatu bahan alam
atau aktivitas isolat (kristal) dapat diuji secara langsung dalam biakan sel
leukemia L-1210. Sebagai ukuran aktivitas sitotoksik ditentukan nilai IC50
dari ekstrak kasar tersebut. Aktivitas isolat (kristal) dikatakan aktif sebagai
anti kanker bila nilai IC50 ≤ 50 µg/mL (Mans et al., 2000).
1. Analisis Probit

Analisis probit adalah model regresi khusus yang digunakan untuk
menganalisis variabel respon binomial. Ide analisis probit pada mulanya
dipublikasikan dalam majalah Science oleh Cester Ittner Bliss pada tahun
1934 yang digunakan untuk mengetahui efektivitas suatu pestisida dengan
memplotkan kurva hubungan antara dosis dan respon pada berbagai
konsenterasi, dan diperoleh kurva berbentuk sigmoid (Greenberg, 1980).
Bliss mengembangkan ide untuk mengubah kurva sigmoid tersebut ke dalam
persamaan garis lurus. Pada tahun 1952 seorang profesor statistik dari
Edinburgh yang bernama David Finney menggunakan ide Bliss dan menulis
buku yang berjudul Analisis Probit. Sampai saat ini analisis probit masih
digunakan untuk mengetahui hubungan antara dosis dan respon (Cochran and
David, 1979)

Analisis probit adalah jenis regresi yang digunakan untuk menganalisis
variabel respon binomial, dengan mengubah kurva dosis respon sigmoid untuk
garis lurus yang kemudian dapat dianalisis dengan regresi baik melalui
kuadrat terkecil atau kemungkinan maksimum. Regresi adalah sebuah metode

21

pas garis untuk membandingkan hubungan antara variabel respon atau
variabel dependen (y) terhadap variabel independen (x).
y= a + bx + e
dimana:

a= y-intercept
b= kemiringan garis
e= kesalahan jangka

variavel respon binomial hanya mengacu pada variabel respon dengan dua
hasil. Analisis probit dapat dilakukan dengan salah satu teknik berikut ini:
1. menggunakan tabel untuk memperkirakan probit
2. menghitung probit dan koefisien regresi
3

memiliki paket stastitical seperti SPS

(Kim, 2011).

G. Kanker

Kanker adalah suatu penyakit yang disebabkan oleh pertumbuhan sel-sel
jaringan tubuh yang tidak normal. Sel-sel kanker akan berkembang dengan
cepat, tidak terkendali, dan akan terus membelah diri, selanjutnya menyusup
ke jaringan sekitarnya (invasive) dan terus menyebar melalui jaringan ikat,
darah, dan menyerang organ-organ penting serta syaraf tulang belakang.
Dalam keadaan normal, sel hanya akan membelah diri jika ada penggantian
sel-sel yang telah mati dan rusak. Sebaliknya sel kanker akan membelah terus
meskipun tubuh tidak memerlukannya, sehingga akan terjadi penumpukan sel
baru yang disebut tumor ganas. Penumpukan sel tersebut mendesak dan
merusak jaringan normal, sehingga mengganggu organ yang ditempatinya.
Kanker dapat terjadi diberbagai jaringan dalam berbagai organ di setiap tubuh,

22

mulai dari kaki sampai kepala. Bila kanker terjadi di bagian permukaan
tubuh, akan mudah diketahui dan diobati. Namun bila terjadi di dalam tubuh,
kanker itu akan sulit diketahui dan kadang-kadang tidak memiliki gejala.
Kalaupun timbul gejala, biasanya sudah stadium lanjut sehingga sulit diobati
(Simon, 2003).

Gambar 2. Perkembangan sel normal menjadi sel kanker (Anand and
Kunnumakkara, 2008).
Banyak zat kimia yang bersifat karsinogenik, diperkirakan bahwa hingga
sekitar 80% kanker pada manusia disebabkan oleh faktor lingkungan,
khususnya zat kimia. Kontak dengan senyawa kimia dapat terjadi akibat
pekerjaan seseorang (misal benzena, asbes, dan alkohol). Bahan kimia seperti
ini bisa menyebabkan kanker dengan menstimulasi tingkat pembelahan sel.
Patagonis kanker dapat dilacak balik ke mutasi DNA yang berdampak pada
pertumbuhan sel dan metastatis. Zat yang menyebabkan mutasi DNA dikenal
sebagai mutagen yang menyebabkan kanker disebut dengan karsinogen. Zatzat kimia yang bersifat karsinogenik dapat dilihat pada Tabel 2.

23

Tabel 2. Beberapa zat kimia bersifat karsinogenik.
Kelompok
Hidrokarbon aromatik polisiklik
Amin aromatik
Berbagai obat
Nitrosamin
Senyawa yang terdapat di alam
Senyawa anorganik
( Murray et al., 2003).

Senyawa
Benzo [ ]piren, dimetilbenzantrasen
2-Asetilaminoflouren, N-metil-4aminoazobenzen (MAB)
Zat pengalkilasi (misal, siklofasmid),
Dietilstilbestrol
Dimetilnitrosamin, dietilnitrosamin
Daktinomisin, aflatoksin B1
Aren, asbes, berilium, cadmium

H. Darah

Darah adalah jaringan cair yang terdiri atas atas dua bagian yaitu plasma darah
dan sel darah. Komponen cair darah yang disebut plasma darah terdiri dari 91
sampai 92 % air yang berperan sebagai medium tranpor, dan 8 sampai 9 % zat
padat. Darah berperan sebagai medium pertukaran pertukaran antara sel yang
terfiksasi dalam tubuh dan lingkungan luar, serta memiliki sifat protektif
terhadap organisme dan khususnya terhadap darah sendiri (Pearce, 2006).

Gambar 3. Unsur Sel Darah (Price dan Wilson, 2005).

24

Sel darah terdiri dari tiga jenis yaitu trombosit, leukosit, dan eritrosit. Eritrosit
berfungsi sebagai transpor atau pertukaran oksigen dan karbondioksida,
leukosit berfungsi untuk mengatasi infeksi, dan trombosit untuk hemostatis.
Sel-sel ini memiliki umur yang terbatas, sehingga diperlukan pembentukan
optimal yang konstan untuk mempertahankan jumlah yang diperlukan untuk
memenuhi kebutuhan jaringan (Price dan Wilson, 2005).

1. Sel darah putih (leukosit)

Sel darah putih disebut juga merupakan unit sistem pertahanan tubuh yang
bergerak aktif. Sel darah putih (leukosit) dibentuk di sumsum tulang
(granulosit, monosit, serta sedikit limfosit) dan sebagian lagi dijaringan limfe
(limfosit dan sel-sel plasma). Setelah dibentuk sel-sel ini diangkut dalam
darah menuju ke bagian tubuh yang membutuhkannya. Fungsi utama sel
darah putih (leukosit) secara khusus dikirim menuju daerah yang mengalami
infeksi dan mengalami peradangan, dengan demikian sel darah putih dapat
menyediakan pertahanan yang cepat dan kuat terhadap agen-agen infeksius.
Sel darah putih (leukosit) jumlahnya lebih sedikit dalam darah daripada
eritrosit. Sel ini dapat bermigrasi dengan bebas dari pembuluh darah ke
jaringan dan kembali lagi ke pembuluh darah dengan gerakan amuboid.
Jumah rata-rata sel dara putih (leukosit) dalam sirkulasi berfluktuasi antara
5000 sampai 10000/mm3 darah. Jenis-jenis sel darah putih yang sudah
diidentifikasikan dalam perifer darah adalah:
1. Polimorfonuclear leukosit terdiri dari:
a. Netrofil (50-75 % sel darah putih total)

25

b. Eosinofil 1-2 %
c. Basofil 0,5-1 %
2. Mononuclear leukosit terdiri dari:
a. Monosit 6 %
b. Limfosit 25-33 %
Leukosit bersifat amuboid atau tidak memiliki bentuk yang tetap. Orang yang
kelebihan leukosit menderita penyakit leukemia, sedangkan orang yang
kekurangan leukosit menderita penyakit leukopenia (Price dan Wilson, 2005).

2. Leukemia

Leukemia berasal dari bahasa Yunani disebut ‘leukos’ yang artinya putih dan
‘aima’ yang berarti darah dan lebih dikenal sebagai kanker darah dan termasuk
dalam klasifikasi penyakit kanker pada sumsum tulang atau darah yang
ditandai dengan sel-sel pembentuk darah yang memiliki perbanyakan yang
tidak normal atau transformasi maglina pada sumsum tulang atau jaringan
limpoid, biasanya terjadi pada sel darah putih atau leukosit. Penyakit
leukemia mempunyai beberapa jenis tipe yang berbeda-beda. Adanya tipetipe ini memudahkan melakukan pengobatan, penyakit leukimia memiliki tipe
sendiri sesuai dengan gejalanya. Penggolongannya didasarkan pada kecepatan
dan jenis sel darah putih yang terlibat.
Berikut ini adalah beberapa tipe-tipe penyakit leukimia yang dapat dikenali
sebagai berikut:

26

a. Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) yaitu suatu bentuk leukemia parah
dan cepat prosesnya biasanya banyak terjadi pada anak-anak yang
melibatkan jenis sel darah putih limposit.
b. Acute Myelongenous Leukemia (AML) yaitu bentuk leukemia parah dan
cepat prosesnya yang melibatkan jenis sel darah putih myelosit.
c. Chronic Lymphoblastic Leukemia (CLL) yaitu suatu bentuk leukemia yang
agak lambat prosesnya yang melibatkan jenis sel darah putih limposit,
banyak diderita oleh orang dewasa yang memiliki umur lebih dari 55
tahun.
d. Chronic Myelongenous Leukemia (CML) yaitu suatu bentuk leukemia
yang agak lambat prosesnya melibatkan jenis sel darah putih myelosit,
biasanya penderita tidak merasakan gejalanya (Aneahira, 2010).

27

III.

METODOLOGI PENELITIAN

A. Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilakukan pada bulan April sampai Juli 2013 di Laboratorium
Kimia Anorganik FMIPA Universitas Lampung. Analisis senyawa
menggunakan spektrofotometer IR dilakukan di Laboratorium Instrumentasi
FMIPA Universitas Islam Indonesia dan analisis dengan spektrofotometer
UV-Vis dilakukan di Laboratorium Kimia Anorganik dan Fisik FMIPA
Universitas Lampung. Analisis unsur dengan menggunakan microelemental
analyzer dilakukan di School of Chemical and Food Technology, Universiti
Kebangsaan Malaysia. Sedangkan uji aktivitas antikanker dilakukan di
Laboratorium Kimia Bahan Alam, Pusat Aplikasi Teknologi Isotop dan
Radiasi (PATIR) BATAN, Jakarta Selatan.

B. Alat dan Bahan

Alat- alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah: gelas kimia, gelas
ukur, pipet tetes, batang pengaduk, corong pisah, erlenmeyer, satu set alat
refluks, hot plate stirer, kertas saring Whatman No. 42, desikator,
spektrofotometer IR Thermo Nicolet Avatar 360, spektrofotometer UV Cary
Win UV 32, microelemental analyzer Fision EA 1108 (analisis unsur),

28

mikroskop dengan Haemecytometer Fuch Rosental (0,200 nm x 0,0625 mm2)
dan alat multiwell plate tissue culture (uji aktivitas kanker).

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah dibutiltimah(IV)
diklorida, difeniltimah(IV) diklorida, trifeniltimah(IV) klorida, NaOH,
metanol p.a, akuabides, asam 4-nitrobenzoat, toluena, dan isolat sel leukemia
L-1210 BATAN, Jakarta Selatan.

C. Metode Penelitian

Prosedur untuk sintesis masing- masing senyawa organotimah(IV)
karboksilat pada peneltian ini diadopsi dari prosedur yang dilakukan oleh
Bonire et al. (1998); Szorscik et al.(2002); Hadi et al. (2008); Hadi et al.
(2009), dan Hadi and Rilyanti (2010).

1. Sintesis senyawa dibutiltimah(IV) oksida [(C4H9)2SnO]
Dibutiltimah(IV) diklorida [(C4H9)2SnCl2] sebanyak 0,045 mol (13,68 gram)
direaksikan dengan 0,09 mol (3,6 gram) NaOH untuk mengganti ligan klor
dengan oksida dalam 50 mL pelarurt metanol p.a., selanjutnya endapan yang
dihasikan disaring dengan menggunakan kertas saring Whatman No. 42, lalu
dicuci dengan akuabides dan metanol p.a. kemudian didiamkan di dalam
desikator untuk menghasilkan (C4H9)2SnO. Kristal (C4H9)2SnCl2 dan
(C4H9)2SnO dikarakterisasi dengan spektrofotometer UV-Vis pada panjang
gelombang 190-380 nm (Sudjadi, 1985), spektrofotometer IR dan dianalisis
kandungan unsur C dan H dengan alat microelemental analyzer.

29

2.

Sintesis senyawa dibutiltimah(IV) di-4-nitrobenzoat
[(C4H9)2Sn(OCOC6H4(NO2)2]

Senyawa dibutiltimah(IV) oksida [(C4H9)2SnO] sebanyak 0,747 gram
direaksikan dengan asam 4- nitrobenzoat (C6H4NO2)2COOH) sebanyak 1,002
gram dengan perbandingan mol 1:2 dalam 30 mL pelarut metanol p.a. dan
direfluks dengan variasi waktu 3, 4, dan 5 jam dengan pemanas pada suhu
60°C. Setelah reaksi sempurna, metanol p.a. diuapkan dan dikeringkan di
dalam desikator sampai diperoleh kristal kering, kristal kering tersebut
dilarutkan dalam toluena dengan dibantu pemanasan hingga larut seluruhnya,
lalu didinginkan dengan es dalam keadaan masih panas, senyawa murni akan
mengendap, kemudian dapat dipisahkan dari pelarutnya. Setelah itu,
dilakukan pengeringan kembali dengan desikator hingga diperoleh kristal
dengan berat konstan. Kristal hasil senyawa dengan rendemen tertinggi dari
variasi waktu refluks tersebut siap untuk dikarakterisasi dengan
spektrofotometer IR dan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang
190-380 nm (Sudjadi, 1985). Dianalisis kandungan unsur C dan H dengan
alat microelemental analyzer dan diuji sifat antikankernya terhadap sel
leukimia L-1210. Sebagai perbandingan, asam 4-nitrobenzoat juga
dikarakterisasi dengan spektofotometer IR dan UV-Vis.

3. Sintesis senyawa difeniltimah(IV) dihidroksida [(C6H5)2Sn(OH)2]
Difeniltimah(IV) diklorida [(C6H5)2SnCl2] sebanyak 0,045 mol (15,48 gram)
direaksikan dengan 0,09 mol (3,6 gram) NaOH untuk mengganti ligan klor
dengan hidroksida dalam 50 mL pelarut metanol p.a., selanjutnya endapan
yang dihasilkan disaring dengan kertas saring Whatman No. 42, lalu dicuci

30

dengan akuabides dan metanol p.a. kemudian didiamkan di dalam desikator
untuk menghasilkan (C6H5)2Sn(OH)2]. Kristal (C6H5)2SnCl2 dan
(C6H5)2Sn(OH)2 dikarakterisasi dengan spektrofotometer IR dan UV-Vis pada
panjang gelombang 190-380 nm (Sudjadi, 1985), dan dianalisis kandungan
unsur C dan H dengan alat microelemental analyzer.

4. Sintesis senyawa difeniltimah(IV) di 4-nitrobenzoat
[(C6H5)2Sn(OCOC6H4(NO2)2]
Senyawa difeniltimah(IV) dihidroksida (C6H5)2Sn(OH)2 sebanyak 0,921 gram
direaksikan dengan asam 4-nitrobenzoat (C6H4(N02)2COOH) sebanyak 1,002
gram dengan perbandingan mol 1:2 dalam 30 mL pelarut metanol p.a. dan
direfluks dengan variasi waktu 3, 4, dan 5 jam dengan pemanas pada suhu
60°C. Setelah reaksi sempurna, metanol p.a. diuapkan dan dikeringkan di
dalam desikator sampai diperoleh kristal kering, kristal kering tersebut
dilarutkan dalam toluena dengan dibantu pemanasan hingga larut seluruhnya,
lalu didinginkan dengan es dalam keadaan masih panas, senyawa murni akan
mengendap, kemudian dapat dipisahkan dari pelarutnya. Setelah itu,
dilakukan pengeringan kembali dengan desikator hingga diperoleh kristal
dengan berat konstan. Kristal hasil senyawa dengan rendemen tinggi dari
variasi waktu refluks tersebut siap untuk di karakterisasi dengan
spektrofotometer IR dan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang
190-380 nm (Sudjadi, 1985). Dianalisis kandungan unsur C dan H dengan
alat microelemental analyzer dan diuji sifat antikankernya terhadap sel
leukimia L-1210.

31

5. Sintesis senyawa trifeniltimah(IV) hidroksida [(C6H5)3SnOH]
Trifeniltimah(IV) klorida [(C6H5)3SnCl] sebanyak 0,045 mol (17,34 gram)
direaksikan dengan 0,045 mol (1,8 gram ) NaOH untuk menggantikan ligan
klor dengan hidroksida dalam 50 mL pelarut metanol p.a., selanjutnya
endapan yang dihasilkan disaring dengan menggunakan kertas saring
Whatman No. 42, lalu dicuci dengan akuabides dan metanol p.a. kemudian
didiamkan di dalam desikator untuk menghasilkan (C6H5)3SnOH. Kristal
(C6H5)3SnCl dan (C6H5)3SnOH dikarakterisasi dengan spektrofotometri IR
dan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 190-380 nm (Sudjadi,
1985), dan dianalisis kandungan unsur C dan H dengan alat microelemental
analyzer

6. Sintesis senyawa trifeniltimah(IV) 4-nitrobenzoat
[(C6H5)3Sn(OCOC6H4(N02)2
Senyawa trifeniltimah(IV) hidroksida (C6H5)3SnOH sebanyak 1,101 gram
direaksikan dengan asam 4-nitrobenzoat (C6H4(NO2)2COOH sebanyak 0,501
gram dengan perbandingan mol 1:1 dalam 30 mL pelarut metanol p.a. dan
direfluks dengan variasi waktu 3, 4, dan 5 jam dengan pemanas pada suhu
60°C. Setelah reaksi sempurna, metanol p.a. diuapkan dan dikeringkan di
dalam desikator sampai diperoleh kristal kering, kristal kering tersebut
dilarutkan dalam toluena dengan dibantu pemanasan hingga larut seluruhnya,
lalu didinginkan dengan es dalam keadaan masih panas, senyawa murni akan
mengendap, kemudian dapat dipisahkan dari pelarutnya. Setelah itu,
dilakukan pengeringan kembali dengan desikator hingga diperoleh kristal
dengan berat konstan. Kristal hasil senyawa dengan rendemen tertinggi dari

32

variasi waktu refluks tersebut siap untuk dikarakterisasi dengan
spektrofotometer IR dan spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang
190-380 nm (Sudjadi, 1985). Dianalisis kandungan unsur C dan H dengan
alat microelemental analyzer dan diuji sifat antikankernya terhadap sel
leukimia L-1210.

7. Pengujian Aktivitas Antikanker terhadap Sel Leukemia L-1210
Prosedur untuk pengujian aktivitas antikanker pada penelitian ini diadopsi dari
prosedur yang dilakukan oleh Katrin dan Winarno (2008). Pembuatan media
RPMI-1640 seberat 10,4 gram yang mengandung L-glutamin dilarutkan dalam
1 liter air steril (A). Kemudian 1,3 gram NaHCO3 dilarutkan dalam 50 mL air
steril (larutan B). Sebanyak 25 mL larutan B ditambahkan ke dalam 475 mL
larutan A, maka diperoleh 500 mL media (C). Untuk keperluan uji, 15 mL
calf bovine serum ditambahkan ke dalam 85 mL larutan C. Semua pekerjaan
dilakukan di ruang steril. Sel leukemia L-1210 yang men