Mempelajari Spesifisitas AIkohol, Spesifisitas Posisi dan Pengaruh Suhu terhadap Aktivitas Enzim Lipase Ekstraseluler Kapang Aspergillus sp
t
MEMPELAJARI SPESIFISITAS ALKOHOL, SPESIFISITAS POSISI DAN
PENGARUH SURU TERHADAP TAS ENZIM LIPASE
EKSTRASELULER DARI KAPANG Aspellus
Oleh
JULITA
F02498075
2003
FAKULTAS TEKNOLOGIPERTANIAN
INSTITUT PERT ANIAN BOGOR
BOGOR
sp.
ULITA. F02498075. Mempelajari Spsiisitas AIkohol, Spesiisitas Posisi dao
Pengruh Suhu tep iis Enim Lipase Eksraselulr apang
Aspergillus sp. Dibawh bimbinn Ulis Nia n Slamet Budijanto. 2003.
NGSN
m lipase din a lus m indusi pngn maupun non
pan. Pada indusi p, m liase dapat dipknpada indusri susu
oi n e, bir, bumbu, n lain-lain. Mioorganisme
mupn psil m ng aling otensial.
Upase mirobial dapa!
n onnya,
dirolh i bkteri Psonas. Achromoter an aphylocs. r
dia n Torulopss, n g Aspergillus. eorichum, Penicillium.
Rhzopus n Mor (Dwis n Sua, 1990).
Sifat-sifat zim lipase m mksis suatu reaksi hs dikethui
agr npnna dapa! opal. h u a untuk mngetahui bal trsebut
adalah dengn melkukn ri m lipase. Pnelitian i bertujuan
untuk mempelajari n mengethui piiis alkohol. psiisitas posisi.
penguh suhu terhadap iis isi n pnguh suhu terbadap iis
hidrolisis m lipase eksaselulr kpng Aspergillus sp.
Pengujian spesiisitas alkohol din dengan mereaksikan asam laurat
n alkobol dengan berbagai
pnjng rntai (butanol, oktaool n lauril
a!kobol),
berbagai posisi OH (n- butanol, sec-butanol dao tert-butanol) n
berbagai jumlah OH (etilen glikol n gliserol). Pengujiao spesiisitas posisi
mengnPOP yang dihidrolisis oleb enzim lipase eksraseluler kapog
Aspergills sp. Analisis asam lemk basil hidrolisis POP din dengao
menggunakan Kromatorai Gas. Pengujian pengaruh suhu terhadap aktivitas
esteriikasi diln vaiasi subu reksi mulai 40, 50, 60, dan 70°C. Aktivitas
esteriikasi tertingi diukur dengan mereksikan
asam
laurat dan lauril
alkohol pada variasi subu yang telah ditentukn. Aktivitas esteriikasi dilakukan
dengan mengukur kecepatan awal reaksi berdarkan penurunan jnlah asam
lemak sebelum do sesudah iikasi (Hariyadi, 1995). Penurunao asam
lemak sebeln dan sesudah sterikasi menggunakan metode Lowry dan
Tinsley (1975). Pengujiao pengruh suhu terhadap aktiitas hidrolisis dilakukao
pada variasi subu reaksi 30, 40, 50, 60, dan 70°C. Aktivitas hidrolisis tertinggi
diukur dengan mereaksikan minyak kelap., air, CaCh 0.1 M, dan enzim lipase
ekstraseluler pada variasi subu yang telah ditentukan (Lienield et al.,1984).
Aktivitas esteriIkasi tertingi pada alkohol dengan berbagai panjang rantai
dimiliki butanol (13.04 nunol ALB/g prot.menit) yang berbeda nyata dengan
aktivitas yang dimiliki oleh oktanol (5.48 mmo! ALB/g prot.menit) dan lauril
alkohol (4.50 mmol ALB/g prot.menit). Aktivitas esteriikasi tertinggi pada
alkohol dengan berbagai posisi OR dimiliki oleh alkohol primer (13.04 mmol
ALB/g prot. menit) yang juga berbda nyata dengan aktivitas esteriikasi yang
dimiliki oleh sekunder butanol (8.53 mmol ALBI g prot. menit) dan tersier
butanol (2.27 mmol ALBI g prot. menit).
Aktivitas esteriikasi tertinggi pada
alkohol dengan berbagai jumlah OH dimiliki oleh etilen gtikol (1.72 mmol ALB/g
prot.menit) y ang temyata tidak berbda nyata dengan aktivitas esteriikasi y ang
dimiliki oleh gliserol (0.74 mmo! ALB/g prot.menit).
Hidrolisis POP oleh enzim lipase eksraseluler kapang Aspergllus sp.
menghasilkan asam palmitat sebesar 52.83 mol AUmol dan asam oleat sebesar
10.93 mmo} AUmol. Perbandingan konsenrasi asam palmitat.dan asam oleat
adalah 4.83:1. Hal ini berarti enzim lipase eksraseluler kapang Aspergllus sp.
memiliki spesifisitas posisi sn 1,3.
Aktivitas esteriikasi tetingi diperoleh pada suhu 50 ·C (4.50 nunol
ALBI g prot. menit), diikuti ivitas esteriikasi pada suhu 40 ·C (4.42 nunol
ALB/g prot.mnit), akivitas estriikasi pada suhu 60 ·C (0.88 nol ALB/g prot.
mnit) n ktivitas iikasi nh pada suhu 70 ·C (0.38 mmol AB/g
prot. menit). Akivits sksi pada suhu 0 dn 50 ·C ik bbda nyala,
dengn dmikian reksi sterii yang diisis oleh m lipase
eksraseluler kapang Aspergilus .p. dpat din pada in suhu 40-50 ·C.
Sdangkn aktivitas hidrolisis tingi diperoleh pada suhu 30 ·C (123.5
lol ALB/g prot.menit), diikuti ivitas hidrolisis pada suhu 50 ·C (108.88
lol ALB/g prot.mnit), aktivits hidrolisis Pada suhu 40 ·C (105.63 lol
ALB/g prot.menit), aktivitas hidolisis pada suhu 0 ·C (65 lol ALB/g
prot.menit), dn ktivitas hidolisis pada suhu 70 ·C (29.25 lol ALB/g
prot.menit). Aktivitas hidrolisis pada suhu 30, 40 dan 50 ·C ik bebeda nyala,
sehingga reaksi hidrolisis yang dikatalisis oleh enzim lipase eksaseluler kapang
Aspergllus sp. dapat dilakukan pada kisaran suhu 30-50 °C.
MEMPELAJARI SPESIlSITAS ALKOHOL, SPESIlSITAS POSISI DAN
PENGARUH SUHU TERHADAP TAS ENZM LIPASE
EKSTRASELULER DARI KAPANG Aspellus
sp.
OIeb
JULITA
F0498075
SRIPSI
Sebagai salah satu sn!
nk memperoleh gelar
Sajna Tenoloi Pertanian
Pada Jn Tenoloi Pangan dan Gizi
Fls Tenoloi Pertanian
nstitut Pertanian Bogor
2003
FAKULTAS TENOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
NSTITUT PEmTANIAN BOsOm
FAqULTAS TEqNOWsI PEmTANaAN
MEMPEJAma SPSFISTAS AuKOHOLr SPSFISaTAS POSISI DAN
PENsAmB SU EDP TAS ENZM LPASE
ESELULEm DAmI PANs .spillus sp.
SSa
Sbi h u yarat nk prolh glar
Sjna Tlnoloi Pn
Pada n Tenoloi Paogao n m
Fs Tlnoloi Ptaoiao
t an Bogar
Olcb
ULITA
0149075
Drkao pada tangga124 Jull 1980
i Jakarta
Tanggal lu,
:
II Mart 2003
isetujui,
Bogor, 19 Maret 2003
�4�
Dr. r. Litis Nuraida. MSc Dosen Pembimbing I
J�
Dr. . Slamet Budijanto, MAgr
Dosen Pembimbing n
WAYAT HvUp
Pnulis an pada tanggal 24
1akana.
Penulis adaJah anak ke
1i 1980
a
i
dari nam
aa dari pasangan Bapak Binar Papahan
n bu Tiara Pbuan.
lipada tahn 1986
i
SD Negeri Rangun
07 a, Jka Tr n s
Pada tahuu yang
a
1njang pnidikau
pada tahn 1992.
ta i SP Negeri 232,
Jakata Tr dan s pada tahn 1995, kn enn penidikau i SMU
Negari 21, Jakata Tiur n lus pada tahun 1998.
Pada tahn 1998 ta mnjai Mahawa
dan i, Faknltas Teknoloi Prt,
ntt
(Ujian Seleki Masnk PB). Sea uliah
1n
Tenoloi Pangan
Prtanian Bogor melalui jalur USMI
i nut
Pian Bogor, f dalam
Organisai PK (Persentuan aa tn) PB n Paduan Suara Fateta
(Faknltas Tenoloi Pn).
am
Mata
h
Semasa pahau pemah menjai istn
Pngtahuan Bahan PDgan
n
Teknologi Proses Pangan
Jun Tenoloi Pangan n i, Faultas Tenoloi Petanian, Institut Pertauian
Bogor.
qATA PENsANTAR
Segala puji r dpnnjntkUn kepndn puhUn VTsus
u,
nlns bTnknl.
kUih kUruniU n pntaNa ynng tiUdn bTrkTudUbUn n lTlUb mTmbTni
kTkuUlnn bimUl sTga spi i dUpnl n n lrselT.
Pns
mnyUdnni bUbõU kbndirUn knryU s i ik Ielns dUni bnntuUn n dukungUn
dnri blbagai phar, bUik
m patan i
L
a
ng apn ik ngungO Ollh kUrnn u
pan uapn leriÄ ah g na kpa dn :
ea llrkah, Mamak, Bapak, Kakak
n
YOI,
Laa, lno qakako Boman
pu Ua atas doao nla , pbUn, png, pngornUnb
bUotuUn n n a h g g b.
2.
r.
r.
s
Nunaidar MS. agai
on
ipg , tns kTsnbnrUo n
biubngUo yUog hbo s poetitiao g.enyn skripi i
3. Dr. r. 'Slapet Budijanto, MAr sTbagUi o. Pbng n, atas kTabUrnn
dnn bubngnn ynng ibo selnmn pnTn gaelTsUnyn spi i
4. r. Dede t. Adawiyah, Msi sebaa i
on
Pnguji, atas mUsukUn dnn snrUn
yUog dibo.
5.
Mbak Anyr Mas Tanl"lk, Mbak msir Pak Sidik, Pak qokor Pak Mol, Pak
moak, Pak Wabidr Pak Sobrinr abn mnbyabr Pak satot, Mbak ada, Pak
qamar Pak Nanya at ns kesnbnnnn dnn segala bnntunD elUmn p nTlitinn di LnbS
knobioloi, Kimin, uTknynsn Pnognn PAv dUo Lnb. Jun PG.
6.
pTmnn·tTmnn epTjunngnn dUlUm penelitiab, Wiwin dnn Idza, ntns kTjnsUmn,
a dnn dukU ynng a ai
7.
Snbnbnl.ahnbnlku lTncinln, Naoli (Iegnnlnb dalap menghndnpi cobnnn i !)b
Riska, menata, ata, qak
ir,
Lince (Ia kUsih kTÅnlib pn !) dnn mudi,
Bintang aynng tnwnw, Nnk!). mini, Elina, atas kTbTrsnmnnn, pTrwntinn, kecerinnnb
donb dnkungnn dnn kritknn-kritkUn ynng dibTriknn.
8.
pTmnn·tTmnn di Lnbonntorill, qak Rispa (thanks fËr the bos, sis!), Mbak
Wiji, Mbak ada. Kak mida. Mbak Nurjana. Ningnup. Fitri. Di mon atTtnp
sTmnngnt ah!), Yuli. Nanda, Nita, muslan. Thori. Mas Asep, Pak Soebar,
Mas Ddi, Bik Opah (aIp), Bik Sari, ntns bnntunn, kTcTrinnn dnn kTbTnsamnnn
kiln.
III
9. p¯ Kllopor cH PB (sibbon, S.un apnia), Adl Papahan, Dll� _.
tn-tn
M
PK
PB
(teTUtapa
durobga, lrhatiabo aan blnsama DA
10.
Saudai-sadani di Pondor nira, Danilko
n!), Ani, Mlio r6n, lonyn,
ak
ak
Ani, Mbak Ary (ursls jadi
En� Mbak ,
k
Mann� Santi,
Mania. Doni, eni, juga saudari-udari di Wtma Andung (Pitao Moniul tea,
Yun� An� Sake, Wlndyo Dewio Nita, Dsy nti"", Niao Merny dan Tao).
Ta h atas doa, png, ll, h
yabgo rbaan
.
n
rkgan yang a.
II.
mkan-rlkan TPs 35 s pa. phnabg idak akan tlrlparab.
Slpoga karya h i ba.
Bogor,
Maret 2003
Pebulis
IV
DAfAm
SI
an
KApA PmNANpAR .
........
DfAu ItI.
O.
.
.......
.P
P
........
...........
.
.............
.
..........
. o ..
...
..
.
............
....................................... ..............................................................
DfAR pABmL P
.
.......
.
...........................
DAfAR tABAu .
.
.............
.
............
DfAuPAN
.....................
.
.....
.
......
O
.
...
.
.
.....
. P . o
..
...............................
.
...............
.
....
................
.O.O
O
.....
................
.
P
...........
......
.
...........
.
...
.. .PP .
..
...
v
o ii
P
........
ii
...
x
x
I. PmlDlLUAN ..O.OOOOO.O.OO..OOOO.O.....O..O.......O.O....O...O.O.S.O..O.O.O.O....O.P......S....P.... I
A LApAR BmANt
P
...........
B. pUJUAN EEN
I.
.......
......
o
....
P
...........
. .
..
P
...............
pNJAUAN PUSpAKA
. . . PP .n .
A NM LPASm
PP. . .o . .
.............
..................
.
.
..
...
...
.
O
.............
..
...
.......
..
P
..............
.O
.
......
....................
o
...............
PP
....
...........................
.
....
PP .
...
o PPP
...
....
.
....
...
I
2
. . . P.PP . o. 3
..
.
PPP
....
..
...
.
..
o.o. . P.P ..
.
.
....
3
B. LPASm RmBIAL............................................................................ 5
C. umAKSI-umAKSI YANt DKATALnSIS LPASm
.....
P PPP o. .
.
...
.
....
PP.
....
o. . 8
.
I. idrolis S.OO...O.O.....O.O.O....o.....O.O.n...S.OSO..O.O....OO.O...O. ...O...o.....P.....O.......... 8
2P mtsi
.....
.
............
3. ntrtai
O
.....
.............
D. SPmSFnSIpAS LPASm
....
.
....... ..............
.
.....................
o ..
...
.
....
O
.
.
oo.o. . .o
..
. .
..
..............
................
.
......
1. SpTitns Js pid . PP o. o .. P .o. .
.
.
...
..
....
o o.o.
.
.....
.
....
o.o.
P
......
.......
.'" 9
' ..... ....... ....... ........ .. 10
P . o o . PP . o
..
.
.
..
...
...
.
........
II
.P. . o . . . PP o ono.o. . PPP .no. o 12
.
.
..
.
.
.
.
.
.
...
.
.
.
2P SpTas qionnlPP..o.......PP......o........n.n.....o..PPPPo..no......P.P.P.n..no....P. 12
3o SpTtns m ak P . . . .
.
.
..
.
....
o.
.
................
. o. P P P
...
.
.
.
....
o.o. .P PP. . o. \3
.
.
.
..
.
4. SpTas kohol .O.O.O..S...O..PO..O.'" S.O............S.SO. O.o......o.S..............S..PP 13
E.
5.
StTrTopTstns P....S.S.".,' ....'"o"... "......o..." P.PPP..ono.S...PPPP.............P.P..n.... 13
6,
SpTitns tnbungnn S...P...on.....P..P..n...S...PP.P.......o...P...............P.PP.o...... 14
FKpmR-FKumu YANt EMnmNtARUI KTIVIpAS
PP . o .Po o . . P . o. ... .P n... . ... PP o .o. P.PPn . o.o. PPP o.on.. . 14
LPASm o
.
I. Suhu
.......
....
.
...
...
o o .PP
.
.
..........
.
.
...
.
.......
.
..
.
....
.
..
..
.
.
P . o.. .P. P . .
...
.
..
.
.
....
.
....
.
........
..
.
.
...
.
.
o o. o PP . .. .PP.o o.o. 14
.
...
..
...
.
..
.
.
2o pHPPP........P......o.S.S.......o.o.O..P..... ..P.P.P....S.....P.P......o.....PP.Po...o...P.P..P...o... 14
o o.o . . .o. . P .... P. PP ...o. . P o o.o. . . P P.n..... . P ,, 15
3. Cn2+ .PPn.no...
.
.....
...
...
.
...
.
..
...
.
..
.
....
.
.
.
..
..
.
. .
.
4P non MTtnl o. PPPP . . . . P. . .o.... PP P ..... P. .Po .o.o... . . . .no. . P PP P.n... . PP . n 15
.
.
.
.
..
.
.
.
.
.
..
.
.
.
.
..
.
..
.
.
.
. .
.
.
F. KAPANt Aspergllus sp. . .o..P P. n. ... P PPPP no.o..... P ....o...P P P .n .. . P. . 16
.
.
..
.
.
..
..
...
.
. .
..
.
.
. .
.
.
v
I. BAHAN
DAN EpmDm O O
..
.
......
Ao BAN PmNmLIpIAN .O O
.
.
B. ALAp PmNmLIpIAN S O O
.
..
.
......
........
......
CO EpmDm PmNmLIpIAN
.....
1.
S
S
.
...
....
O
.
.O
SS
.
.
......
.
....
.
O
.
.......
. . . .
..
......
.......
.
.
....
OO S
.
..
Produki m ar pUsT OO
........
a.
PTriUpn °oºlum.O.. . ..
b.
ai O .. OOOOO .OOOO OOO OOOO O OO
c.
Pn OO O
...
.
.
.
.
.
.
.
....
.
.
.. .
.
....
.....
.
d sim O O O O . . OO .. O.. O
.
.
.
..
.
.
.
.
.
.
..
........
........
....
.
.
. ..... .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
.
.
.
..
.
...
..
..
2. SpTtUs poi S S O S S
.
b.
.
..
.
.
.
.
S SSS
...
.
.
.
...
.
.
.........
.
.
.....
.
.
...
........
18
.
18
.......
.......
.
19
. .
19
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ........
.
..
..
..
.
.
...
.
....
.
O O O S O S O O O O.. ... .O . . 19
.
.
...
.
.
.
.
.
.
....
OOO
....
.
..
.
..
.
.
...
O O S S S O.O
.
.
.
.
..
. . .OO . O. .O . . O OOO .O .O
.
.
.
.
.
.
.
S S
.
.
.
..
O O OO . . . OOOO OO O O O O O O O O. 19
. OO OOO
. .OO ..
......
......... . . . . . . .
.
.
.
.
..
.
.
.
1. Sptas Ukohol.OO .O . .
.
.............
UO PuiUn pas O O O O O .O. O. . O O. O. .OO .OOO .OO .
..
SS
18
O. .O ; O.O.....O.O...O...S.S.S.S......O.OPOPPPPo.O. 19
..
.
...
OO O O O S O S O . O. .O. .
.
......
.
2O rim pnsT OO O O .. . O
.
.
OO
.
.
. .
OO O OO .O
..
..
.......
..................
. .
.O. O.. .
.
..
O
.
.
O OO .
.......
.
.
. . .O
.
.
.
.
.......
O
...
......
O
..........
O
.......
....
..............
SS
.
O
. .
.
...
......
OO
.
....
...................
19
20
20
20
" P..........O.......o.o.S.S.S...,'....P ,'. 21
PengUruh bu tThUdUp aktiitUs tai lpnse
TktrnsTlulTr O OOO O O O S S
. . . . . " o..........O...o.o...S.S.S.......PP.P 21
.
.
...
....
.
.
....
.......
.
..
.
.
.
cO PgUruh bu tTrhUdUp U¹Us bicholiis lipnse
ekrUelulTr. . .. .. O. O . .O . .
o
SS SSS OS
...
.
.
.
.
..
D. EpmDm ANALISIS ..OO O O . O .O O
.
.
.
.
.
.
.
.
........
.
..
.
.
.....
....
O
....
.
.
...
.
.................
SSO OOO
.
.
...
.
.
.....
...
.......
...
.
. . .
.
.
....
. .
..
.
..
.
......
1. PTnn ooai ProtTn dngno MTtodT BrUdord
.........
S
....
S 21
S 22
S 22
..
2S PTngukunu tUs mstknsi aaai, 1995) ....o.o.o.S....... ....PPP... 22
3S Annliis Jh AsUm emnk (Lowry dnn pnslTy, 1975) .....PPP.P.PPP.o... 23
4. mkstrUi m LTmnk dngan menggunnkUn MTtodT
Mnttick n eea1959) S.S.o.....................PP.PPP.........o.o.o.......no.o.........P.P 24
5. AnUlisis o Lemnk dTngnn roenggunUknn Kromntorni
Gns aC)
........................ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . .
24
6. PengÊkurnn AktiôitUs Hicholisis (Lieoield et nI., 1984) ....P.P.P.P.P.P.P .P.P 25
V.
H ASL DAN PmBAHASAN .
..
A
........
. .
..
SPmSFnSopAS ALKmHmL.
...........
.....
.....
S
. .
.
..........................
.......................
1. Spesivtns Ankohol dngnn Berbngni Pnnjnng aotni .
2. SpTsivsitns Alkohol dTngnn BTrbngni Posisi mH
......
.
Bo SPESFoSopAS PmSoSo
C. PENGARUH SUHU
....
O
.............
.......................
.
.............................
. . . . ...........
.
. . . . . . .
.
. . . . . . . . . . . . . . . . .
.
. . . . . . . .
.
. o o.o.
. . . . . . .
.
. . . . . . . . . . . .. . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . .
. . .
. 26
o
........... . . . . . .
3. SpTsivsitns Alkohol dTngnn BTrbngni lumlnb mH . .
..
....
.
.
o.o . o
. .
.
. . . . .
.
..
.
..
.
. . . . .
o 26
..
. . . . . . . .
. . . . . . . .
. . . . . . . . . .
. . . . . . . . . .
. . . . .
.
26
. . .
28
29
31
. 32
VI
MEMPELAJARI SPESIFISITAS ALKOHOL, SPESIFISITAS POSISI DAN
PENGARUH SURU TERHADAP TAS ENZIM LIPASE
EKSTRASELULER DARI KAPANG Aspellus
Oleh
JULITA
F02498075
2003
FAKULTAS TEKNOLOGIPERTANIAN
INSTITUT PERT ANIAN BOGOR
BOGOR
sp.
ULITA. F02498075. Mempelajari Spsiisitas AIkohol, Spesiisitas Posisi dao
Pengruh Suhu tep iis Enim Lipase Eksraselulr apang
Aspergillus sp. Dibawh bimbinn Ulis Nia n Slamet Budijanto. 2003.
NGSN
m lipase din a lus m indusi pngn maupun non
pan. Pada indusi p, m liase dapat dipknpada indusri susu
oi n e, bir, bumbu, n lain-lain. Mioorganisme
mupn psil m ng aling otensial.
Upase mirobial dapa!
n onnya,
dirolh i bkteri Psonas. Achromoter an aphylocs. r
dia n Torulopss, n g Aspergillus. eorichum, Penicillium.
Rhzopus n Mor (Dwis n Sua, 1990).
Sifat-sifat zim lipase m mksis suatu reaksi hs dikethui
agr npnna dapa! opal. h u a untuk mngetahui bal trsebut
adalah dengn melkukn ri m lipase. Pnelitian i bertujuan
untuk mempelajari n mengethui piiis alkohol. psiisitas posisi.
penguh suhu terhadap iis isi n pnguh suhu terbadap iis
hidrolisis m lipase eksaselulr kpng Aspergillus sp.
Pengujian spesiisitas alkohol din dengan mereaksikan asam laurat
n alkobol dengan berbagai
pnjng rntai (butanol, oktaool n lauril
a!kobol),
berbagai posisi OH (n- butanol, sec-butanol dao tert-butanol) n
berbagai jumlah OH (etilen glikol n gliserol). Pengujiao spesiisitas posisi
mengnPOP yang dihidrolisis oleb enzim lipase eksraseluler kapog
Aspergills sp. Analisis asam lemk basil hidrolisis POP din dengao
menggunakan Kromatorai Gas. Pengujian pengaruh suhu terhadap aktivitas
esteriikasi diln vaiasi subu reksi mulai 40, 50, 60, dan 70°C. Aktivitas
esteriikasi tertingi diukur dengan mereksikan
asam
laurat dan lauril
alkohol pada variasi subu yang telah ditentukn. Aktivitas esteriikasi dilakukan
dengan mengukur kecepatan awal reaksi berdarkan penurunan jnlah asam
lemak sebelum do sesudah iikasi (Hariyadi, 1995). Penurunao asam
lemak sebeln dan sesudah sterikasi menggunakan metode Lowry dan
Tinsley (1975). Pengujiao pengruh suhu terhadap aktiitas hidrolisis dilakukao
pada variasi subu reaksi 30, 40, 50, 60, dan 70°C. Aktivitas hidrolisis tertinggi
diukur dengan mereaksikan minyak kelap., air, CaCh 0.1 M, dan enzim lipase
ekstraseluler pada variasi subu yang telah ditentukan (Lienield et al.,1984).
Aktivitas esteriIkasi tertingi pada alkohol dengan berbagai panjang rantai
dimiliki butanol (13.04 nunol ALB/g prot.menit) yang berbeda nyata dengan
aktivitas yang dimiliki oleh oktanol (5.48 mmo! ALB/g prot.menit) dan lauril
alkohol (4.50 mmol ALB/g prot.menit). Aktivitas esteriikasi tertinggi pada
alkohol dengan berbagai posisi OR dimiliki oleh alkohol primer (13.04 mmol
ALB/g prot. menit) yang juga berbda nyata dengan aktivitas esteriikasi yang
dimiliki oleh sekunder butanol (8.53 mmol ALBI g prot. menit) dan tersier
butanol (2.27 mmol ALBI g prot. menit).
Aktivitas esteriikasi tertinggi pada
alkohol dengan berbagai jumlah OH dimiliki oleh etilen gtikol (1.72 mmol ALB/g
prot.menit) y ang temyata tidak berbda nyata dengan aktivitas esteriikasi y ang
dimiliki oleh gliserol (0.74 mmo! ALB/g prot.menit).
Hidrolisis POP oleh enzim lipase eksraseluler kapang Aspergllus sp.
menghasilkan asam palmitat sebesar 52.83 mol AUmol dan asam oleat sebesar
10.93 mmo} AUmol. Perbandingan konsenrasi asam palmitat.dan asam oleat
adalah 4.83:1. Hal ini berarti enzim lipase eksraseluler kapang Aspergllus sp.
memiliki spesifisitas posisi sn 1,3.
Aktivitas esteriikasi tetingi diperoleh pada suhu 50 ·C (4.50 nunol
ALBI g prot. menit), diikuti ivitas esteriikasi pada suhu 40 ·C (4.42 nunol
ALB/g prot.mnit), akivitas estriikasi pada suhu 60 ·C (0.88 nol ALB/g prot.
mnit) n ktivitas iikasi nh pada suhu 70 ·C (0.38 mmol AB/g
prot. menit). Akivits sksi pada suhu 0 dn 50 ·C ik bbda nyala,
dengn dmikian reksi sterii yang diisis oleh m lipase
eksraseluler kapang Aspergilus .p. dpat din pada in suhu 40-50 ·C.
Sdangkn aktivitas hidrolisis tingi diperoleh pada suhu 30 ·C (123.5
lol ALB/g prot.menit), diikuti ivitas hidrolisis pada suhu 50 ·C (108.88
lol ALB/g prot.mnit), aktivits hidrolisis Pada suhu 40 ·C (105.63 lol
ALB/g prot.menit), aktivitas hidolisis pada suhu 0 ·C (65 lol ALB/g
prot.menit), dn ktivitas hidolisis pada suhu 70 ·C (29.25 lol ALB/g
prot.menit). Aktivitas hidrolisis pada suhu 30, 40 dan 50 ·C ik bebeda nyala,
sehingga reaksi hidrolisis yang dikatalisis oleh enzim lipase eksaseluler kapang
Aspergllus sp. dapat dilakukan pada kisaran suhu 30-50 °C.
MEMPELAJARI SPESIlSITAS ALKOHOL, SPESIlSITAS POSISI DAN
PENGARUH SUHU TERHADAP TAS ENZM LIPASE
EKSTRASELULER DARI KAPANG Aspellus
sp.
OIeb
JULITA
F0498075
SRIPSI
Sebagai salah satu sn!
nk memperoleh gelar
Sajna Tenoloi Pertanian
Pada Jn Tenoloi Pangan dan Gizi
Fls Tenoloi Pertanian
nstitut Pertanian Bogor
2003
FAKULTAS TENOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
NSTITUT PEmTANIAN BOsOm
FAqULTAS TEqNOWsI PEmTANaAN
MEMPEJAma SPSFISTAS AuKOHOLr SPSFISaTAS POSISI DAN
PENsAmB SU EDP TAS ENZM LPASE
ESELULEm DAmI PANs .spillus sp.
SSa
Sbi h u yarat nk prolh glar
Sjna Tlnoloi Pn
Pada n Tenoloi Paogao n m
Fs Tlnoloi Ptaoiao
t an Bogar
Olcb
ULITA
0149075
Drkao pada tangga124 Jull 1980
i Jakarta
Tanggal lu,
:
II Mart 2003
isetujui,
Bogor, 19 Maret 2003
�4�
Dr. r. Litis Nuraida. MSc Dosen Pembimbing I
J�
Dr. . Slamet Budijanto, MAgr
Dosen Pembimbing n
WAYAT HvUp
Pnulis an pada tanggal 24
1akana.
Penulis adaJah anak ke
1i 1980
a
i
dari nam
aa dari pasangan Bapak Binar Papahan
n bu Tiara Pbuan.
lipada tahn 1986
i
SD Negeri Rangun
07 a, Jka Tr n s
Pada tahuu yang
a
1njang pnidikau
pada tahn 1992.
ta i SP Negeri 232,
Jakata Tr dan s pada tahn 1995, kn enn penidikau i SMU
Negari 21, Jakata Tiur n lus pada tahun 1998.
Pada tahn 1998 ta mnjai Mahawa
dan i, Faknltas Teknoloi Prt,
ntt
(Ujian Seleki Masnk PB). Sea uliah
1n
Tenoloi Pangan
Prtanian Bogor melalui jalur USMI
i nut
Pian Bogor, f dalam
Organisai PK (Persentuan aa tn) PB n Paduan Suara Fateta
(Faknltas Tenoloi Pn).
am
Mata
h
Semasa pahau pemah menjai istn
Pngtahuan Bahan PDgan
n
Teknologi Proses Pangan
Jun Tenoloi Pangan n i, Faultas Tenoloi Petanian, Institut Pertauian
Bogor.
qATA PENsANTAR
Segala puji r dpnnjntkUn kepndn puhUn VTsus
u,
nlns bTnknl.
kUih kUruniU n pntaNa ynng tiUdn bTrkTudUbUn n lTlUb mTmbTni
kTkuUlnn bimUl sTga spi i dUpnl n n lrselT.
Pns
mnyUdnni bUbõU kbndirUn knryU s i ik Ielns dUni bnntuUn n dukungUn
dnri blbagai phar, bUik
m patan i
L
a
ng apn ik ngungO Ollh kUrnn u
pan uapn leriÄ ah g na kpa dn :
ea llrkah, Mamak, Bapak, Kakak
n
YOI,
Laa, lno qakako Boman
pu Ua atas doao nla , pbUn, png, pngornUnb
bUotuUn n n a h g g b.
2.
r.
r.
s
Nunaidar MS. agai
on
ipg , tns kTsnbnrUo n
biubngUo yUog hbo s poetitiao g.enyn skripi i
3. Dr. r. 'Slapet Budijanto, MAr sTbagUi o. Pbng n, atas kTabUrnn
dnn bubngnn ynng ibo selnmn pnTn gaelTsUnyn spi i
4. r. Dede t. Adawiyah, Msi sebaa i
on
Pnguji, atas mUsukUn dnn snrUn
yUog dibo.
5.
Mbak Anyr Mas Tanl"lk, Mbak msir Pak Sidik, Pak qokor Pak Mol, Pak
moak, Pak Wabidr Pak Sobrinr abn mnbyabr Pak satot, Mbak ada, Pak
qamar Pak Nanya at ns kesnbnnnn dnn segala bnntunD elUmn p nTlitinn di LnbS
knobioloi, Kimin, uTknynsn Pnognn PAv dUo Lnb. Jun PG.
6.
pTmnn·tTmnn epTjunngnn dUlUm penelitiab, Wiwin dnn Idza, ntns kTjnsUmn,
a dnn dukU ynng a ai
7.
Snbnbnl.ahnbnlku lTncinln, Naoli (Iegnnlnb dalap menghndnpi cobnnn i !)b
Riska, menata, ata, qak
ir,
Lince (Ia kUsih kTÅnlib pn !) dnn mudi,
Bintang aynng tnwnw, Nnk!). mini, Elina, atas kTbTrsnmnnn, pTrwntinn, kecerinnnb
donb dnkungnn dnn kritknn-kritkUn ynng dibTriknn.
8.
pTmnn·tTmnn di Lnbonntorill, qak Rispa (thanks fËr the bos, sis!), Mbak
Wiji, Mbak ada. Kak mida. Mbak Nurjana. Ningnup. Fitri. Di mon atTtnp
sTmnngnt ah!), Yuli. Nanda, Nita, muslan. Thori. Mas Asep, Pak Soebar,
Mas Ddi, Bik Opah (aIp), Bik Sari, ntns bnntunn, kTcTrinnn dnn kTbTnsamnnn
kiln.
III
9. p¯ Kllopor cH PB (sibbon, S.un apnia), Adl Papahan, Dll� _.
tn-tn
M
PK
PB
(teTUtapa
durobga, lrhatiabo aan blnsama DA
10.
Saudai-sadani di Pondor nira, Danilko
n!), Ani, Mlio r6n, lonyn,
ak
ak
Ani, Mbak Ary (ursls jadi
En� Mbak ,
k
Mann� Santi,
Mania. Doni, eni, juga saudari-udari di Wtma Andung (Pitao Moniul tea,
Yun� An� Sake, Wlndyo Dewio Nita, Dsy nti"", Niao Merny dan Tao).
Ta h atas doa, png, ll, h
yabgo rbaan
.
n
rkgan yang a.
II.
mkan-rlkan TPs 35 s pa. phnabg idak akan tlrlparab.
Slpoga karya h i ba.
Bogor,
Maret 2003
Pebulis
IV
DAfAm
SI
an
KApA PmNANpAR .
........
DfAu ItI.
O.
.
.......
.P
P
........
...........
.
.............
.
..........
. o ..
...
..
.
............
....................................... ..............................................................
DfAR pABmL P
.
.......
.
...........................
DAfAR tABAu .
.
.............
.
............
DfAuPAN
.....................
.
.....
.
......
O
.
...
.
.
.....
. P . o
..
...............................
.
...............
.
....
................
.O.O
O
.....
................
.
P
...........
......
.
...........
.
...
.. .PP .
..
...
v
o ii
P
........
ii
...
x
x
I. PmlDlLUAN ..O.OOOOO.O.OO..OOOO.O.....O..O.......O.O....O...O.O.S.O..O.O.O.O....O.P......S....P.... I
A LApAR BmANt
P
...........
B. pUJUAN EEN
I.
.......
......
o
....
P
...........
. .
..
P
...............
pNJAUAN PUSpAKA
. . . PP .n .
A NM LPASm
PP. . .o . .
.............
..................
.
.
..
...
...
.
O
.............
..
...
.......
..
P
..............
.O
.
......
....................
o
...............
PP
....
...........................
.
....
PP .
...
o PPP
...
....
.
....
...
I
2
. . . P.PP . o. 3
..
.
PPP
....
..
...
.
..
o.o. . P.P ..
.
.
....
3
B. LPASm RmBIAL............................................................................ 5
C. umAKSI-umAKSI YANt DKATALnSIS LPASm
.....
P PPP o. .
.
...
.
....
PP.
....
o. . 8
.
I. idrolis S.OO...O.O.....O.O.O....o.....O.O.n...S.OSO..O.O....OO.O...O. ...O...o.....P.....O.......... 8
2P mtsi
.....
.
............
3. ntrtai
O
.....
.............
D. SPmSFnSIpAS LPASm
....
.
....... ..............
.
.....................
o ..
...
.
....
O
.
.
oo.o. . .o
..
. .
..
..............
................
.
......
1. SpTitns Js pid . PP o. o .. P .o. .
.
.
...
..
....
o o.o.
.
.....
.
....
o.o.
P
......
.......
.'" 9
' ..... ....... ....... ........ .. 10
P . o o . PP . o
..
.
.
..
...
...
.
........
II
.P. . o . . . PP o ono.o. . PPP .no. o 12
.
.
..
.
.
.
.
.
.
...
.
.
.
2P SpTas qionnlPP..o.......PP......o........n.n.....o..PPPPo..no......P.P.P.n..no....P. 12
3o SpTtns m ak P . . . .
.
.
..
.
....
o.
.
................
. o. P P P
...
.
.
.
....
o.o. .P PP. . o. \3
.
.
.
..
.
4. SpTas kohol .O.O.O..S...O..PO..O.'" S.O............S.SO. O.o......o.S..............S..PP 13
E.
5.
StTrTopTstns P....S.S.".,' ....'"o"... "......o..." P.PPP..ono.S...PPPP.............P.P..n.... 13
6,
SpTitns tnbungnn S...P...on.....P..P..n...S...PP.P.......o...P...............P.PP.o...... 14
FKpmR-FKumu YANt EMnmNtARUI KTIVIpAS
PP . o .Po o . . P . o. ... .P n... . ... PP o .o. P.PPn . o.o. PPP o.on.. . 14
LPASm o
.
I. Suhu
.......
....
.
...
...
o o .PP
.
.
..........
.
.
...
.
.......
.
..
.
....
.
..
..
.
.
P . o.. .P. P . .
...
.
..
.
.
....
.
....
.
........
..
.
.
...
.
.
o o. o PP . .. .PP.o o.o. 14
.
...
..
...
.
..
.
.
2o pHPPP........P......o.S.S.......o.o.O..P..... ..P.P.P....S.....P.P......o.....PP.Po...o...P.P..P...o... 14
o o.o . . .o. . P .... P. PP ...o. . P o o.o. . . P P.n..... . P ,, 15
3. Cn2+ .PPn.no...
.
.....
...
...
.
...
.
..
...
.
..
.
....
.
.
.
..
..
.
. .
.
4P non MTtnl o. PPPP . . . . P. . .o.... PP P ..... P. .Po .o.o... . . . .no. . P PP P.n... . PP . n 15
.
.
.
.
..
.
.
.
.
.
..
.
.
.
.
..
.
..
.
.
.
. .
.
.
F. KAPANt Aspergllus sp. . .o..P P. n. ... P PPPP no.o..... P ....o...P P P .n .. . P. . 16
.
.
..
.
.
..
..
...
.
. .
..
.
.
. .
.
.
v
I. BAHAN
DAN EpmDm O O
..
.
......
Ao BAN PmNmLIpIAN .O O
.
.
B. ALAp PmNmLIpIAN S O O
.
..
.
......
........
......
CO EpmDm PmNmLIpIAN
.....
1.
S
S
.
...
....
O
.
.O
SS
.
.
......
.
....
.
O
.
.......
. . . .
..
......
.......
.
.
....
OO S
.
..
Produki m ar pUsT OO
........
a.
PTriUpn °oºlum.O.. . ..
b.
ai O .. OOOOO .OOOO OOO OOOO O OO
c.
Pn OO O
...
.
.
.
.
.
.
.
....
.
.
.. .
.
....
.....
.
d sim O O O O . . OO .. O.. O
.
.
.
..
.
.
.
.
.
.
..
........
........
....
.
.
. ..... .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
.
.
.
..
.
...
..
..
2. SpTtUs poi S S O S S
.
b.
.
..
.
.
.
.
S SSS
...
.
.
.
...
.
.
.........
.
.
.....
.
.
...
........
18
.
18
.......
.......
.
19
. .
19
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ........
.
..
..
..
.
.
...
.
....
.
O O O S O S O O O O.. ... .O . . 19
.
.
...
.
.
.
.
.
.
....
OOO
....
.
..
.
..
.
.
...
O O S S S O.O
.
.
.
.
..
. . .OO . O. .O . . O OOO .O .O
.
.
.
.
.
.
.
S S
.
.
.
..
O O OO . . . OOOO OO O O O O O O O O. 19
. OO OOO
. .OO ..
......
......... . . . . . . .
.
.
.
.
..
.
.
.
1. Sptas Ukohol.OO .O . .
.
.............
UO PuiUn pas O O O O O .O. O. . O O. O. .OO .OOO .OO .
..
SS
18
O. .O ; O.O.....O.O...O...S.S.S.S......O.OPOPPPPo.O. 19
..
.
...
OO O O O S O S O . O. .O. .
.
......
.
2O rim pnsT OO O O .. . O
.
.
OO
.
.
. .
OO O OO .O
..
..
.......
..................
. .
.O. O.. .
.
..
O
.
.
O OO .
.......
.
.
. . .O
.
.
.
.
.......
O
...
......
O
..........
O
.......
....
..............
SS
.
O
. .
.
...
......
OO
.
....
...................
19
20
20
20
" P..........O.......o.o.S.S.S...,'....P ,'. 21
PengUruh bu tThUdUp aktiitUs tai lpnse
TktrnsTlulTr O OOO O O O S S
. . . . . " o..........O...o.o...S.S.S.......PP.P 21
.
.
...
....
.
.
....
.......
.
..
.
.
.
cO PgUruh bu tTrhUdUp U¹Us bicholiis lipnse
ekrUelulTr. . .. .. O. O . .O . .
o
SS SSS OS
...
.
.
.
.
..
D. EpmDm ANALISIS ..OO O O . O .O O
.
.
.
.
.
.
.
.
........
.
..
.
.
.....
....
O
....
.
.
...
.
.................
SSO OOO
.
.
...
.
.
.....
...
.......
...
.
. . .
.
.
....
. .
..
.
..
.
......
1. PTnn ooai ProtTn dngno MTtodT BrUdord
.........
S
....
S 21
S 22
S 22
..
2S PTngukunu tUs mstknsi aaai, 1995) ....o.o.o.S....... ....PPP... 22
3S Annliis Jh AsUm emnk (Lowry dnn pnslTy, 1975) .....PPP.P.PPP.o... 23
4. mkstrUi m LTmnk dngan menggunnkUn MTtodT
Mnttick n eea1959) S.S.o.....................PP.PPP.........o.o.o.......no.o.........P.P 24
5. AnUlisis o Lemnk dTngnn roenggunUknn Kromntorni
Gns aC)
........................ . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
. . . .
24
6. PengÊkurnn AktiôitUs Hicholisis (Lieoield et nI., 1984) ....P.P.P.P.P.P.P .P.P 25
V.
H ASL DAN PmBAHASAN .
..
A
........
. .
..
SPmSFnSopAS ALKmHmL.
...........
.....
.....
S
. .
.
..........................
.......................
1. Spesivtns Ankohol dngnn Berbngni Pnnjnng aotni .
2. SpTsivsitns Alkohol dTngnn BTrbngni Posisi mH
......
.
Bo SPESFoSopAS PmSoSo
C. PENGARUH SUHU
....
O
.............
.......................
.
.............................
. . . . ...........
.
. . . . . . .
.
. . . . . . . . . . . . . . . . .
.
. . . . . . . .
.
. o o.o.
. . . . . . .
.
. . . . . . . . . . . .. . . . . . . .
. . . . . . . . . . . . . .
. . .
. 26
o
........... . . . . . .
3. SpTsivsitns Alkohol dTngnn BTrbngni lumlnb mH . .
..
....
.
.
o.o . o
. .
.
. . . . .
.
..
.
..
.
. . . . .
o 26
..
. . . . . . . .
. . . . . . . .
. . . . . . . . . .
. . . . . . . . . .
. . . . .
.
26
. . .
28
29
31
. 32
VI