Studi Pertumbuhan dan Perkembangan Embrio Somatik Kakao (Theobroma cacao L.) yang dihasilkan dari kultur In Vitro

VAN6 DlHASllKAlhl DWRl KULTUR IN VITRO

Oleh
SUZANNA LAMRIA SIREGAR
A 23. 0 8 0 2

JURUSAN BUD1 DAYA PERTANIAN
FAKULTAS PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
1991

SUZANNA L M R I A SIREGAR.

S t u d i Pertumbuhan d a n Perkembang-

a n E m b r i o S o m a t i k Kakao ( T h e o b r o m a c a c a o L . ) y a n g D i h a s i l k a n d a r i K u l t u r I n V i t r o ( d i bawah b i m b i n g a n L I V Y WINATA

GUNAWAN d a n SUDIRHAN YAHYA).
Percobaan i n i b e r t u j u a n m e m p e l a j a r i pertumbuhan d a n
p e r k e m b a n g a n e m b r i o s o m a t i k k a k a o Amelonado p a d a b e r b a g a i
t a r a f n i t r o g e n dan s u k r o s a dalam media Murashige-Skoog

(MS) s e r t a m e m p e l a j a r i r e s p o n n y a t e r h a d a p z a t p e n g a t u r
t u m b u h NAA.
Percobaan dilaksanakan d i Laboratorium K u l t u r J a r i n g a n J u r u s a n B u d i Daya P e r t a n i a n , I n s t i t u t P e r t a n i a n B o g o r ,
m u l a i Mei 1 9 9 0 s a m p a i F e b r u a r i 1 9 9 1 .

dalam t i g a t a h a p .

Percobaan d i l a k u k a n

Media d a s a r y a n g d i g u n a k a n u n t u k s e l u -

r u h p e r l a k u a n d a l a m p e r c o b a a n i n i a d a l a h m e d i a MS p a d a t .
T a h a p pertama a d a l a h penanaman e m b r i o z i g o t i k k a k a o
u n t u k mendapatkan embrio s o m a t i k .

Media yang digunakan

dalam t a h a p i n i a d a l a h m e d i a MS p a d a t d i t a m b a h 1 0 % ( v / v )

a i r k e l a p a , 1 . 0 g / l c a s e i n h i d r o l i s a t , 1 . 5 ppm NAA d a n

30 g/l sukrosa.

T a h a p i m i menggunakan 5 0 u l a n g a n d a n t i a p

ulangan t e r d i r i d a r i s a t u embrio z i g o t i k kakao.
T a h a p k e d u a a d a l a h s u b k u l t u r e m b r i o s o m a t i k d a l a m med i a perlakuan nitrogen-sukrosa.
bentuk

Nitrogen d i b e r i k a n dalam

ammonium n i t r a t d e n g a n k o n s e n t r a s i

1 6 5 0 mg/l

( N 2 ) d a n 3300 mg/l

825

mg/l


(N1),

(N3) a t a u s e t a r a d e n g a n 1 / 2 ,

I d a n 2 k a l i k o n s e n t r a s i ammonium n i t r a t d a l a m m e d i a MS
standar.

Sukrosa d i b e r i k a n dengan k o n s e n t r a s i :

( S l ) , 30 g/l ( S 2 ) , 60 g/l ( S g ) dan 120 g/l ( S q )

15 g/l
Tiap

perlakuan d i u l a n g 10 k a l i dan s e t i a p ulangan t e r d i r i d a r i
s a t u embrio s o m a t i k kakao.
Tahap k e t i g a a d a l a h s u b k u l t u r embrio s o m a t i k kakao
dalam media p e r l a k u a n NAA.
a d a l a h : 0 . 0 ppm. 0 . 1 ppm,


K o n s e n t r a s i NAA y a n g d i b e r i k a n
1 . 0 ppm d a n 1 . 5 ppm.

Ketiga

perlakuan d i u l a n g 17 k a l i , s e t i a p ulangan t e r d i r i d a r i sat u embrio s o m a t i k kakao.
K u l t u r e m b r i o s o m a t i k k a k a o p a d a semua p e r l a k u a n n i t r o g e n - s u k r o s a mengalami pertambahan p a n j a n g .

K u l t u r yang

membentuk a k a r d i d a p a t k a n p a d a p e r l a k u a n 8 2 5 mg/l ammonium
n i t r a t dengan k o n s e n t r a s i s u k r o s a 120 g/l,

mg/l

p e r l a k u a n 1650

ammonium n i t r a t p a d a t a r a f s u k r o s a 3 0 , 6 0 d a n 1 2 0 g / l

dan p e r l a k u a n 3300 m g / l

g/l sukrosa.

ammonium n i t r a t d e n g a n 6 0 d a n 1 2 0

K u l t u r y a n g membentuk e m b r i o s o m a t i k k e m b a l i

(berembriogenesis) didapatkan pada perlakuan 825 n g / l

am-

monium n i t r a t d e n g a n 6 0 d a n 1 2 0 g / l s u k r o s a s e r t a p e r l a k u an 3300 m g / l

ammonium n i t r a t d e n g a n 30 g/1 s u k r o s a .

Embrio s o m a t i k kakao p a d a t a h a p k e t i g a mengalami penc o k l a t a n , pembentukan a k a r d a n k a l u s .

Peningkatan konsen-

t r a s i N A A m e n y e b a b k a n p e n i n g k a t a n j u m l a h k u l t u r y a n g membentuk akar dan kalus.


Semua p e r l a k u a n d a l a m p e r c o b a a n

i n i t i d a k menghasilkan k u l t u r yang b e r t u n a s .

STUD1 PERTUHBUWBN D M P E m H B B N G B N
EMBRIO SOHATIB

( Theobroma

cacao L .)

YBNG D I H A S I L W DARI KULTUR IN VITRO

Oleh
SUZmNA LBWRIA SIREGAR

A 23.0802

Laporan Karya I l m i a h
sebagai s a l a h s a t u syarat n e m p e r o l e h


gelar Sarjana P e r t a n i a n pada F a k u l t a s P e r t a n i a n
I n s t i t u t P e r t m i a n Bogor

JURUSBN BUD1 DAYA PERTBNIBN
PAKULTAS PERTBHIBN
INSTITUT P E R T M I A N BOGOR
BOGOR

1991

INSTITUT PERTBWIBN BOGOR
PBKULTAS PERTBNIBN, JURUSBN BUD1 DAYA PERTBNIBN

K a m i m e n y a t a k a n bahwa L a p o r a n Karya I l m i a h y a n g d i s u sun o l e h

Nama

:


: SUZANNA LAMRIA SIREGAR

Nomor Pokok : A 23.0802
Judul

: STUD1 PERTUMBUHAN DAN PERKEMBANGAN

EMBRIO SOMATIK KAKAO (Theobroma cacao L . )
YANG DIHASILKAN D A R I KULTUR I N VITRO

d i t e r i m a s e b a g a i s a l a h s a t u s y a r a t u n t u k memperoleh g e l a r
S a r j a n a P e r t a n i a n p a d a J u r u s a n B u d i Daya P e r t a n i a n , F a k u l -

t a s P e r t a n i a n , I n s t i t u t P e r t a n i a n Bogor.

Dosen P e m b i n b i n g I1

Dosen Pembimbin

Dr

Ketua J u r u s a n

Ir

S r i Setyati Harjadi

K e t u a PS Agronomi

RIWAYAT BIDUP
P e n u l i s d i l a h i r k a n d i J a k a r t a p a d a t a n g g a l 1 9 Septemb e r 1968 s e b a g a i a n a k kedua d a r i d u a b e r s a u d a r a , p u t r i pasangan L . S i r e g a r dan A . Pohan.
P e n u l i s menyelesaikan pendidikan sekolah d a s a r pada
t a h u n 1 9 8 0 d a r i SD PSKD I1 J a k a r t a , m e l a n j u t k a n p e n d i d i k a n
k e SMP N e g e r i 1 J a k a r t a d a n l u l u s t a h u n 1 9 8 3 .

P e n u l i s me-

nempuh p e n d i d i k a n s e k o l a h l a n j u t a n a t a s d i SMA N e g e r i 4
J a k a r t a dan l u l u s tahun 1986.

Pada t a h u n 1986 m e l a l u i ja-


l u r P e n e l u s u r a n M i n a t d a n Kemampuan (PMDK), p e n u l i s d i t e -

rima d i I n s t i t u t P e r t a n i a n B o g o r .

S e t a h u n kemudian, penu-

lis d i t e r i m a d i J u r u s a n B u d i Daya P e r t a n i a n , P r o g r a m S t u d i

Agronomi, P r o g r a m S t u d i Kekhususan P e r k e b u n a n .
P e n u l i s t e r c a t a t sebagai a s i s t e n praktikum B i o l o g i
Umum d a r i t a h u n a j a r a n 1989/1990 s a m p a i 1990/1991 d a n Bot a n i Umum p a d a t a h u n a j a r a n 1 9 9 0 / 1 9 9 1 , k e d u a n y a p a d a J u r u s a n B i o l o g i , F a k u l t a s M a t e m a t i k a d a n Ilmu P e n g e t a h u a n
Alan, I n s t i t u t P e r t a n i a n Bogor.

KATA PENGMTAR
P u j i s y u k u r p e n u l i s p a n j a t k a n k e h a d i r a t Tuhan A l l a h
k a r e n a hanya dengan kasih-Nya,

p e n u l i s d a p a t menyelesaikan


p e n e l i t i a n dan penyusunan l a p o r a n k a r y a i l m i a h i n i .
P e n u l i s menghaturkan t e r i m a k a s i h kepada
1.

:

I b u D r I r L i v y W i n a t a Gunawan d a n B a p a k D r I r S u d i r m a n
Yahya s e b a g a i d o s e n p e m b i m b i n g y a n g t e l a h membantu
pelaksanaan p e n e l i t i a n dan penyusunan laporan i n i .

2.

B a p a k D r I r Roedhy P o e r w a n t o d a n B a p a k I r Agus P u r w i t o
s e b a g a i d o s e n p e n g u j i y a n g m e m b e r i b a n y a k masukan b a g i
perbaikan laporan i n i .

3.

S t a f Laboratorium K u l t u r J a r i n g a n d a n rekan-rekan

ma-

h a s i s w a J u r u s a n Budi Daya P e r t a n i a n , IPB.
4.

Fanny,SW d a n warga B e l i t u n g 2 1 s e r t a semua p i h a k y a n g
t e l a h membantu p e l a k s a n a a n p e n e l i t i a n d a n p e n y u s u n a n
laporan i n i .
Semoga l a p o r a n y a n g s e d e r h a n a i n i b e r m a n f a a t b a g i s e -

mua p i h a k y a n g m e m b u t u h k a n n y a .

Bogor, Agustus 1991.
Penulis

VAN6 DlHASllKAlhl DWRl KULTUR IN VITRO

Oleh
SUZANNA LAMRIA SIREGAR
A 23. 0 8 0 2

JURUSAN BUD1 DAYA PERTANIAN
FAKULTAS PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
1991

SUZANNA L M R I A SIREGAR.

S t u d i Pertumbuhan d a n Perkembang-

a n E m b r i o S o m a t i k Kakao ( T h e o b r o m a c a c a o L . ) y a n g D i h a s i l k a n d a r i K u l t u r I n V i t r o ( d i bawah b i m b i n g a n L I V Y WINATA

GUNAWAN d a n SUDIRHAN YAHYA).
Percobaan i n i b e r t u j u a n m e m p e l a j a r i pertumbuhan d a n
p e r k e m b a n g a n e m b r i o s o m a t i k k a k a o Amelonado p a d a b e r b a g a i
t a r a f n i t r o g e n dan s u k r o s a dalam media Murashige-Skoog
(MS) s e r t a m e m p e l a j a r i r e s p o n n y a t e r h a d a p z a t p e n g a t u r
t u m b u h NAA.
Percobaan dilaksanakan d i Laboratorium K u l t u r J a r i n g a n J u r u s a n B u d i Daya P e r t a n i a n , I n s t i t u t P e r t a n i a n B o g o r ,
m u l a i Mei 1 9 9 0 s a m p a i F e b r u a r i 1 9 9 1 .

dalam t i g a t a h a p .

Percobaan d i l a k u k a n

Media d a s a r y a n g d i g u n a k a n u n t u k s e l u -

r u h p e r l a k u a n d a l a m p e r c o b a a n i n i a d a l a h m e d i a MS p a d a t .
T a h a p pertama a d a l a h penanaman e m b r i o z i g o t i k k a k a o
u n t u k mendapatkan embrio s o m a t i k .

Media yang digunakan

dalam t a h a p i n i a d a l a h m e d i a MS p a d a t d i t a m b a h 1 0 % ( v / v )

a i r k e l a p a , 1 . 0 g / l c a s e i n h i d r o l i s a t , 1 . 5 ppm NAA d a n
30 g/l sukrosa.

T a h a p i m i menggunakan 5 0 u l a n g a n d a n t i a p

ulangan t e r d i r i d a r i s a t u embrio z i g o t i k kakao.
T a h a p k e d u a a d a l a h s u b k u l t u r e m b r i o s o m a t i k d a l a m med i a perlakuan nitrogen-sukrosa.
bentuk

Nitrogen d i b e r i k a n dalam

ammonium n i t r a t d e n g a n k o n s e n t r a s i

1 6 5 0 mg/l

( N 2 ) d a n 3300 mg/l

825

mg/l

(N1),

(N3) a t a u s e t a r a d e n g a n 1 / 2 ,

I d a n 2 k a l i k o n s e n t r a s i ammonium n i t r a t d a l a m m e d i a MS
standar.

Sukrosa d i b e r i k a n dengan k o n s e n t r a s i :

( S l ) , 30 g/l ( S 2 ) , 60 g/l ( S g ) dan 120 g/l ( S q )

15 g/l
Tiap

perlakuan d i u l a n g 10 k a l i dan s e t i a p ulangan t e r d i r i d a r i
s a t u embrio s o m a t i k kakao.
Tahap k e t i g a a d a l a h s u b k u l t u r embrio s o m a t i k kakao
dalam media p e r l a k u a n NAA.
a d a l a h : 0 . 0 ppm. 0 . 1 ppm,

K o n s e n t r a s i NAA y a n g d i b e r i k a n
1 . 0 ppm d a n 1 . 5 ppm.

Ketiga

perlakuan d i u l a n g 17 k a l i , s e t i a p ulangan t e r d i r i d a r i sat u embrio s o m a t i k kakao.
K u l t u r e m b r i o s o m a t i k k a k a o p a d a semua p e r l a k u a n n i t r o g e n - s u k r o s a mengalami pertambahan p a n j a n g .

K u l t u r yang

membentuk a k a r d i d a p a t k a n p a d a p e r l a k u a n 8 2 5 mg/l ammonium
n i t r a t dengan k o n s e n t r a s i s u k r o s a 120 g/l,

mg/l

p e r l a k u a n 1650

ammonium n i t r a t p a d a t a r a f s u k r o s a 3 0 , 6 0 d a n 1 2 0 g / l

dan p e r l a k u a n 3300 m g / l
g/l sukrosa.

ammonium n i t r a t d e n g a n 6 0 d a n 1 2 0

K u l t u r y a n g membentuk e m b r i o s o m a t i k k e m b a l i

(berembriogenesis) didapatkan pada perlakuan 825 n g / l

am-

monium n i t r a t d e n g a n 6 0 d a n 1 2 0 g / l s u k r o s a s e r t a p e r l a k u an 3300 m g / l

ammonium n i t r a t d e n g a n 30 g/1 s u k r o s a .

Embrio s o m a t i k kakao p a d a t a h a p k e t i g a mengalami penc o k l a t a n , pembentukan a k a r d a n k a l u s .

Peningkatan konsen-

t r a s i N A A m e n y e b a b k a n p e n i n g k a t a n j u m l a h k u l t u r y a n g membentuk akar dan kalus.

Semua p e r l a k u a n d a l a m p e r c o b a a n

i n i t i d a k menghasilkan k u l t u r yang b e r t u n a s .

STUD1 PERTUHBUWBN D M P E m H B B N G B N
EMBRIO SOHATIB

( Theobroma

cacao L .)

YBNG D I H A S I L W DARI KULTUR IN VITRO

Oleh
SUZmNA LBWRIA SIREGAR

A 23.0802

Laporan Karya I l m i a h
sebagai s a l a h s a t u syarat n e m p e r o l e h

gelar Sarjana P e r t a n i a n pada F a k u l t a s P e r t a n i a n
I n s t i t u t P e r t m i a n Bogor

JURUSBN BUD1 DAYA PERTBNIBN
PAKULTAS PERTBHIBN
INSTITUT P E R T M I A N BOGOR
BOGOR

1991

INSTITUT PERTBWIBN BOGOR
PBKULTAS PERTBNIBN, JURUSBN BUD1 DAYA PERTBNIBN

K a m i m e n y a t a k a n bahwa L a p o r a n Karya I l m i a h y a n g d i s u sun o l e h

Nama

:

: SUZANNA LAMRIA SIREGAR

Nomor Pokok : A 23.0802
Judul

: STUD1 PERTUMBUHAN DAN PERKEMBANGAN

EMBRIO SOMATIK KAKAO (Theobroma cacao L . )
YANG DIHASILKAN D A R I KULTUR I N VITRO

d i t e r i m a s e b a g a i s a l a h s a t u s y a r a t u n t u k memperoleh g e l a r
S a r j a n a P e r t a n i a n p a d a J u r u s a n B u d i Daya P e r t a n i a n , F a k u l -

t a s P e r t a n i a n , I n s t i t u t P e r t a n i a n Bogor.

Dosen P e m b i n b i n g I1

Dosen Pembimbin

Dr
Ketua J u r u s a n

Ir

S r i Setyati Harjadi

K e t u a PS Agronomi

RIWAYAT BIDUP
P e n u l i s d i l a h i r k a n d i J a k a r t a p a d a t a n g g a l 1 9 Septemb e r 1968 s e b a g a i a n a k kedua d a r i d u a b e r s a u d a r a , p u t r i pasangan L . S i r e g a r dan A . Pohan.
P e n u l i s menyelesaikan pendidikan sekolah d a s a r pada
t a h u n 1 9 8 0 d a r i SD PSKD I1 J a k a r t a , m e l a n j u t k a n p e n d i d i k a n
k e SMP N e g e r i 1 J a k a r t a d a n l u l u s t a h u n 1 9 8 3 .

P e n u l i s me-

nempuh p e n d i d i k a n s e k o l a h l a n j u t a n a t a s d i SMA N e g e r i 4
J a k a r t a dan l u l u s tahun 1986.

Pada t a h u n 1986 m e l a l u i ja-

l u r P e n e l u s u r a n M i n a t d a n Kemampuan (PMDK), p e n u l i s d i t e -

rima d i I n s t i t u t P e r t a n i a n B o g o r .

S e t a h u n kemudian, penu-

lis d i t e r i m a d i J u r u s a n B u d i Daya P e r t a n i a n , P r o g r a m S t u d i

Agronomi, P r o g r a m S t u d i Kekhususan P e r k e b u n a n .
P e n u l i s t e r c a t a t sebagai a s i s t e n praktikum B i o l o g i
Umum d a r i t a h u n a j a r a n 1989/1990 s a m p a i 1990/1991 d a n Bot a n i Umum p a d a t a h u n a j a r a n 1 9 9 0 / 1 9 9 1 , k e d u a n y a p a d a J u r u s a n B i o l o g i , F a k u l t a s M a t e m a t i k a d a n Ilmu P e n g e t a h u a n
Alan, I n s t i t u t P e r t a n i a n Bogor.

KATA PENGMTAR
P u j i s y u k u r p e n u l i s p a n j a t k a n k e h a d i r a t Tuhan A l l a h
k a r e n a hanya dengan kasih-Nya,

p e n u l i s d a p a t menyelesaikan

p e n e l i t i a n dan penyusunan l a p o r a n k a r y a i l m i a h i n i .
P e n u l i s menghaturkan t e r i m a k a s i h kepada
1.

:

I b u D r I r L i v y W i n a t a Gunawan d a n B a p a k D r I r S u d i r m a n
Yahya s e b a g a i d o s e n p e m b i m b i n g y a n g t e l a h membantu
pelaksanaan p e n e l i t i a n dan penyusunan laporan i n i .

2.

B a p a k D r I r Roedhy P o e r w a n t o d a n B a p a k I r Agus P u r w i t o
s e b a g a i d o s e n p e n g u j i y a n g m e m b e r i b a n y a k masukan b a g i
perbaikan laporan i n i .

3.

S t a f Laboratorium K u l t u r J a r i n g a n d a n rekan-rekan

ma-

h a s i s w a J u r u s a n Budi Daya P e r t a n i a n , IPB.
4.

Fanny,SW d a n warga B e l i t u n g 2 1 s e r t a semua p i h a k y a n g
t e l a h membantu p e l a k s a n a a n p e n e l i t i a n d a n p e n y u s u n a n
laporan i n i .
Semoga l a p o r a n y a n g s e d e r h a n a i n i b e r m a n f a a t b a g i s e -

mua p i h a k y a n g m e m b u t u h k a n n y a .

Bogor, Agustus 1991.
Penulis