Pengaruh Lama Penyinaran dan GA3 Terhadap Induksi Tunas Mikro pada Tanaman Karet (Hevea brasiliensis Muell. Arg)
Lampiran 1. Data Pengamatan Umur Munculnya Tunas (hari)
ULANGAN
Perlakuan
1
2
3
4
5
6
21
28
28
28
21
21
C1G1
21
28
28
21
28
28
C1G2
28
21
28
21
21
21
C1G3
21
21
21
28
28
28
C1G4
21
21
28
28
28
28
C2G1
28
28
21
21
21
21
C2G2
28
21
21
28
28
21
C2G3
21
21
21
28
21
28
C2G4
28
21
0
21
21
28
C3G1
21
28
28
28
28
21
C3G2
21
21
28
21
28
21
C3G3
28
28
21
28
21
21
C3G4
287
287
294
301
294
287
TOTAL
RATAAN 23,92 23,92 24,50 25,08 24,50 23,92
7
28
21
21
21
28
28
21
28
21
28
21
21
287
23,92
Total
175
175
161
168
182
168
168
168
161
182
161
168
2037
Rataan
25
25
23
24
26
24
24
24
23
26
23
24
24,25
xliv
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Data Pengamatan Persentase Munculnya Tunas (%)
Perlakuan
1
2
100 100
C1G1
100 100
C1G2
100 100
C1G3
100 100
C1G4
100 100
C2G1
100 100
C2G2
100 100
C2G3
100 100
C2G4
100 100
C3G1
100 100
C3G2
100 100
C3G3
100 100
C3G4
1200 1200
Total
100 100
Rataan
ULANGAN
3
4
5
6
7
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
0 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
1100 1200 1200 1200 1200
91,67 100 100 100 100
Total
700
700
700
700
700
700
700
700
600
700
700
700
Rataan
100
100
100
100
100
100
100
100
85,71
100
100
100
8300
98,80952
xlv
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Data Transformasi Persentase Munculnya Tunas Arcsin √P
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
1080 1080
90
90
ULANGAN
3
4
5
6
7
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
0,41
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
990,405 1080 1080 1080 1080
82,5338
90
90
90
90
Total
Rataan
630
630
630
630
630
630
630
630
540,41
630
630
630
7470,41
90
90
90
90
90
90
90
90
77,20
90
90
90
88,93
Lampiran 4. Daftar Sidik Ragam Persentase Munculnya Tunas
SK
C
G
CxG
Galat
Total
db
2
3
6
72
83
FK
KK
664368,48
10,99
JK
191,12
286,69
573,37
5829,30
7931,68
KT
95,56
95,56
95,56
95,56
F.Hit
1,37
1,40
1,43
0,05
3,15
2,76
2,25
Ket
tn
tn
tn
xlvi
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Data Pengamatan Jumlah Tunas (tunas)
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
12,00 12,00
1,00 1,00
ULANGAN
3
4
5
6
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
0,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
11,00 12,00 12,00 12,00
0,92 1,00 1,00 1,00
7
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
12,00
1,00
Total
7,00
7,00
7,00
7,00
7,00
7,00
7,00
7,00
6,00
7,00
7,00
7,00
83,00
Rataan
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
0,86
1,00
1,00
1,00
0,99
xlvii
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Data Transformasi Jumlah Tunas √x+ 0,5
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
14,70 14,70
1,22 1,22
ULANGAN
3
4
5
6
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
0,71 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
14,18 14,70 14,70 14,70
1,18 1,22 1,22 1,22
Lampiran 7. Data Sidik Ragam Jumlah Tunas
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
C
2
0,01
0,003
1,37
G
3
0,01
0,003
1,40
CxG
6
0,02
0,003
1,43
Galat
72
0,19
0,003
Total
83
0,26
FK
KK
7
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
14,70
1,22
0,05
3,15
2,76
2,25
Total
8,57
8,57
8,57
8,57
8,57
8,57
8,57
8,57
8,06
8,57
8,57
8,57
102,36
Rataan
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,15
1,22
1,22
1,22
1,22
Ket
tn
tn
tn
124,7352
4,634807
xlviii
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. Data Pengamatan Panjang Tunas (cm)
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
1,50
2,10
2,50
2,20
0,20
3,40
0,80
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
13,70
1,14
2
1,80
1,80
1,50
1,20
0,10
1,50
0,60
0,20
0,10
0,20
0,30
0,20
9,50
0,79
ULANGAN
3
4
5
1,00 0,20 0,20
0,90 0,50 0,50
1,80 0,60 1,00
0,70 0,60 0,40
0,50 0,60 1,50
0,50 0,20 0,50
0,10 0,20 0,50
0,20 0,50 0,20
0,00 0,20 0,20
0,10 0,80 0,20
0,20 0,20 0,20
0,30 0,20 0,30
6,30 4,80 5,70
0,53 0,40 0,48
6
0,20
1,60
0,70
0,20
1,30
0,70
0,20
0,30
0,20
0,20
0,30
0,30
6,20
0,52
7
0,10
0,20
0,50
0,30
0,10
0,30
0,50
0,20
0,80
0,20
0,30
0,30
3,80
0,32
Total
Rataan
5,00
7,60
8,60
5,60
4,30
7,10
2,90
1,80
1,70
1,90
1,70
1,80
50,00
xlix
Universitas Sumatera Utara
0,71
1,09
1,23
0,80
0,61
1,01
0,41
0,26
0,24
0,27
0,24
0,26
0,60
Lampiran 9. Data Transformasi Panjang Tunas √x+ 0,5
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
1,41 1,52
1,61 1,52
1,73 1,41
1,64 1,30
0,84 0,77
1,97 1,41
1,14 1,05
0,84 0,84
0,84 0,77
0,84 0,84
0,84 0,89
0,84 0,84
14,54 13,17
1,21 1,10
ULANGAN
3
4
5
6
1,22 0,84 0,84 0,84
1,18 1,00 1,00 1,45
1,52 1,05 1,22 1,10
1,10 1,05 0,95 0,84
1,00 1,05 1,41 1,34
1,00 0,84 1,00 1,10
0,77 0,84 1,00 0,84
0,84 1,00 0,84 0,89
0,71 0,84 0,84 0,84
0,77 1,14 0,84 0,84
0,84 0,84 0,84 0,89
0,89 0,84 0,89 0,89
11,84 11,31 11,67 11,85
0,99 0,94 0,97 0,99
Lampiran 10. Data Sidik Ragam Panjang Tunas
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
C
2
1,34
0,67
12,86
G
3
0,24
0,08
1,52
CxG
6
0,34
0,06
1,12
Galat
72
1,83
0,03
Total
83
5,69
FK
KK
7
0,77
0,84
1,00
0,89
0,77
0,89
1,00
0,84
1,14
0,84
0,89
0,89
10,78
0,90
0,05
3,15
2,76
2,25
Total
7,44
8,60
9,03
7,77
7,19
8,22
6,64
6,08
5,97
6,10
6,03
6,09
85,15
Rataan
1,06
1,23
1,29
1,11
1,03
1,17
0,95
0,87
0,85
0,87
0,86
0,87
1,01
Ket
**
tn
tn
86,30755
22,4459
l
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. Data Pengamatan Jumlah Terbentuk bakal daun
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
1
1
1
1
0
1
1
0
0
0
0
0
6
0,5
1
1
1
1
0
1
1
0
0
0
0
0
6
0,5
ULANGAN
3
4
5
1
0
0
1
0
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
0
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
0
0
1
0
0
0
0
0
0
0
5
5
4
0,42 0,42 0,33
6
7
0
1
1
0
1
1
0
0
0
0
0
0
4
0,33
0
0
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
0,08
Total
Rataan
3
5
7
5
4
3
2
1
0
1
0
0
31
0,43
0,71
1,00
0,71
0,57
0,43
0,29
0,14
0,00
0,14
0,00
0,00
0,37
li
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 12. Data Transformasi Terbentuknya Bakal Daun
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
0,71 0,71
1,22 1,22
1,22 1,22
0,71 0,71
0,71 0,71
0,71 0,71
0,71 0,71
0,71 0,71
11,59 11,59
0,97 0,97
ULANGAN
3
4
5
6
1,22 0,71 0,71 0,71
1,22 0,71 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 0,71
1,22 1,22 1,22 1,22
0,71 0,71 0,71 1,22
0,71 0,71 0,71 0,71
0,71 1,22 0,71 0,71
0,71 0,71 0,71 0,71
0,71 1,22 0,71 0,71
0,71 0,71 0,71 0,71
0,71 0,71 0,71 0,71
11,07 11,07 10,56 10,56
0,92 0,92 0,88 0,88
7
0,71
0,71
1,22
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
9,00
0,75
Lampiran 13. Data Sidik Ragam Terbentuknya Bakal Daun
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
0,05
C
2
1,73
0,86
20,84
3,15
G
3
0,09
0,03
0.90
2,76
CxG
6
0,44
0,07
1.67
2,25
Galat
72
0,73
0,01
Total
83
5,24
FK
KK
Total
Rataan
6,50
7,54
8,57
7,54
7,02
6,50
5,99
5,47
4,95
5,47
4,95
4,95
75,44
0,93
1,08
1,22
1,08
1,00
0,93
0,86
0,78
0,71
0,78
0,71
0,71
0,90
Ket
**
tn
tn
67,75904
22,3368
lii
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. Data Pengamatan Jumlah Daun (helai)
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
3,00 5,00
8,00 3,00
5,00 4,00
6,00 4,00
0,00 0,00
9,00 3,00
2,00 2,00
0,00 0,00
0,00 0,00
0,00 0,00
0,00 0,00
0,00 0,00
33,00 21,00
2,75 1,75
ULANGAN
3
4
5
2,00 0,00 0,00
6,00 0,00 3,00
8,00 1,00 5,00
3,00 1,00 2,00
2,00 2,00 4,00
0,00 0,00 0,00
0,00 0,00 0,00
0,00 1,00 0,00
0,00 0,00 0,00
0,00 3,00 0,00
0,00 0,00 0,00
0,00 0,00 0,00
21,00 8,00 14,00
1,75 0,67 1,17
6
0,00
2,00
4,00
0,00
0,00
1,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
7,00
0,58
7
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
Total
10,00
22,00
27,00
16,00
8,00
13,00
4,00
1,00
0,00
3,00
0,00
0,00
104,00
Rataan
1,43
3,14
3,86
2,29
1,14
1,86
0,57
0,14
0,00
0,43
0,00
0,00
1,24
liii
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 15. Data Transformasi Jumlah Daun √x+ 0,5
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
1,87 2,35
2,92 1,87
2,35 2,12
2,55 2,12
0,71 0,71
3,08 1,87
1,58 1,58
0,71 0,71
0,71 0,71
0,71 0,71
0,71 0,71
0,71 0,71
18,59 16,15
1,55 1,35
ULANGAN
3
4
5
6
1,58 0,71 0,71 0,71
2,55 0,71 1,87 1,58
2,92 1,22 2,35 2,12
1,87 1,22 1,58 0,71
1,58 1,58 2,12 0,71
0,71 0,71 0,71 1,22
0,71 0,71 0,71 0,71
0,71 1,22 0,71 0,71
0,71 0,71 0,71 0,71
0,71 1,87 0,71 0,71
0,71 0,71 0,71 0,71
0,71 0,71 0,71 0,71
15,45 12,08 13,58 11,29
1,29 1,01 1,13 0,94
Lampiran 16. Data Sidik Ragam Jumlah Daun
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
C
2
11,00
5,50
17,25
G
3
1,25
0,42
1,31
CxG
6
1,99
0,33
1,04
Galat
72
8,68
0,14
Total
83
37,16
FK
KK
7
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
8,49
0,71
0,05
3,15
2,76
2,25
Total
8,63
12,20
13,78
10,76
8,11
9,01
6,70
5,47
4,95
6,11
4,95
4,95
95,62
Rataan
1,23
1,74
1,97
1,54
1,16
1,29
0,96
0,78
0,71
0,87
0,71
0,71
1,14
Ket
**
tn
tn
108,8381
49,4316
liv
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 17. Komposisi Media MurashigedanSkoog (MS)
Bahan Kimia
Konsentrasi Media (mg/l)
Makro Nutrien (Stok I)
NH4 NO3
KNO3
CaCl2.2H2O
MgSO4.7H2O
KH2PO4
1650,000
1900,000
440,000
370,000
170,000
Mikro Nutrien (Stok II)
MnSO4.H2O
ZnSO4.7H2O
H3BO3
KI
Na2MoO4.2H20
CuSO4.5H2O
CoCl2.6H2O
6,900
8,600
6,200
0,830
0,250
0,025
0,025
Iron (Stok III)
FeSO4.7H2O
Na2.EDTA
27,800
37,200
Vitamin (Stok IV)
Nikotinic acid
Pyridoxin HCL
Thiamine HCL
Myo-inositol
0,500
0,500
0,100
100,000
Sukrosa
Agar
30.000,000
7.000,000
(Sumber: Gunawan, 1995)
lv
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 18. Bagan Penelitian
I
II
C1G1
C1G4
C2G3
III
IV
V
VI
VII
C1G2
C2G2
C1G1
C2G3
C1G3
C2G2
C3G1
C2G4
C3G1
C2G1
C3G1
C3G2
C1G2
C2G3
C1G2
C3G2
C1G4
C3G3
C1G3
C2G1
C3G3
C3G2
C2G2
C2G4
C2G2
C3G1
C3G2
C1G1
C3G3
C1G3
C3G1
C1G1
C1G4
C3G1
C2G4
C1G4
C2G4
C3G2
C3G2
C2G4
C1G3
C2G1
C3G4
C1G4
C1G2
C3G3
C2G3
C2G3
C3G2
C1G2
C3G4
C3G3
C1G4
C1G1
C1G1
C3G1
C2G2
C2G4
C2G2
C2G3
C3G3
C2G2
C1G2
C2G3
C1G1
C3G4
C2G1
C1G2
C2G4
C3G4
C3G4
C2G1
C1G4
C1G2
C2G1
C1G3
C2G1
C1G3
C3G3
C3G4
C3G4
lvi
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 19. Kegiatan Penelitian
Jenis Kegiatan
Sterilisasi Alat
Pembuatan Media
Pengambilan Bahan Tanaman
Sterilisasi Bahan Tanaman
Persiapan Ruang Tanam
Penanaman
Pemeliharaan Eksplan
1
X
X
2
3
Minggu ke –
4
5
6
7
8
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
Peubah amatan
- Persentase Munculnya Tunas (%)
X
- Umur Munculnya Tunas (hari)
X
- Jumlah Tunas (tunas)
X
- Panjang Tunas (cm)
X
- Jumlah Terbentuknya Bakal Daun
X
- Jumlah Daun (helai)
X
- Kehadiran Kalus (visual)
X
- Warna Kalus
X
- Morfogenesis
X
lvii
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 20. Lampiran Foto Penelitian
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
lviii
Universitas Sumatera Utara
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
lix
Universitas Sumatera Utara
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
lx
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR PUSTAKA
Abbas, B.S., S. Ginting. 1981. Influence of Rootstock and Scion on Girth
Increment in Rubber Trees. Buletin Balai Penelitian Perkebunan Medan12,
145-152.
Abo , M.M. 1977. Organogenesis and Organogenesis and Embryogenesis in
Callus Culture of Garlic (Allium sativum L) . Plant Sci. Letter. 9:259-264.
Altman, A., B. Loberant. 1998. Micropropagation: clonal plant propagation in
vitro, p. 19-34. In: A. Altman (Ed.) Agricultural Biotechnology. Marcel
Dekker Inc. New York.
Anwar. 2006. Perkembangan Pasar dan Prospek Agribisnis Karet di Indonesia.
Lokakarya Budidaya Tanaman Karet. Pusat Penelitian Karet. Medan. 2p.
Ariany, S. P., Nirwan, S., Abdul, S. 2013. Pengaruh Kuantitas Cahaya Terhadap
Pertumbuhan Dan Kadar Antosianin Daun Dewa (Gynura pseudochina
(L.) DC) Secara In Vitro. e-J. Agrotekbis 1 (5) : 413 – 420.
Armini, N. M., G. A. Wattimena ., L. Gunawan. 1991. Bioteknologi Tanaman.
Tim Laboratorium Kultur Jaringan. Pusat Antar Universitas Bioteknologi.
IPB. Bogor. 455 hal.
Benny, Lahmuddin, L., Syahrial, O., Zaidah, F.2013. Uji Dosis Dan Cara
Aplikasi
Biofungisida
Bacillus
sp.
Terhadap
Penyakit Jamur Akar Putih (Rigidoporus lignosus) Pada Tanaman Karet
Di Pembibitan. Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan.
Bewley, J. D., M. Black. 1982. Seeds: Physiology of Development and
Germination. Plenum Press. London. 418 p.
Budiman, H., 2012. BudidayaKaretUnggulProspekJituInvestasiMasaDepan.
PustakaBaru Press, Yogyakarta.
Carron, M.P.dan F. Enjalric. 1983. Perspectives du micro bouturage de l’Hevea
brasiliensis. Caoutchoucs et Plastiques 627-628, 65-68.
Cresswell, R D, Bouiary, M ., Franclet A (1982). Vegetative propagation of
Eucalyptus.In: Tissue culture in Forestry, pp. 150-180 (Eds. J M Bonga
and D J Durzon).Martinus Nijhott/Dr.W Junk publishers.
Djumat, J. L. 2014. Multiplikasi In Vitro Samama (Anthocephalus macrophyllus
(ROBX).HAVIL) Melalui Tunas Pucuk Dan Tunas Aksilar. Fakultas
Kehutanan UNIDAR, Ambon.
Gardner, F. P., R. B. Pearce, R. L. Mitchell. 1991. Fisiologi Tanaman Budidaya.
UI-Press. Jakarta. 426 hal.
xl
Universitas Sumatera Utara
Gunawan, L.W., 1995. Teknik Kultur Jaringan In Vitro dalam Hortikultura.
Penebar Swadaya. Jakarta.
George, E. F., P. D. Sherrington. 1984. Plant Propagation by Tissue Culture.
Exegetics Limited. England.
Gunnatilleke, I.D., Samaranayake. C.. 1988. Shoot Tip Culture as a Method of
Micropropagation of Hevea. Rubber Research Institute Agalawatta.
Journal of the Rubber Research Institute of Sri Lanka. 68pp. 33-34.
Harahap, P. S., L. A. M. Siregar ., Y. Husni. 2015. Kajian Awal : Respon Eksplan
Nodus dalam Inisiasi Tunas Mikro Tanaman Karet
(Hevea
brasiliensis Muell Arg.) dalam Medium MS. Jurnal Online
Agroekoteknologi. Vol.3(1) : 229 – 237.
Haris, N. 2013. Batang Bawah Klonal : Apakah Mungkin Pada Tanaman Karet ?.
www.ibriec.org.juli 2013 1(1)
Haris, N., Sumaryono ., M.P. Carron., 2009. Pengaruh Bahan pra-sterilan, Tutup
Tabung Kultur, dan Terhadap Tingkat Kontaminasi Eksplan pada Kultur
Microcutting Karet. Menara Perkebunan, 2009 77(2), Hal 89-99.
Hendaryono, D. P. S ., A. Wijayani. 1994. Teknik Kultur Jaringan, Pengenalan
dan Petunjuk Perbanyakan Secara Vegetatip. Kanisius, Yogyakarta.
Hoesen, D. S. H. 2009. Pembentukan Tunas Lilium sp. Secara Ex Vitro Dan In
Vitro. J. Tek. Ling Vol. 10 No. 2 Hal. 183 - 193 Jakarta, Mei 2009 ISSN
1441-318X.
Hooley, R. 1994. Gibberellins : perception, transduction and responses. Plant
Molecular Biology 26: 1529-1555.
Jumroh, P.H. 2013. Pengaruh Periode Subkultur Terhadap Mikropropagasi Puar
Tenangau (Elettariopsis sp.).Fakultas Pertanian. Universitas Sumatera
Utara, Medan.
Kosmiatin, M., A. Husni, I. Mariska. 2005. Perkecambahan dan perbanyakan
Gaharu secara In Vitro. Jurnal Agrobiogen 1(2). Oktober 2005.
Kurilcik, A., Dapkuniene, S., Kurilcik, G., Zilinskaite, S., Zukauskas, A., P.
Duchovskis. 2008. Effect Of The Photoperiod Duration On The Growth Of
Chrysanthemum Plantlets In Vitro. Scientific Works Of The Lithuanian
Institute Of Horticulture And Lithuanian University Of Agriculture. 27(2).
Lawalata, I.J. 2013. Application of GA3 and Sucrose on Vegetative Growth of
Gloxinia (Siningia speciosa) In Vitro. Jurnal Budidaya Pertanian 9: 33-38.
xli
Universitas Sumatera Utara
Mitrovic1, A., Giba, Z ., L. Culafic. 2007. The Photoperiodic Control Of Growth
And Development of Chenopodium Rubrum L. Plants In Vitro. Arch. Biol.
Sci., Belgrade, 59 (3), 203-208.
Montoro P, MP Carron, L Lardet, A Clement-Demange, J Leclercq. 2010.
Biotechnologies of rubber tree (Hevea brasiliensis). Aus Pac J Mol Biol
Biotechnol 18(1), 81-83.
Muslihatin, W. 2009. Pertumbuhan dan Keragaan Planlet Sagu (Metroxylon sagu
Rottb)pada Medium dengan Berbagai Sumber Karbohidrat dan Intensitas
Cahaya yangBerbeda. Tesis Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian
Bogor.
Nayanakantha NMC., P Seneviratne (2007). Tissue culture of rubber: past, present
and future prospects. Ceylon J Sci 36(2), 116-125.
Padilla, I. M. G. , C. L. Encina. 2002. In vitro germination of cherimoya (Annona
cherimola Mill.) seeds.
Pancholi, N., A. Wetten, P. D. S. Caligari. 1995. Germination of Musa veluntia
seeds: comparison of in vivo and in vitro systems. In vitro cellular and
developmental biology 31: 127-130.
Pieterse, A. H. 1981. Germination of Orobanche crenata Forsk. seeds in vitro.
Weed Research 26(6): 279-287.
Rahmawati, M.S. 2008. Pengaruh BAP DAN GA3 Terhadap Perkecambahan
Heliconia caribaea Lam. Secara In Vitro. Fakultas Pertanian Institut
Pertanian Bogor.
Salisbury, F. B., C. W. Ross. 1992. Plant Physiology. 4th edition. Belmont,
California : Wadsworth Publishing Company.
Santoso, U., F. Nursandi, 2001. Kultur Jaringan Tanaman. Penerbit UMM,
Malang.
Seneviratna, P., G. A. S. Wijesekera. 1997. Effect Of GA3, On The Growth Of
Axillary Buds Of Hevea Brasilliensis In Vitro. Journal Of Yhe Rubber
Research Institute Of Sri Lanka, 80, 37-44.
Setiawan, H.D. ,A Andoko. 2005. Petunjuk Lengkap Budidaya Karet(edisi revisi).
Agromedia Pustaka. Jakarta.
Setyamidjaja, D., 1993. Karet Budidaya dan Pengelolaan. Kanisius, Yogyakarta.
Sianturi, H. S. D., 2001. Budidaya Tanaman Karet. Fakultas Pertanian USU.
Medan.
xlii
Universitas Sumatera Utara
Siburian, O. 2012. Analisis Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Ekspor Karet
Alam Indonesia Ke Singapura Tahun 1980-2010. Fakultas Ekonomi
Universitas Negeri Semarang.
Steel, R.G., J.H. Torrie, 1993. Prinsip Dan Prosedur Statiska (Pendekatan
Biometric) Penerjemah B. Sumantri. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
Steenis, C. G. G. K. 2005. Flora. PT. Pradnya Paramita. Jakarta.
Sundari, L., Siregar, L. A. M.,Hanafiah, D. S. 2015. Kajian Awal : Respon
Eksplan Nodus dalam Inisiasi Tunas Mikro Tanaman Karet
(Hevea brasiliensis Muell Arg.) dalam Medium WPM. Jurnal Online
Agroekoteknologi. 3(1): 4-5.
Syamsulbahri. 1996. Bercocok Tanam Tanaman Perkebunan Tahunan. Fakultas
Pertanian Universitas Brawijaya. Malang.
Thomas, T. D. 2006. Effect of sugars, gibberellic acid and somatic embryogenesis
in Tylophora indica (Burm. f.) Merrill. Chinese Journal of Biotechnology
22(3):465-471.
Wattimena, G.A;L.W. Gunawan; N. A. Mattjik; Endang. S; N.M. A. Wiendi.,
Andri. E. 1992. Bioteknologi Tanaman. Penerjemah Ahmad Sukarti
Abidin. Pusat Antar Universitas Bioteknologi IPB: Bogor.
Wetherell, D. F. 1982. Pengantar Propagasi Tanaman secara In Vitro Seri
KulturJaringan Tanaman. Avery Publishing Group, Inc. Wayne –
NewJersey.
Widyastuti, N. 2002. Pengaruh Intensitas Cahaya Terhadap Multiplikasi Kultur
Tanaman Secara In Vitro. Seminar Nasional Penerapan Teknologi Kendali
dan Instrumentasi Pertanian.
Yusnita., 2003. Kultur Jaringan. Cara Memperbanyak Tanaman Secara Efisisen.
Cetakan Ketiga. Agro Media Pustaka. Jakarta.
Yuwono, T. 2008. Bioteknologi Pertanian. Gadjah mada University Press:
Yogyakarta.
Zulkarnain, H. 2009. Kultur Jaringan Tanaman. Bumi Aksara. Jakarta.
xliii
Universitas Sumatera Utara
BAHAN DAN METODE
Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Microcutting Tanaman Karet
PT. Perkebunan Nusantara III Kebun Gunung Pamela Tebing Tinggi, Sumatera
Utara, Indonesia. Penelitian ini dimulai pada bulan April 2015 sampai dengan Juli
2015.
Bahan dan Alat Penelitian
Bahan eksplan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tunas dari
bahan tanaman karet yang di tanam di rumah kasa, komposisi media yang
digunakan larutan stok media WPM sebagai media tumbuh tanaman dengan BAP
dan GA3 sebagai zat pengatur tumbuh (ZPT) yang digunakan, eksplan yang
digunakan berasal dari beberapa klon yang merupakan koleksi PTPN III dengan
satu jenis klon dengan panjang 1,5 – 2 cm. Pada media WPM ditambahkan
dengan 0,5 mg/l BAP, agar, aquadest steril, dan bahan lainnya yang mendukung
penelitian ini.
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Laminar Air Flow
Cabinet (LAFC), tabung uji, autoklaf, steri box, timbangan analitik, rak kultur,
hot plate dengan magnetik stirer, erlenmeyer, gelas ukur, kaca tebal, pipet ukur,
pinset, gunting, scalpel, lampu bunsen, pH meter, oven, kertas plano, aluminium
foil, kompor gas, minisar, mikropipet, tip, pipet tetes, dan alat-alat lainnya yang
mendukung penelitian ini.
Metode Penelitian
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap
(RAL) faktorial, dengan dua faktor perlakuan yaitu :
xvi
Universitas Sumatera Utara
Faktor I
: Lama penyinaran dengan 3 taraf
C1
: 12 jam terang, 12 jam gelap
C2
: 24 jam terang
C3
: 24 jam gelap
Faktor II
: Perendaman nodus sebelum pengkulturan dengan 4 taraf selama dua
setengah jam
G1
: 0 mg/lGA3
G2
: 5 mg/lGA3
G3
: 10 mg/lGA3
G4
: 15 mg/lGA3
Sehingga diperoleh kombinasi perlakuan sebagai berikut:
C1G1
C2G1
C3G1
C1G2
C2G2
C3G2
C1G3
C2G3
C3G3
C1G4
C2G4
C3G4
Jumlah perlakuan
: 12
Jumlah ulangan
:6
Jumlah eksplan tiap tabung uji
:1
Jumlah seluruh eksplan
: 72
Jumlah seluruh tanaman
: 72
Adapun model liner dari sidik ragam penelitian sebagai berikut:
Yijk = µ + αi + βj + (αβ)ij + ε ijk
i = 1,2,3
j = 1,2,3,4
k = 1,2,3…6
xvii
Universitas Sumatera Utara
Yijk
= Nilai pengamatan unit percobaan pada perlakuan lama penyinaran ke-i,
konsentrasi perendaman giberelin sebelum pengkulturan
ke-j, dan
ulangan ke-k
µ
= Nilai tengah umum
αi
= Pengaruh lama penyinaran ke-i
βj
= Pengaruh konsentrasi perendaman giberelin sebelum pengkulturan ke-j
(αβ)ij = Nilai tambah pengaruh interaksi lama penyinaran ke-i dankonsentrasi
perendaman giberelin ke-j
Εijk
= Galat percobaan
Jika perlakuan berbeda nyata dalam sidik ragam maka dilanjutkan dengan
Uji Jarak Berganda Duncan (DMRT) pada α = 5% (Steel and Torrie, 1995).
xviii
Universitas Sumatera Utara
PELAKSANAAN PENELITIAN
Sterilisasi Alat-Alat
Sebelum semua alat-alat disterilisasi dan alat-alat kaca digunakan untuk
kultur in vitro maka terlebih dahulu dicuci dan dikeringkan. Kemudian bungkus
tabung dengan plastik tahan panas atau letakkan pada rak tabung, sedangkan
untuk botol biasanya bisa langsung diletakkan pada autoklaf. Disterilkan
tabung/botol dengan autoklaf pada suhu 121oC dengn tekanan 17,5 psi selama 60
menit. Setelah itu sterilkan secara kering tabung/botol di dalam oven pada suhu
150oC selama 1-2 jam.
Pembuatan Media
Media yang digunakan dalam penelitian ini adalah mediaWoody Plant
Medium (WPM). Sebelum dilakukan pembuatan media WPM, dilakukan
pembuatan larutan stok hormon BAP dan GA3. Larutan stok hormon masingmasing dibuat 100mg/100ml. Kemudian larutan stok BAP dan GA3 disaring
menggunakan minisar guna meningkatkan sterilitas dari hormon tersebut dan
dilakukan di Laminar Air Flow Cabinet (LAFC).
Pada pembuatan media WPM, tahap pertama adalah membuat larutan stok
bahan kimia hara makro dengan pembesaran 10x, hara mikro dengan pembesaran
100x, larutan iron dengan pembesaran 50x, larutan vitamin dengan pembesaran
100x, sukrosa 30 g, myo-inositol 0,1 g dan agar 7 g. Tahap berikutnya, sukrosa
dimasukkan ke dalam beaker glass yang telah berisi akuades 1000 ml, lalu diaduk
dengan menggunakan magnetik stirer sebagai pengaduk. Kemudian ditambahkan
myo-inositol diaduk hingga larut. Dimasukkan larutan stok hara makro 160ml,
larutan stok hara mikro 6.4ml, iron 12.8ml dan vitamin 6.4ml. Kemudian larutan
xix
Universitas Sumatera Utara
ditepatkan menjadi 3200ml dengan menambahkan akuades. Keasaman diukur
dengan pH meter. pH yang dikehendaki adalah 5,8, untuk mengatur pH yaitu
menaikkan atau menurunkan pH dapat digunakan larutan KOH dan HCl 0,1 N.
Ditambahkan agar biotek dan dimasak di atas kompor gas sampai larutan
mendidih dan bening (semua agar telah larut). Larutan dipindahkan ke erlenmeyer
berukuran 5000ml dan ditutup dengan aluminium foil dan diikat dengan tali
plastik. Kemudian media WPM di sterilisasi dengan tekanan 17,5 psi pada suhu
121°C
selama 20 menit di autoklaf. Setelah proses sterilisasi selesai, media
dimasukkan ke ruang kultur dan dimasukkan keLaminar Air Flow Cabinet
(LAFC). Teteskan BAP dan GA3 ke masing-masing tabung uji sesuai perlakuan.
Dituangkan media ke dalam tabung uji berisikan 13ml/tabung dan ditutup kain
kasa steril yang dibalut dan diikat benang. Sehingga diperoleh ± 246 tabung uji.
Tabung uji diberi label sesuai dengan perlakuan. Selanjutnya disimpan dalam
ruang kultur sebelum digunakan.
Pembuatan Media Perendaman Nodus
Pada pembuatan media perendaman nodus, dimasukkan akuades 2500ml
kedalam erlenmeyer. Kemudian media disterilisasi dengan tekanan 17,5 psi pada
suhu 1210C selama 20 menit diautoklaf. Setelah proses sterilisasi selesai, media
dimasukkan keruang kultur
dan dimasukkan ke Laminar Air Flow Cabinet
(LAFC). Larutan dipindahkan ke 4 erlenmeyer berukuran 2000ml yang masingmasing erlenmeyer berisi 625ml dan ditutup dengan almunium foil dan diikat
dengan karet. Teteskan GA3 ke masing-masing tabung uji sesuai perlakuan.
Dituangkan media kedalam tabung uji berisikan 10ml/tabung dari setiap
perlakuannya dan ditutup dengan penutup botol. Sehingga diperoleh 62 tabung uji
xx
Universitas Sumatera Utara
dari setiap perlakuannya. Tabung uji diberi label sesuai dengan perlakuan.
Selanjutnya disimpan dalam ruang kultur sebelum digunakan.
Sterilisasi Bahan Tanaman di Lapangan
Bahan tanaman berasal dari rumah kasa tanaman karet PT. Perkebunan
Nusantara III, Kebun Gunung Pamela. Sterilisasi lapangan ialah dengan
memberikan fungisida (dithane) yang dicampurkan dengan air, kemudian
dioleskan pada bahan tanaman yang akan dijadikan eksplan di rumah kaca dengan
menggunakan kuas. Ditunggu selama 1 malam untuk fungisida bereaksi
mencegah jamur pada bahan tanaman. Dipotong bahan tanaman yang akan
dijadikan eksplan keesokan paginya dan diberi label.
Pengambilan Bahan Tanaman
Bahan tanaman yang digunakan ialah yang telah diberikan fungisida
dithane. Bahan tanaman yang digunakan ialah bibit karet yang telah latern(daun
terbuka sempurna) dan berwarna hijau terang, batang tanaman kokoh dan
berwarna hijau, serta berpayung dua. Batang bawah dari tanaman karet itu sendiri
berasal dari seedling karet pendukung klon tertentu yang selanjutnya diokulasi
Bagian yang diambil ialah nodus yang terdapat dari setiap batang tersebut.
Pengambilan dilakukan pada pagi hari dengan menggunakan gunting.
Sterilisasi Bahan Tanaman di Laboratorium
Sterilisasi di laboratorium ialah dengan mecuci bahan tanaman
menggunakan air mengalir dengan menggunakan kuas untuk menghilangkan
olesan dithane. Bilas eksplan dengan cara memasukkan eksplan ke dalam tabung
toples kemudian diisi alkohol 70% dan diguncang selama 1 menit, setelah itu
alkohol dibuang dan toples diisi kembali dengan H2O2 dengan konsentrasi 17%
xxi
Universitas Sumatera Utara
selama 20 menit. Setelah selesai larutan tersebut dibuang, tabung toples diisi
akuades dan diguncang selama 1 menit dan dibuang kembali. Rendam kembali
eksplan dengan akuades di dalam tabung toples selama 2 x 15 menit. Kemudian
air tersebut dibuang dari tabung toples. Eksplan sudah siap untuk ditanam.
Persiapan Ruang Tanam
Seluruh permukaan laminar air flow cabinet sebelumnya dibersihkan
terlebih dahulu dengan di lap menggunakan alkohol 96% lalu di sterilkan dengan
sinar Ultra Violet selama 1 jam sebelum proses penanaman dilakukan. Semua alat
dan bahan yang akan dipakai harus disemprot dengan alkohol 96% dan beberapa
alat seperti pinset, gunting, scalpel setelah disemprot lalu dibakar di dalam ke
dalam laminar air flow cabinet selama 1 menit. Hal ini dilakukan untuk
menghindari resiko bahan penelitian terkontaminasi. Steri box dihidupkan dan
disediakan alkohol 70% untuk membersihkan alat yang telah digunakan.
Perendaman Nodus
Perendaman nodus
dilakukan sebelum penanaman. Nodus diambil
kemudian dimasukkan ke tabung uji masing-masing perlakuan perendaman yang
berisi akuades dengan penambahan GA3 sesuai konsentrasi setiap masing-masing
perlakuan ke dalam tabung uji. Lama perendaman nodus sebagai perlakuan
dilakukan selama 2 jam 30 menit.
Penanaman
Eksplan yang digunakan adalah nodus dari bahan tanaman karet yang telah
di sterilisasi sebelumnya dengan standar yang dimiliki Laboratorium microcutting
karet Kebun Gunung Pamela dan juga eksplan yang telah mengalami perendaman
GA3 selama 2 jam 30 menit, lalu langsung ditanam pada tabung uji yang sudah
xxii
Universitas Sumatera Utara
berisikan media sebanyak 13ml/tabung uji. Eksplan
yang
digunakan
berukuran1,5-2 cm, apabila ukuran eksplan belum sesuai maka dipotong
menggunakan gunting steril dan tajam. Eksplan yang akan dikulturkan ke dalam
media tanam diletakkan di piringan kaca tebal dengan alas kertas plano.
Kemudian eksplan ditanamkan ke dalam tabung uji sesuai dengan perlakuan,
setiap tabung uji terdiri dari 1 eksplan. Kemudian ujung tabung uji ditutup dengan
menggunakan kain kasa steril yang dibalut dan diikat benang. Kegiatan
penanaman dilakukan di dalam Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) dan di bawah
api bunsen. Tabung uji diletakkan di rak kultur di bawah cahaya dan ruangan
memiliki air conditioner dengan suhu 18oC.
Pemeliharaan Eksplan
Tabung-tabung uji diletakkan pada rak kultur di dalam ruang kultur.
Ruangan ini diusahakan bebas dari bakteri dan cendawan, dimana setiap hari
disemprot dengan alkohol 96% atau dan disemprot formalin agar bebas dari
organisme yang menyebabkan terjadi kontaminasi. Suhu ruangan kultur yang
digunakan + 20-25°C, paling optimum 18oC dan intensitas cahaya 2000 lux serta
dengan kondisi ruangan memiliki air conditioner dengan hefa yang dibersihkan
selama 6 bulan sekali. Apabila mengalami kontaminasi, segera diambil dari rak
kultur agar mencegah kontaminasi ke tabung lainnya.
xxiii
Universitas Sumatera Utara
Peubah Amatan
Umur Muncal Tunas (hari)
Umur muncul tunas dihitung dari awal penanaman hingga terbentuknya
tunas dalam satuan hari.
Persentase Terbentuknya Tunas (%)
Persentase terbentuknya tunas dihitung pada akhir penelitian (6
MST) dengan rumus:
Persentase terbentuknya tunas = jumlah tunas yang terbentuk x 100%
jumlah eksplan seluruhnya (perperlakuan)
Jumlah Tunas (tunas)
Dihitung pada akhir penelitian dengan menghitung banyaknya tunas baru
yang terbentuk dari setiap eksplan
Panjang Tunas (cm)
Panjang tunas diukur pada tunas tertinggi dengan menggunakan kertas
milimeter yang diukur dari tempat munculnya tunas (pangkal) sampai ujung tunas
tertinggi. Pengukuran dilakukan pada akhir penelitian.
Jumlah Terbentuk Bakal Daun
Jumlah daun dihitung dari bakal daun yang terbentuk pada eksplan.
Pengamatan dilakukan pada akhir penelitian. Jumlah terbentuknya bakal daun
dihitung pada akhir penelitian dengan rumus:
Persentase terbentuknya daun = jumlah bakal daun yang terbentuk
jumlah eksplan seluruhnya (per perlakuan)
Jumlah Daun (helai)
Jumlah daun dihitung dari daun yang terbentuk yang telah terbuka
sempurna pada eksplan yang dilakukan pada akhir percobaan.
xxiv
Universitas Sumatera Utara
Kehadiran Kalus (visual)
Kehadiran kalus dilihat dari ada atau tidaknya kemunculan kalus dari
tunas-tunas samping yang bersifat positif atau negatif bagi penelitian. Dilihat pada
akhir percobaan.
Warna Kalus (visual)
Kehadiran warna kalus dilihat dari ada atau tidaknya kemunculan warna
yang berbeda atau tidak dari kalus. Dilihat pada akhir percobaan.
Morfogenesis
Kemunculan tunas diluar jaringan meristem aksilar (pangkal batang,
ujung batang, bagian manapun dari eksplan).
xxv
Universitas Sumatera Utara
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Berdasarkan hasil analisis data yang dilakukan, diperoleh bahwa perlakuan
lama penyinaran memberikan pengaruh sangat nyata terhadap panjang tunas,
jumlah terbentuk bakal daun, dan jumlah daun. Pada perlakuan perendaman
dengan GA3 dan interaksi antara lama penyinaran dan GA3 belum memberikan
pengaruh yang nyata terhadap terhadap persentase munculnya tunas, jumlah tunas,
panjang tunas, jumlah terbentuk bakal daun, dan jumlah daun.
Umur Munculnya Tunas (hari)
Hasil pengamatan terhadap parameter umur munculnya tunas pada
perlakuan lama penyinaran dan GA3 (Lampiran 1). Rataan umur munculnya tunas
dari perlakuan lama penyinaran dan GA3 dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Pengaruh perlakuan lama penyinaran dan GA3 terhadap umur
munculnya tunas (hari) 6 MST.
GA3
Perlakuan
Rataan
G1
G2
G3
G4
C1
25,00
25,00
23,00
24,00
24,25
C2
26,00
24,00
24,00
24,00
24,50
C3
23,00
26,00
23,00
24,00
24,00
Rataan
24,67
25,00
23,33
24,00
24,25
Keterangan: Perlakuan C1=12 jam terang 12 jam gelap; C2=24 jam terang; C3=24 jam gelap.
Perlakuan G1: 0 mg/l GA3, G2: 5 mg/l GA3, G3: 10 mg/l GA3, G4: 15 mg/l GA3.
Persentase Munculnya Tunas (%)
Hasil pengamatan serta sidik ragam pada perlakuan lama penyinaran dan
GA3 serta interaksi antara perlakuan lama penyinaran dan GA3 (Lampiran 2-4)
belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap persentase munculnya tunas
pada 6 MST.
Rataan persentase munculnya tunas dari perlakuan lama penyinaran dan
GA3 dapat dilihat pada Tabel 2.
xxvi
Universitas Sumatera Utara
Tabel 2. Pengaruh perlakuan lama penyinaran dan GA3 terhadap persentase
munculnya tunas (%) 6 MST.
GA3
Pencahayaan
Rataan
G1
G2
G3
G4
C1
100,00
100,00
100,00
100,00
100,00
C2
100,00
100,00
100,00
100,00
100,00
C3
85,71
100,00
100,00
100,00
96,43
Rataan
95,24
100,00
100,00
100,00
98,81
Keterangan: Perlakuan C1=12 jam terang 12 jam gelap; C2=24 jam terang; C3=24 jam gelap.
Perlakuan G1: 0 mg/l GA3, G2: 5 mg/l GA3, G3: 10 mg/l GA3, G4: 15 mg/l GA3.
Gambar eksplan sesudah membentuk tunas pada salah satu perlakuan
dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Eksplan setelah membentuk tunas ( 6 MST )
Jumlah Tunas ( Tunas )
Hasil pengamatan terhadap parameter jumlah tunas pada perlakuan lama
penyinaran dan GA3 serta interaksi antara perlakuan lama penyinaran dan GA3
(Lampiran 5-7) belum memberikan pengaruh yang nyata pada 6 MST
Rataan jumlah tunas dari perlakuan lama penyinaran dan GA3 dapat
dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Pengaruh perlakuan lama penyinaran dan GA3 terhadap jumlah tunas
xxvii
Universitas Sumatera Utara
tunas (tunas) 6 MST.
Perlakuan
C1
C2
C3
Rataan
GA3
G1
1,00
1,00
0,86
0,95
G2
1,00
1,00
1,00
1,00
G3
1,00
1,00
1,00
1,00
G4
1,00
1,00
1,00
1,00
Rataan
1,00
1,00
0,96
0,99
Keterangan: Perlakuan C1=12 jam terang 12 jam gelap; C2=24 jam terang; C3=24 jam gelap.
Perlakuan G1: 0 mg/l GA3, G2: 5 mg/l GA3, G3: 10 mg/l GA3, G4: 15 mg/l GA3.
Panjang Tunas (cm)
Hasil pengamatan serta sidik ragam terhadap parameter panjang tunas
pada perlakuan lama penyinaran (Lampiran 8-10) menunjukkan pengaruh sangat
nyata, sedangkan GA3 serta interaksi antara perlakuan lama penyinaran dan GA3
belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap panjang tunas.
Rataan panjang tunas lama penyinaran dan GA3 dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Pengaruh perlakuan lama penyinaran dan GA3 terhadap panjang tunas
(cm) 6 MST.
GA3
Perlakuan
Rataan
G1
G2
G3
G4
C1
0,71
1,09
1,23
0,80
0,96a
C2
0,61
1,01
0,41
0,26
0,58b
C3
0,24
0,27
0,24
0,26
0,25c
Rataan
0,52
0,79
0,63
0,44
0,60
Keterangan : Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan
tidak berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
Perlakuan C1=12 jam terang 12 jam gelap; C2=24 jam terang; C3=24 jam gelap.
Perlakuan G1: 0 mg/l GA3, G2: 5 mg/l GA3, G3: 10 mg/l GA3, G4: 15 mg/l GA3.
Tabel 4, memperlihatkan panjang tunas tertinggi pada perlakuan lama
penyinaran terdapat pada perlakuan C1 (12 jam terang 12 jam gelap) dengan
rataan (0,96) cm dan terendah pada perlakuan C3 (24 jam gelap) dengan rataan
(0,25) cm. Perlakuan lama penyinaran dengan perlakuan C1 berbeda nyata dengan
perlakuan C2 dan C3.
xxviii
Universitas Sumatera Utara
Gambar panjang tunas eksplan pada salah satu perlakuan dapat dilihat
pada Gambar 2.
Gambar 2. Panjang Tunas ( 6 MST ) pada C2G2
(24 jam terang +5 mg/l GA3)
Jumlah Terbentuk Bakal Daun
Hasil pengamatan serta sidik ragam terhadap parameter jumlah terbentuk
bakal daun pada perlakuan lama penyinaran (Lampiran 11-13) menunjukkan
pengaruh sangat nyata, sedangkan GA3 serta interaksi antara perlakuan lama
penyinaran dan GA3 belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap jumlah
terbentuk bakal daun.
Gambar jumlah terbentuk bakal daun pada salah satu perlakuan dapat
dilihat pada Gambar 3.
xxix
Universitas Sumatera Utara
Gambar 3. Eksplan Membentuk Bakal Daun pada C1G2
(12 jam terang 12 jam gelap +5 mg/l GA3)
Rataan jumlah terbentuk bakal daun dari perlakuan lama penyinaran dan
GA3 dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Pengaruh perlakuan lama penyinaran dan GA3 terhadap jumlah terbentuk
bakal daun6 MST.
GA3
Perlakuan
Rataan
G1
G2
G3
G4
C1
0,43
0,71
1,00
0,71
0,71a
C2
0,57
0,43
0,29
0,14
0,36b
C3
0,00
0,14
0,00
0,00
0,04c
Rataan
0,33
0,43
0,43
0,29
0,37
Keterangan : Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada baris dan kolom yang sama
menunjukkan berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
Perlakuan C1=12 jam terang 12 jam gelap; C2=24 jam terang; C3=24 jam gelap.
Perlakuan G1: 0 mg/l GA3, G2: 5 mg/l GA3, G3: 10 mg/l GA3, G4: 15 mg/l GA3.
Tabel 5, memperlihatkan jumlah terbentuk bakal daun tertinggi pada
perlakuan lama penyinaran terdapat pada perlakuan C1 (12 jam terang 12 jam
gelap) dengan rataan (0,96) cm dan terendah pada perlakuan C3 (24 jam gelap)
dengan rataan (0,25) cm. Perlakuan lama penyinaran dengan perlakuan C1
berbeda nyata dengan perlakuan C2 dan C3.
xxx
Universitas Sumatera Utara
Jumlah Daun (helai)
Hasil pengamatan serta sidik ragam terhadap parameter jumlah daun pada
perlakuan lama penyinaran (Lampiran 14-16) menunjukkan pengaruh sangat
nyata, sedangkan GA3 serta interaksi antara perlakuan lama penyinaran dan GA3
belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap jumlah daun. Gambar eksplan
membentuk daun dapat dilihat pada Gambar 4.
Gambar 4. Eksplan Membentuk Daun pada C1G1
(12 jam terang 12 jam gelap +5 mg/l GA3)
Rataan jumlah daun dari perlakuan lama penyinaran dan GA3 dapat dilihat
pada Tabel 6.
Tabel 6. Pengaruh perlakuan lama penyinaran dan GA3 terhadap jumlah daun
(helai) 6 MST.
GA3
Perlakuan
Rataan
G1
G2
G3
G4
C1
1,43
3,14
3,86
2,29
2,68a
C2
1,14
1,86
0,57
0,14
0,93b
C3
0,00
0,43
0,00
0,00
0,11c
Rataan
0,86
1,81
1,48
0,81
1,24
Keterangan : Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada baris dan kolom yang sama
menunjukkan berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
Perlakuan C1=12 jam terang 12 jam gelap; C2=24 jam terang; C3=24 jam gelap.
Perlakuan G1: 0 mg/l GA3, G2: 5 mg/l GA3, G3: 10 mg/l GA3, G4: 15 mg/l GA3.
Tabel 6, memperlihatkan jumlah daun tertinggi pada perlakuan lama
penyinaran terdapat pada perlakuan C1 (12 jam terang 12 jam gelap) dengan
xxxi
Universitas Sumatera Utara
rataan (0,96) cm dan terendah pada perlakuan C3 (24 jam gelap) dengan rataan
(0,25) cm. Perlakuan lama penyinaran dengan perlakuan C1 berbeda nyata dengan
perlakuan C2 dan C3 (Lampiran 17-19).
Data pada Tabel 7, menunjukkan rangkuman berdasarkan hasil penelitian.
Lama penyinaran memberikan pengaruh sangat nyata terhadap panjang tunas,
jumlah terbentuk bakal daun, dan jumlah daun. Pada perlakuan perendaman
dengan GA3 dan interaksi antara lama penyinaran dan GA3 belum memberikan
pengaruh yang nyata terhadap semua peubah amatan.
Tabel 7. Tabel 7. Rekapitulasi Peubah Amatan Sidik Ragam pada Induksi Tunas
Mikro Tanaman Karet Pada Lama Penyinaran dan GA3 6 MST.
Perlakuan
Peubah Amatan
C
G
CxG
a
Umur Muncul tunas (hari)
tn
tn
tn
a
Persentase Munculnya Tunas (%)
tn
tn
tn
a
Jumlah Tunas (tunas)
tn
tn
tn
Panjang Tunas (cm)a
**
tn
tn
a
Jumlah terbentuk bakal Daun
**
tn
tn
a
Jumlah Daun (helai)
**
tn
tn
Kehadiran Kalus
Tidak ada
Tidak ada
Tidak ada
Warna Kalus
Tidakkada
Tidak ada
Tidak ada
Morfogenesis
Tidak ada
Tidak ada
Tidak ada
Keterangan: C = Lama Penyinaran
G = GA3
CxG = interaksi lama penyinaran dengan GA3
**= sangat nyata pada taraf 5 %
tn = tidak nyata
a = transformasi data
Kehadiran Kalus
Pada semua kultur yang dilakukan tidak ada satu pun yang menunjukkan
kehadiran kalus. Ketidakhadiran kalus pada tunas mikro tanaman karet merupakan
hal yang diharapkan dalam penelitian ini, sebab microcutting pada tahap primary
culture merupakan tahapan awal sehingga tidak diharapkan kehadiran kalus dan
hingga akhir penelitian tidak ditemukan kehadiran kalus.
Warna Kalus
xxxii
Universitas Sumatera Utara
Karena tidak ada kalus yang terbentuk hingga akhir penelitian
menyebabkan tidak adanya warna kalus yang diamati secara visual.
Morfogenesis
Berdasarkan kemunculan tunas mikro tanaman karet, maka tidak diperoleh
kemunculan tunas diluar jaringan meristem aksilar (pangkal batang, ujung batang,
atau bagian lain dari eksplan).
Pembahasan
Pengaruh Lama Penyinaran terhadap Induksi Tunas Mikro Tanaman Karet
Berdasarkan hasil analisis data secara statistik diperoleh bahwa perlakuan
lama penyinaran memberikan pengaruh sangat nyata terhadap panjang tunas,
jumlah terbentuk bakal daun, dan jumlah daun
tetapi belum memberikan
pengaruh yang nyata terhadap persentase munculnya tunas, umur muncul tunas,
dan jumlah tunas.
Panjang tunas tertinggi pada perlakuan lama penyinaran terdapat pada
perlakuan C1 (12 jam terang 12 jam gelap) dengan rataan (0,96) cm dan terendah
pada perlakuan C3 (24 jam gelap) dengan rataan (0,25) cm. Hal ini diduga karena
lama penyinaran dengan 12 jam terang 12 jam gelap mampu mendorong eksplan
untuk melakukan pembelahan sel sehingga menyebabkan tunas bertambah
panjang. Lama penyinaran yang sesuai akan membantu eksplan dalam
pembentukan tunas.Hal ini didukung oleh Kurilcik et al. (2008) yang menyatakan
bahwa penyinaran optimal untuk pertumbuhan tunas dan akar planlet krisan
secara in vitro terdapat pada 16 jam penyinaran.Menurut Wattimena et al. (1992)
yang menyatakan bahwa lama penyinaran di dalam kultur jaringan mempunyai
pengaruh terhadap kandungan hormon endogen. Peranan lama peyinaran dalam
xxxiii
Universitas Sumatera Utara
kultur jaringan terhadap morfogenesis mungkin dapat juga digantikan dengan
penambahan zat pengatur tumbuh ke dalam medium. Di dalam morfogenesis,
lama penyinaran berkaitan dengan energi yang diterima oleh jaringan.
Pemindahan kultur dari penyinaran pendek juda dapat mendorong terjadinya
embryogenesis dari kultur karet.
Jumlah terbentuk bakal daun tertinggi pada perlakuan lama penyinaran
terdapat pada perlakuan C1 (12 jam terang 12 jam gelap) dengan rataan (0,71)
dan terendah pada perlakuan C3 (24 jam gelap) dengan rataan (0,04). Hal ini
menunjukkan bahwa pembentukan bakal daun diduga didorong oleh lama
penyinaran yang sesuai yaitu 12 jam terang 12 jam gelap. Penyinaran yang sesuai
membantu eksplan untuk melakukan pembelahan sel untuk membentuk daun. Hal
ini didukung oleh penelitian Mitrovic et al. (2007) yang menyatakan bahwa lama
penyinaran yang berbeda juga mempengaruhi jumlah daun. Lama penyinrana
yang panjang akan merangsang perkembangan daun pada tanaman Chinopodium
rubrum L. Hal ini sesuai dengan pernyataan Abo (1977) yang menyatakan bahwa
pembentukan dan pertumbuhan tunas aksiler menjadi daun diperngaruhi oleh
lingkungan, terutama faktor fisik pencahayaan, lama penyinaran (fotoperiodisme)
dan suhu ruang inkubasi. menurut Rahmawati (2008) menyatakan pertumbuhan
organ atau jaringan tanaman dalam kultur in vitroumumnya tidak dihambat oleh
cahaya, namun pertumbuhan kalus umumnya dihambat oleh cahaya.
Jumlah daun tertinggi pada perlakuan lama penyinaran terdapat pada
perlakuan C1 (12 jam terang 12 jam gelap) dengan rataan (2,68) helai dan
terendah pada perlakuan C3 (24 jam gelap) dengan rataan (0,11) helai. Hal ini
menunjukkan bahwa perlakuan lama penyinaran 12 jam terang 12 jam gelap dapat
xxxiv
Universitas Sumatera Utara
mendorong eksplan mengalami pembelahan sel sehingga eskplan dapat
membentuk daun. Hal ini didukung oleh Kurilcik et al. (2008) yang menyatakan
bahwa morfogenesis daun baru dan akumulasi DW/FW tertinggi terdapat pada 24
jam penyinaran. Hal ini sesuai dengan literatur Salisbury dan Ross (1992) yang
menyatakan bahwa cahaya dalam kultur jaringan tidak diutamakan digunakan
untuk berfotosintesis, namun digunakan untuk morfogenesis seperti pembentukan
tunas, pembentukan akar, pembentukan daun, dan sebagainya.
Pengaruh GA3 terhadap Induksi Tunas Mikro Tanaman Karet
Berdasarkan hasil analisis data secara statistik diperoleh bahwa GA3
belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap semua peubah amatan. Hal ini
diduga karena GA3 memberikan respon yang sama pada pertumbuhan tunas
mikro tanaman karet terhadap semua lama penyinaran, serta disebabkan oleh
kondisi eksplan dalam penyerapan GA3 pada saat perendaman sehingga tidak
berpengaruh terhadap pertumbuhan tunas mikro. Hal ini didukung Gunatilleke
dan Samaranayake (1988) yang menyatakan bahwa efek GA3 pada pemanjangan
ploriferasi tunas dengan 0,5 mg/l dan 2,0 mg/l GA3 tidak efektif
untuk
mendorong ploriferasi tunas aksilar pada tanaman karet. Hasil penelitian Lawalata
(2013) menunjukkan bahwa pada 14MST, pemberian GA3 hingga 10 mg/l
cenderungmenurunkan pertumbuhan gloxinia dengan persentasetumbuh sebesar
66,7%, walaupun ada peningkatanpersentase tumbuh pada perlakuan 6
mg/l.Menurut Wattimena et al. (1992) yang menyatakan bahwa di dalam
morfogenesis tanaman in vitro giberelin menghambat pembentukan akarmaupun
tunas. Pada nisbah auksin-sitokinin yang mampu membentuk akar atau tunas
dengan penambahan giberelin maka akar atau tunas tidak akan terbentuk.
xxxv
Universitas Sumatera Utara
Berdasarkan hasil penelitian diketahui bahwa GA3 belum memberikan
pengaruh yang nyata terhadap pembentukan tunas. Hal ini dapat disebabkan oleh
respon pertumbuhan dan perkembangan eksplan yang sama akibat pemberian
GA3. GA3 merupakan zat pengatur tumbuh yang berfungsi dalam pembelahan sel
dan pematahan dormansi eksplan dengan cara perendaman sehingga mata tunas
yang mengalami dormansi dapat tumbuh dan berkembang untuk membentuk
tunas baru yang seterusnya akan mengalami pembelahan dan pemanjangan sel.
Hal ini didukung oleh penelitian Seneviratna dan Wijesekera (1997) yang
menyatakan bahwa jumlah tunas tertinggi pada tanaman karet terdapat pada
konsentrasi 2,5 dan 12,5 ppm GA3 yang dikombinasikan dengan 25 ppm 2ip.
Sedangkan untuk panjang tunas tertinggi terdapat pada 0,5 dan 2,5 ppm GA3.
Menurut George dan Sherrington (1984) penambahan GA3 pada media in vitro
bersama auksin dan sitokinin meningkatkan morfogenesis.
Jumlah daun dan jumlah terbentuk bakal daun pada penelitian juga belum
berpengaruh nyata untuk perendaman GA3. Hal ini dapat dikarenakan GA3
memberikan respon yang sama terhadap eksplan yaitu mendorong pembelahan sel
untuk membentuk daun.Menurut
Hooley (1994) menyatakan bahwa dengan
meningkatkan aktivitas pemanjangan dan pembesaran sel, giberelin dapat
berfungsi untuk meningkatkan pemanjangan batang dan pertumbuhan daun-daun
muda. Hasil penelitian Lawalata (2013) menyatakan bahwa perlakuan GA3
4 mg/l dan 6 mg/l menunjukkan jumlah daun tertinggi. Pemberian GA3 4 mg/l
sampai dengan 10 mg/l dapat meningkatkan jumlah daun total gloxinia pada 2
MST, sebaliknya pada 6 MST hingga 14 MST peningkatan konsentrasi GA3
xxxvi
Universitas Sumatera Utara
menyebabkan penurunan jumlah daun total. Jumlah daun total tertinggi diperoleh
dari perlakuan GA3 6 mg/l.
Pengaruh Interaksi Lama Penyinaran dan GA3 terhadap Induksi Tunas
Mikro Tanaman Karet
Dari hasil analisis data secara statistik diperoleh bahwa interaksi lama
penyinaran dan GA3 belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap semua
peubah amatan. Hal ni diduga kerja hormon GA3 terhambat oleh adanya cahaya.
Penghambatan ini diduga karena adanya peningkatan inhibitor zat pengatur
tumbuh GA3 yang terdapat dalam eksplan itu sendiri sehingga menyebabkan
pertumbuhan eksplan tidak optimal. Hal ini juga didukung oleh pernyataan
Widyastuti(2002) yang menyatakan bahwa penyinaran dalam kultur in vitro oleh
beberapa peneliti dianggap tidak perlu karena sudah diberikan karbohidrat sebagai
sumber energi kedalam medium. Tetapi dari hasil pengamatan beberapa peneliti
dilaporkan bahwa kultur yang diinkubasikan dalam gelap morfogenesisnya
terhambat, meskipun telah diberi karbohidrat. Demikian juga dengan kultur yang
diberi udara tanpa CO2 atau diberi senyawa kimia penghambat fotosintesis maka
morfogenesis akan terhambat.
Berdasarkan hasil analisis data diketahui bahwa interaksi GA3 dan lama
penyinaran belum berpengaruh nyata terhadap terbentuknya tunas tetapi secara
visual menunjukkan pertumbuhan dan perkembangan eksplan yang baik yaitu
dengan munculnya tunas. Munculnya tunas terdapat pada hampir semua
perlakuan. Menurut penelitian Hoesen (2009), pembentukan tunas dari sisik umbi
yang diberi perlakuan perendaman GA3 10 mg/l selama 16 jam, pada minggu
pertama setelah tanam, tampak 90% sisik umbi Lilium speciosum membentuk
bakal tunas di bagian pangkal sisik.
xxxvii
Universitas Sumatera Utara
Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh memperlihatkan bahwa dalam
induksi tunas mikro tanaman karet, tidak ada kalus yang terbentuk. Hal ini
menunjukkan bahwa perlakuan lama penyinaran dan GA3 tidak mendorong
pembentukan kalus. Hal ini didukung oleh Wattimena et al. (1992) yang
menyatakan bahwa penghambatan pertumbuhan kalus dan pembelahan sel juga
dilaporkan disebabkan oleh intensitas cahaya yang tinggi, pertumbuhan kalus juga
terhambat pada medium dengan 0,1 mg/l giberelin.
Hasil penelitian yang dilakukan bahwa dalam induksi tunas mikro
tanaman karet, sehingga tidak ada peubah amatan warna kalus. Hal ini disebabkan
oleh penambahan zat pengatur tumbuh yang dapat menghambat pembentukan
kalus serta lama penyinaran yang tak sesuai sehingga kalus tidak terbentuk seperti
yang diharapkan. Hal ini didukung oleh Wattimena et al. (1992) yang menyatakan
bahwa dari pengujian yang dilakukan ditemukan bahwa kemampuan jaringan
membentuk kalus dan laju pertumbuhan kalus tergantung pada medium, zat
pengatur tumbuh yang digunakan dan faktor lingkungan lainnya
ULANGAN
Perlakuan
1
2
3
4
5
6
21
28
28
28
21
21
C1G1
21
28
28
21
28
28
C1G2
28
21
28
21
21
21
C1G3
21
21
21
28
28
28
C1G4
21
21
28
28
28
28
C2G1
28
28
21
21
21
21
C2G2
28
21
21
28
28
21
C2G3
21
21
21
28
21
28
C2G4
28
21
0
21
21
28
C3G1
21
28
28
28
28
21
C3G2
21
21
28
21
28
21
C3G3
28
28
21
28
21
21
C3G4
287
287
294
301
294
287
TOTAL
RATAAN 23,92 23,92 24,50 25,08 24,50 23,92
7
28
21
21
21
28
28
21
28
21
28
21
21
287
23,92
Total
175
175
161
168
182
168
168
168
161
182
161
168
2037
Rataan
25
25
23
24
26
24
24
24
23
26
23
24
24,25
xliv
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 2. Data Pengamatan Persentase Munculnya Tunas (%)
Perlakuan
1
2
100 100
C1G1
100 100
C1G2
100 100
C1G3
100 100
C1G4
100 100
C2G1
100 100
C2G2
100 100
C2G3
100 100
C2G4
100 100
C3G1
100 100
C3G2
100 100
C3G3
100 100
C3G4
1200 1200
Total
100 100
Rataan
ULANGAN
3
4
5
6
7
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
0 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
100 100 100 100 100
1100 1200 1200 1200 1200
91,67 100 100 100 100
Total
700
700
700
700
700
700
700
700
600
700
700
700
Rataan
100
100
100
100
100
100
100
100
85,71
100
100
100
8300
98,80952
xlv
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 3. Data Transformasi Persentase Munculnya Tunas Arcsin √P
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
1080 1080
90
90
ULANGAN
3
4
5
6
7
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
0,41
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
90
990,405 1080 1080 1080 1080
82,5338
90
90
90
90
Total
Rataan
630
630
630
630
630
630
630
630
540,41
630
630
630
7470,41
90
90
90
90
90
90
90
90
77,20
90
90
90
88,93
Lampiran 4. Daftar Sidik Ragam Persentase Munculnya Tunas
SK
C
G
CxG
Galat
Total
db
2
3
6
72
83
FK
KK
664368,48
10,99
JK
191,12
286,69
573,37
5829,30
7931,68
KT
95,56
95,56
95,56
95,56
F.Hit
1,37
1,40
1,43
0,05
3,15
2,76
2,25
Ket
tn
tn
tn
xlvi
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 5. Data Pengamatan Jumlah Tunas (tunas)
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
1,00 1,00
12,00 12,00
1,00 1,00
ULANGAN
3
4
5
6
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
0,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
1,00 1,00 1,00 1,00
11,00 12,00 12,00 12,00
0,92 1,00 1,00 1,00
7
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
12,00
1,00
Total
7,00
7,00
7,00
7,00
7,00
7,00
7,00
7,00
6,00
7,00
7,00
7,00
83,00
Rataan
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
1,00
0,86
1,00
1,00
1,00
0,99
xlvii
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 6. Data Transformasi Jumlah Tunas √x+ 0,5
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
14,70 14,70
1,22 1,22
ULANGAN
3
4
5
6
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
0,71 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
14,18 14,70 14,70 14,70
1,18 1,22 1,22 1,22
Lampiran 7. Data Sidik Ragam Jumlah Tunas
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
C
2
0,01
0,003
1,37
G
3
0,01
0,003
1,40
CxG
6
0,02
0,003
1,43
Galat
72
0,19
0,003
Total
83
0,26
FK
KK
7
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
14,70
1,22
0,05
3,15
2,76
2,25
Total
8,57
8,57
8,57
8,57
8,57
8,57
8,57
8,57
8,06
8,57
8,57
8,57
102,36
Rataan
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,22
1,15
1,22
1,22
1,22
1,22
Ket
tn
tn
tn
124,7352
4,634807
xlviii
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 8. Data Pengamatan Panjang Tunas (cm)
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
1,50
2,10
2,50
2,20
0,20
3,40
0,80
0,20
0,20
0,20
0,20
0,20
13,70
1,14
2
1,80
1,80
1,50
1,20
0,10
1,50
0,60
0,20
0,10
0,20
0,30
0,20
9,50
0,79
ULANGAN
3
4
5
1,00 0,20 0,20
0,90 0,50 0,50
1,80 0,60 1,00
0,70 0,60 0,40
0,50 0,60 1,50
0,50 0,20 0,50
0,10 0,20 0,50
0,20 0,50 0,20
0,00 0,20 0,20
0,10 0,80 0,20
0,20 0,20 0,20
0,30 0,20 0,30
6,30 4,80 5,70
0,53 0,40 0,48
6
0,20
1,60
0,70
0,20
1,30
0,70
0,20
0,30
0,20
0,20
0,30
0,30
6,20
0,52
7
0,10
0,20
0,50
0,30
0,10
0,30
0,50
0,20
0,80
0,20
0,30
0,30
3,80
0,32
Total
Rataan
5,00
7,60
8,60
5,60
4,30
7,10
2,90
1,80
1,70
1,90
1,70
1,80
50,00
xlix
Universitas Sumatera Utara
0,71
1,09
1,23
0,80
0,61
1,01
0,41
0,26
0,24
0,27
0,24
0,26
0,60
Lampiran 9. Data Transformasi Panjang Tunas √x+ 0,5
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
1,41 1,52
1,61 1,52
1,73 1,41
1,64 1,30
0,84 0,77
1,97 1,41
1,14 1,05
0,84 0,84
0,84 0,77
0,84 0,84
0,84 0,89
0,84 0,84
14,54 13,17
1,21 1,10
ULANGAN
3
4
5
6
1,22 0,84 0,84 0,84
1,18 1,00 1,00 1,45
1,52 1,05 1,22 1,10
1,10 1,05 0,95 0,84
1,00 1,05 1,41 1,34
1,00 0,84 1,00 1,10
0,77 0,84 1,00 0,84
0,84 1,00 0,84 0,89
0,71 0,84 0,84 0,84
0,77 1,14 0,84 0,84
0,84 0,84 0,84 0,89
0,89 0,84 0,89 0,89
11,84 11,31 11,67 11,85
0,99 0,94 0,97 0,99
Lampiran 10. Data Sidik Ragam Panjang Tunas
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
C
2
1,34
0,67
12,86
G
3
0,24
0,08
1,52
CxG
6
0,34
0,06
1,12
Galat
72
1,83
0,03
Total
83
5,69
FK
KK
7
0,77
0,84
1,00
0,89
0,77
0,89
1,00
0,84
1,14
0,84
0,89
0,89
10,78
0,90
0,05
3,15
2,76
2,25
Total
7,44
8,60
9,03
7,77
7,19
8,22
6,64
6,08
5,97
6,10
6,03
6,09
85,15
Rataan
1,06
1,23
1,29
1,11
1,03
1,17
0,95
0,87
0,85
0,87
0,86
0,87
1,01
Ket
**
tn
tn
86,30755
22,4459
l
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 11. Data Pengamatan Jumlah Terbentuk bakal daun
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
1
1
1
1
0
1
1
0
0
0
0
0
6
0,5
1
1
1
1
0
1
1
0
0
0
0
0
6
0,5
ULANGAN
3
4
5
1
0
0
1
0
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
0
0
0
0
0
0
0
1
0
0
0
0
0
1
0
0
0
0
0
0
0
5
5
4
0,42 0,42 0,33
6
7
0
1
1
0
1
1
0
0
0
0
0
0
4
0,33
0
0
1
0
0
0
0
0
0
0
0
0
1
0,08
Total
Rataan
3
5
7
5
4
3
2
1
0
1
0
0
31
0,43
0,71
1,00
0,71
0,57
0,43
0,29
0,14
0,00
0,14
0,00
0,00
0,37
li
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 12. Data Transformasi Terbentuknya Bakal Daun
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
1,22 1,22
0,71 0,71
1,22 1,22
1,22 1,22
0,71 0,71
0,71 0,71
0,71 0,71
0,71 0,71
0,71 0,71
11,59 11,59
0,97 0,97
ULANGAN
3
4
5
6
1,22 0,71 0,71 0,71
1,22 0,71 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 1,22
1,22 1,22 1,22 0,71
1,22 1,22 1,22 1,22
0,71 0,71 0,71 1,22
0,71 0,71 0,71 0,71
0,71 1,22 0,71 0,71
0,71 0,71 0,71 0,71
0,71 1,22 0,71 0,71
0,71 0,71 0,71 0,71
0,71 0,71 0,71 0,71
11,07 11,07 10,56 10,56
0,92 0,92 0,88 0,88
7
0,71
0,71
1,22
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
9,00
0,75
Lampiran 13. Data Sidik Ragam Terbentuknya Bakal Daun
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
0,05
C
2
1,73
0,86
20,84
3,15
G
3
0,09
0,03
0.90
2,76
CxG
6
0,44
0,07
1.67
2,25
Galat
72
0,73
0,01
Total
83
5,24
FK
KK
Total
Rataan
6,50
7,54
8,57
7,54
7,02
6,50
5,99
5,47
4,95
5,47
4,95
4,95
75,44
0,93
1,08
1,22
1,08
1,00
0,93
0,86
0,78
0,71
0,78
0,71
0,71
0,90
Ket
**
tn
tn
67,75904
22,3368
lii
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 14. Data Pengamatan Jumlah Daun (helai)
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
3,00 5,00
8,00 3,00
5,00 4,00
6,00 4,00
0,00 0,00
9,00 3,00
2,00 2,00
0,00 0,00
0,00 0,00
0,00 0,00
0,00 0,00
0,00 0,00
33,00 21,00
2,75 1,75
ULANGAN
3
4
5
2,00 0,00 0,00
6,00 0,00 3,00
8,00 1,00 5,00
3,00 1,00 2,00
2,00 2,00 4,00
0,00 0,00 0,00
0,00 0,00 0,00
0,00 1,00 0,00
0,00 0,00 0,00
0,00 3,00 0,00
0,00 0,00 0,00
0,00 0,00 0,00
21,00 8,00 14,00
1,75 0,67 1,17
6
0,00
2,00
4,00
0,00
0,00
1,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
7,00
0,58
7
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
0,00
Total
10,00
22,00
27,00
16,00
8,00
13,00
4,00
1,00
0,00
3,00
0,00
0,00
104,00
Rataan
1,43
3,14
3,86
2,29
1,14
1,86
0,57
0,14
0,00
0,43
0,00
0,00
1,24
liii
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 15. Data Transformasi Jumlah Daun √x+ 0,5
Perlakuan
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
TOTAL
RATAAN
1
2
1,87 2,35
2,92 1,87
2,35 2,12
2,55 2,12
0,71 0,71
3,08 1,87
1,58 1,58
0,71 0,71
0,71 0,71
0,71 0,71
0,71 0,71
0,71 0,71
18,59 16,15
1,55 1,35
ULANGAN
3
4
5
6
1,58 0,71 0,71 0,71
2,55 0,71 1,87 1,58
2,92 1,22 2,35 2,12
1,87 1,22 1,58 0,71
1,58 1,58 2,12 0,71
0,71 0,71 0,71 1,22
0,71 0,71 0,71 0,71
0,71 1,22 0,71 0,71
0,71 0,71 0,71 0,71
0,71 1,87 0,71 0,71
0,71 0,71 0,71 0,71
0,71 0,71 0,71 0,71
15,45 12,08 13,58 11,29
1,29 1,01 1,13 0,94
Lampiran 16. Data Sidik Ragam Jumlah Daun
ANOVA
SK
db
JK
KT
F.Hit
C
2
11,00
5,50
17,25
G
3
1,25
0,42
1,31
CxG
6
1,99
0,33
1,04
Galat
72
8,68
0,14
Total
83
37,16
FK
KK
7
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
0,71
8,49
0,71
0,05
3,15
2,76
2,25
Total
8,63
12,20
13,78
10,76
8,11
9,01
6,70
5,47
4,95
6,11
4,95
4,95
95,62
Rataan
1,23
1,74
1,97
1,54
1,16
1,29
0,96
0,78
0,71
0,87
0,71
0,71
1,14
Ket
**
tn
tn
108,8381
49,4316
liv
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 17. Komposisi Media MurashigedanSkoog (MS)
Bahan Kimia
Konsentrasi Media (mg/l)
Makro Nutrien (Stok I)
NH4 NO3
KNO3
CaCl2.2H2O
MgSO4.7H2O
KH2PO4
1650,000
1900,000
440,000
370,000
170,000
Mikro Nutrien (Stok II)
MnSO4.H2O
ZnSO4.7H2O
H3BO3
KI
Na2MoO4.2H20
CuSO4.5H2O
CoCl2.6H2O
6,900
8,600
6,200
0,830
0,250
0,025
0,025
Iron (Stok III)
FeSO4.7H2O
Na2.EDTA
27,800
37,200
Vitamin (Stok IV)
Nikotinic acid
Pyridoxin HCL
Thiamine HCL
Myo-inositol
0,500
0,500
0,100
100,000
Sukrosa
Agar
30.000,000
7.000,000
(Sumber: Gunawan, 1995)
lv
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 18. Bagan Penelitian
I
II
C1G1
C1G4
C2G3
III
IV
V
VI
VII
C1G2
C2G2
C1G1
C2G3
C1G3
C2G2
C3G1
C2G4
C3G1
C2G1
C3G1
C3G2
C1G2
C2G3
C1G2
C3G2
C1G4
C3G3
C1G3
C2G1
C3G3
C3G2
C2G2
C2G4
C2G2
C3G1
C3G2
C1G1
C3G3
C1G3
C3G1
C1G1
C1G4
C3G1
C2G4
C1G4
C2G4
C3G2
C3G2
C2G4
C1G3
C2G1
C3G4
C1G4
C1G2
C3G3
C2G3
C2G3
C3G2
C1G2
C3G4
C3G3
C1G4
C1G1
C1G1
C3G1
C2G2
C2G4
C2G2
C2G3
C3G3
C2G2
C1G2
C2G3
C1G1
C3G4
C2G1
C1G2
C2G4
C3G4
C3G4
C2G1
C1G4
C1G2
C2G1
C1G3
C2G1
C1G3
C3G3
C3G4
C3G4
lvi
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 19. Kegiatan Penelitian
Jenis Kegiatan
Sterilisasi Alat
Pembuatan Media
Pengambilan Bahan Tanaman
Sterilisasi Bahan Tanaman
Persiapan Ruang Tanam
Penanaman
Pemeliharaan Eksplan
1
X
X
2
3
Minggu ke –
4
5
6
7
8
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
Peubah amatan
- Persentase Munculnya Tunas (%)
X
- Umur Munculnya Tunas (hari)
X
- Jumlah Tunas (tunas)
X
- Panjang Tunas (cm)
X
- Jumlah Terbentuknya Bakal Daun
X
- Jumlah Daun (helai)
X
- Kehadiran Kalus (visual)
X
- Warna Kalus
X
- Morfogenesis
X
lvii
Universitas Sumatera Utara
Lampiran 20. Lampiran Foto Penelitian
C1G1
C1G2
C1G3
C1G4
lviii
Universitas Sumatera Utara
C2G1
C2G2
C2G3
C2G4
lix
Universitas Sumatera Utara
C3G1
C3G2
C3G3
C3G4
lx
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR PUSTAKA
Abbas, B.S., S. Ginting. 1981. Influence of Rootstock and Scion on Girth
Increment in Rubber Trees. Buletin Balai Penelitian Perkebunan Medan12,
145-152.
Abo , M.M. 1977. Organogenesis and Organogenesis and Embryogenesis in
Callus Culture of Garlic (Allium sativum L) . Plant Sci. Letter. 9:259-264.
Altman, A., B. Loberant. 1998. Micropropagation: clonal plant propagation in
vitro, p. 19-34. In: A. Altman (Ed.) Agricultural Biotechnology. Marcel
Dekker Inc. New York.
Anwar. 2006. Perkembangan Pasar dan Prospek Agribisnis Karet di Indonesia.
Lokakarya Budidaya Tanaman Karet. Pusat Penelitian Karet. Medan. 2p.
Ariany, S. P., Nirwan, S., Abdul, S. 2013. Pengaruh Kuantitas Cahaya Terhadap
Pertumbuhan Dan Kadar Antosianin Daun Dewa (Gynura pseudochina
(L.) DC) Secara In Vitro. e-J. Agrotekbis 1 (5) : 413 – 420.
Armini, N. M., G. A. Wattimena ., L. Gunawan. 1991. Bioteknologi Tanaman.
Tim Laboratorium Kultur Jaringan. Pusat Antar Universitas Bioteknologi.
IPB. Bogor. 455 hal.
Benny, Lahmuddin, L., Syahrial, O., Zaidah, F.2013. Uji Dosis Dan Cara
Aplikasi
Biofungisida
Bacillus
sp.
Terhadap
Penyakit Jamur Akar Putih (Rigidoporus lignosus) Pada Tanaman Karet
Di Pembibitan. Fakultas Pertanian Universitas Sumatera Utara, Medan.
Bewley, J. D., M. Black. 1982. Seeds: Physiology of Development and
Germination. Plenum Press. London. 418 p.
Budiman, H., 2012. BudidayaKaretUnggulProspekJituInvestasiMasaDepan.
PustakaBaru Press, Yogyakarta.
Carron, M.P.dan F. Enjalric. 1983. Perspectives du micro bouturage de l’Hevea
brasiliensis. Caoutchoucs et Plastiques 627-628, 65-68.
Cresswell, R D, Bouiary, M ., Franclet A (1982). Vegetative propagation of
Eucalyptus.In: Tissue culture in Forestry, pp. 150-180 (Eds. J M Bonga
and D J Durzon).Martinus Nijhott/Dr.W Junk publishers.
Djumat, J. L. 2014. Multiplikasi In Vitro Samama (Anthocephalus macrophyllus
(ROBX).HAVIL) Melalui Tunas Pucuk Dan Tunas Aksilar. Fakultas
Kehutanan UNIDAR, Ambon.
Gardner, F. P., R. B. Pearce, R. L. Mitchell. 1991. Fisiologi Tanaman Budidaya.
UI-Press. Jakarta. 426 hal.
xl
Universitas Sumatera Utara
Gunawan, L.W., 1995. Teknik Kultur Jaringan In Vitro dalam Hortikultura.
Penebar Swadaya. Jakarta.
George, E. F., P. D. Sherrington. 1984. Plant Propagation by Tissue Culture.
Exegetics Limited. England.
Gunnatilleke, I.D., Samaranayake. C.. 1988. Shoot Tip Culture as a Method of
Micropropagation of Hevea. Rubber Research Institute Agalawatta.
Journal of the Rubber Research Institute of Sri Lanka. 68pp. 33-34.
Harahap, P. S., L. A. M. Siregar ., Y. Husni. 2015. Kajian Awal : Respon Eksplan
Nodus dalam Inisiasi Tunas Mikro Tanaman Karet
(Hevea
brasiliensis Muell Arg.) dalam Medium MS. Jurnal Online
Agroekoteknologi. Vol.3(1) : 229 – 237.
Haris, N. 2013. Batang Bawah Klonal : Apakah Mungkin Pada Tanaman Karet ?.
www.ibriec.org.juli 2013 1(1)
Haris, N., Sumaryono ., M.P. Carron., 2009. Pengaruh Bahan pra-sterilan, Tutup
Tabung Kultur, dan Terhadap Tingkat Kontaminasi Eksplan pada Kultur
Microcutting Karet. Menara Perkebunan, 2009 77(2), Hal 89-99.
Hendaryono, D. P. S ., A. Wijayani. 1994. Teknik Kultur Jaringan, Pengenalan
dan Petunjuk Perbanyakan Secara Vegetatip. Kanisius, Yogyakarta.
Hoesen, D. S. H. 2009. Pembentukan Tunas Lilium sp. Secara Ex Vitro Dan In
Vitro. J. Tek. Ling Vol. 10 No. 2 Hal. 183 - 193 Jakarta, Mei 2009 ISSN
1441-318X.
Hooley, R. 1994. Gibberellins : perception, transduction and responses. Plant
Molecular Biology 26: 1529-1555.
Jumroh, P.H. 2013. Pengaruh Periode Subkultur Terhadap Mikropropagasi Puar
Tenangau (Elettariopsis sp.).Fakultas Pertanian. Universitas Sumatera
Utara, Medan.
Kosmiatin, M., A. Husni, I. Mariska. 2005. Perkecambahan dan perbanyakan
Gaharu secara In Vitro. Jurnal Agrobiogen 1(2). Oktober 2005.
Kurilcik, A., Dapkuniene, S., Kurilcik, G., Zilinskaite, S., Zukauskas, A., P.
Duchovskis. 2008. Effect Of The Photoperiod Duration On The Growth Of
Chrysanthemum Plantlets In Vitro. Scientific Works Of The Lithuanian
Institute Of Horticulture And Lithuanian University Of Agriculture. 27(2).
Lawalata, I.J. 2013. Application of GA3 and Sucrose on Vegetative Growth of
Gloxinia (Siningia speciosa) In Vitro. Jurnal Budidaya Pertanian 9: 33-38.
xli
Universitas Sumatera Utara
Mitrovic1, A., Giba, Z ., L. Culafic. 2007. The Photoperiodic Control Of Growth
And Development of Chenopodium Rubrum L. Plants In Vitro. Arch. Biol.
Sci., Belgrade, 59 (3), 203-208.
Montoro P, MP Carron, L Lardet, A Clement-Demange, J Leclercq. 2010.
Biotechnologies of rubber tree (Hevea brasiliensis). Aus Pac J Mol Biol
Biotechnol 18(1), 81-83.
Muslihatin, W. 2009. Pertumbuhan dan Keragaan Planlet Sagu (Metroxylon sagu
Rottb)pada Medium dengan Berbagai Sumber Karbohidrat dan Intensitas
Cahaya yangBerbeda. Tesis Sekolah Pascasarjana, Institut Pertanian
Bogor.
Nayanakantha NMC., P Seneviratne (2007). Tissue culture of rubber: past, present
and future prospects. Ceylon J Sci 36(2), 116-125.
Padilla, I. M. G. , C. L. Encina. 2002. In vitro germination of cherimoya (Annona
cherimola Mill.) seeds.
Pancholi, N., A. Wetten, P. D. S. Caligari. 1995. Germination of Musa veluntia
seeds: comparison of in vivo and in vitro systems. In vitro cellular and
developmental biology 31: 127-130.
Pieterse, A. H. 1981. Germination of Orobanche crenata Forsk. seeds in vitro.
Weed Research 26(6): 279-287.
Rahmawati, M.S. 2008. Pengaruh BAP DAN GA3 Terhadap Perkecambahan
Heliconia caribaea Lam. Secara In Vitro. Fakultas Pertanian Institut
Pertanian Bogor.
Salisbury, F. B., C. W. Ross. 1992. Plant Physiology. 4th edition. Belmont,
California : Wadsworth Publishing Company.
Santoso, U., F. Nursandi, 2001. Kultur Jaringan Tanaman. Penerbit UMM,
Malang.
Seneviratna, P., G. A. S. Wijesekera. 1997. Effect Of GA3, On The Growth Of
Axillary Buds Of Hevea Brasilliensis In Vitro. Journal Of Yhe Rubber
Research Institute Of Sri Lanka, 80, 37-44.
Setiawan, H.D. ,A Andoko. 2005. Petunjuk Lengkap Budidaya Karet(edisi revisi).
Agromedia Pustaka. Jakarta.
Setyamidjaja, D., 1993. Karet Budidaya dan Pengelolaan. Kanisius, Yogyakarta.
Sianturi, H. S. D., 2001. Budidaya Tanaman Karet. Fakultas Pertanian USU.
Medan.
xlii
Universitas Sumatera Utara
Siburian, O. 2012. Analisis Faktor-Faktor Yang Mempengaruhi Ekspor Karet
Alam Indonesia Ke Singapura Tahun 1980-2010. Fakultas Ekonomi
Universitas Negeri Semarang.
Steel, R.G., J.H. Torrie, 1993. Prinsip Dan Prosedur Statiska (Pendekatan
Biometric) Penerjemah B. Sumantri. Gramedia Pustaka Utama, Jakarta.
Steenis, C. G. G. K. 2005. Flora. PT. Pradnya Paramita. Jakarta.
Sundari, L., Siregar, L. A. M.,Hanafiah, D. S. 2015. Kajian Awal : Respon
Eksplan Nodus dalam Inisiasi Tunas Mikro Tanaman Karet
(Hevea brasiliensis Muell Arg.) dalam Medium WPM. Jurnal Online
Agroekoteknologi. 3(1): 4-5.
Syamsulbahri. 1996. Bercocok Tanam Tanaman Perkebunan Tahunan. Fakultas
Pertanian Universitas Brawijaya. Malang.
Thomas, T. D. 2006. Effect of sugars, gibberellic acid and somatic embryogenesis
in Tylophora indica (Burm. f.) Merrill. Chinese Journal of Biotechnology
22(3):465-471.
Wattimena, G.A;L.W. Gunawan; N. A. Mattjik; Endang. S; N.M. A. Wiendi.,
Andri. E. 1992. Bioteknologi Tanaman. Penerjemah Ahmad Sukarti
Abidin. Pusat Antar Universitas Bioteknologi IPB: Bogor.
Wetherell, D. F. 1982. Pengantar Propagasi Tanaman secara In Vitro Seri
KulturJaringan Tanaman. Avery Publishing Group, Inc. Wayne –
NewJersey.
Widyastuti, N. 2002. Pengaruh Intensitas Cahaya Terhadap Multiplikasi Kultur
Tanaman Secara In Vitro. Seminar Nasional Penerapan Teknologi Kendali
dan Instrumentasi Pertanian.
Yusnita., 2003. Kultur Jaringan. Cara Memperbanyak Tanaman Secara Efisisen.
Cetakan Ketiga. Agro Media Pustaka. Jakarta.
Yuwono, T. 2008. Bioteknologi Pertanian. Gadjah mada University Press:
Yogyakarta.
Zulkarnain, H. 2009. Kultur Jaringan Tanaman. Bumi Aksara. Jakarta.
xliii
Universitas Sumatera Utara
BAHAN DAN METODE
Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Microcutting Tanaman Karet
PT. Perkebunan Nusantara III Kebun Gunung Pamela Tebing Tinggi, Sumatera
Utara, Indonesia. Penelitian ini dimulai pada bulan April 2015 sampai dengan Juli
2015.
Bahan dan Alat Penelitian
Bahan eksplan yang digunakan dalam penelitian ini adalah tunas dari
bahan tanaman karet yang di tanam di rumah kasa, komposisi media yang
digunakan larutan stok media WPM sebagai media tumbuh tanaman dengan BAP
dan GA3 sebagai zat pengatur tumbuh (ZPT) yang digunakan, eksplan yang
digunakan berasal dari beberapa klon yang merupakan koleksi PTPN III dengan
satu jenis klon dengan panjang 1,5 – 2 cm. Pada media WPM ditambahkan
dengan 0,5 mg/l BAP, agar, aquadest steril, dan bahan lainnya yang mendukung
penelitian ini.
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah Laminar Air Flow
Cabinet (LAFC), tabung uji, autoklaf, steri box, timbangan analitik, rak kultur,
hot plate dengan magnetik stirer, erlenmeyer, gelas ukur, kaca tebal, pipet ukur,
pinset, gunting, scalpel, lampu bunsen, pH meter, oven, kertas plano, aluminium
foil, kompor gas, minisar, mikropipet, tip, pipet tetes, dan alat-alat lainnya yang
mendukung penelitian ini.
Metode Penelitian
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan Rancangan Acak Lengkap
(RAL) faktorial, dengan dua faktor perlakuan yaitu :
xvi
Universitas Sumatera Utara
Faktor I
: Lama penyinaran dengan 3 taraf
C1
: 12 jam terang, 12 jam gelap
C2
: 24 jam terang
C3
: 24 jam gelap
Faktor II
: Perendaman nodus sebelum pengkulturan dengan 4 taraf selama dua
setengah jam
G1
: 0 mg/lGA3
G2
: 5 mg/lGA3
G3
: 10 mg/lGA3
G4
: 15 mg/lGA3
Sehingga diperoleh kombinasi perlakuan sebagai berikut:
C1G1
C2G1
C3G1
C1G2
C2G2
C3G2
C1G3
C2G3
C3G3
C1G4
C2G4
C3G4
Jumlah perlakuan
: 12
Jumlah ulangan
:6
Jumlah eksplan tiap tabung uji
:1
Jumlah seluruh eksplan
: 72
Jumlah seluruh tanaman
: 72
Adapun model liner dari sidik ragam penelitian sebagai berikut:
Yijk = µ + αi + βj + (αβ)ij + ε ijk
i = 1,2,3
j = 1,2,3,4
k = 1,2,3…6
xvii
Universitas Sumatera Utara
Yijk
= Nilai pengamatan unit percobaan pada perlakuan lama penyinaran ke-i,
konsentrasi perendaman giberelin sebelum pengkulturan
ke-j, dan
ulangan ke-k
µ
= Nilai tengah umum
αi
= Pengaruh lama penyinaran ke-i
βj
= Pengaruh konsentrasi perendaman giberelin sebelum pengkulturan ke-j
(αβ)ij = Nilai tambah pengaruh interaksi lama penyinaran ke-i dankonsentrasi
perendaman giberelin ke-j
Εijk
= Galat percobaan
Jika perlakuan berbeda nyata dalam sidik ragam maka dilanjutkan dengan
Uji Jarak Berganda Duncan (DMRT) pada α = 5% (Steel and Torrie, 1995).
xviii
Universitas Sumatera Utara
PELAKSANAAN PENELITIAN
Sterilisasi Alat-Alat
Sebelum semua alat-alat disterilisasi dan alat-alat kaca digunakan untuk
kultur in vitro maka terlebih dahulu dicuci dan dikeringkan. Kemudian bungkus
tabung dengan plastik tahan panas atau letakkan pada rak tabung, sedangkan
untuk botol biasanya bisa langsung diletakkan pada autoklaf. Disterilkan
tabung/botol dengan autoklaf pada suhu 121oC dengn tekanan 17,5 psi selama 60
menit. Setelah itu sterilkan secara kering tabung/botol di dalam oven pada suhu
150oC selama 1-2 jam.
Pembuatan Media
Media yang digunakan dalam penelitian ini adalah mediaWoody Plant
Medium (WPM). Sebelum dilakukan pembuatan media WPM, dilakukan
pembuatan larutan stok hormon BAP dan GA3. Larutan stok hormon masingmasing dibuat 100mg/100ml. Kemudian larutan stok BAP dan GA3 disaring
menggunakan minisar guna meningkatkan sterilitas dari hormon tersebut dan
dilakukan di Laminar Air Flow Cabinet (LAFC).
Pada pembuatan media WPM, tahap pertama adalah membuat larutan stok
bahan kimia hara makro dengan pembesaran 10x, hara mikro dengan pembesaran
100x, larutan iron dengan pembesaran 50x, larutan vitamin dengan pembesaran
100x, sukrosa 30 g, myo-inositol 0,1 g dan agar 7 g. Tahap berikutnya, sukrosa
dimasukkan ke dalam beaker glass yang telah berisi akuades 1000 ml, lalu diaduk
dengan menggunakan magnetik stirer sebagai pengaduk. Kemudian ditambahkan
myo-inositol diaduk hingga larut. Dimasukkan larutan stok hara makro 160ml,
larutan stok hara mikro 6.4ml, iron 12.8ml dan vitamin 6.4ml. Kemudian larutan
xix
Universitas Sumatera Utara
ditepatkan menjadi 3200ml dengan menambahkan akuades. Keasaman diukur
dengan pH meter. pH yang dikehendaki adalah 5,8, untuk mengatur pH yaitu
menaikkan atau menurunkan pH dapat digunakan larutan KOH dan HCl 0,1 N.
Ditambahkan agar biotek dan dimasak di atas kompor gas sampai larutan
mendidih dan bening (semua agar telah larut). Larutan dipindahkan ke erlenmeyer
berukuran 5000ml dan ditutup dengan aluminium foil dan diikat dengan tali
plastik. Kemudian media WPM di sterilisasi dengan tekanan 17,5 psi pada suhu
121°C
selama 20 menit di autoklaf. Setelah proses sterilisasi selesai, media
dimasukkan ke ruang kultur dan dimasukkan keLaminar Air Flow Cabinet
(LAFC). Teteskan BAP dan GA3 ke masing-masing tabung uji sesuai perlakuan.
Dituangkan media ke dalam tabung uji berisikan 13ml/tabung dan ditutup kain
kasa steril yang dibalut dan diikat benang. Sehingga diperoleh ± 246 tabung uji.
Tabung uji diberi label sesuai dengan perlakuan. Selanjutnya disimpan dalam
ruang kultur sebelum digunakan.
Pembuatan Media Perendaman Nodus
Pada pembuatan media perendaman nodus, dimasukkan akuades 2500ml
kedalam erlenmeyer. Kemudian media disterilisasi dengan tekanan 17,5 psi pada
suhu 1210C selama 20 menit diautoklaf. Setelah proses sterilisasi selesai, media
dimasukkan keruang kultur
dan dimasukkan ke Laminar Air Flow Cabinet
(LAFC). Larutan dipindahkan ke 4 erlenmeyer berukuran 2000ml yang masingmasing erlenmeyer berisi 625ml dan ditutup dengan almunium foil dan diikat
dengan karet. Teteskan GA3 ke masing-masing tabung uji sesuai perlakuan.
Dituangkan media kedalam tabung uji berisikan 10ml/tabung dari setiap
perlakuannya dan ditutup dengan penutup botol. Sehingga diperoleh 62 tabung uji
xx
Universitas Sumatera Utara
dari setiap perlakuannya. Tabung uji diberi label sesuai dengan perlakuan.
Selanjutnya disimpan dalam ruang kultur sebelum digunakan.
Sterilisasi Bahan Tanaman di Lapangan
Bahan tanaman berasal dari rumah kasa tanaman karet PT. Perkebunan
Nusantara III, Kebun Gunung Pamela. Sterilisasi lapangan ialah dengan
memberikan fungisida (dithane) yang dicampurkan dengan air, kemudian
dioleskan pada bahan tanaman yang akan dijadikan eksplan di rumah kaca dengan
menggunakan kuas. Ditunggu selama 1 malam untuk fungisida bereaksi
mencegah jamur pada bahan tanaman. Dipotong bahan tanaman yang akan
dijadikan eksplan keesokan paginya dan diberi label.
Pengambilan Bahan Tanaman
Bahan tanaman yang digunakan ialah yang telah diberikan fungisida
dithane. Bahan tanaman yang digunakan ialah bibit karet yang telah latern(daun
terbuka sempurna) dan berwarna hijau terang, batang tanaman kokoh dan
berwarna hijau, serta berpayung dua. Batang bawah dari tanaman karet itu sendiri
berasal dari seedling karet pendukung klon tertentu yang selanjutnya diokulasi
Bagian yang diambil ialah nodus yang terdapat dari setiap batang tersebut.
Pengambilan dilakukan pada pagi hari dengan menggunakan gunting.
Sterilisasi Bahan Tanaman di Laboratorium
Sterilisasi di laboratorium ialah dengan mecuci bahan tanaman
menggunakan air mengalir dengan menggunakan kuas untuk menghilangkan
olesan dithane. Bilas eksplan dengan cara memasukkan eksplan ke dalam tabung
toples kemudian diisi alkohol 70% dan diguncang selama 1 menit, setelah itu
alkohol dibuang dan toples diisi kembali dengan H2O2 dengan konsentrasi 17%
xxi
Universitas Sumatera Utara
selama 20 menit. Setelah selesai larutan tersebut dibuang, tabung toples diisi
akuades dan diguncang selama 1 menit dan dibuang kembali. Rendam kembali
eksplan dengan akuades di dalam tabung toples selama 2 x 15 menit. Kemudian
air tersebut dibuang dari tabung toples. Eksplan sudah siap untuk ditanam.
Persiapan Ruang Tanam
Seluruh permukaan laminar air flow cabinet sebelumnya dibersihkan
terlebih dahulu dengan di lap menggunakan alkohol 96% lalu di sterilkan dengan
sinar Ultra Violet selama 1 jam sebelum proses penanaman dilakukan. Semua alat
dan bahan yang akan dipakai harus disemprot dengan alkohol 96% dan beberapa
alat seperti pinset, gunting, scalpel setelah disemprot lalu dibakar di dalam ke
dalam laminar air flow cabinet selama 1 menit. Hal ini dilakukan untuk
menghindari resiko bahan penelitian terkontaminasi. Steri box dihidupkan dan
disediakan alkohol 70% untuk membersihkan alat yang telah digunakan.
Perendaman Nodus
Perendaman nodus
dilakukan sebelum penanaman. Nodus diambil
kemudian dimasukkan ke tabung uji masing-masing perlakuan perendaman yang
berisi akuades dengan penambahan GA3 sesuai konsentrasi setiap masing-masing
perlakuan ke dalam tabung uji. Lama perendaman nodus sebagai perlakuan
dilakukan selama 2 jam 30 menit.
Penanaman
Eksplan yang digunakan adalah nodus dari bahan tanaman karet yang telah
di sterilisasi sebelumnya dengan standar yang dimiliki Laboratorium microcutting
karet Kebun Gunung Pamela dan juga eksplan yang telah mengalami perendaman
GA3 selama 2 jam 30 menit, lalu langsung ditanam pada tabung uji yang sudah
xxii
Universitas Sumatera Utara
berisikan media sebanyak 13ml/tabung uji. Eksplan
yang
digunakan
berukuran1,5-2 cm, apabila ukuran eksplan belum sesuai maka dipotong
menggunakan gunting steril dan tajam. Eksplan yang akan dikulturkan ke dalam
media tanam diletakkan di piringan kaca tebal dengan alas kertas plano.
Kemudian eksplan ditanamkan ke dalam tabung uji sesuai dengan perlakuan,
setiap tabung uji terdiri dari 1 eksplan. Kemudian ujung tabung uji ditutup dengan
menggunakan kain kasa steril yang dibalut dan diikat benang. Kegiatan
penanaman dilakukan di dalam Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) dan di bawah
api bunsen. Tabung uji diletakkan di rak kultur di bawah cahaya dan ruangan
memiliki air conditioner dengan suhu 18oC.
Pemeliharaan Eksplan
Tabung-tabung uji diletakkan pada rak kultur di dalam ruang kultur.
Ruangan ini diusahakan bebas dari bakteri dan cendawan, dimana setiap hari
disemprot dengan alkohol 96% atau dan disemprot formalin agar bebas dari
organisme yang menyebabkan terjadi kontaminasi. Suhu ruangan kultur yang
digunakan + 20-25°C, paling optimum 18oC dan intensitas cahaya 2000 lux serta
dengan kondisi ruangan memiliki air conditioner dengan hefa yang dibersihkan
selama 6 bulan sekali. Apabila mengalami kontaminasi, segera diambil dari rak
kultur agar mencegah kontaminasi ke tabung lainnya.
xxiii
Universitas Sumatera Utara
Peubah Amatan
Umur Muncal Tunas (hari)
Umur muncul tunas dihitung dari awal penanaman hingga terbentuknya
tunas dalam satuan hari.
Persentase Terbentuknya Tunas (%)
Persentase terbentuknya tunas dihitung pada akhir penelitian (6
MST) dengan rumus:
Persentase terbentuknya tunas = jumlah tunas yang terbentuk x 100%
jumlah eksplan seluruhnya (perperlakuan)
Jumlah Tunas (tunas)
Dihitung pada akhir penelitian dengan menghitung banyaknya tunas baru
yang terbentuk dari setiap eksplan
Panjang Tunas (cm)
Panjang tunas diukur pada tunas tertinggi dengan menggunakan kertas
milimeter yang diukur dari tempat munculnya tunas (pangkal) sampai ujung tunas
tertinggi. Pengukuran dilakukan pada akhir penelitian.
Jumlah Terbentuk Bakal Daun
Jumlah daun dihitung dari bakal daun yang terbentuk pada eksplan.
Pengamatan dilakukan pada akhir penelitian. Jumlah terbentuknya bakal daun
dihitung pada akhir penelitian dengan rumus:
Persentase terbentuknya daun = jumlah bakal daun yang terbentuk
jumlah eksplan seluruhnya (per perlakuan)
Jumlah Daun (helai)
Jumlah daun dihitung dari daun yang terbentuk yang telah terbuka
sempurna pada eksplan yang dilakukan pada akhir percobaan.
xxiv
Universitas Sumatera Utara
Kehadiran Kalus (visual)
Kehadiran kalus dilihat dari ada atau tidaknya kemunculan kalus dari
tunas-tunas samping yang bersifat positif atau negatif bagi penelitian. Dilihat pada
akhir percobaan.
Warna Kalus (visual)
Kehadiran warna kalus dilihat dari ada atau tidaknya kemunculan warna
yang berbeda atau tidak dari kalus. Dilihat pada akhir percobaan.
Morfogenesis
Kemunculan tunas diluar jaringan meristem aksilar (pangkal batang,
ujung batang, bagian manapun dari eksplan).
xxv
Universitas Sumatera Utara
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil
Berdasarkan hasil analisis data yang dilakukan, diperoleh bahwa perlakuan
lama penyinaran memberikan pengaruh sangat nyata terhadap panjang tunas,
jumlah terbentuk bakal daun, dan jumlah daun. Pada perlakuan perendaman
dengan GA3 dan interaksi antara lama penyinaran dan GA3 belum memberikan
pengaruh yang nyata terhadap terhadap persentase munculnya tunas, jumlah tunas,
panjang tunas, jumlah terbentuk bakal daun, dan jumlah daun.
Umur Munculnya Tunas (hari)
Hasil pengamatan terhadap parameter umur munculnya tunas pada
perlakuan lama penyinaran dan GA3 (Lampiran 1). Rataan umur munculnya tunas
dari perlakuan lama penyinaran dan GA3 dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1. Pengaruh perlakuan lama penyinaran dan GA3 terhadap umur
munculnya tunas (hari) 6 MST.
GA3
Perlakuan
Rataan
G1
G2
G3
G4
C1
25,00
25,00
23,00
24,00
24,25
C2
26,00
24,00
24,00
24,00
24,50
C3
23,00
26,00
23,00
24,00
24,00
Rataan
24,67
25,00
23,33
24,00
24,25
Keterangan: Perlakuan C1=12 jam terang 12 jam gelap; C2=24 jam terang; C3=24 jam gelap.
Perlakuan G1: 0 mg/l GA3, G2: 5 mg/l GA3, G3: 10 mg/l GA3, G4: 15 mg/l GA3.
Persentase Munculnya Tunas (%)
Hasil pengamatan serta sidik ragam pada perlakuan lama penyinaran dan
GA3 serta interaksi antara perlakuan lama penyinaran dan GA3 (Lampiran 2-4)
belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap persentase munculnya tunas
pada 6 MST.
Rataan persentase munculnya tunas dari perlakuan lama penyinaran dan
GA3 dapat dilihat pada Tabel 2.
xxvi
Universitas Sumatera Utara
Tabel 2. Pengaruh perlakuan lama penyinaran dan GA3 terhadap persentase
munculnya tunas (%) 6 MST.
GA3
Pencahayaan
Rataan
G1
G2
G3
G4
C1
100,00
100,00
100,00
100,00
100,00
C2
100,00
100,00
100,00
100,00
100,00
C3
85,71
100,00
100,00
100,00
96,43
Rataan
95,24
100,00
100,00
100,00
98,81
Keterangan: Perlakuan C1=12 jam terang 12 jam gelap; C2=24 jam terang; C3=24 jam gelap.
Perlakuan G1: 0 mg/l GA3, G2: 5 mg/l GA3, G3: 10 mg/l GA3, G4: 15 mg/l GA3.
Gambar eksplan sesudah membentuk tunas pada salah satu perlakuan
dapat dilihat pada Gambar 1.
Gambar 1. Eksplan setelah membentuk tunas ( 6 MST )
Jumlah Tunas ( Tunas )
Hasil pengamatan terhadap parameter jumlah tunas pada perlakuan lama
penyinaran dan GA3 serta interaksi antara perlakuan lama penyinaran dan GA3
(Lampiran 5-7) belum memberikan pengaruh yang nyata pada 6 MST
Rataan jumlah tunas dari perlakuan lama penyinaran dan GA3 dapat
dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Pengaruh perlakuan lama penyinaran dan GA3 terhadap jumlah tunas
xxvii
Universitas Sumatera Utara
tunas (tunas) 6 MST.
Perlakuan
C1
C2
C3
Rataan
GA3
G1
1,00
1,00
0,86
0,95
G2
1,00
1,00
1,00
1,00
G3
1,00
1,00
1,00
1,00
G4
1,00
1,00
1,00
1,00
Rataan
1,00
1,00
0,96
0,99
Keterangan: Perlakuan C1=12 jam terang 12 jam gelap; C2=24 jam terang; C3=24 jam gelap.
Perlakuan G1: 0 mg/l GA3, G2: 5 mg/l GA3, G3: 10 mg/l GA3, G4: 15 mg/l GA3.
Panjang Tunas (cm)
Hasil pengamatan serta sidik ragam terhadap parameter panjang tunas
pada perlakuan lama penyinaran (Lampiran 8-10) menunjukkan pengaruh sangat
nyata, sedangkan GA3 serta interaksi antara perlakuan lama penyinaran dan GA3
belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap panjang tunas.
Rataan panjang tunas lama penyinaran dan GA3 dapat dilihat pada Tabel 4.
Tabel 4. Pengaruh perlakuan lama penyinaran dan GA3 terhadap panjang tunas
(cm) 6 MST.
GA3
Perlakuan
Rataan
G1
G2
G3
G4
C1
0,71
1,09
1,23
0,80
0,96a
C2
0,61
1,01
0,41
0,26
0,58b
C3
0,24
0,27
0,24
0,26
0,25c
Rataan
0,52
0,79
0,63
0,44
0,60
Keterangan : Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang sama menunjukkan
tidak berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
Perlakuan C1=12 jam terang 12 jam gelap; C2=24 jam terang; C3=24 jam gelap.
Perlakuan G1: 0 mg/l GA3, G2: 5 mg/l GA3, G3: 10 mg/l GA3, G4: 15 mg/l GA3.
Tabel 4, memperlihatkan panjang tunas tertinggi pada perlakuan lama
penyinaran terdapat pada perlakuan C1 (12 jam terang 12 jam gelap) dengan
rataan (0,96) cm dan terendah pada perlakuan C3 (24 jam gelap) dengan rataan
(0,25) cm. Perlakuan lama penyinaran dengan perlakuan C1 berbeda nyata dengan
perlakuan C2 dan C3.
xxviii
Universitas Sumatera Utara
Gambar panjang tunas eksplan pada salah satu perlakuan dapat dilihat
pada Gambar 2.
Gambar 2. Panjang Tunas ( 6 MST ) pada C2G2
(24 jam terang +5 mg/l GA3)
Jumlah Terbentuk Bakal Daun
Hasil pengamatan serta sidik ragam terhadap parameter jumlah terbentuk
bakal daun pada perlakuan lama penyinaran (Lampiran 11-13) menunjukkan
pengaruh sangat nyata, sedangkan GA3 serta interaksi antara perlakuan lama
penyinaran dan GA3 belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap jumlah
terbentuk bakal daun.
Gambar jumlah terbentuk bakal daun pada salah satu perlakuan dapat
dilihat pada Gambar 3.
xxix
Universitas Sumatera Utara
Gambar 3. Eksplan Membentuk Bakal Daun pada C1G2
(12 jam terang 12 jam gelap +5 mg/l GA3)
Rataan jumlah terbentuk bakal daun dari perlakuan lama penyinaran dan
GA3 dapat dilihat pada Tabel 5.
Tabel 5. Pengaruh perlakuan lama penyinaran dan GA3 terhadap jumlah terbentuk
bakal daun6 MST.
GA3
Perlakuan
Rataan
G1
G2
G3
G4
C1
0,43
0,71
1,00
0,71
0,71a
C2
0,57
0,43
0,29
0,14
0,36b
C3
0,00
0,14
0,00
0,00
0,04c
Rataan
0,33
0,43
0,43
0,29
0,37
Keterangan : Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada baris dan kolom yang sama
menunjukkan berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
Perlakuan C1=12 jam terang 12 jam gelap; C2=24 jam terang; C3=24 jam gelap.
Perlakuan G1: 0 mg/l GA3, G2: 5 mg/l GA3, G3: 10 mg/l GA3, G4: 15 mg/l GA3.
Tabel 5, memperlihatkan jumlah terbentuk bakal daun tertinggi pada
perlakuan lama penyinaran terdapat pada perlakuan C1 (12 jam terang 12 jam
gelap) dengan rataan (0,96) cm dan terendah pada perlakuan C3 (24 jam gelap)
dengan rataan (0,25) cm. Perlakuan lama penyinaran dengan perlakuan C1
berbeda nyata dengan perlakuan C2 dan C3.
xxx
Universitas Sumatera Utara
Jumlah Daun (helai)
Hasil pengamatan serta sidik ragam terhadap parameter jumlah daun pada
perlakuan lama penyinaran (Lampiran 14-16) menunjukkan pengaruh sangat
nyata, sedangkan GA3 serta interaksi antara perlakuan lama penyinaran dan GA3
belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap jumlah daun. Gambar eksplan
membentuk daun dapat dilihat pada Gambar 4.
Gambar 4. Eksplan Membentuk Daun pada C1G1
(12 jam terang 12 jam gelap +5 mg/l GA3)
Rataan jumlah daun dari perlakuan lama penyinaran dan GA3 dapat dilihat
pada Tabel 6.
Tabel 6. Pengaruh perlakuan lama penyinaran dan GA3 terhadap jumlah daun
(helai) 6 MST.
GA3
Perlakuan
Rataan
G1
G2
G3
G4
C1
1,43
3,14
3,86
2,29
2,68a
C2
1,14
1,86
0,57
0,14
0,93b
C3
0,00
0,43
0,00
0,00
0,11c
Rataan
0,86
1,81
1,48
0,81
1,24
Keterangan : Angka-angka yang diikuti huruf yang sama pada baris dan kolom yang sama
menunjukkan berbeda nyata pada Uji Jarak Berganda Duncan pada taraf 5%.
Perlakuan C1=12 jam terang 12 jam gelap; C2=24 jam terang; C3=24 jam gelap.
Perlakuan G1: 0 mg/l GA3, G2: 5 mg/l GA3, G3: 10 mg/l GA3, G4: 15 mg/l GA3.
Tabel 6, memperlihatkan jumlah daun tertinggi pada perlakuan lama
penyinaran terdapat pada perlakuan C1 (12 jam terang 12 jam gelap) dengan
xxxi
Universitas Sumatera Utara
rataan (0,96) cm dan terendah pada perlakuan C3 (24 jam gelap) dengan rataan
(0,25) cm. Perlakuan lama penyinaran dengan perlakuan C1 berbeda nyata dengan
perlakuan C2 dan C3 (Lampiran 17-19).
Data pada Tabel 7, menunjukkan rangkuman berdasarkan hasil penelitian.
Lama penyinaran memberikan pengaruh sangat nyata terhadap panjang tunas,
jumlah terbentuk bakal daun, dan jumlah daun. Pada perlakuan perendaman
dengan GA3 dan interaksi antara lama penyinaran dan GA3 belum memberikan
pengaruh yang nyata terhadap semua peubah amatan.
Tabel 7. Tabel 7. Rekapitulasi Peubah Amatan Sidik Ragam pada Induksi Tunas
Mikro Tanaman Karet Pada Lama Penyinaran dan GA3 6 MST.
Perlakuan
Peubah Amatan
C
G
CxG
a
Umur Muncul tunas (hari)
tn
tn
tn
a
Persentase Munculnya Tunas (%)
tn
tn
tn
a
Jumlah Tunas (tunas)
tn
tn
tn
Panjang Tunas (cm)a
**
tn
tn
a
Jumlah terbentuk bakal Daun
**
tn
tn
a
Jumlah Daun (helai)
**
tn
tn
Kehadiran Kalus
Tidak ada
Tidak ada
Tidak ada
Warna Kalus
Tidakkada
Tidak ada
Tidak ada
Morfogenesis
Tidak ada
Tidak ada
Tidak ada
Keterangan: C = Lama Penyinaran
G = GA3
CxG = interaksi lama penyinaran dengan GA3
**= sangat nyata pada taraf 5 %
tn = tidak nyata
a = transformasi data
Kehadiran Kalus
Pada semua kultur yang dilakukan tidak ada satu pun yang menunjukkan
kehadiran kalus. Ketidakhadiran kalus pada tunas mikro tanaman karet merupakan
hal yang diharapkan dalam penelitian ini, sebab microcutting pada tahap primary
culture merupakan tahapan awal sehingga tidak diharapkan kehadiran kalus dan
hingga akhir penelitian tidak ditemukan kehadiran kalus.
Warna Kalus
xxxii
Universitas Sumatera Utara
Karena tidak ada kalus yang terbentuk hingga akhir penelitian
menyebabkan tidak adanya warna kalus yang diamati secara visual.
Morfogenesis
Berdasarkan kemunculan tunas mikro tanaman karet, maka tidak diperoleh
kemunculan tunas diluar jaringan meristem aksilar (pangkal batang, ujung batang,
atau bagian lain dari eksplan).
Pembahasan
Pengaruh Lama Penyinaran terhadap Induksi Tunas Mikro Tanaman Karet
Berdasarkan hasil analisis data secara statistik diperoleh bahwa perlakuan
lama penyinaran memberikan pengaruh sangat nyata terhadap panjang tunas,
jumlah terbentuk bakal daun, dan jumlah daun
tetapi belum memberikan
pengaruh yang nyata terhadap persentase munculnya tunas, umur muncul tunas,
dan jumlah tunas.
Panjang tunas tertinggi pada perlakuan lama penyinaran terdapat pada
perlakuan C1 (12 jam terang 12 jam gelap) dengan rataan (0,96) cm dan terendah
pada perlakuan C3 (24 jam gelap) dengan rataan (0,25) cm. Hal ini diduga karena
lama penyinaran dengan 12 jam terang 12 jam gelap mampu mendorong eksplan
untuk melakukan pembelahan sel sehingga menyebabkan tunas bertambah
panjang. Lama penyinaran yang sesuai akan membantu eksplan dalam
pembentukan tunas.Hal ini didukung oleh Kurilcik et al. (2008) yang menyatakan
bahwa penyinaran optimal untuk pertumbuhan tunas dan akar planlet krisan
secara in vitro terdapat pada 16 jam penyinaran.Menurut Wattimena et al. (1992)
yang menyatakan bahwa lama penyinaran di dalam kultur jaringan mempunyai
pengaruh terhadap kandungan hormon endogen. Peranan lama peyinaran dalam
xxxiii
Universitas Sumatera Utara
kultur jaringan terhadap morfogenesis mungkin dapat juga digantikan dengan
penambahan zat pengatur tumbuh ke dalam medium. Di dalam morfogenesis,
lama penyinaran berkaitan dengan energi yang diterima oleh jaringan.
Pemindahan kultur dari penyinaran pendek juda dapat mendorong terjadinya
embryogenesis dari kultur karet.
Jumlah terbentuk bakal daun tertinggi pada perlakuan lama penyinaran
terdapat pada perlakuan C1 (12 jam terang 12 jam gelap) dengan rataan (0,71)
dan terendah pada perlakuan C3 (24 jam gelap) dengan rataan (0,04). Hal ini
menunjukkan bahwa pembentukan bakal daun diduga didorong oleh lama
penyinaran yang sesuai yaitu 12 jam terang 12 jam gelap. Penyinaran yang sesuai
membantu eksplan untuk melakukan pembelahan sel untuk membentuk daun. Hal
ini didukung oleh penelitian Mitrovic et al. (2007) yang menyatakan bahwa lama
penyinaran yang berbeda juga mempengaruhi jumlah daun. Lama penyinrana
yang panjang akan merangsang perkembangan daun pada tanaman Chinopodium
rubrum L. Hal ini sesuai dengan pernyataan Abo (1977) yang menyatakan bahwa
pembentukan dan pertumbuhan tunas aksiler menjadi daun diperngaruhi oleh
lingkungan, terutama faktor fisik pencahayaan, lama penyinaran (fotoperiodisme)
dan suhu ruang inkubasi. menurut Rahmawati (2008) menyatakan pertumbuhan
organ atau jaringan tanaman dalam kultur in vitroumumnya tidak dihambat oleh
cahaya, namun pertumbuhan kalus umumnya dihambat oleh cahaya.
Jumlah daun tertinggi pada perlakuan lama penyinaran terdapat pada
perlakuan C1 (12 jam terang 12 jam gelap) dengan rataan (2,68) helai dan
terendah pada perlakuan C3 (24 jam gelap) dengan rataan (0,11) helai. Hal ini
menunjukkan bahwa perlakuan lama penyinaran 12 jam terang 12 jam gelap dapat
xxxiv
Universitas Sumatera Utara
mendorong eksplan mengalami pembelahan sel sehingga eskplan dapat
membentuk daun. Hal ini didukung oleh Kurilcik et al. (2008) yang menyatakan
bahwa morfogenesis daun baru dan akumulasi DW/FW tertinggi terdapat pada 24
jam penyinaran. Hal ini sesuai dengan literatur Salisbury dan Ross (1992) yang
menyatakan bahwa cahaya dalam kultur jaringan tidak diutamakan digunakan
untuk berfotosintesis, namun digunakan untuk morfogenesis seperti pembentukan
tunas, pembentukan akar, pembentukan daun, dan sebagainya.
Pengaruh GA3 terhadap Induksi Tunas Mikro Tanaman Karet
Berdasarkan hasil analisis data secara statistik diperoleh bahwa GA3
belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap semua peubah amatan. Hal ini
diduga karena GA3 memberikan respon yang sama pada pertumbuhan tunas
mikro tanaman karet terhadap semua lama penyinaran, serta disebabkan oleh
kondisi eksplan dalam penyerapan GA3 pada saat perendaman sehingga tidak
berpengaruh terhadap pertumbuhan tunas mikro. Hal ini didukung Gunatilleke
dan Samaranayake (1988) yang menyatakan bahwa efek GA3 pada pemanjangan
ploriferasi tunas dengan 0,5 mg/l dan 2,0 mg/l GA3 tidak efektif
untuk
mendorong ploriferasi tunas aksilar pada tanaman karet. Hasil penelitian Lawalata
(2013) menunjukkan bahwa pada 14MST, pemberian GA3 hingga 10 mg/l
cenderungmenurunkan pertumbuhan gloxinia dengan persentasetumbuh sebesar
66,7%, walaupun ada peningkatanpersentase tumbuh pada perlakuan 6
mg/l.Menurut Wattimena et al. (1992) yang menyatakan bahwa di dalam
morfogenesis tanaman in vitro giberelin menghambat pembentukan akarmaupun
tunas. Pada nisbah auksin-sitokinin yang mampu membentuk akar atau tunas
dengan penambahan giberelin maka akar atau tunas tidak akan terbentuk.
xxxv
Universitas Sumatera Utara
Berdasarkan hasil penelitian diketahui bahwa GA3 belum memberikan
pengaruh yang nyata terhadap pembentukan tunas. Hal ini dapat disebabkan oleh
respon pertumbuhan dan perkembangan eksplan yang sama akibat pemberian
GA3. GA3 merupakan zat pengatur tumbuh yang berfungsi dalam pembelahan sel
dan pematahan dormansi eksplan dengan cara perendaman sehingga mata tunas
yang mengalami dormansi dapat tumbuh dan berkembang untuk membentuk
tunas baru yang seterusnya akan mengalami pembelahan dan pemanjangan sel.
Hal ini didukung oleh penelitian Seneviratna dan Wijesekera (1997) yang
menyatakan bahwa jumlah tunas tertinggi pada tanaman karet terdapat pada
konsentrasi 2,5 dan 12,5 ppm GA3 yang dikombinasikan dengan 25 ppm 2ip.
Sedangkan untuk panjang tunas tertinggi terdapat pada 0,5 dan 2,5 ppm GA3.
Menurut George dan Sherrington (1984) penambahan GA3 pada media in vitro
bersama auksin dan sitokinin meningkatkan morfogenesis.
Jumlah daun dan jumlah terbentuk bakal daun pada penelitian juga belum
berpengaruh nyata untuk perendaman GA3. Hal ini dapat dikarenakan GA3
memberikan respon yang sama terhadap eksplan yaitu mendorong pembelahan sel
untuk membentuk daun.Menurut
Hooley (1994) menyatakan bahwa dengan
meningkatkan aktivitas pemanjangan dan pembesaran sel, giberelin dapat
berfungsi untuk meningkatkan pemanjangan batang dan pertumbuhan daun-daun
muda. Hasil penelitian Lawalata (2013) menyatakan bahwa perlakuan GA3
4 mg/l dan 6 mg/l menunjukkan jumlah daun tertinggi. Pemberian GA3 4 mg/l
sampai dengan 10 mg/l dapat meningkatkan jumlah daun total gloxinia pada 2
MST, sebaliknya pada 6 MST hingga 14 MST peningkatan konsentrasi GA3
xxxvi
Universitas Sumatera Utara
menyebabkan penurunan jumlah daun total. Jumlah daun total tertinggi diperoleh
dari perlakuan GA3 6 mg/l.
Pengaruh Interaksi Lama Penyinaran dan GA3 terhadap Induksi Tunas
Mikro Tanaman Karet
Dari hasil analisis data secara statistik diperoleh bahwa interaksi lama
penyinaran dan GA3 belum memberikan pengaruh yang nyata terhadap semua
peubah amatan. Hal ni diduga kerja hormon GA3 terhambat oleh adanya cahaya.
Penghambatan ini diduga karena adanya peningkatan inhibitor zat pengatur
tumbuh GA3 yang terdapat dalam eksplan itu sendiri sehingga menyebabkan
pertumbuhan eksplan tidak optimal. Hal ini juga didukung oleh pernyataan
Widyastuti(2002) yang menyatakan bahwa penyinaran dalam kultur in vitro oleh
beberapa peneliti dianggap tidak perlu karena sudah diberikan karbohidrat sebagai
sumber energi kedalam medium. Tetapi dari hasil pengamatan beberapa peneliti
dilaporkan bahwa kultur yang diinkubasikan dalam gelap morfogenesisnya
terhambat, meskipun telah diberi karbohidrat. Demikian juga dengan kultur yang
diberi udara tanpa CO2 atau diberi senyawa kimia penghambat fotosintesis maka
morfogenesis akan terhambat.
Berdasarkan hasil analisis data diketahui bahwa interaksi GA3 dan lama
penyinaran belum berpengaruh nyata terhadap terbentuknya tunas tetapi secara
visual menunjukkan pertumbuhan dan perkembangan eksplan yang baik yaitu
dengan munculnya tunas. Munculnya tunas terdapat pada hampir semua
perlakuan. Menurut penelitian Hoesen (2009), pembentukan tunas dari sisik umbi
yang diberi perlakuan perendaman GA3 10 mg/l selama 16 jam, pada minggu
pertama setelah tanam, tampak 90% sisik umbi Lilium speciosum membentuk
bakal tunas di bagian pangkal sisik.
xxxvii
Universitas Sumatera Utara
Berdasarkan hasil penelitian yang diperoleh memperlihatkan bahwa dalam
induksi tunas mikro tanaman karet, tidak ada kalus yang terbentuk. Hal ini
menunjukkan bahwa perlakuan lama penyinaran dan GA3 tidak mendorong
pembentukan kalus. Hal ini didukung oleh Wattimena et al. (1992) yang
menyatakan bahwa penghambatan pertumbuhan kalus dan pembelahan sel juga
dilaporkan disebabkan oleh intensitas cahaya yang tinggi, pertumbuhan kalus juga
terhambat pada medium dengan 0,1 mg/l giberelin.
Hasil penelitian yang dilakukan bahwa dalam induksi tunas mikro
tanaman karet, sehingga tidak ada peubah amatan warna kalus. Hal ini disebabkan
oleh penambahan zat pengatur tumbuh yang dapat menghambat pembentukan
kalus serta lama penyinaran yang tak sesuai sehingga kalus tidak terbentuk seperti
yang diharapkan. Hal ini didukung oleh Wattimena et al. (1992) yang menyatakan
bahwa dari pengujian yang dilakukan ditemukan bahwa kemampuan jaringan
membentuk kalus dan laju pertumbuhan kalus tergantung pada medium, zat
pengatur tumbuh yang digunakan dan faktor lingkungan lainnya