Aktivitas antiproliferasi ekstrak etanol temulawak (Curcuma xanthorrhiza.Roxb) pada sel lestari tumor YAC-1 dan Hela secara In vitro
AKTIFITAS ANTIPROLIFERASI EKSTRAK ETANOL
TEMULAWAK (Curcuma xanthorrhiza Roxb.) PADA SEL
LESTARI TUMOR YAC-1 DAN HeLa SECARA IN VITRO
ESTHER JULIANA STEPHANI
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2009
PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN SUMBER INFORMASI
Saya menyatakan bahwa skripsi dengan judul “Aktivitas Antiproliferasi
Ekstrak Etanol Temulawak (Curcuma xanthorriza Roxb.) Pada Sel Lestari
Tumor YAC-1 dan HeLa Secara In Vitro” adalah karya sendiri dan belum
diajukan dalam bentuk apapun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber
informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak
diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam
daftar pustaka di bagian akhir skripsi.
Bogor, September 2009
Esther Juliana Stephani
NIM B04051158
ABSTRACT
ESTHER JULIANA STEPHANI. The Activity of Temulawak (Curcuma
xanthorriza Roxb.) Ethanol Extract on Antiproliferation of YAC-1 and HeLa
Cell Lines In Vitro. Under direction by BAMBANG PONTJO
PRIOSOERYANTO.
The aim of this research is to observed the antiproliferation activity of
temulawak (Curcuma xanthoriza Roxb.) 70% ethanol extract on YAC-1
(lymphoma in mouse) and HeLa (cancer in human cervix) cell lines in vitro. Cells
were cultivated in tissue culture plate in 3 replicates. The concentrations of
extract were 0 (negative control), 15, 30, 45, 60 and 75 ppm. After 4 days
incubation at 370C 5% CO2, cells were harvested and total cells were counted
using a haemocytometer Neubauer with Trypan blue dye. The results showed that
temulawak ethanol-70% extract had an antiproliferation activities on YAC-1 and
HeLa cell lines. The best result was achieved at the dose of 75 ppm with
antiproliferation activity reached for 70% on YAC-1 cell line and 37.41% on
HeLa cell line. We concluded that temulawak ethanol extract has a potential as an
antitumor agent.
Keywords : Curcuma xanthorriza, extract, antiproliferation, YAC-1, HeLa, in
vitro
ABSTRAK
ESTHER JULIANA STEPHANI. Aktivitas Antiproliferasi Ekstrak Etanol
Temulawak (Curcuma xanthorrhiza.Roxb) Pada Sel Lestari Tumor YAC-1
dan HeLa Secara In Vitro. Di bawah bimbingan BAMBANG PONTJO
PRIOSOERYANTO.
Penelitian ini bertujuan untuk menguji adanya aktivitas ekstrak etanol70% temulawak (Curcuma xanthoriza Roxb.) dalam penghambatan proliferasi sel
lestari tumor YAC-1 dan HeLa secara in vitro. Penelitian dilakukan dengan
menanam sel lestari tumor YAC-1 (tumor limfoma mencit) dan Hela (sel kanker
serviks manusia) pada tissue culture plate sebanyak 3 kali ulangan. Konsentrasi
ekstrak yang digunakan adalah 0 (kontrol negatif), 15, 30, 45, 60 dan 75 ppm.
Pemanenan dilakukan setelah 4 hari diinkubasi pada 370C 5% C02 dan
penghitungan sel dilakukan dengan pewarnaan Trypan blue pada hemositometer
Neubauer. Hasil penelitian menunjukan adanya aktivitas antiproliferasi ekstrak
etanol temulawak pada kedua sel lestari tumor. Konsentrasi ekstrak yang
memberikan hasil paling baik pada sel tumor YAC-1 adalah 75 ppm dengan
aktivitas antiproliferasi sebesar 70%. Pada sel tumor HeLa, konsentrasi ekstrak
etanol temulawak yang memberikan hasil paling baik adalah 75 ppm dengan
aktivitas antiproliferasi sebesar 37.41%. Hasil tersebut menunjukkan potensi
temulawak sebagai tanaman yang memiliki aktivitas sebagai antitumor.
Kata kunci : temulawak, ekstrak, antiproliferasi, YAC-1, HeLa, in vitro
AKTIVITAS ANTIPROLIFERASI EKSTRAK ETANOL
TEMULAWAK (Curcuma xanthorriza Roxb.) PADA SEL
LESTARI TUMOR YAC-1 DAN HeLa SECARA IN VITRO
ESTHER JULIANA STEPHANI
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Kedokteran Hewan pada
Fakultas Kedokteran Hewan
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2009
Judul
Nama
NRP
: Aktivitas Antiproliferasi Ekstrak Etanol Temulawak (Curcuma
xanthorriza Roxb.) Pada Sel Lestari Tumor YAC-1 dan HeLa
Secara In Vitro
: Esther Juliana Stephani
: B04051158
Menyetujui
Drh. Bambang P.Priosoeryanto, MS Ph.D
NIP : 19600228 198601 1 001
Mengetahui
Wakil Dekan
Fakultas Kedokteran Hewan
Dr. Nastiti Kusumorini
NIP. 19621205 198703 2 001
Tanggal lulus :
KATA PENGANTAR
Puji syukur kepada Tuhan Yesus Kristus atas berkatNya sehingga penulis
telah menyelesaikan tugas akhir dengan baik. Penelitian ini berjudul ”Aktivitas
Antiproliferasi Ekstrak Etanol Temulawak (Curcuma xanthorriza Roxb.) pada Sel
Lestari Tumor YAC-1 dan HeLa secara in vitro”. Penyelesaian penelitian dan
penulisan skripsi ini tidak lepas dari dukungan dan bantuan banyak pihak. Penulis
ucapkan terimakasih kepada kedua orang tua tercinta, Bapak Januar dan Ibu
Syenny, yang telah memberikan dukungan baik moril maupun materiil. Selain itu
penulis mengucapkan terimakasih kepada:
1. Drh. Bambang Pontjo Priosoeryanto, MS, Ph.D selaku dosen pembimbing
yang telah memberikan bimbingan dan pengarahan kepada penulis.
2. Dr. drh. Upik Kesumawati Hadi, MS sebagai pembimbing akademik.
3. Seluruh staf pengajar Fakultas Kedokteran Hewan IPB.
4. Seluruh staf pengajar dan karyawan Bagian Patologi dan Farmasi, Departemen
Klinik, Reproduksi dan Patologi FKH IPB.
5. Keluarga besar di Jakarta, Manado, Medan dan Belanda atas doa dan
dukungannya.
6.
Bachtiar “slebor” Yulianto atas perhatian, kasih sayang serta dukungan baik
moril maupun materiil.
7. Teman seperjuangan penelitian, Apid, Listia, Cha-cha, Lince, Ajeng, Dine,
Maryam, Reni, Dimas atas dukungannya terhadap penelitian penulis.
8. Teman angkatan Goblet 42, Lissa, Ronald, Muning, Hage, Iga, Mencit, Afu,
Angga, Cipie, Firda, Mieke, Reky serta teman-teman lainnya yang telah
banyak mendoakan dan membantu dalam menyelesaikan skripsi ini.
9. Teman satu kost, Inggie, Novi, Bagus dan Dika.
Penulis berharap semoga tulisan ini dapat bermanfaat di kemudian hari bagi
pihak-pihak yang membutuhkan.
Bogor, September 2009
Esther Juliana Stephani
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di kota Jakarta pada tanggal 25 Juli 1987. Penulis
merupakan anak tunggal dari pasangan Bapak Januar W. Silitonga dan Ibu
Syenny Soemyarsono.
Pada umur 5 tahun, penulis memasuki jenjang Taman Kanak-kanak
Martha, Bekasi. Tahun 1999 penulis lulus dari SDK Pamardi Yuwana Bhakti,
Bekasi, kemudian pada tahun 2002 penulis lulus dari SLTPK Pamardi Yuwana
Bhakti, Bekasi. Di kota yang berbeda, selanjutnya penulis melanjutkan studi di
SMUK 7 BPK PENABUR JAKARTA dan lulus tahun 2005. Tahun 2005 penulis
diterima sebagai mahasiswa program sarjana di Institut Pertanian Bogor melalui
jalur Seleksi Penerimaan Mahasiswa Baru (SPMB). Setahun kemudian penulis
masuk ke Fakultas Kedokteran Hewan IPB setelah melalui seleksi Tingkat
Persiapan Bersama.
Tahun 2005-2006 penulis bergabung dalam anggota komisi pelayanan
anak Persekutuan Mahasiswa Kristen (PMK) IPB. Tahun 2006-2007 penulis
bergabung sebagai anggota Himpunan Profesi Hewan Kesayangan dan Satwa
Akuatik (HKSA) IPB. Pada tahun 2007-2008 penulis merupakan anggota divisi
pendidikan Himpro HKSA FKH IPB. Selain itu penulis juga aktif pada berbagai
kegiatan dan kepanitiaan yang diselenggarakan oleh berbagai organisasi di IPB.
DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR ISI.................................................................................................... iii
DAFTAR TABEL............................................................................................ iv
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... v
PENDAHULUAN
Latar Belakang........................................................................................ 1
Tujuan Penelitian.................................................................................... 2
Manfaat Penelitian.................................................................................. 3
TINJAUAN PUSTAKA
Tumor .....................................................................................................
Etimologi Tumor ....................................................................................
Penggolongan Tumor .............................................................................
Pengobatan Tumor..................................................................................
Sel Lestari Tumor ...................................................................................
Sel Lestari Tumor YAC – 1 ..........................................................
Sel Lestari tumor HeLa .................................................................
Kultur Jaringan .......................................................................................
Tanaman Temulawak .............................................................................
Klasifikasi .....................................................................................
Deskripsi .......................................................................................
Manfaat .........................................................................................
Komposisi .....................................................................................
4
4
5
7
7
7
8
8
9
10
10
11
12
MATERI DAN METODE
Lokasi dan Waktu...................................................................................
Bahan dan Alat .......................................................................................
Metodologi .............................................................................................
Persiapan Media dan Penanaman Sel............................................
Pemanenan dan Penghitungan Sel ................................................
Analisis Data ..........................................................................................
14
14
14
14
15
16
HASIL DAN PEMBAHASAN
Aktifitas Antiproliferasi Pada Sel Lestari Tumor YAC-1 ......................
Aktifitas Antiproliferasi Pada Sel Lestari Tumor HeLa.........................
Perbandingan Aktifitas Antiproliferasi pada Sel Lestari Tumor
YAC-1 dan HeLa....................................................................................
Mekanisme Penghambatan Sel Tumor oleh Ekstrak Etanol
Temulawak .............................................................................................
17
18
19
19
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan............................................................................................. 23
Saran ....................................................................................................... 23
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 24
LAMPIRAN..................................................................................................... 28
DAFTAR TABEL
Halaman
1 Perbedaan tumor jinak dan ganas ................................................................. 6
2 Klasifikasi tumor........................................................................................... 6
3 Komposisi rimpang temulawak .................................................................... 12
4 Komposisi pati temulawak............................................................................ 13
DAFTAR GAMBAR
Halaman
1 Tanaman Temulawak.................................................................................... 10
2 Sel Tumor...................................................................................................... 16
3 Presentase sel tumor YAC-1 pada berbagai konsentrasi ekstrak etanol
Temulawak.................................................................................................... 17
4 Presentase sel tumor HeLa pada berbagai konsentrasi ekstrak etanol
Temulawak.................................................................................................... 18
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
1 Hasil analisis ragam jumlah sel tumor YAC-1 pada berbagai konsentrasi
Ekstrak etanol temulawak .............................................................................. 28
2 Hasil analisis ragam jumlah sel tumor HeLa pada berbagai konsentrasi
Ekstrak etanol temulawak .............................................................................. 28
3 Uji ANOVA dan uji Duncan (P
TEMULAWAK (Curcuma xanthorrhiza Roxb.) PADA SEL
LESTARI TUMOR YAC-1 DAN HeLa SECARA IN VITRO
ESTHER JULIANA STEPHANI
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2009
PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN SUMBER INFORMASI
Saya menyatakan bahwa skripsi dengan judul “Aktivitas Antiproliferasi
Ekstrak Etanol Temulawak (Curcuma xanthorriza Roxb.) Pada Sel Lestari
Tumor YAC-1 dan HeLa Secara In Vitro” adalah karya sendiri dan belum
diajukan dalam bentuk apapun kepada perguruan tinggi manapun. Sumber
informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak
diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam
daftar pustaka di bagian akhir skripsi.
Bogor, September 2009
Esther Juliana Stephani
NIM B04051158
ABSTRACT
ESTHER JULIANA STEPHANI. The Activity of Temulawak (Curcuma
xanthorriza Roxb.) Ethanol Extract on Antiproliferation of YAC-1 and HeLa
Cell Lines In Vitro. Under direction by BAMBANG PONTJO
PRIOSOERYANTO.
The aim of this research is to observed the antiproliferation activity of
temulawak (Curcuma xanthoriza Roxb.) 70% ethanol extract on YAC-1
(lymphoma in mouse) and HeLa (cancer in human cervix) cell lines in vitro. Cells
were cultivated in tissue culture plate in 3 replicates. The concentrations of
extract were 0 (negative control), 15, 30, 45, 60 and 75 ppm. After 4 days
incubation at 370C 5% CO2, cells were harvested and total cells were counted
using a haemocytometer Neubauer with Trypan blue dye. The results showed that
temulawak ethanol-70% extract had an antiproliferation activities on YAC-1 and
HeLa cell lines. The best result was achieved at the dose of 75 ppm with
antiproliferation activity reached for 70% on YAC-1 cell line and 37.41% on
HeLa cell line. We concluded that temulawak ethanol extract has a potential as an
antitumor agent.
Keywords : Curcuma xanthorriza, extract, antiproliferation, YAC-1, HeLa, in
vitro
ABSTRAK
ESTHER JULIANA STEPHANI. Aktivitas Antiproliferasi Ekstrak Etanol
Temulawak (Curcuma xanthorrhiza.Roxb) Pada Sel Lestari Tumor YAC-1
dan HeLa Secara In Vitro. Di bawah bimbingan BAMBANG PONTJO
PRIOSOERYANTO.
Penelitian ini bertujuan untuk menguji adanya aktivitas ekstrak etanol70% temulawak (Curcuma xanthoriza Roxb.) dalam penghambatan proliferasi sel
lestari tumor YAC-1 dan HeLa secara in vitro. Penelitian dilakukan dengan
menanam sel lestari tumor YAC-1 (tumor limfoma mencit) dan Hela (sel kanker
serviks manusia) pada tissue culture plate sebanyak 3 kali ulangan. Konsentrasi
ekstrak yang digunakan adalah 0 (kontrol negatif), 15, 30, 45, 60 dan 75 ppm.
Pemanenan dilakukan setelah 4 hari diinkubasi pada 370C 5% C02 dan
penghitungan sel dilakukan dengan pewarnaan Trypan blue pada hemositometer
Neubauer. Hasil penelitian menunjukan adanya aktivitas antiproliferasi ekstrak
etanol temulawak pada kedua sel lestari tumor. Konsentrasi ekstrak yang
memberikan hasil paling baik pada sel tumor YAC-1 adalah 75 ppm dengan
aktivitas antiproliferasi sebesar 70%. Pada sel tumor HeLa, konsentrasi ekstrak
etanol temulawak yang memberikan hasil paling baik adalah 75 ppm dengan
aktivitas antiproliferasi sebesar 37.41%. Hasil tersebut menunjukkan potensi
temulawak sebagai tanaman yang memiliki aktivitas sebagai antitumor.
Kata kunci : temulawak, ekstrak, antiproliferasi, YAC-1, HeLa, in vitro
AKTIVITAS ANTIPROLIFERASI EKSTRAK ETANOL
TEMULAWAK (Curcuma xanthorriza Roxb.) PADA SEL
LESTARI TUMOR YAC-1 DAN HeLa SECARA IN VITRO
ESTHER JULIANA STEPHANI
Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Kedokteran Hewan pada
Fakultas Kedokteran Hewan
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2009
Judul
Nama
NRP
: Aktivitas Antiproliferasi Ekstrak Etanol Temulawak (Curcuma
xanthorriza Roxb.) Pada Sel Lestari Tumor YAC-1 dan HeLa
Secara In Vitro
: Esther Juliana Stephani
: B04051158
Menyetujui
Drh. Bambang P.Priosoeryanto, MS Ph.D
NIP : 19600228 198601 1 001
Mengetahui
Wakil Dekan
Fakultas Kedokteran Hewan
Dr. Nastiti Kusumorini
NIP. 19621205 198703 2 001
Tanggal lulus :
KATA PENGANTAR
Puji syukur kepada Tuhan Yesus Kristus atas berkatNya sehingga penulis
telah menyelesaikan tugas akhir dengan baik. Penelitian ini berjudul ”Aktivitas
Antiproliferasi Ekstrak Etanol Temulawak (Curcuma xanthorriza Roxb.) pada Sel
Lestari Tumor YAC-1 dan HeLa secara in vitro”. Penyelesaian penelitian dan
penulisan skripsi ini tidak lepas dari dukungan dan bantuan banyak pihak. Penulis
ucapkan terimakasih kepada kedua orang tua tercinta, Bapak Januar dan Ibu
Syenny, yang telah memberikan dukungan baik moril maupun materiil. Selain itu
penulis mengucapkan terimakasih kepada:
1. Drh. Bambang Pontjo Priosoeryanto, MS, Ph.D selaku dosen pembimbing
yang telah memberikan bimbingan dan pengarahan kepada penulis.
2. Dr. drh. Upik Kesumawati Hadi, MS sebagai pembimbing akademik.
3. Seluruh staf pengajar Fakultas Kedokteran Hewan IPB.
4. Seluruh staf pengajar dan karyawan Bagian Patologi dan Farmasi, Departemen
Klinik, Reproduksi dan Patologi FKH IPB.
5. Keluarga besar di Jakarta, Manado, Medan dan Belanda atas doa dan
dukungannya.
6.
Bachtiar “slebor” Yulianto atas perhatian, kasih sayang serta dukungan baik
moril maupun materiil.
7. Teman seperjuangan penelitian, Apid, Listia, Cha-cha, Lince, Ajeng, Dine,
Maryam, Reni, Dimas atas dukungannya terhadap penelitian penulis.
8. Teman angkatan Goblet 42, Lissa, Ronald, Muning, Hage, Iga, Mencit, Afu,
Angga, Cipie, Firda, Mieke, Reky serta teman-teman lainnya yang telah
banyak mendoakan dan membantu dalam menyelesaikan skripsi ini.
9. Teman satu kost, Inggie, Novi, Bagus dan Dika.
Penulis berharap semoga tulisan ini dapat bermanfaat di kemudian hari bagi
pihak-pihak yang membutuhkan.
Bogor, September 2009
Esther Juliana Stephani
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di kota Jakarta pada tanggal 25 Juli 1987. Penulis
merupakan anak tunggal dari pasangan Bapak Januar W. Silitonga dan Ibu
Syenny Soemyarsono.
Pada umur 5 tahun, penulis memasuki jenjang Taman Kanak-kanak
Martha, Bekasi. Tahun 1999 penulis lulus dari SDK Pamardi Yuwana Bhakti,
Bekasi, kemudian pada tahun 2002 penulis lulus dari SLTPK Pamardi Yuwana
Bhakti, Bekasi. Di kota yang berbeda, selanjutnya penulis melanjutkan studi di
SMUK 7 BPK PENABUR JAKARTA dan lulus tahun 2005. Tahun 2005 penulis
diterima sebagai mahasiswa program sarjana di Institut Pertanian Bogor melalui
jalur Seleksi Penerimaan Mahasiswa Baru (SPMB). Setahun kemudian penulis
masuk ke Fakultas Kedokteran Hewan IPB setelah melalui seleksi Tingkat
Persiapan Bersama.
Tahun 2005-2006 penulis bergabung dalam anggota komisi pelayanan
anak Persekutuan Mahasiswa Kristen (PMK) IPB. Tahun 2006-2007 penulis
bergabung sebagai anggota Himpunan Profesi Hewan Kesayangan dan Satwa
Akuatik (HKSA) IPB. Pada tahun 2007-2008 penulis merupakan anggota divisi
pendidikan Himpro HKSA FKH IPB. Selain itu penulis juga aktif pada berbagai
kegiatan dan kepanitiaan yang diselenggarakan oleh berbagai organisasi di IPB.
DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR ISI.................................................................................................... iii
DAFTAR TABEL............................................................................................ iv
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... v
PENDAHULUAN
Latar Belakang........................................................................................ 1
Tujuan Penelitian.................................................................................... 2
Manfaat Penelitian.................................................................................. 3
TINJAUAN PUSTAKA
Tumor .....................................................................................................
Etimologi Tumor ....................................................................................
Penggolongan Tumor .............................................................................
Pengobatan Tumor..................................................................................
Sel Lestari Tumor ...................................................................................
Sel Lestari Tumor YAC – 1 ..........................................................
Sel Lestari tumor HeLa .................................................................
Kultur Jaringan .......................................................................................
Tanaman Temulawak .............................................................................
Klasifikasi .....................................................................................
Deskripsi .......................................................................................
Manfaat .........................................................................................
Komposisi .....................................................................................
4
4
5
7
7
7
8
8
9
10
10
11
12
MATERI DAN METODE
Lokasi dan Waktu...................................................................................
Bahan dan Alat .......................................................................................
Metodologi .............................................................................................
Persiapan Media dan Penanaman Sel............................................
Pemanenan dan Penghitungan Sel ................................................
Analisis Data ..........................................................................................
14
14
14
14
15
16
HASIL DAN PEMBAHASAN
Aktifitas Antiproliferasi Pada Sel Lestari Tumor YAC-1 ......................
Aktifitas Antiproliferasi Pada Sel Lestari Tumor HeLa.........................
Perbandingan Aktifitas Antiproliferasi pada Sel Lestari Tumor
YAC-1 dan HeLa....................................................................................
Mekanisme Penghambatan Sel Tumor oleh Ekstrak Etanol
Temulawak .............................................................................................
17
18
19
19
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan............................................................................................. 23
Saran ....................................................................................................... 23
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................... 24
LAMPIRAN..................................................................................................... 28
DAFTAR TABEL
Halaman
1 Perbedaan tumor jinak dan ganas ................................................................. 6
2 Klasifikasi tumor........................................................................................... 6
3 Komposisi rimpang temulawak .................................................................... 12
4 Komposisi pati temulawak............................................................................ 13
DAFTAR GAMBAR
Halaman
1 Tanaman Temulawak.................................................................................... 10
2 Sel Tumor...................................................................................................... 16
3 Presentase sel tumor YAC-1 pada berbagai konsentrasi ekstrak etanol
Temulawak.................................................................................................... 17
4 Presentase sel tumor HeLa pada berbagai konsentrasi ekstrak etanol
Temulawak.................................................................................................... 18
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
1 Hasil analisis ragam jumlah sel tumor YAC-1 pada berbagai konsentrasi
Ekstrak etanol temulawak .............................................................................. 28
2 Hasil analisis ragam jumlah sel tumor HeLa pada berbagai konsentrasi
Ekstrak etanol temulawak .............................................................................. 28
3 Uji ANOVA dan uji Duncan (P