© 2003 Digit ized by USU digit al libr ar y
5
Gbr . 3. Aspir at ber upa m assa nek r ot ik t api t anpa ber cak- ber cak .
Aspir at k e du a in i dik u lt u r den gan m en ggu n ak an m ediu m Ku doh 20 m odifikasi m edium Ogaw a oleh Kudoh .
Penilaian t er hadap sediaan - sediaan ini dilak uk an oleh t enaga pet ugas Lab. Kesehat an Da Medan.
5 . PEM ERI KSAAN KU LTU R
A. M ETOD E
Met ode pem er ik saan k ult ur ber pedom an pada buk u Minim um essent ial of labor at or y pr ocedur e for t uber culosis cont r ol y ang dik eluar k an oleh Japan
I nt er nat ional Cooper at ion Agency t he Resear ch I nst it ut e of Tuber culosis, Japan Ant i Tuber culosis Associat ion, 1987.
B. TEH N I K
1 . PERSED I AAN M ED I A
Sebelum dilak uk an k ult ur t er lebih dahulu per lu diper siapk an m edia Ogaw a dalam t abung dan disim pan di dalam lem ar i es.
2 . PEN GOLAH AN BAH AN PEM ERI KSAAN
Pada w ak t u pengolahan bahan y ang diper iksa, t er lebih dahulu t ehnik st er ilisasi har us dilak uk an selam a pr osedur ber langsung, unt uk m encegah
pencem ar an sediaan dan j uga infek si pada m anusia. Jangan m em buat aer osol dengan car a pipet at au m em om pa sediaan, sediaan diaduk
dengan hat i- hat i unt uk m encampur lar ut an. Let ak an t abung k ult ur , t ut up t abung, t ut up w adah aspir at at au pipet - pipet dit em pat t er t ent u.
3 . BAH AN D AN ALAT U N TU K PEN GOLAH AN ASPI RAT
3.1. NaOH 4
Bahan t am bahan aspir at agar aspir at j adi hom ogen ser t a m em bunuh m ik r oor ganism e y ang t idak diingini.
3.2. Rak Tabung
3.3. Pipet 1 m l
Unt uk m elet ak k an bahan pem er ik saan y ang sudah diolah pada t abung y ang ber isi m edia Ogaw a 3
3.4. I nk ubat or 37
o
C Tem pat unt uk m elar ut k an bahan pem er ik saan dan t em pat
peny im panan pem benihan y ang sudah dit anam .
4 . I N OKU LASI
Sebelum inok ulasi aspir at dilak uk an, t er lebih dahulu diper siapk an : 4.1.
Pipet 1 m l Unt uk inok ulasi aspir at y ang t elah diolah k edalam t abung ber isi
m edia Ogawa 3 . 4.2.
Media Ogaw a
© 2003 Digit ized by USU digit al libr ar y
6
Media t idak boleh t er k en a pen cem ar an . Gu n ak an lah du a t abu n g m edia Ogaw a ser t a m asing- m asing dit ulis nam a pasien ser t a t anggal
pem er ik saan. 4.3.
Peny angga Mir ing Unt uk m elet ak an t abung inok ulasi dalam k eadaan posisi m ir ing,
sehingga lar ut an inok ulasi m eny ebar r at a pada per m uk aan m edia. 4.4.
Pengolahan Sediaan Aspir at 4.4.1.
Per lu diper hat ik an k onsent r asi NaOH 4 t idak t er lalu t inggi, sebab pada k onsum si NaOH y ang t inggi ak an m engham bat
per t um buhan k um an- kum an BTA. 4.4.2.
Tam bahk an lebih k ur ang 4 v ol. NaOH 4 k edalam aspir at . Tabung aspir at dilet ak an dalam ink ubat or 37
o
C selam a 15 m enit unt uk m elar ut k an sediaan aspir at , kem u dian dik elu ar k an
diaduk isi t abung per lahan- lah an den gan pipet . 4.4.3.
Sebelum dilak uk an inok ulasi aspir at , lebih dahulu diper ik sa k ondensat pada m edia dim ana t idak boleh lebih dar i 0,1 m l
unt uk m enj aga kenet ralan m edia. 4.4.4.
Lar ut an k ondensat y ang t elah diper ik sa k em udian diam bil sediaan aspir at y ang t elah diolah dengan pipet 0,1 m l dan
dim asuk an 4.4.5.
k edalam dat a t abung k ult ur y ang ber isi m edia Ogaw a 3 dalam k eadaan m er at a pada per m uk aan m edia, k em udian
t abung t er sebut dilet ak an pada r ak m ir ing dengan t ut up y ang dik en dor k an .
5 . I N KU BASI
Set elah sediaan ink ubasi k er ing dan m eny ebar r at a pada per m uk aan m edia t ut up t abung dik encangk an k em bali unt uk m encegah penguapan
m edia. Kem udian t abung y ang t elah ber isi sediaan aspir at dilet ak an dalam inkubat or 37
o
C dengan t ut up r a pat . Wak t u ink ubasi sek ur ang- kurangnya 4 m inggu.
6 . PEN GAM AT AN PEM BACAAN
Pada um um ny a per t um buhan y ang k has dar i M. Tuber k ulosis ak an t am pak dalam 3 – 4 m inggu k oloniny a ber w ar na k uning, per m uk aanny a
k er ing dan r apuh dengan sudut - sudut y ang t idak r at a per t um buhan eugonik .
Pengam at an k ult ur dim ulai pada har i k e t uj uh unt uk per t um buhan cepat dan m inggu k eem pat bagi per t um buhan y ang lam bat .
Per t um buhan k oloni diper ik sa dan dihit ung. Jik a t er lihat adany a k oloni pada set iap pem ben ih an pada h ar i k e t u j u h at au pada m inggu k eem pat ,
k em udian dilak uk an t es Niacin. Bila dalam w ak t u em pat m in ggu k olon i t idak t u m bu h dilan j u t k an
sam pai delapan m inggu, j ik a k oloni t idak t um buh j uga, dianggap k ult ur n egat if.
7 . PEN CATATAN D AN PELAPORAN H ASI L PERTU M BU H AN KOLON I
BTA Tingkat per t um buhan k oloni BTA ber dasar k an pada k r it er ia :
- Tidak ada per t um buhan k oloni
1+ 1 – 200 k oloni
2+ 200 – 500 k oloni at au ½ dar i m edia t er t ut up dengan k olon i
3+ 500 – 2000 k oloni at au ¾ dar i m edia t er t ut up dengan k oloni
4+ Media t er t ut up selur uhny a dengan k oloni.
© 2003 Digit ized by USU digit al libr ar y
7
Per t um buhan k oloni t er lihat pada gam bar 4 dengan t ingk at per t um buhan I sam pai I V.
Gbr . 4. Tingk at per t um buhan basil dar i t ingk at I sam pai I V padda k ult ur yang ber isi m edia Ogaw a 3 .
7 . I D EN TI FI KASI JEN I S BASI L
Ber hubung k arena pem er ik saan k ult ur biak an hany a dapat m em ast ik an k um an BTA saj a dan belum dapat m em ast ik an M. t uber k ulosis m ak a unt uk
ident ifik asi basil dilak uk an t es Niacin. Tes Niacin posit if bila t es m em ber ik an w ar na k uning dan negat if bila t idak ber w ar na.
Car a m elak uk an t es Niacin y ait u : -
Tuangk an 2 m l air m endidih pada k ult ur y ang per t um buhanny a t elah cuk up lebih dar i 100 k oloni .
- Biar k an t abung r eak si pada posisi m ir ing selam a 10 m enit .
- Sediak an 2 t abung r eak si dan m asing- m asing diisi oleh 0,2 m l dengan
cair an e k st r ak y an g ber ben t u k t adi k em u dian t am bah k an 0 , 1 m l An ilin e - Et anol 4 pada k edua t abung t er sebut .
- Pada salah sat u t abung t am bahk an 0 , 1 m l Cy anogen Br om ide 1 0 , lalu
cam pur pelan- pelan, bila t er lihat w ar na k uning em as ber ar t i r eak si t es Niacin posit if Adany a M. Tuber k ulosis
- Tabung lain sebagai k ont r ol.
8 . PEN CATATAN D ATA
Selu r u h dat a- dat a pem er ik saan dar i t iap pender it a di cat at dalam t abel lam pir an 1
9 . PEN GO LAH AN BAH AN PEM ERI KSAAN
Kult ur dibaca pada m inggu per t am a, k eem pat , k eenam dan delapan sesudah inok ulasi. Aspir at dik at ak an m engandung k um an bila di j um pai k olom
pada salah sat u dar i sediaan langsung k ult ur m inggu per t am a, k eem pat , k eenam , k edelapan. Dihit ung j um lah sediaan y ang m engandung ber cak dan
t anpa ber cak di silang dengan hasil k ult ur .
18
© 2003 Digit ized by USU digit al libr ar y
8
BAB I V H ASI L PEN ELI TI AN D AN PEM BAH ASAN
