Uji Aktivitas Diuretik Ekstrak Etanol Daun Legundi (Vitex Trifolial.) Pada Tikus Putih Jantan

Lampiran 1. Hasil persetujuan etik penelitian

35
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Hasil identifikasi tumbuhan

36
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Tumbuhan legundi (Vitex trifolia L.)

37
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. Perhitungan pemeriksaan karakteristik ekstrak
Perhitungan Penetapan Kadar Air
i

Kadar air =


x 100%

No

Berat sampel (g)

Volume awal (ml)

Volume akhir (ml)

1

1,014

0,85

0,9

2


1,016

0,95

1

3

1,013

1,1

1,2

a. Berat sampel

= 1,014 g

Volume air


= 0,05 ml

Kadar air

= 0,05 x 100% = 4,93%
1,014

b. Berat sampel = 1,016 g
Volume air

= 0,05 ml

Kadar air

= 0,05 x 100% = 4,92%
1,016

c. Berat sampel = 1,013 g
Volume air


= 0,1 ml

Kadar air

= 0,1 x 100% = 9,87%
1,013

Kadar air rata - rata

= (4,93  4,92  9,87) % = 6,57%
3

38
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Alat Yang Digunakan
Modifikasi alat penampung Urin

Alat AAS


39
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6. Data volume urin (ml), kadar natrium, dan kadar kalium (meq/l) setelah
pemberian ekstrak dan furosemid (pembanding)
Ekstrak Etanol Daun Legundi
No

1

Parameter

Volume urin
(ml)

Rata-rata ± Sd

2

Kadar natrium

(meq/l)

Rata-rata ± Sd

3

Kadar kalium
(meq/l)

Rata-rata ± Sd

Kontrol
CMC Na
1%

1,3
1,4
1,4
1,2
1,2

1,3
1,3 ±
0,09
19,8
55,2
33,5
19
27,3
31,1
31 ± 13,23
8,7
7,5
7,8
11,8
7,1
6,9
8,3 ± 1,83

3,7
4,2

3,8
4,1
3,5
3,7
3,83 ±
0,27

1,9
2,0
2,1
1,9
1,9
1,7
1,91 ±
0,13

inggir
Dosis
100
mg/kg

bb
2,5
3,0
2,9
2,7
3,0
2,6
2,78 ±
0,21

91,2
86,1
93,7
96,2
90,9
100,6
93,12 ±
4,97
25,7
24,9

21,1
20,9
23,6
25,8
23,7 ±
2,21

47
49
43,7
39,2
46,8
42,5
44,7 ±
3,39
13,4
12,4
11,5
13,1
11,1

13,8
12,06 ±
1,08

60
67,5
61,9
64,4
68
68,9
65,12 ±
3,62
15,4
15,6
14,8
17,3
14,4
16,9
15,7 ±
1,15

Furosemid3,6
Dosis 50
mg/kg bb
mg/kg
bb

Dosis
150
mg/kg
bb
3,5
3,3
3,5
3,0
3,2
3,5
3,33 ±
0,19
81,3
85,9
80,8
76,3
77,8
86,7
81,847 ±
4,19
21,8
19,6
18,9
21,4
20,2
22,4
20,7 ±
1,36

40
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7. Tabel konversi dosis antara jenis hewan dengan manusia
(Laurence and Bacharach, 1964)

Mencit

Tikus Marmut

Kelinci

Kera

Anjing Manusia

20 g

200 g

1,2 kg

4 kg

12 kg

1,0

7,0

12,25

27,8

64,1

124,2

387,9

0,14

1,0

1,74

3,9

9,2

17,8

56,0

0,08

0,57

1,0

2,25

5,2

10,2

31,5

0,04

0,25

0,44

1,0

2,4

4,5

14,2

0,016

0,11

0,19

0,42

1,0

1,9

6,1

0,008

0,06

0,10

0,22

0,52

1,0

3,1

0,0026

0,018

0,031

0,07

0,16

0,32

1,0

400 g

70 kg

Mencit
20g
Tikus
200g
Marmut
400 g
Kelinci
1,2 kg
Kera
4 kg
Anjing
12 kg
Manusia
70 kg

41
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8. Contoh perhitungan dosis kontrol CMC Na 1%
-

Pembuatan CMC Na 1 %
= 100 mg/ 100 ml
= 10 mg/ml

-

Perhitungan CMC Na 1 % pada tikus 180 g
= 1 x 180
100

Volume yang diberikan
= 1,8 ml

42
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. Contoh perhitungan dosis furosemid
Dosis penggunaan furosemid pada manusia (berat 70 kg) = 40 mg
Konversi dosis manusia ke hewan tikus = 0,018 (Lampiran 6)
Furosemid yang digunakan = 40 mg untuk tikus 200 g
0,018 x 40 mg = 0,72 mg (untuk 200 g tikus)
Jika 1000 g = 1000 g x 0,72 mg = 3,6 mg/kg bb
200 g

Untuk bb 193 g = 193 g x 3,6 mg/kg bb = 0,695 mg
1000 g

Furosemid yang diberikan = 0,695 mg x 10 ml = 0,174 ml
40 mg

43
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10. Contoh perhitungan dosis dari ekstrak etanol daun legundi
1. Untuk dosis 50 mg/kg bb pada tikus 199 g
= 199 g x 50 kg/mg bb = 9,95 mg
1000 g

Volume yang diberikan
= 9,95 mg x 10 ml = 1,99 ml
50 mg

2. Untuk dosis 100 mg/kg bb pada tikus 196 g
= 196 g x 100 kg/mg bb = 19,6 mg
1000 g

Volume yang diberikan
= 19,6 mg x 10 ml = 1,96 ml
100 mg

3. Untuk dosis 150 mg/kg bb pada tikus 192 g
= 192 g x 150 kg/mg bb = 28,8 mg
1000 g

Volume yang diberikan
= 28,8 mg x 10 ml = 1,92 ml
150 mg

44
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. Hasil pengujian AAS dari volume urin untuk kadar Na+ dan K+
No

Kelompok pengujian

1.

Kontrol CMC-Na 1%

2.

Furosemid dosis 3,6 mg/kg
bb

3.

EEDL dosis 50 mg/kg bb

4.

EEDL dosis 100 mg/kg
bb

5.

EEDL dosis 150 mg/kg
bb

Tikus
1
2
3
4
5
6
1
2
3
4
5
6
1
2
3
4
5
6
1
2
3
4
5
6
1
2
3
4
5
6

Konsentrasi
Na+
0,9101
2,4142
1,5409
0,8752
1,2567
1,4307
4,1958
3,9593
4,3103
4,4242
4,1827
4,6294
2,1624
2,2531
2,0101
1,8042
2,1515
1,9572
2,7599
3,1044
2,8477
2,9615
3,1290
3,1675
3,7382
3,9499
3,7150
3,5105
3,5779
3,9905

K+
3,3824
2,9167
3,0539
4,6102
2,7671
2,6867
10,2157
9,7009
8,2205
8,1593
9,1862
10,0563
5,2255
4,8333
4,4779
5,1127
4,3186
5,3872
6,0196
6,1005
5,7819
6,7328
5,6250
6,5735
8,5123
7,6397
7,3259
8,3553
7,8823
8,7500

45
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. Contoh perhitungan kadar elektrolit (Lanjutan)
Kadar Na =

K

g⁄
S

i

V

xV

x FP

Pembacaan pada AAS = 1,0481 mcg/ml
Kadar Na =

g⁄

,

x

x

= 455,05 mcg/ml

= 0,4550 mg/ml
meq/l =
=

K
,

B

g⁄
g⁄

x 1000 meq
x 1000 meq = 19,78 meq/l

46
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 12. Data kalibrasi natrium dengan AAS, perhitungan persamaan garis
regresi dan koefisien korelasi

No
1
2
3
4
5
6
7

Konsentrasi
(µg/ml)
(X)
0,0000
1,0000
2,0000
3,0000
4,0000
5,0000
6,0000

N0
1
a=
2
∑ − ∑ ∑ /
3
∑ 2− ∑ 2 /
4
5
=
,
−6

7


=

0,1
37
9

X
0,0000
1,0000
2,0000
3,0000
4,0000
, 5,0000
/
2/
6,0000
21
̅ =3

Absorbansi
(Y)
0,0004
0,1458
0,2963
0,4255
0,5732
0,6982
0,8267
Y
0,0004
0,1458
0,2963
0,4255
0,5732
0,6982
0,8267
2,9661

XY
0
0,1458
0,5926
1,2765
2,2928
3,4910
4,9602
12,7589

X2
0,0000
1,0000
4,0000
9,0000
16,0000
25,0000
36,0000
91

Y2
0,00000016
0,2126
0,0878
0,1811
0,3286
0,4875
0,6834
1,790

̅ = 0,4237

Y=aX+b
b=Y-aX
= 0,4237 - (0,1379) . (3)
= 0,4237 - 0,4137
= 0,0100

47
Universitas Sumatera Utara

Persamaan regresi : Y = 0,1379 X + 0,0100
Dengan nilai r sebagai berikut :
r=

=



√ ∑ 2− ∑




= 0,9996

,

− ∑



2/
2/



/

∑ 2− ∑
,

,



,

/

2/ �
2/

48
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 13. Data kalibrasi kalium dengan AAS, perhitungan persamaan garis
regresi dan koefisien korelasi

Konsentrasi
(µg/ml)
(X)
0,0000
2,0000
4,0000
6,0000
8,0000
10,0000

No
1
2
3
4
5
6

N0
1
2
3
4
5
6


a=



=

,



− ∑
2−



= 0,0408





2



/
,

2

X
0,0000
2,0000
4,0000
6,0000
8,0000
10,0000
30

/
/

̅ =5

Absorbansi
(Y)
0,0010
0,0804
0,1538
0,2495
0,3208
0,4089
Y
0,0010
0,0804
0,1538
0,2495
0,3208
0,4089
1,2144

XY
0
0,1608
0,6152
1,4970
2,5664
4,0890
8,9284

X2
0,0000
4,0000
16,0000
36,0000
64,0000
100,0000
220

Y2
0,000001
0,0065
0,0237
0,0623
0,1030
0,1672
0,3625

̅ = 0,2024

/

Y=aX+b
b=Y-aX
= 0,2024 - (0,0408) . (5)
= 0,2024 - 0,204
= -0,0016
Persamaan regresi : Y = 0,0408 X - 0,0016

49
Universitas Sumatera Utara

Dengan nilai r sebagai berikut :
r=

=

√ ∑


2−

= 0,9994






,

− ∑

2/
2/






,

/

2−

,




2/ �

/
,

2/

50
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14. Hasil analisis data SPSS
Hasil perhitungan ANAVA dari volume urin

Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total

Df

Mean Square

25.189

4

6.297

.890

25

.036

26.079

29

F

Sig.

176.887

.000

Hasil perhitungan urin dengan menggunakan perhitungan Tukey

(I) Kelompok

(J) Kelompok

95% Confidence
Interval

Tukey

Kontrol CMC Na 1 %

HSD

Mean

Std.

Difference (I-J)

Error

Furosemid

Sig.

Lower

Upper

Bound

Bound

-2.53333*

.10893

.000

-2.8533

-2.2134

-.61667*

.10893

.000

-.9366

-.2967

-1.48333*

.10893

.000

-1.8033

-1.1634

-2.00000*

.10893

.000

-2.3199

-1.6801

2.53333*

.10893

.000

2.2134

2.8533

1.91667*

.10893

.000

1.5967

2.2366

1.05000*

.10893

.000

.7301

1.3699

.53333*

.10893

.000

.2134

.8533

dosis 3,6
mg/kg bb
EEDL dosis 50
mg/kg bb
EEDL dosis
100 mg/kg bb
EEDL dosis
150 mg/kg bb
Furosemid dosis 3,6

Kontrol CMC

mg/kg bb

Na 1 %
EEDL dosis 50
mg/kg bb
EEDL dosis
100 mg/kg bb
EEDL dosis
150 mg/kg bb

51
Universitas Sumatera Utara

Hasil perhitungan kadar natrium secara ANAVA
Sum of Squares
Between Groups

Mean Square

F

15674.635

4

3918.659

1215.978

25

48.639

16890.614

29

Within Groups
Total

Df

Sig.

80.566

.000

Hasil kadar natrium dari urin dengan menggunakan perhitungan Tukey

(I) Kelompok

(J) Kelompok

Tukey Kontrol CMC Na 1 %

Furosemid

HSD

dosis 3,6

95% Confidence Interval
Mean

Std.

Upper

Difference (I-J)

Error

Sig.

-62.13333*

4.02654

.000

-73.9588

-50.3079

-13.71667*

4.02654

.017

-25.5421

-1.8912

-34.13333*

4.02654

.000

-45.9588

-22.3079

-50.48333*

4.02654

.000

-62.3088

-38.6579

62.13333*

4.02654

.000

50.3079

73.9588

48.41667*

4.02654

.000

36.5912

60.2421

28.00000*

4.02654

.000

16.1746

38.8254

11.65000

4.02654

.055

-1754

23.4754

Lower Bound

Bound

mb/kg bb
EEDL dosis
50 mg/kg bb
EEDL dosis
100 mg/kg bb
EEDL dosis
150 mg/kg bb
Furosemid dosis 3,6

Kontrol CMC

mb/kg bb

Na 1 %
EEDL dosis
50 mg/kg bb
EEDL dosis
100 mg/kg bb
EEDL dosis
150 mg/kg bb

52
Universitas Sumatera Utara

Hasil perhitungan kadar kalium secara ANAVA
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total

Df

Mean Square

913.082

4

228.271

62.827

25

2.513

975.909

29

F

Sig.

90.833

.000

Hasil kadar kalium dari urin dengan menggunakan perhitungan Tukey
(I) Kelompok

(J)

95% Confidence

Kelompok

Interval
Mean Difference
(I-J)

Tukey Kontrol CMC Na 1 %

Furosemid

HSD

dosis 3,6

Std. Error

Sig.

Lower

Upper

Bound

Bound

-15.37167*

.91525

.000

-18. 0597

-12.6837

-4.25500*

.91525

.001

-6.9430

-1.5670

-7.43833*

.91525

.000

-10.1263

-4.7503

-12.42167*

.91525

.000

-15.1097

-9.7337

15.37167*

.91525

.000

12.6837

18.0597

11.11667*

.91525

.000

8.4287

13.8047

7.93333*

.91525

.000

5.2453

10.6213

2.95000*

.91525

.026

.2620

5.6380

mg/kg bb
EEDL dosis
50 mg/kg bb
EEDL dosis
100 mg/kg
bb
EEDL dosis
150 mg/kg
bb
Furosemid dosis 3,6

Kontrol CMC

mg/kg bb

Na 1 %
EEDL dosis
50 mg/kg bb
EEDL dosis
100 mg/kg
bb
EEDL dosis
150 mg/kg
bb

53
Universitas Sumatera Utara