PERENDAMAN INFUSA MENIRAN (Phyllantus niruri) PADA IKAN GURAME (Osphronemus gouramy) YANG DIINFEKSI Vibrio anguillarum TERHADAP KADAR HEMOGLOBIN, PACKED CELL VOLUME DAN JUMLAH ERITROSIT Repository - UNAIR REPOSITORY

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN (Phyllantus niruri)
PADA IKAN GURAME (Osphronemus gouramy) YANG
DIINFEKSI Vibrio anguillarum TERHADAP KADAR
HEMOGLOBIN, PACKED CELL VOLUME DAN
JUMLAH ERITROSIT

Oleh :
MOCH. BASYARUL HAQ
NIM 061111163

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
UNIVERSITAS AIRLANGGA
SURABAYA
2015

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN (Phyllantus niruri) PADA IKAN
GURAME (Osphronemus gouramy) YANG DIINFEKSI Vibrio anguillarum
TERHADAP KADAR HEMOGLOBIN, PACKED CELL VOLUME DAN
JUMLAH ERITROSIT

Skripsi
Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
Sarjana Kedokteran Hewan
pada
Fakultas Kedokteran Hewan, Universitas Airlangga

Oleh :
MOCH. BASYARUL HAQ
NIM 061111163

Menyetujui,
Komisi Pembimbing

(Prof. Dr. Nunuk Dyah Retno L, drh.,M.S)
Pembimbing Pertama

(Retno Sri Wahyuni., drh., M.S)
Pembimbing Kedua

ii
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

PERNYATAAN

Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi berjudul :
PERENDAMAN INFUSA MENIRAN (Phyllantus niruri) PADA IKAN
GURAME (Osphronemus gouramy) YANG DIINFEKSI Vibrio anguillarum
TERHADAP KADAR HEMOGLOBIN, PACKED CELL VOLUME DAN
JUMLAH ERITROSIT
Tidak t erdapat ka rya ya ng pe rnah diajukan untuk memperoleh ge lar ke sarjanaan
di s uatu pe rguruan t inggi da n sepanjang pe ngetahuan s aya j uga tidak terdapat
karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali
yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surabaya, 27 Februari 2015

Moch. Baasyarul Haq
NIM. 061111163

iii
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

DIPPING OF MENIRAN INFUSION (Phyllantus niruri) ON GOURAME (Osphronemus
gouramy) INFECTED WITH Vibrio anguillarum TOWARD THE LEVEL OF
HEMOGLOBIN, PACKED CELL VOLUME AND NUMBER OF ERYTHROCYTES
Moch. BasyarulHaq
ABSTRACT
The ai m o f t his r esearch i s t o p rove t he ef fect o f dipping meniran infusion c an
increase Hb, PCV and the number of erythrocytes of Gourame infected with V. anguillarum.
This research was conducted 5 group treatments and 4 replications. P0(-) was a control group,
gouramy was not infected with V.anguillarum and wasn’t given any treatment, P0(+) gruop
was infected with V. anguillarum and wasn’t given meniran i nfusion and P1, P 2 and P 3
group was infected with V. anguillarum and dipping in meniran infusion at a dose of 10%,
20%, 30%. D ata were an alyzed with ANOVA (Analysis o f Variant) if there obtained a
significant effect th en f ollowed w ith D uncan's multiple ra nge te st significance level o f 5 %.
The results sh ow dipping meniran infusion in gouramy i nfected with V. anguillarum can
increase H b, P CV a nd total e rythrocyte. D ose of 30% s how r esult efective d ose dipping

meniran infusion in gouramy infected with V. anguillarum.
Key word : meniran infusion (Phyllantus niruri L), gouramy (Osphronemus gouramy), Vibrio
anguillarum, Hb (Haemoglobin), PCV (Packed Cell Volume), erythrocytes

SKRIPSI

vi

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

Telah dinilai pada Seminar Hasil Penelitian
Tanggal : 13 Februari 2015

KOMISI PENILAI SEMINAR HASIL PENELITIAN

Ketua

: Emy Koestanti Sabdoningrum, drh., M.Kes

Sekretaris

: M. Gandul Atik yuliani, drh, M.Kes

Anggota

: Dr. Lilik Maslachah, drh., M.Kes

Pembimbing Utama : Prof. Dr. Nunuk Dyah Retno L, drh, M.S
Pembimbing Serta

: Retno Sri Wahyuni, drh, M.S

iv
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

Telah diuji pada

Tanggal : 27 Februari 2015

KOMISI PENGUJI SKRIPSI
Ketua

: Emy Koestanti Sabdoningrum, drh., M.Kes

Anggota

: M. Gandul Atik yuliani, drh, M.Kes
Dr. Lilik Maslachah, drh., M.Kes
Prof. Dr. Nunuk Dyah Retno L, drh, M.S
Retno Sri Wahyuni, drh, M.S

Surabaya, 27 Februari 2015
Fakultas Kedokteran Hewan
Universitas Airlangga
Dekan

Prof. Hj. Romziah Sidik, drh., PhD
NIP 195 312 161 978 062 001

v
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

UCAPAN TERIMA KASIH

Puji s yukur K ehadirat Allah S WT a tas ka runia ya ng t elah dilimpahkan
sehingga penulis dapat melaksanakan penelitian dengan judul Perendaman Infusa
Meniran (Phyllantus niruri) pada I kan G urame (Osphronemus gouramy) yang
Diinfeksi Vibrio anguillarum terhadap kadar Hb, PCV dan Jumlah Eritrosit. Pada
kesempatan kali ini penulis ingin menyampaikan terima kasih kepada :
1. Allah S WT ya ng t elah memberi r akhmat da n hi dayah-Nya s ehingga
penulis dapat menyelesaikan skripsi ini.
2. Prof. R omziah S idik, drh., Ph.D selaku D ekan F akultas K edokteran
Hewan U niversitas A irlangga a tas kesempatan m engikuti pendidikan di
Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga.
3.

Prof. Nunuk D yah R etno L , MS., dr h sebagai pe mbimbing ut ama da n
Retno S ri W., dr h., M .S sebagai pembimbing ser ta y ang t elah b ersedia
memberikan bimbingan, saran serta nasehat dalam penyusunan skripsi ini.

4. Emy Koestanti S abdoningrum, dr h., M .Kes selaku ke tua pe nguji, M.
Gandul A tik yul iani, d rh, M .Kes selaku sek ertaris p enguji d an Dr. Lilik
Maslachah, drh., M.Kes selaku anggota penguji.
5. Seluruh s taf pe ngajar Fakultas K edokteran H ewan U niversitas A irlangga

atas b imbingan da n dor ongan s emangat s erta motivasi s elama mengikuti
pendidikan di Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga.
6. Kedua or ang t ua p enulis, B apak H . B ambang Edy S uryanto da n I bu Hj.
Siti F atimah, kakak t ersayang R izky F ameiyanti B R serta seg enap

vii
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

keluarga ya ng s elalu memberikan do’ a, dukunga n ba ik s ecara m ateril
maupun spiritual kepada penulis selama ini.
7. Pendamping pe nulis, A lfiana L aili D wi A gustin ya ng telah m emberi
dorongan dan semangat pribadi kepada penulis.
8. Teman-teman kuliah penulis, teman satu kelompok penelitian Aurora, Dini,
Dwi dalam membantu proses keberhasilan penelitian ini dan teman-teman

seperjuangan Rezha s etyo, A gil R ahmat, R ifqi N ajwan, M. R ofi, F aiq
Mudhafar, Asri A yu, Mentari Maharani, T utuk W ahyuningtyas, N atalia
Cyntia, H ana C ipka, Karinadhinta, s erta t eman-teman angkatan 2 011
lainnya ya ng t elah ba nyak memberi dor ongan da n s emangat ke pada
penulis.
9. Semua pihak ya ng tidak sempat penulis sebutkan satu-persatu yang telah
banyak membantu penulis sehingga selesainya penulisan ini.

Akhirnya, semoga s kripsi i ni bermanfaat ba gi s emua pi hak ya ng
membutuhkan.

Surabaya, 27 Februari 2015

Penulis

viii
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN PENGESAHAN............................................................
HALAMAN PERNYATAAN ...........................................................
HALAMAN IDENTITAS .................................................................
ABSTRACT .......................................................................................
UCAPAN TERIMAKASIH ...............................................................
DAFTAR ISI ......................................................................................
DAFTAR TABEL ..............................................................................
DAFTAR GAMBAR .........................................................................
DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................
DAFTAR SINGKATAN DAN ARTI LAMBANG ..........................

ii
iii
iv
vi
vii
ix
xi
xii
xiii
xiv

BAB 1 PENDAHULUAN .................................................................
1.1. Latar belakang masalah.......................................................
1.2. Rumusan masalah ...............................................................
1.3. Landasan teori .....................................................................
1.4. Tujuan penelitian ................................................................
1.5. Manfaat penelitian ..............................................................
1.6. Hipotesis ..............................................................................

1
1
3
3
4
5
5

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA ........................................................
2.1. Ikan Gurame (Osphronemus gouramy) ..............................
2.1.1. Morfologi ikan gurame (Osphronemus gouramy) ...
2.1.2. Klasifikasi ikan gurame (Osphronemus gouramy) ..
2.1.3. Sistem peredaran darah ............................................
2.2. Meniran (Phyllanthus niruri L) ............................................
2.2.1 Klasifikasi dan morfologi meniran ..........................
2.2.2 Kandungan kimia dan farmakologis meniran .........
2.3. Morfologi Vibrio anguillarum .............................................
2.4. Darah Ikan ............................................................................
2.4.1 Hemoglobin..............................................................
2.4.2 Hematokrit (PCV) ....................................................
2.4.3 Eritrosit ikan.............................................................

6
6
7
7
7
8
8
9
11
12
12
13
13

BAB 3 MATERI DAN METODE .....................................................
3.1. Tempat dan Waktu Penelitian ..............................................
3.2. Bahan dan Materi Penelitian ................................................
3.2.1 Hewan coba ..............................................................
3.2.2 Bahan penelitian ......................................................
3.2.3 Alat penelitian .........................................................
3.3. Metode Penelitian ................................................................
3.3.1 Pembuatan s uspensi ba kteri, pe ngenceran da n
perhitungan jumlah bakteri vibrio anguillarum........
3.3.2 Pembuatan infusum meniran ....................................

15
15
15
15
15
16
16
16
18

ix
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

3.3.3 Penentuan jumlah sampel ........................................
3.4. Pelaksanaan Peneltian ..........................................................
3.4.1 Persiapan akuarium penelitian ..................................
3.4.2 Kelompok perlakuan.................................................
3.4.3 Pemberian perlakuan ................................................
3.4.4 Pengambilan darah ...................................................
3.4.5 Pemeriksaan kadar hemoglobin ................................
3.4.6 Pemeriksaan hematokrit (PCV) ................................
3.4.7 Pemeriksaan jumlah eritrosit ....................................
3.5. Variabel Penelitian ..............................................................
3.6. Definisi Operasional Variabel..............................................
3.7. Rancangan Percobaan dan Analisis Data .............................
3.8. Kerangka operasional penelitian .........................................

18
19
19
19
20
20
21
22
22
23
23
24
25

BAB 4 HASIL PENELITIAN ..........................................................
4.1 Pengamatan gejala klinis......................................................
4.2 Kadar Hemoglobin (Hb) ......................................................
4.3 Kadar hematokrit (PCV) ......................................................
4.4 Jumlah eritrosit.....................................................................

26
26
27
28
29

BAB 5 PEMBAHASAN ...................................................................
5.1 Pengamatan Gejala Klinis ...................................................
5.2 Kadar Hemoglobin(Hb) .....................................................
5.3 Kadar Hematokrit (PCV) ....................................................
5.4 Jumlah Eritrosit ...................................................................

31
31
31
33
34

BAB 6 KESIMPULAN DAN SARAN ............................................
6.1 Kesimpulan ..........................................................................
6.2 Saran ...................................................................................

37
37
37

RINGKASAN ....................................................................................
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................
LAMPIRAN ......................................................................................

38
40
45

x
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

DAFTAR TABEL

Tabel
Halaman
4.1 Rata-rata h asil s tandar deviasi ( x ± S D) Kadar hemoglobin
(Hb) ikan gurame pada akhir penelitian .....................................
27
4.2 Rata-rata h asil s tandar deviasi ( x ± S D) kadar hematokrit
(PCV) ikan gurame pada akhir penelitian ..................................
28
4.3 Rata-rata hasil standar deviasi ( x ± SD) jumlah eritrosit ikan
gurame pada akhir penelitian ......................................................
29

xi
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1 Gurame (Osphronemus gouramy)...............................................
6
2.2 Tanaman meniran........................................................................
8
2.3 Bakteri vibrio sp. .........................................................................
11
2.4 Eritrosit ikan................................................................................
14
3.1 Skema kerangka penelitian .........................................................
25
4.1 Ulcer pada daerah tubuh ikan ....................................................
26
4.2 Hemoraghi pada tubuh ikan ........................................................
27
4.3 Luka pada bibir ikan ...................................................................
27
4.4 Kadar hemoglobin (Hb) ..............................................................
28
4.5 Kadar hematokrit (PCV) .............................................................
29
4.6 Jumlah eritrosit............................................................................
30

xii
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran
Halaman
1. Skema pengenceran bakteri ...........................................................
45
2. Perhitungan dosis infusum meniran .............................................
46
3. Hasil analisis data menggunakan SPSS.........................................
47
4. Dokumentasi kegiatan penelitian .................................................
53

xiii
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

SINGKATAN DAN ARTI LAMBANG

Hb
PCV
pH
MCV
CFU
EDTA
ID
RAL
ANOVA
Dpl
MCHC
Rpm

:
:
:
:
:
:
:
:
:
:
:
:

Haemoglobin
Packed Cell Volume
Potential of Hydrogen
Mean Corpuscular Volume
Cell Form Unit
Ethylene Diamine Tetra Acetid Acid
Infectious Dosage
Rancangan Acak Lengkap
Analysis of Variant
Di atas permukaan laut
Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration
Rotation per minutes

Xiv
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

BAB 1 PENDAHULUAN

1.1

Latar Belakang
Ikan gur ame ( Osphronemus gouramy) m erupakan sal ah s atu i kan ai r t awar

yang di budidayakan s ecara m eluas d an k omersial. Ikan i ni t ersebar di k awasan
tropis mulai dari India sampai Semenanjung Malaya dan Indonesia. Ikan gurame
bernilai ekonomis dan harganya di pasar cukup tinggi (Effendi dkk., 2006). Salah
satu kendala yang dihadapi peternak ikan gurame adalah gangguan penyakit, baik
yang bersifat infeksius maupun yang bersifat non-infeksius. Vibriosis merupakan
penyakit infeksius y ang m ampu menyerang ikan gur ame. Bakteri ini berdampak
pada pe nurunan ha sil produksi dan menyebabkan kematian massal seh ingga
menimbulkan ke rugian ekonomi ya ng c ukup t inggi ( Purwaningsih da n T aukhid,
2010).
Vibriosis m erupakan p enyakit y ang salah s atunya disebabkan o leh Vibrio
anguillarum (V. anguillarum) (Desrina dkk., 2006). Gejala klinis yang di tunjukan
oleh i kan y ang t erinfeksi Vibrio adalah l esu, w arna kul it ge lap, sisik l epas,
peradangan pa da r ahang, a bdomen, t utup i nsang, pa ngkal s irip, l uka ya ng
berkembang m enjadi ulcer pada tubuh, pe rdarahan pa da o rgan da lam, ha ti dan
ginjal be ngkak ( Nitimulyo dkk., 2005). Menurut Sarjito dkk., (2007) perdarahan
pada or gan ( haemorarrghic) diakibatkan o leh a danya haemolysin yang
dikeluarkan oleh bakteri dan merusak sel darah merah.
Vibrio m erupakan ba kteri ya ng berkemampuan s ebagai pa togen ketika
mekanisme pertahanan inang melemah yang ada dalam lingkungan pemeliharaan,

1
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

2

bakteri v ibrio in i berkembang menjadi p atogenik bi la b erada p ada kondi si
lingkungan yang memungkinkan. Bakteri vibrio dapat hidup di bagian luar tubuh
organisme de ngan j alan m enempel, m aupun pa da or gan t ubuh b agian da lam
seperti hati, usus, dan lain sebagainya (Yanuhar, 2011). Bakteri memasuki darah
melalui i nsang da n m enyebar pa da or gan d alam, ba kteri dapat m enyebabkan
kematian sep erti septicaemia. Vibriosis pa da or gan e ksternal da n i nternal
memperlihatkan haemorrhage dan ulcer superficial tertutup pada kepala atau anus
(Valiente et al., 2008). Bakteri vibrio memiliki haemolysin yang bila dikeluarkan
dapat memecah eritrosit dan keluar dari pembuluh darah (Sarjito dkk., 2007).
Pengendalian vibriosis de ngan menggunakan a ntibiotik seperti ampicilin,
chloramphenicol, tetracycline belum memberikan ha sil ya ng m emuaskan.
Penggunakan antibiotik untuk jangka lama mempunyai beberapa kelemahan yaitu
menimbulkan r esistensi pada ba kteri, mencemari l ingkungan da n meninggalkan
residu pada tubuh ikan (Desrina dkk., 2006 ; Lukistyowati dan Syawal, 2013).
Alternatif y ang da pat digunakan adalah p enggunaan a nti ba kterial ya ng
bersifat a lami, efektif, dan mudah t eruarai di p erairan sal ah sa tunya ad alah
meniran (phyllantus niruri L.) (Sudarno dkk., 2011).
Tanaman meniran d apat b erfungsi seb agai an tibakteri karena m emiliki
kandungan ba han a ntibakteri di antaranya f lavonoid, a lakaloid, f enol, da n t anin
(Sudarno dkk., 2011). Penelitian yang di lakukan M angunwardoyo dkk., (2009)
pada pengujian aktivitas anti mikroba terhadap bakteri Gram positif, Gram negatif,
dan kha mir. E kstrak m eniran yang mengandung s enyawa gol ongan a lkaloid,
flavonoid, tanin dan s afonin, m emiliki a ktifitas a ntimikroba te rlihat d ari

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

3

penghambatan pe rtumbuhan mikroba ha l i ni terjadi karena ad anya h ambatan
sintesis d inding s el, pe rubahan pe rmeabilitas membran s el a tau t ransport a ktif
melalui membran s el, pe nghambatan s intesis pr otein, da n pe nghambatan s intesis
asam nukleat.
Perendaman meniran pada i kan g urame yang b ersifat a ntibakteri dapat
menghambat bahkan membunuh bakteri diharapkan dapat memberi perlindungan
terhadap infeksi V. anguillarum yang terlihat dari perubahan kadar Haemoglobin
(Hb), packed cell volume (PCV) dan jumlah eritrosit.

1.2

Perumusan Masalah
Berdasarkan latar belakang tersebut, maka dapat dirumuskan masalah sebagai

berikut yaitu apakah perendaman infusa meniran pada ikan gurame yang diinfeksi
V. anguillarum dapat meningkatkan kadar Hb, PCV dan jumlah eritrosit ?

1.3

Landasan Teori
Penyakit Vibriosis berdampak pa da pe nurunan ha sil pr oduksi budi daya

perikanan. P enyakit t ersebut m enyebabkan ke rugian be sar s erta m enghancurkan
berbagai budidaya perikanan salah satunya adalah ikan gurame. Ikan gurame yang
terserang V.anguillarum akan m enjadi l esu da n a kan m enyebabkan w arna k ulit
ikan berubah menjadi gelap, sisik lepas, peradangan pada rahang, abdomen, tutup
insang, pangkal sirip, perdarahan pada organ dalam dan akan bisa menyebabkan
kematian massal (Sarida dkk., 2010).

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

4

Salah satu penyebab kematian massal yang terjadi pada ikan gurame karena
adanya haemolysin yang diproduksi oleh bakteri V.anguillarum. Haemolysin yang
dikeluarkan ol eh ba kteri V.anguillarum dapat m emecah e ritrosit da n da pat
menyebabkan e ritrosit k eluar da ri p embuluh da rah s ehingga da pat m enyebabkan
haemorrhage, dan bahkan dapat menyebabkan anemia (Nasi dkk., 2011). Anemia
secara fungsional didefinisikan sebagai penurunan jumlah eritrosit. Secara praktis
ada 3 pa rameter unt uk m enegakkan a danya anemia ya itu : ka dar H b, PCV da n
jumlah eritrosit (Syawal dan Ikhwan, 2011).
Meniran m erupakan tanaman ya ng m empunyai ba nyak kha siat s eperti
memperbaiki j aringan hati da n d igunakan s ebagai oba t t radisional. Khasiat
tanaman t ersebut be rasal da ri ka ndungan s enyawa gol ongan alkaloid, f lavonoid,
tanin da n saponin ( Mangunwardoyo dkk., 2009) . S enyawa gol ongan tanin
merupakan a ntibakterial yang da pat mencegah pe rtumbuhan ba kteri da n
menghentikan pe rdarahan sehingga da pat m eningkatkan k adar H b, P CV da n
jumlah eritrosit (Mathivanan et al., 2006). Analisis karakteristik sel darah dapat
memberikan beberapa petunjuk keberadaan penyakit yang ditemukan dalam tubuh
organisme. P emeriksaan d arah sangat p erlu terutama p ada k eadaan patologis
tertentu (Andayani dkk., 2006).

1.4

Tujuan Penelitian
Penelitian ini be rtujuan unt uk membuktikan pengaruh perendaman infusa

meniran dapat m eningkatkan kadar Hb, P CV d an jumlah eritrosit pada ikan
gurame yang diinfeksi V. anguilarium.

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

5

1.5

Manfaat Penelitian
Diharapkan hasil dari penelitian ini dapat diketahui konsentrasi meniran yang

dapat meningkatkan kadar Hb, PCV dan jumlah eritrosit pada ikan gurame yang
diinfeksi bakteri V. anguillarium.

1.6

Hipotesis
Berdasarkan p ermasalahan tersebut d i atas da pat di ajukan hi potesis ba hwa

perendaman infusa m eniran dapat m eningkatkan kadar Hb, P CV d an jumlah
eritrosit pada ikan gurame yang diinfeksi V. anguilarium.

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA
2.1

Ikan Gurame (Osphronemus gouramy)
Gurame umumnya hidup dan banyak dipelihara di perairan air tawar. Namun

ada j uga gu rame ya ng hi dup di pe rairan pa yau. K etinggian l okasi y ang c ocok
untuk budi daya gur ame a dalah 0 – 800 m dpl de ngan s uhu 24 -28oC. Gu rame
tergolong ikan yang peka terhadap suhu rendah sehingga tidak akan produktif jika
suhu tempat hidupnya lebih rendah dari kisaran suhu optimal (Brotoadji, 2011).

Gambar 2.1. Osphronemus gouramy (Standar Nasional Indonesia, 2000)
2.1.1 Morfologi ikan gurame (Osphronemus gouramy)
Gurame memiliki be ntuk f isik kha s. B adannya pipih, a gak panjang da n
lebar. Badan itu tertutup sisik yang kuat dengan tepi agak kasar. Mulutnya kecil,
letaknya m iring, t idak tepat di ba wah uj ung moncong. B ibir ba wah t erlihat
menonjol sedikit dibandingkan bibir atas. Gurame dewasa memiliki badan hampir
dua ka li pa njang ke pala a tau ¾ k ali pa njang t ubuh. B entuk ke pala de mpak
(tumpul), berdahi agak menonjol. Sedangkan gurame muda yang masih berukuran
kecil m emiliki delapan garis t egak berwarna h itam p ada k edua si si b adannya.
6
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

7

Berkepala l ancip ke de pan, be rdahi nor mal da n r ata ( Sitanggang da n Sarwono,
2011).
2.1.2 Klasifikasi ikan gurame (Osphronemus gouramy)
Klasifikasi Ikan Gurame menurut Sutanto (2011) adalah sebagai berikut:
Kelas

: Pisces

Sub kelas

: Teleostei

Ordo

: Labyrinthici

Sub Ordo

: Anabantoidae

Famili

: Anabantidae

Genus

: Osphronemus

Species

: Osphronemus gouramy

2.1.3 Sistem peredaran darah ikan
Sistem si rkulasi d arah pada i kan berbeda de ngan ve rtebrata um umnya.
Sistem s irkulasi i kan be rsifat t unggal. O rgan ya ng t erlihat a dalah j antung da n
pembuluh-pembuluh da rah. P embuluh da rah pa da or gan-organ d isebut si stem
portal dan merupakan jalinan buluh kapiler. Umumnya, sistem portal ditemukan
pada i nsang, l iver, d an ren (Juni dk k., 2010) . S istem he matopoetik pa da i kan
meliputi: limpa, gi njal, da n t hymus. P embentukan e ritrosit terjadi d i g injal d an
limpa, sedangkan leukosit di bantu thymus dan bagian atas ginjal (Bijanti, 2010).

2.2

Meniran
Pohon meniran be rupa semak de ngan t inggi m encapai 50 cm, be rbatang

basah dan bentuk bulat. Tanaman ini mempunyai daun bersirip genap setiap satu

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

8

tangkai da un t erdiri da ri da un m ajemuk ya ng m empunyai ukur an k ecil da n
berbentuk l onjong. N ama l atinnya a dalah Phyllantus nirui Linn. Dari s uku
Euphorbiaceae (Mun’im dan Hanani, 2011).
2.2.1 Klasifikasi dan morfologi
Klasifikasi meniran menurut (Robinson, 1995) adalah :
Kingdom

: Plantae

Division

: Spermatophyta

Subdivision

: Angiospermae

Class

: Dicotylae

Order

: Euphorbiales

Family

: Euphorbiaceaea

Genus

: Phyllanthus LINN

Species

: Phillanthus niruri

Gambar 2.2 Tanaman Meniran (Husna, 2007)

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

9

2.2.2 Kandungan kimia dan efek farmakologis meniran (Phyllanthus niruri
Linn)
Tumbuhan meniran (Phyllanthus niruri L.) mengandung berbagai macam
senyawa ki mia a ktif ya itu f lavonoid, t anin dan s aponin ( R iana, 2006) .
Flavonoid merupakan salah s atu g olongan f enol ya ng t erdapat dalam sem ua
tumbuhan be rbiji ( monokotil). M enurut s trukturnya, f lavonoid m erupakan
turunan senyawa induk flavon. Flavonoid mengandung atom karbon dalam inti
dasarnya. Seluruh va rian f lavonoid s aling be rkaitan ka rena jalur b iosintesis
yang berasal dari jalur sikimat dan jalur asetat malonat. Senyawa ini umumnya
terikat seb agai g likosida, b aik O -glikoksida m aupun C -glikoksida
(Mangunwardoyo, dkk 2009).
Senyawa flavonoid juga berperan dalam memberikan banyak warna lain di
alam, terutama daun mahkota kuning dan jingga. bahkan flavonoid yang tidak
bewarna m engabsorbsi cahaya pa da s pektrum U V ( karena ba nyak gu gus
kromofor) da n da pat dilihat ol eh ba nyak s erangga. Senyawa i ni d iduga
mempunyai manfaat e kologi ya ng be sar di a lam be rkat w arnanya s ebagai
penarik s erangga da n bur ung untuk m embantu penyerbukan t anaman.
Flavonoid tertentu j uga m empengaruhi rasa m akanan secara si gnifikasi,
misalnya b eberapa tanaman memiliki r asa p ahit d an k esat sep erti g likosida
flavon narigin ada kulit grapefruit (Citrus paradisi). Senyawa flavonoid diduga
sangat b ermanfaat d alam makanan k arena, b erupa sen yawa f enolik, senyawa
ini bersifat antioksidan kuat.( Heinrich and Barnes, 2010).

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

10

Tanin termasuk senyawa polifenol alami yang mengandung gugus hidroksi
fenolik dan karboksil dengan bobot molekul 300−5000 Dalton. Tanin memiliki
sifat ut ama da pat be rinteraksi de ngan pr otein membentuk i katan ya ng kua t.
Ikatan t anin da n p rotein s angat di pengaruhi o leh pH lingkungan. S enyawa
tanin terdiri dari katekin, leukoantosianin, dan asam hidroksi (asam galat, asam
kafeat, d an k lorogenat) ser ta est er d ari a sam-asam t ersebut, ya itu 3 galoilepikatekin, 3 -galoilgalokatekin, da n f enil ka feat (Mangunwardoyo, dkk
2009). Tannin dapat d imanfaatkan seb agai b ahan an tiseptik ser ta an tioksidan
dalam makanan Z ulaikha ( 2006). Tanin be rsifat m engendapkan pr otein da n
berkhasiat sebagai a dstringensia, yaitu da pat meringankan di are d engan
mengecilkan at au menciutkan l ender u sus. Tanin mudah l arut da lam a ir,
gliserol, alkohol, al kali en cer d an aset on, ser ta t idak larut d alam et er d an
benzena dalam Aziz (2004).
Menurut H arbone ( 1987) da lam H arimukti ( 2013) S aponin a dalah j enis
glikosida triterpenoid d an s terol y ang ba nyak di temukan da lam t umbuhan.
Saponin a da pa da s eluruh t anaman de ngan kons entrasi t inggi pa da ba gianbagian tertentu, dan dipengaruhi oleh varietas tanaman dan tahap pertumbuhan.
Saponin m erupakan senyawa a ktif permukaan ya ng kua t y ang m enimbulkan
busa j ika dikocok da lam a ir da n pa da ko nsentrasi y ang r endah s ering
menyebabkan he molisis s el da rah merah. Saponin m erupakan senyawa y ang
berasa pa hit menusuk, be rbusa dalam a ir da n l arut da lam a ir da n a lkohol da n
tidak l arut d alam et er se hingga m enyebabkan b ersin se rta i ritasi p ada s elaput
lendir.

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

11

2.3

Morfologi Vibrio anguillarum
Bakteri V. anguillarum merupakan ba kteri pa togen pada spesies i kan l aut

memiliki flagella dan chemotactic motility yang penting sebagai faktor verulensi
setelah in feksi p erendaman te tapi tid ak t erlalu in fektif jik a d isuntikkan
intraperitonial. C ara p enetrasi m asih di perdebatkan p ada us us, insang, da n
anggota l ain t etapi s angat di mungkinkan ba kteri i ni bi sa masuk da lam s emua
organ. S ebelum pe netrasi pa da kul it ba kteri ha rus m enembus l apisan pe lindung
ikan yaitu lendir, motilitas, dan kemotaksis (Lanser et al., 2001).

Gambar 2.3 Bakteri Vibrio anguillarum (Crosa, 1980)
Vibrio anguillarum merupakan pe nyebab ut ama da ri pe rdarahan s eptikemia.
Vibriosis m erupakan pe nyakit be rat ya ng mempengaruhi b anyak s pesies i kan.
fungsi f lagella da lam v irulensi terbawa o leh a ir y ang d imediasi motilitas
kemotaktik ( Toole et al., 2004) . F lagella V. anguillarum memiliki s truktur ya ng
komplek berisi empat atau mungkin lebih protein flagell yang terbungkus dalam
selubung m embran. Penelitian terbaru m enunjukan ba hwa f lagella m embantu V.
anguillarum penetrasi p ada i ntegumen. Flagella p ada b eberapa b akteri p atogen
telah t erbukti b erperan d alam in vasi p ada ja ringan host. S elama masa aw al
penetrasi ke dalam host flagella berfungsi sebagai organel motilitas atau sebagai

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

12

organel y ang berfungsi seb agai p elekat untuk m engikat j aringan m ukosa
(Ormonde et al., 2000)

2.4

Darah Ikan
Darah ikan tersusun dari sel-sel yang tersuspensi dalam plasma dan diedarkan

ke s eluruh jaringan tu buh m elalui sistem s irkulasi tertutup. M enurut Maswan
(2009), da rah t ersusun a tas c airan da rah ( plasma da rah) da n elemen-elemen
seluler (sel-sel darah). Plasma darah terdiri dari air, protein, lipid dan ion, adapun
sel-sel d arah y ang t erdiri d ari s el darah m erah (e ritrosit) d an s el d arah p utih
(leukosit).
Sel dan cairan darah (plasma darah) merupakan aspek diagnosa yang penting
untuk dikaji, karena kedua aspek tersebut mempunyai peran fisiologis yang sangat
penting s erta m ampu menggambarkan kondi si kesehatan i kan Dalam p enelitian
hematologic i kan, pa rameter da rah ya ng di ukur m eliputi ka dar he moglobin,
hematokrit dan jumlah eritrosit (Nabib dan Pasaribu 1989).
2.4.1. Hemoglobin
Hemoglobin m erupakan pr otein yang be rperan pa ling be sar da lam
transpor oks igen ke jaringan da n k arbondioksida ke pa ru-paru. H emoglobin
merupakan pr otein he me s ama s eperti m yoglobin, m yoglobin ya ng bersifat
monomerik ( mengandung s atu s ubunit) ba nyak ditemukan d i ot ot, s edangkan
hemoglobin yang ditemukan di darah memiliki empat subunit polipeptida maka
disebut te tramerik (Shabir et al., 2013). Faktor-faktor ya ng da pat
mempengaruhi ka dar hemoglobin ya itu um ur, j enis ke lamin, a ktivitas ot ot,

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

13

kondisi p sikis, m usim, t ekanan uda ra da n ke biasaan hi dup spesies ( Maswan,
2009).
2.4.2. Hematokrit (PCV)
Hematokrit (PCV) a dalah vol ume e ritrosit d alam 100 ml da rah da n
volume darah dinyatakan dalam bentuk persen. Kadar hematokrit (PCV) adalah
presentase dari volume darah yang terdiri dari eritrosit. Nilai PCV merupakan
petunjuk ya ng s angat baik unt uk menentukan j umlah e ritrosit da n ka dar
hemoglobin da lam s irkulasi d arah. N ilai P CV merupakan pe tunjuk da ya
pengikat ok sigen ol eh darah da n be rmanfaat bagi s uatu diagnosa u mtuk
menentukan Mean Corpuscular Hemoglobin Concentration (MCHC) d an
Mean Corpuscular Volume (MCV). Jika dalam suatu keadaan ditemukan nilai
PCV ya ng m elebihi nor mal, maka ke mungkinan t erjadi he mokonsentrasi d an
jika n ilai P CV t urun s ampai di ba wah nor mal di sebut da lam ke adaan a nemia
(Maswan, 2009). Hasil dari pemeriksaan hematokrit ini bervariasi, tergantung
dari kondi si f isiologis dan kesehatan ser ta ak tivitas d ari i kan y ang d iambil
sampel darahnya (Bijanti, 2010).
2.4.3. Eritrosit Ikan
Sel d arah merah ( eritrosit) m erupakan sal ah sat u k omponen sel y ang
terdapat dalam darah, fungsi utama dari eritrosit adalah mentranfer hemoglobin
(Warni, 2009). Selain mentranfer hemoglobin, sel darah merah juga berfungsi
mengkatalisis r eaksi de ngan ka rbon di oksida dan mentransport C O 2 dari
jaringan ke insang (Bijanti, 2010).

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

14

Gambar 2.4 Eritrosit ikan (Maswan, 2009)
Sel da rah merah ( eritrosit) p ada i kan m empunyai i nti yang berbentuk
bulat d an o val te rgantung p ada je nis ik annya. I nti s el e ritrosit te rletak s entral
dengan si toplasma t erlihat j ernih k ebiruan d engan p ewarnaan g iemsa. Ju mlah
eritrosit berbeda-beda pada jenis spesies dan juga sangat dipengaruhi oleh suhu,
namun u mumnya b erkisar an tara 1 – 3 ju ta s el/mm3. Rendahnya j umlah
eritrosit menunjukkan bahwa ikan mengalami infeksi (Maswan, 2009).

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

BAB 3 MATERI DAN METODE

3.1 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian i ni di lakukan pada bul an S eptember – November 201 4 di
Laboratorium P atologi V eteriner D epartemen P atologi V eteriner F akultas
Kedokteran Hewan U niversitas A irlangga S urabaya. Bakteri Vibrio anguillarum
diperoleh dari prodi Biologi Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Airlangga
Surabaya. Isolasi, id entifikasi, da n pengenceran ba kteri Vibrio anguillarum
dilakukan di Laboratorium Bakteriologi dan Mikologi, Departemen Mikrobiologi
Veteriner Fakultas K edokteran H ewan U niversitas A irlangga S urabaya. Proses
pengambilan darah, pembuatan preparat darah, dan penghitungan kadar Hb, PCV
dan jumlah eritrosit dilakukan d i la boratorium P atologi K linik V eteriner,
Departemen Kedokteran Dasar Veteriner.

3.2 Bahan dan Materi Penelitian
3.2.1 Hewan coba
Hewan c oba ya ng di gunakan a dalah i kan gur ame s ebanyak 25 e kor
dengan rata-rata berat badan 100 gram dengan panjang tubuh 10-15 cm. Umur
3 bul an. H ewan c oba di peroleh da ri B alai B enih I kan T angunan K ecamatan
Puri Kabupaten Mojokerto.
3.2.2 Bahan penelitian
Bahan-bahan yang diperlukan adalah pakan pellet jenis 208 produksi PT.
Phokphan. M eniran di peroleh de ngan c ara m embeli di d aerah P robolinggo.

15
SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

16

Bakteri Vibrio anguillarum diperoleh dari prodi B iologi Fakultas Sains da n
Teknologi Universitas A irlangga Surabaya, ke mudian di lakukan pe ngenceran
berjumlah 10 6 CFU/ml d iperoleh se telah d ilakukan i solasi dan i dentifikasi d i
Laboratorium Bakteriologi dan Mikologi, Departemen Mikrobiologi Veteriner
Fakultas Kedokteran Hewan Universitas Airlangga Surabaya.
3.2.3 Alat penelitian
Peralatan ya ng di gunakan unt uk pe rlakuan a dalah aquarium sebanyak 5
buah de ngan ukur an p anjang 30 cm t inggi 30 cm da n l ebar 60 cm, m esin
aerator 5 buah, selang aerator 5 buah dan jaring ikan.
Peralatan y ang di gunakan unt uk i solasi i dentifikasi da n pengenceran
bakteri Vibrio anguillarum serta penghitungan jumlah bakteri adalah autoclave,
inkubator, p ipet 1m l, os e, c awan pe tri, tabung reaksi, erlenmeyer, ge las ukur
dan bunsen.
Peralatan u ntuk pengambilan da rah, menghitung j umlah Hb, P CV d an
eritrosit adalah spuit insulin d engan j arumnya, tabung E DTA, t abung
mikrohematokrit, centrifuge, t abung cuvette, spektrofotometer, pipet pasteur,
larutan dacies, kamar hitung Improved Neubauer, mikroskop cahaya.

3.3

Metode Penelitian

3.3.1 Pembuatan

suspensi

bakteri,

pengenceran

bakteri

Vibrio

anguillarum
Isolat vibrio sp yang di dapat da ri P rodi B iologi F akultas S ains da n
Teknologi Universitas Airlangga S urabaya d iambil de ngan m enggunakan os e

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

17

steril kemudian dimasukkan ke dalam media APW dengan kandungan NaCl
2%. K emudian s uspensi di buat ho mogen de ngan a lat vortex dan d ilakukan
penambahan suspensi bakteri hingga kekeruhannya sebanding dengan standart
Mc.Farland no. 1 ( Konema et al., 1992). Tabung yang berisi suspensi bakteri
sesuai standart M c. Farland no 1 memiliki kons entrasi ba kteri s ejumlah 3.10 8
CFU/ml.
Penetapan dosis infeksi V. anguillarum konsentrasi 10 6 CFU/ml (Ilmiah
dkk., 2012) , di sesuaikan de ngan infeksi ikan d alam 15 L a ir akuarium.
Suspensi bakteri dengan konsentrasi 106 CFU/ml dibutuhkan sebanyak 150 ml
ditambah 14.850 ml s ehingga di dapatkan 15 L de ngan kons entrasi bakteri
106 CFU/ml (Lampiran 1).
Cara p enginfeksian b akteri Vibrio anguillarum adalah de ngan l angsung
menuangkan 150 ml suspensi bakteri yang telah dilakukan pengenceran dengan
konsentrasi 10 6 CFU/ml ke dalam a ir a kuarium dan a kan di dapatkan 15 L a ir
akuarium.
Setelah p enginfeksian b akteri se luruh i kan g urame d iamati sat u p ersatu
terhadap k emunculan ge jala kl inis i kan y ang t erserang vi briosis b ila
menunjukkan l esu, w arna kul it ge lap, s isik l epas, pe radangan pa da r ahang,
abdomen, t utup i nsang, pa ngkal s irip, l uka ya ng be rkembang menjadi ulcer
pada tubuh, perdarahan pada organ dalam, hati dan ginjal bengkak (Nitimulyo,
dkk 2005).

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

18

3.3.2 Pembuatan infusum meniran
Diperlukan herba m eniran s ebanyak 1kg . Meniran ya ng s udah di cuci
dikeringkan di uda ra t erbuka t anpa t erkena s inar m atahari s ampai ke ring
selanjutnya dihancurkan. Infusum meniran dibuat dengan mencampurkan 1 kg
simplisia m eniran dengan akuades sampai v olume 1 L, campuran di rebus
dalam wadah di atas air panas (panci infusum) dihitung mulai suhu 90° selama
15 menit kemudian diperas dengan ka in f lannel, jika be lum mencapai 1L
ampas meniran di tambahkan a qudes pa nas s ampai vol ume ya ng d idapat
mencapai 1L i nfusum m eniran dengan kons entrasi 100% (Farmakope
Indonesia, 1995; B POM, 2010) . Digunakan s ebagai i nfusum unt uk dos is
perlakuan 1 0%,20% da n 30% ( Putra, 2013 ). P erhitungan dos is infusum
meniran berdasarkan penelitian pendahuluan dapat dilihat pada (Lampiran 2).
3.3.3 Penentuan Jumlah Sampel
Rumus besaran sampel ad alah t (n-1)> 15, d imana t adalah ba nyaknya
perlakuan d an n adalah ba nyaknya ul angan (Federer da lam kus riningrum,
2008). D ari r umus di atas m aka ul angan ya ng digunakan adalah 4 e kor i kan
gurame p ada set iap p erlakuan. Untuk menghindari mati maka di tambahkan 1
ekor pada tiap kelompok, sehingga setiap perlakuan menggunakan 5 ekor ikan
gurame.

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

19

3.4

Pelaksaan Penelitian

3.4.1 Persiapan akuarium penelitian
Akuarium yang digunakan sejumlah 5 bua h dengan ukuran 30 x 30 x 6 0
cm. Akuarium I unt uk i kan gur ami s ebagai ko ntrol (-), akuarium I I seb agai
kontrol ( +), a kuarium I II unt uk i kan gur ami de ngan pe rlakuan dos is i nfusum
meniran 10%, akuarium IV untuk ikan gurami dengan dosis infusum meniran
20%, akuarium V untuk ikan gurami yang diberi dosis infusum meniran 30%.
3.4.2 Kelompok Perlakuan
Setelah ad aptasi se lama sa tu minggu ke lompok pe rlakuan P0+, P 1, P 2,
dan P 3 dari he wan c oba di infeksi dengan ba kteri V. anguillarum kemudian
setelah m enunjukan ge jala k linis s emua direndam de ngan i nfusa m eniran 3
menit/hari selama 5 hari kecuali P0- (kontrol negatif) dan P0+ (kontrol positif).
Kelompok perlakuan diberi perlakuan sebagai berikut :
PO-

= kontrol negatif tanpa perlakuan

PO+

= kontrol positif ikan diinfeksi V. anguillarum 106 CFU/ml tanpa
direndam infusa meniran

P1

= ikan diinfeksi V. anguillarum 106 CFU/ml direndam infusa
meniran 10% dalam volume 1000 ml selama 3 menit

P2

= ikan diinfeksi V. anguillarum 106 CFU/ml direndam infusa
meniran 20% dalam volume 1000 ml selama 3 menit

P3

= ikan diinfeksi V. anguillarum 106 CFU/ml direndam infusa
meniran 30% dalam volume 1000 ml selama 3 menit

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

20

Setelah perlakuan lima hari, darah ikan diambil melalui pembuluh darah
bagian cau dal kemudian di amati ga mbaran da rah ya ng m eliputi jumlah H b,
PCV dan eritrosit.
3.4.3 Pemberian perlakuan
Semua ke lompok pe rlakuan da lam a kuarium diberi pa kan ya ng s ama
sebanyak d ua ka li s ehari s etiap p agi da n s ore ha ri. K emudian di lakukan
adaptasi s elama s atu m inggu, s etelah itu d iinfeksi de ngan m enuangkan
langsung bakteri Vibrio anguillarum konsentrasi 10 6 pada air akuarium untuk
PO(+), P1, P2, P3 sedangkan PO(-) sebagai kontrol negatif.
Ikan gur ame ya ng m enunjukkan g ejala kl inis seperti l esu, t ubuh i kan
menjadi gelap, hemoraghi dan ulcer setelah 3hari diinfeksi V. anguillarum pada
kelompok perlakuan P1, P2 dan P3 dilakukan dipping dengan infusum meniran
sesuai d engan masing-masing ke lompok pe rlakuan. Ikan gur ami di dipping
dengan i nfusum meniran sel ama t iga m enit/hari, d ilakukan sel ama l ima h ari
berturut-turut.
Hari berikutnya setelah dipping infusum meniran dilakukan pengamatan
terhadap he wan c oba. Setelah d ilakukan p engamatan t erhadap i kan g urame
baru di laksanakan pr oses pe ngambilan da rah u ntuk pe meriksaan ka dar H b,
PCV dan jumlah eritrosit.
3.4.4 Pengambilan Darah
Pengambian d arah pada i kan di lakukan dengan t eknik Punctie Vena
Caudal. Prosedur pengambilan darah ikan Gurame dengan teknik Punctie Vena
Caudal yaitu :

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

21

Ikan ya ng sudah di eutinasi, d isiapkan unt uk diambil da rah, ha l y ang
harus di siapkan pe rtama a dalah m empersiapkan s puit i nsulin l engkap de ngan
jarum, ke mudian a ntikoagulan Ethylene Diamine Tetra Acetid (EDTA)
dimasukan kedalam spuit. Jarum yang sudah ada EDTA ditusukkan pada garis
tengah tubuh ikan di belakang sirip anal. Jarum dimasukan ke dalam muskulus
sampai mencapai t ulang belakang (columna spinalis), ke mudian s puit ditarik
perlahan sampai darah masuk ke dalam spuit (Bijanti, 2010).
3.4.5 Pemeriksaan Kadar Hemoglobin
Kadar he moglobin da rah da pat di tentukan de ngan be rmacam-macam
cara, ya ng banyak di pakai da lam l aboratorium kl inik ya itu c ara kol orimetri
visual (cara Sahli Adams) dan cara fotoelektrik (memakai Spektrofotometer).
Prosedur pelaksanaan fotoelektrik:
Darah di ambil s ebanyak 20 µ l ke mudian di masukan ke dalam t abung
reaksi. T abung ya ng be risi da rah ditambah d engan 5 ml l arutan Drabkin’s
kemudian campur rata. Larutan tersebut diambil sebanyak 2 ml dan dimasukan
ke d alam cuvette. H asil pa da s pektrofotometer dibaca de ngan pa njang
gelombang 540 nm, sebagai blanko digunakan larutan Drabkin’s. Konsentrasi
Hemoglobin da ri sampel da rah dihitung de ngan c ara m embandingkan
absorbansinya dengan kurva standart Hemoglobin (Bijanti, dkk 2010).
Ada kor elasi ya ng kua t a ntara he matokrit de ngan j umlah he moglobin
darah, m akin r endah j umlah s el-sel e ritrosit maka s emakin r endah pul a
kandungan hemoglobin dalam darah (Bijanti, 2010).

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

22

3.4.6 Pemeriksaan Hematokrit (PCV)
Hematokrit adalah presentase bagian volume sel darah merah (eritrosit)
yang mengendap da lam vol ume da rah s eluruhnya. P emeriksaan i ni h asilnya
bervariasi t ergantung da ri kondi si f isiologis da n ke sehatan s erta aktivitas da ri
ikan yang diambil sampel darahnya.
Prosedur Pelaksanaan :
Darah di ambil de ngan menggunakan t abung m ikrohematokrit. T abung
diisi de ngan da rah s ampai ¾ t abung. S alah s atu u jung t abung ditutup
menggunakan ba han pe nutup khus us t abung kapiler. D imasukan ke da lam
centrifuge he matokrit yang mempunyai ke cepatan l ebih da ri 16.00 0 r pm
selama 3 -5 m enit, ke mudian ha sil centrifuge di baca d engan a lat khusus
(Mikrohematocrit Reader) unt uk mengetahui ni lai he matokrit ( Bijanti, dkk
2010).
3.4.7 Pemeriksaan Jumlah Eritrosit
Pemeriksaan j umlah s el da rah pa da i kan ya ng pa ling ba nyak di gunakan
adalah m etode Blaxhall dan Daisley. Metode i ni ba ik di gunakan unt uk
pemeriksaan jumlah eritrosit maupun pemeriksaan jumlah leukosit. Perbedaan
hanya t erletak pa da penghitungan de ngan menggunakan ka mar hi tung
Neubauer.
Prosedur Pelaksanaan:
Darah ya ng di peroleh di encerkan de ngan pe rbandingan 1 :

50

menggunakan l arutan Dacies. S ebelum di encerkan, l arutan Dacies disaring
terlebih da hulu. L arutan Dacies

SKRIPSI

dan da rah dicampur pe rlahan a gar t idak

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

23

merusak sel d arah. L arutan tersebut d iambil d an d imasukan k e d alam k amar
hitung Improved Neubauer. Cover glass diletakkan di a tas ka mar h itung
Improved Neubauer, ke mudian di amati di ba wah mikroskop unt uk di hitung
jumlah e ritrosit ya ng terdapat pa da kamar hi tung tertentu khus us e ritrosit
(Bijanti, 2010).

3.5

Variabel Penelitian
Variabel bebas

: Dosis infusum meniran (10%, 20%, 30%)

Variabel tergantung

: Kadar Hb, PCV dan jumlah eritrosit

Variabel kendali

: Vibrio anguillarum 10⁶ CFU/ml, Ikan
gurami,Panjang ikan, berat ikan, akuarium,
pakan.

3.6

Definisi Operasional Variabel
1. Infeksi V.anguillarum adalah i nfeksi V. anguillarum dengan langsung
menuangkan 150 ml s uspensi ba kteri de ngan konsentrasi 106 CFU/ml
kedalam air akuarium yang berisi ikan gurame dengan berat badan ratarata 100 gram dengan panjang tubuh 10-15 cm
2. 10% i nfusum meniran di buat da ri 100 g

meniran kering ditambah

akuades a d 1 l iter di rebus da lam p anci i nfusum di hitung m ulai s uhu
90°C s elama 15 menit, ke mudian di saring d engan ka in f lanel da n
diperas. Untuk dos is 20 % da n 30% di lakukan dengan c ara ya ng s ama,

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

24

akan t etapi untuk dos is 20% m engggunakan 200 g m eniran kering dan
30% menggunakan 300 g meniran kering.
3. Kadar H b ya ng di periksa a dalah da rah i kan gur ame yang di ambil
sebanyak 2 0µl ke mudian di campur de ngan larutan d rabkin 5m l dan
diperiksa menggunakan fotoelektrik dengan membandingkan pada kurva
standart hemoglobin.
4. Kadar P CV ya ng di periksa a dalah da rah i kan gur ame ya ng di ambil
dengan t abung mikrohematokrit s ampai ¾ t abung da n di tutup de ngan
bahan pe nutup khus us t abung ka piler ke mudian m asukkan ke dalam
centrifuge hematokrit sel ama 3 -5 m enit da n di hitung de ngan
menggunakan mikrohematokrit reader.
5. Jumlah eritrosit yang diperiksa adalah darah ikan gurame yang diperoleh
diencerkan dengan pe rbandingan 1 : 50 menggunakan l arutan dacies
kemudian dihitung de ngan menggunakan ka mar hi tung improved
neubauer.

3.7

Rancangan Percobaan dan Analisis Data
Rancangan yang di gunakan a dalah R ancangan A cak L engkap ( RAL)

dengan ul angan ya ng s ama pa da s etiap pe rlakuan ya itu e mpat pe rlakuan da n 4
ulangan ( Kusriningrum, 2010 ). Data ya ng di peroleh di analisis de ngan
menggunakan A NOVA ( analysis of variant). A pabila t erdapat pengaruh yang
signifikan maka di lanjutkan de ngan uj i j arak be rganda Duncan dengan t araf
signifikan 5% (Kusriningrum,2010).

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

25

Kerangka Operasional Penelitian
GURAME

Gurame sebanyak 20 ekor dengan Berat Badan 100g, Panjang 10cm
Adaptasi 1minggu

P0 (-)

P0 (+)

P1

P2

P3

4 ekor

4 ekor

4 ekor

4 ekor

4 ekor

Diinfeksi Vibrio sp
106CFU/ml
3 hari setelah diinfeksi

P0 (-) tanpa
perlakuan

P0 (+)
diinfeksi V.
anguillarum

P1 + Phyllanthus

P2 + Phyllanthus

P3 + Phyllanthus

10 %

20 %

30 %

Dipping 3 menit/hari
selama 5 hari

Pengambilan sampel darah, pemeriksaan kadar hemoglobin, pemeriksaan
hematokrit (PCV) dan pemeriksaan jumlah eritrosit

Analisis Data

Gambar 3.1. Skema Kerangka Penelitian.

SKRIPSI

PERENDAMAN INFUSA MENIRAN....

MOCH. BASYARUL HAQ

ADLN - PERPUSTAKAAN UNIVERSITAS AIRLANGGA

BAB 4 HASIL PENELITIAN

Hasil penelitian perendaman i nfusa meniran (Phyllantus niruri) pada i kan gurame
(Osphronemus gourame) yang diinfeksi V. anguillarum dilakukan langkah awal dengan cara
memisahkan ikan gu rame berdasarkan masing-masing perlakuan, ikan di infeksi suspensi V.
anguillarum dengan jumlah 10 6CFU/ml, virulensi in feksi V. anguillarum pada i kan