VALIDASI METODE ANALISIS CAMPURAN VITAMIN B1, B 2, DAN B6 DALAM SEDIAAN TABLET DENGAN KCKT MENGGUNAKAN KOLOM RP-18 ULTRA HIGH BASE DEACTIVATED PURITY SILICA

  SKRIPSI

  

VALIDASI METODE ANALISIS CAMPURAN VITAMIN B

  1 , B 2, DAN B

  6 DALAM SEDIAAN TABLET DENGAN KCKT

MENGGUNAKAN KOLOM RP-18

  

ULTRA HIGH BASE DEACTIVATED PURITY SILICA

DYAH FOURRISKA RINI

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS AIRLANGGA

BAGIAN KIMIA FARMASI

SURABAYA

2012

  

LEMBAR PERSETUJUAN

PUBLIKASI KARYA ILMIAH

  Demi perkembangan ilmu pengetahuan, saya menyetujui skripsi / karya ilmiah saya, dengan judul : VALIDASI METODE ANALISIS CAMPURAN VITAMIN B , B , DAN B DALAM

  1

  2

  6 SEDIAAN TABLET DENGAN KCKT MENGGUNAKAN

  KOLOM RP-18 ULTRA HIGH BASE DEACTIVATED PURITY

  

SILICA untuk dipublikasikan atau ditampilkan di internet, digital

library Perpustakaan Universitas Airlangga atau media lain untuk

  kepentingan akademik sebatas sesuai dengan undang-undang Hak Cipta.

  Demikian pernyataan persetujuan publikasi skripsi / karya ilmiah ini saya buat dengan sebenarnya.

  Surabaya, 09 Oktober 2012 Dyah Fourriska R.

  NIM : 050810237

LEMBAR PERNYATAAN

  Dengan ini saya menyatakan bahwa sesungguhnya hasil skripsi / tugas akhir ini adalah benar – benar merupakan hasil karya saya sendiri. Apabila di kemudian hari diketahui bahwa skripsi ini menggunakan data fiktif atau merupakan hasil dari plagiarism, maka saya bersedia menerima sanksi berupa pembatalan kelulusan dan atau pencabutan gelar yang saya peroleh.

  Surabaya, 09 Oktober 2012 Dyah Fourriska R.

  NIM : 050810237

  LEMBAR PENGESAHAN

  

VALIDASI METODE ANALISIS CAMPURAN VITAMIN B ,

  1 B , DAN B DALAM SEDIAAN TABLET DENGAN KCKT

  2

6 MENGGUNAKAN KOLOM RP-18

  ULTRA HIGH BASE DEACTIAVED PURITY SILICA

SKRIPSI

Dibuat untuk memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana

  

Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Airlangga

2012

Oleh :

DYAH FOURRISKA RINI

   NIM : 050810237

Disetujui Oleh:

Pembimbing Utama Pembimbing Serta

  

Prof. Dr. rer. nat. H. Moch. Yuwono, Apt., M.S Drs.Achmad Toto Poernomo, Apt., M.Si

NIP 196005051986011003 NIP 195909181987101001

KATA PENGANTAR

  Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi ini sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar sarjana farmasi pada Pakultas Farmasi Universitas Airlangga.

  Dalam penyusunan skripsi ini tidak lepas dari bantuan bebagai pihak, baik moril maupun materil. Oleh karena itu, pada kesempatan ini saya menyampaikan rasa terima kasih yang sedalam- dalamnya kepada :

  1. Rektor Universitas Airlangga, Prof. Dr. Fasich, Apt., MS. yang telah memberikan kesempatan untuk menyelesaikan pendidikan di Fakultas Farmasi Universitas Airlangga.

  2. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Airlangga, Dr. Hj.

  Umi Athijah, Apt., MS. atas kesempatan yang diberikan sehingga penulis dapat menyelesaikan pendidikan program sarjana.

  3. Prof. Dr. rer. nat. H. Moch. Yuwono, Apt., M.S. selaku pembimbing utama, atas semua bantuan, bimbingan, perhatian, nasehat dan kesabaran serta pengertiannya selama penulis menyelesaikan skripsi ini.

  4. Drs.Achmad Toto Poernomo, Apt., M.Si selaku dosen pembimbing serta yang dengan segala kesabaran dan penuh pengertian memberikan dorongan, bimbingan, pengarahan serta saran-saran selama penulis menyelesaikan skripsi ini.

  5. Prof. Dr. GN. Astika dan Dra. Nuzul Wahyuningdyah, Apt. M.Si, selaku dosen penguji yang telah berkenan memberikan masukan dan saran sehingga menjadikan skripsi ini menjadi lebih baik.

  6. Bapak dan Ibu Dosen dan Staf Departemen Kimia Farmasi yang telah memberikan dukungan , masukan dan bantuan kepada saya sehingga skripsi ini dapat terselesaikan

  7. Papi, bunda, kakak-kakak semua (Yenie, Yayak, Theaz) dan Ade Rizky, serta keluarga besar yang penulis sayangi, terima kasih atas doa, cinta, kasih sayang, pengorbanan, perhatian, dorongan dan semangat yang begitu besar kepada penulis.

  8. Seluruh staf di Laboratorium Unit Layanan dan Pengujian Universitas Airlangga, terutama kepada mas Sri Gunarso yang telah banyak memberikan bantuan selama penyelesaian skripsi ini.

  9. Terima kasih untuk semua yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu, penulis ucapkan terima kasih sebanyak-banyaknya.

  Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih jauh dari sempurna. Untuk itu penulis mengharapkan masukan baik kritik maupun saran dari semua pihak. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat dan memberikan tambahan ilmu pengetahuan khususnya dalam bidang kefarmasian.

  Surabaya, 09 Oktober 2012 Penulis

  

RINGKASAN

Validasi Metode Analisis Campuran Vitamin B , B , dan B

  1

  2

  6 Dalam Sediaan Tablet Dengan KCKT Menggunakan Kolom

RP-18 Ultra High Base Deactivated Purity Silica

  Vitamin adalah senyawa – senyawa organik yang dibutuhkan untuk pertumbuhan normal dan mempertahankan hidup manusia, yang secara alami tidak mampu mensintesis senyawa – senyawa tersebut. Senyawa-senyawa tersebut diperlukan dan efektif dalam jumlah sedikit, tidak menghasilkan energi dan tidak digunakan sebagai unit pembangunan struktur tubuh organisme, tetapi asupannya harus teratur dan dalam jumlah yang cukup, serta sangat penting untuk transformasi energi dan pengaturan metabolisme tubuh (Andarwulan dan Koswara, 1992).

  Analisis kuantitatif multivitamin secara simultan sulit untuk dilakukan karena terdapat senyawa beragam, sehingga membutuhkan suatu proses pemisahan. Metode kromatografi pada dasarnya adalah seatu teknik pemisahan, sehingga sesuai untuk analisis multivitamin. Metode yang digunakan dalam analisis ini adalah Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT). Dari data literatur, untuk analisis kuantitatif multivitamin secara simultan dapat digunakan kolom RP-18 Ultra High Base Deactivated Purity

  

Silica (150 mm x 4,6 mm, ukuran partikel 3 µm), fase gerak yang

  terdiri dari Trifluoroacetic Acid (TFA) 0,01% pH = 3,9 (pelarut A) dan methanol (pelarut B), dan eluasi yang digunakan adalah gradien (Mandiola, 2007). Pengamatan dilakukan pada panjang gelombang 280 nm (Kledjus, 2004). Setelah dilakukan optimasi, diperoleh kondisi KCKT yang sesuai untuk analisis kuantitatif multivitamin secara simultan, yakni pengamatan dilakukan pada suhu 15°C, dan elusi yang digunakan adalah elusi gradien.

  Tahap pertama uji validasi metode adalah uji selektivitas. Harga Rs dan α masing – masing vitamin memenuhi persyaratan yakni harga Rs

  ≥ 1,5 dan harga α > 1 yaitu, untuk Rs vitamin B

  1

  2

  sebesar 29,96 sebesar 3,65 dan α sebesar 1,34. Untuk Rs vitamin B

  dan α sebesar 1,95. Untuk Rs vitamin B

  6 sebesar 4,55 dan α sebesar

  1,29. Pada penentuan batas deteksi (BD) dan batas kuantitasi (BK) diperoleh hasil, yaitu untuk vitamin B harga BD sebesar 1,1 µg/mL

  1

  dan harga BK sebesar 3,4 µg/mL. untuk vitamin B harga BD

  2

  sebesar 0,7 µg/mL dan harga BK sebesar 2,3 µg/mL. Dan untuk vitamin B harga BD sebesar 1,7 µg/mL dan harga BK sebesar 5,2

  6

  µg/mL. Hasil penentuan linieritas diperoleh persamaan regresi vitamin B , Y = 8,57873x – 4,28421 (r hitung = 0,9994; r tabel =

  1

  0,754; VXo = 2,52 %). Persamaan regresi vitamin B , Y =

  6

  14,38781x + 1,33948 (r hitung = 0,9998; r tabel = 0,754; VXo = 4,89%). Dan persamaan regresi untuk vitamin B , Y = 24,12112x +

  2

  3,93074 (r hitung = 0,9999; r tabel = 0,754; VXo = 1,57 %). Dari data tersebut dapat dinyatakan bahwa hasil regresi linear memenuhi persyaratan vaidasi metode.

  Dari tahap akurasi dan presisi metode diperoleh harga rata- rata persentase recovery vitamin B adalah 82,98% ± 3,56 dengan

  

1 koefisien variasi (4,41%-6,58%). Harga rata-rata persentase recovery vitamin B adalah 104,26% + 0,80 dengan koefisien variasi

  2

  (0,80%-1,36%). Dan harga rata-rata persentase recovery vitamin B

  6 adalah B 99,52% ± 3,75 dengan koefisien variasi (0,73-1,14%).

6 Dari data tersebut dapat dinyatakan bahwa hasil akurasi memenuhi

  persyaratan vaidasi metode yaitu nilai persen recovery antara 80 – 110 % dan % KV tidak lebih dari atau sama dengan 7,3 %. Tahap selanjutnya dari validasi metode yaitu presisi atau ketelitian dari instrumen yang digunakan. Hasilnya didapatkan koefisien variasi (KV) vitamin B sebesar 0,71%, vitamin B sebesar 1,40%, dan

  1

  2

  vitamin B sebesar 0,33%. Berdasarkan data tersebut presisi dari

  6 penelitian ini memenuhi persyaratan validasi yang telah di tentukan.

  Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa validasi metode untuk vitamin B , B , dan B dengan menggunakan KCKT

  1

  2

  6

  yang digunakan memenuhi persyaratan validasi untuk selektivitas, linieritas, batas deteksi dan batas kuantitasi, presisi dan akurasi.

  

ABSTRACT

,

METHOD VALIDATION FOR SIMULTANEOUS ANALYSIS OF B

  1 B , AND B

   VITAMINS BY HPLC USING ULTRA HIGH BASE

  2

6 DEACTIVATED PURITY SILICA COLUMN

  Dyah Fourriska Rini The objective of the present study was to optimize and validate the method for the simultaneous analysis of B , B , and B vitamins by HPLC

  1

  2

  6

  using RP-18 Ultra High Purity Silica column (150 mm x 4.6 mm, 3 µ m particle size). The best separation was achieved by linear gradient elution with a mobile phase consisting of 0.01% trifluoroacetic acid of pH 3.9

• 1

  (solvent A) and methanol (solvent B) at the flow rate of 0.5 ml min with UV detection set at 280 nm. The separation showed symmetrical peaks and good resolution of the vitamins. The method demonstrated good accuracy, precision and linearity of area responses within the concentration range used, with r

  ≥ 0.999. The method was successfully applied for the analysis of vitamin in samples.

  Keywords : B 1 , B 2 , and B 6 vitamin, HPLC, method validation,