Pengaruh Pemaparan Asap Rokok Herbal Dan Asap Rokok Mild Terhadap Mikrostruktur Hati Mencit (Mus musculus L.)
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
43
Lampiran 1. Surat Rekomendasi Persetujuan Kode Etik Penelitian Kesehatan
43
Universitas Sumatera Utara
44
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 2. Data Berat Badan Mencit Setelah Dipaparkan Asap Rokok
Perlakuan
K
PA
PB
Total
Rata-rata Berat
Badan Mencit
34.35±1.23
32.65±1.56
31.48±3.06
309.17
293.82
283.29
Notasi
a
ab
b
Keterangan: K: kontrol tanpa perlakuan; PA: perlakuan dengan pemaparan asap
rokok herbal; PB: perlakuan dengan pemaparan asap rokok mild
44
Universitas Sumatera Utara
45
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 3. Analisis Statistik Rerata Berat Badan Mencit Setelah
Dipaparkan Asap Rokok
Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova
Perlakuan
Statistic
Berat_Badan K
df
Sig.
.174
PA
Shapiro-Wilk
.151
PB
.165
a. Lilliefors Significance Correction
Statistic
Df
Sig.
9
.200*
.947
9
.657
9
.200
*
.971
9
.904
.200
*
.965
9
.848
9
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variance
Levene
Statistic
Berat_Badan Based on Mean
df1
df2
Sig.
2.372
2
24
.115
Based on Median
2.194
2
24
.133
Based on Median and
with adjusted df
2.194
2
14.789
.146
Based on trimmed mean
2.409
2
24
.111
Oneway
ANOVA
Berat_Badan
Sum of
Squares
df
Mean Square
Between Groups
Within Groups
37.640
106.305
2
24
Total
143.945
26
18.820
4.429
F
Sig.
4.249
.026
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Berat_Badan
Bonferroni
(J)
Perlakuan
K
PA
1.70556
.99212
.295
-.8478
4.2589
PB
2.87556
*
.99212
.024
.3222
5.4289
K
-1.70556
.99212
.295
-4.2589
.8478
PB
1.17000
.99212
.750
-1.3834
3.7234
*
.99212
.024
-5.4289
-.3222
PA
-1.17000
.99212
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
.750
-3.7234
1.3834
PA
PB
K
Mean
Difference (I-J) Std. Error
95% Confidence Interval
(I)
Perlakuan
-2.87556
Sig.
Lower Bound
Upper Bound
45
Universitas Sumatera Utara
46
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 4. Data Berat Hati Mencit Setelah Dipaparkan Asap Rokok
Perlakuan
K
PA
PB
Total
Rata-rata Berat
Hepar Mencit
1,84±0,17
1,74±0,34
1,72±0,24
16,55
15,69
15,47
Notasi
a
a
a
Keterangan: K: kontrol tanpa perlakuan; PA: perlakuan dengan pemaparan asap
rokok herbal; PB: perlakuan dengan pemaparan asap rokok mild
46
Universitas Sumatera Utara
47
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 5. Analisis Statistik Rerata Berat Hati Mencit Setelah Dipaparkan
Asap Rokok
Tests of Normality
Kelom
pok
Kolmogorov-Smirnova
Statistic
Berat_Hepar K
df
.125
PA
.174
PB
.303
a. Lilliefors Significance Correction
Shapiro-Wilk
Sig.
Statistic
Df
Sig.
9
.200*
.971
9
.904
9
*
.917
9
.365
.017
.793
9
.017
.200
9
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variance
Levene
Statistic
Berat_Hepar Based on Mean
df1
df2
Sig.
1.025
2
24
.374
Based on Median
.810
2
24
.457
Based on Median and
with adjusted df
.810
2
18.762
.460
Based on trimmed mean
.939
2
24
.405
NPar Tests
Kruskal-Wallis Test
Ranks
Kelom
pok
Berat_Hepar K
Test Statisticsa,b
N
Mean Rank
9
16.72
PA
9
14.44
PB
9
10.83
Total
27
NPAR TESTS
/M-W= Berat_Hepar BY Kelompok(1 2)
/MISSING ANALYSIS.
Berat_Hepar
Chi-Square
2.524
df
2
Asymp.
.283
Sig.
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable:
Kelompok
47
Universitas Sumatera Utara
48
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Ranks
Test Statisticsb
Mean
Rank
Kelompok N
Berat_Hepar K
PA
Total
Sum of
Ranks
9
10.00
90.00
9
9.00
81.00
18
NPAR TESTS
/M-W= Berat_Hepar BY Kelompok(1 3)
/MISSING ANALYSIS.
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Ranks
Mann-Whitney U
36.000
Wilcoxon W
81.000
Z
-.397
Asymp. Sig. (2-tailed)
.691
Exact Sig. [2*(1-tailed
.730a
Sig.)]
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Test Statisticsb
Kelompok
Berat_Hepar K
PB
Total
Mean
Rank
N
Sum of
Ranks
9
11.72
105.50
9
7.28
65.50
18
NPAR TESTS
/M-W= Berat_Hepar BY Kelompok(2 3)
/MISSING ANALYSIS.
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Ranks
Berat_Hepar
Mann-Whitney U
20.500
Wilcoxon W
65.500
Z
-1.769
Asymp. Sig. (2-tailed)
.077
Exact Sig. [2*(1-tailed
.077a
Sig.)]
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Test Statisticsb
Kelom
pok
N
Mean
Rank
Sum of
Ranks
Berat_Hepar PA
9
10.44
94.00
PB
9
8.56
77.00
Total
Berat_Hepar
18
Berat_Hepar
Mann-Whitney U
32.000
Wilcoxon W
77.000
Z
-.753
Asymp. Sig. (2-tailed)
.452
Exact Sig. [2*(1-tailed
.489a
Sig.)]
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
48
Universitas Sumatera Utara
49
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 6. Data Tingkat Kerusakan Hepatosit Setelah Pemaparan Asap
Rokok
Perlakuan
K
PA
PB
Total
Rerata Tingkat
Kerusakan Hati
70,15 ± 32,37
187,04 ± 69,85
86,82 ± 39,01
631,33
1683,33
781,34
Notasi
a
b
a
Keterangan: K: kontrol tanpa perlakuan; PA: perlakuan dengan pemaparan asap
rokok herbal; PB: perlakuan dengan pemaparan asap rokok mild
49
Universitas Sumatera Utara
50
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 7. Analisis Statistik Tingkat Kerusakan Hepatosit Setelah
Dipaparkan Asap Rokok
Tests of Normality
Kelom
pok
Perlakuan
Kolmogorov-Smirnova
Statistic
K
df
Sig.
.228
PA
Shapiro-Wilk
.084
PB
.253
a. Lilliefors Significance Correction
Statistic
df
Sig.
9
.194
.905
9
.281
9
*
.991
9
.997
.101
.883
9
.168
.200
9
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variance
Levene
Statistic
Perlakuan
df1
df2
Sig.
Based on Mean
2.706
2
24
.087
Based on Median
2.277
2
24
.124
Based on Median and
with adjusted df
2.277
2
19.199
.130
Based on trimmed mean
2.653
2
24
.091
Oneway
ANOVA
Perlakuan
Sum of
Squares
Between Groups
Within Groups
Total
df
Mean Square
71955.295
59595.828
2
24
131551.122
26
F
35977.647
2483.159
Sig.
14.489
.000
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable:Perlakuan
(I)
Kelompok
Bon
ferr
oni
K
PA
PB
(J)
Kelompok
95% Confidence Interval
Mean
Difference
(I-J)
PA
-116.88889
PB
-16.66778
*
Std. Error
Sig.
Lower
Bound
Upper Bound
23.49070
.000
-177.3455
-56.4322
23.49070
1.000
-77.1244
43.7889
116.88889
*
23.49070
.000
56.4322
177.3455
PB
100.22111
*
23.49070
.001
39.7645
160.6778
K
16.66778
23.49070
1.000
-43.7889
77.1244
23.49070
.001
-160.6778
-39.7645
K
PA
-100.22111
*
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
50
Universitas Sumatera Utara
51
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 8. Data Rerata Pengamatan Inti Sel Hati Mencit Setelah
Dipaparkan Asap Rokok
Perlakuan
K
PA
PB
Total
Tingkat Kerusakan
Inti Sel Hati
51,26 ± 15,91
76,89 ± 28,79
58,04 ± 15,47
461,33
692,00
522,33
Notasi
a
b
ab
Keterangan: K: kontrol tanpa perlakuan; PA: perlakuan dengan pemaparan asap
rokok herbal; PB: perlakuan dengan pemaparan asap rokok mild
51
Universitas Sumatera Utara
52
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 9. Analisis Statistik Pengamatan Inti Sel Setelah Dipaparkan Asap
Rokok
Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova
Shapiro-Wilk
Kelompok
Statistic
df
Sig.
Statistic
df
Sig.
K
.280
9
.040
.751
9
.005
9
.200
*
.843
9
.062
.200
*
.959
9
.787
Bentuk_Inti
PA
.212
PB
.198
9
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variance
Levene
Statistic
Bentuk_Inti Based on Mean
df1
df2
Sig.
1.904
2
24
.171
Based on Median
.997
2
24
.384
Based on Median and
with adjusted df
.997
2
16.678
.390
1.603
2
24
.222
Based on trimmed mean
NPar Tests
Kruskal-Wallis Test
Ranks
Kelompok
Bentuk_Inti K
Test Statisticsa,b
Bentuk_Inti
N Mean Rank
9
8.83
PA
9
19.22
PB
9
13.94
Total
27
NPAR TESTS
/M-W= Bentuk_Inti BY Kelompok (1 2)
/MISSING ANALYSIS.
Chi-Square 7.719
df
2
Asymp.
.021
Sig.
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable:
Kelompok
52
Universitas Sumatera Utara
53
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Test Statisticsb
Bentuk_Inti
Ranks
Kelompok
Mean
Rank
N
Bentuk_Inti K
PA
Total
Sum of
Ranks
9
6.17
55.50
9
12.83
115.50
18
NPAR TESTS
/M-W= Bentuk_Inti BY Kelompok(1 3)
/MISSING ANALYSIS.
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Mann-Whitney U
10.500
Wilcoxon W
55.500
Z
-2.652
Asymp. Sig. (2-tailed)
.008
Exact Sig. [2*(1-tailed
.006a
Sig.)]
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Test Statisticsb
Bentuk_Inti
Ranks
Bentuk_Inti
Kelompok
N
Mean
Rank
Sum of
Ranks
K
9
7.67
69.00
PB
9
11.33
102.00
Total
18
NPAR TESTS
/M-W= Bentuk_Inti BY Kelompok(2 3)
/MISSING ANALYSIS.
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Test Statisticsb
Ranks
Bentuk_Inti
Mann-Whitney U
24.000
Wilcoxon W
69.000
Z
-1.458
Asymp. Sig. (2-tailed)
.145
Exact Sig. [2*(1-tailed
.161a
Sig.)]
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Bentuk_Inti
Kelompok
N
Mean
Rank
Sum of
Ranks
PA
9
11.39
102.50
PB
9
7.61
68.50
Total
18
Mann-Whitney U
23.500
Wilcoxon W
68.500
Z
-1.503
Asymp. Sig. (2-tailed)
.133
Exact Sig. [2*(1-tailed
.136a
Sig.)]
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
53
Universitas Sumatera Utara
54
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 10. Pengamatan Morfologi Dan Berat Hati
Mus musculus L.
didislokasi
dibedah
diambil organ hati
diamati permukaan luar dan warna hati
Hasil
54
Universitas Sumatera Utara
55
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 11. Pembuatan Preparat Histologi Hati
Organ Hati
Dicuci dengan NaCl 0,9%
Difiksasi (dimasukkan ke dalam fiksatif Bouin)
Washing (dengan menggunakan alkohol 70%, dilakukan
berkali-kali hingga jernih), direndam selama 1 malam
Dehidrasi dilakukan dengan merendam hati ke dalam alkohol
bertingkat yaitu konsentrasi 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%,
96% dan 100% selama 1 jam pada masing-masing konsentrasi
Clearing dilakukan dengan merendam hati ke dalam xylol
selama 1 malam
Infiltrasi
Embedding dilakukan dengan meletakkan hati pada kotak
berbentuk segi empat yang telah dipersiapkan sebelumnya
sebagai cetakan. Dituang parafin yang telah cair ke dalam
kotak tersebut, kemudian hati ditanam dan diatur posisinya
lalu diberi label. Dibiarkan sampai dingin dan membeku
sehingga membentuk blok parafin dan dimasukkan ke dalam
freezer. Dilakukan penempelan blok-blok parafin pada holder
yang terbuat dari kayu berukuran 2x2 cm yang berbentuk
persegi.
Blok Parafin
55
Universitas Sumatera Utara
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
56
Blok Parafin
Cutting dilakukan dengan memotong blok-blok parafin yang
telah diholder pada mikrotom sehingga membentuk pita-pita
parafin dengan ukuran ketebalan 6-10 µm
Pita Parafin
Attaching dilakukan dengan mengambil beberapa pita parafin
dengan skapel, kemudian diletakkan pada object glass, dan
dicelupkan pada air dingin dan air hangat. Lalu diletakkan di
atas hotplate beberapa detik untuk melekatkan pita parafin
pada object glass
Deparafinasi dilakukan dengan cara mencelupkan objek pada
xylol sampai parafin habis kira-kira selama ± 15 menit
Dealkoholisasi dilakukan dengan mencelupkan object glass ke
dalam alkohol absolut, 96%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40% dan
30%
Pewarnaan sediaan hati diwarnai dengan menggunakan
Hematoxylin Erlich selama 3-5 menit, lalu dicuci dengan
dengan air mengalir ± 3 menit, kemudian dimasukkan ke
dalam alkohol 30%, 50%, dan 70%%, lalu dimasukkan ke
dalam larutan pewarna Eosin 0,5% dalam alkohol selama 1-3
menit, lalu dimasukkan ke dalam aquadest dan kemudian
preparat dimasukkan berturut-turut ke dalam alkohol 30%,
40%, 50%, 60%, 70%, 80%, dan 96%, alkohol absolut,
dikeringkan dengan kertas tisu, selanjutnya preparat
dimasukkan dalam chamber berisi xylol
Mounting dilakukan dengan menutup preparat dengan canada
balsam. Diusahakan supaya tidak terdapat gelembung udara.
Preparat diberi label
Diamati kerusakan hepatosit normal, nekrosis, fibrosis dan
sirosis
Hasil
56
Universitas Sumatera Utara
57
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 12. Foto Penelitian
Bahan Uji
Dislokasi Leher
Pemberian Perlakuan
57
Universitas Sumatera Utara
43
Lampiran 1. Surat Rekomendasi Persetujuan Kode Etik Penelitian Kesehatan
43
Universitas Sumatera Utara
44
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 2. Data Berat Badan Mencit Setelah Dipaparkan Asap Rokok
Perlakuan
K
PA
PB
Total
Rata-rata Berat
Badan Mencit
34.35±1.23
32.65±1.56
31.48±3.06
309.17
293.82
283.29
Notasi
a
ab
b
Keterangan: K: kontrol tanpa perlakuan; PA: perlakuan dengan pemaparan asap
rokok herbal; PB: perlakuan dengan pemaparan asap rokok mild
44
Universitas Sumatera Utara
45
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 3. Analisis Statistik Rerata Berat Badan Mencit Setelah
Dipaparkan Asap Rokok
Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova
Perlakuan
Statistic
Berat_Badan K
df
Sig.
.174
PA
Shapiro-Wilk
.151
PB
.165
a. Lilliefors Significance Correction
Statistic
Df
Sig.
9
.200*
.947
9
.657
9
.200
*
.971
9
.904
.200
*
.965
9
.848
9
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variance
Levene
Statistic
Berat_Badan Based on Mean
df1
df2
Sig.
2.372
2
24
.115
Based on Median
2.194
2
24
.133
Based on Median and
with adjusted df
2.194
2
14.789
.146
Based on trimmed mean
2.409
2
24
.111
Oneway
ANOVA
Berat_Badan
Sum of
Squares
df
Mean Square
Between Groups
Within Groups
37.640
106.305
2
24
Total
143.945
26
18.820
4.429
F
Sig.
4.249
.026
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Berat_Badan
Bonferroni
(J)
Perlakuan
K
PA
1.70556
.99212
.295
-.8478
4.2589
PB
2.87556
*
.99212
.024
.3222
5.4289
K
-1.70556
.99212
.295
-4.2589
.8478
PB
1.17000
.99212
.750
-1.3834
3.7234
*
.99212
.024
-5.4289
-.3222
PA
-1.17000
.99212
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
.750
-3.7234
1.3834
PA
PB
K
Mean
Difference (I-J) Std. Error
95% Confidence Interval
(I)
Perlakuan
-2.87556
Sig.
Lower Bound
Upper Bound
45
Universitas Sumatera Utara
46
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 4. Data Berat Hati Mencit Setelah Dipaparkan Asap Rokok
Perlakuan
K
PA
PB
Total
Rata-rata Berat
Hepar Mencit
1,84±0,17
1,74±0,34
1,72±0,24
16,55
15,69
15,47
Notasi
a
a
a
Keterangan: K: kontrol tanpa perlakuan; PA: perlakuan dengan pemaparan asap
rokok herbal; PB: perlakuan dengan pemaparan asap rokok mild
46
Universitas Sumatera Utara
47
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 5. Analisis Statistik Rerata Berat Hati Mencit Setelah Dipaparkan
Asap Rokok
Tests of Normality
Kelom
pok
Kolmogorov-Smirnova
Statistic
Berat_Hepar K
df
.125
PA
.174
PB
.303
a. Lilliefors Significance Correction
Shapiro-Wilk
Sig.
Statistic
Df
Sig.
9
.200*
.971
9
.904
9
*
.917
9
.365
.017
.793
9
.017
.200
9
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variance
Levene
Statistic
Berat_Hepar Based on Mean
df1
df2
Sig.
1.025
2
24
.374
Based on Median
.810
2
24
.457
Based on Median and
with adjusted df
.810
2
18.762
.460
Based on trimmed mean
.939
2
24
.405
NPar Tests
Kruskal-Wallis Test
Ranks
Kelom
pok
Berat_Hepar K
Test Statisticsa,b
N
Mean Rank
9
16.72
PA
9
14.44
PB
9
10.83
Total
27
NPAR TESTS
/M-W= Berat_Hepar BY Kelompok(1 2)
/MISSING ANALYSIS.
Berat_Hepar
Chi-Square
2.524
df
2
Asymp.
.283
Sig.
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable:
Kelompok
47
Universitas Sumatera Utara
48
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Ranks
Test Statisticsb
Mean
Rank
Kelompok N
Berat_Hepar K
PA
Total
Sum of
Ranks
9
10.00
90.00
9
9.00
81.00
18
NPAR TESTS
/M-W= Berat_Hepar BY Kelompok(1 3)
/MISSING ANALYSIS.
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Ranks
Mann-Whitney U
36.000
Wilcoxon W
81.000
Z
-.397
Asymp. Sig. (2-tailed)
.691
Exact Sig. [2*(1-tailed
.730a
Sig.)]
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Test Statisticsb
Kelompok
Berat_Hepar K
PB
Total
Mean
Rank
N
Sum of
Ranks
9
11.72
105.50
9
7.28
65.50
18
NPAR TESTS
/M-W= Berat_Hepar BY Kelompok(2 3)
/MISSING ANALYSIS.
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Ranks
Berat_Hepar
Mann-Whitney U
20.500
Wilcoxon W
65.500
Z
-1.769
Asymp. Sig. (2-tailed)
.077
Exact Sig. [2*(1-tailed
.077a
Sig.)]
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Test Statisticsb
Kelom
pok
N
Mean
Rank
Sum of
Ranks
Berat_Hepar PA
9
10.44
94.00
PB
9
8.56
77.00
Total
Berat_Hepar
18
Berat_Hepar
Mann-Whitney U
32.000
Wilcoxon W
77.000
Z
-.753
Asymp. Sig. (2-tailed)
.452
Exact Sig. [2*(1-tailed
.489a
Sig.)]
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
48
Universitas Sumatera Utara
49
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 6. Data Tingkat Kerusakan Hepatosit Setelah Pemaparan Asap
Rokok
Perlakuan
K
PA
PB
Total
Rerata Tingkat
Kerusakan Hati
70,15 ± 32,37
187,04 ± 69,85
86,82 ± 39,01
631,33
1683,33
781,34
Notasi
a
b
a
Keterangan: K: kontrol tanpa perlakuan; PA: perlakuan dengan pemaparan asap
rokok herbal; PB: perlakuan dengan pemaparan asap rokok mild
49
Universitas Sumatera Utara
50
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 7. Analisis Statistik Tingkat Kerusakan Hepatosit Setelah
Dipaparkan Asap Rokok
Tests of Normality
Kelom
pok
Perlakuan
Kolmogorov-Smirnova
Statistic
K
df
Sig.
.228
PA
Shapiro-Wilk
.084
PB
.253
a. Lilliefors Significance Correction
Statistic
df
Sig.
9
.194
.905
9
.281
9
*
.991
9
.997
.101
.883
9
.168
.200
9
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variance
Levene
Statistic
Perlakuan
df1
df2
Sig.
Based on Mean
2.706
2
24
.087
Based on Median
2.277
2
24
.124
Based on Median and
with adjusted df
2.277
2
19.199
.130
Based on trimmed mean
2.653
2
24
.091
Oneway
ANOVA
Perlakuan
Sum of
Squares
Between Groups
Within Groups
Total
df
Mean Square
71955.295
59595.828
2
24
131551.122
26
F
35977.647
2483.159
Sig.
14.489
.000
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable:Perlakuan
(I)
Kelompok
Bon
ferr
oni
K
PA
PB
(J)
Kelompok
95% Confidence Interval
Mean
Difference
(I-J)
PA
-116.88889
PB
-16.66778
*
Std. Error
Sig.
Lower
Bound
Upper Bound
23.49070
.000
-177.3455
-56.4322
23.49070
1.000
-77.1244
43.7889
116.88889
*
23.49070
.000
56.4322
177.3455
PB
100.22111
*
23.49070
.001
39.7645
160.6778
K
16.66778
23.49070
1.000
-43.7889
77.1244
23.49070
.001
-160.6778
-39.7645
K
PA
-100.22111
*
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
50
Universitas Sumatera Utara
51
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 8. Data Rerata Pengamatan Inti Sel Hati Mencit Setelah
Dipaparkan Asap Rokok
Perlakuan
K
PA
PB
Total
Tingkat Kerusakan
Inti Sel Hati
51,26 ± 15,91
76,89 ± 28,79
58,04 ± 15,47
461,33
692,00
522,33
Notasi
a
b
ab
Keterangan: K: kontrol tanpa perlakuan; PA: perlakuan dengan pemaparan asap
rokok herbal; PB: perlakuan dengan pemaparan asap rokok mild
51
Universitas Sumatera Utara
52
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 9. Analisis Statistik Pengamatan Inti Sel Setelah Dipaparkan Asap
Rokok
Tests of Normality
Kolmogorov-Smirnova
Shapiro-Wilk
Kelompok
Statistic
df
Sig.
Statistic
df
Sig.
K
.280
9
.040
.751
9
.005
9
.200
*
.843
9
.062
.200
*
.959
9
.787
Bentuk_Inti
PA
.212
PB
.198
9
a. Lilliefors Significance Correction
*. This is a lower bound of the true significance.
Test of Homogeneity of Variance
Levene
Statistic
Bentuk_Inti Based on Mean
df1
df2
Sig.
1.904
2
24
.171
Based on Median
.997
2
24
.384
Based on Median and
with adjusted df
.997
2
16.678
.390
1.603
2
24
.222
Based on trimmed mean
NPar Tests
Kruskal-Wallis Test
Ranks
Kelompok
Bentuk_Inti K
Test Statisticsa,b
Bentuk_Inti
N Mean Rank
9
8.83
PA
9
19.22
PB
9
13.94
Total
27
NPAR TESTS
/M-W= Bentuk_Inti BY Kelompok (1 2)
/MISSING ANALYSIS.
Chi-Square 7.719
df
2
Asymp.
.021
Sig.
a. Kruskal Wallis Test
b. Grouping Variable:
Kelompok
52
Universitas Sumatera Utara
53
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Test Statisticsb
Bentuk_Inti
Ranks
Kelompok
Mean
Rank
N
Bentuk_Inti K
PA
Total
Sum of
Ranks
9
6.17
55.50
9
12.83
115.50
18
NPAR TESTS
/M-W= Bentuk_Inti BY Kelompok(1 3)
/MISSING ANALYSIS.
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Mann-Whitney U
10.500
Wilcoxon W
55.500
Z
-2.652
Asymp. Sig. (2-tailed)
.008
Exact Sig. [2*(1-tailed
.006a
Sig.)]
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Test Statisticsb
Bentuk_Inti
Ranks
Bentuk_Inti
Kelompok
N
Mean
Rank
Sum of
Ranks
K
9
7.67
69.00
PB
9
11.33
102.00
Total
18
NPAR TESTS
/M-W= Bentuk_Inti BY Kelompok(2 3)
/MISSING ANALYSIS.
NPar Tests
Mann-Whitney Test
Test Statisticsb
Ranks
Bentuk_Inti
Mann-Whitney U
24.000
Wilcoxon W
69.000
Z
-1.458
Asymp. Sig. (2-tailed)
.145
Exact Sig. [2*(1-tailed
.161a
Sig.)]
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
Bentuk_Inti
Kelompok
N
Mean
Rank
Sum of
Ranks
PA
9
11.39
102.50
PB
9
7.61
68.50
Total
18
Mann-Whitney U
23.500
Wilcoxon W
68.500
Z
-1.503
Asymp. Sig. (2-tailed)
.133
Exact Sig. [2*(1-tailed
.136a
Sig.)]
a. Not corrected for ties.
b. Grouping Variable: Kelompok
53
Universitas Sumatera Utara
54
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 10. Pengamatan Morfologi Dan Berat Hati
Mus musculus L.
didislokasi
dibedah
diambil organ hati
diamati permukaan luar dan warna hati
Hasil
54
Universitas Sumatera Utara
55
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 11. Pembuatan Preparat Histologi Hati
Organ Hati
Dicuci dengan NaCl 0,9%
Difiksasi (dimasukkan ke dalam fiksatif Bouin)
Washing (dengan menggunakan alkohol 70%, dilakukan
berkali-kali hingga jernih), direndam selama 1 malam
Dehidrasi dilakukan dengan merendam hati ke dalam alkohol
bertingkat yaitu konsentrasi 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%,
96% dan 100% selama 1 jam pada masing-masing konsentrasi
Clearing dilakukan dengan merendam hati ke dalam xylol
selama 1 malam
Infiltrasi
Embedding dilakukan dengan meletakkan hati pada kotak
berbentuk segi empat yang telah dipersiapkan sebelumnya
sebagai cetakan. Dituang parafin yang telah cair ke dalam
kotak tersebut, kemudian hati ditanam dan diatur posisinya
lalu diberi label. Dibiarkan sampai dingin dan membeku
sehingga membentuk blok parafin dan dimasukkan ke dalam
freezer. Dilakukan penempelan blok-blok parafin pada holder
yang terbuat dari kayu berukuran 2x2 cm yang berbentuk
persegi.
Blok Parafin
55
Universitas Sumatera Utara
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
56
Blok Parafin
Cutting dilakukan dengan memotong blok-blok parafin yang
telah diholder pada mikrotom sehingga membentuk pita-pita
parafin dengan ukuran ketebalan 6-10 µm
Pita Parafin
Attaching dilakukan dengan mengambil beberapa pita parafin
dengan skapel, kemudian diletakkan pada object glass, dan
dicelupkan pada air dingin dan air hangat. Lalu diletakkan di
atas hotplate beberapa detik untuk melekatkan pita parafin
pada object glass
Deparafinasi dilakukan dengan cara mencelupkan objek pada
xylol sampai parafin habis kira-kira selama ± 15 menit
Dealkoholisasi dilakukan dengan mencelupkan object glass ke
dalam alkohol absolut, 96%, 80%, 70%, 60%, 50%, 40% dan
30%
Pewarnaan sediaan hati diwarnai dengan menggunakan
Hematoxylin Erlich selama 3-5 menit, lalu dicuci dengan
dengan air mengalir ± 3 menit, kemudian dimasukkan ke
dalam alkohol 30%, 50%, dan 70%%, lalu dimasukkan ke
dalam larutan pewarna Eosin 0,5% dalam alkohol selama 1-3
menit, lalu dimasukkan ke dalam aquadest dan kemudian
preparat dimasukkan berturut-turut ke dalam alkohol 30%,
40%, 50%, 60%, 70%, 80%, dan 96%, alkohol absolut,
dikeringkan dengan kertas tisu, selanjutnya preparat
dimasukkan dalam chamber berisi xylol
Mounting dilakukan dengan menutup preparat dengan canada
balsam. Diusahakan supaya tidak terdapat gelembung udara.
Preparat diberi label
Diamati kerusakan hepatosit normal, nekrosis, fibrosis dan
sirosis
Hasil
56
Universitas Sumatera Utara
57
DEPARTEMEN BIOLOGI FMIPA USU
Lampiran 12. Foto Penelitian
Bahan Uji
Dislokasi Leher
Pemberian Perlakuan
57
Universitas Sumatera Utara