Pengaruh Epigalocatechin-3-Gallat (EGCG) dan Epigallocatechin (EGC) Dalam Teh Hijau Terhadap Proliferasi Sel Leukosit Mencit Jantan Galur Swiss Webster Yang Diinduksi Colitis Dengan Dextran Sulphate Sodium (DSS).

ABSTRAK
PENGARUH PEMBERIAN EPIGALLOCATECHIN-3-GALLAT (EGCG)
DAN EPIGALLOCATECHIN (EGC) DALAM TEH HIJAU TERHADAP
PROLIFERASI SEL LEUKOSIT MENCIT JANTAN GALUR Swiss
Webster YANG DIINDUKSI COLITIS DENGAN DEXTRAN SULPHATE
SODIUM (DSS)
Prisca Larasati, 2009; Pembimbing I: Sugiarto Puradisastra, dr., M.Kes.
Pembimbing II: Teresa Liliana Wargasetia, S.Si, M.Kes
Teh hijau merupakan minuman yang sangat populer di dunia. Selain
sebagai antioksidan, kandungan utama dalam teh hijau, yaitu epigallocatechin-3gallat (EGCG) dan epigallocatechin (EGC), ternyata memiliki fungsi sebagai
immunomodulator. Salah satu penyakit yang disebabkan kegagalan sistem imun
adalah Ulcerative Colitis (UC) yang merupakan suatu penyakit inflamasi kronis
pada mukosa kolon.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah EGCG dan EGC
berperan terhadap proliferasi sel leukosit pada mencit yang diiduksi colitis dengan
Dextran Sulfate Sodium (DSS).
Penelitian bersifat prospektif eksperimental komparatif laboratorium
sungguhan dengan Rancang Acak Lengkap (RAL). Mencit jantan galur Swiss
Webster sebanyak 40 ekor dengan berat rata-rata 20-25 gram dibagi dalam 8
kelompok perlakuan (n=5). Kemudian diberi perlakuan aquadest; 2.5 % DSS
dalam air minum; 0.3 mg EGCG; 0,6 mg EGCG; 1,2 mg EGCG; 0.02 mg EGC;

0.04 mg EGC; dan 0.08 mg EGC. Setelah 14 hari perlakuan, kelompok perlakuan
yang diberi EGCG atau EGC berbagai dosis diinduksi colitis dengan DSS selama
7 hari. Pada hari ke-22 limpa diambil dan dilakukan pengukuran proliferasi sel
leukosit non-T dan limfosit dengan metode MTT assay menggunakan ELISA
plate reader.
Data yang diamati adalah jumlah sel leukosit dalam setiap sumuran.
Analisis data menggunakan uji One-way ANOVA, dilanjutkan dengan LSD
dengan α = 0,05. Hasil penelitian didapatkan EGCG 0,6 mg meningkatkan
proliferasi leukosit non-T dengan pemberian mitogen (LPS) 1 µg/ml dan 10 µg/ml
secara bermakna (p < 0,05). EGCG 0,3 mg dan 1,2 mg meningkatkan proliferasi
leukosit non-T dengan pemberian mitogen (LPS) 10 µg/ml secara bermakna (p <
0,05). Pemberian 1,2 mg EGCG juga dapat meningkatkan proliferasi sel limfosit
T secara bermakna dibandingkan kontrol negatif (p = 0,000) dan kelompok
perlakuan DSS (p = 0,000). Pada Perlakuan EGC tidak memberikan pengaruh
yang bermakna baik terhadap proliferasi sel leukosit non-T maupun limfosit T.
Kesimpulan penelitian adalah EGCG meningkatkan proliferasi sel leukosit
baik non-T maupun limfosit T pada mencit yang diinduksi colitis dengan DSS,
sedangkan pada perlakuan EGC tidak.
Kata kunci: Ulcerative colitis, EGCG, EGC, proliferasi leukosit dan limfosit T,
Dextran Sulfate Sodium (DSS)

iv

ABSTRACT
THE EFFECT OF EPIGALLOCATECHIN-3-GALLAT (EGCG) DAN
EPIGALLOCATECHIN (EGC) IN GREEN TEA TOWARDS LEUKOCYTES
PROLIFERATION IN DSS-INDUCED COLITIS SWISS WEBSTER MALE
MICE
Prisca Larasati, 2009; Supervisor I : Sugiarto Puradisastra, dr., M. Kes
Supervisor II : Teresa Liliana Wargasetia, S.Si, M.Kes
Green tea is a popular beverage in the world. Beside its effect as
antioksidant, the mayor ingridient in green tea which are epigallocatechin-3gallat (EGCG) and epigallocatechin (EGC), have effect as immunomodulator.
One of the disease that is caused by immune regulation failure is ulcerative
colitis (UC) which is a chronic inflammatory disease of colonic mucosa.
The aim of this study was to examine the role of EGCG dan EGC towards
leucocytes proliferation in colitis mice induced by DSS.
The method of this research was comparative, prospective laboratory
experiment with complete Randomized Trial Design. Eight groups (n=5) of Swiss
Webster male mice with average weight 20-25 gram were treated with aquadest;
2.5 % DSS on drinking water; 0.3 mg EGCG; 0,6 mg EGCG; 1,2 mg EGCG;

0.02 mg EGC; 0.04 mg EGC; and 0.08 mg EGC. After 14 days treatment, groups
which are treated by EGCG or EGC were induced by 2.5 % DSS for 7 days. All
mice were humanly sacrificed on the 22th day, lymphocytes were obtained from
spleen, cultured, and the proliferation of, lymphocytes were measured using MTT
assay method.
Parameter which were measured were the amounts of leukocytes in every
wells. Then data were analyzed by One-Way ANOVA continued with LSD (α =
0.05). The treatment with 0,6 mg with mitogen (LPS) 1 µg/ml and 10 µg/ml
increased non-T leucocytes proliferation significantly. The treatment with 0,3 mg
and 1,2 mg with mitogen (LPS) 10 µg/ml also increased non-T leucocytes
proliferation significantly. EGCG 1,2 mg could also increase significantly T
lymphocytes. Beside, EGC showed unsignificant result in increased both non-T
leucocytes and T lymphocytes proliferation
As conclusions, EGCG can increase non-T leucocytes and T lymphocytes
proliferation significantly in animal models induced-colitis by DSS.
Key words: Ulcerative colitis, EGCG, EGC, leucocytes and T lymphocytes
proliferation, Dextran Sulfate Sodium (DSS)

v

DAFTAR ISI

Judul.............................................................................................................. i
Lembar Persetujuan ..................................................................................... ii
SuratPernyataan ........................................................................................... iii
Abstrak.......................................................................................................... iv
Prakata.......................................................................................................... vi
Daftar Isi ....................................................................................................... viii
Daftar Gambar ............................................................................................. xii
Daftar Tabel.................................................................................................. xiii
Daftar Grafik ................................................................................................ xv
Daftar Lampiran........................................................................................... xvi

BAB I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang Masalah ............................................................... 1
1.2. Identifikasi Masalah ..................................................................... 2
1.3. Tujuan dan Maksud ...................................................................... 3
1.4. Kegunaan Karya Tulis Ilmiah ....................................................... 3
1.5. Kerangka Pemikiran dan Hipotesis ............................................... 3
1.5.1. Kerangka Pemikiran..................................................... 3

1.5.2. Hipotesis ...................................................................... 4
1.6 Metodologi.................................................................................... 4
1.7 Waktu dan Lokasi Penelitian ......................................................... 5

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Sistem Imun .................................................................................. 6
2.1.1 Sistem Imun Nonspesifik ...................................................... 6
2.1.2 Sistem Imun Spesifik ............................................................ 7
2.1.2.1 Sistem Imun Spesifik Humoral.................................. 8
2.1.2.2 Sistem Imun Spesifik Selular..................................... 8

viii

2.1.3 Limfosit ................................................................................ 9
2.1.3.1 Pematangan Limfosit, Seleksi Positif, dan Negatif .... 9
2.1.3.2 Reseptor Permukaan dan Fungsional......................... 10
2.1.3.3 Limfosit T................................................................. 12
2.1.3.4 Limfosit B ................................................................ 14
2.2 Ulcerative Colitis (UC) ................................................................. 15
2.2.1 Epidemiologi ........................................................................ 15

2.2.2 Etiologi................................................................................. 15
2.2.3 Gambaran Histopatologi ....................................................... 16
2.2.4 Simptom ............................................................................... 17
2.2.5 Patogenesis ........................................................................... 17
2.2.6 Terapi ................................................................................... 18
2.3 Model Hewan Kolitis .................................................................... 19
2.4 Teh (Camelia sinensis) .................................................................. 20
2.4.1 Berbagai Cara Pengolahan Teh ............................................. 21
2.3.2 Komposisi Kimia Teh........................................................... 22
2.3.3 Aktivitas Farmakologi Teh ................................................... 23
2.5 Epigallocatechin-3 Gallat (EGCG) dan Epigallocatechin (EGC)... 24
2.5.1 Epigallocatechin-3 Gallat (EGCG)....................................... 24
2.5.2 Epigallocatechin (EGC)........................................................ 25

BAB III. ALAT, BAHAN, DAN METODE PENELITIAN
3.1 Alat ............................................................................................... 26
3.2 Bahan
3.2.1 Bahan Kimia dan Reagen...................................................... 27
3.2.2 Hewan Coba ........................................................................ 28
3.3 Metode Penelitian

3.3.1 Desain Penelitian .................................................................. 28
3.3.2 Variabel Penelitian................................................................ 29
3.3.3 Persiapan Penelitian
3.3.3.1 Pelarutan Epigallocatechin-3-Gallat (EGCG)............ 29

ix

3.3.3.2 Pelarutan Epigallocatechin (EGC)............................. 29
3.3.3.3 Sterilisasi Alat........................................................... 29
3.3.3.4 Pembuatan Medium RPMI 1640 (incomplete) ........... 30
3.3.3.5 Pembuatan Medium RPMI-complete (RPMI-c) ........ 30
3.3.3.6 Pembuatan Larutan MTT .......................................... 31
3.3.3.7 Pembuatan MACS Buffer .......................................... 31
3.3.3.8 Pembuatan Larutan Lysis Buffer ................................ 31
3.3.3.9 Thawing dan Heat Inactivated FBS ........................... 32
3.3.3.10 Pengenceran Berseri (Serial Dilution) LPS.............. 32
3.3.3.11 Pembuatan Larutan anti-mouse CD3 dan anti-mouse
CD28 ...................................................................... 32
3.3.3.12 Persiapan 96-wells ELISA culture plate steril.......... 32
3.3.4 Prosedur Penelitian

3.3.4.1 Penentuan Perlakuan Hewan Coba ............................ 33
3.3.4.2 Isolasi Sel Limfosit ................................................... 34
3.3.4.3 Isolasi Sel Limfosit Non-T ........................................ 35
3.3.4.4 Isolasi Sel Limfosit T ................................................ 35
3.3.4.5 Perhitungan Jumlah Leukosit Non-T dan Limfosit T . 36
3.3.4.6 Pengukuran Proliferasi Sel Limfosit (ELISA)............ 36
3.3.5 Pengukuran Hasil Penelitian ................................................. 37
3.3.6 Data yang Diamati ................................................................ 37
3.3.7 Analisis Data ........................................................................ 37
3.3.7.1 Hipotesis Statistik ..................................................... 38
3.3.7.2 Kriteria Uji................................................................ 38

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Hasil Penelitian
4.1.1 Proliferasi Sel Leukosit Non-T pada Pemberian
Epigallocatechin -3-Gallat (EGCG)..................................... 39
4.1.2 Proliferasi Limfosit T pada Pemberian
Epigallocatechin-3-Gallat (EGCG)....................................... 46

x

4.1.3 Proliferasi Sel Leukosit Non-T pada Pemberian
Epigallocatechin (EGC)........................................................ 51
4.1.4 Proliferasi Limfosit T pada Pemberian
Epigallocatechin (EGC)........................................................ 57
4.2 Pembahasan................................................................................... 60
4.3 Uji Hipotesis ................................................................................. 63

BAB V.KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan ................................................................................... 66
5.2 Saran............................................................................................. 66

DAFTAR PUSTAKA.................................................................................... 67
LAMPIRAN .................................................................................................. 70

RIWAYAT HIDUP....................................................................................... 86

xi

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1

Pematangan Sel Limfosit ......................................................... 10

Gambar 2.2

Reseptor Permukaan dan Molekul-Molekul Asesori
Sel T Limfosit.......................................................................... 11

Gambar 2.3

Peran Sel T .............................................................................. 12

Gambar 2.4

Gambaran Histopatologis Mukosa Kolon................................. 16

Gambar 2.5

Struktur Kimia DSS ................................................................. 19

Gambar 2.6

Tanaman Teh........................................................................... 20

Gambar 2.7

Struktur Kimia Epigallocatechin-3-Gallat (EGCG) ................. 24

Gambar 2.8

Struktur Kimia Epigallocatechin (EGC) .................................. 25

xii

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1

Rata-Rata Jumlah Sel Leukosit Non-T pada Setiap Kelompok
Perlakuan EGCG ......................................................................... 39

Tabel 4.2

Hasil Uji One-Way Descriptives dan ANOVA untuk Perlakuan
EGCG Tanpa Pemberian LPS...................................................... 40

Tabel 4.3

Hasil Uji One-Way Descriptives dan ANOVA untuk Perlakuan
EGCG dengan Pemberian LPS 0,1 µg/ml .................................... 41

Tabel 4.4

Hasil Uji Beda Rata-Rata Metode LSD Jumlah Sel Leukosit
Non-T Perlakuan EGCG dengan LPS 0,1 µg/ml .......................... 41

Tabel 4.5

Hasil Uji One-Way Descriptives dan ANOVA untuk Perlakuan
EGCG dengan Pemberian LPS 1 µg/ml ....................................... 42

Tabel 4.6

Hasil Uji Beda Rata-Rata Metode LSD Jumlah Sel Leukosit
Non-T Perlakuan EGCG dengan LPS 1 µg/ml ............................. 42

Tabel 4.7

Hasil Uji One-Way Descriptives dan ANOVA untuk Perlakuan
EGCG dengan Pemberian LPS 10 µg/ml ..................................... 43

Tabel 4.8

Hasil Uji Beda Rata-Rata Metode LSD Jumlah Sel Leukosit
Non-T Perlakuan EGCG dengan LPS 10 µg/ml ........................... 44

Tabel 4.9

Rata-Rata Jumlah Limfosit T Pada Setiap Kelompok Perlakuan
EGCG ......................................................................................... 46

Tabel 4.10 Hasil Uji One-Way Descriptives dan ANOVA untuk Perlakuan
EGCG Tanpa Pemberian Anti-mouse CD3 dan CD28 .................. 47
Tabel 4.11 Hasil Uji One-Way Descriptives dan ANOVA untuk Perlakuan
EGCG dengan Pemberian Anti-mouse CD3 dan CD28................. 48
Tabel 4.12 Hasil Uji Beda Rata-Rata Metode LSD Jumlah Limfosit T
Menggunakan Anti-mouse CD3 dan Anti-mouse CD28 ................ 48
Tabel 4.13 Rata-Rata Jumlah Sel Leukosit Non-T pada Setiap Kelompok
Perlakuan EGC............................................................................ 51
Tabel 4.14 Hasil Uji One-Way Descriptives dan ANOVA untuk Perlakuan
EGC Tanpa Pemberian LPS......................................................... 52

xiii

Tabel 4.15 Hasil Uji One-Way Descriptives dan ANOVA untuk Perlakuan
EGC dengan Pemberian LPS 0,1 µg/ml ....................................... 53
Tabel 4.16 Hasil Uji Beda Rata-Rata Metode LSD Jumlah Sel Leukosit
Non-T Perlakuan EGC dengan LPS 0,1 µg/ml ............................. 53
Tabel 4.17 Hasil Uji One-Way Descriptives dan ANOVA untuk Perlakuan
EGC dengan Pemberian LPS 1 µg/ml .......................................... 54
Tabel 4.18 Hasil Uji Beda Rata-Rata Metode LSD Jumlah Sel Leukosit
Non-T Perlakuan EGC dengan LPS 1 µg/ml ................................ 54
Tabel 4.19 Hasil Uji One-Way Descriptives dan ANOVA untuk Perlakuan
EGC dengan Pemberian LPS 10 µg/ml ........................................ 55
Tabel 4.20 Rata-Rata Jumlah Limfosit T Pada Setiap Kelompok Perlakuan
EGC ............................................................................................ 57
Tabel 4.21 Hasil Uji One-Way Descriptives dan ANOVA untuk Perlakuan
EGC Tanpa Pemberian Anti-mouse CD3 dan CD28 ..................... 58
Tabel 4.22 Hasil Uji One-Way Descriptives dan ANOVA untuk Perlakuan
EGC dengan Pemberian Anti-mouse CD3 dan CD28 ................... 59

xiv

DAFTAR GRAFIK

Grafik 4.1

Perbandingan Rata-Rata Jumlah Sel Leukosit Non-T Perlakuan
EGCG dengan dan Tanpa Pemberian LPS .................................. 45

Grafik 4.2

Perbandingan Rata-Rata Jumlah Sel Limfosit T Perlakuan EGCG
Tanpa Pemberian Anti-mouse CD3 dan CD28............................. 49

Grafik 4.3

Perbandingan Rata-Rata Jumlah Sel Limfosit T Perlakuan EGCG
dengan Pemberian Anti-mouse CD3 dan CD28 ........................... 50

Grafik 4.4

Perbandingan Rata-Rata Jumlah Sel Leukosit Non-T Perlakuan
EGC dengan dan Tanpa Pemberian LPS ..................................... 56

Grafik 4.5

Perbandingan Rata-Rata Jumlah Sel Limfosit T Perlakuan EGC
dengan dan Tanpa Pemberian Anti-mouse CD3 dan CD28 .......... 59

xv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1

Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh
EGCG Terhadap Proliferasi Sel Leukosit non-T Tanpa
Menggunakan LPS .................................................................. 70

Lampiran 2

Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh
EGCG Terhadap Proliferasi Sel Leukosit non-T Menggunakan
LPS 0,1 μ g/ml......................................................................... 71

Lampiran 3

Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh
EGCG Terhadap Proliferasi Sel Leukosit non-T Menggunakan
LPS 1 μ g/ml ............................................................................ 72

Lampiran 4

Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh
EGCG Terhadap Proliferasi Sel Leukosit non-T Menggunakan
LPS 10 μ g/ml .......................................................................... 73

Lampiran 5

Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh
EGCG Terhadap Proliferasi Limfosit T Tanpa Meggunakan
anti-mouse CD3 dan CD28 ...................................................... 74

Lampiran 6

Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh
EGCG Terhadap Proliferasi Limfosit T Menggunakan
anti-mouse CD3 dan CD28 ...................................................... 75

Lampiran 7

Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh
EGC Terhadap Proliferasi Sel Leukosit non-T Tanpa
Menggunakan LPS .................................................................. 76

Lampiran 8

Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh
EGC Terhadap Proliferasi Sel Leukosit non-T Menggunakan
LPS 0,1 μ g/ml......................................................................... 77

Lampiran 9

Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh
EGC Terhadap Proliferasi Sel Leukosit non-T Menggunakan
LPS 1 μ g/ml ............................................................................ 78

xvi

Lampiran 10

Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh
EGC Terhadap Proliferasi Sel Leukosit non-T Menggunakan
LPS 10 μ g/ml .......................................................................... 79

Lampiran 11 Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh
EGC Terhadap Proliferasi Limfosit T Tanpa Meggunakan
Anti-mouse CD3 dan CD28...................................................... 80
Lampiran 12 Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh
EGC Terhadap Proliferasi Limfosit T Menggunakan
Anti-mouse CD3 dan Anti-mouse CD28 ................................... 81
Lampiran 13

Penghitungan Dosis................................................................. 82

Lampiran 14

Foto Alat, Bahan, dan Foto Penelitian ..................................... 83

xvii

70

LAMPIRAN

LAMPIRAN 1
Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian EGCG Terhadap
Proliferasi Sel Leukosit non-T Tanpa Menggunakan LPS
Oneway
Descriptives
hasil perlakuan

N
kontrol negatif
dss
EGCG 1
EGCG II
EGCG III
Total

3
3
3
3
3
15

Mean
.44167
.43267
.45733
.45167
.46100
.44887

Std. Deviation
.022008
.020599
.023714
.006658
.022869
.020177

Std. Error
.012706
.011893
.013691
.003844
.013204
.005210

95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound
Upper Bound
.38700
.49634
.38150
.48384
.39843
.51624
.43513
.46821
.40419
.51781
.43769
.46004

Minimum
.420
.417
.432
.446
.444
.417

Maximum
.464
.456
.479
.459
.487
.487

ANOVA
hasil perlakuan

Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
.002
.004
.006

df
4
10
14

Mean Square
.000
.000

F
.995

Sig.
.454

Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: hasil perlakuan
LSD

(I) kelompok perlakuan
kontrol negatif

dss

EGCG 1

EGCG II

EGCG III

(J) kelompok perlakuan
dss
EGCG 1
EGCG II
EGCG III
kontrol negatif
EGCG 1
EGCG II
EGCG III
kontrol negatif
dss
EGCG II
EGCG III
kontrol negatif
dss
EGCG 1
EGCG III
kontrol negatif
dss
EGCG 1
EGCG II

Mean
Difference
(I-J)
.009000
-.015667
-.010000
-.019333
-.009000
-.024667
-.019000
-.028333
.015667
.024667
.005667
-.003667
.010000
.019000
-.005667
-.009333
.019333
.028333
.003667
.009333

Std. Error
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486
.016486

Sig.
.597
.364
.558
.268
.597
.165
.276
.116
.364
.165
.738
.828
.558
.276
.738
.584
.268
.116
.828
.584

95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
-.02773
.04573
-.05240
.02107
-.04673
.02673
-.05607
.01740
-.04573
.02773
-.06140
.01207
-.05573
.01773
-.06507
.00840
-.02107
.05240
-.01207
.06140
-.03107
.04240
-.04040
.03307
-.02673
.04673
-.01773
.05573
-.04240
.03107
-.04607
.02740
-.01740
.05607
-.00840
.06507
-.03307
.04040
-.02740
.04607

71

LAMPIRAN 2
Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh EGCG
Terhadap Proliferasi Sel Leukosit non-T Menggunakan LPS 0,1 μ g/ml
Oneway
Descriptives
hasil perlakuan

N
kontrol negatif
dss
EGCG 1
EGCG II
EGCG III
Total

3
3
3
3
3
15

Mean
.51000
.55933
.58567
.60867
.50633
.55400

Std. Deviation
.026058
.038004
.029569
.069573
.026407
.054612

Std. Error
.015044
.021942
.017072
.040168
.015246
.014101

95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound
Upper Bound
.44527
.57473
.46493
.65374
.51221
.65912
.43584
.78149
.44073
.57193
.52376
.58424

Minimum
.480
.516
.555
.568
.483
.480

Maximum
.527
.587
.614
.689
.535
.689

ANOVA
hasil perlakuan

Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
.025
.017
.042

df
4
10
14

Mean Square
.006
.002

F
3.615

Sig.
.045

Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: hasil perlakuan
LSD

(I) kelompok perlakuan
kontrol negatif

dss

EGCG 1

EGCG II

EGCG III

(J) kelompok perlakuan
dss
EGCG 1
EGCG II
EGCG III
kontrol negatif
EGCG 1
EGCG II
EGCG III
kontrol negatif
dss
EGCG II
EGCG III
kontrol negatif
dss
EGCG 1
EGCG III
kontrol negatif
dss
EGCG 1
EGCG II

Mean
Difference
(I-J)
-.049333
-.075667*
-.098667*
.003667
.049333
-.026333
-.049333
.053000
.075667*
.026333
-.023000
.079333*
.098667*
.049333
.023000
.102333*
-.003667
-.053000
-.079333*
-.102333*

*. The mean difference is significant at the .05 level.

Std. Error
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735
.033735

Sig.
.174
.049
.015
.916
.174
.453
.174
.147
.049
.453
.511
.041
.015
.174
.511
.013
.916
.147
.041
.013

95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
-.12450
.02583
-.15083
-.00050
-.17383
-.02350
-.07150
.07883
-.02583
.12450
-.10150
.04883
-.12450
.02583
-.02217
.12817
.00050
.15083
-.04883
.10150
-.09817
.05217
.00417
.15450
.02350
.17383
-.02583
.12450
-.05217
.09817
.02717
.17750
-.07883
.07150
-.12817
.02217
-.15450
-.00417
-.17750
-.02717

72

LAMPIRAN 3
Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh EGCG
Terhadap Proliferasi Sel Leukosit non-T Menggunakan LPS 1 μ g/ml
Oneway
Descriptives
hasil perlakuan

N
kontrol negatif
dss
EGCG 1
EGCG II
EGCG III
Total

3
3
3
3
3
15

Mean
.46733
.51633
.51600
.57500
.55133
.52520

Std. Deviation
.011590
.031660
.021794
.017349
.031770
.042985

Std. Error
.006692
.018279
.012583
.010017
.018342
.011099

95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound
Upper Bound
.43854
.49613
.43769
.59498
.46186
.57014
.53190
.61810
.47241
.63025
.50140
.54900

Minimum
.454
.480
.491
.560
.532
.454

Maximum
.475
.538
.531
.594
.588
.594

ANOVA
hasil perlakuan

Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
.020
.006
.026

df
4
10
14

Mean Square
.005
.001

F
8.566

Sig.
.003

Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: hasil perlakuan
LSD

(I) kelompok perlakuan
kontrol negatif

dss

EGCG 1

EGCG II

EGCG III

(J) kelompok perlakuan
dss
EGCG 1
EGCG II
EGCG III
kontrol negatif
EGCG 1
EGCG II
EGCG III
kontrol negatif
dss
EGCG II
EGCG III
kontrol negatif
dss
EGCG 1
EGCG III
kontrol negatif
dss
EGCG 1
EGCG II

Mean
Difference
(I-J)
-.049000*
-.048667*
-.107667*
-.084000*
.049000*
.000333
-.058667*
-.035000
.048667*
-.000333
-.059000*
-.035333
.107667*
.058667*
.059000*
.023667
.084000*
.035000
.035333
-.023667

*. The mean difference is significant at the .05 level.

Std. Error
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738
.019738

Sig.
.032
.033
.000
.002
.032
.987
.014
.107
.033
.987
.014
.104
.000
.014
.014
.258
.002
.107
.104
.258

95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
-.09298
-.00502
-.09265
-.00469
-.15165
-.06369
-.12798
-.04002
.00502
.09298
-.04365
.04431
-.10265
-.01469
-.07898
.00898
.00469
.09265
-.04431
.04365
-.10298
-.01502
-.07931
.00865
.06369
.15165
.01469
.10265
.01502
.10298
-.02031
.06765
.04002
.12798
-.00898
.07898
-.00865
.07931
-.06765
.02031

73

LAMPIRAN 4
Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh EGCG
Terhadap Proliferasi Sel Leukosit non-T Menggunakan LPS 10 μ g/ml
Oneway
Descriptives
hasil perlakuan

N
kontrol negatif
dss
EGCG 1
EGCG II
EGCG III
Total

3
3
3
3
3
15

Mean
.43900
.45967
.54533
.52733
.53000
.50027

Std. Deviation
.024062
.037005
.034312
.004509
.005292
.048915

Std. Error
.013892
.021365
.019810
.002603
.003055
.012630

95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound
Upper Bound
.37923
.49877
.36774
.55159
.46010
.63057
.51613
.53853
.51686
.54314
.47318
.52735

Minimum
.414
.417
.514
.523
.526
.414

Maximum
.462
.483
.582
.532
.536
.582

ANOVA
hasil perlakuan

Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
.027
.006
.033

df
4
10
14

Mean Square
.007
.001

F
10.692

Sig.
.001

Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: hasil perlakuan
LSD

(I) kelompok perlakuan
kontrol negatif

dss

EGCG 1

EGCG II

EGCG III

(J) kelompok perlakuan
dss
EGCG 1
EGCG II
EGCG III
kontrol negatif
EGCG 1
EGCG II
EGCG III
kontrol negatif
dss
EGCG II
EGCG III
kontrol negatif
dss
EGCG 1
EGCG III
kontrol negatif
dss
EGCG 1
EGCG II

Mean
Difference
(I-J)
-.020667
-.106333*
-.088333*
-.091000*
.020667
-.085667*
-.067667*
-.070333*
.106333*
.085667*
.018000
.015333
.088333*
.067667*
-.018000
-.002667
.091000*
.070333*
-.015333
.002667

*. The mean difference is significant at the .05 level.

Std. Error
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572
.020572

Sig.
.339
.000
.002
.001
.339
.002
.008
.007
.000
.002
.402
.473
.002
.008
.402
.899
.001
.007
.473
.899

95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
-.06650
.02517
-.15217
-.06050
-.13417
-.04250
-.13684
-.04516
-.02517
.06650
-.13150
-.03983
-.11350
-.02183
-.11617
-.02450
.06050
.15217
.03983
.13150
-.02784
.06384
-.03050
.06117
.04250
.13417
.02183
.11350
-.06384
.02784
-.04850
.04317
.04516
.13684
.02450
.11617
-.06117
.03050
-.04317
.04850

74

LAMPIRAN 5
Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh EGCG
Proliferasi Limfosit T Tanpa Menggunakan anti-mouse CD3 dan CD28
Oneway
Descriptives
hasil perlakuan

N
kontrol
DSS
EGCG I
EGCG II
EGCG III
Total

Mean
.52420
.53820
.53480
.53740
.56520
.53996

5
5
5
5
5
25

Std. Deviation
.042722
.021948
.017570
.015060
.050519
.033032

Std. Error
.019106
.009815
.007857
.006735
.022593
.006606

95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound Upper Bound
.47115
.57725
.51095
.56545
.51298
.55662
.51870
.55610
.50247
.62793
.52632
.55360

Minimum
.488
.515
.521
.514
.517
.488

Maximum
.587
.563
.564
.552
.623
.623

ANOVA
hasil perlakuan

Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
.005
.022
.026

df
4
20
24

Mean Square
.001
.001

F
1.068

Sig.
.398

Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: hasil perlakuan
LSD

(I) kelompok perlakuan
kontrol

DSS

EGCG I

EGCG II

EGCG III

(J) kelompok perlakuan
DSS
EGCG I
EGCG II
EGCG III
kontrol
EGCG I
EGCG II
EGCG III
kontrol
DSS
EGCG II
EGCG III
kontrol
DSS
EGCG I
EGCG III
kontrol
DSS
EGCG I
EGCG II

Mean
Difference
(I-J)
-.014000
-.010600
-.013200
-.041000
.014000
.003400
.000800
-.027000
.010600
-.003400
-.002600
-.030400
.013200
-.000800
.002600
-.027800
.041000
.027000
.030400
.027800

Std. Error
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774
.020774

Sig.
.508
.615
.532
.062
.508
.872
.970
.208
.615
.872
.902
.159
.532
.970
.902
.196
.062
.208
.159
.196

95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
-.05733
.02933
-.05393
.03273
-.05653
.03013
-.08433
.00233
-.02933
.05733
-.03993
.04673
-.04253
.04413
-.07033
.01633
-.03273
.05393
-.04673
.03993
-.04593
.04073
-.07373
.01293
-.03013
.05653
-.04413
.04253
-.04073
.04593
-.07113
.01553
-.00233
.08433
-.01633
.07033
-.01293
.07373
-.01553
.07113

75

LAMPIRAN 6
Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh EGCG
Terhadap Proliferasi Limfosit T Menggunakan anti-mouse CD3 dan CD28
Oneway
Descriptives
hasil perlakuan

N
kontrol
DSS
EGCG I
EGCG II
EGCG III
Total

Mean
.50683
.56067
.57717
.58517
.63983
.57393

6
6
6
6
6
30

Std. Deviation
.048918
.029764
.014525
.037659
.022427
.053176

Std. Error
.019971
.012151
.005930
.015374
.009156
.009709

95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound Upper Bound
.45550
.55817
.52943
.59190
.56192
.59241
.54565
.62469
.61630
.66337
.55408
.59379

Minimum
.453
.530
.551
.546
.613
.453

Maximum
.563
.602
.593
.651
.670
.670

ANOVA
hasil perlakuan

Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
.055
.027
.082

df
4
25
29

Mean Square
.014
.001

F
12.694

Sig.
.000

Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: hasil perlakuan
LSD

(I) kelompok perlakuan
kontrol

DSS

EGCG I

EGCG II

EGCG III

(J) kelompok perlakuan
DSS
EGCG I
EGCG II
EGCG III
kontrol
EGCG I
EGCG II
EGCG III
kontrol
DSS
EGCG II
EGCG III
kontrol
DSS
EGCG I
EGCG III
kontrol
DSS
EGCG I
EGCG II

*. The mean difference is significant at the .05 level.

Mean
Difference
(I-J)
-.053833*
-.070333*
-.078333*
-.133000*
.053833*
-.016500
-.024500
-.079167*
.070333*
.016500
-.008000
-.062667*
.078333*
.024500
.008000
-.054667*
.133000*
.079167*
.062667*
.054667*

Std. Error
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993
.018993

Sig.
.009
.001
.000
.000
.009
.393
.209
.000
.001
.393
.677
.003
.000
.209
.677
.008
.000
.000
.003
.008

95% Confidence Interval
Lower Bound
Upper Bound
-.09295
-.01472
-.10945
-.03122
-.11745
-.03922
-.17212
-.09388
.01472
.09295
-.05562
.02262
-.06362
.01462
-.11828
-.04005
.03122
.10945
-.02262
.05562
-.04712
.03112
-.10178
-.02355
.03922
.11745
-.01462
.06362
-.03112
.04712
-.09378
-.01555
.09388
.17212
.04005
.11828
.02355
.10178
.01555
.09378

76

LAMPIRAN 7
Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian EGC Terhadap
Proliferasi Sel Leukosit non-T Tanpa Menggunakan LPS
Oneway
Descriptives
hasil perlakuan

N
kontrol negatif
dss
EGC 1
EGC II
EGC III
Total

4
4
4
4
4
20

Mean
.49000
.47875
.49675
.48350
.50875
.49155

Std. Deviation
.003367
.024784
.008617
.009110
.029579
.019452

Std. Error
.001683
.012392
.004308
.004555
.014789
.004350

95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound Upper Bound
.48464
.49536
.43931
.51819
.48304
.51046
.46900
.49800
.46168
.55582
.48245
.50065

Minimum
.486
.456
.487
.475
.469
.456

Maximum
.494
.510
.508
.496
.535
.535

ANOVA
hasil perlakuan

Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
.002
.005
.007

df
4
15
19

Mean Square
.001
.000

F
1.671

Sig.
.209

Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: hasil perlakuan
LSD

(I) kelompok perlakuan
kontrol negatif

dss

EGC 1

EGC II

EGC III

(J) kelompok perlakuan
dss
EGC 1
EGC II
EGC III
kontrol negatif
EGC 1
EGC II
EGC III
kontrol negatif
dss
EGC II
EGC III
kontrol negatif
dss
EGC 1
EGC III
kontrol negatif
dss
EGC 1
EGC II

Mean
Difference
(I-J)
.011250
-.006750
.006500
-.018750
-.011250
-.018000
-.004750
-.030000*
.006750
.018000
.013250
-.012000
-.006500
.004750
-.013250
-.025250
.018750
.030000*
.012000
.025250

*. The mean difference is significant at the .05 level.

Std. Error
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875
.012875

Sig.
.396
.608
.621
.166
.396
.182
.717
.034
.608
.182
.320
.366
.621
.717
.320
.069
.166
.034
.366
.069

95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
-.01619
.03869
-.03419
.02069
-.02094
.03394
-.04619
.00869
-.03869
.01619
-.04544
.00944
-.03219
.02269
-.05744
-.00256
-.02069
.03419
-.00944
.04544
-.01419
.04069
-.03944
.01544
-.03394
.02094
-.02269
.03219
-.04069
.01419
-.05269
.00219
-.00869
.04619
.00256
.05744
-.01544
.03944
-.00219
.05269

77

LAMPIRAN 8
Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh EGC Terhadap
Proliferasi Sel Leukosit non-T Menggunakan LPS 0,1 μ g/ml
Oneway
Descriptives
hasil perlakuan

N
kontrol negatif
dss
EGC 1
EGC II
EGC III
Total

12
6
6
6
6
36

Mean
.53375
.58800
.52733
.53817
.53333
.54239

Std. Deviation
.042557
.043331
.035109
.015993
.016943
.039106

Std. Error
.012285
.017690
.014333
.006529
.006917
.006518

95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound Upper Bound
.50671
.56079
.54253
.63347
.49049
.56418
.52138
.55495
.51555
.55111
.52916
.55562

Minimum
.473
.516
.482
.509
.508
.473

Maximum
.606
.645
.584
.558
.559
.645

ANOVA
hasil perlakuan

Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
.015
.038
.054

df
4
31
35

Mean Square
.004
.001

F
3.113

Sig.
.029

Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: hasil perlakuan
LSD

(I) kelompok perlakuan
kontrol negatif

dss

EGC 1

EGC II

EGC III

(J) kelompok perlakuan
dss
EGC 1
EGC II
EGC III
kontrol negatif
EGC 1
EGC II
EGC III
kontrol negatif
dss
EGC II
EGC III
kontrol negatif
dss
EGC 1
EGC III
kontrol negatif
dss
EGC 1
EGC II

Mean
Difference
(I-J)
-.054250*
.006417
-.004417
.000417
.054250*
.060667*
.049833*
.054667*
-.006417
-.060667*
-.010833
-.006000
.004417
-.049833*
.010833
.004833
-.000417
-.054667*
.006000
-.004833

*. The mean difference is significant at the .05 level.

Std. Error
.017549
.017549
.017549
.017549
.017549
.020264
.020264
.020264
.017549
.020264
.020264
.020264
.017549
.020264
.020264
.020264
.017549
.020264
.020264
.020264

Sig.
.004
.717
.803
.981
.004
.005
.020
.011
.717
.005
.597
.769
.803
.020
.597
.813
.981
.011
.769
.813

95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
-.09004
-.01846
-.02937
.04221
-.04021
.03137
-.03537
.03621
.01846
.09004
.01934
.10199
.00851
.09116
.01334
.09599
-.04221
.02937
-.10199
-.01934
-.05216
.03049
-.04733
.03533
-.03137
.04021
-.09116
-.00851
-.03049
.05216
-.03649
.04616
-.03621
.03537
-.09599
-.01334
-.03533
.04733
-.04616
.03649

78

LAMPIRAN 9
Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh EGC Terhadap
Proliferasi Sel Leukosit non-T Menggunakan LPS 1 μ g/ml
Oneway
Descriptives
hasil perlakuan

N
kontrol negatif
dss
EGC 1
EGC II
EGC III
Total

12
6
6
6
6
36

Mean
.43008
.53633
.40617
.47550
.52217
.46672

Std. Deviation
.086643
.036811
.079733
.049561
.056019
.081976

95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound Upper Bound
.37503
.48513
.49770
.57496
.32249
.48984
.42349
.52751
.46338
.58096
.43899
.49446

Std. Error
.025012
.015028
.032551
.020233
.022870
.013663

Minimum
.246
.480
.257
.426
.433
.246

Maximum
.546
.581
.482
.556
.575
.581

ANOVA
hasil perlakuan

Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
.086
.149
.235

df
4
31
35

Mean Square
.022
.005

F
4.475

Sig.
.006

Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: hasil perlakuan
LSD

(I) kelompok perlakuan
kontrol negatif

dss

EGC 1

EGC II

EGC III

(J) kelompok perlakuan
dss
EGC 1
EGC II
EGC III
kontrol negatif
EGC 1
EGC II
EGC III
kontrol negatif
dss
EGC II
EGC III
kontrol negatif
dss
EGC 1
EGC III
kontrol negatif
dss
EGC 1
EGC II

Mean
Difference
(I-J)
-.106250*
.023917
-.045417
-.092083*
.106250*
.130167*
.060833
.014167
-.023917
-.130167*
-.069333
-.116000*
.045417
-.060833
.069333
-.046667
.092083*
-.014167
.116000*
.046667

*. The mean difference is significant at the .05 level.

Std. Error
.034677
.034677
.034677
.034677
.034677
.040042
.040042
.040042
.034677
.040042
.040042
.040042
.034677
.040042
.040042
.040042
.034677
.040042
.040042
.040042

Sig.
.004
.496
.200
.012
.004
.003
.139
.726
.496
.003
.093
.007
.200
.139
.093
.253
.012
.726
.007
.253

95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
-.17697
-.03553
-.04681
.09464
-.11614
.02531
-.16281
-.02136
.03553
.17697
.04850
.21183
-.02083
.14250
-.06750
.09583
-.09464
.04681
-.21183
-.04850
-.15100
.01233
-.19767
-.03433
-.02531
.11614
-.14250
.02083
-.01233
.15100
-.12833
.03500
.02136
.16281
-.09583
.06750
.03433
.19767
-.03500
.12833

79

LAMPIRAN 10
Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh EGC Terhadap
Proliferasi Sel Leukosit non-T Menggunakan LPS 10 μ g/ml
Oneway
Descriptives
hasil perlakuan

N
kontrol negatif
dss
EGC 1
EGC II
EGC III
Total

6
6
6
6
6
30

Mean
.48350
.48200
.48750
.48717
.49683
.48740

Std. Deviation
.014598
.034820
.012927
.021009
.040032
.025585

Std. Error
.005960
.014215
.005277
.008577
.016343
.004671

95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound Upper Bound
.46818
.49882
.44546
.51854
.47393
.50107
.46512
.50921
.45482
.53884
.47785
.49695

Minimum
.469
.417
.464
.458
.442
.417

Maximum
.505
.519
.499
.513
.563
.563

ANOVA
hasil perlakuan

Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
.001
.018
.019

df

Mean Square
.000
.001

4
25
29

F
.275

Sig.
.891

Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: hasil perlakuan
LSD

(I) kelompok perlakuan
kontrol negatif

dss

EGC 1

EGC II

EGC III

(J) kelompok perlakuan
dss
EGC 1
EGC II
EGC III
kontrol negatif
EGC 1
EGC II
EGC III
kontrol negatif
dss
EGC II
EGC III
kontrol negatif
dss
EGC 1
EGC III
kontrol negatif
dss
EGC 1
EGC II

Mean
Difference
(I-J)
.001500
-.004000
-.003667
-.013333
-.001500
-.005500
-.005167
-.014833
.004000
.005500
.000333
-.009333
.003667
.005167
-.000333
-.009667
.013333
.014833
.009333
.009667

Std. Error
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570
.015570

Sig.
.924
.799
.816
.400
.924
.727
.743
.350
.799
.727
.983
.554
.816
.743
.983
.540
.400
.350
.554
.540

95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
-.03057
.03357
-.03607
.02807
-.03573
.02840
-.04540
.01873
-.03357
.03057
-.03757
.02657
-.03723
.02690
-.04690
.01723
-.02807
.03607
-.02657
.03757
-.03173
.03240
-.04140
.02273
-.02840
.03573
-.02690
.03723
-.03240
.03173
-.04173
.02240
-.01873
.04540
-.01723
.04690
-.02273
.04140
-.02240
.04173

80

LAMPIRAN 11
Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh EGC
Proliferasi Limfosit T Tanpa Menggunakan anti-mouse CD3 dan CD28
Oneway
Descriptives
hasil perlakuan

N
kontrol
DSS
EGC I
EGC II
EGC III
Total

Mean
.51433
.52967
.55783
.54733
.52800
.53543

6
6
6
6
6
30

Std. Deviation
.045214
.028675
.056581
.017386
.026031
.038193

Std. Error
.018458
.011707
.023099
.007098
.010627
.006973

95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound Upper Bound
.46688
.56178
.49957
.55976
.49846
.61721
.52909
.56558
.50068
.55532
.52117
.54969

Minimum
.465
.487
.487
.522
.504
.465

Maximum
.587
.563
.627
.562
.571
.627

ANOVA
hasil perlakuan

Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
.007
.035
.042

df
4
25
29

Mean Square
.002
.001

F
1.253

Sig.
.315

Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: hasil perlakuan
LSD

(I) kelompok perlakuan
kontrol

DSS

EGC I

EGC II

EGC III

(J) kelompok perlakuan
DSS
EGC I
EGC II
EGC III
kontrol
EGC I
EGC II
EGC III
kontrol
DSS
EGC II
EGC III
kontrol
DSS
EGC I
EGC III
kontrol
DSS
EGC I
EGC II

Mean
Difference
(I-J)
-.015333
-.043500
-.033000
-.013667
.015333
-.028167
-.017667
.001667
.043500
.028167
.010500
.029833
.033000
.017667
-.010500
.019333
.013667
-.001667
-.029833
-.019333

Std. Error
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676
.021676

Sig.
.486
.056
.140
.534
.486
.206
.423
.939
.056
.206
.632
.181
.140
.423
.632
.381
.534
.939
.181
.381

95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
-.05998
.02931
-.08814
.00114
-.07764
.01164
-.05831
.03098
-.02931
.05998
-.07281
.01648
-.06231
.02698
-.04298
.04631
-.00114
.08814
-.01648
.07281
-.03414
.05514
-.01481
.07448
-.01164
.07764
-.02698
.06231
-.05514
.03414
-.02531
.06398
-.03098
.05831
-.04631
.04298
-.07448
.01481
-.06398
.02531

81

LAMPIRAN 12
Penghitungan Statistik SPSS 13.0 untuk Pengujian Pengaruh EGC Terhadap
Proliferasi Limfosit T Menggunakan anti-mouse CD3 dan CD28
Oneway
Descriptives
hasil perlakuan

N
kontrol
DSS
EGC I
EGC II
EGC III
Total

Mean
.50683
.56067
.54567
.55350
.57183
.54770

6
6
6
6
6
30

Std. Deviation
.048918
.029764
.042434
.021380
.050313
.043585

Std. Error
.019971
.012151
.017324
.008728
.020540
.007958

95% Confidence Interval for
Mean
Lower Bound Upper Bound
.45550
.55817
.52943
.59190
.50113
.59020
.53106
.57594
.51903
.62463
.53143
.56397

Minimum
.453
.530
.483
.521
.526
.453

Maximum
.563
.602
.607
.580
.667
.667

ANOVA
hasil perlakuan

Between Groups
Within Groups
Total

Sum of
Squares
.015
.040
.055

df
4
25
29

Mean Square
.004
.002

F
2.285

Sig.
.088

Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: hasil perlakuan
LSD

(I) kelompok perlakuan
kontrol

DSS

EGC I

EGC II

EGC III

(J) kelompok perlakuan
DSS
EGC I
EGC II
EGC III
kontrol
EGC I
EGC II
EGC III
kontrol
DSS
EGC II
EGC III
kontrol
DSS
EGC I
EGC III
kontrol
DSS
EGC I
EGC II

Mean
Difference
(I-J)
-.053833*
-.038833
-.046667
-.065000*
.053833*
.015000
.007167
-.011167
.038833
-.015000
-.007833
-.026167
.046667
-.007167
.007833
-.018333
.065000*
.011167
.026167
.018333

*. The mean difference is significant at the .05 level.

Std. Error
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192
.023192

Sig.
.029
.107
.055
.010
.029
.524
.760
.634
.107
.524
.738
.270
.055
.760
.738
.437
.010
.634
.270
.437

95% Confidence Interval
Lower Bound Upper Bound
-.10160
-.00607
-.08660
.00893
-.09443
.00110
-.11276
-.01724
.00607
.10160
-.03276
.06276
-.04060
.05493
-.05893
.03660
-.00893
.08660
-.06276
.03276
-.05560
.03993
-.07393
.02160
-.00110
.09443
-.05493
.04060
-.03993
.05560
-.06610
.02943
.01724
.11276
-.03660
.05893
-.02160
.07393
-.02943
.06610

82

LAMPIRAN 13
Perhitungan Dosis

§ Dosis EGCG
Dosis manusia 70 kg

= 225 mg (Nakagawa et al., 1997)

Dosis untuk mencit 20 g

= 225 mg x 0,0026 = 0,585 mg 0,6
≈ mg

§ Dosis EGC
Dosis manusia 70 kg

= 17,5 mg (Nakagawa et al., 1997)

Dosis untuk mencit 20 g

= 17,5 mg x 0,0026 = 0,045 mg 0,04
≈
mg

§ Dextran Sulphate Sodium (DSS)
Garam DSS yang dipakai adalah 2,5 g dilarutkan dengan aquadest 100 ml
sehingga didapatkan larutan DSS 2,5%.
Larutan ini diberikan melalui air minum pada mencit.

83

LAMPIRAN 14
Foto Alat, Bahan, dan Foto Penelitian
Alat dan Bahan

MACS Separation Column

Sentrifuga Suhu Dingin

RPMI-complete

Inkubator CO2

ELISA Reader, BioRad

Epigallocatechin-3-gallate
(EGCG)

84

Epigallocatechin
(EGC)

Foto Penelitian

Pemberian EGCG atau EGC per oral

Limpa yang akan digerus

Penggerusan limpa

Tabung falcon yang akan disentrifuga

85

Penyortiran sel leukosit

Penambahan Reagen MTT

Penambahan sample

86

87

88

89

90

91

92

93

94

95

96

86

RIWAYAT HIDUP

Nama

: Prisca Larasati

NRP

: 0510112

Tempat/Tanggal Lahir

: Bogor, 18 Maret 1987

Alamat

: Tmn. Kopo Melati No. 1

Riwayat Pendidikan

:

SD Kesatuan, Bogor (1993-1999)
SMP Kesatuan, Bogor (1999-2002)
SMU Kesatuan, Bogor (2002-2005)
Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha, Bandung (2005sekarang)

BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang
Lingkungan hidup manusia mengandung berbagai bahan yang setiap saat
dapat masuk ke dalam tubuh dan menimbulkan kerusakan jaringan atau penyakit.
Tubuh memiliki suatu sistem pertahanan tubuh yang pada keadaan normal dapat
mengatasi paparan benda-benda asing, baik melalui respon spesifik maupun nonspesifik. Akan tetapi, fungsi sistem imun dapat terganggu sehingga menimbulkan
ketidakseimbangan yang dapat bermanifestasi menjadi infeksi berulang,
predisposisi terhadap keganasan dan autoimunitas (Karnen Garna Baratawidjaja,
2004). Salah satu contoh penyakit dengan ganguan sistem imun adalah
Inflammatory Bowel Disease (IBD).
Inflammatory Bowel Disease (IBD) adalah penyakit inflamasi yang
melibatkan saluran cerna meliputi, yaitu ulcerative colitis (UC) dan Crohn’s
disease (CD) (Kumar et al., 2005). Ulcerative colitis (UC) memiliki distribusi
luas yang tersebar di seluruh dunia, tetapi biasanya sering ditemukan di daerah
tropik dan negara industri. Insidensi UC di Amerika Serikat dapat mencapai 4-12
per 100.000 populasi dan terus meningkat dalam beberapa dekade ini. Penyakit ini
lebih banyak menyerang wanita daripada pria dan pada orang kulit putih daripada
kulit berwarna. Penderita UC biasanya berusia antara usia 20 sampai 40 tahun,
namun tidak tertutup kemungkinan menyerang penderita yang lebih muda ataupun
lebih tua (Kumar et al., 2005). Pada UC peradangan dimulai akibat dari aktivasi
sel limfosit T yang diikuti oleh aktivasi mediator-mediator inflamasi lainnya
(Friedman dan Blumberg, 2005). Peradangan yang terjadi umumnya diatasi
dengan obat-obatan anti-colitis seperti sulfasalazine, olsalazine, dan mesalazine,
yang banyak digunakan dalam terapi UC pada manusia dan memiliki beberapa
fungsi immunomodulator (Axelsson et al., 1996; Kim et al., 2006). Namun
demikian, obat-obat tersebut dapat juga menambah beratnya penyakit,
menyebabkan abnormalitas sperma, alergi sulfa, gangguan fungsi hati,
agranulositosis, pankreatitis, dan efek samping lainnya (Friedman dan Blumberg,

1

2

2005). Sebagai alternatif pengobatan dicari tanaman obat yang lebih aman, lebih
murah dan mudah didapat. Sejumlah tanaman obat ada yang dapat berefek sebagai
immunomodulator, seperti teh hijau yang dapat menimbulkan anemia bila
dikonsumsi berlebih (Matsunaga et al., 2001; Imadatainstipen, 2007).
Teh hijau adalah minuman yang cukup popular di dunia. Teh hijau dibuat
dari pucuk daun muda tanaman teh (Camellia sinensis) dengan cara
menginaktivasi enzim oksidase/fenolase yang terdapat dalam pucuk daun teh
segar, yaitu dengan cara pemanasan atau penguapan dengan menggunakan uap
panas, sehingga oksidasi enzimatik terhadap katekin dalam daun teh dapat
dicegah (Imadatainstipen, 2007). Kandungan dalam teh hijau adalah polifenol
katekin yaitu epigallocatechin-3-gallate (EGCG), epigallocatechin (EGC),
epicatechin-3-gallate (ECG) dan epicatechin (EC). Teh hijau mempunyai
beberapa efek farmakologis antara lain sebagai antioksidan, untuk menurunkan
berat badan, menurunkan kolesterol, trigliserida, dan glukosa, antimutagenik,
serta antibakteri (Brunetton, 1999; Murase et al., 2000; Sueoka et al., 2001).
Beberapa penelitian melaporkan bahwa teh hijau memiliki peranan sebagai
immunomodulator dengan meregulasi produksi sitokin (Matsunaga et al., 2001).
Berdasarkan hal-hal yang telah disebutkan di atas, penelitian ini dilakukan
sebagai upaya untuk mengetahui apakah EGCG dan EGC meningkatkan
proliferasi sel leukosit pada mencit yang diinduksi colitis dengan DSS.

1.2 Identifikasi Masalah
Apakah epigallocatechin-3-gallate (EGCG) meningkatkan proliferasi sel
leukosit non-T pada mencit yang diinduksi colitis dengan DSS.
Apakah epigallocatechin-3-gallate (EGCG) meningkatkan proliferasi limfosit
T pada mencit yang diinduksi colitis dengan DSS.
Apakah epigallocatechin (EGC) meningkatkan proliferasi sel leukosit non-T
pada mencit yang diinduksi colitis dengan DSS.
Apakah epigallocatechin (EGC) meningkatkan proliferasi limfosit T pada
mencit yang diinduksi colitis dengan DSS.

3

1.3 Tujuan dan Maksud Penelitian
Tujuan dari penelitian ini adalah melihat pengaruh EGCG dan EGC
terhadap peningkatan jumlah sel leukosit pada mencit yang diinduksi colitis
dengan DSS.
Maksud penelitian ini adalah diharapkan agar teh hijau dapat menjadi obat
alternatif untuk meningkatkan sistem imun.

1.4 Kegunaan Karya Tulis Ilmiah
Kegunaan akademis KTI ini adalah diharapkan dapat membuka cakrawala
pengetahuan bidang imunologi mengenai pengaruh EGCG dan EGC terhadap
peningkatan sistem imun