Pengaruh Ekstrak Buah Merah (Pandanus conoideus Lam.) Terhadap Jaringan Usus Mencit Jantan Galur DDY Yang Diinduksi Colitis Dengan DSS.
iv ABSTRAK
PENGARUH EKSTRAK BUAH MERAH (Pandanus conoideus Lam.) TERHADAP JARINGAN USUS MENCIT JANTAN GALUR DDY
YANG DIINDUKSI COLITIS DENGAN DSS
Michelle Nasseri, 2008. Pembimbing I : Hana Ratnawati, dr., M.Kes
Pembimbing II : Khie Khiong, M.Si., M.Pharm.Sc., Ph.D
Ulcerative Colitis (UC) adalah inflamasi kronis pada kolon akibat reaksi oksidatif ditandai dengan kerusakan mukosa dan ulserasi rektum yang menyebar secara proksimal. Dextran Sulphate Sodium (DSS) yang diberikan secara oral dapat menginduksi terjadinya UC pada mencit dengan gambaran klinik yang sama seperti UC pada manusia. Masyarakat Papua banyak menggunakan Buah Merah (Pandanus conoideus Lam.) untuk menyembuhkan berbagai macam penyakit.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek ekstrak Buah Merah (Pandanus conoideus Lam.) dalam mengurangi reaksi inflamasi pada jaringan usus mencit yang diinduksi colitis dengan DSS.
Penelitian dilakukan pada mencit jantan galur DDY berumur 7 minggu, dibagi dalam 6 kelompok perlakuan (n=5). Kelompok negatif hanya diberi aquadest, kelompok I diinduksi colitis tanpa pemberian ekstrak Buah Merah, kelompok II dengan pemberian ekstrak Buah Merah tanpa induksi colitis, kelompok III, IV, V dengan pemberian ekstrak Buah Merah dengan dosis berturut-turut 0,1 ml, 0,2 ml, dan 0,4 ml selama 14 hari dan diinduksi colitis (DSS 2,5%) sampai hari ke-25. Parameter penelitian yang diamati adalah penurunan berat badan, clinical score colitis, yang ditandai dengan diare, perdarahan rektum, serta gambaran histopatologis kolon dengan pewarnaan Hematoxyline-Eosin.
Hasil penelitian menunjukkan clinical score colitis kelompok negatif, I, II, III, IV, V berturut-turut adalah 0,05; 1,675; 0,15; 1,42; 0,35; 0,45. Semakin besar nilai clinical score colitis menunjukkan semakin berat colitis yang diderita. Berdasarkan penurunan berat badan mencit, maka yang paling sedikit mengalami penurunan berat badan adalah kelompok yang diberi ekstrak Buah Merah dengan dosis 0,1 ml. Dilihat dari analisis histopatologis, kelompok yang diberi ekstrak Buah Merah dengan dosis 0,1 ml juga memiliki gambaran histologis terbaik Dari nilai yang didapat, pemberian ekstrak Buah Merah dengan dosis 0,1 ml dinilai paling efektif dalam mengurangi gejala-gejala colitis.
Dari data diatas dapat ditarik kesimpulan bahwa pemberian ekstrak Buah Merah dengan dosis 0,1 ml dapat mengurangi reaksi inflamasi pada mencit yang diinduksi colitis dengan DSS.
(2)
v
THE EFFECT OF RED FRUIT (Pandanus conoideus Lam.) EXTRACT TOWARDS INTESTINE TISSUE IN DSS-INDUCED
COLITIS DDY MALE MICE
Michelle Nasseri, 2008. 1st Tutor : Hana Ratnawati, dr., M.Kes
2nd Tutor : Khie Khiong, M.Si., M.Pharm.Sc., Ph.D Ulcerative Colitis (UC) is an inflammatory bowel disease characterized by mucosal damage and ulceration, which can involve rectum and extend proximally. Oral administration of Dextran Sulphate Sodium (DSS) solution can cause acute inflammatory reaction and ulceration in the colon similar to that observed in UC patients. Red Fruits are widely used by Papua’s society and is believed to cure variety of diseases.
The aim of this study is to examine the effect of Red Fruit Extract in reducing inflammation of the intestine tissue in DSS-induced colitis DDY male mice.
This study was done to 7 weeks old DDY male mice, divided into 6 groups. Negative control was given distilled water, 1st group was DSS-induced colitis, 2nd group was given Red Fruit extract, 3rd to 5th groups were given Red Fruit extract with respectively dose 0.1 ml, 0.2 ml, 0.4 ml for 14 days, and were induced by DSS 2.5% until day 25th. The parameters were observed in this study are body weight loss, clinical score colitis which was characterized by diarrhoea, rectal bleeding, also histopathological analysis of colon structure with HE staining.
The result showed the clinical score colitis from negative control to 5th group were 0.05, 1.675, 0.15, 1.42, 0.35, 0.4. Higher score showed the severity of colitis. Based on the mice body weight loss, 3rd groups had the least body weight loss. From the histopathological analysis, 3rd groups also showed the best colon structure. Based on the information above, 0.1 ml Red Fruit Extract was found as the most effective dose in reducing colitis manifestation.
It can be conclude that the 0.1 ml Red Fruit Extract treatment could reduce inflammatory reaction.
(3)
viii DAFTAR ISI
Judul Dalam... (i)
Lembar Persetujuan ... (ii)
Surat Pernyataan ... (iii)
Abstrak... (iv)
Abstract... (v)
Kata Pengantar ... (vi)
Daftar Isi ... (viii)
Daftar Tabel... (xi)
Daftar Gambar ... (xii)
Daftar Diagram ... (xiii)
Daftar Lampiran ... (xiv)
BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... 1
1.2 Identifikasi Masalah ... 2
1.3 Maksud dan Tujuan... 2
1.4 Manfaat Karya Tulis Ilmiah ... 2
1.5 Kerangka Pemikiran dan Hipotesis... 3
1.5.1 Kerangka Penelitian ... 3
1.5.2 Hipotesis Penelitian... 4
1.6 Metodologi ... 4
1.7 Lokasi dan Waktu Penelitian ... 5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Sistem Pencernaan ... 6
2.1.1 Anatomi Sistem Pencernaan ... 6
2.1.2 Histologi Usus... 13
2.2 Inflamasi dan Ulcerative Colitis (UC) ... 16
(4)
ix
2.4.2.1 Tokoferol (Vitamin E)... 27
2.4.2.2 Beta-karoten ... 29
2.4.2.3 Vitamin C ... 31
2.5 Buah Merah ... 33
2.5.1 Taksonomi dan Gambaran Botanikal... 34
2.5.2 Morfologi Buah Merah ... 35
2.5.3 Kandungan Kimia Buah Merah ... 35
2.5.4 Dosis Buah Merah... 39
BAB III BAHAN DAN METODE PENELITIAN 3.1 Alat dan Bahan... 41
3.2 Pemilihan Tanaman dan Persiapan Bahan Uji ... 42
3.2.1 Pemilihan Tanaman... 42
3.2.2 Persiapan Bahan Uji... 42
3.3 Metode Penelitian... 43
3.3.1 Desain Penelitian... 43
3.3.2 Variabel Penelitian ... 43
3.3.3 Metode Penarikan Sampel... 44
3.4 Prosedur Penelitian... 44
3.4.1 Pemaparan Dextran Sulphate Sodium dan Pemberian Buah Merah ... 44
3.4.2 Pembuatan Preparat Histopatologis ... 45
3.4.3 Penilaian Clinical Score Colitis dan Analisis Histopatologis ... 47
3.5 Analisis Data ... 48
(5)
x
3.5.2 Kriteria Uji ... 49
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 4.1 Hasil Penelitian ... 50
4.2 Uji Hipotesis ... 58
4.3 Pembahasan... 59
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN 5.1 Kesimpulan ... 62
5.2 Saran... 62
DAFTAR PUSTAKA ... 63
(6)
xi
Diberi Perlakuan... 51 Tabel 4.2 Perbandingan Rata-Rata Berat Badan Mencit Setelah
Perlakuan Berdasarkan Uji Statistik ANOVA Satu Arah ... 53 Tabel 4.3 Perbandingan Rata-Rata Berat Badan Mencit Setelah
Perlakuan Berdasarkan Uji Beda Rata-Rata Tukey HSD ... 53 Tabel 4.4 Derajat Beratnya Diare dan Perdarahan pada Rektum... 54 Tabel 4.5 Clinical Score Colitis Pada Berbagai Perlakuan Berdasarkan
Uji Statistik ANOVA Satu Arah ... 55 Tabel 4.6 Clinical Score Colitis Pada Berbagai Perlakuan Berdasarkan
Uji Beda Rata-Rata Metode Tukey HSD ... 56 Tabel 4.7 Analisis Histopatologis Jaringan Usus Mencit ... 57
(7)
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1 Anatomi Saluran Pencernaan ... 6
Gambar 2.2 Struktur Kolon... 10
Gambar 2.3 Kelainan-kelainan pada Kolon ... 12
Gambar 2.4 Penampang Jaringan Kolon Normal ... 14
Gambar 2.5 Struktur Vili dan Kripta pada Usus ... 15
Gambar 2.6 Perubahan Diameter dan Arus Vaskuler ... 17
Gambar 2.7 Peristiwa Ekstravasasi Seluler... 18
Gambar 2.8 Mediator Kimia pada Proses Inflamasi ... 19
Gambar 2.9 Kanker Invasif pada Usus ... 21
Gambar 2.10 Etiologi UC ... 22
Gambar 2.11 Senyawa Dextran Sulphate Sodium... 22
Gambar 2.12 Cara Kerja Antioksidan dalam Menghambat Kerusakan Sel Akibat Radikal Bebas ... 26
Gambar 2.13 Struktur -tokoferol... 27
Gambar 2.14 Fungsi Vitamin E ... 28
Gambar 2.15 Sumber Vitamin E... 28
Gambar 2.16 Sumber Beta-karoten... 29
Gambar 2.17 Struktur Beta-karoten ... 30
Gambar 2.18 Struktur Vitamin C ... 31
Gambar 2.19 Fungsi Vitamin C ... 32
Gambar 2.20 Defisiensi Vitamin C... 33
Gambar 2.21 Sumber Vitamin C... 33
Gambar 2.22 Lokasi Tanaman Buah Merah ... 34
Gambar 2.23 Buah Merah ... 35
(8)
xiii
(9)
xiv
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Jaringan Usus Mencit Kelompok Kontrol Negatif ... 67
Lampiran 2. Jaringan Usus Mencit Kelompok I ... 68
Lampiran 3. Jaringan Usus Mencit Kelompok II... 69
Lampiran 4. Jaringan Usus Mencit Kelompok III ... 70
Lampiran 5. Jaringan Usus Mencit Kelompok IV ... 71
Lampiran 6. Jaringan Usus Mencit Kelompok V ... 72
Lampiran 7. Perhitungan Statistik SPSS 13.0 Data Berat Badan Setelah Perlakuan... 73
Lampiran 8. Perhitungan Statistik SPSS 13.0 Clinical Score Colitis... 76
Lampiran 9. Perhitungan Dosis... 79
Lampiran 10. Alat-alat yang Digunakan... 80
Lampiran 11. Pembuatan Blok Parafin ... 81
Lampiran 12. Pewarnaan Perparat dengan Pewarnaan Hematoxyline-Eosin (HE) ... 82
(10)
Jaringan Usus Mencit Kelompok Kontrol Negatif
Mukosa normal
Nodus Limfatikus
(11)
68
Lampiran 2
Jaringan Usus Mencit Kelompok I
Dinding sangat tipis
Mukosa sangat tipis dengan Sel Goblet
(12)
Jaringan Usus Mencit Kelompok II
Hiperproliferasi epitel
Hiperproliferasi epitel
(13)
70
Lampiran 4
Jaringan Usus Mencit Kelompok III
Dinding tebal, mukosa normal
Dinding tebal, mukosa normal
(14)
Jaringan Usus Mencit Kelompok IV
Dinding tipis
Dinding tipis
(15)
72
Lampiran 6
Jaringan Usus Mencit Kelompok V
Hiperproliferasi epitel
Hiperproliferasi epitel
(16)
Perhitungan Statistik SPSS 13.0 Data Berat Badan Setelah Perlakuan
Descriptives
HasilDSS
5 27.734000 .3154392 .1410687 27.342331 28.125669 27.3800 28.1525 5 23.905000 .5821029 .2603243 23.182224 24.627776 23.1975 24.8125 5 17.812000 .3697313 .1653489 17.352918 18.271082 17.3625 18.3675 5 27.945600 .3445966 .1541083 27.517727 28.373473 27.4780 28.4400 5 25.793500 .6161108 .2755331 25.028497 26.558503 24.8825 26.4850 5 22.410000 .3814938 .1706092 21.936313 22.883687 21.9625 22.9075 30 24.266683 3.5744314 .6525989 22.931969 25.601398 17.3625 28.4400 Kontrol NEG DSS BM P1 P2 P3 Total
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound 95% Confidence Interval for
Mean
Minimum Maximum
Test of Homogeneity of Variances HasilDSS
.604 5 24 .697
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
ANOVA HasilDSS
365.645 5 73.129 359.968 .000
4.876 24 .203
370.520 29 Between Groups Within Groups Total Sum of
(17)
74
Multiple Comparisons Dependent Variable: HasilDSS
Tukey HSD
3.8290000* .2850642 .000 2.947601 4.710399 9.9220000* .2850642 .000 9.040601 10.803399 -.2116000 .2850642 .974 -1.092999 .669799 1.9405000* .2850642 .000 1.059101 2.821899 5.3240000* .2850642 .000 4.442601 6.205399 -3.8290000* .2850642 .000 -4.710399 -2.947601 6.0930000* .2850642 .000 5.211601 6.974399 -4.0406000* .2850642 .000 -4.921999 -3.159201 -1.8885000* .2850642 .000 -2.769899 -1.007101 1.4950000* .2850642 .000 .613601 2.376399 -9.9220000* .2850642 .000 -10.803399 -9.040601 -6.0930000* .2850642 .000 -6.974399 -5.211601 -10.133600* .2850642 .000 -11.014999 -9.252201 -7.9815000* .2850642 .000 -8.862899 -7.100101 -4.5980000* .2850642 .000 -5.479399 -3.716601 .2116000 .2850642 .974 -.669799 1.092999 4.0406000* .2850642 .000 3.159201 4.921999 10.1336000* .2850642 .000 9.252201 11.014999 2.1521000* .2850642 .000 1.270701 3.033499 5.5356000* .2850642 .000 4.654201 6.416999 -1.9405000* .2850642 .000 -2.821899 -1.059101 1.8885000* .2850642 .000 1.007101 2.769899 7.9815000* .2850642 .000 7.100101 8.862899 -2.1521000* .2850642 .000 -3.033499 -1.270701 3.3835000* .2850642 .000 2.502101 4.264899 -5.3240000* .2850642 .000 -6.205399 -4.442601 -1.4950000* .2850642 .000 -2.376399 -.613601 4.5980000* .2850642 .000 3.716601 5.479399 -5.5356000* .2850642 .000 -6.416999 -4.654201 -3.3835000* .2850642 .000 -4.264899 -2.502101 (J) PerlakuanDSS DSS BM P1 P2 P3 KontrolNEG BM P1 P2 P3 KontrolNEG DSS P1 P2 P3 KontrolNEG DSS BM P2 P3 KontrolNEG DSS BM P1 P3 KontrolNEG DSS BM P1 P2 (I) PerlakuanDSS KontrolNEG DSS BM P1 P2 P3 Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound 95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level. *.
(18)
HasilDSS Tukey HSDa
5 17.812000
5 22.410000
5 23.905000
5 25.793500
5 27.734000
5 27.945600
1.000 1.000 1.000 1.000 .974 Perlakuan
DSS BM P3 DSS P2
KontrolNEG P1
Sig.
N 1 2 3 4 5
Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000. a.
(19)
76
Lampiran 8
Perhitungan Statistik SPSS 13.0 Clinical Score Colitis
Descriptives Hasil
10 .0500 .15811 .05000 -.0631 .1631 .00 .50
10 1.6750 .89791 .28395 1.0327 2.3173 .00 2.50
10 .1500 .24152 .07638 -.0228 .3228 .00 .50
10 1.4200 .89169 .28198 .7821 2.0579 .00 2.20
10 .3500 .33747 .10672 .1086 .5914 .00 1.00
10 .4500 .59861 .18930 .0218 .8782 .00 2.00
60 .6825 .85553 .11045 .4615 .9035 .00 2.50
KontrolNEG DSS BM P1 P2 P3 Total
N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound 95% Confidence Interval for
Mean
Minimum Maximum
Test of Homogeneity of Variances Hasil
6.214 5 54 .000
Levene
Statistic df1 df2 Sig.
ANOVA Hasil
23.772 5 4.754 13.225 .000
19.412 54 .359
43.184 59 Between Groups
Within Groups Total
Sum of
(20)
Multiple Comparisons Dependent Variable: Hasil
Tukey HSD
-1.62500* .26814 .000 -2.4172 -.8328
-.10000 .26814 .999 -.8922 .6922
-1.37000* .26814 .000 -2.1622 -.5778
-.30000 .26814 .871 -1.0922 .4922
-.40000 .26814 .671 -1.1922 .3922
1.62500* .26814 .000 .8328 2.4172
1.52500* .26814 .000 .7328 2.3172
.25500 .26814 .931 -.5372 1.0472
1.32500* .26814 .000 .5328 2.1172
1.22500* .26814 .000 .4328 2.0172
.10000 .26814 .999 -.6922 .8922
-1.52500* .26814 .000 -2.3172 -.7328 -1.27000* .26814 .000 -2.0622 -.4778
-.20000 .26814 .975 -.9922 .5922
-.30000 .26814 .871 -1.0922 .4922
1.37000* .26814 .000 .5778 2.1622
-.25500 .26814 .931 -1.0472 .5372
1.27000* .26814 .000 .4778 2.0622
1.07000* .26814 .003 .2778 1.8622
.97000* .26814 .008 .1778 1.7622
.30000 .26814 .871 -.4922 1.0922
-1.32500* .26814 .000 -2.1172 -.5328
.20000 .26814 .975 -.5922 .9922
-1.07000* .26814 .003 -1.8622 -.2778
-.10000 .26814 .999 -.8922 .6922
.40000 .26814 .671 -.3922 1.1922
-1.22500* .26814 .000 -2.0172 -.4328
.30000 .26814 .871 -.4922 1.0922
-.97000* .26814 .008 -1.7622 -.1778
.10000 .26814 .999 -.6922 .8922
(J) Perlakuan DSS BM P1 P2 P3 KontrolNEG BM P1 P2 P3 KontrolNEG DSS P1 P2 P3 KontrolNEG DSS BM P2 P3 KontrolNEG DSS BM P1 P3 KontrolNEG DSS BM P1 P2 (I) Perlakuan KontrolNEG DSS BM P1 P2 P3 Mean Difference
(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound 95% Confidence Interval
The mean difference is significant at the .05 level. *.
(21)
78
Hasil Tukey HSD a
10 .0500 10 .1500 10 .3500 10 .4500
10 1.4200
10 1.6750
.671 .931 Perlakuan
Kontrol NEG BM P2 P3 P1 DSS Sig.
N 1 2
Subset for alpha = .05
Means for groups in homogeneous subsets are displayed. Uses Harmonic Mean Sample Size = 10.000. a.
(22)
Perhitungan Dosis
Dosis Buah Merah
Dosis manusia 70 kg = 30 cc
Dosis untuk mencit 20 g = 30 cc x 0,0026 = 0,078 cc
Dosis untuk mencit 24 g = 24 x 0,078 cc = 0,0936 cc 0,1 cc 20
Dextran Sulphate Sodium
Garam DSS yang dipakai adalah 2,5 g dilarutkan dengan aquadest 100 ml sehingga didapatkan larutan DSS 2,5%.
(23)
80
Lampiran 10
Alat-alat yang Digunakan
Kandang mencit
Penimbangan Berat Badan Mencit
(24)
Pembuatan Blok Parafin
Proses Embedding Inkubator
Persiapan Lilin Parafin ` Persiapan Pembuatan Blok Parafin
(25)
82
Lampiran 12
Pewarnaan Preparat dengan Pewarnaan Hematoxyline Eosin (HE)
Zat-zat Pewarnaan HE
Pewarnaan Preparat
(26)
Nama : Michelle Nasseri NRP : 0510068
Agama : Kristen
Tempat / Tanggal Lahir : Bandung, 20 Agustus 1987 Alamat : Jl. Astana Anyar 222, Bandung Riwayat pendidikan :
- TK Maria Bintang Laut Bandung (1991-1993) - SD Maria Bintang Laut Bandung (1993-1999) - SLTP Santa Angela Bandung (1999-2002) - SMU Santa Angela Bandung (2002-2005) - Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha (2005-sekarang) Karya Tulis Ilmiah yang Pernah Dibuat :
Pengaruh Pemberian Aluminium sebagai Faktor Resiko Penyakit Alzheimer Terhadap Jaringan Otak Mencit
(27)
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1
Latar Belakang
Ulcerative Colitis
(UC) termasuk dalam golongan penyakit
Inflammatory Bowel
Disease
(IBD). Keadaan ini sering berlangsung kronis sehingga dapat mengarah pada
keganasan, yaitu karsinoma kolon. UC adalah keadaan yang ditandai oleh adanya
inflamasi kronis pada kolon, berupa kerusakan pada mukosa dan ulserasi rektum yang
menyebar secara proksimal. Insidensi UC di Amerika Serikat adalah 4-12 per 100.000
populasi, dan terus meningkat pada dekade ini. Gejala klinis UC merupakan suatu reaksi
berulang yang ditandai oleh adanya diare yang disertai darah dan lendir yang kadang
bertahan selama beberapa bulan sampai beberapa tahun. UC juga dapat mengakibatkan
kerusakan DNA pada sel mukosa, yang jika terjadi secara berulang akan menyebabkan
displasia epitel dan berkembang menjadi kanker invasif (Popivanova
et al
., 2008).
Dextran Sulphate Sodium
(DSS) yang diberikan secara oral dapat menginduksi
terjadinya UC pada mencit dengan gambaran klinik yang sama seperti UC pada manusia.
Pemberian DSS jangka panjang juga dapat mengakibatkan terjadinya karsinoma kolon
(Popivanova
et al
., 2008).
Buah Merah (
Pandanus conoideus
Lam.) banyak digunakan oleh masyarakat Papua
sebagai sumber pangan sehari-hari dan dipercaya dapat meningkatkan kondisi kesehatan
dan sistem pertahanan tubuh (I Made Budi, 2005). Buah Merah tidak hanya mengandung
-karoten dan -tokoferol, tetapi juga diduga terdapat senyawa lain yang bersifat
major
compounds
yang belum diketahui (Trubus, 2005). Akhir-akhir ini, penggunaan Buah
Merah sebagai terapi alternatif dan suportif untuk mengatasi dan mencegah berbagai
penyakit semakin banyak digunakan. Telah banyak ditemukan bukti khasiat Buah Merah
secara empiris, namun penelitian yang dilakukan secara in-vitro maupun in-vivo belum
banyak dilakukan. Dalam situs www.BuahMerah.biz.tm, dilaporkan bahwa atas
kesaksian masyarakat, konsumsi ekstrak Buah Merah satu sendok makan per hari dapat
meningkatkan kekebalan tubuh. Disamping itu, penelitian yang dilakukan oleh Mun’im,
dkk. (2006) terhadap aktivitas antikanker Buah Merah menunjukkan bahwa pemberian
(28)
mengetahui peranan Buah Merah dalam mengurangi reaksi inflamasi pada mencit yang
diinduksi
colitis
dengan DSS.
1.2
Identifikasi Masalah
Apakah pemberian ekstrak Buah Merah dapat mengurangi reaksi inflamasi yang
terjadi pada mencit yang diinduksi
colitis
dengan DSS, dengan kriteria penilaian
berdasarkan efeknya terhadap berat badan,
clinical score colitis
dan gambaran
histopatologis kolon.
1.3
Maksud dan Tujuan
Maksud dari penelitian ini adalah untuk mengetahui apakah Buah Merah efektif
untuk mengurangi reaksi inflamasi pada penderita
ulcerative colitis
.
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak Buah
Merah terhadap jaringan usus mencit yang diinduksi
colitis
dengan DSS.
1.4
Manfaat Karya Tulis Ilmiah
Manfaat akademis adalah memperluas wawasan pembaca mengenai tanaman asli
Indonesia, khususnya Buah Merah dalam mengurangi reaksi inflamasi.
Manfaat praktis adalah menunjukkan bahwa Buah Merah memiliki komponen yang
dapat mencegah terjadinya reaksi inflamasi sehingga dapat dimanfaatkan oleh masyarakat
untuk mengurangi kejadian
colitis
.
(29)
3
1.5
Kerangka Pemikiran dan Hipotesis
1.5.1
Kerangka Pemikiran
Secara umum, inflamasi/radang adalah reaksi kompleks dari suatu jaringan hidup
terhadap trauma (
injury agent
), seperti mikroba dan kerusakan jaringan setempat.
Berdasarkan onset dibagi menjadi 2, yaitu inflamasi akut dan inflamasi kronis.
Pada inflamasi akut terjadi respon yang cepat terhadap trauma (
injury agent
). Reaksi
ini dipicu oleh berbagai macam stimulus, antara lain infeksi, trauma fisik, zat kimia,
jaringan nekrotik, benda asing, dan reaksi imunologik. Banyak peristiwa yang terjadi
selama inflamasi akut, seperti perubahan vaskuler, dan peristiwa seluler. Selain itu
sejumlah mediator kimiawi juga dilepaskan, seperti vasoaktif amin, protein plasma,
metabolit asam arakhidonat,
platelet-activating factor
(PAF), sitokin dan kemokin, nitrat
oksida (NO), unsur lisosomal leukosit, dan radikal bebas turunan oksigen. Radikal bebas
dapat mengakibatkan kerusakan sel endotel, inaktivasi enzim antiprotease, dan trauma
pada beberapa jenis sel. Kerusakan oksidatif akibat radikal bebas diminimalisir oleh
antioksidan yang meliputi protein seruloplasmin dan transferin, serta enzim superoksida
dismutase, katalase, dan glutation peroksidase (Kumar
et al
., 2005).
Sedangkan pada inflamasi kronis, respon yang terjadi terhadap trauma (
injury agent
)
lebih lama (minggu sampai bulan), dimana proses inflamasi aktif terjadi bersamaan
dengan proses regenerasi. Inflamasi kronis bisa terjadi setelah inflamasi akut, tetapi
biasanya tersembunyi,
low-grade
, ringan, dan sering asimptomatik. Reaksi yang
mengakibatkan inflamasi kronis yaitu infeksi berkepanjangan, paparan zat toksik terus
menerus, dan autoimun (Kumar
et al
., 2005).
Ulcerative Colitis
(UC) adalah keadaan yang ditandai oleh adanya inflamasi kronis
pada kolon, berupa kerusakan pada mukosa dan ulserasi rektum yang menyebar secara
proksimal. Gejala klinis UC merupakan reaksi berulang yang ditandai oleh adanya diare
yang disertai darah dan lendir yang bertahan selama beberapa bulan sampai beberapa
tahun.
(30)
Buah Merah merupakan salah satu tanaman obat Indonesia yang telah banyak
digunakan untuk mencegah atau mengobati banyak penyakit. Telah diketahui bahwa
Buah Merah mengandung komposisi gizi yang lengkap dan bermanfaat bagi kesehatan.
Kandungan tersebut antara lain -karoten, -tokoferol, vitamin C, vitamin B1, dan asam
lemak esensial seperti asam oleat, asam linoleat, asam linolenat, dan asam dekanoat.
Senyawa antioksidan yang terkandung dalam Buah Merah tergolong tinggi, yaitu 12.000
ppm total karotenoid, dimana 700 ppm diantaranya berupa -karoten, dan -tokoferol
yang mencapai 11.000 ppm (Trubus, 2005).
Berdasarkan hal-hal di atas, penelitian ini dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui
apakah Buah Merah dengan kandungan antioksidan yang tinggi dapat mengurangi reaksi
inflamasi pada mencit yang diinduksi
colitis
dengan DSS.
1.5.2
Hipotesis
Buah Merah dapat berperan untuk mengurangi reaksi inflamasi pada mencit yang
diinduksi
colitis
dengan DSS.
1.6
Metodologi
Metode penelitian yang digunakan adalah prospektif eksperimental laboratorium
sungguhan bersifat komparatif dengan desain Rancangan Acak Lengkap (RAL).
Data dianalisis secara statistik dengan menggunakan program SPSS 13.0, yaitu uji
Analisis Varian (ANAVA) satu arah dengan = 0,05 dan dilanjutkan uji beda rata-rata
Tukey HSD. Tingkat kemaknaan berdasarkan nilai p 0,05.
(31)
5
1.7
Lokasi dan Waktu
Penelitian dilakukan pada bulan Februari-Juli 2008, bertempat di Pusat Penelitian
Ilmu Kedokteran (PPIK) Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha dan
Laboratorium Rekayasa Genetika Pusat Penelitian Antar Universitas (PPAU)
Bioteknologi Institut Teknologi Bandung.
(32)
62
Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa ekstrak Buah Merah dengan dosis 0,1 ml dapat mengurangi reaksi inflamasi pada mencit yang diinduksi colitis
dengan DSS.
5.2 Saran
1. Diperlukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui dosis -karoten, tokoferol, dan vitamin C yang aman untuk penderita UC.
2. Diperlukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui zat antiinflamasi yang terkandung dalam Buah Merah.
(33)
63
DAFTAR PUSTAKA
Albert Sumampouw.. 2003. Radikal Bebas dan Antioksidan.
http://www.medikaholistik.com/2033/2004/11/28/medica.html. 1 Juli 2008. Bambang Budiono.. 2008. Hati-Hati Konsumsi Supplemen Antioksidan. Opini
Tribun R.S. Dr Wahidin Sudirohusodo, Makassar. 29 Juni 2008.
Bernard T. Wahyu Wiryanta.. 2007. Keajaiban Buah Merah dari Kesaksian Mereka yang Tersembuhkan. http://www.deherba.com/bukti-ilmiah-sari-buah-merah-2.html. 7 Juli 2008.
Burstein E. and Fearon E. R.. 2008. Colitis and Cancer: A Tale of Inflammatory Cells and Their Cytokines. The Journal of Clinical Investigation. Vol. 118 Number 2.
Dinna Sofia.. 2003. Antioksidan dan Radikal Bebas. http://chem-is-try.org/?sect=artikel&ext=81. 1 Juli 2008.
Fendy R. Paimin.. 2005. Buah Merah. http:// www.buah-merah.info/bm-news.php. 20 Juni 2008.
Hendra Priantono.. Buah Merah Si Multi Khasiat. http://www.terussehat.com/ artikel050403it.shtml. 20 Juni 2008.
Hernani dan Mono Rahardjo.. 2005. Tanaman Berkhasiat Antioksidan. Edisi 1. Jakarta: Penebar Swadaya. Hal. 9-21.
I Made Budi.. 2005. Buah Merah. http:// www.buah-merah.info/bm-news.php. 20 Juni 2008.
.. 2005. Khasiat Buah Merah. http://www.trubus-online.com/Khasiat Buah Merah. 20 Juni 2008.
Jeanne Esvandiary, Maria Firmina Sekar Utami, Yosef Wijoyo.. Efek Analgetik dan Efek Anti Inflamasi Beta Karoten pada Mencit. Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. 29 Juni 2008.
Kim T.W., Seo J. N., Suh Y. H., Park H. J., Kim J. H., Kim J. Y., et al.. 2006. Involvement of Lymphocytes in Dextran Sulphate Sodium-Induced Experimental Colitis. World Journal of Gastroenterology. January 14, 12(2): 302-305.
(34)
Cell Death. In: Kumar V., Abbas A. K., Fausto N.. eds.. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease. 7th ed, Philadelphia, USA: Elsevier-Saunders. p. 17.
.. 2005. Acute and Chronic Inflammation. In: Kumar V., Abbas A. K., Fausto N.. eds.. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease. 7th ed, Philadelphia, USA: Elsevier-Saunders. p. 50, 53, 63.
Liu C., Russell R. M., Wang X. D.. 2004. Low Dose -carotene
Supplementation of Ferrets Attenuates Smoke-Induced Lung Phosphorylation of JNK, p53 MAPK, and p53 Protein. The American Society for Nutritional Sciences Journal. 134:2705-2710.
MP-Biomedicals.. 2008. Dextran Sulphate Sodium Salt.
http://mpbio.com/index.php. 25 Juni 2008.
Mu’nim Abdul, Andrajati Retnosari, Susilowati Heni.. 2006. Uji Hambatan Tumorigenesis dari Buah Merah (Pandanus conoideus Lam.) terhadap Tikus Putih Betina yang Diinduksi 7,12 Dimetilbenz(a)Antrasen (DMBA). Majalah Ilmu Kefarmasian. Vol. III No.3.
Ovalle W. K. and Nahirney P.C.. 2008. Netter’s Essential Histology. Philadelphia, USA: Elsevier-Saunders. p. 304-305.
Popivanova B.K., Kitamura K., Wu Y., Kondo T., Kagaya T., Kaneko S., et al.. 2008. Blocking TNF- in Mice Reduces Colorectal Carcinogenesis Associated with Chronic Colitis. The Journal of Clinical Investigation. Vol. 118 (2): 560-570.
Petersen E.W., Otrowski K., Ibfelt T., Richelle M., Offord E., Kristensen J. H., et al.. 2001. Effect of Vitamin Supplementation on Cytokine Response and on Muscle Damage after Strenuous Excercise. The American Physiological Society. Vol 280: 1570-1575.
Trubus.. 2005. Panduan Praktis Buah Merah Bukti Empiris dan Ilmiah. Jakarta: Penebar Swadaya. h. 14-20, 50-52, 58-61.
Young B. and Heath J. W.. 2002. Wheather’s Functional Histology A Text and Color Atlas. Spain: Churchill Livingstone. p. 249-273.
http://www.becomehealthynow.com.. 2008. Sumber Beta Karoten. 22 Juni 2008.
http://www.berkeleywellness.com/html/dsBetaCarotene.php.. 2000. Beta-Carotene. UC BerkeleyWellness Letter. 29 Juni 2008.
(35)
65
http://www.buahmerah.biz.tm/buahmerah.cfm.. Buah Merah. 20 Juni 2008. http://www.BuahMerahOil.com.. 2007. Sari Buah Merah dari Papua. 20 Juni 2008.
http://www.buahmerahoil.com/images/research.jpg.. Sari Buah Merah. 20 Juni 2008.
http://www.buahmerahoil.com/penelitian-buah-merah-papua.htm.. Sari Buah Merah - Pandanus Conoideus Lam. 20 Juni 2008.
http://www.chemlab.truman.edu.. 2008. Struktur Vitamin C. 22 Juni 2008. http://www.digestive.niddk.nih.gov.. 2006. Ulcerative Colitis. 27 Juni 2008. http://www.evitamins.com/healthnotes.asp?contentID=2931005.. 2006.
Beta-carotene. 22 Juni 2008.
http://www.evitamins.com/healthnotes.asp?contentID=2931005.. 2006.
Vitamin E. 22 Juni 2008.
http://www.focolatino.de/buah_merah/images/collage.jpg.. Lokasi Buah Merah. 20 Juni 2008.
http://www.freepatentsonline.com.. 2008. Dextran Sulphate Sodium Salt. 20 Juni 2008.
http://www.geocities.com/lanklax/buahmerah..Buah Merah (Pandanus conoideus). 20 Juni 2008.
http://id.wikipedia.org/wiki/Radikal_Bebas.. 2006a. Radikal Bebas. 22 Juni 2008.
http://id.wikipedia.org/wiki/Radikal_Bebas.. 2006b. Antioksidan. 22 Juni 2008. http://www.info-sehat.com/content.php?s_sid=677.. 2008. Radikal Bebas. 22
Juni 2008.
http://insidewinme.blogspot.com/2007/11/bicara-vitamin-c.html.. 2007. Bicara Vitamin C. 22 Juni 2008.
http://www.medicastore.com.. 2008. Anatomi dan Fisiologi Sistem Pencernaan. 27 Juni 2008.
(36)
Kripta pada Usus. 27 Juni 2008.
http://www.ncn.org.. 2008. Normal Intestinal Tissue. 27 Juni 2008. http://www.nlm.nih.gov.. 2008. Fungsi Vitamin C. 22 Juni 2008. .. 2008. Fungsi Vitamin E. 22 Juni 2008. .. 2008. Sumber Vitamin E. 22 Juni 2008.
http://www.oncolink.org/pathology_colon1.jpg.. Kanker invasive. 30 Juni 2008. http://www.organtubuh.com.. 2005. Anatomi Tubuh Manusia. 27 Juni 2008. http://www.pharmawebsite.tripod.com/adm/intersititial/remote.jpg.. 2008.
Etiologi Ulcerative Colitis. 27 Juni 2008.
http://www.poetogauliptek.multiply.com.htm/journal/Sistem-Pencernaan.. 2008. Sistem Pencernaan Manusia. 27 Juni 2008.
http://www.prn.org/index.php/progression/article/hiv_1_gastrointestinal_galt _267&h=481&w=608&sz=49&hl=id&start=20&um=1&tbnid=76tAq4Wf v-yUcM:&tbnh=108&tbnw=136&prev=/images%3Fq%3Dcross%2
Bsection%2Bintestinal%2Btissue%26um%3D1%26hl%3Did.. Struktur
Villi dan Kripta. 27 Juni 2008.
http://www.ultimatebalance.co.uk/graphics/centre.. Kelainan pada Kolon. 27 Juni 2008.
http://www.umm.edu/altmed/ConsSupplements/BetaCarotenes.html.. 2001.
Beta Carotene. A.D.A.M., Inc. 29 Juni 2008.
http://wikimedia.org.. 2008. Struktur -tokoferol. 22 Juni 2008. .. 2008. Struktur -karoten. 22 Juni 2008.
(1)
5
1.7
Lokasi dan Waktu
Penelitian dilakukan pada bulan Februari-Juli 2008, bertempat di Pusat Penelitian
Ilmu Kedokteran (PPIK) Fakultas Kedokteran Universitas Kristen Maranatha dan
Laboratorium Rekayasa Genetika Pusat Penelitian Antar Universitas (PPAU)
Bioteknologi Institut Teknologi Bandung.
(2)
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
Dari hasil penelitian ini dapat disimpulkan bahwa ekstrak Buah Merah dengan dosis 0,1 ml dapat mengurangi reaksi inflamasi pada mencit yang diinduksi colitis dengan DSS.
5.2 Saran
1. Diperlukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui dosis -karoten, tokoferol, dan vitamin C yang aman untuk penderita UC.
2. Diperlukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui zat antiinflamasi yang terkandung dalam Buah Merah.
(3)
63
Albert Sumampouw.. 2003. Radikal Bebas dan Antioksidan.
http://www.medikaholistik.com/2033/2004/11/28/medica.html. 1 Juli 2008.
Bambang Budiono.. 2008. Hati-Hati Konsumsi Supplemen Antioksidan. Opini
Tribun R.S. Dr Wahidin Sudirohusodo, Makassar. 29 Juni 2008.
Bernard T. Wahyu Wiryanta.. 2007. Keajaiban Buah Merah dari Kesaksian
Mereka yang Tersembuhkan. http://www.deherba.com/bukti-ilmiah-sari-buah-merah-2.html. 7 Juli 2008.
Burstein E. and Fearon E. R.. 2008. Colitis and Cancer: A Tale of Inflammatory
Cells and Their Cytokines. The Journal of Clinical Investigation. Vol. 118 Number 2.
Dinna Sofia.. 2003. Antioksidan dan Radikal Bebas.
http://chem-is-try.org/?sect=artikel&ext=81. 1 Juli 2008.
Fendy R. Paimin.. 2005. Buah Merah. http://
www.buah-merah.info/bm-news.php. 20 Juni 2008.
Hendra Priantono.. Buah Merah Si Multi Khasiat. http://www.terussehat.com/ artikel050403it.shtml. 20 Juni 2008.
Hernani dan Mono Rahardjo..2005. Tanaman Berkhasiat Antioksidan. Edisi 1.
Jakarta: Penebar Swadaya. Hal. 9-21.
I Made Budi..2005.Buah Merah. http:// www.buah-merah.info/bm-news.php. 20
Juni 2008.
..2005.Khasiat Buah Merah.http://www.trubus-online.com/Khasiat Buah Merah. 20 Juni 2008.
Jeanne Esvandiary, Maria Firmina Sekar Utami, Yosef Wijoyo.. Efek
Analgetik dan Efek Anti Inflamasi Beta Karoten pada Mencit. Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. 29 Juni 2008.
Kim T.W., Seo J. N., Suh Y. H., Park H. J., Kim J. H., Kim J. Y., et al.. 2006.
Involvement of Lymphocytes in Dextran Sulphate Sodium-Induced Experimental Colitis. World Journal of Gastroenterology. January 14, 12(2): 302-305.
(4)
64
Kumar V., Abbas A. K., Fausto N.. 2005. Cellular Adaptation, Cell Injury, and
Cell Death. In: Kumar V., Abbas A. K., Fausto N.. eds.. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease. 7th ed, Philadelphia, USA: Elsevier-Saunders. p. 17.
.. 2005. Acute and Chronic Inflammation. In: Kumar V., Abbas A. K., Fausto N.. eds.. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease. 7th ed, Philadelphia, USA: Elsevier-Saunders. p. 50, 53, 63.
Liu C., Russell R. M., Wang X. D.. 2004. Low Dose -carotene
Supplementation of Ferrets Attenuates Smoke-Induced Lung Phosphorylation of JNK, p53 MAPK, and p53 Protein. The American Society for Nutritional Sciences Journal. 134:2705-2710.
MP-Biomedicals.. 2008. Dextran Sulphate Sodium Salt.
http://mpbio.com/index.php. 25 Juni 2008.
Mu’nim Abdul, Andrajati Retnosari, Susilowati Heni.. 2006. Uji Hambatan
Tumorigenesis dari Buah Merah (Pandanus conoideus Lam.) terhadap Tikus Putih Betina yang Diinduksi 7,12 Dimetilbenz(a)Antrasen (DMBA). Majalah Ilmu Kefarmasian. Vol. III No.3.
Ovalle W. K. and Nahirney P.C.. 2008. Netter’s Essential Histology.
Philadelphia, USA: Elsevier-Saunders. p. 304-305.
Popivanova B.K., Kitamura K., Wu Y., Kondo T., Kagaya T., Kaneko S., et
al.. 2008. Blocking TNF- in Mice Reduces Colorectal Carcinogenesis Associated with Chronic Colitis. The Journal of Clinical Investigation. Vol. 118 (2): 560-570.
Petersen E.W., Otrowski K., Ibfelt T., Richelle M., Offord E., Kristensen J. H., et al.. 2001. Effect of Vitamin Supplementation on Cytokine Response and on Muscle Damage after Strenuous Excercise. The American Physiological Society. Vol 280: 1570-1575.
Trubus.. 2005. Panduan Praktis Buah Merah Bukti Empiris dan Ilmiah. Jakarta: Penebar Swadaya. h. 14-20, 50-52, 58-61.
Young B. and Heath J. W.. 2002. Wheather’s Functional Histology A Text and
Color Atlas. Spain: Churchill Livingstone. p. 249-273.
http://www.becomehealthynow.com..2008. Sumber Beta Karoten. 22 Juni
2008.
http://www.berkeleywellness.com/html/dsBetaCarotene.php..2000.
(5)
http://www.buahmerah.biz.tm/buahmerah.cfm.. Buah Merah. 20 Juni 2008.
http://www.BuahMerahOil.com..2007. Sari Buah Merah dari Papua. 20 Juni
2008.
http://www.buahmerahoil.com/images/research.jpg.. Sari Buah Merah. 20 Juni
2008.
http://www.buahmerahoil.com/penelitian-buah-merah-papua.htm.. Sari Buah
Merah - Pandanus Conoideus Lam. 20 Juni 2008.
http://www.chemlab.truman.edu.. 2008. Struktur Vitamin C. 22 Juni 2008.
http://www.digestive.niddk.nih.gov.. 2006. Ulcerative Colitis. 27 Juni 2008.
http://www.evitamins.com/healthnotes.asp?contentID=2931005.. 2006.
Beta-carotene. 22 Juni 2008.
http://www.evitamins.com/healthnotes.asp?contentID=2931005.. 2006.
Vitamin E. 22 Juni 2008.
http://www.focolatino.de/buah_merah/images/collage.jpg..Lokasi Buah
Merah. 20 Juni 2008.
http://www.freepatentsonline.com..2008. Dextran Sulphate Sodium Salt. 20
Juni 2008.
http://www.geocities.com/lanklax/buahmerah..Buah Merah (Pandanus
conoideus). 20 Juni 2008.
http://id.wikipedia.org/wiki/Radikal_Bebas.. 2006a. Radikal Bebas. 22 Juni
2008.
http://id.wikipedia.org/wiki/Radikal_Bebas.. 2006b. Antioksidan. 22 Juni 2008.
http://www.info-sehat.com/content.php?s_sid=677.. 2008. Radikal Bebas. 22
Juni 2008.
http://insidewinme.blogspot.com/2007/11/bicara-vitamin-c.html..2007. Bicara
Vitamin C. 22 Juni 2008.
http://www.medicastore.com.. 2008. Anatomi dan Fisiologi Sistem Pencernaan.
(6)
66
http://www.med.mun.ca/anatomyts/digest/gut97a.htm.. 2008. Struktur Vili dan
Kripta pada Usus. 27 Juni 2008.
http://www.ncn.org..2008. Normal Intestinal Tissue. 27 Juni 2008.
http://www.nlm.nih.gov.. 2008. Fungsi Vitamin C. 22 Juni 2008.
.. 2008. Fungsi Vitamin E. 22 Juni 2008.
.. 2008. Sumber Vitamin E. 22 Juni 2008.
http://www.oncolink.org/pathology_colon1.jpg.. Kanker invasive. 30 Juni 2008.
http://www.organtubuh.com.. 2005. Anatomi Tubuh Manusia. 27 Juni 2008.
http://www.pharmawebsite.tripod.com/adm/intersititial/remote.jpg.. 2008.
Etiologi Ulcerative Colitis. 27 Juni 2008.
http://www.poetogauliptek.multiply.com.htm/journal/Sistem-Pencernaan..
2008. Sistem Pencernaan Manusia. 27 Juni 2008.
http://www.prn.org/index.php/progression/article/hiv_1_gastrointestinal_galt _267&h=481&w=608&sz=49&hl=id&start=20&um=1&tbnid=76tAq4Wf v-yUcM:&tbnh=108&tbnw=136&prev=/images%3Fq%3Dcross%2
Bsection%2Bintestinal%2Btissue%26um%3D1%26hl%3Did.. Struktur
Villi dan Kripta. 27 Juni 2008.
http://www.ultimatebalance.co.uk/graphics/centre.. Kelainan pada Kolon. 27
Juni 2008.
http://www.umm.edu/altmed/ConsSupplements/BetaCarotenes.html.. 2001.
Beta Carotene. A.D.A.M., Inc. 29 Juni 2008.
http://wikimedia.org..2008. Struktur -tokoferol. 22 Juni 2008.