Studi histopatologi organ hati Broiler yang diberi pakan silase dan ditantang Salmonella typhimurium
STUDI HISTOPATOLOGI ORGAN HATI BROILER YANG DIBERI
PAKAN SILASE DAN DITANTANG Salmonella typhimurium
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM
B04103137
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2007
ABSTRAK
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM. Studi histopatologi organ hati Broiler yang
diberi pakan silase dan ditantang Salmonella typhimurium. Dibimbing oleh AGUS
SETIYONO.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui gambaran histopatologi organ hati
broiler yang diberi pakan silase dan diinfeksi Salmonella typhimurium. Penelitian ini
menggunakan 168 ekor ayam broiler strain Lohman yang dipelihara sejak umur sehari
(Day Old Chick) sampai umur 6 minggu. Perlakuan dibagi atas 7 kelompok perlakuan
yaitu: B1 (Ransum basal); B2 (B1 + infeksi S. typhimurium); A (B1 + antibiotik +
infeksi S. typhimurium); L1 (B1 + Lactobacillus plantarum); L2 (L1 + infeksi S.
typhimurium); S1 (ransum silase) dan S2 (S1 + infeksi S. typhimurium). Setiap perlakuan
terdiri atas 3 kali ulangan dan setiap ulangan terdiri dari 8 ekor ayam. Nekropsi dilakukan
setiap minggu pada satu ekor ayam yang diambil secara acak pada setiap perlakuan.
Organ hati diambil untuk preparat histopatologi menggunakan pewarna Hematoxylin
Eosin (HE). Pengamatan histopatologi organ hati dilakukan berdasarkan deskriptif
kualitatif seperti adanya oedema, degenerasi berbutir, degenerasi hidropis dan sel radang
dengan sistem skoring pada 10 lapang pandang. Pengolahan data dilakukan
menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap (RAL). Data yang diperoleh dianalisa
dengan sidik ragam acak (ANOVA). Hasil penelitian menunjukkan bahwa terjadi
penurunan tingkat kerusakan pada organ hati setelah pemberian silase. Hasil ini
mengindikasikan bahwa zat aktif berupa asam laktat yang bersifat antibakteri pada silase
bekerja baik untuk mengurangi timbulnya kerusakan hati akibat infeksi S. typhimurium.
STUDI HISTOPATOLOGI ORGAN HATI BROILER YANG DIBERI
PAKAN SILASE DAN DITANTANG Salmonella typhimurium
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM
B04103137
Skripsi
Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar
Sarjana Kedokteran Hewan
Pada Fakultas Kedokteran Hewan
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2007
LEMBAR PENGESAHAN
Judul Skripsi
Nama
NRP
: Studi histopatologi organ hati Broiler yang diberi pakan silase
dan ditantang Salmonella typhimurium
: Achmad Isfar Shaffan Adlim
: B04103137
Disetujui :
Dosen Pembimbing
Dr. Drh. Agus Setiyono, MS
NIP. 131 760 847
Diketahui
Wakil Dekan FKH IPB
Dr. Drh. I Wayan Teguh Wibawan, MSc.
NIP. 131 129 090
Tanggal Lulus:
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala karunia-Nya
sehingga skripsi dengan judul Studi histopatologi organ hati Broiler yang diberi pakan
silase dan ditantang Salmonella typhimurium ini berhasil diselesaikan. Penelitian ini
dilaksanakan sejak bulan Oktober 2006 – Februari 2007.
Terima kasih penulis ucapkan kepada bapak Dr. Drh. Agus Setiyono, MS yang
telah banyak memberikan bimbingan dan saran dalam penyusunan skripsi ini. Selain itu
kepada Dr. Drh. Ekowati Handharyani, MS yang telah bersedia sebagai dosen penguji. Di
samping itu, ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada Bapak dan Ibu Dosen beserta
staf dan pegawai di Bagian Patologi, Departemen Klinik, Reproduksi dan Patologi
Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor yang telah membantu dalam
pelaksanaan penelitian ini. Terima kasih juga kepada, saudara-saudaraku Bangkit, Edi,
Laksana, Feri, Heru, Sabto, Supri, Kunto, Yunus, Mbak Merry dan Dattu.
Ungkapan terima kasih yang sebesar-besarnya disampaikan kepada bapak
Achmad Zainal Adlim (alm), Ibu Maria Ulfah yang selalu mencintai tiada batas, Mas
Awang-Ninda-Izza, Mbak Iin-Adi-Hirzi, seluruh keluarga besar Mohammad Mastoer dan
Mohammad Masduki serta Heirmayani yang tetap menyayangi sepenuh hati untuk
berbagi semangat dan kebahagiaan dalam hidup ini. Lanang, Uus, Ramli, Aziz dan
teman-teman keluarga dari pulau Madura yang tidak dapat disebutkan namanya satupersatu, atas segala do’a serta dukungannya baik secara moral maupun materil yang
diberikan selama penulis melakukan penelitian dan penulisan skripsi ini.
Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi para pembaca.
Bogor, Agustus 2007
Achmad Isfar Shaffan Adlim
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Pamekasan pada tanggal 11 Juli 1985 sebagai anak ke tiga
dari tiga bersaudara, anak dari pasangan ayah Achmad Zainal Adlim dan ibu Maria
Ulfah. Tahun 2003 penulis lulus dari SMU Negeri 3 Pamekasan dan pada tahun yang
sama lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI).
Penulis memilih Fakultas Kedokteran Hewan.
Selama mengikuti perkuliahan penulis juga aktif bekerja pada beberapa
perusahaan swasta yang bergerak dalam bidang Agribisnis, Logistik, Asuransi otomotif,
Konsultan, dan General Trading di Jakarta maupun Bogor. Sampai saat ini penulis juga
masih aktif sebagai marketing officer pada perusahaan Asuransi otomotif dan General
Trading di Jakarta.
DAFTAR ISI
Halaman
KATA PENGANTAR ............................................................................................. i
DAFTAR TABEL .................................................................................................... ii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................... iii
PENDAHULUAN .................................................................................................... 1
Latar Belakang ................................................................................................. 1
Tujuan .............................................................................................................. 2
Hipotesa ........................................................................................................... 2
TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................................... 3
Silase ............................................................................................................... 3
Bakteri Asam Laktat ......................................................................................... 4
Penggunaan Antibiotika ................................................................................... 5
Salmonellosis pada Unggas .............................................................................. 6
Hati .................................................................................................................. 7
MATERI DAN METODE ...................................................................................... 10
Tempat dan Waktu ........................................................................................... 10
Materi .............................................................................................................. 10
Kandang dan Perlengkapan ........................................................................ 10
Ransum ...................................................................................................... 10
Perlakuan .................................................................................................... 11
Bakteri dan Additive ................................................................................... 12
Pembuatan Ransum Silase ........................................................................... 12
Vitamin dan Vaksin .................................................................................... 12
Uji Tantang ................................................................................................. 12
Metode ............................................................................................................. 13
Rancangan Percobaan ................................................................................ 13
Pengamatan ................................................................................................ 14
Prosedur Pelaksanaan ................................................................................. 14
HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................................. 16
KESIMPULAN DAN SARAN.................................................................................. 25
Kesimpulan ........................................................................................................ 25
Saran .................................................................................................................. 25
DAFTAR PUSTAKA .............................................................................................. 26
LAMPIRAN .............................................................................................. ………... 29
DAFTAR TABEL
Tabel
1. Susunan dan kandungan zat makanan dalam ransum penelitian .........
Halaman
11
2. Histopatologi organ hati broiler akibat infeksi S. typhimurium
berdasarkan nilai skoring rata-rata pada 10 lapang pandang ..............
16
DAFTAR GAMBAR
Gambar
1. Proses Pembuatan Silase Ransum .....................................................
2. Gambaran mikroskopis hati broiler normal pada umur 9 hari;
pewarnaan HE (pembesaran objektif 40X) ........................................
3. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi pakan silase
dan diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari; pewarnaan
HE (pembesaran objektif 40X) .........................................................
4. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi antibiotik dan
diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari; pewarnaan HE
(pembesaran objektif 40X) ................................................................
5. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi Lactobacillus
plantarum dan diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari;
pewarnaan HE (pembesaran objektif 40X) ........................................
6. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi ransum basal
dan diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari; pewarnaan
HE (pembesaran objektif 40X) .........................................................
Halaman
13
17
21
22
23
23
ABSTRACT
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM. Study Histopathology of Liver Broiler Given
Silase and Challenged by Salmonella typhimurium. Under the Direction of AGUS
SETIYONO.
The aim of this study was find out the description histopathology of liver broiler
given silase and infected by Salmonella thypimurium. The study used 168 broilers of the
Lohman strain starting from the age of day old chick (DOC) until the age 6 weeks. They
were devided into 7 treatment groups namely: B1 (Basal ration); B2 (B1 + S.
typhimurium infection); A (B1 + antibiotic + S. typhimurium infection); L1 (B1 +
Lactobacillus plantarum); L2 (L1 + S. typhimurium infection); S1 (silase ration) dan S2
(S1 + S. typhimurium infection). Each treatment consisted of 3 replication and each
replication consisted of 8 broilers. Necropsi was performed every week on one broiler
taken at random from each treatment. The liver for the histopathology examination using
Hematoxylin Eosin (HE) dyeing. Observation was conducted by qualitative description
such as the existance of oedema, foaming degeneration, hydrophis degeneration, infected
cells, by scoring system at 10 miscroscopic areas. Data processing was done by using
randomized complete design. The data obtained was analysed by Analysis of Variance
(ANOVA). The result of the study showed that after the silase was given, the level of
damage was descrease. This result indicates that the lactat acid, which is an antibacteria
worked well to reduce the liver damage caused by S. typhimurium infection.
STUDI HISTOPATOLOGI ORGAN HATI BROILER YANG DIBERI
PAKAN SILASE DAN DITANTANG Salmonella typhimurium
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM
B04103137
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2007
ABSTRAK
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM. Studi histopatologi organ hati Broiler yang
diberi pakan silase dan ditantang Salmonella typhimurium. Dibimbing oleh AGUS
SETIYONO.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui gambaran histopatologi organ hati
broiler yang diberi pakan silase dan diinfeksi Salmonella typhimurium. Penelitian ini
menggunakan 168 ekor ayam broiler strain Lohman yang dipelihara sejak umur sehari
(Day Old Chick) sampai umur 6 minggu. Perlakuan dibagi atas 7 kelompok perlakuan
yaitu: B1 (Ransum basal); B2 (B1 + infeksi S. typhimurium); A (B1 + antibiotik +
infeksi S. typhimurium); L1 (B1 + Lactobacillus plantarum); L2 (L1 + infeksi S.
typhimurium); S1 (ransum silase) dan S2 (S1 + infeksi S. typhimurium). Setiap perlakuan
terdiri atas 3 kali ulangan dan setiap ulangan terdiri dari 8 ekor ayam. Nekropsi dilakukan
setiap minggu pada satu ekor ayam yang diambil secara acak pada setiap perlakuan.
Organ hati diambil untuk preparat histopatologi menggunakan pewarna Hematoxylin
Eosin (HE). Pengamatan histopatologi organ hati dilakukan berdasarkan deskriptif
kualitatif seperti adanya oedema, degenerasi berbutir, degenerasi hidropis dan sel radang
dengan sistem skoring pada 10 lapang pandang. Pengolahan data dilakukan
menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap (RAL). Data yang diperoleh dianalisa
dengan sidik ragam acak (ANOVA). Hasil penelitian menunjukkan bahwa terjadi
penurunan tingkat kerusakan pada organ hati setelah pemberian silase. Hasil ini
mengindikasikan bahwa zat aktif berupa asam laktat yang bersifat antibakteri pada silase
bekerja baik untuk mengurangi timbulnya kerusakan hati akibat infeksi S. typhimurium.
STUDI HISTOPATOLOGI ORGAN HATI BROILER YANG DIBERI
PAKAN SILASE DAN DITANTANG Salmonella typhimurium
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM
B04103137
Skripsi
Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar
Sarjana Kedokteran Hewan
Pada Fakultas Kedokteran Hewan
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2007
LEMBAR PENGESAHAN
Judul Skripsi
Nama
NRP
: Studi histopatologi organ hati Broiler yang diberi pakan silase
dan ditantang Salmonella typhimurium
: Achmad Isfar Shaffan Adlim
: B04103137
Disetujui :
Dosen Pembimbing
Dr. Drh. Agus Setiyono, MS
NIP. 131 760 847
Diketahui
Wakil Dekan FKH IPB
Dr. Drh. I Wayan Teguh Wibawan, MSc.
NIP. 131 129 090
Tanggal Lulus:
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala karunia-Nya
sehingga skripsi dengan judul Studi histopatologi organ hati Broiler yang diberi pakan
silase dan ditantang Salmonella typhimurium ini berhasil diselesaikan. Penelitian ini
dilaksanakan sejak bulan Oktober 2006 – Februari 2007.
Terima kasih penulis ucapkan kepada bapak Dr. Drh. Agus Setiyono, MS yang
telah banyak memberikan bimbingan dan saran dalam penyusunan skripsi ini. Selain itu
kepada Dr. Drh. Ekowati Handharyani, MS yang telah bersedia sebagai dosen penguji. Di
samping itu, ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada Bapak dan Ibu Dosen beserta
staf dan pegawai di Bagian Patologi, Departemen Klinik, Reproduksi dan Patologi
Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor yang telah membantu dalam
pelaksanaan penelitian ini. Terima kasih juga kepada, saudara-saudaraku Bangkit, Edi,
Laksana, Feri, Heru, Sabto, Supri, Kunto, Yunus, Mbak Merry dan Dattu.
Ungkapan terima kasih yang sebesar-besarnya disampaikan kepada bapak
Achmad Zainal Adlim (alm), Ibu Maria Ulfah yang selalu mencintai tiada batas, Mas
Awang-Ninda-Izza, Mbak Iin-Adi-Hirzi, seluruh keluarga besar Mohammad Mastoer dan
Mohammad Masduki serta Heirmayani yang tetap menyayangi sepenuh hati untuk
berbagi semangat dan kebahagiaan dalam hidup ini. Lanang, Uus, Ramli, Aziz dan
teman-teman keluarga dari pulau Madura yang tidak dapat disebutkan namanya satupersatu, atas segala do’a serta dukungannya baik secara moral maupun materil yang
diberikan selama penulis melakukan penelitian dan penulisan skripsi ini.
Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi para pembaca.
Bogor, Agustus 2007
Achmad Isfar Shaffan Adlim
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Pamekasan pada tanggal 11 Juli 1985 sebagai anak ke tiga
dari tiga bersaudara, anak dari pasangan ayah Achmad Zainal Adlim dan ibu Maria
Ulfah. Tahun 2003 penulis lulus dari SMU Negeri 3 Pamekasan dan pada tahun yang
sama lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI).
Penulis memilih Fakultas Kedokteran Hewan.
Selama mengikuti perkuliahan penulis juga aktif bekerja pada beberapa
perusahaan swasta yang bergerak dalam bidang Agribisnis, Logistik, Asuransi otomotif,
Konsultan, dan General Trading di Jakarta maupun Bogor. Sampai saat ini penulis juga
masih aktif sebagai marketing officer pada perusahaan Asuransi otomotif dan General
Trading di Jakarta.
DAFTAR ISI
Halaman
KATA PENGANTAR ............................................................................................. i
DAFTAR TABEL .................................................................................................... ii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................... iii
PENDAHULUAN .................................................................................................... 1
Latar Belakang ................................................................................................. 1
Tujuan .............................................................................................................. 2
Hipotesa ........................................................................................................... 2
TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................................... 3
Silase ............................................................................................................... 3
Bakteri Asam Laktat ......................................................................................... 4
Penggunaan Antibiotika ................................................................................... 5
Salmonellosis pada Unggas .............................................................................. 6
Hati .................................................................................................................. 7
MATERI DAN METODE ...................................................................................... 10
Tempat dan Waktu ........................................................................................... 10
Materi .............................................................................................................. 10
Kandang dan Perlengkapan ........................................................................ 10
Ransum ...................................................................................................... 10
Perlakuan .................................................................................................... 11
Bakteri dan Additive ................................................................................... 12
Pembuatan Ransum Silase ........................................................................... 12
Vitamin dan Vaksin .................................................................................... 12
Uji Tantang ................................................................................................. 12
Metode ............................................................................................................. 13
Rancangan Percobaan ................................................................................ 13
Pengamatan ................................................................................................ 14
Prosedur Pelaksanaan ................................................................................. 14
HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................................. 16
KESIMPULAN DAN SARAN.................................................................................. 25
Kesimpulan ........................................................................................................ 25
Saran .................................................................................................................. 25
DAFTAR PUSTAKA .............................................................................................. 26
LAMPIRAN .............................................................................................. ………... 29
DAFTAR TABEL
Tabel
1. Susunan dan kandungan zat makanan dalam ransum penelitian .........
Halaman
11
2. Histopatologi organ hati broiler akibat infeksi S. typhimurium
berdasarkan nilai skoring rata-rata pada 10 lapang pandang ..............
16
DAFTAR GAMBAR
Gambar
1. Proses Pembuatan Silase Ransum .....................................................
2. Gambaran mikroskopis hati broiler normal pada umur 9 hari;
pewarnaan HE (pembesaran objektif 40X) ........................................
3. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi pakan silase
dan diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari; pewarnaan
HE (pembesaran objektif 40X) .........................................................
4. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi antibiotik dan
diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari; pewarnaan HE
(pembesaran objektif 40X) ................................................................
5. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi Lactobacillus
plantarum dan diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari;
pewarnaan HE (pembesaran objektif 40X) ........................................
6. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi ransum basal
dan diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari; pewarnaan
HE (pembesaran objektif 40X) .........................................................
Halaman
13
17
21
22
23
23
ABSTRACT
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM. Study Histopathology of Liver Broiler Given
Silase and Challenged by Salmonella typhimurium. Under the Direction of AGUS
SETIYONO.
The aim of this study was find out the description histopathology of liver broiler
given silase and infected by Salmonella thypimurium. The study used 168 broilers of the
Lohman strain starting from the age of day old chick (DOC) until the age 6 weeks. They
were devided into 7 treatment groups namely: B1 (Basal ration); B2 (B1 + S.
typhimurium infection); A (B1 + antibiotic + S. typhimurium infection); L1 (B1 +
Lactobacillus plantarum); L2 (L1 + S. typhimurium infection); S1 (silase ration) dan S2
(S1 + S. typhimurium infection). Each treatment consisted of 3 replication and each
replication consisted of 8 broilers. Necropsi was performed every week on one broiler
taken at random from each treatment. The liver for the histopathology examination using
Hematoxylin Eosin (HE) dyeing. Observation was conducted by qualitative description
such as the existance of oedema, foaming degeneration, hydrophis degeneration, infected
cells, by scoring system at 10 miscroscopic areas. Data processing was done by using
randomized complete design. The data obtained was analysed by Analysis of Variance
(ANOVA). The result of the study showed that after the silase was given, the level of
damage was descrease. This result indicates that the lactat acid, which is an antibacteria
worked well to reduce the liver damage caused by S. typhimurium infection.
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Kebutuhan masyarakat terhadap protein hewani terus meningkat. Sebagian
besar protein hewani berasal dari hewan ternak terutama unggas. Untuk itu sektor
perunggasan perlu dikembangkan agar dapat menghasilkan produk yang aman,
sehat dan halal bagi masyarakat Indonesia. Salah satu permasalahan penting
dalam peternakan ayam adalah Salmonellosis. Selain dapat mengganggu proses
pertumbuhan, Salmonellosis juga sering menyebabkan kematian pada ayam akibat
toksin yang dihasilkan oleh Salmonella typhimurium. Toksin ini dapat menyerang
sistem pencernaan ayam, salah satunya adalah organ hati. Untuk menanggulangi
permasalahan tersebut para peternak dan perusahaan peternakan unggas
melakukan pemberian antibiotik.
Antibiotik telah diketahui berguna untuk memberantas penyakit dan juga
dapat berfungsi sebagai growth promotor pada ayam. Namun pemberian
antibiotik dalam waktu lama dapat menyebabkan munculnya permasalahan baru
berupa resistensi bakteri patogen terhadap antibiotik yang diberikan. S.
typhimurium akan bersifat resisten terhadap antibiotik seperti ampisilin,
kotrimoksasol dan tetrasiklin (Tabbu 2000). Antibiotik juga dapat menimbulkan
residu yang berbahaya bagi manusia akibat mengkonsumsi produk unggas. Untuk
itu jumlah bakteri patogen S. typhimurium harus ditekan keberadaannya sehingga
tidak menyebabkan Salmonellosis (penyakit yang disebabkan oleh bakteri
Salmonella sp seperti fowl typoid, pullorum dan fowl paratyphoid) baik pada
ternak maupun pada manusia.
Masalah yang timbul akibat pemberian antibiotik perlu mendapat perhatian
penting, sehingga pada penelitian ini diujicobakan pemberian silase untuk
mengurangi kerusakan hati akibat S. typhimurium. Silase memiliki kelebihan
antara lain : (1) Ransum akan lebih awet (2) Memiliki kandungan Bakteri Asam
Laktat yang berperan sebagai probiotik (3) Memiliki kandungan asam organik
yang cukup baik, yang berperan sebagai growth promotor dan penghambat
penyakit (4) Kandungan air yang terdapat dalam silase cukup baik, sehingga
sangat bermanfaat bagi ternak (Sapienza dan Keith 1993).
Bakteri asam laktat yang digunakan dalam pengawetan bahan makanan
umumnya berbentuk silase dan dibuat melalui proses ensilase. Silase dapat
dikategorikan probiotik yang bermanfaat sebagai feed additive karena memiliki
kelebihan sebagai berikut : dapat meningkatkan ketersediaan lemak dan protein
bagi ternak, mempertahankan konversi pakan, meningkatkan pertumbuhan berat
badan, mampu memperbaiki resistensi penyakit akibat stimulasi dan peningkatan
natural immunity, selain itu juga dapat meningkatkan kandungan vitamin B
komplek melalui proses fermentasi (McDonald et al. 1991). Berdasarkan
kelebihan tersebut, diharapkan silase dapat menggantikan penggunaan antibiotik
sebagai growth promotor dan obat salmonellosis yang aman bagi ternak dan
manusia sebagai konsumen produk ternak.
Tujuan
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui gambaran histopatologi organ
hati broiler yang diberi pakan silase dan diinfeksi S. typhimurium.
Hipotesa
H0
: Ransum Silase dapat mengurangi kerusakan hati yang diakibatkan S.
typhimurium.
H1
: Ransum Silase tidak dapat mengurangi kerusakan hati yang diakibatkan
S. typhimurium.
Manfaat
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai
silase yang dapat mengurangi kerusakan organ hati broiler akibat infeksi bakteri S.
typhimurium.
2
TINJAUAN PUSTAKA
Silase
Silase merupakan makanan ternak yang dihasilkan melalui proses
fermentasi. Tujuan pembuatan silase adalah untuk memaksimalkan nutrien yang
dapat diawetkan (Sapienza dan Keith 1993), sehingga diharapkan pakan dapat
lebih tahan lama dalam penyimpanannya.
Silase memiliki beberapa kelebihan, antara lain : (1) Ransum lebih awet,
(2) Memiliki kandungan Bakteri Asam Laktat yang berperan sebagai probiotik,
(3) Memiliki kandungan asam organik cukup baik yang berperan sebagai growth
promotor dan penghambat penyakit, (4) Kandungan air yang terdapat dalam silase
cukup baik sehingga sangat bermanfaat bagi ternak.
Keberhasilan pembuatan silase terlihat dari maksimalnya nutrien yang
dapat diawetkan. Silase yang baik diperoleh dengan cara menekan berbagai
aktivitas enzim yang tidak dikehendaki dalam bahan baku dan dapat mendorong
berkembangnya bakteri penghasil asam laktat (Sapienza dan Keith 1993). Selain
menghasilkan asam laktat, bakteri ini juga mampu menghasilkan berbagai
substansi antimikroba yang potensial seperti hidrogen peroksida, diasetil, asam
organik dan yang utama adalah bakteriosin (Cintas et al. 1995). Bakteriosin
merupakan substansi protein yang memiliki berat molekul kecil dan memiliki efek
antagonis sebagai bakterisidal atau bakteriostatik terhadap pertumbuhan bakteri
patogen (Suarsana et al. 2001).
Karakteristik silase yang penting adalah kandungan asam lemak
terbangnya (asam asetat, asam propionat dan asam butirat) akan menekan
pertumbuhan jamur. Dari ketiga asam lemak terbang tersebut yang paling toksik
adalah asam butirat dan yang paling baik adalah asam asetat. Asam butirat
dikatakan paling toksik karena memiliki antifungal yang sangat kuat sehingga
menyebabkan bakteri Clostridial menjadi stabil. Asam laktat dapat menekan
pertumbuhan jamur meskipun tidak seefektif asam asetat. Secara keseluruhan,
semakin besar tingkat fermentasi asam laktat dan asam asetat maka silase tersebut
akan semakin stabil dibandingkan pada kondisi aerob.
3
Bakteri Asam Laktat
Bakteri asam
laktat
merupakan
golongan
mikroorganisme
yang
bermanfaat karena sifatnya tidak toksik bagi inang dan mampu menghasilkan
asam laktat sebagai hasil metabolismenya. Asam laktat berfungsi membunuh
mikroorganisme patogen dalam tubuh. Bakteri asam laktat juga memproduksi
metabolit sekunder seperti asam hidroksi peroksida, diasetil, amonia, asam lemak
dan bakteriosin (Lopez 2000). Produksi bakteriosin ini juga dapat menghambat
perkembangan bakteri patogen (Wiryawan dan Anita 2001). Bakteriosin
merupakan senyawa protein yang bersifat antibakteri terhadap mikroorganisme
(bakteri), jika ditinjau dari segi genetiknya berdekatan dengan mikroorganisme
penghasil bakteriosin, sehingga bakteriosin ini akan terdegradasi dalam
pencernaan manusia maupun hewan (Wiryawan dan Anita 2001).
Mekanisme kerja bakteri asam laktat yang dikemukakan oleh Lopez
(2000), yaitu menekan kemampuan hidup mikroorganisme patogen karena mampu
memproduksi komponen antibakteria seperti hidroksi peroksida dan asam-asam
organik seperti asam laktat. Asam laktat yang dihasilkan tersebut berguna untuk
menurunkan pH. Beberapa mekanisme kerja yang dilakukan oleh asam laktat
sebagai probiotik, yaitu : (1) Berkompetisi dengan mikroorganisme patogen untuk
mendapat nutrisi dan tempat tinggal, (2) Menjaga keseimbangan ekosistem
melalui penjagaan pH lingkungan agar tetap berada dalam kondisi asam sehingga
perkembangan bakteri patogen dapat terhambat, (3) Menyediakan kebutuhan
enzim-enzim yang mampu mencerna serat kasar, protein, lemak dan karbohidrat
(4) Mendetoksifikasi zat beracun dalam tubuh, (5) Mampu menstimulasi
kekebalan tubuh dengan cara meningkatkan konsentrasi antibodi imunoglobulin
(Lopez 2000).
Bakteri asam laktat dalam pengawetan bahan makanan digunakan dalam
proses ensilase yang akan menghasilkan suatu produk yaitu silase. Silase ini dapat
dikategorikan sebagai probiotik yang bermanfaat sebagai feed additive dengan
beberapa kelebihan sebagai berikut : dapat meningkatkan ketersediaan lemak dan
protein bagi ternak, mempertahankan konversi pakan, meningkatkan pertumbuhan
berat badan, mampu memperbaiki resistensi penyakit akibat stimulasi dan
4
peningkatan natural immunity, selain itu juga dapat meningkatkan kandungan
vitamin B komplek melalui proses fermentasi (McDonald et al. 1991).
Pemberian bakteri asam laktat (BAL) pada ayam memiliki dua sasaran,
yaitu di saluran pencernaan dan di sekum yang diharapkan dapat menghasilkan
senyawa antimikroba sehingga dapat berpengaruh terhadap ternak (Fuller 1992).
Sedangkan Watkins dan Miller (1983) menunjukkan adanya penurunan mortalitas
pada ayam gnotobiotik yang diberi kultur Lactobacillus acidophilus dua hari
sebelum diberi kultur bakteri patogen S. typhimurium.
Penggunaan Antibiotik
Broiler mampu mengolah makanannya dengan cepat setelah makanan
dikonsumsi. Keadaan ini menyebabkan broiler memiliki laju pertumbuhan yang
sangat cepat, selain dipengaruhi oleh genetik, cepatnya laju pertumbuhan juga
dipicu oleh adanya growth promotor yang umumnya menggunakan senyawa
antibiotik. Selain sebagai growth promotor, senyawa antibiotik juga dapat
meningkatkan efisiensi pakan, alternatif pengobatan dan juga dapat meningkatkan
reproduksi ternak. Namun di beberapa negara telah melarang penggunaan
antibiotik sebagai zat aditif.
Menurut Tabbu (2000), penurunan penggunaan antibiotik disebabkan oleh
2 hal utama, yaitu : (1). Antibiotik dapat meninggalkan residu dalam jangka
panjang sehingga dapat membahayakan kesehatan konsumen, (2). Antibiotik
menyebabkan mikroorganisme yang berada dalam tubuh manusia ataupun hewan
menjadi resisten, terutama bakteri patogen seperti Salmonella sp, Escherichia coli
dan Clostridium sp. Akhir-akhir ini banyak ditemui penggunaan probiotik sebagai
bahan aditif yang dapat menggantikan penggunaan antibiotik dalam pakan, yaitu
sebagai growth promotor dan dapat memelihara kesehatan ternak. Bakteri asam
laktat yang berperan dalam pengawetan pakan melalui proses ensilase dapat
dimanfaatkan sebagai probiotik dalam ransum. Suplementasi pakan dengan
probiotik ataupun prebiotik dapat meningkatkan bobot badan dan efisiensi serta
konversi pakan broiler diusia muda namun tidak berlaku pada broiler berumur
lebih dari 2 minggu (Palliyaguru et al. 2004).
5
Salmonellosis pada Unggas
Salmonella adalah bakteri berbentuk batang. Ukuran lebar Salmonella
antara 0.3 – 0.5 µm dan panjang 0.7 – 2.5 µm. Pertumbuhan optimal pada
temperatur 37.0 – 37.5 oC (Shivaprasad 1997). Di alam bakteri Salmonella tidak
hidup lama, terutama bila keadaan disekitarnya kering. Sumber infeksi Salmonella
paling sering terjadi pada flock unggas yang diduga berasal dari pakan. Cox et al.
(1996) melaporkan bahwa tempat penetasan merupakan sumber penularan
Salmonella sp yang dominan pada peternakan ayam broiler.
Infeksi Salmonella sp terjadi melalui 3 cara yaitu kongenital, oral dan
aerogen (Ressang 1984). Secara kongenital yaitu penularan melalui telur sehingga
anak ayam yang menetas melalui telur tersebut akan terinfeksi Salmonella sp.
Infeksi secara oral terjadi melalui pakan dan air minum yang tercemari Salmonella
sp. Sedang aerogen adalah infeksi yang terjadi di dalam mesin penetas telur
dimana masa tunas penyakit berkisar antara 1 minggu. Penularan melalui vektor
juga lazim terjadi, penyebaran ini terjadi melalui hewan-hewan kecil seperti tikus,
lalat, burung liar dan peralatan yang mengandung bakteri Salmonella sp yang
digunakan di dalam kandang (Cox et al. 1996).
Daging dan telur unggas merupakan sumber utama penularan Salmonella
sp pada manusia. Banyak cara organisme tersebut dapat masuk, menyebar, dan
bertahan di dalam tubuh unggas yang pada akhirnya produk yang dihasilkan oleh
unggas juga akan tercemari oleh Salmonella sp. Perusahaan kecil maupun besar
telah menggalakkan kebijakan kontrol dalam mengurangi berkembangnya bakteri
Salmonella sp. Peningkatan monitoring dan kontrol di dalam kawasan peternakan
lebih difokuskan pada bagian breeding, umumnya lebih menekan perkembangan
S. Enteritidis dan S. typhimurium. Kawasan breeding, pabrik pakan dan kawasan
hatcheries merupakan kawasan utama terjadinya kontaminasi Salmonella sp.
Kontaminasi pada kawasan tersebut umumnya melalui sistem ventilasi (Davis dan
Breslin 2004).
Bentuk penyakit yang disebabkan oleh bakteri Salmonella sp antara lain :
fowl typoid, pullorum dan fowl paratyphoid. Pada kasus fowl typoid akan terjadi
hepatitis parenkimatosa yang menyebar dan pada kasus akut akan terjadi distrofi
lemak, sedang pada usus dan ginjal akan ditemukan adanya infiltrasi limfosit dan
6
heterofil, sehingga jumlah eritrosit dapat menurun dari 3.5 juta menjadi 1.5 juta
per ml dan leukosit akan meningkat dari 18.000 menjadi 240.000 per ml (Tabbu
2000).
Pada ayam muda yang mengalami pullorum akan menunjukkan
peradangan dan pendarahan pada hati, paru-paru dan ginjal. Demikian pula
dengan sekum pada ayam muda ini akan mengalami nekrosis pada mukosa dan
submukosa dengan akumulasi nekrosis debris dengan campuran fibrin dan
heterofil dalam lumen (Shiravaprasad 1997). Sedangkan perubahan yang terjadi
pada kasus fowl paratyphoid adalah adanya pendarahan dan infiltrasi heterofil
pada berbagai jaringan seperti hati, limpa, ginjal, usus dan paru-paru (Tabbu
2000).
Hati
Hati adalah organ tubuh yang berukuran besar dan merupakan kelenjar
terbesar dalam tubuh hewan ataupun manusia. Di dalam hati ditemukan banyak
sel-sel RES (Reticulo Endothelial System), yakni sel-sel Kupffer yang terdapat
dalam dinding-dinding kapiler dan sinusoid-sinusoid hati yang berfungsi untuk
membersihkan benda-benda asing dari darah (Ressang 1984 dan Hartono 1992).
Sel-sel Kupffer yang berada di lumen sinusoid bertindak sebagai makrofag yang
mempunyai fungsi fagositik (Ganong 2003). Hati merupakan organ sekresi
terbesar dan merupakan kelenjar pertahanan yang terpenting dalam tubuh. Sel hati
dapat rusak hingga lebih dari 80% tanpa menyebabkan gejala yang berat dan
dapat sembuh kembali secara sempurna (Nort dan Bell 1990). Hati dapat
mengalami beberapa perubahan diantaranya adalah degenerasi hidropis dan
degenerasi berbutir yang terlihat pada sel-sel hati. Kerusakan pada hati dapat
terjadi oleh beberapa faktor yaitu: onset pemaparan yang terlalu lama atau terlalu
singkat, durasi pemaparan, dosis dan host yang rentan (Jubb 1993). Kerusakan
yang terjadi pada sel hati dapat bersifat sementara dan tetap. Sel akan mengalami
perubahan untuk beradaptasi mempertahankan hidup pada kerusakan yang bersifat
sementara. Perubahan yang bersifat sementara ini biasa disebut degenerasi.
7
Degenerasi sering terjadi karena beberapa hal, adanya gangguan
biokimiawi yang disebabkan oleh iskemia, anemia, metabolisme abnormal dan zat
kimia yang bersifat toksik adalah salah satu faktornya. Gangguan biokimiawi ini
menyebabkan membran sel normal akan mengalami kerusakan sehingga
keseimbangan pengeluaran K+ dan pemasukan ion Na+, Ca+ dan air akan
terganggu. Kerusakan membran sel menyebabkan terjadinya peningkatan jumlah
air ke dalam sel sehingga menyebabkan sitoplasma menjadi bengkak dan dipenuhi
butiran-butiran air. Apabila kerusakan membran sel terus berlangsung, maka
sitoplasma sel akan berisi cairan yang membentuk vakuola-vakuola sehingga
sitoplasma terlihat lebih pucat, keadaan ini dinamakan degenerasi hidropis
(Cheville 1999). Degenerasi hidropis dan degenerasi berbutir sering terjadi secara
bersamaan pada sel-sel hati.
Degenerasi hyalin jaringan ikat sering terjadi pada proses peradangan hati
yang menahun sedangkan pada degenerasi lemak terjadi penumpukan lemak di
lobuli hati yang sering terlihat pada akhir masa kebuntingan karena kekurangan
oksigen dan adanya bahan toksik. Hal ini terjadi karena adanya gangguan
keseimbangan antara trigliserida misel dan lemak globular. Ketidakseimbangan
lemak terjadi karena pengangkutan dan sintesis lemak di hati meningkat
sedangkan penggunaan lemak dalam sel hati berkurang sehingga jumlah lemak
dalam sel hati meningkat (Donatus 2001). Selain degenerasi, sel juga sering
mengalami akumulasi protein di dalam sitoplasmanya (Carlton dan McGavin
1995).
Degenerasi lemak dan nekrosa merupakan stadium permulaan dari proses
kelainan dalam hati, kemudian keadaan ini akan berlanjut pada proses
peradangan. Peradangan dapat terjadi secara infeksius maupun non infeksius.
Peradangan secara non infeksius secara umum disebabkan oleh toksin. Hepatitis
non infeksius atau toksik dapat terjadi secara akut maupun kronis. Bentuk
hepatitis ini ditandai oleh kematian sel-sel hati serta perubahan-perubahan yang
mengawali kematian seperti cloudy swelling, degenerasi lemak dan nekrosis
(Harold 1971). Secara mikroskopis sifat nekrosis koagulatif ditandai dengan
piknosis dan sitoplasma asidofilik yang dilanjutkan dengan penguraian dan
menghilangnya komponen-komponen sel (Nabib 1987).
8
Kerusakan sel secara terus-menerus akan mencapai suatu titik akumulasi
toksin yang sudah bersifat kronis sehingga terjadi kematian sel. Mekanisme
kematian sel terjadi melalui dua proses: yaitu apoptosis dan nekrosa. Pada
apoptosis terjadi kematian sel yang terprogram. Kematian sel dipicu oleh
fragmentasi DNA dan biasanya terjadi pada satu atau sekelompok sel saja. Lain
halnya dengan nekrosa, kematian sel bersifat menyeluruh. Pada nekrosa biasanya
ditemukan sel radang dan sitoplasma sel akan terlihat asidofilik. Nekrosa ini ada
yang bersifat lokal dan ada yang bersifat difus (Lu 1995).
9
MATERI DAN METODE
Tempat dan Waktu
Penelitian ini dilakukan pada bulan Oktober 2006 sampai Februari 2007,
bertempat di Laboratorium Lapang Ilmu Nutrisi Unggas, Jurusan Ilmu Nutrisi dan
Makanan Ternak, Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor. Sedangkan
pembuatan preparat dan analisa histopatologi dilaksanakan di Bagian Patologi,
Fakultas Kedokteran hewan, Institut Pertanian Bogor.
Materi
Ternak
Pada penelitian ini digunakan 168 ekor broiler strain Lohman yang
dipelihara sejak umur sehari (Day Old Chick) sampai umur 6 minggu dengan ratarata bobot badan DOC adalah 41,76 gram. DOC diperoleh dari poultry shop
Bogor.
Kandang dan Perlengkapan
Kandang yang digunakan adalah kandang litter berukuran 1 x 1 m. Setiap
sekat dilengkapi dengan 1 tempat pakan dan 1 tempat minum. Peralatan lain yang
digunakan adalah timbangan, plastik ransum, tong, karet, nomor sayap dan ember.
Ransum
Ransum yang digunakan adalah ransum kering komplit, ransum silase
dengan perlakuan uji tantang S. typhimurium dan ransum silase tanpa uji tantang.
Komposisi ransum terdiri dari: jagung, dedak padi, bungkil kedelai, CGM, tepung
ikan, minyak kelapa, CaCO3, DCP, L-Lysin, DL-Methionine dan premix. Ransum
ini disusun atas rekomendasi Scoot et al. (1982). Susunan dan kandungan nutrisi
ransum kering komplit yang digunakan dalam penelitian ini dapat dilihat pada
Tabel 1.
10
Tabel 1. Susunan dan kandungan zat makanan dalam ransum penelitian
Bahan Makanan
Persentase (%)
Jagung
Dedak Padi
Bungkil Kedelai
CGM
Tepung Ikan
Minyak Kelapa
DCP
Caco3
L-Lysin
DL-Methionine
Premix*
Total ( % )
50.0
12.0
16.7
11.0
5.5
2.0
1.0
1.0
0.3
0.2
0.3
100
Kandungan nutrisi ransum penelitian :
Protein Kasar ( % )
Energi Bruto (kkal/kg)
Serat Kasar ( % )
Ca ( % )
P-tersedia ( % )
Lys (% )
Met ( % )
23.03
3020.00
4.19
0.96
0.63
1.20
0.67
*Dalam 1 kg premix mengandung Vit A 4000.000 IU, Vit D3 800.000 IU, Vit E 4.500 mg,
Vit K3 450 mg, Vit B1 450 mg, Vit B2 1.350 mg, Vit B6 480 mg, Vit B12 6 mg, Ca-d-P
2.400 mg, As folat 270 mg, As nikotinat 7.200 mg, kolin klorida 28.000 mg, DL-Met
28.000 mg, L-Lys 50.000mg, Fe 8.500 mg, Cu 700 mg, Mg 18.500 mg, Zn 14.000 mg,
Co 50 mg, I 70 mg, Se 35 mg, dan antioksidan.
Perlakuan
Perlakuan yang digunakan terdiri atas tujuh kelompok, yaitu :
S1
= Ransum silase
B1
= Ransum basal
L1
= B1 + Lactobacillus plantarum
S2
= S1 + infeksi S. typhimurium
B2
= B1 + infeksi S. typhimurium
L2
= L1+ infeksi S. typhimurium
A
= B1 + antibiotik + infeksi S. typhimurium
11
Bakteri dan Additive
Dua macam bakteri yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu L.
plantarum diperoleh dari Laboratorium Bioteknologi Lembaga Ilmu Pengetahuan
Indonesia (LIPI), Cibinong-Bogor dan S. typhimurium tipe ganas diperoleh dari
Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor.
Additive yang digunakan adalah Bambermycin sebesar 0,02 ppm.
Pembuatan Ransum Silase Komplit
Ransum silase komplit berkadar air 40% dibuat dari ransum basal yang telah
disusun sesuai dengan kebutuhan ternak unggas. Ransum basal tersebut dijadikan
ransum silase dengan menambahkan air dan starter bakteri L. plantarum. Proses
ensilase dilakukan dengan cara menyimpan ransum dalam kantong plastik
berukuran 5 kg yang kedap udara dan diusahakan tidak ada udara yang masuk,
selanjutnya disimpan di dalam tong selama 3 minggu. Pada saat memasuki
penyimpanan minggu ke-3, ransum silase diamati kandungan nutrien, energi, pH
dan bahan kering ransum. Karena pada minggu ke-3 proses ensilase memasuki
waktu yang cukup stabil. Proses pembuatan silase dapat dilihat pada Gambar 1.
Vitamin dan Vaksin
Vitamin yang digunakan adalah Vita Stress. Sedangkan jenis vaksin yang
digunakan antara lain: vaksin Newcastle Diseases (ND) I yang diberikan pada
ayam umur 3 hari yaitu melalui tetes mata, ND II diberikan pada ayam umur 21
hari yaitu dengan cara suntik dan vaksin Gumboro diberikan pada saat ayam
berumur 10 hari dengan pemberian secara oral.
Uji tantang
Infeksi S. typhimurium dilakukan pada broiler umur 7 hari secara oral.
Jenis Salmonella yang digunakan adalah S. typhimurium ganas dari biakan cair =
1 x 107 CFU untuk setiap ekor ayam.
12
Lactobacillus
plantarum
Diaduk
Air
60 : 40
Dicampur
Ransum
basal
Ransum basal + LP
fermentasi
Dikemas di dalam
kantong plastik
Kedap udara
Disimpan selama
3 minggu
Silase
Gambar 1. Proses Pembuatan Silase Ransum
Metode
Rancangan Percobaan dan Analisis Data
Rancangan penelitian yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap
(RAL). Anak ayam broiler terbagi dalam 7 kelompok perlakuan.
Data yang
diperoleh dianalisa dengan sidik ragam (Analysis of Variance / ANOVA). Input
data ANOVA diperoleh dari pengamatan pada 7 perlakuan yang masing-masing
memiliki 3 ulangan dengan cara skoring pada 10 lapang pandang.
13
Pengamatan
Pengamatan pada penelitian ini meliputi pemeriksaan histopatologi.
Pemeriksaan ini terfokus pada perubahan-perubahan yang terjadi pada sitoplasma,
inti dari sel hepatosit, sinusoid dan pembuluh darah dengan mengamati adanya
perubahan oedema, degenerasi berbutir, degenerasi hidropis dan sel radang.
Pengamatan dilakukan terhadap 10 lapang pandang dengan pembesaran objektif
10X dan 20X. Selanjutnya dilakukan skoring untuk mengetahui derajat kerusakan
dan keparahan yang terjadi akibat infeksi S. typhimurium. Sistem skor yang
dilakukan memiliki interval 0 sampai 4 dengan penilaian kondisi hati 0 : hati
dalam kondisi normal, terlihat sel-sel hepatosit tersusun radier; 1 : terjadi oedema
pada hati dan sinusoid dengan adanya jarak yang terlihat saling menjauh antara
sel-sel hepatosit; 2 : terjadi degenerasi berbutir, terlihat adanya butir-butir kecil
dalam jumlah yang banyak didalam sel-sel hepatosit; 3 : terjadi degenerasi
hidropis, terlihat adanya butir rongga besar sehingga menggeser inti sel hepatosit;
4 : terdapat sel sarang radang yang mengelilingi sel-sel hepatosit dan bergerombol
dengan warna khas ungu.
Prosedur Pelaksanaan
Persiapan kandang dan ayam dilakukan dua minggu sebelum penelitian
dilaksanakan. Ransum penelitian dan air minum diberikan ad libitum. Pakan silase
diberikan pada saat ayam berumur 7 hari. Tempat pakan dan tempat air minum
diletakkan di atas sekam di dalam kandang sekat..
Ayam dipelihara dalam kandang litter, Setiap kandang berisi 8 ekor ayam.
Tiap unit kandang dilengkapi dengan lampu sebesar 60 watt yang berfungsi
sebagai penghangat tubuh DOC. Tempat pakan dan tempat air minum digantung
sejajar dengan punggung ayam agar pakan dan air minum tidak mudah kotor oleh
ekskreta ataupun sekam. Kontrol kebersihan kandang, tempat minum dan pakan
dilakukan setiap hari. Selama penelitian dilakukan, suhu dan kelembaban udara
pada ruang kandang tetap diperhatikan.
Setelah proses
pemeliharaan dan pemotongan selesai
dilakukan,
dilanjutkan dengan pengumpulan sampel dan pembuatan preparat histopatologi.
Pengumpulan sampel organ hati dilakukan pada saat broiler berumur 9, 18, 27, 36
14
dan 42 hari. Dalam setiap pengamatan yang dilakukan digunakan 3 ekor ayam
yang diambil secara acak. Hati Broiler disampel, dikumpulkan dan difiksasi
menggunakan larutan fiksatif formalin. Sampel diproses melalui serangkaian
tahapan yaitu proses dehidrasi dengan peningkatan konsentrasi ethyl alcohol (50%
- 100%), clearing atau penjernihan dan kemudian disimpan dalan larutan buffer
neutral formaline (BNF) 10% (pada pH 7.2 – 7.4) , embedding atau penanaman
jaringan dalam paraffin, pemotongan dengan menggunakan mikrotom setebal 5
µm. Proses ini dilanjutkan dengan proses pewarnaan HE (Hematoksilin Eosin)
dan yang terakhir adalah mounting atau penutupan dengan gelas penutup
(Humason 1972). Preparasi preparat, identifikasi dan pengamatan preparat
dilakukan di Bagian Patologi, Departemen Klinik, Reproduksi dan Patologi
Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor.
15
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini memberikan data pengamatan histopatologi organ hati
broiler pada 7 perlakuan. Data ini menunjukkan tingkat kerusakan hati yang
diakibatkan adanya infeksi bakteri S. typhimurium. Kerusakan yang timbul pada
hati akibat infeksi S. typhimurium dicoba ditekan dengan pemberian silase, L.
plantarum dan antibiotik. Pada Tabel 2 disajikan hasil pengamatan histopatologi
organ hati.
Tabel 2. Histopatologi organ hati broiler akibat infeksi S. typhimurium
berdasarkan nilai skoring rata-rata pada 10 lapang pandang
Hari Pengamatan
Perlakuan1)
9
18
27
36
42
0.00a 2)
1,03) ± 0,00 a
1,6 ± 0,52b
1,4 ± 0,74a
1,3 ± 1,57a
B1
0.00a
2,0 ± 0,67b
2,4 ± 0,52c
2,2 ± 0,70c
2,6 ± 0,52c
L1
0.00a
2,5 ± 0,48c
2,3 ± 0,53c
3,2 ± 0,42d
3,0 ± 0,00d
S2
0.00a
2,9 ± 0,57d
2,4 ± 0,52c
1,0 ± 0,32a
1,5 ± 0,85a
B2
0.00a
1,9 ± 0,29b
2,5 ± 0,53c
2,6 ± 0,57c
3,2 ± 0,42d
L2
0.00a
1,8 ± 0,63b
1,7 ± 1,42b
3,2 ± 0,42d
3,6 ± 0,52d
A
0.00a
2,4 ± 0,52c
2,1 ± 0,32b
3,0 ± 0,94d
3,5 ± 0,53d
S1
1) Keterangan: S1 (Ransum silase), B1 (Ransum basal), L1 (B1 + L. Plantarum),
S2 (S1 + infeksi S. typhimurium), B2 (B1 + infeksi S. typhimurium), L2 (L1+
infeksi S. typhimurium), A (B1 + antibiotik + infeksi S. typhimurium)
2) Superskrip yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan berbeda nyata
(P
PAKAN SILASE DAN DITANTANG Salmonella typhimurium
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM
B04103137
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2007
ABSTRAK
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM. Studi histopatologi organ hati Broiler yang
diberi pakan silase dan ditantang Salmonella typhimurium. Dibimbing oleh AGUS
SETIYONO.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui gambaran histopatologi organ hati
broiler yang diberi pakan silase dan diinfeksi Salmonella typhimurium. Penelitian ini
menggunakan 168 ekor ayam broiler strain Lohman yang dipelihara sejak umur sehari
(Day Old Chick) sampai umur 6 minggu. Perlakuan dibagi atas 7 kelompok perlakuan
yaitu: B1 (Ransum basal); B2 (B1 + infeksi S. typhimurium); A (B1 + antibiotik +
infeksi S. typhimurium); L1 (B1 + Lactobacillus plantarum); L2 (L1 + infeksi S.
typhimurium); S1 (ransum silase) dan S2 (S1 + infeksi S. typhimurium). Setiap perlakuan
terdiri atas 3 kali ulangan dan setiap ulangan terdiri dari 8 ekor ayam. Nekropsi dilakukan
setiap minggu pada satu ekor ayam yang diambil secara acak pada setiap perlakuan.
Organ hati diambil untuk preparat histopatologi menggunakan pewarna Hematoxylin
Eosin (HE). Pengamatan histopatologi organ hati dilakukan berdasarkan deskriptif
kualitatif seperti adanya oedema, degenerasi berbutir, degenerasi hidropis dan sel radang
dengan sistem skoring pada 10 lapang pandang. Pengolahan data dilakukan
menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap (RAL). Data yang diperoleh dianalisa
dengan sidik ragam acak (ANOVA). Hasil penelitian menunjukkan bahwa terjadi
penurunan tingkat kerusakan pada organ hati setelah pemberian silase. Hasil ini
mengindikasikan bahwa zat aktif berupa asam laktat yang bersifat antibakteri pada silase
bekerja baik untuk mengurangi timbulnya kerusakan hati akibat infeksi S. typhimurium.
STUDI HISTOPATOLOGI ORGAN HATI BROILER YANG DIBERI
PAKAN SILASE DAN DITANTANG Salmonella typhimurium
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM
B04103137
Skripsi
Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar
Sarjana Kedokteran Hewan
Pada Fakultas Kedokteran Hewan
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2007
LEMBAR PENGESAHAN
Judul Skripsi
Nama
NRP
: Studi histopatologi organ hati Broiler yang diberi pakan silase
dan ditantang Salmonella typhimurium
: Achmad Isfar Shaffan Adlim
: B04103137
Disetujui :
Dosen Pembimbing
Dr. Drh. Agus Setiyono, MS
NIP. 131 760 847
Diketahui
Wakil Dekan FKH IPB
Dr. Drh. I Wayan Teguh Wibawan, MSc.
NIP. 131 129 090
Tanggal Lulus:
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala karunia-Nya
sehingga skripsi dengan judul Studi histopatologi organ hati Broiler yang diberi pakan
silase dan ditantang Salmonella typhimurium ini berhasil diselesaikan. Penelitian ini
dilaksanakan sejak bulan Oktober 2006 – Februari 2007.
Terima kasih penulis ucapkan kepada bapak Dr. Drh. Agus Setiyono, MS yang
telah banyak memberikan bimbingan dan saran dalam penyusunan skripsi ini. Selain itu
kepada Dr. Drh. Ekowati Handharyani, MS yang telah bersedia sebagai dosen penguji. Di
samping itu, ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada Bapak dan Ibu Dosen beserta
staf dan pegawai di Bagian Patologi, Departemen Klinik, Reproduksi dan Patologi
Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor yang telah membantu dalam
pelaksanaan penelitian ini. Terima kasih juga kepada, saudara-saudaraku Bangkit, Edi,
Laksana, Feri, Heru, Sabto, Supri, Kunto, Yunus, Mbak Merry dan Dattu.
Ungkapan terima kasih yang sebesar-besarnya disampaikan kepada bapak
Achmad Zainal Adlim (alm), Ibu Maria Ulfah yang selalu mencintai tiada batas, Mas
Awang-Ninda-Izza, Mbak Iin-Adi-Hirzi, seluruh keluarga besar Mohammad Mastoer dan
Mohammad Masduki serta Heirmayani yang tetap menyayangi sepenuh hati untuk
berbagi semangat dan kebahagiaan dalam hidup ini. Lanang, Uus, Ramli, Aziz dan
teman-teman keluarga dari pulau Madura yang tidak dapat disebutkan namanya satupersatu, atas segala do’a serta dukungannya baik secara moral maupun materil yang
diberikan selama penulis melakukan penelitian dan penulisan skripsi ini.
Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi para pembaca.
Bogor, Agustus 2007
Achmad Isfar Shaffan Adlim
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Pamekasan pada tanggal 11 Juli 1985 sebagai anak ke tiga
dari tiga bersaudara, anak dari pasangan ayah Achmad Zainal Adlim dan ibu Maria
Ulfah. Tahun 2003 penulis lulus dari SMU Negeri 3 Pamekasan dan pada tahun yang
sama lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI).
Penulis memilih Fakultas Kedokteran Hewan.
Selama mengikuti perkuliahan penulis juga aktif bekerja pada beberapa
perusahaan swasta yang bergerak dalam bidang Agribisnis, Logistik, Asuransi otomotif,
Konsultan, dan General Trading di Jakarta maupun Bogor. Sampai saat ini penulis juga
masih aktif sebagai marketing officer pada perusahaan Asuransi otomotif dan General
Trading di Jakarta.
DAFTAR ISI
Halaman
KATA PENGANTAR ............................................................................................. i
DAFTAR TABEL .................................................................................................... ii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................... iii
PENDAHULUAN .................................................................................................... 1
Latar Belakang ................................................................................................. 1
Tujuan .............................................................................................................. 2
Hipotesa ........................................................................................................... 2
TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................................... 3
Silase ............................................................................................................... 3
Bakteri Asam Laktat ......................................................................................... 4
Penggunaan Antibiotika ................................................................................... 5
Salmonellosis pada Unggas .............................................................................. 6
Hati .................................................................................................................. 7
MATERI DAN METODE ...................................................................................... 10
Tempat dan Waktu ........................................................................................... 10
Materi .............................................................................................................. 10
Kandang dan Perlengkapan ........................................................................ 10
Ransum ...................................................................................................... 10
Perlakuan .................................................................................................... 11
Bakteri dan Additive ................................................................................... 12
Pembuatan Ransum Silase ........................................................................... 12
Vitamin dan Vaksin .................................................................................... 12
Uji Tantang ................................................................................................. 12
Metode ............................................................................................................. 13
Rancangan Percobaan ................................................................................ 13
Pengamatan ................................................................................................ 14
Prosedur Pelaksanaan ................................................................................. 14
HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................................. 16
KESIMPULAN DAN SARAN.................................................................................. 25
Kesimpulan ........................................................................................................ 25
Saran .................................................................................................................. 25
DAFTAR PUSTAKA .............................................................................................. 26
LAMPIRAN .............................................................................................. ………... 29
DAFTAR TABEL
Tabel
1. Susunan dan kandungan zat makanan dalam ransum penelitian .........
Halaman
11
2. Histopatologi organ hati broiler akibat infeksi S. typhimurium
berdasarkan nilai skoring rata-rata pada 10 lapang pandang ..............
16
DAFTAR GAMBAR
Gambar
1. Proses Pembuatan Silase Ransum .....................................................
2. Gambaran mikroskopis hati broiler normal pada umur 9 hari;
pewarnaan HE (pembesaran objektif 40X) ........................................
3. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi pakan silase
dan diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari; pewarnaan
HE (pembesaran objektif 40X) .........................................................
4. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi antibiotik dan
diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari; pewarnaan HE
(pembesaran objektif 40X) ................................................................
5. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi Lactobacillus
plantarum dan diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari;
pewarnaan HE (pembesaran objektif 40X) ........................................
6. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi ransum basal
dan diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari; pewarnaan
HE (pembesaran objektif 40X) .........................................................
Halaman
13
17
21
22
23
23
ABSTRACT
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM. Study Histopathology of Liver Broiler Given
Silase and Challenged by Salmonella typhimurium. Under the Direction of AGUS
SETIYONO.
The aim of this study was find out the description histopathology of liver broiler
given silase and infected by Salmonella thypimurium. The study used 168 broilers of the
Lohman strain starting from the age of day old chick (DOC) until the age 6 weeks. They
were devided into 7 treatment groups namely: B1 (Basal ration); B2 (B1 + S.
typhimurium infection); A (B1 + antibiotic + S. typhimurium infection); L1 (B1 +
Lactobacillus plantarum); L2 (L1 + S. typhimurium infection); S1 (silase ration) dan S2
(S1 + S. typhimurium infection). Each treatment consisted of 3 replication and each
replication consisted of 8 broilers. Necropsi was performed every week on one broiler
taken at random from each treatment. The liver for the histopathology examination using
Hematoxylin Eosin (HE) dyeing. Observation was conducted by qualitative description
such as the existance of oedema, foaming degeneration, hydrophis degeneration, infected
cells, by scoring system at 10 miscroscopic areas. Data processing was done by using
randomized complete design. The data obtained was analysed by Analysis of Variance
(ANOVA). The result of the study showed that after the silase was given, the level of
damage was descrease. This result indicates that the lactat acid, which is an antibacteria
worked well to reduce the liver damage caused by S. typhimurium infection.
STUDI HISTOPATOLOGI ORGAN HATI BROILER YANG DIBERI
PAKAN SILASE DAN DITANTANG Salmonella typhimurium
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM
B04103137
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2007
ABSTRAK
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM. Studi histopatologi organ hati Broiler yang
diberi pakan silase dan ditantang Salmonella typhimurium. Dibimbing oleh AGUS
SETIYONO.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui gambaran histopatologi organ hati
broiler yang diberi pakan silase dan diinfeksi Salmonella typhimurium. Penelitian ini
menggunakan 168 ekor ayam broiler strain Lohman yang dipelihara sejak umur sehari
(Day Old Chick) sampai umur 6 minggu. Perlakuan dibagi atas 7 kelompok perlakuan
yaitu: B1 (Ransum basal); B2 (B1 + infeksi S. typhimurium); A (B1 + antibiotik +
infeksi S. typhimurium); L1 (B1 + Lactobacillus plantarum); L2 (L1 + infeksi S.
typhimurium); S1 (ransum silase) dan S2 (S1 + infeksi S. typhimurium). Setiap perlakuan
terdiri atas 3 kali ulangan dan setiap ulangan terdiri dari 8 ekor ayam. Nekropsi dilakukan
setiap minggu pada satu ekor ayam yang diambil secara acak pada setiap perlakuan.
Organ hati diambil untuk preparat histopatologi menggunakan pewarna Hematoxylin
Eosin (HE). Pengamatan histopatologi organ hati dilakukan berdasarkan deskriptif
kualitatif seperti adanya oedema, degenerasi berbutir, degenerasi hidropis dan sel radang
dengan sistem skoring pada 10 lapang pandang. Pengolahan data dilakukan
menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap (RAL). Data yang diperoleh dianalisa
dengan sidik ragam acak (ANOVA). Hasil penelitian menunjukkan bahwa terjadi
penurunan tingkat kerusakan pada organ hati setelah pemberian silase. Hasil ini
mengindikasikan bahwa zat aktif berupa asam laktat yang bersifat antibakteri pada silase
bekerja baik untuk mengurangi timbulnya kerusakan hati akibat infeksi S. typhimurium.
STUDI HISTOPATOLOGI ORGAN HATI BROILER YANG DIBERI
PAKAN SILASE DAN DITANTANG Salmonella typhimurium
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM
B04103137
Skripsi
Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Memperoleh Gelar
Sarjana Kedokteran Hewan
Pada Fakultas Kedokteran Hewan
FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2007
LEMBAR PENGESAHAN
Judul Skripsi
Nama
NRP
: Studi histopatologi organ hati Broiler yang diberi pakan silase
dan ditantang Salmonella typhimurium
: Achmad Isfar Shaffan Adlim
: B04103137
Disetujui :
Dosen Pembimbing
Dr. Drh. Agus Setiyono, MS
NIP. 131 760 847
Diketahui
Wakil Dekan FKH IPB
Dr. Drh. I Wayan Teguh Wibawan, MSc.
NIP. 131 129 090
Tanggal Lulus:
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala karunia-Nya
sehingga skripsi dengan judul Studi histopatologi organ hati Broiler yang diberi pakan
silase dan ditantang Salmonella typhimurium ini berhasil diselesaikan. Penelitian ini
dilaksanakan sejak bulan Oktober 2006 – Februari 2007.
Terima kasih penulis ucapkan kepada bapak Dr. Drh. Agus Setiyono, MS yang
telah banyak memberikan bimbingan dan saran dalam penyusunan skripsi ini. Selain itu
kepada Dr. Drh. Ekowati Handharyani, MS yang telah bersedia sebagai dosen penguji. Di
samping itu, ucapan terima kasih penulis sampaikan kepada Bapak dan Ibu Dosen beserta
staf dan pegawai di Bagian Patologi, Departemen Klinik, Reproduksi dan Patologi
Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor yang telah membantu dalam
pelaksanaan penelitian ini. Terima kasih juga kepada, saudara-saudaraku Bangkit, Edi,
Laksana, Feri, Heru, Sabto, Supri, Kunto, Yunus, Mbak Merry dan Dattu.
Ungkapan terima kasih yang sebesar-besarnya disampaikan kepada bapak
Achmad Zainal Adlim (alm), Ibu Maria Ulfah yang selalu mencintai tiada batas, Mas
Awang-Ninda-Izza, Mbak Iin-Adi-Hirzi, seluruh keluarga besar Mohammad Mastoer dan
Mohammad Masduki serta Heirmayani yang tetap menyayangi sepenuh hati untuk
berbagi semangat dan kebahagiaan dalam hidup ini. Lanang, Uus, Ramli, Aziz dan
teman-teman keluarga dari pulau Madura yang tidak dapat disebutkan namanya satupersatu, atas segala do’a serta dukungannya baik secara moral maupun materil yang
diberikan selama penulis melakukan penelitian dan penulisan skripsi ini.
Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi para pembaca.
Bogor, Agustus 2007
Achmad Isfar Shaffan Adlim
RIWAYAT HIDUP
Penulis dilahirkan di Pamekasan pada tanggal 11 Juli 1985 sebagai anak ke tiga
dari tiga bersaudara, anak dari pasangan ayah Achmad Zainal Adlim dan ibu Maria
Ulfah. Tahun 2003 penulis lulus dari SMU Negeri 3 Pamekasan dan pada tahun yang
sama lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Undangan Seleksi Masuk IPB (USMI).
Penulis memilih Fakultas Kedokteran Hewan.
Selama mengikuti perkuliahan penulis juga aktif bekerja pada beberapa
perusahaan swasta yang bergerak dalam bidang Agribisnis, Logistik, Asuransi otomotif,
Konsultan, dan General Trading di Jakarta maupun Bogor. Sampai saat ini penulis juga
masih aktif sebagai marketing officer pada perusahaan Asuransi otomotif dan General
Trading di Jakarta.
DAFTAR ISI
Halaman
KATA PENGANTAR ............................................................................................. i
DAFTAR TABEL .................................................................................................... ii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................... iii
PENDAHULUAN .................................................................................................... 1
Latar Belakang ................................................................................................. 1
Tujuan .............................................................................................................. 2
Hipotesa ........................................................................................................... 2
TINJAUAN PUSTAKA .......................................................................................... 3
Silase ............................................................................................................... 3
Bakteri Asam Laktat ......................................................................................... 4
Penggunaan Antibiotika ................................................................................... 5
Salmonellosis pada Unggas .............................................................................. 6
Hati .................................................................................................................. 7
MATERI DAN METODE ...................................................................................... 10
Tempat dan Waktu ........................................................................................... 10
Materi .............................................................................................................. 10
Kandang dan Perlengkapan ........................................................................ 10
Ransum ...................................................................................................... 10
Perlakuan .................................................................................................... 11
Bakteri dan Additive ................................................................................... 12
Pembuatan Ransum Silase ........................................................................... 12
Vitamin dan Vaksin .................................................................................... 12
Uji Tantang ................................................................................................. 12
Metode ............................................................................................................. 13
Rancangan Percobaan ................................................................................ 13
Pengamatan ................................................................................................ 14
Prosedur Pelaksanaan ................................................................................. 14
HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................................. 16
KESIMPULAN DAN SARAN.................................................................................. 25
Kesimpulan ........................................................................................................ 25
Saran .................................................................................................................. 25
DAFTAR PUSTAKA .............................................................................................. 26
LAMPIRAN .............................................................................................. ………... 29
DAFTAR TABEL
Tabel
1. Susunan dan kandungan zat makanan dalam ransum penelitian .........
Halaman
11
2. Histopatologi organ hati broiler akibat infeksi S. typhimurium
berdasarkan nilai skoring rata-rata pada 10 lapang pandang ..............
16
DAFTAR GAMBAR
Gambar
1. Proses Pembuatan Silase Ransum .....................................................
2. Gambaran mikroskopis hati broiler normal pada umur 9 hari;
pewarnaan HE (pembesaran objektif 40X) ........................................
3. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi pakan silase
dan diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari; pewarnaan
HE (pembesaran objektif 40X) .........................................................
4. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi antibiotik dan
diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari; pewarnaan HE
(pembesaran objektif 40X) ................................................................
5. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi Lactobacillus
plantarum dan diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari;
pewarnaan HE (pembesaran objektif 40X) ........................................
6. Gambaran mikroskopis hati broiler yang diberi ransum basal
dan diinfeksi S. typhimurium pada umur 42 hari; pewarnaan
HE (pembesaran objektif 40X) .........................................................
Halaman
13
17
21
22
23
23
ABSTRACT
ACHMAD ISFAR SHAFFAN ADLIM. Study Histopathology of Liver Broiler Given
Silase and Challenged by Salmonella typhimurium. Under the Direction of AGUS
SETIYONO.
The aim of this study was find out the description histopathology of liver broiler
given silase and infected by Salmonella thypimurium. The study used 168 broilers of the
Lohman strain starting from the age of day old chick (DOC) until the age 6 weeks. They
were devided into 7 treatment groups namely: B1 (Basal ration); B2 (B1 + S.
typhimurium infection); A (B1 + antibiotic + S. typhimurium infection); L1 (B1 +
Lactobacillus plantarum); L2 (L1 + S. typhimurium infection); S1 (silase ration) dan S2
(S1 + S. typhimurium infection). Each treatment consisted of 3 replication and each
replication consisted of 8 broilers. Necropsi was performed every week on one broiler
taken at random from each treatment. The liver for the histopathology examination using
Hematoxylin Eosin (HE) dyeing. Observation was conducted by qualitative description
such as the existance of oedema, foaming degeneration, hydrophis degeneration, infected
cells, by scoring system at 10 miscroscopic areas. Data processing was done by using
randomized complete design. The data obtained was analysed by Analysis of Variance
(ANOVA). The result of the study showed that after the silase was given, the level of
damage was descrease. This result indicates that the lactat acid, which is an antibacteria
worked well to reduce the liver damage caused by S. typhimurium infection.
PENDAHULUAN
Latar Belakang
Kebutuhan masyarakat terhadap protein hewani terus meningkat. Sebagian
besar protein hewani berasal dari hewan ternak terutama unggas. Untuk itu sektor
perunggasan perlu dikembangkan agar dapat menghasilkan produk yang aman,
sehat dan halal bagi masyarakat Indonesia. Salah satu permasalahan penting
dalam peternakan ayam adalah Salmonellosis. Selain dapat mengganggu proses
pertumbuhan, Salmonellosis juga sering menyebabkan kematian pada ayam akibat
toksin yang dihasilkan oleh Salmonella typhimurium. Toksin ini dapat menyerang
sistem pencernaan ayam, salah satunya adalah organ hati. Untuk menanggulangi
permasalahan tersebut para peternak dan perusahaan peternakan unggas
melakukan pemberian antibiotik.
Antibiotik telah diketahui berguna untuk memberantas penyakit dan juga
dapat berfungsi sebagai growth promotor pada ayam. Namun pemberian
antibiotik dalam waktu lama dapat menyebabkan munculnya permasalahan baru
berupa resistensi bakteri patogen terhadap antibiotik yang diberikan. S.
typhimurium akan bersifat resisten terhadap antibiotik seperti ampisilin,
kotrimoksasol dan tetrasiklin (Tabbu 2000). Antibiotik juga dapat menimbulkan
residu yang berbahaya bagi manusia akibat mengkonsumsi produk unggas. Untuk
itu jumlah bakteri patogen S. typhimurium harus ditekan keberadaannya sehingga
tidak menyebabkan Salmonellosis (penyakit yang disebabkan oleh bakteri
Salmonella sp seperti fowl typoid, pullorum dan fowl paratyphoid) baik pada
ternak maupun pada manusia.
Masalah yang timbul akibat pemberian antibiotik perlu mendapat perhatian
penting, sehingga pada penelitian ini diujicobakan pemberian silase untuk
mengurangi kerusakan hati akibat S. typhimurium. Silase memiliki kelebihan
antara lain : (1) Ransum akan lebih awet (2) Memiliki kandungan Bakteri Asam
Laktat yang berperan sebagai probiotik (3) Memiliki kandungan asam organik
yang cukup baik, yang berperan sebagai growth promotor dan penghambat
penyakit (4) Kandungan air yang terdapat dalam silase cukup baik, sehingga
sangat bermanfaat bagi ternak (Sapienza dan Keith 1993).
Bakteri asam laktat yang digunakan dalam pengawetan bahan makanan
umumnya berbentuk silase dan dibuat melalui proses ensilase. Silase dapat
dikategorikan probiotik yang bermanfaat sebagai feed additive karena memiliki
kelebihan sebagai berikut : dapat meningkatkan ketersediaan lemak dan protein
bagi ternak, mempertahankan konversi pakan, meningkatkan pertumbuhan berat
badan, mampu memperbaiki resistensi penyakit akibat stimulasi dan peningkatan
natural immunity, selain itu juga dapat meningkatkan kandungan vitamin B
komplek melalui proses fermentasi (McDonald et al. 1991). Berdasarkan
kelebihan tersebut, diharapkan silase dapat menggantikan penggunaan antibiotik
sebagai growth promotor dan obat salmonellosis yang aman bagi ternak dan
manusia sebagai konsumen produk ternak.
Tujuan
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui gambaran histopatologi organ
hati broiler yang diberi pakan silase dan diinfeksi S. typhimurium.
Hipotesa
H0
: Ransum Silase dapat mengurangi kerusakan hati yang diakibatkan S.
typhimurium.
H1
: Ransum Silase tidak dapat mengurangi kerusakan hati yang diakibatkan
S. typhimurium.
Manfaat
Hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi mengenai
silase yang dapat mengurangi kerusakan organ hati broiler akibat infeksi bakteri S.
typhimurium.
2
TINJAUAN PUSTAKA
Silase
Silase merupakan makanan ternak yang dihasilkan melalui proses
fermentasi. Tujuan pembuatan silase adalah untuk memaksimalkan nutrien yang
dapat diawetkan (Sapienza dan Keith 1993), sehingga diharapkan pakan dapat
lebih tahan lama dalam penyimpanannya.
Silase memiliki beberapa kelebihan, antara lain : (1) Ransum lebih awet,
(2) Memiliki kandungan Bakteri Asam Laktat yang berperan sebagai probiotik,
(3) Memiliki kandungan asam organik cukup baik yang berperan sebagai growth
promotor dan penghambat penyakit, (4) Kandungan air yang terdapat dalam silase
cukup baik sehingga sangat bermanfaat bagi ternak.
Keberhasilan pembuatan silase terlihat dari maksimalnya nutrien yang
dapat diawetkan. Silase yang baik diperoleh dengan cara menekan berbagai
aktivitas enzim yang tidak dikehendaki dalam bahan baku dan dapat mendorong
berkembangnya bakteri penghasil asam laktat (Sapienza dan Keith 1993). Selain
menghasilkan asam laktat, bakteri ini juga mampu menghasilkan berbagai
substansi antimikroba yang potensial seperti hidrogen peroksida, diasetil, asam
organik dan yang utama adalah bakteriosin (Cintas et al. 1995). Bakteriosin
merupakan substansi protein yang memiliki berat molekul kecil dan memiliki efek
antagonis sebagai bakterisidal atau bakteriostatik terhadap pertumbuhan bakteri
patogen (Suarsana et al. 2001).
Karakteristik silase yang penting adalah kandungan asam lemak
terbangnya (asam asetat, asam propionat dan asam butirat) akan menekan
pertumbuhan jamur. Dari ketiga asam lemak terbang tersebut yang paling toksik
adalah asam butirat dan yang paling baik adalah asam asetat. Asam butirat
dikatakan paling toksik karena memiliki antifungal yang sangat kuat sehingga
menyebabkan bakteri Clostridial menjadi stabil. Asam laktat dapat menekan
pertumbuhan jamur meskipun tidak seefektif asam asetat. Secara keseluruhan,
semakin besar tingkat fermentasi asam laktat dan asam asetat maka silase tersebut
akan semakin stabil dibandingkan pada kondisi aerob.
3
Bakteri Asam Laktat
Bakteri asam
laktat
merupakan
golongan
mikroorganisme
yang
bermanfaat karena sifatnya tidak toksik bagi inang dan mampu menghasilkan
asam laktat sebagai hasil metabolismenya. Asam laktat berfungsi membunuh
mikroorganisme patogen dalam tubuh. Bakteri asam laktat juga memproduksi
metabolit sekunder seperti asam hidroksi peroksida, diasetil, amonia, asam lemak
dan bakteriosin (Lopez 2000). Produksi bakteriosin ini juga dapat menghambat
perkembangan bakteri patogen (Wiryawan dan Anita 2001). Bakteriosin
merupakan senyawa protein yang bersifat antibakteri terhadap mikroorganisme
(bakteri), jika ditinjau dari segi genetiknya berdekatan dengan mikroorganisme
penghasil bakteriosin, sehingga bakteriosin ini akan terdegradasi dalam
pencernaan manusia maupun hewan (Wiryawan dan Anita 2001).
Mekanisme kerja bakteri asam laktat yang dikemukakan oleh Lopez
(2000), yaitu menekan kemampuan hidup mikroorganisme patogen karena mampu
memproduksi komponen antibakteria seperti hidroksi peroksida dan asam-asam
organik seperti asam laktat. Asam laktat yang dihasilkan tersebut berguna untuk
menurunkan pH. Beberapa mekanisme kerja yang dilakukan oleh asam laktat
sebagai probiotik, yaitu : (1) Berkompetisi dengan mikroorganisme patogen untuk
mendapat nutrisi dan tempat tinggal, (2) Menjaga keseimbangan ekosistem
melalui penjagaan pH lingkungan agar tetap berada dalam kondisi asam sehingga
perkembangan bakteri patogen dapat terhambat, (3) Menyediakan kebutuhan
enzim-enzim yang mampu mencerna serat kasar, protein, lemak dan karbohidrat
(4) Mendetoksifikasi zat beracun dalam tubuh, (5) Mampu menstimulasi
kekebalan tubuh dengan cara meningkatkan konsentrasi antibodi imunoglobulin
(Lopez 2000).
Bakteri asam laktat dalam pengawetan bahan makanan digunakan dalam
proses ensilase yang akan menghasilkan suatu produk yaitu silase. Silase ini dapat
dikategorikan sebagai probiotik yang bermanfaat sebagai feed additive dengan
beberapa kelebihan sebagai berikut : dapat meningkatkan ketersediaan lemak dan
protein bagi ternak, mempertahankan konversi pakan, meningkatkan pertumbuhan
berat badan, mampu memperbaiki resistensi penyakit akibat stimulasi dan
4
peningkatan natural immunity, selain itu juga dapat meningkatkan kandungan
vitamin B komplek melalui proses fermentasi (McDonald et al. 1991).
Pemberian bakteri asam laktat (BAL) pada ayam memiliki dua sasaran,
yaitu di saluran pencernaan dan di sekum yang diharapkan dapat menghasilkan
senyawa antimikroba sehingga dapat berpengaruh terhadap ternak (Fuller 1992).
Sedangkan Watkins dan Miller (1983) menunjukkan adanya penurunan mortalitas
pada ayam gnotobiotik yang diberi kultur Lactobacillus acidophilus dua hari
sebelum diberi kultur bakteri patogen S. typhimurium.
Penggunaan Antibiotik
Broiler mampu mengolah makanannya dengan cepat setelah makanan
dikonsumsi. Keadaan ini menyebabkan broiler memiliki laju pertumbuhan yang
sangat cepat, selain dipengaruhi oleh genetik, cepatnya laju pertumbuhan juga
dipicu oleh adanya growth promotor yang umumnya menggunakan senyawa
antibiotik. Selain sebagai growth promotor, senyawa antibiotik juga dapat
meningkatkan efisiensi pakan, alternatif pengobatan dan juga dapat meningkatkan
reproduksi ternak. Namun di beberapa negara telah melarang penggunaan
antibiotik sebagai zat aditif.
Menurut Tabbu (2000), penurunan penggunaan antibiotik disebabkan oleh
2 hal utama, yaitu : (1). Antibiotik dapat meninggalkan residu dalam jangka
panjang sehingga dapat membahayakan kesehatan konsumen, (2). Antibiotik
menyebabkan mikroorganisme yang berada dalam tubuh manusia ataupun hewan
menjadi resisten, terutama bakteri patogen seperti Salmonella sp, Escherichia coli
dan Clostridium sp. Akhir-akhir ini banyak ditemui penggunaan probiotik sebagai
bahan aditif yang dapat menggantikan penggunaan antibiotik dalam pakan, yaitu
sebagai growth promotor dan dapat memelihara kesehatan ternak. Bakteri asam
laktat yang berperan dalam pengawetan pakan melalui proses ensilase dapat
dimanfaatkan sebagai probiotik dalam ransum. Suplementasi pakan dengan
probiotik ataupun prebiotik dapat meningkatkan bobot badan dan efisiensi serta
konversi pakan broiler diusia muda namun tidak berlaku pada broiler berumur
lebih dari 2 minggu (Palliyaguru et al. 2004).
5
Salmonellosis pada Unggas
Salmonella adalah bakteri berbentuk batang. Ukuran lebar Salmonella
antara 0.3 – 0.5 µm dan panjang 0.7 – 2.5 µm. Pertumbuhan optimal pada
temperatur 37.0 – 37.5 oC (Shivaprasad 1997). Di alam bakteri Salmonella tidak
hidup lama, terutama bila keadaan disekitarnya kering. Sumber infeksi Salmonella
paling sering terjadi pada flock unggas yang diduga berasal dari pakan. Cox et al.
(1996) melaporkan bahwa tempat penetasan merupakan sumber penularan
Salmonella sp yang dominan pada peternakan ayam broiler.
Infeksi Salmonella sp terjadi melalui 3 cara yaitu kongenital, oral dan
aerogen (Ressang 1984). Secara kongenital yaitu penularan melalui telur sehingga
anak ayam yang menetas melalui telur tersebut akan terinfeksi Salmonella sp.
Infeksi secara oral terjadi melalui pakan dan air minum yang tercemari Salmonella
sp. Sedang aerogen adalah infeksi yang terjadi di dalam mesin penetas telur
dimana masa tunas penyakit berkisar antara 1 minggu. Penularan melalui vektor
juga lazim terjadi, penyebaran ini terjadi melalui hewan-hewan kecil seperti tikus,
lalat, burung liar dan peralatan yang mengandung bakteri Salmonella sp yang
digunakan di dalam kandang (Cox et al. 1996).
Daging dan telur unggas merupakan sumber utama penularan Salmonella
sp pada manusia. Banyak cara organisme tersebut dapat masuk, menyebar, dan
bertahan di dalam tubuh unggas yang pada akhirnya produk yang dihasilkan oleh
unggas juga akan tercemari oleh Salmonella sp. Perusahaan kecil maupun besar
telah menggalakkan kebijakan kontrol dalam mengurangi berkembangnya bakteri
Salmonella sp. Peningkatan monitoring dan kontrol di dalam kawasan peternakan
lebih difokuskan pada bagian breeding, umumnya lebih menekan perkembangan
S. Enteritidis dan S. typhimurium. Kawasan breeding, pabrik pakan dan kawasan
hatcheries merupakan kawasan utama terjadinya kontaminasi Salmonella sp.
Kontaminasi pada kawasan tersebut umumnya melalui sistem ventilasi (Davis dan
Breslin 2004).
Bentuk penyakit yang disebabkan oleh bakteri Salmonella sp antara lain :
fowl typoid, pullorum dan fowl paratyphoid. Pada kasus fowl typoid akan terjadi
hepatitis parenkimatosa yang menyebar dan pada kasus akut akan terjadi distrofi
lemak, sedang pada usus dan ginjal akan ditemukan adanya infiltrasi limfosit dan
6
heterofil, sehingga jumlah eritrosit dapat menurun dari 3.5 juta menjadi 1.5 juta
per ml dan leukosit akan meningkat dari 18.000 menjadi 240.000 per ml (Tabbu
2000).
Pada ayam muda yang mengalami pullorum akan menunjukkan
peradangan dan pendarahan pada hati, paru-paru dan ginjal. Demikian pula
dengan sekum pada ayam muda ini akan mengalami nekrosis pada mukosa dan
submukosa dengan akumulasi nekrosis debris dengan campuran fibrin dan
heterofil dalam lumen (Shiravaprasad 1997). Sedangkan perubahan yang terjadi
pada kasus fowl paratyphoid adalah adanya pendarahan dan infiltrasi heterofil
pada berbagai jaringan seperti hati, limpa, ginjal, usus dan paru-paru (Tabbu
2000).
Hati
Hati adalah organ tubuh yang berukuran besar dan merupakan kelenjar
terbesar dalam tubuh hewan ataupun manusia. Di dalam hati ditemukan banyak
sel-sel RES (Reticulo Endothelial System), yakni sel-sel Kupffer yang terdapat
dalam dinding-dinding kapiler dan sinusoid-sinusoid hati yang berfungsi untuk
membersihkan benda-benda asing dari darah (Ressang 1984 dan Hartono 1992).
Sel-sel Kupffer yang berada di lumen sinusoid bertindak sebagai makrofag yang
mempunyai fungsi fagositik (Ganong 2003). Hati merupakan organ sekresi
terbesar dan merupakan kelenjar pertahanan yang terpenting dalam tubuh. Sel hati
dapat rusak hingga lebih dari 80% tanpa menyebabkan gejala yang berat dan
dapat sembuh kembali secara sempurna (Nort dan Bell 1990). Hati dapat
mengalami beberapa perubahan diantaranya adalah degenerasi hidropis dan
degenerasi berbutir yang terlihat pada sel-sel hati. Kerusakan pada hati dapat
terjadi oleh beberapa faktor yaitu: onset pemaparan yang terlalu lama atau terlalu
singkat, durasi pemaparan, dosis dan host yang rentan (Jubb 1993). Kerusakan
yang terjadi pada sel hati dapat bersifat sementara dan tetap. Sel akan mengalami
perubahan untuk beradaptasi mempertahankan hidup pada kerusakan yang bersifat
sementara. Perubahan yang bersifat sementara ini biasa disebut degenerasi.
7
Degenerasi sering terjadi karena beberapa hal, adanya gangguan
biokimiawi yang disebabkan oleh iskemia, anemia, metabolisme abnormal dan zat
kimia yang bersifat toksik adalah salah satu faktornya. Gangguan biokimiawi ini
menyebabkan membran sel normal akan mengalami kerusakan sehingga
keseimbangan pengeluaran K+ dan pemasukan ion Na+, Ca+ dan air akan
terganggu. Kerusakan membran sel menyebabkan terjadinya peningkatan jumlah
air ke dalam sel sehingga menyebabkan sitoplasma menjadi bengkak dan dipenuhi
butiran-butiran air. Apabila kerusakan membran sel terus berlangsung, maka
sitoplasma sel akan berisi cairan yang membentuk vakuola-vakuola sehingga
sitoplasma terlihat lebih pucat, keadaan ini dinamakan degenerasi hidropis
(Cheville 1999). Degenerasi hidropis dan degenerasi berbutir sering terjadi secara
bersamaan pada sel-sel hati.
Degenerasi hyalin jaringan ikat sering terjadi pada proses peradangan hati
yang menahun sedangkan pada degenerasi lemak terjadi penumpukan lemak di
lobuli hati yang sering terlihat pada akhir masa kebuntingan karena kekurangan
oksigen dan adanya bahan toksik. Hal ini terjadi karena adanya gangguan
keseimbangan antara trigliserida misel dan lemak globular. Ketidakseimbangan
lemak terjadi karena pengangkutan dan sintesis lemak di hati meningkat
sedangkan penggunaan lemak dalam sel hati berkurang sehingga jumlah lemak
dalam sel hati meningkat (Donatus 2001). Selain degenerasi, sel juga sering
mengalami akumulasi protein di dalam sitoplasmanya (Carlton dan McGavin
1995).
Degenerasi lemak dan nekrosa merupakan stadium permulaan dari proses
kelainan dalam hati, kemudian keadaan ini akan berlanjut pada proses
peradangan. Peradangan dapat terjadi secara infeksius maupun non infeksius.
Peradangan secara non infeksius secara umum disebabkan oleh toksin. Hepatitis
non infeksius atau toksik dapat terjadi secara akut maupun kronis. Bentuk
hepatitis ini ditandai oleh kematian sel-sel hati serta perubahan-perubahan yang
mengawali kematian seperti cloudy swelling, degenerasi lemak dan nekrosis
(Harold 1971). Secara mikroskopis sifat nekrosis koagulatif ditandai dengan
piknosis dan sitoplasma asidofilik yang dilanjutkan dengan penguraian dan
menghilangnya komponen-komponen sel (Nabib 1987).
8
Kerusakan sel secara terus-menerus akan mencapai suatu titik akumulasi
toksin yang sudah bersifat kronis sehingga terjadi kematian sel. Mekanisme
kematian sel terjadi melalui dua proses: yaitu apoptosis dan nekrosa. Pada
apoptosis terjadi kematian sel yang terprogram. Kematian sel dipicu oleh
fragmentasi DNA dan biasanya terjadi pada satu atau sekelompok sel saja. Lain
halnya dengan nekrosa, kematian sel bersifat menyeluruh. Pada nekrosa biasanya
ditemukan sel radang dan sitoplasma sel akan terlihat asidofilik. Nekrosa ini ada
yang bersifat lokal dan ada yang bersifat difus (Lu 1995).
9
MATERI DAN METODE
Tempat dan Waktu
Penelitian ini dilakukan pada bulan Oktober 2006 sampai Februari 2007,
bertempat di Laboratorium Lapang Ilmu Nutrisi Unggas, Jurusan Ilmu Nutrisi dan
Makanan Ternak, Fakultas Peternakan, Institut Pertanian Bogor. Sedangkan
pembuatan preparat dan analisa histopatologi dilaksanakan di Bagian Patologi,
Fakultas Kedokteran hewan, Institut Pertanian Bogor.
Materi
Ternak
Pada penelitian ini digunakan 168 ekor broiler strain Lohman yang
dipelihara sejak umur sehari (Day Old Chick) sampai umur 6 minggu dengan ratarata bobot badan DOC adalah 41,76 gram. DOC diperoleh dari poultry shop
Bogor.
Kandang dan Perlengkapan
Kandang yang digunakan adalah kandang litter berukuran 1 x 1 m. Setiap
sekat dilengkapi dengan 1 tempat pakan dan 1 tempat minum. Peralatan lain yang
digunakan adalah timbangan, plastik ransum, tong, karet, nomor sayap dan ember.
Ransum
Ransum yang digunakan adalah ransum kering komplit, ransum silase
dengan perlakuan uji tantang S. typhimurium dan ransum silase tanpa uji tantang.
Komposisi ransum terdiri dari: jagung, dedak padi, bungkil kedelai, CGM, tepung
ikan, minyak kelapa, CaCO3, DCP, L-Lysin, DL-Methionine dan premix. Ransum
ini disusun atas rekomendasi Scoot et al. (1982). Susunan dan kandungan nutrisi
ransum kering komplit yang digunakan dalam penelitian ini dapat dilihat pada
Tabel 1.
10
Tabel 1. Susunan dan kandungan zat makanan dalam ransum penelitian
Bahan Makanan
Persentase (%)
Jagung
Dedak Padi
Bungkil Kedelai
CGM
Tepung Ikan
Minyak Kelapa
DCP
Caco3
L-Lysin
DL-Methionine
Premix*
Total ( % )
50.0
12.0
16.7
11.0
5.5
2.0
1.0
1.0
0.3
0.2
0.3
100
Kandungan nutrisi ransum penelitian :
Protein Kasar ( % )
Energi Bruto (kkal/kg)
Serat Kasar ( % )
Ca ( % )
P-tersedia ( % )
Lys (% )
Met ( % )
23.03
3020.00
4.19
0.96
0.63
1.20
0.67
*Dalam 1 kg premix mengandung Vit A 4000.000 IU, Vit D3 800.000 IU, Vit E 4.500 mg,
Vit K3 450 mg, Vit B1 450 mg, Vit B2 1.350 mg, Vit B6 480 mg, Vit B12 6 mg, Ca-d-P
2.400 mg, As folat 270 mg, As nikotinat 7.200 mg, kolin klorida 28.000 mg, DL-Met
28.000 mg, L-Lys 50.000mg, Fe 8.500 mg, Cu 700 mg, Mg 18.500 mg, Zn 14.000 mg,
Co 50 mg, I 70 mg, Se 35 mg, dan antioksidan.
Perlakuan
Perlakuan yang digunakan terdiri atas tujuh kelompok, yaitu :
S1
= Ransum silase
B1
= Ransum basal
L1
= B1 + Lactobacillus plantarum
S2
= S1 + infeksi S. typhimurium
B2
= B1 + infeksi S. typhimurium
L2
= L1+ infeksi S. typhimurium
A
= B1 + antibiotik + infeksi S. typhimurium
11
Bakteri dan Additive
Dua macam bakteri yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu L.
plantarum diperoleh dari Laboratorium Bioteknologi Lembaga Ilmu Pengetahuan
Indonesia (LIPI), Cibinong-Bogor dan S. typhimurium tipe ganas diperoleh dari
Laboratorium Mikrobiologi Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor.
Additive yang digunakan adalah Bambermycin sebesar 0,02 ppm.
Pembuatan Ransum Silase Komplit
Ransum silase komplit berkadar air 40% dibuat dari ransum basal yang telah
disusun sesuai dengan kebutuhan ternak unggas. Ransum basal tersebut dijadikan
ransum silase dengan menambahkan air dan starter bakteri L. plantarum. Proses
ensilase dilakukan dengan cara menyimpan ransum dalam kantong plastik
berukuran 5 kg yang kedap udara dan diusahakan tidak ada udara yang masuk,
selanjutnya disimpan di dalam tong selama 3 minggu. Pada saat memasuki
penyimpanan minggu ke-3, ransum silase diamati kandungan nutrien, energi, pH
dan bahan kering ransum. Karena pada minggu ke-3 proses ensilase memasuki
waktu yang cukup stabil. Proses pembuatan silase dapat dilihat pada Gambar 1.
Vitamin dan Vaksin
Vitamin yang digunakan adalah Vita Stress. Sedangkan jenis vaksin yang
digunakan antara lain: vaksin Newcastle Diseases (ND) I yang diberikan pada
ayam umur 3 hari yaitu melalui tetes mata, ND II diberikan pada ayam umur 21
hari yaitu dengan cara suntik dan vaksin Gumboro diberikan pada saat ayam
berumur 10 hari dengan pemberian secara oral.
Uji tantang
Infeksi S. typhimurium dilakukan pada broiler umur 7 hari secara oral.
Jenis Salmonella yang digunakan adalah S. typhimurium ganas dari biakan cair =
1 x 107 CFU untuk setiap ekor ayam.
12
Lactobacillus
plantarum
Diaduk
Air
60 : 40
Dicampur
Ransum
basal
Ransum basal + LP
fermentasi
Dikemas di dalam
kantong plastik
Kedap udara
Disimpan selama
3 minggu
Silase
Gambar 1. Proses Pembuatan Silase Ransum
Metode
Rancangan Percobaan dan Analisis Data
Rancangan penelitian yang digunakan adalah Rancangan Acak Lengkap
(RAL). Anak ayam broiler terbagi dalam 7 kelompok perlakuan.
Data yang
diperoleh dianalisa dengan sidik ragam (Analysis of Variance / ANOVA). Input
data ANOVA diperoleh dari pengamatan pada 7 perlakuan yang masing-masing
memiliki 3 ulangan dengan cara skoring pada 10 lapang pandang.
13
Pengamatan
Pengamatan pada penelitian ini meliputi pemeriksaan histopatologi.
Pemeriksaan ini terfokus pada perubahan-perubahan yang terjadi pada sitoplasma,
inti dari sel hepatosit, sinusoid dan pembuluh darah dengan mengamati adanya
perubahan oedema, degenerasi berbutir, degenerasi hidropis dan sel radang.
Pengamatan dilakukan terhadap 10 lapang pandang dengan pembesaran objektif
10X dan 20X. Selanjutnya dilakukan skoring untuk mengetahui derajat kerusakan
dan keparahan yang terjadi akibat infeksi S. typhimurium. Sistem skor yang
dilakukan memiliki interval 0 sampai 4 dengan penilaian kondisi hati 0 : hati
dalam kondisi normal, terlihat sel-sel hepatosit tersusun radier; 1 : terjadi oedema
pada hati dan sinusoid dengan adanya jarak yang terlihat saling menjauh antara
sel-sel hepatosit; 2 : terjadi degenerasi berbutir, terlihat adanya butir-butir kecil
dalam jumlah yang banyak didalam sel-sel hepatosit; 3 : terjadi degenerasi
hidropis, terlihat adanya butir rongga besar sehingga menggeser inti sel hepatosit;
4 : terdapat sel sarang radang yang mengelilingi sel-sel hepatosit dan bergerombol
dengan warna khas ungu.
Prosedur Pelaksanaan
Persiapan kandang dan ayam dilakukan dua minggu sebelum penelitian
dilaksanakan. Ransum penelitian dan air minum diberikan ad libitum. Pakan silase
diberikan pada saat ayam berumur 7 hari. Tempat pakan dan tempat air minum
diletakkan di atas sekam di dalam kandang sekat..
Ayam dipelihara dalam kandang litter, Setiap kandang berisi 8 ekor ayam.
Tiap unit kandang dilengkapi dengan lampu sebesar 60 watt yang berfungsi
sebagai penghangat tubuh DOC. Tempat pakan dan tempat air minum digantung
sejajar dengan punggung ayam agar pakan dan air minum tidak mudah kotor oleh
ekskreta ataupun sekam. Kontrol kebersihan kandang, tempat minum dan pakan
dilakukan setiap hari. Selama penelitian dilakukan, suhu dan kelembaban udara
pada ruang kandang tetap diperhatikan.
Setelah proses
pemeliharaan dan pemotongan selesai
dilakukan,
dilanjutkan dengan pengumpulan sampel dan pembuatan preparat histopatologi.
Pengumpulan sampel organ hati dilakukan pada saat broiler berumur 9, 18, 27, 36
14
dan 42 hari. Dalam setiap pengamatan yang dilakukan digunakan 3 ekor ayam
yang diambil secara acak. Hati Broiler disampel, dikumpulkan dan difiksasi
menggunakan larutan fiksatif formalin. Sampel diproses melalui serangkaian
tahapan yaitu proses dehidrasi dengan peningkatan konsentrasi ethyl alcohol (50%
- 100%), clearing atau penjernihan dan kemudian disimpan dalan larutan buffer
neutral formaline (BNF) 10% (pada pH 7.2 – 7.4) , embedding atau penanaman
jaringan dalam paraffin, pemotongan dengan menggunakan mikrotom setebal 5
µm. Proses ini dilanjutkan dengan proses pewarnaan HE (Hematoksilin Eosin)
dan yang terakhir adalah mounting atau penutupan dengan gelas penutup
(Humason 1972). Preparasi preparat, identifikasi dan pengamatan preparat
dilakukan di Bagian Patologi, Departemen Klinik, Reproduksi dan Patologi
Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor.
15
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini memberikan data pengamatan histopatologi organ hati
broiler pada 7 perlakuan. Data ini menunjukkan tingkat kerusakan hati yang
diakibatkan adanya infeksi bakteri S. typhimurium. Kerusakan yang timbul pada
hati akibat infeksi S. typhimurium dicoba ditekan dengan pemberian silase, L.
plantarum dan antibiotik. Pada Tabel 2 disajikan hasil pengamatan histopatologi
organ hati.
Tabel 2. Histopatologi organ hati broiler akibat infeksi S. typhimurium
berdasarkan nilai skoring rata-rata pada 10 lapang pandang
Hari Pengamatan
Perlakuan1)
9
18
27
36
42
0.00a 2)
1,03) ± 0,00 a
1,6 ± 0,52b
1,4 ± 0,74a
1,3 ± 1,57a
B1
0.00a
2,0 ± 0,67b
2,4 ± 0,52c
2,2 ± 0,70c
2,6 ± 0,52c
L1
0.00a
2,5 ± 0,48c
2,3 ± 0,53c
3,2 ± 0,42d
3,0 ± 0,00d
S2
0.00a
2,9 ± 0,57d
2,4 ± 0,52c
1,0 ± 0,32a
1,5 ± 0,85a
B2
0.00a
1,9 ± 0,29b
2,5 ± 0,53c
2,6 ± 0,57c
3,2 ± 0,42d
L2
0.00a
1,8 ± 0,63b
1,7 ± 1,42b
3,2 ± 0,42d
3,6 ± 0,52d
A
0.00a
2,4 ± 0,52c
2,1 ± 0,32b
3,0 ± 0,94d
3,5 ± 0,53d
S1
1) Keterangan: S1 (Ransum silase), B1 (Ransum basal), L1 (B1 + L. Plantarum),
S2 (S1 + infeksi S. typhimurium), B2 (B1 + infeksi S. typhimurium), L2 (L1+
infeksi S. typhimurium), A (B1 + antibiotik + infeksi S. typhimurium)
2) Superskrip yang berbeda pada kolom yang sama menunjukkan berbeda nyata
(P