Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia Serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.) Dengan Metode DPPH
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA
SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
DAUN KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.)
DENGAN METODE DPPH
SKRIPSI
OLEH:
DESI TRISNAWATI
NIM 121501088
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA
SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
DAUN KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.)
DENGAN METODE DPPH
SKRIPSI
Diajukan sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh
Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
DESI TRISNAWATI
NIM 121501088
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA
SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
DAUN KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.)
DENGAN METODE DPPH
OLEH:
DESI TRISNAWATI
NIM 121501088
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 27 Juli 2016
Disetujui Oleh:
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Sri Yuliasmi, S.Farm., M.Si., Apt.
NIP 198207032008122002
Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.
NIP 195201041980031002
Pembimbing II,
Sri Yuliasmi, S. Farm., M.Si., Apt.
NIP 198207032008122002
Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt.
NIP 195709091985112001
Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt.
NIP 195112231980032002
Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt.
NIP 195109081985031002
Medan,
Agustus 2016
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
iii
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas segala limpahan
anugerah dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan
penyusunan skripsi yang berjudul “Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia
serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.)
dengan Metode DPPH”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk
memperoleh gelar Sarjana Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera
Utara.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terimakasih yang sebesarbesarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi. Ibu
Sri Yuliasmi, S.Farm., M.Si., Apt., dan Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt.,
selaku pembimbing yang telah membimbing dengan penuh kesabaran, tulus dan
ikhlas selama penelitian hingga menyelesaikan penulisan skripsi ini. Ibu Prof. Dr.
Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt., selaku penasehat akademik yang memberikan
motivasi dan bimbingan kepada penulis selama perkuliahan. Bapak Drs. Fathur
Rahman Harun, M.Si., Apt., Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., dan Bapak
Drs. Suryadi Achmad, M.S., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan
masukan, arahan, kritik dan saran dalam penyusunan skripsi ini dan seluruh staf
pengajar Fakultas Farmasi.
Penulis mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga dan
penghargaan yang sebesar-besarnya kepada Ayahanda Binsar Simbolon dan
Ibunda Riris Silitonga, serta kakak dan adik-adik yang tiada hentinya berdoa dan
iv
Universitas Sumatera Utara
berkorban dengan tulus ikhlas memberikan dukungan baik moril maupun materil
selama perkuliahan hingga penyelesaian skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan dalam penulisan skripsi
ini, dengan itu sangat diharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari
semua pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga
skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua.
Medan, Agustus 2016
Penulis,
Desi Trisnawati
NIM 121501088
v
Universitas Sumatera Utara
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT
Saya yang bertandatangan di bawah ini,
Nama
: Desi Trisnawati
Nomor Induk Mahasiswa
: 121501088
Program Studi
: Reguler Farmasi
Judul Skripsi
: Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia
serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun
Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.) dengan Metode
DPPH
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil
pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat
karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila di kemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi
ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia
menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Utara, dan bukan menjadi tanggungjawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat
digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, Agustus 2016
Yang membuat pernyataan,
Desi Trisnawati
NIM 121501088
vi
Universitas Sumatera Utara
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK DAUN KETEPENG
(Senna alata (L.) Roxb.) DENGAN METODE DPPH
ABSTRAK
Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.) merupakan salah satu jenis tumbuhan
dari keluarga Leguminosae yang diketahui memiliki berbagai khasiat untuk
pengobatan termasuk sebagai antioksidan. Daun ketepeng banyak digunakan oleh
masyarakat secara tradisional untuk pengobatan kudis, sariawan dan cacingan.
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karakteristik simplisia, kandungan
senyawa kimia dan aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi daun ketepeng.
Serbuk simplisia daun ketepeng dikarakterisasi dan diskrining, selanjutnya
diekstraksi dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 80%. Ekstrak etanol
difraksinasi dengan pelarut n-heksana dan etilasetat. Analisis kandungan kimia
secara kromatografi lapis tipis (KLT) dan kromatografi kertas (KKt) serta uji
aktivitas antioksidan terhadap DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil) sebagai
radikal bebas dengan mengukur absorbansi DPPH pada panjang gelombang 516
nm pada menit ke-60 setelah penambahan pelarut metanol. Kemampuan
antioksidan diukur sebagai penurunan absorbansi larutan DPPH setelah
penambahan ekstrak atau fraksi.
Hasil karakterisasi serbuk simplisia diperoleh kadar air 6,62%, kadar sari
yang larut dalam air 20,46%, kadar sari yang larut dalam etanol 15,40%, kadar
abu total 4,14%, dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,37%. Hasil skrining
fitokimia daun ketepeng mengandung senyawa kimia golongan flavonoida,
glikosida, tanin, antrakinon, saponin dan triterpenoid/steroid. Hasil KLT dan KKt
ekstrak etanol diperoleh 6 senyawa tanin, 3 senyawa flavonoid dan 4 senyawa
triterpenoid/steroid. Hasil pengujian aktivitas antioksidan dengan metode DPPH
menunjukkan bahwa ekstrak etanol, fraksi n-heksana, fraksi etilasetat dan fraksi
air dari daun ketepeng memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai inhibitory
concentration (IC50) yang diperoleh dari ekstrak etanol, fraksi n-heksana, fraksi
etilasetat dan fraksi air sebesar 60,08, 127,27, 33,43 dan 66,78 µg/ml.
Kata kunci: uji aktivitas antioksidan, Senna alata (L.) Roxb., DPPH
vii
Universitas Sumatera Utara
CHARACTERIZATION OF SIMPLISIA AND PHYTOCHEMICAL
SCREENING AND ANTIOXIDANT ACTIVITY TESTING FROM
KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.) LEAVES EXTRACT
USING DPPH
ABSTRACT
Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.) is one species of the family
Leguminosae which are known to have various benefits for treatment, including
as an antioxidant. Ketepeng widely used by people traditionally for the treatment
of scabies, ulcers and intestinal worms. The purpose of this study was to
determine the characteristics of the simplisia, chemical compounds content and
antioxidant activity of extracts and fractions of ketepeng.
Simplisia powder was characterized and screened, then extracted by
maceration using ethanol 80%. Ethanol extract was fractionated with n-hexane
and ethylacetate. Analysis of chemical compounds by thin layer chromatography
(TLC) and papper chromatography and then the antioxidant activity of extracts
were tested using DPPH (1,1diphenyl-2-picrylhydrazil) as free radical.
Absorbance of DPPH was measured at 516 nm, at 60th minute after the addition
of methanol solvent. Antioxidant activity was measured as a decrease in
absorbance of DPPH solution after the addition of extracts or fractions.
The result of simplisia powder characterization gave the water content
value 6.62%, the water soluble extract 20.46%, the ethanol soluble extract
15.40%, the total ash 4.14%, and the ash is not soluble in acid 0.37%. Results of
phytochemical screening showed that ketepeng contained flavonoid, glycoside,
tannin, antraquinon, saponin and triterpenoid/steroid. Result analysis by TLC and
papper chromatography, ethanol extract obtained 6 tannins, 3 flavonoids and 4
triterpenoids/steroids. Results of antioxidant activity testing by DPPH method
showed that the ethanol extract, fraction of n-hexane, fraction of ethylacetate and
water fraction of ketepeng have antioxidant activity with a inhibitory
concentration value (IC50) obtained from the ethanol extract, n-hexane fractions,
ethylacetate fractions and the water fractions amounted to 60.08, 127.27, 33.43
and 66.78 µg/ml.
Keywords: antioxidant activity testing, Senna alata (L.) Roxb., DPPH
viii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ...................................................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN ...................................................................
iii
KATA PENGANTAR ...........................................................................
iv
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT .......................................
vi
ABSTRAK .............................................................................................
vii
ABSTRACT ...........................................................................................
viii
DAFTAR ISI ..........................................................................................
ix
DAFTAR GAMBAR .............................................................................
xiv
DAFTAR TABEL ..................................................................................
xv
DAFTAR LAMPIRAN ..........................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN ...................................................................
1
1.1 Latar Belakang ...................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ...........................................................
3
1.3 Hipotesis .............................................................................
3
1.4 Tujuan Penelitian ...............................................................
3
1.5 Manfaat Penelitian .............................................................
4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...........................................................
5
2.1 Uraian Tumbuhan ..............................................................
5
2.1.1 Morfologi tumbuhan ................................................
5
2.1.2 Habitat ......................................................................
5
2.1.3 Sistematika tumbuhan ..............................................
6
2.1.4 Nama daerah dan nama asing ..................................
6
ix
Universitas Sumatera Utara
2.1.5 Kegunaan .................................................................
6
2.1.6 Kandungan kimia .....................................................
7
2.2 Uraian Golongan Senyawa Kimia Daun Ketepeng ...........
7
2.2.1 Glikosida ..................................................................
7
2.2.2 Flavonoid .................................................................
8
2.2.3 Tanin ........................................................................
8
2.2.4 Triterpenoid/ steroid ................................................
9
2.2.5 Saponin ....................................................................
10
2.2.6 Antrakinon ...............................................................
11
2.3 Ekstraksi ............................................................................
11
2.4 Radikal Bebas ....................................................................
13
2.5 Antioksidan .......................................................................
14
2.5.1 Antioksidan alami ....................................................
16
2.5.2 Antioksidan sintetik .................................................
17
2.6 Kromatografi .....................................................................
17
2.6.1 Kromatografi lapis tipis ...........................................
18
2.6.2 Kromatografi kertas .................................................
19
2.7 Metode Pemerangkapan Radikal Bebas
DPPH
(1,1-diphenyl-2 picrylhydrazil) .........................................
20
2.8 Spektrofotometer UV-Visibel ...........................................
22
BAB III METODE PENELITIAN .........................................................
24
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ............................................
24
3.2 Alat .....................................................................................
24
3.3 Bahan ..................................................................................
24
3.4 Penyiapan Tumbuhan .........................................................
25
x
Universitas Sumatera Utara
3.4.1 Pengambilan tumbuhan .............................................
25
3.4.2 Identifikasi tumbuhan ................................................
25
3.4.3 Pengolahan tumbuhan ...............................................
25
3.4.4 Karakterisasi simplisia ..............................................
25
3.4.4.1 Pemeriksaan makroskopik ............................
26
3.4.4.2 Pemeriksaan mikroskopik .............................
26
3.4.4.3 Penetapan kadar air .......................................
26
3.4.4.4 Penetapan kadar sari larut dalam air .............
27
3.4.4.5 Penetapan kadar sari larut dalam etanol .......
27
3.4.4.6 Penetapan kadar abu total .............................
27
3.4.4.7 Penetapan kadar abu tidak larut dalam asam
28
3.5 Pembuatan Larutan Pereaksi ..............................................
28
3.5.1 Larutan pereaksi Bouchardat .....................................
28
3.5.2 Larutan pereaksi Dragendorff ...................................
28
3.5.3 Larutan pereaksi Mayer .............................................
28
3.5.4 Larutan pereaksi Molisch ..........................................
29
3.5.5 Larutan pereaksi asam klorida 2 N ...........................
29
3.5.6 Larutan pereaksi asam sulfat 2 N ..............................
29
3.5.7 Larutan pereaksi asam nitrat 0,5 N ...........................
29
3.5.8 Larutan pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M ..................
29
3.5.9 Larutan pereaksi besi (III) klorida 1% ......................
29
3.5.10 Larutan pereaksi kloralhidrat 70% b/b ....................
29
3.5.11 Larutan pereaksi natrium hidroksida 2 N ................
30
3.6 Skrining Fitokimia .............................................................
30
xi
Universitas Sumatera Utara
3.6.1 Pemeriksaan alkaloid ................................................
30
3.6.2 Pemeriksaan glikosida ...............................................
30
3.6.3 Pemeriksaan saponin .................................................
31
3.6.4 Pemeriksaan flavonoid ..............................................
31
3.6.5 Pemeriksaan antrakinon ............................................
31
3.6.6 Pemeriksaan tanin .....................................................
32
3.6.7 Pemeriksaan triterpenoid/steroid ...............................
32
3.7 Pembuatan Ekstrak dan Fraksi ...........................................
32
3.7.1 Pembuatan ekstrak etanol ..........................................
32
3.7.2 Pembuatan fraksi .......................................................
33
3.8 Pembuatan Profil Kromatografi .........................................
33
3.8.1 Pembuatan profil KLT ..............................................
33
3.8.2 Pembuatan profil KKt ...............................................
33
3.9 Pengujian Antioksidan dengan Spektrofotometer Visibel .
34
3.9.1 Prinsip metode penangkapan radikal bebas DPPH ...
34
3.9.2 Pembuatan larutan blanko DPPH ..............................
34
3.9.3 Pengukuran panjang gelombang serapan maksimum
DPPH ........................................................................
34
3.9.4 Pembuatan larutan induk ekstrak dan fraksi .............
35
3.9.5 Penentuan waktu reaksi .............................................
35
3.9.6 Pengukuran aktivitas antioksidan sampel uji ............
35
3.9.7 Penentuan persen peredaman ....................................
35
3.9.8 Penentuan nilai IC50 ..................................................
36
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...............................................
37
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ..............................................
37
xii
Universitas Sumatera Utara
4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia .............................................
37
4.3 Hasil Skrining Fitokimia Serbuk Simplisia .......................
39
4.4 Hasil Ekstraksi dan Fraksinasi ...........................................
40
4.5 Profil Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Etanol Daun
Ketepeng .............................................................................
40
4.6 Profil Kromatografi Kertas Ekstrak Etanol Daun
Ketepeng .............................................................................
40
4.7 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Ekstrak dan Fraksi ..
41
4.7.1 Hasil penentuan panjang gelombang serapan
maksimum .................................................................
41
4.7.2 Hasil analisis peredaman radikal bebas DPPH oleh
sampel uji ..................................................................
42
4.7.3 Hasil analisis aktivitas antioksidan ...........................
43
4.7.4 Hasil analisis nilai IC50 (Inhibitory Concentration) ..
44
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................
45
5.1 Kesimpulan ........................................................................
45
5.2 Saran ...................................................................................
45
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................
46
LAMPIRAN ...........................................................................................
50
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1
Struktur dasar steroida dan sistem penomorannya ........................
10
2.2
Resonansi DPPH ...........................................................................
21
2.3 Reaksi antara DPPH dengan atom H dari senyawa antioksidan ...
22
4.1
Kurva panjang gelombang maksimum DPPH dalam metanol .....
42
4.2
Grafik hasil analisis aktivitas antioksidan ekstrak etanol, fraksi
n-heksana, fraksi etilasetat dan fraksi air dari daun ketepeng .....
43
xiv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
4.1
Halaman
Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia daun ketepeng
(Senna alata (L.) Roxb.) ..............................................................
38
4.2
Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia daun ketepeng ............
39
4.3
Data hasil analisis KKt ekstrak etanol daun ketepeng .................
41
4.4
Hasil analisis peredaman radikal bebas oleh ekstrak dan fraksi
daun ketepeng ..............................................................................
42
Hasil persamaan regresi linier dan nilai IC50 dari ekstrak dan
fraksi daun ketepeng ....................................................................
44
4.5
xv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
1
Halaman
Hasil identifikasi tumbuhan ketepeng (Senna alata (L.)
Roxb.) ......................................................................................
50
2
Gambar tumbuhan dan daun ketepeng ....................................
51
3
Gambar simplisia dan serbuk simplisia daun ketepeng ...........
52
4
Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia daun
ketepeng ...................................................................................
53
5
Bagan kerja penelitian .............................................................
54
6
Bagan pembuatan ekstrak etanol daun ketepeng .....................
55
7
Bagan pembuatan fraksi n-heksana dan fraksi etilasetat daun
ketepeng ...................................................................................
56
8
Perhitungan karakterisasi simplisia daun ketepeng .................
57
9
Kromatogram dan data Rf hasil KLT ekstrak etanol daun
ketepeng (EEDK) ....................................................................
61
Kromatogram hasil KKt ekstrak etanol daun ketepeng dengan
berbagai fase gerak ..................................................................
63
11
Penentuan waktu kerja .............................................................
67
12
Hasil uji antioksidan ................................................................
71
13
Perhitungan nilai IC50 ..............................................................
84
14
Gambar spektrofotometer UV-Visibel ....................................
88
10
xvi
Universitas Sumatera Utara
SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
DAUN KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.)
DENGAN METODE DPPH
SKRIPSI
OLEH:
DESI TRISNAWATI
NIM 121501088
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA
SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
DAUN KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.)
DENGAN METODE DPPH
SKRIPSI
Diajukan sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh
Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
DESI TRISNAWATI
NIM 121501088
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2016
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA
SERTA UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK
DAUN KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.)
DENGAN METODE DPPH
OLEH:
DESI TRISNAWATI
NIM 121501088
Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 27 Juli 2016
Disetujui Oleh:
Pembimbing I,
Panitia Penguji,
Sri Yuliasmi, S.Farm., M.Si., Apt.
NIP 198207032008122002
Drs. Fathur Rahman Harun, M.Si., Apt.
NIP 195201041980031002
Pembimbing II,
Sri Yuliasmi, S. Farm., M.Si., Apt.
NIP 198207032008122002
Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt.
NIP 195709091985112001
Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt.
NIP 195112231980032002
Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt.
NIP 195109081985031002
Medan,
Agustus 2016
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Dr. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
iii
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur ke hadirat Tuhan Yang Maha Esa atas segala limpahan
anugerah dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan
penyusunan skripsi yang berjudul “Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia
serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.)
dengan Metode DPPH”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk
memperoleh gelar Sarjana Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera
Utara.
Pada kesempatan ini penulis menyampaikan terimakasih yang sebesarbesarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M.S., Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi. Ibu
Sri Yuliasmi, S.Farm., M.Si., Apt., dan Ibu Dr. Marline Nainggolan, M.S., Apt.,
selaku pembimbing yang telah membimbing dengan penuh kesabaran, tulus dan
ikhlas selama penelitian hingga menyelesaikan penulisan skripsi ini. Ibu Prof. Dr.
Siti Morin Sinaga, M.Sc., Apt., selaku penasehat akademik yang memberikan
motivasi dan bimbingan kepada penulis selama perkuliahan. Bapak Drs. Fathur
Rahman Harun, M.Si., Apt., Ibu Dra. Herawaty Ginting, M.Si., Apt., dan Bapak
Drs. Suryadi Achmad, M.S., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan
masukan, arahan, kritik dan saran dalam penyusunan skripsi ini dan seluruh staf
pengajar Fakultas Farmasi.
Penulis mempersembahkan rasa terima kasih yang tak terhingga dan
penghargaan yang sebesar-besarnya kepada Ayahanda Binsar Simbolon dan
Ibunda Riris Silitonga, serta kakak dan adik-adik yang tiada hentinya berdoa dan
iv
Universitas Sumatera Utara
berkorban dengan tulus ikhlas memberikan dukungan baik moril maupun materil
selama perkuliahan hingga penyelesaian skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan dalam penulisan skripsi
ini, dengan itu sangat diharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun dari
semua pihak guna perbaikan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga
skripsi ini dapat bermanfaat bagi kita semua.
Medan, Agustus 2016
Penulis,
Desi Trisnawati
NIM 121501088
v
Universitas Sumatera Utara
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT
Saya yang bertandatangan di bawah ini,
Nama
: Desi Trisnawati
Nomor Induk Mahasiswa
: 121501088
Program Studi
: Reguler Farmasi
Judul Skripsi
: Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia
serta Uji Aktivitas Antioksidan Ekstrak Daun
Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.) dengan Metode
DPPH
Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil
pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di perguruan tinggi lain, dan bukan plagiat
karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya di dalam daftar pustaka.
Apabila di kemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena di dalam skripsi
ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia
menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi
Universitas Utara, dan bukan menjadi tanggungjawab pembimbing.
Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat
digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.
Medan, Agustus 2016
Yang membuat pernyataan,
Desi Trisnawati
NIM 121501088
vi
Universitas Sumatera Utara
KARAKTERISASI SIMPLISIA DAN SKRINING FITOKIMIA SERTA UJI
AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK DAUN KETEPENG
(Senna alata (L.) Roxb.) DENGAN METODE DPPH
ABSTRAK
Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.) merupakan salah satu jenis tumbuhan
dari keluarga Leguminosae yang diketahui memiliki berbagai khasiat untuk
pengobatan termasuk sebagai antioksidan. Daun ketepeng banyak digunakan oleh
masyarakat secara tradisional untuk pengobatan kudis, sariawan dan cacingan.
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui karakteristik simplisia, kandungan
senyawa kimia dan aktivitas antioksidan ekstrak dan fraksi daun ketepeng.
Serbuk simplisia daun ketepeng dikarakterisasi dan diskrining, selanjutnya
diekstraksi dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 80%. Ekstrak etanol
difraksinasi dengan pelarut n-heksana dan etilasetat. Analisis kandungan kimia
secara kromatografi lapis tipis (KLT) dan kromatografi kertas (KKt) serta uji
aktivitas antioksidan terhadap DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil) sebagai
radikal bebas dengan mengukur absorbansi DPPH pada panjang gelombang 516
nm pada menit ke-60 setelah penambahan pelarut metanol. Kemampuan
antioksidan diukur sebagai penurunan absorbansi larutan DPPH setelah
penambahan ekstrak atau fraksi.
Hasil karakterisasi serbuk simplisia diperoleh kadar air 6,62%, kadar sari
yang larut dalam air 20,46%, kadar sari yang larut dalam etanol 15,40%, kadar
abu total 4,14%, dan kadar abu yang tidak larut dalam asam 0,37%. Hasil skrining
fitokimia daun ketepeng mengandung senyawa kimia golongan flavonoida,
glikosida, tanin, antrakinon, saponin dan triterpenoid/steroid. Hasil KLT dan KKt
ekstrak etanol diperoleh 6 senyawa tanin, 3 senyawa flavonoid dan 4 senyawa
triterpenoid/steroid. Hasil pengujian aktivitas antioksidan dengan metode DPPH
menunjukkan bahwa ekstrak etanol, fraksi n-heksana, fraksi etilasetat dan fraksi
air dari daun ketepeng memiliki aktivitas antioksidan dengan nilai inhibitory
concentration (IC50) yang diperoleh dari ekstrak etanol, fraksi n-heksana, fraksi
etilasetat dan fraksi air sebesar 60,08, 127,27, 33,43 dan 66,78 µg/ml.
Kata kunci: uji aktivitas antioksidan, Senna alata (L.) Roxb., DPPH
vii
Universitas Sumatera Utara
CHARACTERIZATION OF SIMPLISIA AND PHYTOCHEMICAL
SCREENING AND ANTIOXIDANT ACTIVITY TESTING FROM
KETEPENG (Senna alata (L.) Roxb.) LEAVES EXTRACT
USING DPPH
ABSTRACT
Ketepeng (Senna alata (L.) Roxb.) is one species of the family
Leguminosae which are known to have various benefits for treatment, including
as an antioxidant. Ketepeng widely used by people traditionally for the treatment
of scabies, ulcers and intestinal worms. The purpose of this study was to
determine the characteristics of the simplisia, chemical compounds content and
antioxidant activity of extracts and fractions of ketepeng.
Simplisia powder was characterized and screened, then extracted by
maceration using ethanol 80%. Ethanol extract was fractionated with n-hexane
and ethylacetate. Analysis of chemical compounds by thin layer chromatography
(TLC) and papper chromatography and then the antioxidant activity of extracts
were tested using DPPH (1,1diphenyl-2-picrylhydrazil) as free radical.
Absorbance of DPPH was measured at 516 nm, at 60th minute after the addition
of methanol solvent. Antioxidant activity was measured as a decrease in
absorbance of DPPH solution after the addition of extracts or fractions.
The result of simplisia powder characterization gave the water content
value 6.62%, the water soluble extract 20.46%, the ethanol soluble extract
15.40%, the total ash 4.14%, and the ash is not soluble in acid 0.37%. Results of
phytochemical screening showed that ketepeng contained flavonoid, glycoside,
tannin, antraquinon, saponin and triterpenoid/steroid. Result analysis by TLC and
papper chromatography, ethanol extract obtained 6 tannins, 3 flavonoids and 4
triterpenoids/steroids. Results of antioxidant activity testing by DPPH method
showed that the ethanol extract, fraction of n-hexane, fraction of ethylacetate and
water fraction of ketepeng have antioxidant activity with a inhibitory
concentration value (IC50) obtained from the ethanol extract, n-hexane fractions,
ethylacetate fractions and the water fractions amounted to 60.08, 127.27, 33.43
and 66.78 µg/ml.
Keywords: antioxidant activity testing, Senna alata (L.) Roxb., DPPH
viii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
JUDUL ...................................................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN ...................................................................
iii
KATA PENGANTAR ...........................................................................
iv
SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT .......................................
vi
ABSTRAK .............................................................................................
vii
ABSTRACT ...........................................................................................
viii
DAFTAR ISI ..........................................................................................
ix
DAFTAR GAMBAR .............................................................................
xiv
DAFTAR TABEL ..................................................................................
xv
DAFTAR LAMPIRAN ..........................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN ...................................................................
1
1.1 Latar Belakang ...................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ...........................................................
3
1.3 Hipotesis .............................................................................
3
1.4 Tujuan Penelitian ...............................................................
3
1.5 Manfaat Penelitian .............................................................
4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...........................................................
5
2.1 Uraian Tumbuhan ..............................................................
5
2.1.1 Morfologi tumbuhan ................................................
5
2.1.2 Habitat ......................................................................
5
2.1.3 Sistematika tumbuhan ..............................................
6
2.1.4 Nama daerah dan nama asing ..................................
6
ix
Universitas Sumatera Utara
2.1.5 Kegunaan .................................................................
6
2.1.6 Kandungan kimia .....................................................
7
2.2 Uraian Golongan Senyawa Kimia Daun Ketepeng ...........
7
2.2.1 Glikosida ..................................................................
7
2.2.2 Flavonoid .................................................................
8
2.2.3 Tanin ........................................................................
8
2.2.4 Triterpenoid/ steroid ................................................
9
2.2.5 Saponin ....................................................................
10
2.2.6 Antrakinon ...............................................................
11
2.3 Ekstraksi ............................................................................
11
2.4 Radikal Bebas ....................................................................
13
2.5 Antioksidan .......................................................................
14
2.5.1 Antioksidan alami ....................................................
16
2.5.2 Antioksidan sintetik .................................................
17
2.6 Kromatografi .....................................................................
17
2.6.1 Kromatografi lapis tipis ...........................................
18
2.6.2 Kromatografi kertas .................................................
19
2.7 Metode Pemerangkapan Radikal Bebas
DPPH
(1,1-diphenyl-2 picrylhydrazil) .........................................
20
2.8 Spektrofotometer UV-Visibel ...........................................
22
BAB III METODE PENELITIAN .........................................................
24
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ............................................
24
3.2 Alat .....................................................................................
24
3.3 Bahan ..................................................................................
24
3.4 Penyiapan Tumbuhan .........................................................
25
x
Universitas Sumatera Utara
3.4.1 Pengambilan tumbuhan .............................................
25
3.4.2 Identifikasi tumbuhan ................................................
25
3.4.3 Pengolahan tumbuhan ...............................................
25
3.4.4 Karakterisasi simplisia ..............................................
25
3.4.4.1 Pemeriksaan makroskopik ............................
26
3.4.4.2 Pemeriksaan mikroskopik .............................
26
3.4.4.3 Penetapan kadar air .......................................
26
3.4.4.4 Penetapan kadar sari larut dalam air .............
27
3.4.4.5 Penetapan kadar sari larut dalam etanol .......
27
3.4.4.6 Penetapan kadar abu total .............................
27
3.4.4.7 Penetapan kadar abu tidak larut dalam asam
28
3.5 Pembuatan Larutan Pereaksi ..............................................
28
3.5.1 Larutan pereaksi Bouchardat .....................................
28
3.5.2 Larutan pereaksi Dragendorff ...................................
28
3.5.3 Larutan pereaksi Mayer .............................................
28
3.5.4 Larutan pereaksi Molisch ..........................................
29
3.5.5 Larutan pereaksi asam klorida 2 N ...........................
29
3.5.6 Larutan pereaksi asam sulfat 2 N ..............................
29
3.5.7 Larutan pereaksi asam nitrat 0,5 N ...........................
29
3.5.8 Larutan pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M ..................
29
3.5.9 Larutan pereaksi besi (III) klorida 1% ......................
29
3.5.10 Larutan pereaksi kloralhidrat 70% b/b ....................
29
3.5.11 Larutan pereaksi natrium hidroksida 2 N ................
30
3.6 Skrining Fitokimia .............................................................
30
xi
Universitas Sumatera Utara
3.6.1 Pemeriksaan alkaloid ................................................
30
3.6.2 Pemeriksaan glikosida ...............................................
30
3.6.3 Pemeriksaan saponin .................................................
31
3.6.4 Pemeriksaan flavonoid ..............................................
31
3.6.5 Pemeriksaan antrakinon ............................................
31
3.6.6 Pemeriksaan tanin .....................................................
32
3.6.7 Pemeriksaan triterpenoid/steroid ...............................
32
3.7 Pembuatan Ekstrak dan Fraksi ...........................................
32
3.7.1 Pembuatan ekstrak etanol ..........................................
32
3.7.2 Pembuatan fraksi .......................................................
33
3.8 Pembuatan Profil Kromatografi .........................................
33
3.8.1 Pembuatan profil KLT ..............................................
33
3.8.2 Pembuatan profil KKt ...............................................
33
3.9 Pengujian Antioksidan dengan Spektrofotometer Visibel .
34
3.9.1 Prinsip metode penangkapan radikal bebas DPPH ...
34
3.9.2 Pembuatan larutan blanko DPPH ..............................
34
3.9.3 Pengukuran panjang gelombang serapan maksimum
DPPH ........................................................................
34
3.9.4 Pembuatan larutan induk ekstrak dan fraksi .............
35
3.9.5 Penentuan waktu reaksi .............................................
35
3.9.6 Pengukuran aktivitas antioksidan sampel uji ............
35
3.9.7 Penentuan persen peredaman ....................................
35
3.9.8 Penentuan nilai IC50 ..................................................
36
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ...............................................
37
4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan ..............................................
37
xii
Universitas Sumatera Utara
4.2 Hasil Karakterisasi Simplisia .............................................
37
4.3 Hasil Skrining Fitokimia Serbuk Simplisia .......................
39
4.4 Hasil Ekstraksi dan Fraksinasi ...........................................
40
4.5 Profil Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Etanol Daun
Ketepeng .............................................................................
40
4.6 Profil Kromatografi Kertas Ekstrak Etanol Daun
Ketepeng .............................................................................
40
4.7 Hasil Analisis Aktivitas Antioksidan Ekstrak dan Fraksi ..
41
4.7.1 Hasil penentuan panjang gelombang serapan
maksimum .................................................................
41
4.7.2 Hasil analisis peredaman radikal bebas DPPH oleh
sampel uji ..................................................................
42
4.7.3 Hasil analisis aktivitas antioksidan ...........................
43
4.7.4 Hasil analisis nilai IC50 (Inhibitory Concentration) ..
44
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................
45
5.1 Kesimpulan ........................................................................
45
5.2 Saran ...................................................................................
45
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................
46
LAMPIRAN ...........................................................................................
50
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1
Struktur dasar steroida dan sistem penomorannya ........................
10
2.2
Resonansi DPPH ...........................................................................
21
2.3 Reaksi antara DPPH dengan atom H dari senyawa antioksidan ...
22
4.1
Kurva panjang gelombang maksimum DPPH dalam metanol .....
42
4.2
Grafik hasil analisis aktivitas antioksidan ekstrak etanol, fraksi
n-heksana, fraksi etilasetat dan fraksi air dari daun ketepeng .....
43
xiv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
4.1
Halaman
Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia daun ketepeng
(Senna alata (L.) Roxb.) ..............................................................
38
4.2
Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia daun ketepeng ............
39
4.3
Data hasil analisis KKt ekstrak etanol daun ketepeng .................
41
4.4
Hasil analisis peredaman radikal bebas oleh ekstrak dan fraksi
daun ketepeng ..............................................................................
42
Hasil persamaan regresi linier dan nilai IC50 dari ekstrak dan
fraksi daun ketepeng ....................................................................
44
4.5
xv
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
1
Halaman
Hasil identifikasi tumbuhan ketepeng (Senna alata (L.)
Roxb.) ......................................................................................
50
2
Gambar tumbuhan dan daun ketepeng ....................................
51
3
Gambar simplisia dan serbuk simplisia daun ketepeng ...........
52
4
Hasil pemeriksaan mikroskopik serbuk simplisia daun
ketepeng ...................................................................................
53
5
Bagan kerja penelitian .............................................................
54
6
Bagan pembuatan ekstrak etanol daun ketepeng .....................
55
7
Bagan pembuatan fraksi n-heksana dan fraksi etilasetat daun
ketepeng ...................................................................................
56
8
Perhitungan karakterisasi simplisia daun ketepeng .................
57
9
Kromatogram dan data Rf hasil KLT ekstrak etanol daun
ketepeng (EEDK) ....................................................................
61
Kromatogram hasil KKt ekstrak etanol daun ketepeng dengan
berbagai fase gerak ..................................................................
63
11
Penentuan waktu kerja .............................................................
67
12
Hasil uji antioksidan ................................................................
71
13
Perhitungan nilai IC50 ..............................................................
84
14
Gambar spektrofotometer UV-Visibel ....................................
88
10
xvi
Universitas Sumatera Utara