SINTESIS SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6-TRIHIDROKSIFENIL) ETANON (DAPG) DAN UJI SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANKER SERVIKS, KANKER KOLON DAN KANKER PAYUDARA.
Skripsi
SINTESIS SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6TRIHIDROKSIFENIL) ETANON (DAPG) DAN UJI
SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANKER SERVIKS,
KANKER KOLON DAN KANKER PAYUDARA
Disusun Oleh:
TATA LUGAS NASTITI
M0311065
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi sebagian persyaratan mendapatkan gelar
Sarjana Sains dalam bidang ilmu kimia
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
2017
HALAMAN PENGESAHAN
Skripsi
SINTESIS SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6-TRIHIDROKSIFENIL) ETANON
(DAPG) DAN UJI SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANKER SERVIKS,
KANKER KOLON DAN KANKER PAYUDARA
TATA LUGAS NASTITI
M0311065
Skripsi ini dibimbing oleh :
Pembimbing I
Pembimbing II
Dr. Triana Kusumaningsih, M.Si
Anif Nur Artanti, M. Sc., Apt.
NIP.19730124 199903 2001
NIP. 19870427 2014051
Dipertahankan di depan Tim Penguji Skripsi pada:
Hari
: Kamis
Tanggal
: 29 Desember 2016
Anggota Tim Penguji :
1. Dr. Soerya Dewi Marliyana, M.Si
NIP. 19690313 199702 2001
1…………………
2. Dr. Eddy Heraldy, M.Si
NIP. 19640305 200003 1002
2…………………
Disahkan oleh
Kepala Program Studi Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Sebelas Maret Surakarta
Dr. Triana Kusumaningsih, M.Si
NIP.19730124 199903 2001
ii
PERNYATAAN
Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi saya yang berjudul “SINTESIS
SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6-TRIHIDROKSIFENIL) ETANON (DAPG)
DAN UJI SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANKER SERVIKS,
KANKER
KOLON DAN KANKER PAYUDARA” belum pernah diajukan
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang
pengetahuan saya juga belum pernah ditulis atau dipublikasikan oleh orang lain,
kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar
pustaka.
Surakarta, 12 Januari 2017
TATA LUGAS NASTITI
iii
SINTESIS SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6-TRIHIDROKSIFENIL)
ETANON (DAPG) DAN UJI SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANER
SERVIKS, KANKER KOLON DAN KANKER PAYUDARA
TATA LUGAS NASTITI
Program Studi Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Sebelas Maret
ABSTRAK
Senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon (DAPG) merupakan
senyawa turunan ploroglusinol telah berhasil disintesis dengan mereaksikan
ploroglusinol dengan asam asetat anhidrid menggunakan katalis asam
metasulfonat melalui reaksi esterifikasi dan penataan ulang Fries. Identifikasi
senyawa tersebut dikarakterisasi dengan uji titik leleh, spektroskopi FT-IR,
dan 1D NMR dan diperoleh rendemen sebesar 34%.
Uji sitotoksisitas senyawa DAPG dilakukan pada seri konsentrasi 10; 15;
20; 25; 50; 75; 90; dan 100 µg/mL terhadap sel kanker HeLa, WiDr dan
MCF7. Hasil uji sitotoksisitas menunjukkan DAPG hanya aktif terhadap sel
HeLa dengan nilai IC50 sebesar 50,1 µg/mL dan viabilitas sel sebesar 58,73%.
Kata kunci: 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil)etanon (DAPG), IC50, sitotoksisitas,
sel HeLa, sel WiDr dan sel MCF7
iv
SYNTHESIS OF 1-(3-ACETYL-2,4,6-TRIHYDROXYPHENYL)
ETHANONE (DAPG) COMPOUND AND ITS CYTOTOXICITY OF
CERVIX CANCER, COLON CANCER AND BREAST CANCER CELLS
TATA LUGAS NASTITI
Department of Chemistry, Faculty of Mathematics and Natural Sciences,
University of Sebelas Maret
ABSTRACT
1-(3-acetyl-2,4,6-trihydroxyphenyl) ethanone (DAPG) compounds
had been successfully synthesized using commercially available
phloroglucinol, acetate anhydride and methanesulfonic acid as a catalyst
through esterification reaction and Fries rearrangement. The synthesized
product, DAPG compound were characterized by FT-IR, NMR spectroscopy
which were gave 34% yield.
Cytotoxicity assay of DAPG compound had been measured in 10;
15; 20; 25; 50; 75; 90; dan 100 µg/mL of concentration against HeLa, WiDr
and MCF7 cancer cells. DAPG compound had showed better bioactivity only
on HeLa cancer cells with respectively gave 50,1 µg/mL of IC50 values and
58,73% of its cell viabillity.
Keywords: 1-(3-acetyl-2,4,6-trihydroxyphenyl) ethanone (DAPG), cytotoxicity,
IC50, HeLa, MCF7, and WiDr cancer cells.
v
MOTTO
“Jadikanlah sabar dan shalat sebagai penolongmu. Dan sesungguhnya yang
demikian itusungguh berat, kecuali bagi orang-orang yang khusyu.”
(Q.S. Al-Baqarah : 45)
“Karena sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan. Sesuangguhnya
sesudah kesulitan itu ada kemudahan. Maka apabila kamu telah selesai (dari suatu
urusan), kerjakanlah dengan sungguh-sungguh (urusan) yang lain. Dan hanya
kepada Tuhanmulah hendaknya kamu berharap.”
(Q.S. Al-Insyirah : 5-8)
“Never forget what you are. The rest of the world will not.Wear it like armor and
it can never be used to hurt you.”
(Tyrion Lannister, Game of Thrones)
“No one looks at the context, they only see the effect and believe it as a fact.”
(Kang Cheol, W-two worlds)
“It is not the strongest of the species that survive, nor the most intelligent, but the
one most responsive to change.”
(Charles Darwin)
“It isnt what we say or think that defines us, but something what we do.”
(Jane Austin, Sense and Sensibility)
vi
PERSEMBAHAN
Karya kecil ini kupersembahkan untuk :
Papa dan mama, yang selalu memberi dukungan doa, semangat, motivasi, cinta
dan kasih sayang yang tiada henti
Saudara-saudaraku, Taufiq Putra; Unggul Tan Ngasorake; dan Kamulan
Indupati Pinasthika, yang turut memberi doa, kasih sayang serta candatawa yang mengisi hidupku
Sahabat baikku, Luthfi Fadhila (Alm.), terima kasih atas dukungan
baikmu selama ini yang tidak ada hentinya.
vii
KATA PENGANTAR
Puji syukur atas kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat,
karunia, dan ijin-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan skripsi ini.
Sholawat dan salam
senantiasa penulis haturkan
kepada Rasulullah SAW
sebagai pembimbing seluruh umat manusia.
Penyusun bersyukur dan berterima kasih kepada semua pihak yang telah
membantu hingga selesainya penyusunan skripsi ini:
1. Dr. Triana Kusumaningsih., selaku Kepala Program Studi Kimia Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret serta
selaku Pembimbing I yang telah banyak memberikan penulis masukan
ilmu dan bimbingan materi maupun moral selama penulisan.
2. Anif Nur Artanti, M.Sc., Apt., selaku Pembimbing II yang telah banyak
memberikan penulis masukan ilmu dan bimbingan materi maupun moral
selama penulisan.
3. Dr. Eddy Heraldy, M.Si., selaku Pembimbing Akademik
4. Muhammad Widyo Wartono, M.Si., yang telah banyak memberikan
penulis masukan ilmu dan bimbingan materi maupun moral selama
penulisan.
5. Rumbiwati, ST., M.Sc., selaku pembimbing dan teknisi Laboratorium
Phroto bagian parasitologi, Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada
yang telah banyak memberikan masukan ilmu dan bimbingan materi
selama penelitian.
6. Orang tua dan keluarga yang selalu memberikan kasih sayang, cinta,
semangat, dukungan, dan doanya.
7. Dyah Choiriyah sebagai teman bekerja selama di laboratorium yang telah
banyak memberikan bantuan sehingga skripsi dan penelitian ini selesai
tepat waktu.
8. Luthfi Fadhila (Alm.) sahabat penulis yang telah banyak memberikan
dukungan dan masukan moral sehingga skripsi dan penelitian ini selesai
tepat waktu.
viii
9. Vaishnavita Nawakusuma, Dwita Nur Aisyah, Wendah Herawati, Patimah
dan Euodia N. Maranatha, sahabat-sahabat penulis yang bersedia berbagi
tawa dan haru serta memberikan dukungan moral sehingga skripsi dan
penelitian ini selesai tepat waktu.
10. Ichsan, Zuhdi, Susanti, Gesti, Nais, Bagus, Taufik, Imroatu, Dheo,
Muslim, Tika, Tari, Karin, Carissa, Prapti, Frillia, Ida, Natasya, dan
Salsabila,teman-teman seperjuangan di Laboratorium Riset Kimia Organik
dan Analit. Terima kasih atas semangat dan bantuannya dalamm penelitian
ini.
11. Teman-teman dan semua pihak yang telah membantu hingga selesainya
penyusunan dan penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih sangat jauh dari
sempurna, untuk itu penulis selalu mengharap dan menerima kritik dan saran yang
membangun agar lebih sempurnanya skripsi ini. Penulis juga berharap semoga
penelitian ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan, khususnya
di bidang ilmu Kimia.
Surakarta, 10 Desember 2016
Penyusun
ix
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL....................................................................................
i
HALAMAN PERSETUJUAN.....................................................................
ii
HALAMAN PERNYATAAN......................................................................
iii
HALAMAN ABSTRAK..............................................................................
iv
HALAMAN ABSTRACT..............................................................................
v
HALAMAN MOTTO..................................................................................
vi
HALAMAN PERSEMBAHAN...................................................................
vii
KATA PENGANTAR..................................................................................
viii
DAFTAR ISI................................................................................................
x
DAFTAR GAMBAR....................................................................................
xiii
DAFTAR TABEL........................................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN................................................................................
xv
BAB I PENDAHULUAN...........................................................................
1
A. Latar Belakang.................................................................................
1
B. Perumusan Masalah........................................................................
4
1. Identifikasi Masalah.....................................................................
4
2. Batasan Masalah..........................................................................
5
3. Rumusan Masalah........................................................................
5
C. Tujuan dan Manfaat........................................................................
5
1. Tujuan Penelitian........................................................................
5
2. Manfaat Penelitian......................................................................
6
BAB II LANDASAN TEORI.....................................................................
7
A. Tinjauan Pustaka.............................................................................
7
1. Ploroglusinol................................................................................
7
2. Asil Ploroglusinol.........................................................................
8
a. Senyawa 1-(2,4,6-trihidroksifenil) etanon (MAPG)...........
9
b. Senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-tihidroksifenil) etanon
(DAPG)................................................................................
x
10
3. Esterifikasi....................................................................................
11
4. Penataan Ulang Fries....................................................................
12
5. Sel HeLa.......................................................................................
13
6. Sel WiDr.......................................................................................
14
7. Sel MCF7......................................................................................
15
8. Uji Sitotoksisitas..........................................................................
16
9. Inhibition Concentration (IC50)....................................................
17
B. Kerangka Pemikiran.........................................................................
17
C. Hipotesis...........................................................................................
19
BAB III METODOLOGI PENELITIAN ...................................................
20
A. Metodologi Penelitian......................................................................
20
B. Tempat dan Waktu Penelitian..........................................................
20
C. Alat dan Bahan.................................................................................
20
D. Prosedur Penelitian.........................................................................
22
1. Sintesis Senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon
(DAPG).....................................................................................
22
2. Kultur Sel...................................................................................
22
3. Uji Sitotoksitas...........................................................................
23
a. Pembuatan Larutan Uji.........................................................
23
b. Uji Sitotoksisitas dengan MTT assay....................................
23
4. Teknik Pengumpulan dan Analisa Data.....................................
24
a. Analisis Gugus Fungsional (FT-IR).......................................
24
1
13
b. Analisis Struktur Senyawa ( H-NMR dan C-NMR)...........
24
c. Penetuan IC50 Senyawa Produk Terhadap Sel Kanker...........
25
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN.....................................................
26
A. Sintesis Senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon.
(DAPG)...........................................................................................
26
B. Karakterisasi Senyawa Hasil Reaksi...............................................
29
1. Karateristik Fisik (Melting Point Apparatus).............................
29
2. Analisis Gugus Fungsional (FT-IR)...........................................
30
1
13
3. Analisis Struktur Senyawa ( H-NMR dan C-NMR)...............
xi
32
C. Uji Sitotoksitas senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon
(DAPG) Terhadap Sel Kanker........................................................
BAB V PENUTUP......................................................................................
34
42
A. Kesimpulan......................................................................................
42
B. Saran...............................................................................................
42
DAFTAR PUSTAKA.................................................................................
43
LAMPIRAN.................................................................................................
49
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Senyawa Ploroglusinol yang mengalami tautomer......................
7
Gambar 2. Senyawa Aspidinol-B hasil isolasi dari Dryopteris
crassirhizoma...............................................................................
8
Gambar 3. Senyawa MAPG (2) dan DAPG (3).............................................
9
Gambar 4. Mekanisme reaksi esterifikasi.......................................................
12
Gambar 5. Reaksi penataan ulang fenil asetat...............................................
13
Gambar 6. Penampakan sel HeLa di bawah mikroskop................................
14
Gambar 7. Penampakan sel WiDr dibawah mikroskop..................................
14
Gambar 8. Penampakan sel MCF7 dibawah mikroskop..............................
15
Gambar 9. Reaksi umum sintesis asil ploroglusinol; Senyawa MAPG (2)
dan DAPG (3)............................................................................
18
Gambar 10 Reaksi umum sintesis asil ploroglusinol; Senyawa MAPG (2)
dan DAPG (3)............................................................................
Gambar 11. Kemungkinan mekanisme reaksi pembentukan fenil ester (iii)..
26
27
Gambar 12. Kemungkinan mekanisme reaksi pembentukan MAPG (2) dan
DAPG (3)...................................................................................
28
Gambar 13. Spektra FTIR: (a) senyawa ploroglusinol murni; dan (b)
senyawa DAPG (3)..................................................................
30
Gambar 14. Spektrum 1H-NMR senyawa DAPG (3) (CD3COCD3, 400
MHz)..........................................................................................
32
Gambar 15. Spektrum 13C-NMR senyawa DAPG (3) (CD3COCD3, 100
MHz)..........................................................................................
33
Gambar 16. Grafik analisa probit dari sel HeLa............................................
36
Gambar 17. Grafik analisa probit dari sel WiDr............................................
36
Gambar 18. Grafik analisa probit dari sel MCF7..........................................
37
Gambar 19. Grafik analisa probit dari doxorubicin.......................................
37
Gambar 20. Penampakan sel WiDr sebelum perlakuan sampel dibawah
xiii
invented microscope....................................................................
40
Gambar 21. Penampakan sel MCF7 sebelum perlakuan sampel dibawah
invented microscope...................................................................
xiv
41
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Perbandingan karakteristik fisik fraksi A (FA) dan fraksi B (FB)
dengan senyawa muni ploroglusinol.......................................................
29
Tabel 2. Perbandingan hasil spektra FT-IR senyawa DAPG (9) dengan
senyawa murni ploroglusinol.........................................................
31
Tabel 2. Perbandingan hasil spektra NMR senyawa DAPG (3) dengan data
literatur....................................................................................................
xv
33
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Perhitungan mol bahan yang digunakan....................................
49
Lampiran 2. Perhitungan rendemen................................................................
50
Lampiran 3. Spektra FT-IR senyawa ploroglusinol murni dan senyawa 1(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon.......................................
51
Lampiran 4. Perhitungan seri konsentrasi pengenceran sampel.....................
53
Lampiran 5. Penampakan sel di bawah invented microscope.........................
54
Lampiran 6. Perhitungan persen viabilitas sel dan nilai IC50.......................................
60
Lampiran 7. Grafik analisis probit..................................................................
69
xvi
SINTESIS SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6TRIHIDROKSIFENIL) ETANON (DAPG) DAN UJI
SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANKER SERVIKS,
KANKER KOLON DAN KANKER PAYUDARA
Disusun Oleh:
TATA LUGAS NASTITI
M0311065
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi sebagian persyaratan mendapatkan gelar
Sarjana Sains dalam bidang ilmu kimia
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
2017
HALAMAN PENGESAHAN
Skripsi
SINTESIS SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6-TRIHIDROKSIFENIL) ETANON
(DAPG) DAN UJI SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANKER SERVIKS,
KANKER KOLON DAN KANKER PAYUDARA
TATA LUGAS NASTITI
M0311065
Skripsi ini dibimbing oleh :
Pembimbing I
Pembimbing II
Dr. Triana Kusumaningsih, M.Si
Anif Nur Artanti, M. Sc., Apt.
NIP.19730124 199903 2001
NIP. 19870427 2014051
Dipertahankan di depan Tim Penguji Skripsi pada:
Hari
: Kamis
Tanggal
: 29 Desember 2016
Anggota Tim Penguji :
1. Dr. Soerya Dewi Marliyana, M.Si
NIP. 19690313 199702 2001
1…………………
2. Dr. Eddy Heraldy, M.Si
NIP. 19640305 200003 1002
2…………………
Disahkan oleh
Kepala Program Studi Kimia
Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Sebelas Maret Surakarta
Dr. Triana Kusumaningsih, M.Si
NIP.19730124 199903 2001
ii
PERNYATAAN
Dengan ini saya menyatakan bahwa skripsi saya yang berjudul “SINTESIS
SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6-TRIHIDROKSIFENIL) ETANON (DAPG)
DAN UJI SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANKER SERVIKS,
KANKER
KOLON DAN KANKER PAYUDARA” belum pernah diajukan
untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang
pengetahuan saya juga belum pernah ditulis atau dipublikasikan oleh orang lain,
kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar
pustaka.
Surakarta, 12 Januari 2017
TATA LUGAS NASTITI
iii
SINTESIS SENYAWA 1-(3-ASETIL-2,4,6-TRIHIDROKSIFENIL)
ETANON (DAPG) DAN UJI SITOTOKSISITAS TERHADAP SEL KANER
SERVIKS, KANKER KOLON DAN KANKER PAYUDARA
TATA LUGAS NASTITI
Program Studi Kimia, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Sebelas Maret
ABSTRAK
Senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon (DAPG) merupakan
senyawa turunan ploroglusinol telah berhasil disintesis dengan mereaksikan
ploroglusinol dengan asam asetat anhidrid menggunakan katalis asam
metasulfonat melalui reaksi esterifikasi dan penataan ulang Fries. Identifikasi
senyawa tersebut dikarakterisasi dengan uji titik leleh, spektroskopi FT-IR,
dan 1D NMR dan diperoleh rendemen sebesar 34%.
Uji sitotoksisitas senyawa DAPG dilakukan pada seri konsentrasi 10; 15;
20; 25; 50; 75; 90; dan 100 µg/mL terhadap sel kanker HeLa, WiDr dan
MCF7. Hasil uji sitotoksisitas menunjukkan DAPG hanya aktif terhadap sel
HeLa dengan nilai IC50 sebesar 50,1 µg/mL dan viabilitas sel sebesar 58,73%.
Kata kunci: 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil)etanon (DAPG), IC50, sitotoksisitas,
sel HeLa, sel WiDr dan sel MCF7
iv
SYNTHESIS OF 1-(3-ACETYL-2,4,6-TRIHYDROXYPHENYL)
ETHANONE (DAPG) COMPOUND AND ITS CYTOTOXICITY OF
CERVIX CANCER, COLON CANCER AND BREAST CANCER CELLS
TATA LUGAS NASTITI
Department of Chemistry, Faculty of Mathematics and Natural Sciences,
University of Sebelas Maret
ABSTRACT
1-(3-acetyl-2,4,6-trihydroxyphenyl) ethanone (DAPG) compounds
had been successfully synthesized using commercially available
phloroglucinol, acetate anhydride and methanesulfonic acid as a catalyst
through esterification reaction and Fries rearrangement. The synthesized
product, DAPG compound were characterized by FT-IR, NMR spectroscopy
which were gave 34% yield.
Cytotoxicity assay of DAPG compound had been measured in 10;
15; 20; 25; 50; 75; 90; dan 100 µg/mL of concentration against HeLa, WiDr
and MCF7 cancer cells. DAPG compound had showed better bioactivity only
on HeLa cancer cells with respectively gave 50,1 µg/mL of IC50 values and
58,73% of its cell viabillity.
Keywords: 1-(3-acetyl-2,4,6-trihydroxyphenyl) ethanone (DAPG), cytotoxicity,
IC50, HeLa, MCF7, and WiDr cancer cells.
v
MOTTO
“Jadikanlah sabar dan shalat sebagai penolongmu. Dan sesungguhnya yang
demikian itusungguh berat, kecuali bagi orang-orang yang khusyu.”
(Q.S. Al-Baqarah : 45)
“Karena sesungguhnya sesudah kesulitan itu ada kemudahan. Sesuangguhnya
sesudah kesulitan itu ada kemudahan. Maka apabila kamu telah selesai (dari suatu
urusan), kerjakanlah dengan sungguh-sungguh (urusan) yang lain. Dan hanya
kepada Tuhanmulah hendaknya kamu berharap.”
(Q.S. Al-Insyirah : 5-8)
“Never forget what you are. The rest of the world will not.Wear it like armor and
it can never be used to hurt you.”
(Tyrion Lannister, Game of Thrones)
“No one looks at the context, they only see the effect and believe it as a fact.”
(Kang Cheol, W-two worlds)
“It is not the strongest of the species that survive, nor the most intelligent, but the
one most responsive to change.”
(Charles Darwin)
“It isnt what we say or think that defines us, but something what we do.”
(Jane Austin, Sense and Sensibility)
vi
PERSEMBAHAN
Karya kecil ini kupersembahkan untuk :
Papa dan mama, yang selalu memberi dukungan doa, semangat, motivasi, cinta
dan kasih sayang yang tiada henti
Saudara-saudaraku, Taufiq Putra; Unggul Tan Ngasorake; dan Kamulan
Indupati Pinasthika, yang turut memberi doa, kasih sayang serta candatawa yang mengisi hidupku
Sahabat baikku, Luthfi Fadhila (Alm.), terima kasih atas dukungan
baikmu selama ini yang tidak ada hentinya.
vii
KATA PENGANTAR
Puji syukur atas kehadirat Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat,
karunia, dan ijin-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan skripsi ini.
Sholawat dan salam
senantiasa penulis haturkan
kepada Rasulullah SAW
sebagai pembimbing seluruh umat manusia.
Penyusun bersyukur dan berterima kasih kepada semua pihak yang telah
membantu hingga selesainya penyusunan skripsi ini:
1. Dr. Triana Kusumaningsih., selaku Kepala Program Studi Kimia Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Sebelas Maret serta
selaku Pembimbing I yang telah banyak memberikan penulis masukan
ilmu dan bimbingan materi maupun moral selama penulisan.
2. Anif Nur Artanti, M.Sc., Apt., selaku Pembimbing II yang telah banyak
memberikan penulis masukan ilmu dan bimbingan materi maupun moral
selama penulisan.
3. Dr. Eddy Heraldy, M.Si., selaku Pembimbing Akademik
4. Muhammad Widyo Wartono, M.Si., yang telah banyak memberikan
penulis masukan ilmu dan bimbingan materi maupun moral selama
penulisan.
5. Rumbiwati, ST., M.Sc., selaku pembimbing dan teknisi Laboratorium
Phroto bagian parasitologi, Fakultas Kedokteran Universitas Gadjah Mada
yang telah banyak memberikan masukan ilmu dan bimbingan materi
selama penelitian.
6. Orang tua dan keluarga yang selalu memberikan kasih sayang, cinta,
semangat, dukungan, dan doanya.
7. Dyah Choiriyah sebagai teman bekerja selama di laboratorium yang telah
banyak memberikan bantuan sehingga skripsi dan penelitian ini selesai
tepat waktu.
8. Luthfi Fadhila (Alm.) sahabat penulis yang telah banyak memberikan
dukungan dan masukan moral sehingga skripsi dan penelitian ini selesai
tepat waktu.
viii
9. Vaishnavita Nawakusuma, Dwita Nur Aisyah, Wendah Herawati, Patimah
dan Euodia N. Maranatha, sahabat-sahabat penulis yang bersedia berbagi
tawa dan haru serta memberikan dukungan moral sehingga skripsi dan
penelitian ini selesai tepat waktu.
10. Ichsan, Zuhdi, Susanti, Gesti, Nais, Bagus, Taufik, Imroatu, Dheo,
Muslim, Tika, Tari, Karin, Carissa, Prapti, Frillia, Ida, Natasya, dan
Salsabila,teman-teman seperjuangan di Laboratorium Riset Kimia Organik
dan Analit. Terima kasih atas semangat dan bantuannya dalamm penelitian
ini.
11. Teman-teman dan semua pihak yang telah membantu hingga selesainya
penyusunan dan penulisan skripsi ini.
Penulis menyadari bahwa penyusunan skripsi ini masih sangat jauh dari
sempurna, untuk itu penulis selalu mengharap dan menerima kritik dan saran yang
membangun agar lebih sempurnanya skripsi ini. Penulis juga berharap semoga
penelitian ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan, khususnya
di bidang ilmu Kimia.
Surakarta, 10 Desember 2016
Penyusun
ix
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL....................................................................................
i
HALAMAN PERSETUJUAN.....................................................................
ii
HALAMAN PERNYATAAN......................................................................
iii
HALAMAN ABSTRAK..............................................................................
iv
HALAMAN ABSTRACT..............................................................................
v
HALAMAN MOTTO..................................................................................
vi
HALAMAN PERSEMBAHAN...................................................................
vii
KATA PENGANTAR..................................................................................
viii
DAFTAR ISI................................................................................................
x
DAFTAR GAMBAR....................................................................................
xiii
DAFTAR TABEL........................................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN................................................................................
xv
BAB I PENDAHULUAN...........................................................................
1
A. Latar Belakang.................................................................................
1
B. Perumusan Masalah........................................................................
4
1. Identifikasi Masalah.....................................................................
4
2. Batasan Masalah..........................................................................
5
3. Rumusan Masalah........................................................................
5
C. Tujuan dan Manfaat........................................................................
5
1. Tujuan Penelitian........................................................................
5
2. Manfaat Penelitian......................................................................
6
BAB II LANDASAN TEORI.....................................................................
7
A. Tinjauan Pustaka.............................................................................
7
1. Ploroglusinol................................................................................
7
2. Asil Ploroglusinol.........................................................................
8
a. Senyawa 1-(2,4,6-trihidroksifenil) etanon (MAPG)...........
9
b. Senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-tihidroksifenil) etanon
(DAPG)................................................................................
x
10
3. Esterifikasi....................................................................................
11
4. Penataan Ulang Fries....................................................................
12
5. Sel HeLa.......................................................................................
13
6. Sel WiDr.......................................................................................
14
7. Sel MCF7......................................................................................
15
8. Uji Sitotoksisitas..........................................................................
16
9. Inhibition Concentration (IC50)....................................................
17
B. Kerangka Pemikiran.........................................................................
17
C. Hipotesis...........................................................................................
19
BAB III METODOLOGI PENELITIAN ...................................................
20
A. Metodologi Penelitian......................................................................
20
B. Tempat dan Waktu Penelitian..........................................................
20
C. Alat dan Bahan.................................................................................
20
D. Prosedur Penelitian.........................................................................
22
1. Sintesis Senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon
(DAPG).....................................................................................
22
2. Kultur Sel...................................................................................
22
3. Uji Sitotoksitas...........................................................................
23
a. Pembuatan Larutan Uji.........................................................
23
b. Uji Sitotoksisitas dengan MTT assay....................................
23
4. Teknik Pengumpulan dan Analisa Data.....................................
24
a. Analisis Gugus Fungsional (FT-IR).......................................
24
1
13
b. Analisis Struktur Senyawa ( H-NMR dan C-NMR)...........
24
c. Penetuan IC50 Senyawa Produk Terhadap Sel Kanker...........
25
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN.....................................................
26
A. Sintesis Senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon.
(DAPG)...........................................................................................
26
B. Karakterisasi Senyawa Hasil Reaksi...............................................
29
1. Karateristik Fisik (Melting Point Apparatus).............................
29
2. Analisis Gugus Fungsional (FT-IR)...........................................
30
1
13
3. Analisis Struktur Senyawa ( H-NMR dan C-NMR)...............
xi
32
C. Uji Sitotoksitas senyawa 1-(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon
(DAPG) Terhadap Sel Kanker........................................................
BAB V PENUTUP......................................................................................
34
42
A. Kesimpulan......................................................................................
42
B. Saran...............................................................................................
42
DAFTAR PUSTAKA.................................................................................
43
LAMPIRAN.................................................................................................
49
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Senyawa Ploroglusinol yang mengalami tautomer......................
7
Gambar 2. Senyawa Aspidinol-B hasil isolasi dari Dryopteris
crassirhizoma...............................................................................
8
Gambar 3. Senyawa MAPG (2) dan DAPG (3).............................................
9
Gambar 4. Mekanisme reaksi esterifikasi.......................................................
12
Gambar 5. Reaksi penataan ulang fenil asetat...............................................
13
Gambar 6. Penampakan sel HeLa di bawah mikroskop................................
14
Gambar 7. Penampakan sel WiDr dibawah mikroskop..................................
14
Gambar 8. Penampakan sel MCF7 dibawah mikroskop..............................
15
Gambar 9. Reaksi umum sintesis asil ploroglusinol; Senyawa MAPG (2)
dan DAPG (3)............................................................................
18
Gambar 10 Reaksi umum sintesis asil ploroglusinol; Senyawa MAPG (2)
dan DAPG (3)............................................................................
Gambar 11. Kemungkinan mekanisme reaksi pembentukan fenil ester (iii)..
26
27
Gambar 12. Kemungkinan mekanisme reaksi pembentukan MAPG (2) dan
DAPG (3)...................................................................................
28
Gambar 13. Spektra FTIR: (a) senyawa ploroglusinol murni; dan (b)
senyawa DAPG (3)..................................................................
30
Gambar 14. Spektrum 1H-NMR senyawa DAPG (3) (CD3COCD3, 400
MHz)..........................................................................................
32
Gambar 15. Spektrum 13C-NMR senyawa DAPG (3) (CD3COCD3, 100
MHz)..........................................................................................
33
Gambar 16. Grafik analisa probit dari sel HeLa............................................
36
Gambar 17. Grafik analisa probit dari sel WiDr............................................
36
Gambar 18. Grafik analisa probit dari sel MCF7..........................................
37
Gambar 19. Grafik analisa probit dari doxorubicin.......................................
37
Gambar 20. Penampakan sel WiDr sebelum perlakuan sampel dibawah
xiii
invented microscope....................................................................
40
Gambar 21. Penampakan sel MCF7 sebelum perlakuan sampel dibawah
invented microscope...................................................................
xiv
41
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Perbandingan karakteristik fisik fraksi A (FA) dan fraksi B (FB)
dengan senyawa muni ploroglusinol.......................................................
29
Tabel 2. Perbandingan hasil spektra FT-IR senyawa DAPG (9) dengan
senyawa murni ploroglusinol.........................................................
31
Tabel 2. Perbandingan hasil spektra NMR senyawa DAPG (3) dengan data
literatur....................................................................................................
xv
33
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Perhitungan mol bahan yang digunakan....................................
49
Lampiran 2. Perhitungan rendemen................................................................
50
Lampiran 3. Spektra FT-IR senyawa ploroglusinol murni dan senyawa 1(3-asetil-2,4,6-trihidroksifenil) etanon.......................................
51
Lampiran 4. Perhitungan seri konsentrasi pengenceran sampel.....................
53
Lampiran 5. Penampakan sel di bawah invented microscope.........................
54
Lampiran 6. Perhitungan persen viabilitas sel dan nilai IC50.......................................
60
Lampiran 7. Grafik analisis probit..................................................................
69
xvi